UNIDAD 1.

BASES BIOLGICAS: DNA

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Clulas procariotas/clulas eucariotas
La diferencia fundamental entre ellas es que las
clulas procariotas carecen de un ncleo
diferenciado.

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Clulas procariotas/clulas eucariotas
El ADN NUCLEAR representa el GENOMA de las clulas eucariotas

Curso 2016/17 4
Localizacin del material gentico en las clulas
eucariotas
En las clulas eucariotas, el ADN se encuentra
principalmente en el ncleo, pero tambin en las
mitocondrias y en los cloroplastos.

Curso 2016/17 5
 Biologa Molecular:
estudio de los
genes

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Curso 2016/17 7
ACIDOS NUCLEICOS- AZCARES

Curso 2016/17 8
ACIDOS NUCLEICOS- BASES
NITROGENADAS

Los cidos nucleicos estn compuestos por cinco bases nitrogenadas

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Curso 2016/17 10
Curso 2016/17 11
ESTRUCTURA DE LOS NUCLESIDOS

Curso 2016/17 12
UNIN COVALENTE ENTRE LA BASE Y EL AZUCAR

Curso 2016/17 13
TIPOS DE NUCLESIDOS

Curso 2016/17 14
 Los ribonucletidos y desoxiribonucletidos

Se forman por la unin del cido fosfrico y un nuclesido.

AMP, ADP o ATP segn contengan uno, dos o tres grupos fosfato.

Curso 2016/17 15
ESTRUCTURA DE NUCLETIDOS

Curso 2016/17 16
Curso 2016/17 17
Curso 2016/17 18
NOMENCLATURA

Curso 2016/17 19
Funciones de los nucletidos
Formacin de los cidos nucleicos.
Cuando un nucletido se modifica por la unin de dos
grupos fosfato, se convierte en un transportador de
energa, necesario para que se produzcan numerosas
reacciones qumicas celulares. El principal portador de
energa, en casi todos los procesos biolgicos, es una
molcula llamada adenosn trifosfato o ATP.
Intervienen en procesos de oxido-reduccin (NAD/NADH+ )
Intervienen en procesos metablicos
(AMPcintermediario de hormonas)

Curso 2016/17 20
ADN-ARN: POLINUCLETIDOS

Curso 2016/17 21
ACIDOS NUCLEICOS (ADN, ARN)

Curso 2016/17 22
 La estructura del ADN es la clave para entender su funcin.
Cmo se organizan las cadenas de pn en el ADN que sirve de material gentico?
Se compone el ADN de una cadena sencilla, o ms de una?
Si este ltimo caso es el correcto, Cmo se relacionan qumicamente las
cadenas entre s?
Y todava ms importante, Cmo se relaciona la estructura de esta molcula
con las funciones genticas que tiene? (por ejemplo, almacenamiento,
expresin, replicacin y mutacin?
Entre 1940 y 1953, muchos cientficos se interesaron en resolver la estructura
del ADN.
E. Chargaff, Wilkins, Rosalind Franklin, Linus Pauling, Francis Crick y James
Watson

Curso 2016/17 23
Wilkins y Rosalind Franklin, en Londres, estudiaron la estructura del ADN con
la tcnica de difraccin de rayos X, obteniendo imgenes de la estructura del
ADN

Curso 2016/17 24
 Estudio de composicin de las bases: Erwin Chargaff

1nm=10

Astbury, detect
una periodicidad de
3,4 lo que sugiri
que las bases
estaran apiladas
unas sobre otras
como monedas.

Curso 2016/17 25
 Watson y Crick
1.Postularon un modelo tridimensional =DOBLE HELICE

2.Cadenas antiparalelas, es decir, la orientacin C-5 a C-3 va

en direcciones opuestas.

3.Las bases nitrogenadas son estructuras planas

perendiculares al eje; estaran apiladas unas sobre otras,
separadas 3,4 (0,34nm), y se encuentran en el interior de la
doble hlice.

4.El apareamiento se realizara entre A-T; C-G ------>

complementariedad.

5. Cada vuelta completa de la hlice tiene una longitud de 34

(3,4nm); por tanto, cada vuelta de la hlice tiene una
longitud equivalente a una serie de 10 pares de bases.

6. Un surco mayor y un surco menor alternados se enrollan a

todo lo largo de la molcula.

