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Tesis214 PDF
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TRABAJO DE GRADO
Presentado como requisito parcial
Para optar al titulo de microbiologa industrial
APROBADO
____________________
Ana Karina Carrascal
Bacteriloga M. Sc
Directora
____________________ ______________________
Luisa Gutirrez Luz Amparo Maldonado
Bacteriloga Bacteriologa
VERIFICACION DEL PROCESO DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE LOS
LABORATORIOS: AGUAS Y LODOS, INMUNOLOGIA ESPECIALIZADA Y
CITOMETRIA DE FLUJO, MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS Y
MICROBIOLOGIA AMBIENTAL Y DE SUELOS
_____________________ _____________________
Ingrid Schuler Garcia Janeth Arias
Decana Acadmica Directora de Carrera
Facultad de Ciencias Microbiologa Industrial y Agrcola
DEDICATORIA
Le dedico este trabajo de grado, ante todo, a Dios, por otorgarme la sabidura y la
salud para lograrlo. A mis padres por estar ah cuando ms los necesit, por su
ayuda y constante cooperacin. Por ser la fuente de mi inspiracin y motivacin
para superarme cada da ms y as poder luchar para que la vida depare un futuro
mejor. A Alejandro Daz por que sabes lo que esto significa para m. Y para todas
las personas que me acompaaron en todos y cada uno de los momentos de mi
vida.
Lena Marcela Callejas
Agradezco a Dios ante todo quien me ha dado la vida, haberme permitido culminar
esta meta. A mis padres por su apoyo incondicional, a mis hermanas por su
inmensa ayuda, a mi hija Sarita, quien ha sido el motivo para luchar y el motor de
mi vida. A Germn mi esposo, por su gran amor, su sacrificio, su infinita paciencia
y comprensin. A todos, dedico este trabajo de grado y los llevo en mi corazn.
Pg.
1. INTRODUCCION................................................................................................. 1
2. MARCO TEORICO.............................................................................................. 2
4. JUSTIFICACIN ............................................................................................... 26
5. OBJETIVOS ...................................................................................................... 28
6. MATERIALES Y MTODOS............................................................................. 29
7. RESULTADOS .................................................................................................. 35
11. BIBLIOGRAFIA............................................................................................... 58
LISTA DE FIGURAS
Por esto, la finalidad de este estudio fue demostrar la efectividad de los procesos
de limpieza y desinfeccin llevados a cabo en los laboratorios de que prestan
servicios al Departamento de Microbiologa. Este proceso fue evaluado realizando
un anlisis microbiolgico de las superficies de mesones, pisos antes y despus
del proceso de limpieza y desinfeccin mediante la tcnica del hisopo.
2. MARCO TEORICO
Siempre que se presta un servicio las caractersticas de este deben cumplir con
determinadas condiciones o requisitos que conformen al cliente que lo recibe, o a
la sociedad. El sistema de gestin de la calidad es el conjunto de actividades que
se desarrollan para que las caractersticas del servicio cumplan con los requisitos
establecidos.
El planteo inicial antes de elaborar o disear el sistema de calidad es establecer o
averiguar cules son los requisitos que deben cumplir el producto o servicio.
Luego se debe decidir de qu forma se van a cumplir los requisitos usando los
recursos disponibles de la manera ms eficiente. Existen normas o estndar es de
calidad que contienen requisitos de carcter general y que se pueden aplicar a un
caso particular siempre que se determina que los requisitos de dicha norma o
estndar sean equivalentes a los requisitos del propio producto o servicio que se
debe brindar. Tambin es posible utilizar solamente aquellos requisitos de una
Norma que son aplicables al producto o servicio (BERNILLON, 1999).
El sistema de control destinado a eliminar y/o prevenir las fallas del producto o el
servicio que se brinda y cumplir con los requisitos establecidos se denomina
Sistema de Gestin de la Calidad o simplemente Sistema de Calidad. Sistema
de calidad es el conjunto de actividades que se planifican y realizan en una
empresa, durante la fabricacin de un producto o la prestacin de un servicio, para
lograr efectivamente la calidad de ese producto o servicio, tomando todas las
precauciones necesarias a fin de prevenir la aparicin de fallas y desviaciones
durante el proceso productivo.
