UNIVERSIDAD: PRIVADA FRAN TAMAYO

CARRERA: BIOQUMICA Y FARMACIA

CTEDRA: HEMATOLOGA I
DOCENTE: DRA. MARIL ESCALANTE GONZALES

DETERMINACION DE LA SERIE ROJA

PRACTICA N 3

ESTUDIANTE: Fernandez Paniagua Yhovana

FECHA: 11- 04- 2017

 DETERMINACION DE LA SERIE ROJA

I. OBJETIVOS:
Destreza y cuidado en la utilizacin de la cmara de neubauer
Conocer las propiedades de los anticoagulantes
Destreza en las determinaciones que comprende la serie roja
Conocer la formula de los ndices eritrocitarios
Dominio en los valores referenciales

II. FUNDAMENTO TERICO

1 .Caracterstica Y Aplicacines De La Cmara De Cmara De Neubaue
Es un instrumento utilizado en medicina y biologa para realizar el recuento de esporas
y clulas en un medio lquido, que puede ser; un cultivo celular, sangre, orina, lquido
cefalorraqudeo, lquido sinovial, etc.
Esta cmara de recuento est adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de
fases. Se trata de un portaobjetos que tiene dos zonas ligeramente deprimidas en cuyo
fondo se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrcula de dimensiones
conocidas. Se cubre la cmara con un cubreobjetos que se adhiere por simple tensin
superficial (en especial una vez que se haya aadido la muestra lquida).
Luego se introduce, por capilaridad entre la cmara y el cubre, el lquido con las clulas a
contar, generalmente tras una dilucin previa; puesto que la cmara tiene dos zonas esto
permite hacer dos recuentos simultneamente A partir del nmero de clulas contadas,
conociendo el volumen de lquido que admite el campo de la retcula, se calcula la
concentracin de clulas en la muestra lquida aplicada.1
En la retcula central, la cmara de Neubauer tiene un cuadrado primario que contiene
nueve cuadrados secundarios,
2.Caracteristicas De Los Anticoagulantes Mecanismo De Accion
Anticoagulantes. Es a aquellas sustancias, ya sea exgena o endgena, que tienen la
capacidad de inhibir la coagulacin de la sangre. Esto es posible a partir de la creacin de
un estado denominado prohemorrgico. Anticoagulantes de accin directa
Anticoagulantes de accin indirecta La funcin principal de cualquier anticoagulante es la
de impedir que la sangre se coagule esto lo pueden conseguir a travs de diferentes
mecanismos de accin. Se divide en:
Caractersticas Bsicas de los Anticoagulantes Ms Usados en Hematologa - No
alterar el tamao de los hemates, ni produce hemlisis. - Evita al mximo la agregacin
plaquetaria sin alterar la morfologa de los leucocitos Segn el mecanismo de accin los
anticoagulantes se pueden clasifican as: 1. Anticoagulantes Slidos: Wintrobe,
Etilendiaminotetracetico (EDTA) y Heparina 2. Anticoagulantes Lquidos: Citrato trisdico y
Oxalato sdico
Anticoagulantes Anticoagulantes De Wintrobe: Es una mezcla de oxalato de amonio y
potasio. Acta por precipitacin del calcio. Ventajas. No afecta el volumen globular medio.
Con la proporcin utilizada, los eritrocitos no se alteran, actan por fijacin de calcio.
Desventajas. En los extendidos queda limitada a los primeros minutos y produce
formacin de agregados plaquetarios. El oxalato de potasio solo se utiliza frecuentemente
como anticoagulante en bioqumicos.
Anticoagulantes Anticoagulante Etilendiaminotetracetico (EDTA) Es la sal disdica o
tripotsica del cido etilendiaminotetractico. Ventajas: No afecta la morfologa de las
clulas hemticas ni modifica la velocidad de sedimentacin globular. Respeta la
morfologa eritrocitaria y leucocitaria. Facilita su recuento a partir del frotis. Desventajas:
Anticoagulantes Heparina Es un mucopolisacrido cido. Ventajas: Acta
inmediatamente. Es apta para la proteccin de clulas. Desventajas: Necesita
frecuentes controles para ver cunto de lquida est la sangre para ajustar la dosis. Si no
se agita al momento de ponerla en el frasco, forma microcoagulos. Tipos de heparina:
Heparina corriente o no fraccionada (HNF) Heparina fraccionada o de bajo peso molecular
(HBPM)
Anticoagulantes Citrato Trisdico Es de eleccin para las pruebas de hemostasia y la
velocidad de sedimentacin. Acta a travs de la precipitacin del calcio. La
concentracin depende de la prueba por realizar. Para pruebas de hemostasia se emplea
en proporcin de 1:9 (0,5 ml de anticoagulante para 4,5 ml de sangre total). Para la
determinacin de la VSG (Velocidad de Sedimentacin Globular) es 1:4 (0,5 ml de
anticoagulante para 2 ml de sangre). Citrato Trisdico en polvo
Anticoagulantes Oxalato Sdico Recomendado tambin para las pruebas de
hemostasia. Se emplea en proporcin de un volumen de anticoagulante para 4 vol. de
sangre.
3. Componentes Generales De La Sangre, Plasma Suero Y Clula Sanguneas