7. La doble hlice mide 20 (2,0 nm) de dimetro.

Curso 2016/17 26
Curso 2016/17 27
 SITUACIN: ncleo + protenas (histonas), mitocondrias, cloroplastos
COMPOSICIN: C, H,O,N, P
ESTRUCTURA
Primaria: secuencia de nucletidos
Secundaria: doble hlice
Terciaria: superenrollamiento= cromatina
Cuaternaria: los cromosomas

Curso 2016/17 28
ADN
Estructura 1
Secuencia lineal de desoxirribonucletidos unidos por enlaces fosfodister. Presenta
dos extremos libres: el 5 (unido al grupo fosfato) y el 3 (unido al grupo hidroxilo).
Las molculas de ADN difieren en tamao, composicin y secuencia de nucletidos

Curso 2016/17 29
 SECUNDARIA: La estructura secundaria del ADN fue determinada en 1953
por Watson y Crick. Para ello utilizaron los resultados obtenidos por otros
investigadores como Chargaff (equivalencia de las bases) y Franklin y Wilkins
(difraccin de rayos X). Watson y Crick saban que:
o El ADN es una molcula larga y rgida que no se pliega como las
protenas.
o Existe una equivalencia de bases, de manera que el contenido en bases
pricas es igual al contenido en bases pirimidnicas, o lo que es lo
mismo, la proporcin de adenina es la misma que la de timina, y la de
guanina igual a la de citosina (Regla de Chargaff).

A+G=T+C

o En la molcula hay detalles estructurales que se repiten cada 0,34 y

3,4 nm.

Curso 2016/17 30
1. El ADN es una doble hlice de 2 nm de dimetro formada por dos cadenas de
polinucletidos enrolladas alrededor de un eje imaginario. El enrollamiento es
dextrgiro (hacia la derecha) y plectonmico (para que las dos cadenas se
separen es necesario que se desenrollen).
2. Las bases nitrogenadas quedan situadas en el interior, como si fueran los
peldaos de una escalera de caracol.
3. Cada pareja de nucletidos queda separada de la siguiente por una distancia de
0,34 nm y cada vuelta de la doble hlice comprende 10 pares de nucletidos, lo
que supone una longitud de 3,4 nm por vuelta. La estructura espacial entre las
dos cadenas da lugar a la formacin de un surco mayor y un surco menor en la
doble hlice.
4. Las dos cadenas de polinucletidos son antiparalelas, una 5-3y la otra 3-5.
5. Las dos cadenas de polinucletidos son complementarias, de forma que las
bases que estn enfrentadas se unen mediante puentes de hidrgeno. La adenina
se une a la timina mediante dos puentes de hidrgeno y la guanina a la citosina
mediante tres puentes de hidrgeno (este nmero de enlaces depende de sus
grupos polares).
Curso 2016/17 31
Curso 2016/17 32
NIVELES DE CONDENSACIN DEL ADN

Cmo entra la enorme cantidad de ADN en una clula? El secreto est en el

empaquetamiento.

En clulas procariticas, mitocondrias y cloroplastos el ADN adopta una forma

circular y se encuentra asociado a un nmero pequeo de protenas que mantienen la
estructura y el empaquetamiento.
En las clulas eucariticas el problema consiste en introducir ms de 1 metro de ADN
en un ncleo de apenas 10 micras.
Primer nivel de condensacin: Fibra de 10 nm o collar de perlas.
El ADN se encuentra compactado en
el ncleo. Un primer nivel de
condensacin se forma gracias a la Nucleosoma
unin de cierto tipo de protenas
bsicas, denominadas histonas, a
manera de un collar de cuentas: el
ADN rodea un ncleo compuesto por
ocho histonas. Este ncleo rodeado
por ADN, ms el ADN espaciador
entre las cuentas, se denomina
nucleosoma y fue descubierto en
1975 por Roger Kornberg, Dean
Hewish y Leigh Burgoyne. Cada
nucleosoma contiene un pedazo de
ADN de 146 nucletidos ms ocho
histonas.
Curso 2016/17 33
Un nucleosoma est formado por 8 molculas (octmero) de cuatro tipos diferentes de
histonas: H2A, H2B, H3 y H4 y un fragmento de doble hlice de ADN (146 pares de
nucletidos).

El ADN da 1,75 vueltas sobre el octmero.

Los dos extremos de la fibra coinciden en el mismo lugar de salida y all se asocian a la
histona H1.

