Bioqumica heptica

(II) El metabolismo del glucgeno.

Glucogenolisis

Prof. J.V. Castell

El hepatocito muestra abundantes

grnulos de glucgeno

1
 Ultraestructura de los gr
grnulos de gluc
glucgeno
35nm
Rosetas de glucgeno Partcula

Estructura de cadenas
macromolcula ramificadas
de
glucgeno
Lado cataltico

Capa exterior de enzimas

implicados en el
metabolismo del
1 m glucgeno Lado regulador

Glucgeno
fosforilasa

El glucgeno...

Est presente en la mayora de las clulas animales

Abunda en el hgado (10% peso) y en msculo esqueltico (fibra
muscular blanca, 3% peso)
Es un polmero de la glucosa y, por tanto, una forma de
almacenamiento de glucosa dentro de la clula que le sirve de
reservorio energtico
Es de elevado peso molecular, y sin embargo es soluble en agua
Una funcin similar la desempea el almidn en el mundo vegetal

Glucgeno en hepatocitos,
visualizado por la tincin de PAS

2
El glucgeno es una macromolcula de estructura muy ramificada. Las
ramificaciones son ms frecuentes en la zona central que en la perifrica. La
molcula de glucgeno tiene un peso molecular 10.000.000. En su ncleo
central existe una protena, la glicogenina. Puede formalmente hablarse de que
se trata de una glicoprotena extraordinariamente glicosilada.

Dos tipos de enlace en la estructura del Glucgeno

CH2OH CH2OH
H O H H O H
H H
OH H OH H 1
O
OH
O
H OH H OH

CH2OH CH2OH 6 CH2 CH2OH CH2OH

H O H H O H H 5 O H H O H H O H
H H H H H
OH H OH H OH H 1 4 OH H OH H
4 O O
O O OH
OH
3 2
H OH H OH H OH H OH H OH

El glucgeno es un polmero formado por unidades de glucosa

unidas por dos tipos de enlaces:
(14) glicosdicos (mayoritariamente)
(16) glicosdicos (en las ramificaciones)

3
La degradacin del glucgeno ocurre desde los extremos 4-OH de las cadenas.
El enzima clave es la gluc
glucgeno fosforilasa

Glicogenina

Extremo 4-OH (reductor)

CH2OH
H O H
H
OH H
OH OPO32

H OH
glucosa-1-fosfato

El enzima glucgeno fosforilasa cataliza la fosforlisis de

los enlaces (14) glicosdicos, liberando glucosa-1-
fosfato:

glucgeno(n) + Pi glucgeno (n1) + glucosa-1-

fosfato

Fosforlisis: R-O-R' + HO-PO32- R-OH + R'-O-PO32-

4
 La fosfor
fosforlisis est
est catalizada por la gluc
glucgeno fosforilasa

Glucgeno (N)

Pi
Glucgeno fosforilasa

Glucgeno (N-1)

-D-Glucosa 1-fosfato

El piridoxal fosfato, un derivado de la

vitamina B6, acta de grupo prosttico de la
glucgeno fosforilasa

H O El coenzima est anclado al sitio activo

O
O C
del enzima a travs de un enlace de base
H2
P C OH Schiff (formado por la condensacin del
O
O aldehdo y un -amino de una lisina.
+
N CH3
H
piridoxal fosfato Enz

(CH2)4

N+
O HC H
O H2
P C O
O
O
+
N CH3
H
Enzyme (Lys)-PLP Schiff base

5
 Cmo acta la glucgeno fosforilasa?

Glucgeno
fosforilasa
Glucosa 1-P

Cmo acta el enzima desramificante? (I)

-1,4/-1,4 trans-glicosidasa

6
 Cmo acta el enzima desramificante? (II)

1-6 glicosidasa

Glucgeno
fosforilasa Glucosa 1-P

El enzima desramificante tiene dos centros catalticos

independientes, resultante del plegamiento de una nica cadena
polipeptdica:

La actividad transferasa permite hidrolizar un trisacrido de

glucosa, y transferirlo al extremo de otra cadena.Queda una
glucosa unida por un enlace (14).
La actividad (16) glucosidasa hidroliza el enlace
(16) y libera glucosa. Es la nica ocasin en la que se
libera glucosa del glucgeno.

7
 La accin coordinada de los tres enzimas...

-1,4/-1,4 transferasa

-1,6 glucosidasa

Glucgeno
fosforilasa

Una visi
visin global de la degradaci
degradacin del gluc
glucgeno

Glicogenina

El producto resultante Fosforilasa

del catabolismo del
glucgeno es:

glucosa-1-fosfato

y una pequea cantidad

de glucosa Transferasa

-1,6-glucosidasa

8
 La glucosa-1-fosfato no puede utilizarse directamente en el
metabolismo energtico celular

Fosfoglucomutasa

-D-Glucosa 1-fosfato -D-Glucosa 6-fosfato

Glucosa Glicolisis
La glucosa-6-fosfato s puede ser sangunea (Ciclo Krebs)
utilizada en otras rutas metablicas...

