Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Sumario
Dao en el DNA
Reparacin directa
Mecanismos de escisin
Reparacin de desapareamiento de bases
Reparacin inducida
Dao en el DNA
1) Errores en la replicacin: la seguridad con que una secuencia de DNA se copia durante la
replicacin depende de la fidelidad de la polimerasa en la seleccin correcta del dNTP para
insertarlo en la cadena complementaria que se sintetiza a partir del DNA parental. Los errores
en la replicacin se incrementan si el balance de los 4 dNTP en la clula del DNA precursor se
desordena, si un dNTP se encuentra en exceso se puede alterar la normalidad de la
polimerasa e incorporar este nucletido en lugar del correcto.
4) Daos exgenos:
Daos en el DNA
Cambios de 1 base: afectan la secuencia, pero no la estructura total del DNA. Ellos no
afectan la transcripcin o replicacin, cuando las cadenas del DNA dplex se separan. As
estos cambios ejercen su dao sobre futuras generaciones a travs de las consecuencias del
cambio en la secuencia del DNA.
Distorsiones estructurales: ellas causan un impedimento fsico a la replicacin y
transcripcin. Un ejemplo muy estudiado es la formacin de dmeros de pirimidinas. Otros
ejemplos son la introduccin de enlaces covalentes entre bases de cadenas opuestas y la
adicin de aductos.
Mecanismos de reparacin
En lneas generales los mecanismos de reparacin eucariticos son similares a los
mecanismos de reparacin de E. coli (que es donde mejor se han estudiado), aunque en
eucarioticos hay muchas ms protenas implicadas.
Los mecanismos de reparacin pueden clasificarse como (ver Tabla 25-5 Lehninger):
Reparacin por escisin de bases BER (Base Excision Repair) reparacin de parches muy
cortos (VSP)
4) Reparacin inducida:
Respuesta SOS.
Reparacin directa
La mayor parte de los dmeros de timina se reparan por mecanismos de escisin, que inducen
la eliminacin de las zonas donde se encuentran. Adems de los dmeros de timina, algunas
bases modificadas se reparan por este mecanismo, ej: O6 metil guanina se repara por una
metiltransferasa que elimina el metilo, que se transfiere al enzima quedando inactivada. Las
figuras siguientes representan la aparicin de guanina metilada y el mecanismo por el cual se
repara este error:
Pgina siguiente
Mecanismos de escisin
Son aquellos mecanismos de reparacin en los que se elimina la zona en la que se encuentra
la lesin. Hay dos tipos de mecanismos de reparacin por escisin:
1) BER: Reparacin por escisin de bases: la base que se encuentra modificada se escinde.
Ejemplo: oxidacin de citosinas que se convierten en deoxiuracilos. La N-uracil glicosidasa
rompe el enlace glicosdico que une la base con el azcar, origindose as un hueco en el
DNA: sitio apirimidnico si le falta una pirimidina o apurnico si la base que faltara fuera una
purina. Existen AP endonucleasas que reconocen el DNA al que le falta una base y producen
un corte; una exonucleasa degrada el DNA a partir de este corte y deja una zona que es
reparada por la DNA polimerasa y sellada por la ligasa. A veces, la AP endonucleasa corta la
cadena con la base modificada. En cada clula humana se generan diariamente unos 10000
sitios AP que son reparados por una mquina proteica, el reparosoma, formado por cuatro
protenas que actan concertadamente: la UDG (Uracil-DNA glicosilasa, que elimina el
uracilo), HAP1 (AP endonucleasa humana, que corta la cadena azcar-fosfato), la polimerasa
(que introduce el nucletido que faltaba) y la ligasa (que sella el corte).
2) NER: Reparacin por escisin de nucletidos, se corta la cadena de azcar - fosfato. Los
genes implicados, en el caso de E. coli, son Uvr (A, B, C, D). Los mutantes en genes Uvr son
muy sensibles a la luz ultravioleta, por tanto, los genes Uvr confieren resistencia a UV. Las
figuras siguientes muestran el mecanismo:
2 UvrA rastrean el DNA hasta encontrar una distorsin estructural (por ejemplo un dmero de
timina). UvrB queda unido en la zona lesionada, UvrA es eliminado y se recluta UvrC, que
produce dos cortes endonucleotdicos a ambos lados de la lesin, unos 5 nts en direccin 3' y
unos 8 nt 5'. UvrD que es una helicasa (tambin llamada helicasa II) desplaza el oligo que
incluye la distorsin (aproximadamente 14 nucletidos). La DNA polimerasa I rellena el hueco a
partir del extremo 3' OH libre y la ligasa lo sella. (Ver tambin la figura 14.28 Genes VII y otra
representacin alternativa del mecanismo).