Las actividades de un sistema de calidad se pueden dividir en cuatro grupos: la
planificacin, el control, el aseguramiento y la mejora de la calidad (BERNILLON,
1999)
As para las instalaciones, solo exige que las condiciones sean tales que faciliten
la realizacin correcta de los ensayos, y que las condiciones ambientales no
invaliden los resultados ni comprometan la calidad requerida.
En general, resulta importante asegurar el orden y la limpieza del laboratorio, y en
el caso de los laboratorios de microbiologas es necesario preparar procedimientos
para estas operaciones.
Las Normas de Calidad tienen por objetivo ayudar y orientar al responsable de una
actividad en el diseo del sistema de calidad y en brindar herramientas de trabajo
de utilidad para detectar, evaluar y prevenir las fallas que puedan ocurrir
(HARRINGTON, 1992).
Una norma de calidad establece pautas o criterios para que durante todas estas
actividades que se realizan en el proceso productivo no se produzcan fallas o
desviaciones que afecten la calidad final del servicio en forma significativa. Los
Criterios de Calidad son la forma especial en que se realizan todas estas
actividades para evitar que constituyan una fuente de error.
Para verificar que se cumple con los requisitos de la norma, existen unas
entidades de certificacin que dan sus propios certificados y permiten el sello.
Estas entidades estn vigiladas por organismos nacionales que les dan su
acreditacin. Para la implantacin, es necesario que apoye a la organizacin una
empresa de consultora, que tenga buenas referencias, y el firme compromiso de
la Direccin de que quiere implantar el Sistema, ya que es necesario dedicar
tiempo del personal de la empresa para implantar el Sistema de gestin de la
calidad (HARRINGTON, 1992).
2.6.3. Solubilidad
2.6.5. No Corrosivo
El desinfectante no deber poseer propiedades corrosivas, ni irritantes, as como
tampoco producir manchas u otras alteraciones en los metales (RODRIGUEZ,
2002).
2.6.7. Disponibilidad
Una molcula activa, como puede ser por ejemplo un nutriente, puede penetrar a
travs de la membrana citoplasmtica bien mediante difusin pasiva (que es una
forma inespecfica y lenta) o mediante transporte activo (que es un procedimiento
especfico, capaz de permitir la acumulacin de productos en la bacteria o el
traslado se produce con el producto transformado o unido a una protena de
membrana). Muchos de los desinfectantes ms utilizados, incluyendo fenoles,
derivados de amonio cuaternario, biguanidas, entre otras producen fisuras a nivel
de compuestos de bajo peso molecular, siendo causa de desnaturalizacin
proteica y lisis celular. Los derivados de amonio cuaternario interaccionan con los
fosfolpidos de la membrana y producen dao celular generalizado (MCDONNELL,
1999).
Son sustancias que tienen efectos nocivos sobre los microorganismos bien sea
destruyndolos como: Bactericidas, Fungicidas y Viricidas, Inhibindolos o
dificultando su crecimiento: Bacteriostticos, fungistticos y virustticos.
2.8. CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD MICROBIANA
Temperatura de la solucin.
En general, cuanta ms alta sea la temperatura ms eficaz ser la desinfeccin.
Es preferible usar, por lo tanto, una solucin desinfectante tibia o caliente, que una
fra. Por lo que habr que seguir las instrucciones del fabricante, ya que por
ejemplo a temperaturas superiores de 43o C, los yodforos liberan yodo que
puede manchar los materiales, y la accin corrosiva del cloro aumenta cuando se
usan soluciones calientes de hipoclorito.
Tiempo.
Todos los desinfectantes qumicos necesitan un tiempo mnimo de contacto para
que sean eficaces. Este tipo de contacto mnimo puede variar de acuerdo con la
actividad del desinfectante.
Concentracin.
La concentracin de la solucin de desinfectante necesaria, variar de acuerdo
con las condiciones de uso, adems deber ser adecuada para la finalidad a la
que se destina y el medio ambiente en que haya de emplearse. Las soluciones
debern prepararse, por lo tanto, siguiendo estrictamente las instrucciones del
fabricante (MARTINEZ, 2007).
Estabilidad.
Todas las soluciones desinfectantes debern ser de preparacin reciente, en las
que se hayan utilizado utensilios limpios. El mantenimiento prolongado de
soluciones diluidas listas para ser usadas, puede reducir su eficacia, o convertiste,
tal vez, en un depsito de organismos resistentes. Los desinfectantes pueden
desactivarse si se mezclan con detergentes y otros desinfectantes no adecuados.
