TUTORAS TRFICO (2016)

1. Describe brevemente las rutas alternativas que pueden seguir las hidrolasas
lisosomales y el receptor de manosa 6-fosfato desde su sntesis en el ER. Cul sera
el destino de las hidrolasas lisosomales en un mutante deficiente en N-
acetilglucosamina fosfotransferasa?

2. Describe brevemente las rutas alternativas que siguen el receptor de transferrina

humano y el receptor EGF desde la membrana plasmtica.

3. El receptor KDEL: funcin y trfico intracelular.

4. Indica cual de las siguientes sentencias es caracterstica del modelo de

maduracin de las cisternas (M) o del modelo de trfico vesicular (TV) en el
transporte a travs del complejo de Golgi:
- Las cisternas cis, medial y trans del complejo de Golgi, as como las redes del cis-
Golgi y trans Golgi son compartimentos estables conectados por vesculas COPI.
- Las vesculas COPI que rodean el complejo de Golgi transportan exclusivamente
glicosiltransferasas residentes del Golgi.
- Las vesculas COPI que rodean el complejo de Golgi pueden transportar tanto
cargo destinado a la superficie celular como protenas residentes del Golgi.
- Las vesculas COPI que se localizan en las proximidades del complejo de Golgi
estn enriquecidas en enzimas de glicosilacin y deplecionadas de cargo
destinado a la superficie celular.
- Las cisternas del Golgi se ensamblan de novo en la cara cis y se desensamblan en
la cara trans.
- Algunas protenas de secrecin, como el procolgeno, nunca han sido
observadas fuera del lumen de las cisternas del complejo de Golgi.

5. Indica que tipo de vesculas participan en las siguientes etapas del trfico de
protenas:
a) Salida de protenas de secrecin desde el retculo endoplsmico.
b) Transporte de hidrolasas lisosomales desde el TGN hasta los endosomas.
c) Reciclaje de receptores de manosa 6-fosfato desde los endosomas hasta el TGN.
d) Endocitosis del receptor de transferrina humano.
e) Transporte de glicosiltransferasas entre diferentes cisternas del complejo de
Golgi.
f) Transporte de protenas hacia la membrana basolateral en clulas polarizadas.

6. Qu 2 tipos de oligosacridos contienen las protenas de secrecin o las

protenas lisosomales una vez han atravesado el complejo de Golgi?
7. En qu compartimento(s) se produce principalmente la recuperacin de
protenas residentes del retculo endoplsmico (ER) que han salido de dicho
compartimento?

8. Indica 3 ejemplos de protenas secretadas de forma constitutiva y 3 secretadas de

forma regulada.

9. En qu consiste el proceso de maduracin de las vesculas implicadas en el

proceso de secrecin regulada? Qu familia de protenas participa en el proceso de
clasificacin de protenas en vesculas de secrecin regulada? Describe brevemente
cmo participan estas protenas en el proceso de clasificacin

10. Ordena los diferentes compartimentos endosomales de menor a mayor pH:

lisosomas, endosomas de reciclaje (RE), endosomas tardos (LE), endosomas
tempranos (EE). Cul es la razn de esta diferencia de pH?

11. Indica 2 motivos (o seales) para la clasificacin de protenas en vesculas

recubiertas de clatrina y en vesculas COPII. Indica un motivo que pueda funcionar
tanto en la endocitosis como en el transporte de protenas hacia la membrana
basolateral.

12. Si eliminaras la seal KDEL en el extremo C-terminal de la protena disulfuro

isomerasa (PDI), que habitualmente es una protena soluble residente en el ER,
dnde esperaras encontrar la PDI modificada?

13. Si expresaras en una clula una versin de GFP con una seal KDEL en su
extremo C-terminal, Dnde esperaras que se localizara? Cul sera la localizacin
de una hidrolasa lisosomal a la que se adicionara la misma seal KDEL?

14. El receptor KDEL debe desplazarse bidireccionalmente entre ER y Golgi para

asegurar su funcin de recuperacin de protenas residentes en el ER. En qu
compartimento une el receptor KDEL a sus ligandos y qu compartimento los
libera? Cul es la razn que explica dicho comportamiento?

15. El receptor KDEL viaja entre ER y Golgi en vesculas COPI y COPII. Indica en qu
vesculas esperaras encontrar mayoritariamente receptores KDEL en forma libre y
en cuales unidos a sus ligandos.