Entre nucleosoma y nucleosoma queda un ADN espaciador o linker.

Curso 2016/17 34
Segundo nivel de condensacin: Fibra de 30 nm o solenoide.

La fibra de 10 nm se enrolla gracias a la histona H1 originando una estructura ms

condensada denominada solenoide.

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 Doble hlice

Fibra de 10 nm. Collar de perlas

Otros niveles de condensacin. Octmero de histonas

La fibra de 30 nm se pliega formando bucles o asas radiales. 6 bucles forman un

rosetn y 30 rosetones en espiral forman un rodillo. El cromosoma (grado de Fibra de 30 nm. Solenoide
condensacin mximo) sera una sucesin de rodillos.
H1
Finalmente, la compactacin a la que se llega es 10.000 veces mayor que la fibra de
ADN desnudo (2 nm).

En los espermatozoides el ADN se encuentra an mucho ms empaquetado, se dice que

tiene "estructura cristalina".

Bucles, rosetones y espirales

Cromosoma
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Curso 2016/17 37
Curso 2016/17 38
Curso 2016/17 39
1.4 EL CIDO RIBONUCLEICO: ARN
Polirribonucletidos con ribosa, y la base timina
es sustituida por el uracilo. (Algunas molculas de ARN (por
ej. ARNt, pueden contener pequeas cantidades de otras bases
nitrogenadas, que normalmente son derivados metilados de las 4 bases
mayoritarias).

Las diferencias entre ADN y RNA son tanto

estructurales como funcionales.
Es casi siempre MONOCATENARIO, excepto en los
retrovirus en que es BICATENARIO.
Se encuentra en muchos tipos de virus, en
procariotas y en eucariotas. En estas ltimas hay de
cinco a diez veces ms ARN que ADN.
Est asociado a la TRANSMISIN de la informacin
gentica desde el ncleo hacia el citoplasma
(sntesis de protenas).

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Curso 2016/17 41
Tipos de ARN celular que funcionan durante la EXPRESIN de la
informacin gentica
ARN mensajero, mARN
ARN ribosmico, rARN
ARN de trasnferencia, tARN

Se originan como copias complementarias de una de las dos cadenas de DNA durante la
transcripcin.

Los diferentes ARNr se distinguen por:

- comportamiento de sedimentacin (coeficiente Svedberg) (S)
- tamao (n de nt que contiene cada uno)

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Diferencias entre los 3 tipos de ARN

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Curso 2016/17 44
ARN mensajero (5%)

Transportan la informacin gentica desde el DNA del gen

hasta el ribosoma, donde se produce la traduccin.
Cada mRNA codifica una secuencia de nt que se traducir en
una protena.
Tienen un promedio corto de vida.
El ARNm eucaritico se forma a partir del transcrito
primario (pre-ARNm), tambin llamado ARN heterogneo
nuclear (ARNhn), nombre que hace referencia a la
variabilidad de su tamao.
Posee una serie de segmentos con informacin,
denominados exones, alternados con otros sin informacin
denominados intrones, que luego son suprimidos y no
aparecen en el ARNm.
Este proceso se denomina maduracin y se produce en el
ncleo.

Curso 2016/17
45
 ARN transferencia (15%)
Transporta AA hasta los ribosomas durante la
traduccin.
Es la clase ms pequea de molculas de RNA
(facilita que interaccione con el ribosoma).
Cada tipo de RNAt es producto de un gen
distinto y acarrea (en su extremo 3) uno de los 20
aminocidos (as que la mayora de los aminocidos
tienen mas de un RNAt responsable de su
transferencia).

Curso 2016/17 46
 ARN ribosmico (80%)
El ARNr forma parte de los
ribosomas(partculas qumico-mecnicas),
estructuras intracelulares en que se realiza la
sntesis de protenas.
Sus estructuras secundaria y terciaria
presentan un plegamiento complejo que le
permite asociarse tanto a las protenas de los
ribosomas como a otros ARNr y participar en
el proceso de sntesis proteica.
Presentan alto contenido de nuclesidos
infrecuentes.
Adoptan una conformacin compleja.
.