Destino metablico de la glucosa 6-fosfato en el hgado

Glucgeno Glucosa
Glucokinasa
G-6-Pasa
Glucosa-1-P Glucosa-6-P Glucosa + Pi
Glicolisis

Piruvato

La glucosa-6-fosfatasa, que solo existe en el hgado, cataliza la reaccin:

glucosa-6-fosfato + H2O glucosa + Pi

Es clave para la funcin reguladora de la homeostasis de la

glucosa que ejerce el hgado. Los dems tejidos carecen de ella

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 Destino metablico de la glucosa 6-fosfato en otros tejidos

Glucgeno Glucosa
Glucokinasa
G-6-Pasa
Glucosa-1-P Glucosa-6-P Glucosa + Pi
Gliclisis

Piruvato

La ausencia de glucosa-6-fosfatasa en los otros tejidos hace que no sea

posible la liberacin de glucosa; antes bien la Glucosa-6-P proveniente de
la glucogenolisis se destina a la glicolisis.

La regulacin de la glucogenolisis

La glucgeno fosforilasa es, de entre los varios enzimas que participan en el

catabolismo del glucgeno, el enzima que ms eficazmente regula la
glucogenolisis.
La regulacin de la glucgeno fosforilasa heptica y la muscular es diferente
La regulacin de la glucogenolisis puede tener lugar por tres vas diferentes:
Interconversin enzimtica de la glucgeno fosforilasa (mecanismo
dependiente de cAMP; hgado)
Activacin del enzima por mecanismos dependiente de Ca2+ (msculo
e hgado)
Activacin alostrica (AMP)
Dado que el destino metablico del glucgeno es diferente, la glucogenolisis
est regulada por seales hormonales diferentes en cada tejido (glucagn en
el hgado y -adrenrgicos en el msculo). El glucagn se produce en
respuesta a niveles bajos de glucosa. La epinefrina es parte de la respuesta ,
de alerta del individuo ante el peligro.

10
 Regulacin de la glucogenolisis (I)

La glucgeno fosforilasa (hgado y msculo) existe bajo dos

formas:
"a" es una forma activa del enzima, fosforilada, cuya
actividad es poco sensible a reguladores alostricos. La de
msculo es sensible a glucosa
"b" es una forma defosforilada del enzima que es mucho
menos activa, pero que puede ser activada por efectores
alostricos (ms en msculo que en hgado).

Regulacin de la glucogenolisis (II)

En el hgado y msculo, la glucgeno fosforilasa es fosforilizada,
y activada, por la fosforilasa kinasa
Este enzima existe tambin bajo dos formas, una fosforilizada
que es activa y otra no fosforilizada que es mucho menos activa
En hgado, la fosforilizacin y activacin del enzima es
catalizada por la protena kinasa A, dependiente de cAMP

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 El cAMP es un mensajero intracelular que es sintetizado por la adenilato
ciclasa, a partir de ATP, y rpidamente degradado por la 3-5 fosfodiesterasa

ATP

3-5 fosfodiesterasa
5

3
adenilato ciclasa

5AMP

Cascada de activacin de
la glucgeno fosforilasa

El mecanismo en
cascada permite una
notable amplificacin de
la respuesta al agonista

12
 Regulacin de la glucogenolisis en el msculo
tiene ciertas singularidades...

La glucgeno fosforilasa de msculo, adems de su

interconversin y activacin por fosforilizacin, es tambin
regulable alostricamente por glucosa, AMP, ATP, y G6P.

Glucosa es un efector alostrico negativo de la forma a

(fosforilizada, activa) heptica.
AMP, que aumenta cuando los niveles de ATP son bajos,
activa la forma b (no fosforilizada) del enzima.
ATP y glucosa-6-fosfato, poseen sitios de unin que se
solapan con los de AMP, e inhiben la forma b de la
fosforilasa activada por AMP

La degradacin del glucgeno se inhibe cuando existe

suficiente ATP y glucosa-6-fosfato.

En el msculo, existe tambin una va paralela de activacin

a travs de Ca++...

