Especificidades de Varias Endoproteasas Enzima | Fuente Espoctcidad Puntos adicionates Tipina | Pieresdo | ac puiace Cama aR K, | arent especies para ripsi bovinos pero no si esta al lado de P residuos cargados positivamente or ess atbicos Pancreas de Enlace poptidica C-terminal a FY, | & uimctpsna | Since Westone ses allaade P| abled, romp etament en Pucmar | END pence Gtwinal 9A 6 astsa | Panes Slaton poems eb vemammn | eat Eieyretaconeneniy in | peta nay ae omelsna FSMpacostona lado” | Banos pose ener on ‘Stnorteottcus | peau Pome | Nuzose gases | Ente peace Nomina al, F | oxnbo poce especie, psi de bovinos | W. Y, paro no cuando esta_ requieran pH bajo Ensoneidese | Estaoaoce | yac popiico @Ctominal aE Determinacion de la Secuencia Carboxi-Terminal No existen téenicas quimicas confiables para el secuenciamiento de aminodcidos de péptidas en C-terminal ‘Sin embargo, hay enzima, las exopeptidases, que se han identficado que rompen los péptidos en el residuo C- Terminal que pueden enfonces ser analzados cromatograicamente y ser comparadas con los aminoacidos cestandares. A esta clase do exopaptidasas so las lama carboxipeptidasas Especificidades de varios Exopeptidasas Enzima | Fuente Eopecticiad Caboopenae | Pines do | No onpor cuando sivesdvo Gismnal=R, Ko Posi roses P ® Bomes "| ancora dl esau tena Carboopenides | Panes | Rompe cuando lesdv Gieminl=R Ko cuando stall 5 poms" | deresuotannal Garooendase | Hoe cs | os resdos hes Comal aun ado cpio de pH Qatboopontass | aura | Todsios ests tires Cerin enlament ens esos &‘sternnaciin des recuonsia de aminosieos, ctuaente 282g l prea de Sanger etn an 1059, ungue clo parla yaagtado a aga caso once. Sn embargo el ‘teseurmeno ge coago gensic yi capac que ss tee nya para const agenoe de ADM ha Wnt esi tcc a ape de tina compronscin, mas ue unrezitago en sme, de In saeuenes sects 3 par dos agents ce mnt gansta qa = onservan en geotecas tose ae a ue a ecria opie Secuencia fie peptacs de as de 0 0 60 ncaclos a psa tue mete se ha anata laren ya Nes hace ceo peo sue tee anes Mnfacnes core se we Mas ade, Y (ue Soms pasos qu no se ealean hoy a ‘uwamente, at putea una peeing aectamente se cota en péptans que se sepaanen HPLC Se setuercan aumateamerts, peo "apo eto. So se cone fa pone, se abrea Una snes aegcreaaa (con nosh en eugr de base dear) que eaten {LARInoel ques area eg elADNe, que se ampitca meant ha POR. Cone ANe petal se bscaen ina genteca de ADNe el fragmento completo para deeminar sta ptena se crtespendeo pore crtaro es era, pore sabe secverca del ADH se ‘sabe areien age apron gus coanea Er protca se ede ens spurts pasos + Sears subunaaoes. Se sot saber euinas yf enero de extremes Niemi + Redvers puenes ences dito con @ meeagoeanly poser gute con yoacaetao prs que no Soden con eo geo {wot toma pons acu. Tabi se pueden sonetr a eacon de Ei para su cuarneacen. “zane megan gerne acronis ed re rl pe A + lorotcaries ems W-y Ctomns. + Han perc ae pepico ya ea quia oenitia, + Secueneuelon 26a uo oe ls pépnees med a resecln dered oeeUren de Eaman (el nmare eo 2 Mens). + anise poet asti ia atarer qu ropes pes asics ue al secvncase pueda sr comparacos os ater. + suprpeaticn de poe pepice oes ens dsc antereee para poser lege unesecunoacoerete comin aoe Sena ais parca Ree gases shane tetae pets x may epeto aguas se + Deteraar et nero ys posconos dens asi nares © puis asutuo, genramenl pot crematoria agonal amensonat {ye posto seuenclatn oe pepug qu comene una ver teganos a una protein papa purcac pr