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LICENCIATURA EN CIENCIAS
AMBIENTALES
ELABOR
1
Gua para Elaboracin de Prcticas
Atencin a Usuarios Unidad de Laboratorio de Ciencias Ambientales Revisin No. 02
Facultad de Planeacin Urbana y Regional. Fecha: 21/07/09
Subdireccin Acadmica.
Unidad de Laboratorio de Ciencias Ambientales.
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Gua para Elaboracin de Prcticas
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Unidad de Laboratorio de Ciencias Ambientales.
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NDICE
1. Objetivo ................................................................................................................................................ 8
2. Introduccin .......................................................................................................................................... 8
3. Seguridad ............................................................................................................................................. 8
4. Reactivos.............................................................................................................................................. 8
9. Interferencias ...................................................................................................................................... 10
10. Procedimiento................................................................................................................................... 10
11. Reporte............................................................................................................................................. 11
1. Objetivo .............................................................................................................................................. 15
2. Introduccin ........................................................................................................................................ 15
3. Seguridad ........................................................................................................................................... 15
4. Reactivos............................................................................................................................................ 15
9. Interferencias ...................................................................................................................................... 16
10. Procedimiento................................................................................................................................... 16
11. Reporte............................................................................................................................................. 17
Bio-indicadores ........................................................................................................................................... 18
1. Objetivo .............................................................................................................................................. 18
2. Introduccin ........................................................................................................................................ 18
3. Seguridad ........................................................................................................................................... 18
4. Reactivos............................................................................................................................................ 18
9. Interferencias ...................................................................................................................................... 19
10. Procedimiento................................................................................................................................... 19
11. Reporte............................................................................................................................................. 20
1. Objetivo .............................................................................................................................................. 21
2. Introduccin ........................................................................................................................................ 21
3. Seguridad ........................................................................................................................................... 21
4. Reactivos............................................................................................................................................ 21
9. Interferencias ...................................................................................................................................... 22
10. Procedimiento................................................................................................................................... 22
11. Reporte............................................................................................................................................. 23
1. Objetivo .............................................................................................................................................. 25
2. Introduccin ........................................................................................................................................ 25
3. Seguridad ........................................................................................................................................... 25
4. Reactivos............................................................................................................................................ 25
9. Interferencias ...................................................................................................................................... 26
10. Procedimiento................................................................................................................................... 26
11. Reporte............................................................................................................................................. 26
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1. Objetivo
El alumno Investigara la presencia de bacterias del grupo Coliforme en agua de consumo humano
mediante la tcnica del Nmero Ms Probable (NMP), usando tubos de fermentacin mltiple..
2. Introduccin
La potabilidad del agua es de gran importancia en cuanto a Salud Pblica, ya que sta puede servir como
vehculo de microorganismos patgenos, productores de enfermedades llamadas comnmente como
Salmonelosis (Tifoidea y Paratifoidea), Shigelosis, Clera, Hepatitis, etc. Estos microorganismos son
todos de origen entrico. La OMS incluye dentro del grupo coliforme todos los bacilos aerobios y
anaerobios facultativos Gram negativos, no esporulados, que producen cido y gas al fermentar la
lactosa, a 35 37 C. Las especies clsicas de este grupo son Escherichia coli y Enterobacter
aerogenes.
El mtodo se basa en la inoculacin de alcuotas de la muestra sin diluir en una serie de tubos por
quintuplicado con un medio que contiene lactosa (caldo lactosado o caldo lauril triptosa). Esta tcnica
para la determinacin de coliformes totales y termotolerantes consta de dos fases: la fase presuntiva y la
fase confirmatoria.
3. Seguridad
La prctica deber de realizarse con el equipo y material necesarios de acceso a laboratorio de tal manera que
todo alumno se encuentre en perfecta seguridad; para esto se tiene como requisito mnimo la utilizacin de bata,
guantes y zapatos bajos.
4. Reactivos
Reactivo
5.1 Material
Material
1Mechero Bunsen.
1Cerillos encendedor.