Los errores que comete la DNA polimerasa dan lugar a desapareamientos de bases, as si a
una G por error se le enfrenta una A, aunque son bases normales, no lo es su apareamiento,
(mismatch: bases desapareadas). En condiciones normales la actividad exonucleasa asociada
a la polimerasa evita los desapareamientos, pero si no lo hace hay que eliminarlo antes de que
la banda se replique, ya que si no, la mutacin quedara fijada. En E. coli existe un grupo de
genes llamados Mut, implicados en la eliminacin de estos desapareamientos (si hay mutantes
en estos genes Mut se produce una tasa de mutacin ms elevada de lo normal). El sistema
de E. coli usa un reparisoma formado por las siguientes protenas:
1. Unin de Mut S al error: Mut S recluta al menos otros 2 polipptidos Mut H y Mut L.El
ensamblaje del complejo activa la endonucleasa latente de Mut H, la cual entonces inicia el
proceso de escisin introduciendo una mella en la cadena nuevamente sintetizada, del lado 5'
del todava no metilado GATC. El reconocimiento se lleva a cabo por las secuencias GATC que
no estn metiladas en la banda de nueva sntesis, ya que la metilasa Dam an no ha actuado
sobre ellas, recordemos que la actuacin de la metilasa Dam tarda unos minutos, este es el
tiempo que permite reconocer la base errnea (ver Fig. 14.29Genes VII).
En ocasiones el sistema reparador no tiene una forma intrseca de distinguir la base salvaje de
la mutada y es esta una forma en que se fijan las mutaciones. Existen sin embargo otras formas
de dirigir la restauracin de la secuencia salvaje. Por ejemplo para casos tales como la
desaminacin de 5-metil citosina a timina, hay un sistema especial para restablecer la propia
secuencia. La desaminacin genera un par G-T, y el sistema que acta sobre tal par tiene un
sesgo para corregilos a G-C (ms que a A-T). Se ha observado que el sistema Mut L, S traslada
siempre T de los dos apareamientos incorrectos G-T y C-T.
Otra actividad reparadora identificada por mut Y, reemplaza la A en los errores C-A y G-A. Este
sistema funciona por el traslado directo de la base del DNA (reparacin por escisin de bases).
Reparacin inducida
Ante una cantidad masiva de daos en el DNA, se disparan, como respuesta, mecanismos de
emergencia que se caracterizan por tener niveles superiores de protenas implicadas en
reparacin y recombinacin. El ejemplo tpico es larespuesta SOS, si la cantidad de lesiones
que hay en E. coli es muy superior a lo normal, se induce la respuesta SOS.
En los casos de reparacin vistos hasta ahora, los daos estaban en una sola de las dos
bandas, con lo que bastaba replicar la complementaria, pero si tenemos mutaciones masivas,
se puede replicar la zona antes de que d tiempo a reparar la lesin. Por ejemplo cmo se
reparan los dmeros de timina una vez que la horquilla ha pasado? Ahora la zona daada est
en la banda molde. Hay dos maneras de hacerlo:
En la respuesta SOS se induce la expresin de una serie de genes (ver Tabla 25.6 Lehninger):
Uvr (reparacin por escisin de nucletidos).
UmuD/C, que hace que la DNA polimerasa replique moldes daados a costa de
introducir mutaciones. Rec A activa, rompe proteolticamente, adems de lex A, a Umu
D generando la forma activa de la protena. El conjunto de Umu C y Umu D hace
perder fidelidad a la DNA polimerasa III (que estaba parada como consecuencia de la
existencia de daos en el DNA) y que copie la cadena molde aunque est daada,
dndose una replicacin errnea y en definitiva, generando mutaciones.
El gen sfi A est implicado en divisin celular, hace que se pare la divisin celular y se
producen filamentos de clulas.
En clulas eucariotas, cuando hay un gran nmero de lesiones en el DNA, aumentan los
niveles y se activa la protenap53, factor de transcripcin que activa la expresin de p21. p21
bloquea la ciclina G1 / cdk y por lo tanto se para el ciclo celular en G1, de esta manera se
impide la replicacin del DNA, dando tiempo para que se reparen los errores (p21 adems
interacciona con PCNA y frena la replicacin en fase S). p53 activa mecanismos de reparacin
y tambin induce apoptosis. La apoptosis, muerte celular programada o suicidio celular, es un
proceso controlado genticamente y es fisiolgicamente distinto al proceso necrtico. En la
apoptosis la clula se deshidrata, se redondea, el ncleo se condensa, se parten los
cromosomas, y se degrada en vesculas que son engullidas por los macrfagos (ocurre sin
inflamacin, no como en necrosis).
Clulas con gran cantidad de lesiones en el DNA; antes de seguir dividindose y acumulando
mutaciones que podran llevar a procesos tumorales, la clula se suicida.
El desarrollo (por ejemplo: las clulas que forman la cola de los renacuajos, clulas nerviosas
sobrantes, etc.)
Pgina anterior