algun metodo os de Sanaren (nga, pecpeacio seca con Suto ‘Ge amone, ofrrtes cromabogfatios oe nercaraie oo ato Maco ok yGtermihactn dela aca) Ray qe separa haus sutundadoe (ane) Teac os sla Gta. Coma ogo eto ae sabe arse ira poklna una coma en onscones destalrazaes pra separaa en barca, sies ae bene subunaces, oben gaa leneria dvacenac en papel pate ego {anal one Ls exaastol esse ene qe aur emando bs Scartousemsacescaresponaetes pags 90 YONEaN 8 ‘arse yo spoon separa. La pretina o suena abla 2 someie eg 2 una has al eda con HCI Nan cones de vaioy a 100 @ 120% auate 10 2324 reas. Con xn se cons sparartamenis ns amnoscidos sh pofice acomeac er eltpiotane yen mucha ener moda, [Gsetna yiteanna son estuary desapaecen como aes Ades os elas aria Ge tain i asfatapn ann Se Isoteany pasa a ser guaraoyasparato.respectvamente¥ agers se rose aman que comvenza a SN en. Aveces Se Nace Ura sequnca nar basea con NaOH con aque se desea cca, sna (lose ha ecuio aes a Srna la eaina ‘aces de proaseeraemaci debs arinoacos peo se coserae! iran, por qe sto Se wa par sane dees Esa ‘mazion ge amnoa:ice so que sopne un bac athe ge fata este rl, esque anil ota os inal se separa en una cromatogiaia dean nk, de qu se pueden ei con ‘oriacones ane de pH om de fuerza aca Para senaros exter N-¥ Cems Se pues ecu a Wes mets: + Reacln de Sanger: Conse ena tormactn de ceeds oe aminoacoN smal. sto ee constue cone 2.4-dne Rueben, {ue en meio ieaeni bso proc a cndersacion cone! gp amino te Ques ess cond eso st prtonad, para ria {ihz-amtoremsernaoo yuna mob de Sno Moron, Despes se soet Im rein aFiwOISs Se eataunactoratogara at elec ef aminokido que ea en pine wgaes det, eeaeme Wttinal Tene pclema de qu ese anno es de us fee elmnanomsican ens ss nose pera detect 3 tens ues eng un pat crratogrieo dees arenes aes {ue se mechan cna Male acamas soles ha undo un adel 2.-enceno,AcaMs tambien se pa Ue ea:to alr Sino de asparagea yl gama+ ans: seams gual qv aero, pr se uta et cro de cansio (oro de -dmetiaminonaao->-SUON) 4103 Camnatse cnet aruneaeo cotespondete ch as mars contions que a feats de Sanger tas darsterhada que cs ‘orescente ye detocta en un cleo de marera mucho ms tase ¥ pecs (pmo). Tne os msmos protias ce dle que et + begadace, severe a recurenca de Cama. Acumen a Una eacin Ge sacuensacin que ez y aden a un proceso {otamons auomatzado. Tne u ene vera de que ne hace fata Roza ola roti, que es un moc secuencal ‘eauenie, en el qe se van netsanao bs arncacos ue a uo erpesanao pr etiam Nita eon a ques conser ‘arecconatsac NC oasis Dotge2 Sreacvo es fenton PTC). que ch med Disco con tnt sore en Su ‘Carbone oe grupo cana un sage mieaio por pare del ao trina espconace, coo wera a reasn Ge eaogaci ee! bosom La depostdn da esPucia eecvene3 G9 senses ol eocarbarervado (PTC) os muy eneget,ycanbando 3 anactonesiclas con sla ttuotetaace al 100% se pious uote lena pepo ete us dos irbtesemoasces porque ‘op tonmate ques rma rent on stage mcenra sore el artono crx dl pst amiobcie. cs deck caries eM {ibanocatalieoye sepat el ars det sete aninoScuo, Iban una Nola eanttazolnana de ambos Comresporderte(a-872)¥ rar pepo con un feso menos un Neo extemo arin ef. Loego se pasa a condones de 0 Tumiovostaraco 25% en as que Se ae estar de aa ATZy soa un elohicanilngevado PTH 2) ue es oe se uate oon rman anand on ae ame a atari qe oa spat ahs fen excteess en gees de ptactamaa, se ene gue aber un eaero N termina es ata elo seecate 2a ols paca ‘qineso enamtea con pptiaese oe ese magn enemos ia coken do