A.
niger en caldo dextrosa
patata (PDB)durante 7-8 das,
301C, 200 rpm
150 mililitros de sustrato
lquido en un matraz
Erlenmeyer de 500 ml y se
mezcl a fondo y se someti
a autoclave a 121 1 C
durante 30 min.
Sustratos se inocularon con
suspensin de esporas de
10^7 esporas/25 mL
Analizar concentracin de
cido ctrico del
sobrenadante
(espectrofotometricamente)
Muestras de 1 mL diluidas,
en un tubo de ensayo y se
agrega 1.3 mL de piridina
Cosechar esporas de cajas de
Mantener en PDA (agar) Almacenar a 41 C en
PDA utilizando 0.1% de
durante 96 h a 301C refrigerador
Tween 80
Ajustar a 10^8 esporas /mL y
Contar esporas mediante Filtrar a travs de lana de
almacenar en tubos de
hemocitmetro vidrio
ensayo a -20C
Recoger muestras de 5 mL de
Incubar en agitadora a 200 Filtrar muestras a travs de
cada matraz cada 24 hrs (en
rpm, 301C lana de vidrio
condiciones aspticas)
Determinar viabilidad Tomar muestras de 100
Centrifugar el restante a
(conteo de esporas) usando microlitros en tubos
9000xg durante 20 min
hemocitmetro eppendorf
Mezclar manualmente y Mezclar y colocar enn bao
aadir 5.7 mL de anhidrido de agua a 22C durante 30 Analizar pH y viscosidad
actico min. Leer a 420 nm