Curso 2016/17 47
Localizacin de los ribosomas
Citosol,
matriz
mitocondrial,
estroma de
cloroplastos

Curso 2016/17 48
Otros tipos de ARN
ARN heterogneo nuclear (ARNhn) se encuentran en el ncleo y son los precursores
de diferentes ARNm. Tras un proceso de maduracin sale al citoplasma.
ARN de interferencia (ARNi). Descritos recientemente, parece que intervienen en la
regulacin de la actividad gnica.
ARNsn, participa en el procesamiento de los ARNm. Concretamente intervienen en la
maduracin.
ARNsno. Se localiza en el nucleolo y es el precursor de varios ARNr.
miARN; siARN

Curso 2016/17 49
Perfil de fusin del DNA

La propiedad de desnaturalizacin-renaturalizacin que tienen las

cadenas sencillas complementarias de los cidos nucleicos es la
base para la tcnica de HIBRIDACIN MOLECULAR.
Curso 2016/17 50
1.6 CARACTERSTICAS FUNCIONALES DEL ADN

Curso 2016/17 51
Curso 2016/17 52
1.6.1 REPLICACIN= DUPLICACIN Caractersticas principales de
la replicacin
Semiconservativa (dibujo)
Simultnea en ambas hebras
Bidireccional: a partir del sitio de origen, las dos cadenas de ADN se
separan y se sintetizan las dos cadenas en ambos sentidos, con dos puntos
de crecimiento que forman lo que se conoce como horquillas de
replicacin.
Monofocal (procariotas), un nico origen de replicacin.
Multifocal (eucariotas) (dibujo)
Semidiscontnua: se produce en sentido 5 3, y el extremo 3-OH libre es
el punto a partir del cual se produce la elongacin del ADN. (Okazaki)
Hebra adelantada, lder o conductora (leading strand)
Hebra rezagada (lagging strand)

Curso 2016/17 53
Curso 2016/17 54
 INICIACIN
ETAPAS DE LA REPLICACIN ELONGACIN
TERMINACIN
INICIACIN

Desenrrollamiento de la doble hlice: HELICASAS = hidrlisis de los puentes de H.

Prosigue la desespiralizacin =SUPERENROLLAMIENTO : GIRASAS y TOPOISOMERASAS
SSBP: Se unen a las cadenas desenrolladas evitando que se forme la doble hlice.

Girasas

https://www.youtube.com/watch?v=6mKNOlh
w50w

https://www.youtube.com/watch?v=-
EGKrYdQEHQ

Curso 2016/17 55
 ELONGACIN

ADN polimerasa III: responsable de la sntesis de la nueva cadena aadiendo desoxint al extremo 3 de una
cadena en crecimiento. La ADNasa, slo puede elongar una cadena preexixtente de ADN o ARN.
PRIMASA: tiene funcin ARNasa, sintetiza cortos fragmentos de ARN (10nt) denominados PRIMERS o
CEBADORES complementarios a un fragmento de ADN.
Se generan los fragmentos de OKAZAKI.

Curso 2016/17 56
TERMINACIN

ADN POLIMERASA I: degrada cebador de ARN. (actividad exonucleasa)

LIGASAS: une los fragmentos de ADN de la hebra discontinua (retardada).
ADN POLIMERASA II: tiene funcin exonucleasa y cuando se inserta un nt
incorrecto, se activa esta enzima.

Curso 2016/17 57
Curso 2016/17 58
La Polimerasa III es un HOLOENZIMA = enzima compleja formada por
mltiples subunidades polipeptdicas y su PM es de 900,000Da.
Constituye un ncleo enzimtico responsable de la actividad de
polimerizacin.

Curso 2016/17 59
1.6.2 TRANSCRIPCIN= primer paso de la
expresin gnica

Es un proceso en donde, un complejo enzimtico, sintetiza una

hebra de RNA que tiene una secuencia de bases complementaria
a una zona del DNA que se ha ledo; es expresar la informacin
contenida en el material gentico.

En la transcripcin no se copia todo el cromosoma como en la

replicacin, tan solo una seccin de l.

Los productos principales de la transcripcin son tres tipos de

RNA: RNAm, RNAt y RNAr. No obstante, el transcrito que
contiene la informacin de secuencias de bases para la sntesis
proteica es el RNAm.

Curso 2016/17 60
ENZIMAS DEL PROCESO DE TRANSCRIPCIN
PROCARIOTAS: solo existe un tipo de ARN polimerasa.
EUCARIOTAS:
ARNasa I: responsable de la mayor parte de la sntesis de ARNr.
ARNasa II: responsable de la sntesis de ARNm.
ARNasa III: responsable de la sntesis de ARNt y de la subunidad 5S del ARNr.

