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Enzimología Clínica PDF
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Bioqumica Tema 7: Enzimas. Enzimologa clnica Ao: 2013
4. Especificidad:
Las enzimas son muy especficas para el sustrato de la reaccin que catalizan.
Interactan con una o muy pocas molculas y catalizan nicamente un tipo de reaccin. Esta
especificidad le permite distinguir con gran selectividad entre diferentes sustratos y est
determinada por la conformacin del sitio activo. El sitio activo tiene una forma que se
asemeja al sustrato, por lo que el sustrato correcto se ajusta perfectamente en el sitio activo
(Figura 4).
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La actividad enzimtica puede ser regulada, esto quiere decir que dependiendo de los
requerimientos metablicos, las enzimas son activadas o inhibidas, para acelerar o disminuir
la velocidad con la que catalizan la reaccin, respondiendo as a las diferentes necesidades de
sus productos en la clula. La regulacin ms comn es modificando la concentracin de su
substrato.
Localizacin celular:
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citoplasma y 50% en mitocondria). Otras enzimas son solo mitocondriales, como por
ejemplo, la glutamato deshidrogenasa.
Esta compartamentalizacin ayuda a aislar los sustratos o los productos de la
reaccin, de tal forma que no hay competencia de reacciones. De esta manera, se provee un
medio favorable para la reaccin, de tal forma que es posible localizar diferentes etapas del
metabolismo en diferentes organelas, haciendo de la clula una entidad organizada en donde
simultneamente funcionan miles de enzimas.
Isoenzimas:
Las enzimas suelen designarse por el agregado del sufijo asa al nombre del sustrato
o de la reaccin que catalizan. Ejemplo: la ureasa cataliza la hidrlisis de la urea, la amilasa la
hidrlisis del almidn, las proteasas la hidrlisis de las protenas, etc.
Aunque el sufijo asa sigue en uso, en la actualidad los nombres de las enzimas se
enfocan en el tipo de reaccin catalizada. As, la Unin Internacional de Bioqumica y
Biologa Molecular (IUBMB) cre un sistema de nomenclatura basado en las reacciones que
catalizan. En base a esto, las enzimas se clasifican en 6 clases principales (Tabla 3).
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4. Liasas: catalizan reacciones en las que se eliminan grupos (CO2, H2O y NH3) para
formar un doble enlace o aadir un doble enlace (Ej: descarboxilasa cuando se elimina CO2,
deshidratasa cuando se elimina H2O y aldolasas cuando se eliminan grupo s aldehdos).
6. Ligasas o sintetasas: estas enzimas forman uniones covalentes entre dos grupos
compuestos, la reaccin es endergnica y requiere la ruptura de molculas de ATP que
proporcionen energa. Estas enzimas catalizan la unin de dos molculas (Ej. glutamina
sintetasa)
a- Las enzimas del plasma especficas: Son las enzimas que actan en el plasma.
Estas enzimas son sintetizadas en determinados tejidos y son vertidas activamente a la
sangre, donde encuentran su sustrato y pueden actuar. A este grupo pertenecen las enzimas
del complejo protrombnico, lipoprotenlipasa, plasmingeno y pseudocolinesterasa. Este
grupo de enzimas son sintetizadas en el hepatocito y son muy activas en el plasma. La
determinacin de la actividad de estas enzimas tiene inters clnico en la evaluacin tanto de
la funcin propia de la enzima como de la funcin del tejido que la sintetiza. Por ejemplo,
una disminucin en su actividad (la cual es normalmente alta en el suero) indica una
alteracin en su sntesis, y como la mayora son producidas en el hgado, esto nos estara
indicando una alteracin de la funcionalidad heptica.
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2. Enzimas celulares del metabolismo intermedio: Son todas las enzimas que tienen
su lugar de accin dentro de la misma clula que las sintetiza, no tienen lugar de accin en el
plasma. La membrana plasmtica normal no permite el paso de enzimas a travs de ella, por
lo tanto estas se mantienen dentro de la clula y solo se encuentran en cantidades muy
reducidas en el espacio intersticial y plasma sanguneo. Una alteracin muy intensa de la
membrana puede determinar la aparicin de estas enzimas en plasma (procesos
inflamatorios serios, falta de irrigacin sangunea). Si la clula es alterada la membrana se
deteriora y si el proceso es grave, se produce su destruccin. En estos casos, el contenido
celular, incluidas las enzimas, se libera al espacio intersticial y de all llegan a la sangre.