La sangre. Est compuesta por la mezcla de varios elementos. Los diferentes

componentes de la sangre cumplen numerosas funciones dentro del organismo. El corazn
bombea la sangre en un circuito cerrado, denominado circulacin sangunea. Los adultos
tienen un volumen sanguneo de entre 4,5 a 6 litros de sangre, lo que supone entre el 6 y el
8% del peso corporal total. La sangre se compone de glbulos, plaquetas y una parte
lquida llamada plasma (suero sanguneo y factores de coagulacin). Un litro de sangre de
un hombre est compuesto por 0,46 litros de glbulos.

Glbulos rojos (eritrocitos) Lo eritrocitos se forman en la mdula sea. En neonatos

(feto) se forman, sin embargo, en el hgado y en el bazo. Ciertas hormonas como la
eritropoyetina, que se produce en el rin cuando la disminucin de oxigeno cae en sangre,
estimula la produccin de eritrocitos en la medula sea. Cuando se normaliza de nuevo la
cantidad de oxgeno sanguneo la produccin de eritropoyetina vuelve a
descender.Los glbulos rojos son clulas con forma de una rodaja circular con doble
depresin que carecen de ncleo, las nicas clulas sin ncleo del cuerpo humano.
Funcin principal de los glbulos rojos es el transporte de oxgeno (O2) y de dixido de
carbono (CO2) entre los pulmones y los rganos. Lo eritrocitos se forman en la mdula
sea., sin embargo, en el hgado y en el bazo., que se produce en el rin cuando la
disminucin de oxigeno cae en sangre, estimula la produccin de eritrocitos en la medula
sea.

El oxgeno debe desprenderse de la hemoglobina cuando llega a los tejidos que lo

requieren, y necesitan desechardixido de carbono. Es importante el equilibrio sanguneo
entre la concentracin de oxgeno y la concentracin de dixido de carbono,
La vida del eritrocito es de 100 a 120 das, aproximadamente. Los glbulos rojos circulan
por el cuerpo hasta que cumplen su ciclo vital. En este momento, el bazo se encarga de
apartarlos de la circulacin general y de degradarlos. Este proceso se conoce
como regeneracin eritroctica. En este proceso se liberan sustancias, que el cuerpo o bien
sigue descomponiendo

Glbulos blancos (leucocitos), los leucocitos son un componente muy importante

del sistema inmunitario. Su principal misin es identificar y destruir agentes patgenos
(quimiotaxis). Gracias a su movilidad autnoma pueden llegar al foco de infeccin a travs
de las hendiduras de los vasos capilares (diapdesis), fagocitar las bacterias y destruirlas.
Tambin se las conoce como clulas limpiadoras.

