Anlisis Avanzado de Alimentos 2013

Problemas de Espectroscopa UV-Visible y Mtodos de

Calibracin

1) Analice los datos de la tabla que figura a continuacin. Es posible, en

funcin de la informacin que all se brinda, indicar en que zona del
espectro electromagntico absorbern luz estos compuestos?
Datos:
Colores de la radiacin visible
(nm) color
complemento
400-465 violeta verde amarillo
465-482 azul amarillo
482-487 azul verdoso anaranjado
487-493 azul verde rojo anaranjado
493-498 verde azulado rojo
498-530 verde rojo prpura
530-559 verde amarillento prpura rojizo
559-571 amarillo verde prpura
571-576 amarillo verdoso violeta
576-580 amarillo azul
580-587 anaranjado azul
amarillento
587-597 anaranjado azul verdoso
597-617 anaranjado rojizo azul verde
617-780 rojo azul verde

2) El contenido de hierro en bizcochos dulces se determina por

formacin del quelato
tris(1,10-fenantrenolina)Fe(II). Si una solucin estndar de 0.50 g/mL
presenta una absorbancia de 0.34 a 515 nm con una celda de 1.00 cm,
calcular los valores de %T y a para este sistema.

3) El mtodo de Contreras-Guzman y Strong permite determinar

vitamina E (Mprom =
416) en alimentos usando Cu+2/urea para el desarrollo de color. Una
solucin de vitamina
E (1.2x10-5 M) presenta una absorbancia de 0.445 a 478 nm, usando una
celda de 10 mm.
Qu valor de a (coeficiente de extincin) usara si la concentracin se
debe expresar en g/mL?

4) Los compuestos A y B absorben en la regin UV del espectro. La

sustancia A tiene un mximo a 267 nm (a=175 l g -1cm-1) y un mnimo a
312 nm (a=12.6 l g-1cm-1). La sustancia B exhibe un mximo de
absorcin a 312 nm (a=186 l g-1cm-1) y no absorbe a 267 nm. Una
 Anlisis Avanzado de Alimentos 2013

solucin que contiene los dos componentes tiene una absorbancia de

0.726 y 0.544 a 267 y 312 nm respectivamente cuando se utilizan
celdas de 1 cm de camino ptico. Cules son las concentraciones de A
y B en mg/l?

5) Calcular las incgnitas (X1 a X6) de la tabla si las absorbancias de las

soluciones 1 a 4 se realizaron en celdas con camino ptico de 1.0 cm y
los compuestos i y j cumplen la ley de Beer:

Solucin [i] M [j] M A (394 A (502 A (610

nm) nm) nm)
1 2,0 10-4 0 0,973 0,364 0,102
2 0 3,0 10-4 0,084 0,546 1,076
3 X1 X2 0,776 X3 0,934
4 X4 X5 0,812 0,602 X6

6) La concentracin mxima del herbicida 3-aminotriazol (M = 84)

presente en alimentos es 0.05 ppm. Dicho compuesto se determina
mediante una reaccin colorimtrica (Mtodo de Galoux). A partir de 3-
aminotriazol puro (comercial) se construy la siguiente curva de
calibracin empleando una celda de 1 cm:

a. Determinar la concentracin de 3-aminotriazol en un alimento P

sabiendo que la absorbancia es igual a 0.047.

b. Obtenga el valor del coeficiente de extincin a partir de la curva de

calibracin.

7) Un procedimiento normal para la determinacin de protenas es el

ensayo de colorante de Bradford. Segn este mtodo, la protena se
trata con un colorante que, al unirse a ella, cambia su color de pardo a
azul. La intensidad del color azul (medido por la absorbancia de la luz a
una longitud de onda) es proporcional a la cantidad de protena
presente.
a.- De acuerdo a los datos obtenidos con una protena patrn, obtener la
ecuacin de la recta.
 Anlisis Avanzado de Alimentos 2013

b. Si una muestra de protena arroj una lectura de A = 0.973, cuntos

g de protena habr presentes en la muestra?

8) Se desea determinar el contenido de protenas de una muestra

incgnita por medio de un mtodo espectrofotomtrico. Para ello se
realiza una curva de calibracin empleando una protena de referencia
como patrn. Se obtuvieron los siguientes datos:

Protena A
estndar, mg
0 0.100
5 0.188
10 0.272
15 0.392
20 0.430
25 0.496

a. Grafique la curva de calibracin, indique el rango de respuesta lineal

del mtodo y obtenga la ecuacin de la recta.

b. Si su muestra arroj una absorbancia de 0.506 qu concentracin de

protena tiene la muestra?

9) Un laboratorio de anlisis de alimentos desea poner a punto una

tcnica para determinar cido ascrbico en jugos de naranja. Para ello
disponen de los siguientes datos:

-Se determin la concentracin de cido ascrbico en un jugo de

naranja comercial utilizando el una tira comercial. En este mtodo
el cido ascrbico reduce el cido molibdofosfrico (amarillo) a
azul de fosfomolibdeno. La muestra de jugo se decolor
empleando celulosa microcristalina y se realiz una dilucin 1/10
para entrar en el rango de concentraciones de este ensayo.

Se compar visualmente el color de la tira de ensayo de la muestra con

la escala colorimtrica que provee el kit y este fue similar a un color
correspondiente a concentraciones entre 100 y 200 mg/L de cido
ascrbico (aproximadamente 150 mg/L).
- Se obtuvo un espectro de absorcin del azul de fosfomolibdeno.
 Anlisis Avanzado de Alimentos 2013

300 400 500 600 700 800

Longitud de onda, nm
En base a los datos disponibles y considerando que el laboratorio
realizar la misma preparacin de la muestra y usar la misma reaccin
qumica que la empleada en el mtodo rpido:
a. Elija la longitud de onda adecuada para realizar la curva de
calibracin y justifique.
b. Luego de realizar la curva de calibracin a la longitud de onda
ptima empleando una cubeta de 1cm, se obtuvo un coeficiente
de extincin para el azul de fosfomolibdeno de 0,003 L/(cm mg).
Se analiz la misma muestra de jugo de naranja que se haba
empleado para el mtodo rpido y se obtuvo un valor de
absorbancia de 0,457 y de 0,02 para el blanco de reactivos.
Calcule la concentracin de cido ascrbico en el jugo.

10) La constante de disociacin de un indicador cido-base tiene un

valor de 5.4110-7. A continuacin se indican los datos de absorbancia
(medidos en una celda de 1.0 cm) para soluciones 5.010 -4 M del
indicador en medios fuertemente cido y fuertemente alcalino:
 Anlisis Avanzado de Alimentos 2013

a) Dibujar los espectros de absorcin de las formas cida y bsica del

indicador.
b) Predecir los colores de las dos formas del indicador.
c) Calcular la absorbancia de una solucin 1.010-4 M del indicador en su
forma alcalina a 585nm medida en una celda de 2.0 cm.