agents eeeapios de recency Comoe €carboso termina se deeria nacido reastonar con Doron die para forma i onl prea, y ego realzanoo una NOS {otalperadetatars an ia sromatograta, amlen se psc ecu na arene, 2s ua reins (Ne) amps ‘etiacespeticosfarando un amnaachircca de aos bs amos excepto oe lo (Cierra). pore él no foaba pre de Ing enlace peptideo Ese laren se detec en ua fonalogtaa Oo modo de Geeta el exemo Ctrl sulla us enanas “arboxpeptasess qs simnan setonenerte bs esos ce no enna Comenzane por ere ete tne paso del protean pero que ese pero gue Se eatza acuatnete esa digest ons parcial ea pon con unas ‘snamatHamadaspotasaso pepe, ue son capares de recnocer enacee peptide en ne Que wane in arrests once, 7 ‘ofr excimer en ese puro a cadena poeptiea.Esiasenaras se ve en dos andes clegras seg even enazes mins ‘terminals en endopertgasas exrpepacass respertvamenie Enoopepinass: ‘epandn cl primer arodzdo oe ence, oer, que coin eenlae aa1-C--2a2segin como sa at. See que cota "sets “Tips: Coa dts de Lysy igo deck amiodcns Disko con cata, sempre queers no haya un pola Ex aman ‘species ya mposbucad 0 cota ares Ge pola se be aa cadena lara clads, Se encverta eel esomago ye especaents ‘eva apH2 ‘cumurpsna: Cora cars do Phe, Tyr, Tip Le 5 dec amnoiccossomstos 0 my nktabes. Tampoco pads Naber pola detrs ‘Costin: Cort slmre ders ge arghins ‘Depandon dt segundo arncacs del ence, oF der, carta el eniace 231-6 Naa Soqin cme soa a2. Se Oe que coin “cl Pepsina Cota delat de anindens rons o muy habe y amok de aninodeas ios Pe, Ty, Trp Lew. Spy ly Siempre que el aminacdo aren no sealapreina Sissy aiatrpsnaen limiesino yes actvaa pH? “Temotsna: Cora clare ge arnodeds aromébiosy ance (con cadena eral o mrocarbute Simpl) siempre quo Sean raruncaco: Pe. Ty. Tp Leu ey Val Tampoco puede hater una prota ares xopepidasa: Slo se enumeran ds arboxpepass, pero May MAS ms ‘caronpepacasa A Cota todos es oeromes Ctrminals except son reduce amnaiclaesPaseos con carga ap 18OH0¥COO bata, es der corals extemss quero sean Ag. ys Pro. Ave last nbn es n arncacd base ema Pavone ‘Ss esprtonada yan eae pt tesbgice Te qveuno 2 suraeza is exeiyen cits anesmancnnnas Agere de eet no conor fing eee sietreso arenes wo depron ‘caronpepucas 8 cata tos os oxrumes exept hs que sean de aminodcoosbiskos con carga (ova Wer sn 4s)0 de icra. 5 ‘ear cola bs etl que ne sen rg L380 Cs, apace cota nay un eso de prolna ane. Leste de ura paral quia se pueden resumen os sins romute ae clangena (G/CM Es atamerie espeste cana siempre pr ellodscarbosio de metenna es der, cra desde meta.Fracotss 3 un Mes a3 Se ea en exe30 SN Yop a azar Degraston se Eaman: Esa Meola selec ta de eetemo Nerina eo mie tata ences 5p 210 Neloosvccinmita: Weolea en postcres de pane Loe astnoe pepo ganeracos n a nis paral se tenen gue separa or comatcaratadenecamtic eke, papelo mackn roku oor eletforeis en gees de placard con un mao de pore peavere (18% a 20%), per eer ara spar dos ‘russaspacecense ests pos e nares parce ena un eps pepo oexerenania Se miss ue corset en relat tra primera mens crematoria yuna segunda densi ecoorétca Cn esto se conse a separacienacelable de bs ‘Gatton napenios, ds que coninuacn se obiene su scinncasigdendo el todo dea deradacin de Ena, (Con oss dais otis de a sccurncicin se ene qe poder lear a dos sucesines ipa de amioacios, cada una con sma “setvenla, per umales pr bs agmerdes pocedeies de un su lado ge Miss pace Este races equate ae ea fempecaezs es sia 0 CNN MSN OE YEE, UE Sa a a NST aE SVEN Oo