Los leucocitos no llevan pigmento rojo (hemoglobina) y se diferencian de los eritrocitos, a

travs de un microscopio, por su falta de color. Los glbulos blancos se dividen
en granulocitos, monocitos y linfocitos. Los dos primeros se forman en la mdula sea,
mientras que los ltimos lo hacen en los rganos y tejidos

Plasma sanguneo El plasma sanguneo se compone en un 90% de agua y no

contiene clulas sanguneas. Adems, contiene protenas plasmticas (60-50 gr. protena/l)
a las que pertenecen la albmina y las globulinas. Las globulinas y el fibringeno son
responsables de la coagulacin., se elimina el fibringeno del plasma sanguneo hablamos
de suero sanguneo. Las protenas plasmticas tienen numerosas funciones

La presin osmtica, sirve para mantener la diferencia de presin a uno y otro lado de una
membrana semipermeable. Si desciende el contenido protenico de la sangre, por ejemplo,
por una alimentacin pobre en protenas, se puede dar una acumulacion de lquido en el
tejido y surgen los edemas por hipoproteinemia. Otra de las funciones de las protenas
plasmticas reside en su capacidad para unirse a diferentes sustancias.. y evita por otro
lado su rpida eliminacin a travs de los riones o hgado Las sales juegan un papel vital,
porque definen las propiedades fsico-qumicas de la sangre. Junto al cloruro de sodio (sal
comn), que compone el 75% del contenido en sales, hay disponibles en pequeas
cantidades sales de potasio, calcio y magnesio en la sangre. El potasio y el calcio, que solo
se encuentran en la sangre pequeas cantidades, son esenciales para la excitabilidad
nerviosa y la contraccin de los msculos.

4. Fundamento Del Metodo Optico Para Recuento De Eritrocitos Y Mecanismo De

Accin De La Solucin Isotnica

Fundamento. La membrana plasmtica de los eritrocitos -igual que sucede con la de otras
clulas tiene la propiedad de ser una membrana semipermeable, es decir, que permite la
difusin de agua a travs de ella, pero no la de las sales minerales disueltas en el agua.
Por el fenmeno de la smosis, el agua tiende a pasar del medio en el que se encuentran
las sales ms diluidas, al medio en el que se encuentran ms concentradas, hasta igualar
la concentracin (y por tanto la presin osmtica) de ambos medios. concentracin de
sales minerales) que es el plasma sanguneo. Si los introducimos en un
medio hipotnico (con una concentracin salina inferior a la de su citoplasma), el agua
tender a entrar en el eritrocito a travs de su membrana plasmtica para igualar ambas
concentraciones, y la clula reventar.

Mtodo Preparamos una solucin salina isotnica con cloruro sdico (sal comn) al 9 por
1000 en agua destilada (es decir, 9 g de NaCl en cada 1000 de disolucin); una solucin
salina hipotnica, slo con agua destilada; y una solucin salina hipertnica, con NaCl al 18
por 1000. Cada una en un pequeo tubo de ensayo.

Diluimos una gota de sangre en 5 ml de cada una de estas disoluciones, y a los 5

min. Observamos muestras de las tres al microscopio:
Slo en la muestra con solucin salina isotnica se vern eritrocitos normales (con aspecto
redondeado).
En la muestra con solucin salina hipotnica no veremos nada (pues las clulas habrn
reventado). Ni siquiera hace falta utilizar el microscopio con esta muestra: se ve que han
reventado todos los eritrocitos porque es la nica transparente -lo que demuestra que no
hay clulas en suspensin- de las tres, aunque s tenga cierto color sanguinolento debido a
la hemoglobina.
(Pasado un tiempo, en el fondo de los dos tubos que tenan clulas enteras (el iso y el
hipertnico) se ver un puntito de color rojo: los eritrocitos han sedimentado: se puede
explicar esto a los alumnos como el fundamento del hematocrito (% de glbulos rojos en
sangre, que se calcula en un capilar fino de vidrio en el que se introduce la sangre y se deja
reposar: es una prctica que tambin se puede hacer si tenemos algn anticoagulante para
evitar los trombos en el tubo de cristal).
5.Cambios En Los Eritrocitos En La Soluciones Hipo e Hipertnica En biologa,
una solucin hipertnica (gr. hypr, en exceso yton(o), tensin) es aquella que tiene mayor
concentracin desoluto en el medio externo, por lo que una clula en dicha solucin pierde
agua (H2O) debido a la diferencia de presin, es decir, a la presin osmtica, llegando
incluso a morir por deshidratacin. La salida del agua de la clula contina hasta que la
presin penctica del medio externo y de la clula sea igual. Fenmenos similares ocurren
al conservar alimentos en salmueras o jarabes concentrados de azcar..