16. El receptor de manosa 6-fosfato (MPR) es transportado de forma bidireccional

entre la red del trans Golgi (TGN) y los endosomas. Indica que tipos de vesculas
estn implicadas en dicho transporte. En cules de ellas esperaras encontrar
mayoritariamente receptores MPR en forma libre y en cuales unidos a sus ligandos
(hidrolasas lisosomales)?
17. Existen mltiples cubiertas implicadas en la formacin de vesculas de
transporte. Cules son las dos funciones que poseen en comn todas estas
cubiertas?

18. A partir de las cinticas obtenida durante la incorporacin desde el medio

extracelular de peroxidasa (HRP) o el factor de crecimiento epidrmico (EGF),
estima de forma aproximada la concentracin de peroxidasa que sera necesaria
para que su tasa de entrada fuera similar a la de EGF cuando ste ltimo se
encuentra a una concentracin de 20 nM. Explica en base a ese clculo la diferencia
esencial entre la endocitosis mediada por receptores y la endocitosis en fase fluda.

19. Cmo explicaras que el receptor de transferrina, implicado en la endocitosis

de la transferrina desde la membrana plasmtica, se localice mayoritariamente en
los endosomas tempranos? Qu efecto producira la tirfostina A23 sobre su
localizacin?

20. Cul es el patrn comn en el diseo de todas las cubiertas proteicas que dan
lugar a la formacin de vesculas? Cul es la principal diferencia entre el reclutado
de las cubiertas de clatrina o COPII y el reclutado de la cubierta COPI?

21. Qu efecto crees que producira un tratamiento con GTPS sobre la abundancia
de vesculas recubiertas de COPI o COPII?

22. Por qu todas las vesculas recubiertas de clatrina y COPI tienen

aproximadamente el mismo tamao?

23. De qu depende el tamao de las vesculas COPII formadas en el ER? Por qu

las vesculas COPII implicadas en el transporte de procolgeno son de un tamao
superior a las vesculas COPII estndar?
24. Cul es la funcin de las protenas de la familia p24 en la formacin de
vesculas COPI? Y en el transporte de protenas residentes en el ER (conteniendo
seales K/HDEL) desde el cis-Golgi hacia el ER)?

25. Qu droga/inhibidor utilizaras para:

a) Confirmar que una protena se localiza en el complejo de Golgi.
b) Confirmar que una protena se localiza en los endosomas tardos.
c) Impedir la clasificacin del receptor de transferrina en vesculas recubiertas de
clatrina en la membrana plasmtica.
d) Inhibir el transporte desde los endosomas tempranos hasta los endosomas
tardos.
e) Evitar la disociacin de las cubiertas COPI o COPII.

26. Indica si las siguientes sentencias son verdaderas o falsas. En caso de ser falsas,
justifica la respuesta o reformula la sentencia.

- El nico determinante para la unin de una cubierta proteica sobre la membrana

de un compartimento es la presencia de seales de clasificacin en protenas que
deben ser incluidas en la vescula (carga).
- El complejo AP-2 interacciona exclusivamente con seales de clasificacin en el
dominio citoslico de protenas de membrana.
- Las vesculas recubiertas de clatrina se forman en regiones de la membrana
plasmtica ricas en fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato.
- Las protenas p24 se unen simultneamente a la GTPasa ARF1 y al coatmero,
facilitando la polimerizacin de la cubierta COPI.
- El coatmero interacciona con ARF1-GTP, con protenas p24 y con otros tipos de
carga.
- El desensamblaje de las cubiertas COPI y COPII implica la hidrlisis del GTP en
ARF1 y Sar1, respectivamente.
- En presencia de tirfostina A23, el receptor de transferrina se concentra
especficamente en vesculas recubiertas de clatrina.
- El procolgeno no puede ser empaquetado ni en vesculas COPI ni en vesculas
COPII.
- El tamao y nmero de sitios de salida del ER (ERES) es independiente de la
concentracin de cargo.
27. En la figura se muestran diferentes protenas implicadas en el reconocimiento y
fusin de vesculas endosomales con endosomas tempranos. Describe de forma
concisa la funcin de las siguientes protenas en los procesos anteriores
(reconocimiento/fusin):
-SNAP
Inhibidor de la disociacin del nucletido de guanina (GDI)
NSF
EEA1
VAMP4

28. Explica qu ventajas puede aportar una sealizacin va endosomas e indica algn
ejemplo.