1Gradillas para tubos de 18 x 150 y de 20 x 20
1frasco de vidrio estriles y de boca ancha para el
muestreo
1 pipetas serolgicas de 10 mililitros esterilizada
2 pipeta serolgica de 1ml esterilizada
1Asa bacteriolgica
1Una perilla de 3 vas
5 Tubos de 20 x 180 mm con campana Durham en su
interior, conteniendo 20 mL de caldo lauril triptosa estril
de doble concentracin.
tubos de 18 x 150 mm con campana Durham,
conteniendo Caldo Lactosa Bilis Verde Brillante estril.
10 Tubos de 18 x 150 mm con campana Durham en su
interior, conteniendo 10mL de caldo E.C. (Escherichia coli)
estril de concentracin sencilla.
5.2 Equipo
Equipo
1autoclave
1horno de aire caliente o estufa para esterilizacin.
1Bao Mara con una temperatura estable a 42 0,2 C
Una incubadora a 35 0,5 C.
6. Muestreo y Almacenamiento
Las muestras para el anlisis bacteriolgico, se deben tomar en frascos mbar que se hayan lavado con
extremo cuidado y esterilizado. En su interior aadir, previo a la esterilizacin, 0.1 mL de solucin de
Na2S2O3 (tiosulfato de sodio). al 10%, por cada 120 mL de muestra con el propsito de neutralizar la
accin del cloro que pudiera contener la muestra, cubriendo adems el tapn del frasco hasta el cuello
con papel aluminio.
El anlisis bacteriolgico de la muestra debe practicarse inmediatamente despus de su recoleccin. Es
por ello que se recomienda que de no efectuarse as el anlisis, se inicie dentro de las dos horas
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prximas a la recoleccin de la muestra y en ningn caso, este lapso debe de exceder de 24 horas para
agua potable y de 6 horas para otros tipos de agua para que sea vlido el resultado del anlisis.
Durante el perodo que transcurre del muestreo al anlisis, se debe conservar la muestra a 4 C, con
objeto de inhibir la actividad bacteriana para no obtener
resultados falsos o dudosos.
7. Control de Calidad
Cuestionario:
1. Cules son los lmites mximos permisibles de C. totales en agua para consumo humano.
2. Mencionar 5 enfermedades transmitidas por el agua, indicando el agente
etiolgico correspondiente.
3. Adems de representar un riesgo para la salud pblica el uso de agua
Con coliformes totales, Qu otros efectos indeseables puede representar?
4. Cules son las caractersticas que debe reunir un Microorganismo Indicador?
5. Por qu el nmero de Coliformes Totales es siempre mayor que el de
Coliformes Fecales?
6. De acuerdo a la normatividad mexicana vigente Cules son los lmites
permisibles en cuanto a Coliformes Totales y Coliformes Fecales en el agua
para consumo humano? Dar los nmeros de las Normas Oficiales Mexicanas
correspondientes
9. Interferencias
La prctica deber realizarse con medidas de asepsia y material esterilizado para obtener los resultados
confiables y evitar riesgos de contaminacin.
10. Procedimiento
Prueba presuntiva, siembra de 5 tubos, cada tubo con 10 mL de muestra
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11. Reporte
El reporte de prctica deber contener los siguientes apartados:
Caratula
Objetivo
Introduccin
Reactivos, material y equipo
Procedimiento
Resultados
Bibliografa
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0 < 1.1
1 1.1
2 2.6
3 4.6
4 8.0
5 >8
Los tubos que resulten positivos a coliformes totales o termotolerantes, se debern esterilizar en
autoclave para despus ser desechados en la tarja y los que resulten negativos se desechan en la tarja.
1. Organizacin Panamericana de la Salud (1988). Guas para la calidad del agua potable.Vol. 3. Control
de la calidad del agua potable en sistemas de abastecimiento para pequeas comunidades. Publicacin
Cientfica 508. Washington D. C., OPS.Organizacin Panamericana de la Salud (1978).
2. Procedimientos simplificados para el examen de aguas. Segunda edicin en espaol. Publicacin
Cientfica 369. Washington, OPS.