6. Fundamento Del Mtodo Para La Determinacin Delvelocidad De

Eritrosedimentacin (Ves)
El anlisis de sangre llamado velocidad de eritrosedimentacin (VES), o velocidad de
sedimentacin globular (VSG), mide lo rpido que se asientan los glbulos rojos
(eritrocitos) en un tubo de ensayo en una hora. Entre ms glbulos rojos caen hacia el
fondo del tubo de ensayo en una hora, mayor ser la velocidad de eritrosedimentacin.
Cuando hay inflamacin en el cuerpo, ciertas protenas hacen que los glbulos rojos se
unan y caigan ms rpido de lo normal al fondo del tubo. Estas protenas son producidas
por el hgado y el sistema inmunitario bajo muchas condiciones anormales, tales como una
infeccin, una enfermedad autoinmunitaria o cncer.
Hay muchas posibles causas de una velocidad de eritrosedimentacin elevada. Por este
motivo, la velocidad de eritrosedimentacin se hace con otras pruebas para confirmar un
diagnstico. Despus de que se ha hecho un diagnstico, se puede hacer una velocidad de
eritrosedimentacin para ayudar a evaluar la enfermedad o ver lo bien que est
funcionando el tratamiento.

7. Fundamento De La Determinacin De Hemoglobina

Hemoglobina La hemoglobina es una protena que contiene hierro y que le otorga el color
rojo a la sangre. Se encuentra en los glbulos rojos y es la encargada del transporte de
oxgeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos.La hemoglobina tambin transporta
el dixido de carbono, que es el producto de desecho del proceso de produccin de
energa, lo lleva a los pulmones desde donde es exhalado al aire..

Determinacin de Hemoglobina

Se prepar el reactivo CMHb con la mezcla de dos reactivos de los frascos

con tapa azul 25 ml y tapa blanca 25 ml, y con agua destilada 450 ml (500
ml).
Extraer una muestra de sangre total realizando una puncin con la lanceta en
el dedo gordo en la periferia.
Con una micropipeta automtica tomar 20 ul de sangre extrada.
En dos cubetas marcadas B (Blanco) y M (Muestra), colocar:
Leer la absorbancia de cada tubo y calcular los resultados con una cantidad
estndar de 36.8.

Valores normales de Hemoglobina:

12 16 g/dl Varones 14 18 g/dl Mujeres

8. Fundamento de la Determinacin del hematocrito

Hematocrito Tras una centrifugacin de la sangre total se pueden apreciar dos niveles,
uno con el depsito de los glbulos rojos, principalmente, y otro nivel del plasma total. La
relacin porcentual entre ambos es lo que describe el hematocrito y describe el porcentaje
de clulas transportadoras de oxgeno con respecto al volumen total de sangre.

El anlisis del hematocrito se realiza normalmente en un estudio completo de hematimetra,

con el recuento de glbulos rojos o hemates.

Determinacin del valor de hematocrito

Muestra de sangre
Tubos capilares de vidrio
Centrfuga de Hematocrito
Lector de microhematocrito
Plastilina
Lanceta
Algodn y alcohol
 Lectura del valor de hematocrito Determine el valor de hematocrito mediante el disco
delectura que, a su vez, es la tapa del
Valores normales de Hematocrito: 38 50%

II PROCEDIMIENTO-(flujograma)

IV. CLCULOS Y RESULTADOS

1) Vol total
4Mi + 20 Ul
400 Ul + 20 Ul
4020 Ul

1)
4020 Ul disusolu = 1
20 Ul sol 201

2)
Vol = a.h
Vol = 0,04. 5 mm2 0,1 mm
Vol = 0,2 m m2 . 0,1mm

Vol= 0,3 mm3

3)
Fd = dil .u
Fd = 1 . 0,02 mm3
201
Fd = 201
 0,02 mm3

Fd = 10050 mm 3

4)
# GR = fd . total o rojas
# GR = 10050. 475 10050 . 563
# GR = 4773750 cel. mm 3 5658150 cel./mm 3

# GR = 4773750 al .(1000)3
# GR = 4,77375 x 10 15 cel / L # GR = 5,55815 X 10 15 CEL /L

Hb:
0,496 . 109 / / dl = 18,50745 /dl 0,535 x 10 = 19,96269/dL
0,268 G/L 0,268 G/L