Ca++

...implica la activacin de la fosforilasa quinasa a travs de Ca++, sin

necesidad de su fosforilizacin

13
 Sealizacin ligada a canales de Ca2+ (I)
Ca2+ (10-3M)

10-7M Ca2+

Ca2+

La entrada de Ca2+ y su elevacin

intracelular activa procesos en la clula

Sealizacin ligada a canales de Ca2+ (II)

10-7M Ca2+
Ca2+ (10-3M)

Ca2+

La salida de Ca2+ de los depsitos

intracelulares activa procesos en la clula

14
 Activacin de la fosforilasa a travs de receptores -adrenrgicos

+ATP

1. Aumento de IP3
2. Aumento de Ca2+ intracelular
3. Unin de Ca2+ a calmodulina
4. La calmodulina es la subunidad del holoenzima fosforilasa quinasa

Activacin de la fosforilasa quinasa en msculo:

dos alternativas...
Fosforilasa b

Hormonas

Protein Parcialmente activa

kinasa A

Inactiva Totalmente activa

Impulso nervioso Parcialmente activa

Contraccin muscular Fosforilasa a
Hormonas

15
 Fosforilasa Quinasa inactiva

Fosforilasa Quinasa-Ca++ parcialmente activa

P-Fosforilasa Quinasa-Ca++ totalmente activa

La Fosforilasa quinasa de msculo, cuya subunidad

es la calmodulina, puede activarse por dos vas: 1)
fosforilizacin de la subunidad por la
proteinquinasa A dependiente de cAMP; 2) unin
de Ca++-calmodulina para formar el holoenzima.

Los mecanismos de desactivaci

desactivacin de la glucogenolisis...
glucogenolisis...

Los mecanismos descritos explican cmo tras una seal

apropiada, se pone en marcha la glucogenolisis pudiendo dar la
impresin de que una vez activada no cesara hasta haber
degradado totalmente el glucgeno.
Sin embargo existen en la clula toda una serie de mecanismos
de desactivacin que garantizan que la glucogenolisis solo estar
activa si existe un estmulo continuado para que as sea.
En cuanto cesa ese estmulo, cesa poco despus la degradacin
del glucgeno...

16
 Los mecanismos de inactivacin
actan a varios niveles:

1. Disminuci
Disminucin de los niveles de cAMP
Inactivacin de la adenilato ciclasa por separacin de G-GTP a
G-GDP y su separacin del enzima
Hidrlisis del cAMP por la fosfodiesterasa
Inactivacin de la Protena quinasa A

2. Disminuci
Disminucin del Ca2+ intracelular por bombeo a los
correspondientes reservorios

3. Defosforilizaci
Defosforilizacin de la gluc
glucgeno fosforilasa y la fosforilasa
quinasa por una fosfoproten-fosfatasa que se inactiva por
efecto del glucagn y protena quinasas

El cAMP es un mensajero intracelular que es sintetizado por la adenilato

ciclasa, a partir de ATP, y rpidamente degradado por la 3-5 fosfodiesterasa

ATP

3-5 fosfodiesterasa
5

3
adenilato ciclasa

5AMP

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 Normalizacin de los niveles Espacio extracelular
Ca2+ (10-3M) de Ca2+ intracelular

Ca2+ Ca2+
Na+/Ca2+ antipuerto Ca2+ -ATPase

Ca2+ (10-7M)
Na+ Citosol
ATP ADP + P
Bombeo por la Ca2+ -ATPase
hacia el retculo endoplsmico

Incorporacin
ATP ADP + P Secuestro del Ca2+ por
activa de Ca2+ en
protenas del citosol
la mitocondria

Ca2+
Ca2+
Ca2+

calmodulina

Retculo endoplsmico mitocondria

La fosfoprotena fosfatasa (PP1) es un enzima que desfosforila,

e inactiva a la fosforilasa quinasa y la glucgeno fosforilasa

Glucgeno
Fosforilasa
fosforilasa
quinasa

18
 Pero el enzima esta inhibido por un inhibidor que, cuando est
fosforilado, bloquea su actividad

Glucgeno
Fosforilasa
fosforilasa
quinasa

El inhibidor, fosforilado, es un mal substrato de la fosfatasa, al que el enzima, no

obstante, logra eliminar su grupo fosfato con lo que se disocia del enzima

Glucgeno
Fosforilasa
fosforilasa
quinasa

La fosfoprotena fosfatasa, liberada de su inhibidor, desfosforila, e inactiva

a la fosforilasa quinasa y la glucgeno fosforilasa

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 Protena reguladora
Regulaci
Regulacin de la actividad de de unin al glucgeno
la fosfoprote
fosfoprotena fosfatasa
Fosfoprotena
fosfatasa

Glucagn La fosforilizacin de la subunidad

reguladora hace que se suelte el
enzima del glucgeno

Fosfoprotena
fosfatasa
parcialmente
activa

La fosforilizacin del inhibidor por la PK-A

dependiente de cAMP, le hace capaz de Complejo
unirse a la fosfatasa e inactivarla totalmente
inactivo

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