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3. Norma Oficial Mexicana NOM-181-SSA1-1998, Salud ambiental. Agua para uso y consumo humano.
Requisitos sanitarios que deben cumplir las sustancias germicidas para tratamiento de agua, de tipo
domstico, SSA, Mxico D.F.
4. MODIFICACION a la Norma Oficial Mexicana NOM-127-SSA1-1994, Salud ambiental. Agua para uso y
consumo humano. Lmites permisibles de calidad y tratamientos a que debe someterse el agua para su
potabilizacin, SSA, Mxico D:F:
5. Manual para anlisis bsicos de calidad de agua de bebida, Margarita Aurazo de Zumaeta OPS/CEPI,
OMS, Lima,
16. Anexos
A.1 Caldo lauril triptosa o lauril sulfato de sodio
Frmula (concentracin simple)
Triptosa ........................................................................................ 20,0 g
Lactosa ......................................................................................... 5,0 g
Fosfato de hidrgeno dipotasio (K2HPO4).......................... 2,75 g
Fosfato dihidrgeno potasio (KH2PO4) ............................... 2,75 g
Cloruro de sodio (NaCl) ......................................................... 5,0 g
Lauril sulfato de sodio .............................................................. 0,1 g
Agua destilada ............................................................................ 1.000 mL
Frmula (concentracin doble)
Triptosa ........................................................................................ 40,0 g
Lactosa ......................................................................................... 10,0 g
Fosfato de hidrgeno dipotasio (K2HPO4).......................... 5,5 g
Fosfato dihidrgeno potasio (KH2PO4) ............................... 5,5 g
Cloruro de sodio (NaCl) ......................................................... 10,0 g
Lauril sulfato de sodio .............................................................. 0,2 g
Agua destilada ............................................................................ 1.000 mL
Preparacin del medio
Aadir los ingredientes deshidratados al agua destilada, mezclar cuidadosamente
y disolver calentando. El pH final despus de la esterilizacin debe ser 6,8 0,2.
Antes de esterilizar, dispensar 10 mililitros en tubos de fermentacin con un
tubo Durham invertido. Tapar los tubos con tapones de metal, plstico resistente al
calor o tapones de algodn. Autoclavar por 15 minutos a 121 C.
Tapar los tubos con tapones de metal, plstico resistente al calor o tapones de algodn.
Autoclavar por 15 minutos a 121 C.
A.3Caldo EC
Frmula
Triptosa o tripticasa ................................................................... 20,0 g
Lactosa ......................................................................................... 5,0 g
Mezcla de sales biliares o sales biliares N. 3 ........................ 1,5 g
Fosfato de hidrgeno dipotasio (K2HPO4) .......................... 4,0 g
Fosfato dihidrgeno potasio (KH2PO4) ............................... 1,5 g
Cloruro de sodio (NaCl) ......................................................... 5,0 g
Agua destilada ............................................................................ 1.000 mL
Preparacin del medio
Aadir los ingredientes deshidratados al agua destilada, mezclar cuidadosamente
y disolver calentando. El pH final despus de la esterilizacin debe ser 6,9 0,2.
Antes de esterilizar, dispensar en tubos de fermentacin con un tubo Durham
invertido, en cantidad suficiente como para cubrir el tubo despus de la esterilizacin.
Tapar los tubos con tapones de metal, plstico resistente al calor o tapones de algodn.
Autoclavar por 15 minutos a 121 C.
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1. Objetivo
El alumno Investigara la presencia de slidos disueltos y suspendidos por el mtodo gravimtrico.
2. Introduccin
Los slidos en el agua tienen un efecto negativo sobre la calidad de la misma, por lo general, s existe un
alto contenido de slidos el agua tendr mal olor y sabor.
Los slidos totales (ST) son la suma de todos los slidos disueltos y suspendidos en el agua. Cuando el
agua se analiza para los ST se seca la muestra y el residuo se pesa despus. ST pueden ser tanto las
sustancias orgnicas como inorgnicas, los microorganismos y partculas ms grandes como la arena y
arcilla.