UCM = 0,45 c/C

4,77375 X 1012 CEL. / L

UCM = 9,4265 X 10 4 C/C. 1CL

1015 L/
UCM = 9,4265

V. RESUMEN DE LA IMPORTANCIA DE LA PRCTICA

VI. CUESTIONARIO
1. explique el mecanismo dela bomba sodio y potasio
Este mecanismo se produce en contra del gradiente de concentracin gracias a la enzima
ATPasa, que acta sobre el ATP con el fin de obtener la energa necesaria para que los
nutrientes puedan atravesar la membrana celular y llegar al citoplasma.
La bomba de sodio y potasio acta de la siguiente manera:

1: tres iones de sodio (3 Na+) intracelulares se insertan en la protena transportadora.

2: el ATP aporta un grupo fosfato (Pi) liberndose difosfato de adenosina (ADP). El grupo
fosfato se une a la protena, hecho que provoca cambios en el canal proteico.
3: esto produce la expulsin de los 3 Na+ fuera de la clula.
4: dos iones de potasio (2 K+) extracelulares se acoplan a la protena de transporte.
5: el grupo fosfato se libera de la protena induciendo a los 2 K+ a ingresar a la clula. A
partir de ese momento, comienza una nueva etapa con la expulsin de otros tres iones de
sodio.

2 Explique EL fundamento del mtodo de la cianometahemoglobina para la

determinacin de la hemoglobina
Consiste en hacer reaccionar la sangre con un reactivo que contiene cianuro y ferrocianuro
potsico (reactivo de Drabkins), que oxida la hemoglobina a metahemoglobina la cual a su
vez pasa a cianometahemoglobina. La intensidad de color de este compuesto se mide
fotocolorimtricamente. Los resultados se llevan a una curva estndar realizada con
soluciones de cianometahemoglobina comercial, de donde se extrapolan las
concentraciones de hemoglobina de las muestras problema.

3 Mencione Los Factores Que Influyen En La Determinacin Del (Ves )

Cuando hay inflamacin en el cuerpo, ciertas protenas hacen que los glbulos rojos se
unan y caigan ms rpido de lo normal al fondo del tubo. Estas protenas son producidas
por el hgado y el sistema inmunitario bajo muchas condiciones anormales, tales como una
infeccin, una enfermedad autoinmunitaria o cncer.
Hay muchas posibles causas de una velocidad de eritrosedimentacin elevada. Por este
motivo, la velocidad de eritrosedimentacin se hace con otras pruebas para confirmar un
diagnstico. Despus de que se ha hecho un diagnstico, se puede hacer una velocidad de
eritrosedimentacin para ayudar a evaluar la enfermedad o ver lo bien que est
funcionando el tratamiento.

4 Explique El Fundamento Del Mtodo para la determinacin De Hematocritos

Este examen mide el volumen (cantidad) de glbulos rojos en la sangre, comparado con
otros componentes. Los resultados del examen se informan como un porcentaje o como un
fragmento decimal de sangre entera. Este examen puede ser usado para evaluar o manejar
enfermedades como enfermedad renal (rion) en estado terminal, o insuficiencia cardaca
El valor de hematocrito indica el porcentaje volumtrico de eritrocitos en sangre. El
mtodo de referencia para la determinacin del hematocrito es la centrifugacin.
Mediante la centrifugacin se separan los componentes slidos de la sangre de los lquidos
y se envasan hermticamente. Este mtodo est establecido en la norma DIN 58933-1. A
continuacin, los tubos capilares de vidrio se centrifugan hasta que el producto alcance
una aceleracin centrfuga relativa mnima que acte sobre los eritrocitos (RCF 5.000) y
un valor numrico de tiempo de centrifugado en minutos de por lo menos 100.000

5 Determine Los Valores Heritrocitarios Con Los Valores Obtenidos En La Practica

Compare Con Los De Referencia

VII. BIBLIOGRAFA.

Alpiner, L, Jerome, G, Tcnicas Para La Determinacin De Serie Roja Mxico

Editorial Panamericana
Pennac O, Fundamento De la Serie Roja ( 3ra Edicin) Anagrama