Es necesario verificar peridicamente la eficacia de los desinfectantes,
especialmente cuando se han disuelto para usarlos. Existen para tal fin equipos de
ensayo baratos y de fcil uso.
Precauciones.
Los desinfectantes qumicos que pueden envenenar los alimentos, tales como los
fenlicos, no deben usarse en las fbricas de elaboracin de alimentos, ni en
vehculos para su transporte. Se debe tener cuidado que los desinfectantes
qumicos no daen al personal, y de que cuando se usan en lugares donde se
guardan o transportan animales, tales como establos y vehculos, no les
produzcan daos y molestias (MARTINEZ, 2007).
Los hipocloritos son de bajo costo y de accin rpida. Sin embargo, se ha de tener
en cuenta que son desinfectantes que deterioran los metales, que se inactivan
fcilmente en presencia de materia orgnica, relativamente inestables y su eficacia
se ve afectada por el pH. Interaccionan con otras sustancias qumicas: soluciones
cidas y de amonio, con produccin de vapores de cloro que son muy irritantes.
No se deben utilizar tampoco en combinacin con formaldehdo, ya que esta
combinacin es altamente carcingena. Se utiliza ampliamente como
desinfectante de rutina de pavimentos, lavabos, aseos y zonas de preparacin de
alimentos, as como en la desinfeccin de los aparatos de dilisis y tratamiento de
aguas. En brotes y epidemias de Legionella spp. La hipercloracin del sistema de
distribucin de agua ha demostrado ser un mtodo muy eficaz (RODRIGUEZ,
2002).
El hipoclorito de sodio es una solucin acuosa que posee una concentracin entre
el 4.4% y el 5.4% (m/m), clara, ligeramente amarilla, olor caracterstico
dependiendo de la presentacin. Por su naturaleza oxidante, es un blanqueador,
desodorizante y desinfectante. De la concentracin de "cloro libre activo" depende
su reactividad en las reacciones de oxidacin, cloracin y accin bioqumica tales
como el control bacteriolgico y microbiolgico. El cloro, los hipocloritos son los
desinfectantes ms frecuentes en los programas de desinfeccin estos actan
sobre protenas y cidos nucleicos de los microorganismos, oxidando los grupos
SH entre otros de la tirosina. Este compuesto es activo sobre todas las bacterias,
incluyendo esporas y adems es efectivo en un amplio rango de temperaturas.
6.1. HIPOTESIS
Ho: No existe una reduccin del 90% de la carga microbiana despus de realizar
el procedimiento de limpieza y desinfeccin en cada una de las reas de trabajo
de los laboratorios
Hi: Existe una reduccin del 90% de la carga microbiana despus de realizar el
procedimiento de limpieza y desinfeccin en cada una de las reas de trabajo de
laboratorios
Hongos y Levaduras
Los datos obtenidos de los recuentos de mesfilos aerobios y de hongos y
levaduras correspondientes al antes y al despus del proceso de limpieza y
desinfeccin en cada una de las superficies as como tambin el porcentaje de
reduccin de cada uno de los laboratorios muestreados fueron graficados y se
presentan a continuacin.
AREAS DE MUESTREO
AREAS DE MUESTREO
A N T ES 39 28 33 54 49 11
D E S P UE S 3 3 4 3 3 0
%R E D UC C IO N 90 92 90 94 92 92
A R E A S D E M UE S T R E O
Porcentaje mnimo (90%) de la carga microbiana despus de realizar el
procedimiento de limpieza y desinfeccin.