3. Seguridad
La prctica deber de realizarse con el equipo y material necesarios de acceso a laboratorio de tal manera que
todo alumno se encuentre en perfecta seguridad; para esto se tiene como requisito mnimo la utilizacin de bata
y zapatos bajos.
4. Reactivos
Reactivo
No Aplica
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5.1 Material
Material
5.2 Equipo
Equipo
6. Muestreo y Almacenamiento
Deben tomarse un mnimo de 500 mL de muestra en envases de polietileno y taparse inmediatamente
despus de la colecta. Pueden utilizarse muestras compuestas o simples. No se requiere de ningn
tratamiento especfico en campo. Debe preservarse la muestra a 4C hasta su anlisis.
El tiempo mximo de almacenamiento previo al anlisis es de 7 das. Sin embargo, se recomienda realizar el
anlisis dentro de las 24 h posteriores a su colecta. Las muestras deben estar a temperatura ambiente al
momento del anlisis.
7. Control de Calidad
Cuestionario:
9. Interferencias
No tocar el vaso de precipitado previamente tarado con las manos, para evitar la alteracin del peso por la
grasa.
10. Procedimiento
1. Pesar un vaso de precipitado de 50 10 ml previamente secado y llevado a peso constante.
2. Mezclar el agua problema de forma que sea homognea medir y transferir 5 ml de esta al vaso
de precipitado previamente pesado y marcado.
3. Colocar el vaso de precipitado con la muestra en una estufa a una temperatura de 105C para
llevarlos a sequedad durante i o 1:30 horas. Enfriar en el desecado y pesar.
.
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11. Reporte
El reporte de prctica deber contener los siguientes apartados:
Cartula
Objetivo
Introduccin
Reactivos, material y equipo
Procedimiento
Resultados
Bibliografa
16. Anexos
Posibilidad de aplicar fotografas para ver el cambio tenido.
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1. Objetivo
El alumno observar y comprender las razones por las que un componente natural puede alterarse
conforme a las condiciones de calidad climtica y de recursos de casa lugar
2. Introduccin
La prctica consistir en realizar un solo proceso de crecimiento en un frijol, pero con agua de diferentes
lugares para ver cul es la diferencia con el agua y las condiciones de una regin y otra, es decir cada
alumno regara su frijol con agua de diferentes municipios o lugares.
3. Seguridad
La prctica deber de realizarse con el equipo y material necesarios de acceso a laboratorio de tal manera que
todo alumno se encuentre en perfecta seguridad; para esto se tiene como requisito mnimo la utilizacin de bata
y zapatos bajos.
4. Reactivos
Reactivo
5.1 Material
Material
Frasco de vidrio
Frijol y algodn
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5.2 Equipo
Equipo
No aplica.
6. Muestreo y Almacenamiento
Se ir verificando el material ya depositado en el frasco para darle un seguimiento, adems de que se tiene que
regar constantemente con la muestra de agua para evitar que se seque y que no crezca.
7. Control de Calidad
No se debe aplicar por ningn motivo agua ajena a la primera muestra, es decir siempre se tiene que usar agua
del mismo lugar
Si el objetivo es adquirir conocimiento la forma seria aplicar un cuestionario para medir el aprendizaje adquirido.
8. Calibracin o Verificacin
Antes de utilizar la primera muestra de agua se tiene que asegurar que de donde se extrajo el agua por
primera vez se podr seguir extrayendo para los riegos posteriores.
9. Interferencias
No aplica.
10. Procedimiento
a) En un frasco limpio se va a depositar algunos frijoles de la misma especie pero comprados en
diferentes lugares
b) Posteriormente se los pondr algodn como sustituto de tierra que serva como medio absorbente de
agua para lograr tener un crecimiento de la planta del frijol
c) Una vez puesto el frijol con algodn en el frasco se regara constantemente agua extrada de diferentes
municipios por alumno sin alterar el lugar de extraccin para lograr el xito de la planta
d) Finalmente se ver como creci cada frijol para ver las diferencias y se discutir el por qu de estas
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11. Reporte
Reportar en el formato previamente convenido, anotando los cambios observados en la planta.
