Resumen.

(Maricarmen Castillo O / Fernanda Fuerte L)

SDS-western blot y dot blot

Sourthen blot y northen blot

SDS- WESTERN BLOT:

-Tcnica analtica usada para separar y detectar protenas especficas en una muestra determinada.

- Las protenas sufren un tratamiento por agentes reductores que provocan la prdida de las estructuras secundaria y
terciaria y mantiene los polipptidos en este estado desnaturalizado.

-Las muestras de protenas se resuelven primero por SDS-PAGE y luego son electroforticamente transferidas a la
membrana. Despus de una etapa de bloqueo, se aade primero un anticuerpo primario para unirse al eptopo de la
protena diana, luego se sondea la membrana con un anticuerpo primario (mono-o policlonal) especficamente dirigido
contra la protena diana.

- Se detecta la unin antgeno-anticuerpo por actividad enzimtica, fluorescencia entre otros mtodos. De esta forma se
puede estudiar la presencia de la protena en el extracto y analizar su cantidad relativa respecto a otras protenas.

- Esta tcnica es hoy en da imprescindible en varios campos de la biologa, como la biologa molecular, la bioqumica, la
biotecnologa o la inmunologa.

DOT BLOT:

Tcnica en la biologa molecular utilizado para detectar biomolculas, y para la deteccin, anlisis, y la identificacin de
protenas. Esto representa una simplificacin de la transferencia Northern, Southern blot, o los mtodos de Western
Blot. En una transferencia puntual las biomolculas que se detecten no se separan primero por electroforesis. En su
lugar, una mezcla que contiene la molcula a detectar se aplica directamente sobre una membrana en forma de punto, y
luego se detecta a travs de plantillas circulares directamente sobre la membrana o sustrato de papel. Esto difiere de la
transferencia de western, porque las muestras de protenas no se separan electroforticamente.

La tcnica ofrece un ahorro significativo en el tiempo, como la cromatografa o electroforesis en gel, y no son necesarios
los procedimientos de transferencia de complejos para el gel. Sin embargo, no ofrece ninguna informacin sobre el
tamao de la biomolcula diana.

Slo pueden confirmar la presencia o ausencia de una biomolcula o biomolculas que puede ser detectado por las
sondas de ADN o el anticuerpo.

Southern blot

Mtodo de biologa molecular que permite detectar la presencia de una secuencia de ADN en una mezcla compleja de cido ncleotido
utilizando la prueba de electroforesis en gel de agarosa.

Northern Blot

Permite detectar RNA extrayndolo del las clulas pertinentes y su posterior separacin por tamao de electroforesis en gel.