ANTES 24 26 25 29 28 9
DESPUES 2 3 3 3 3 1
%REDUCCION 92 90 83 93 89 95
AREAS DE MUESTREO
A N T ES 30 29 62
D ESP UES 2 2 5
%R ED UC C ION 84 92 94
AREAS DE MUESTREO
AREAS DE MUESTREO
A N T ES 33 37 34 36
D E S P UE S 2 3 2 2
%R E D UC C IO N 94 90 93 91
AREAS DE MUESTREO
AREAS DE MUESTREO
A N T ES 31 50 47 34
D E S P UE S 2 3 5 3
%R E D UC C IO N 94 87 88 91
AREAS DE MUESTREO
AREAS DE MUESTREO
ANTES 25 33 64 69
DESPUES 2 3 4 5
%REDUCCION 94 90 93 91
AREAS DE MUESTREO
A N T ES 33 33 28 38
D E S P UE S 4 4 4 5
%R E D UC C IO N 90 86 86 87
AREAS DE MUESTREOS
MESOFILOS HONGOS Y
AREAS DE MUESTREO
AEROBIOS LEVADURAS
LAB 235 AREA 1 MESON 1,80713E-08 6,1912E-10
LAB 235 AREA 1 PISO 1,633E-07 2,48545E-09
LAB 235 AREA 2 MESON 5,02061E-08 3,88357E-10
LAB 235 AREA 2 PISO 6,12062E-07 4,21536E-12
LAB 124 MESON 1 1,20384E-14 1,70946E-06
LAB 124 MESON 2 1,76012E-10 4,99624E-07
LAB 124 MESON 3 0,086491998 2,13919E-08
LAB 124 PISO 0,224068366 8,93049E-05
LAB PARASITOLOGIA MESON 1 2,00326E-06 1,65222E-10
LAB PARASITOLOGIA MESON 2 0,029836754 8,17545E-08
LAB PARASITOLOGIA MESON 3 0,000446626 2,72204E-07
LAB PARASITOLOGIA PISO 2,05321E-09 2,87474E-06
LAB ALIMENTOS MESON 1 3,29462E-08 1,65785E-10
LAB ALIMENTOS MESON 2 1,7957E-07 9,2411E-09
LAB ALIMENTOS MESON 3 4,4528E-08 5,59963E-09
LAB ALIMENTOS MESON 4 2,09917E-08 4,2752E-08
LAB ALIMENTOS PISO 1 1,68037E-06 1,81837E-09
LAB ALIMENTOS PISO 2 1,10566E-08 2,92082E-10
LAB AMBIENTAL MESON 1 4,9229E-08 1,02143E-07
LAB AMBIENTAL MESON 2 6,14124E-10 6,57188E-10
LAB AMBIENTAL MESON 3 1,57957E-08 1,07874E-09
LAB AMBIENTAL PISO 1 0,003081058 3,22205E-07
LAB AMBIENTAL PISO 2 0,00662456 2,52883E-08
LAB AMBIENTAL CAMARA 4,37927E-12 1,72032E-18
LAB CITOMETRIA MESON 1 3,6851E-08 2,76418E-10
LAB CITOMETRIA MESON 2 7,7866E-10 1,20341E-09
LAB CITOMETRIA PISO 0,17974527 4,3608E-08
Segn los datos estadsticos obtenidos con la prueba de T student, se puede decir
que existen diferencias estadsticamente significativas para decir que el proceso
es aceptable, teniendo en cuenta que la mayora de resultados de las diferentes
reas muestreadas redujeron sus concentraciones, sin embargo al compararlo con
la hiptesis planteada (inhibicin del 90%) algunas reas no superan la prueba.
8. DISCUSION DE RESULTADOS
Utilizar los datos actuales para observar la relacin que existe entre otras
variables de inters que pudieron no tenerse en cuenta en el presente estudio,
como por ejemplo: la variedad de detergentes y desinfectantes utilizados, las
reas de muestreo hmedas o secas, la calidad de las muestras de
investigacin procesadas.
CARRASCAL Ana Karina, Burbano Rosero Mariela, Paez Morales Adriana. 2003,
Manual de laboratorio, microbiologa de alimentos, 1 edicin, Pontificia
Universidad Javeriana, facultad de ciencias, departamento de microbiologa,
Bogot D.C.
DELGADO Erika, 2006, Elaboracin y Documentacin del programa de limpieza y
desinfeccin de los laboratorios del departamento de microbiologa de la Pontificia
Universidad Javeriana, Facultad de ciencias, Bogota, 81pp.
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B1823AIL, Buenos Aires, Rep. Argentina
<http://209.85.165.104/search?q=cache:K7e24gxpeGIJ:www.workstorming.com/V
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Higiene y Desinfeccin en el Hospital. Anales. Suplemento 2.URL:
http://www.cfnavarra.es/salud/anales/textos/suple11/suple8.html (Consulta 2 de
Agosto 2008)