Curso 2016/17 61
ETAPAS DE LA TRANSCRIPCIN

INICIACIN:
La ARNasa reconoce las secuencias promotoras que se localiza antes
de la regin de ADN que se va a transcribir y se une a ella.
La unin de la ARNasa determina que las dos cadenas de la doble
hlice se separen.
No se necesita cebador (a diferencia de la sntesis de ADN).

Curso 2016/17 62
 ELONGACIN:
Formacin del primer enlace fosfodiester.
Burbuja de transcripcin= zona que contiene la ARNasa y la cadena creciente de ARN
(contiene T en lugar de U, y ribosa en lugar de desoxiribosa).
TEMINACIN
localizacin de las secuencias de parada o de terminacin.
Cesa la formacin del enlace fosfodiester.
El ADN-ARN se disocia.
La ARNasa se desprende.
La molcula de ADN recupera su estructura de doble hlice.

Curso 2016/17 63
MADURACIN DEL ARN
Es el proceso que requieren las cadenas
transcritaspara dar lugar a los distintos tipos de ARN.
Este proceso es distinto en procariotas que en
eucariotas.

Curso 2016/17 64
ARNm

Curso 2016/17 65
Maduracin del ARN en eucariotas
1. Adicin de una caperuza en 5 de la cadena en crecimiento.
Esta caperuza cap consiste en la incorporacin de una 7-
metilguanosina-trifosfato, que proege el ARN de la
degradacin.
2. Adicin de una cola de poli-A en 3 mediante un enzima
denominada Poli-A polimerasa. Permite al ARNm salir del
ncleo.
3. Eliminacin de los intrones.

Curso 2016/17 66
1.6.3 TRADUCCIN
Caractersticas fsicas.
Enfermedades hereditarias GENES CROMOSOMA

Traduccin: Sntesis de protenas (ribosomas)

En un gen, la secuencia lineal de nt codifica la secuencia de AA
de la protena.
Cmo se pasa de un lenguaje de 4 letras a un lenguaje de 20
letras?
El cdigo gentico tiene forma de triplete =codn (3nt= 1AA)
Participan numerosos FACTORES DE TRADUCCIN.
Se consume gran cantidad de energa 80% ATP, 20% GTP
43 =64 tripletes para codificar los 20 AA = DEGENERADO

Curso 2016/17 67
Curso 2016/17 68
1.7 LA INFORMACIN GENTICA
Segmento del ADN que contiene el cdigo para la
secuencia de aminocidos de una cadena de
polipptidos, as como las secuencias
reguladoras necesarias para su expresin.
Si bien la mayora de los genes contienen
entremezcladas con las secuencias codificantes
(exones) otras secuencias que inicialmente se
transcriben a ARN en el ncleo pero que no est
presente en el ARNm del citoplasma (intrones

Curso 2016/17 69
Curso 2016/17 70
Curso 2016/17 71
Intrones: secuencias que no se transcriben
Exones: secuencias que si se trasncriben

Curso 2016/17 72
 CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DE LOS GENES

Dentro de los genes existen

regiones responsables de regular
su expresin:
Regin promotor en el inicio 5
del gen (secuencias conservadas
en muchos genes diferentes),
existen tambin regiones
potenciadoras, reguladoras,
silenciadoras.

Curso 2016/17 73
Los intrones son eliminados en el 1er paso del
procesamiento del RNAm (splicing)

splicing

Curso 2016/17 74
Curso 2016/17 75
Curso 2016/17 76
Curso 2016/17 77
 GEN

Tamao de los genes:

-Pequeos (algunas Kb)
-Grandes (cientos de Kb)
-Extralargos (millones de Kb, ej: gen de la distrofina, slo el 1% son exones)

Familias de genes:
-Existen genes nico
-Otros forman familias:Muchos genes codifican secuencias de poliptidos parecidas:
ejemplo (familia de genes que codifican las cadenas poliptidicas de la
hemoglobina, compuesta por cadenas alfa y betaglobina, los genes se encuentran
en los cromosomas 11 y 16.
-Pseudogenes: Algunos genes de la Hb no codifican ninguna cadena de globina
(pseudogenes))

Curso 2016/17 78