Cuestionario
16. Anexos
Posibilidad de aplicar fotografas para ver el cambio tenido.
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1. Objetivo
Aprender sobre la determinacin de valores de soluciones de diferentes aniones comunes en el agua y
muy importantes para la caracterizacin de la misma. Uso del colormetro HATCH, apropiado para
gabinete y para campo.
2. Introduccin
El cloro libre procede de la desinfeccin de aguas con dosis sobrada. Los sulfatos son caractersticos de
aguas subterrneas en zonas volcnicas y del uso de fertilizantes tipo sulfato de amonio. Los fosfatos
proceden de fertilizantes que contienen fosfatos, de algunos detergentes y son la principal causa de la
eutroficacin de loscuerpos de agua que los reciben.
3. Seguridad
La prctica deber de realizarse con el equipo y material necesarios de acceso a laboratorio de tal
manera que todo alumno se encuentre en perfecta seguridad; para esto se tiene como requisito mnimo la
utilizacin de bata y zapatos bajos.
4. Reactivos
Reactivo
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5.1 Material
Material
5.2 Equipo
Equipo
6. Muestreo y Almacenamiento
No se requiere muestreo ni almacenamiento
7. Control de Calidad
Realizar varias lecturas de cada concentracin de anin. Revisar las posibles diferencias entre lecturas
9. Interferencias
NO APLICA.
10. Procedimiento
Para cada uno de los aniones (cloro, fosfato y sulfato):
Preparar dos soluciones, de diferente concentracin, de cada uno de los aniones. Las
soluciones deben de prepararse justo antes de la realizacin de la medicin.
Llenar una pipeta de observacin (10 mL) con la solucin calibradora (agua des-ionizada).
Cl libre 9
Sulfato 91
Fosfato 79
Coloque la pipeta con el agua des-ionizada en el aparato, cbrala con la tapa . Oprima
ENTER.
Al oprimir ENTER (Ej. 9 ENTER, para el cloro) con cada nmero de programa la ventana
mostrar respectivamente:
Luego coloque la pipeta con la muestra de estudio en el aparato y cbrala con la tapa.
Oprima READ y en la ventana aparecer la medida respectiva, de cada anin (en mg/L).
Realizar previamente una medida con el agua des-ionizada antes de la correspondiente a cada anin.
11. Reporte
Formato indicado por el maestro.
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16. Anexos
Agregar cualquier documento necesario para el desarrollo de la prctica que no este descrito en el
procedimiento.
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1. Objetivo
Evaluar el comportamiento de un indicador biolgico ante un fenmeno causado por la emisin de
contaminantes.
2. Introduccin
La lluvia cida fue detectada en los aos 70s, despus de que se observ una disminucin en la
poblacin de peces en los diferentes cuerpos de agua los cuales mostraban altos ndices de acidificacin,
causado por la emisin de contaminantes a la atmsfera, tales como el dixido de azufre y los xidos de
nitrgeno, los cuales en la atmsfera son convertidos a travs de procesos qumicos en cido sulfrico y
cido ntrico respectivamente.
3. Seguridad
El alumno deber portar bata, lentes de seguridad y guantes de plstico.
4. Reactivos
Reactivo
cido Ntrico
cido Sulfrico
Agua
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5.1 Material
Material
5.2 Equipo
Equipo
Potencimetro equipado
6. Muestreo y Almacenamiento
No Aplica
7. Control de Calidad
No Aplica
8. Calibracin o Verificacin
9. Interferencias
No Aplica
10. Procedimiento
Preparar soluciones cidas utilizando los reactivos mencionados, a pHs de 6.5, 5.5 y 4.5 las cuales
funcionarn como peceras
En las soluciones preparadas, incorporar un pez y realizar monitoreo cada 24 horas y describir las
observaciones correspondientes, comparndolas con el blanco.
En una pecera en la cual NO se utilizar solucin cida, mantener un pez como blanco
Alimentar de manera normal a los peces durante la semana que dure el experimento.
11. Reporte
Reportar de acuerdo al formato establecido por el maestro.
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16. Anexos
No Aplica
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