Un chip de cncer de titania de rutilo de monocapa (SAM) monocapa (Nano-patrn) para anlisis

de cncer directo rpido, de bajo costo y altamente sensible en MALDI-MS

Resumen

Desarrollamos un chip de cncer mediante el nano-patrn de una superficie de titanio SAM

altamente sensible capaz de capturar y detectar concentraciones tan bajas como 10 clulas
cancerosas / mL del ambiente mediante la Desorcin por Lser Asistida por Matriz y la
Espectrometra de Masa de Tiempo de Vuelo de Ionizacin (MALDI-TOF MS) . El enfoque actual
evade cualquier forma de pretratamiento y preparacin de muestras; Es un ahorro de tiempo y no
requiere la (costosa) placa convencional MALDI. El costo del titular de la meta de aluminio (Al)
para el hogar, en el que cargamos los chips de cncer para el anlisis MALDI TOF MS, es de unos 60
USD. Mientras que la placa convencional de acero inoxidable MALDI objetivo es ms de 700 USD.
La superficie SAM fue una plataforma efectiva que condujo a la deteccin directa de MALDI-MS en
clulas de clulas cancerosas. Comparamos la funcionalidad de este chip con las superficies de
titanio sin modificar y las superficies de titanio trmicamente oxidado (TO).

La concentracin ms baja detectable del chip TO fue de 103 clulas / ml, mientras que la
concentracin ms baja detectable de los chips de titanio control o no modificados fue de 106
clulas / ml. En comparacin con la superficie de control, el chip de cncer SAM mostr 100.000
veces de sensibilidad mejorada y comparado con el chip TO, 1000 veces de mayor sensibilidad. La
alta sensibilidad de las superficies SAM se atribuye a la presencia de la SAM rutilo, rugosidad
superficial y humectabilidad superficial como lo confirman AFM, XRD, microscopio de ngulo de
contacto y FE-SEM. Este estudio abre una nueva va para la potente aplicacin del chip de cncer
SAM para el diagnstico directo de cncer por MALDI-TOF MS en un futuro prximo.

1. Introduccin

Desde su descubrimiento por William Gregor en 1791, el titanio ha ampliado sus horizontes en
mltiples dominios. El titanio se alea con hierro, aluminio, vanadio, molibdeno, con el fin de
producir aleaciones ligeras fuertes para uso en aeroespacio (motores a reaccin, misiles y naves
espaciales), militares, industriales (qumicos y petroqumicos, plantas de desalinizacin, pulpa y
papel ), Automotriz, agroalimentaria y para aplicaciones tales como prtesis mdicas, implantes
ortopdicos, instrumentos y archivos dentales y endodnticos, implantes dentales, artculos
deportivos, joyera, telfonos mviles. Los materiales utilizados para aplicaciones biomdicas
cubren un amplio espectro y deben exhibir propiedades especficas. Uno de los requisitos vitales
para la eleccin de un material de implante es su biocompatibilidad y propiedades de resistencia a
la corrosin. Los principales biomateriales metlicos utilizados con frecuencia incluyen, aceros
inoxidables, aleacin de cobalto, titanio y aleaciones de titanio [1]. La biocompatibilidad del titanio
se determina con la presencia de la pelcula de xido de titanio. Por lo tanto, los investigadores
han centrado su atencin en el desarrollo de una pelcula de xido estable en las superficies de
titanio para aumentar su biocompatibilidad [2 - 4].
Aunque la pelcula de xido puede jugar un papel directo o indirecto en el aumento de la
biocompatibilidad, es posible que los factores tales como la aspereza, la funcionalizacin del grupo
hidroxilo, el tipo de xido, la hidrofobicidad / hidrofilicidad puedan desempear un papel
igualmente indiscutible en este fenmeno. La biocompatibilidad del titanio tiene un lado oscuro
cuando se utiliza como material condensador en las plantas de energa y en las industrias porque
es propenso a la colonizacin bacteriana y microbiana (biofilm) en su superficie, dando lugar a un
problema llamado biofouling. Hemos [6 - 9] han informado anteriormente de la propiedad
microbiana de ensuciamiento extensiva de superficies de titanio y su control efectivo mediante la
modulacin de las propiedades de xido.

MALDI tcnica fue introducido inicialmente por Hillenkamp [10] y luego rpidamente se
convierten en una ideal (suave) la tcnica de ionizacin para el anlisis de espectrometra de
masas de biomolculas. El desarrollo de plataformas de MALDI-MS funcionalizadas para
plataformas para analizar analitos como fosfopptidos, pptidos, biomolculas y cidos nucleicos
ha sido generosamente reportado. Brockman y Orlando, utiliz un anticuerpo, lectina o receptor
unido a las superficies de las placas MALDI para la sonda de intercambio de catin dbil de
enfoque de extraccin en fase slida / preconcentracin [11]. Navare et al., Utilizaron pelculas de
polmero como sondas MALDI [12] y Wang et al., Inmunoglobulinas inmovilizadas [13]. Neubert et
al. Utiliza un polmero de captura de afinidad [14]. Koopman y Blackburn, utiliz un aptmero de
ADN unido covalentemente a la superficie de un portaobjetos de vidrio para la deteccin
ultrasensible de protenas hidrfobas [15]. McComb, utilizado sillicos DIOS chip molculas y
Trauger et al., Un polmero pelcula delgada [16 - 18]. Torta et al. Desarroll una pelcula de TiO2
nanoestructurada recubierta de placas de acero inoxidable para enriquecimiento fosfopeptdico
[19]. Wang y Bruening [20] usaron obleas de silicio. Todos estos autores utilizaron diversas
plataformas para la captura selectiva y sensible de biomolculas para la deteccin directa de chip
MALDI-MS. En el siguiente artculo nos centramos en describir la utilizacin positiva de esta
propiedad biocompatible inherente exhibida por las superficies de titanio para el desarrollo de un
chip de cncer basado en titanio para la deteccin directa en chip de clulas de cncer usando
MALDI-MS. Los chips de cncer se modificaron superficialmente para mejorar la capacidad de
deteccin por oxidacin trmica y por nano patrones. Este trabajo reporta y discute las razones
por las que las superficies diseadas muestran una mayor biocompatibilidad

2. Materiales y mtodos

2.1. Material

Se adquiri lmina de titanio (espesor de 0,5 mm, base de metal al 99%) de Alfa Aesar, Johnson
Mathey Company, EE.UU. Se adquiri a Sigma Aldrich, Alemania, cido ntrico (65%, calidad de
reactivo) de Scharlau chemie, Espaa y cido fluorhdrico (48% en peso en agua, base de metal
traza). Se adquiri acetona (99,99% de calidad analtica) de B.K baker, Alemania. Se utiliz agua
doblemente destilada, purificada por un sistema de reactivos Milli-Q (Millipore, Milliford, MA,
EE.UU.) para cada experimento.