Cuanto mayor es el nmero de clulas daadas, mayor nivel de enzimas se encontrar en el
plasma. Algunas de las enzimas de este grupo son: aspartato aminotransferasa (AST) o
glutmico-oxalactico transaminasa (GOT), alanina amino transferasa (ALT) o glutmico
pirvico transaminasa (GPT), lactato deshidrogenasa (LDH), creatn fosfoquinasa (CK),
amilasa, -glutamiltranspeptidasa (GGT), 5nucleotidasa y aldolasa (ALS). A veces la
alteracin consiste en un simple cambio a nivel de la membrana celular, que posibilita la
salida de aquellas enzimas presentes en el citoplasma de la clula. Otras veces, determinadas
estructuras intracelulares, como las mitocondrias por ejemplo, resultan daadas y permiten
la salida de enzimas que tienen esa localizacin. Cuanto mayor sea el rea lesionada y ms
intensa la agresin, ms debe esperarse el incremento de la actividad enzimtica en el suero.
Aunque desde el punto de vista biolgico son muchas las enzimas importantes, el inters
clnico se centra en el estudio de aquellas cuyas variaciones son indicadoras de enfermedad o
de alteraciones funcionales.
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Al producirse el dao o la muerte celular, las molculas pequeas son las primeras en
liberarse y escapar a la circulacin. Posteriormente se liberan las macromolculas, entre las
que se encuentran las enzimas, y finalmente todo el contenido celular. La liberacin y
velocidad de aparicin de las enzimas en la circulacin depende de la localizacin
intracelular y de las caractersticas del rgano o tejido daado. La aparicin o aumento en
suero de las enzimas del citosol refleja solo un dao de la membrana, mientras que el
aumento de las enzimas localizadas en organelas, aporta informacin acerca de procesos
destructivos y necrosis celular.
La aparicin de las enzimas en el suero depende de la forma en que logren el paso
desde el lquido intersticial a la sangre, lo que vara de un tejido a otro. Por ejemplo, el
hgado es un rgano altamente vascularizado, con capilares muy permeables por lo que
permite el paso directo de las enzimas a la sangre, mientras que en el caso del msculo
esqueltico con capilares muy poco permeables, las enzimas pasan a la sangre a travs de la
linfa.
Adems de conocer la localizacin intracelular de las enzimas y su paso a la sangre,
es importante tambin cmo se realiza el proceso de clarificacin de las enzimas que llegan al
torrente circulatorio.
El peso molecular de la mayora de las enzimas impide que puedan ser filtradas por
el glomrulo en los riones sanos, por lo que la excrecin a travs de la orina no es la va
principal de eliminacin de las enzimas presentes en el plasma. Una excepcin la constituye
la amilasa de gran valor en las enfermedades pancreticas, que por su pequeo peso
molecular (40 kDa) atraviesa los glomrulos renales y aumenta su excrecin por la orina.
En definitiva, las vas de eliminacin de enzimas sricas son:
a- Eliminacin renal: se cumple para aquellas de bajo peso molecular. Ej: amilasa y
algunas fosfatasas.
c- Para algunas enzimas existe recaptacin por parte de los tejidos convalecientes, al
restablecerse anatmica y fisiolgicamente. Esta pequesima parte de las enzimas
previamente liberadas sera utilizada, no para su funcin primitiva, sino como integrante de
un pool (reservorio) de aminocidos.
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Fosfatasas:
Fosfatasa alcalina: se encuentra aumentada en las enfermedades hepticas. Los
nios en crecimiento y las mujeres embarazadas en el tercer trimestre presentan valores
fisiolgicamente elevados de fosfatasa alcalina en suero. La determinacin de la fosfatasa
alcalina en suero es til para reconocer las enfermedades seas, sobre todo la ostetis
deformante, hipoparatiroidismo y neoplasias seas. La elevacin de la fosfatasa alcalina
srica en algunas enfermedades hepticas puede ser distinguida mediante otras pruebas de
laboratorio y por sus rasgos clnicos.
Fosfatasa cida: se observan valores elevados en pacientes con carcinoma prosttico.
En la mayora de los casos, los cambios que se observan en los niveles de actividad o
la concentracin de las enzimas del plasma permiten inferir la localizacin y la naturaleza de
los cambios patolgicos que se producen en determinados tejidos del cuerpo.
Sin embargo, hay que tener en cuenta que muchos procesos fisiolgicos normales
pueden provocar aumentos en el suero de algunas enzimas, que no se relacionan con una
enfermedad. Son ejemplo de ello, el aumento en los niveles y actividad de fosfatasa alcalina
por los osteoblastos productores de hueso en los nios en estado de crecimiento, lo que debe
diferenciarse del aumento por actividad osteoblstica en varias enfermedades seas.
Las enfermedades del corazn, hgado y pncreas son las que con mayor frecuencia
aparecen en la poblacin, por ello la importancia de la aplicacin de la enzimologa al
diagnstico y evolucin de estas enfermedades.
El trmino infarto agudo de miocardio (IAM) se refiere a la muerte del tejido cardiaco
resultante de la ausencia del flujo sanguneo a las clulas musculares del corazn (Figura
6). Usualmente implica un sndrome clnico clsico, caracterizado por el comienzo sbito de
los sntomas tpicos (dolor opresivo y constante en el pecho que irradia a los brazos, sudor
fro, dolor que llega al cuello y mandbula, dificultad respiratoria), seguidos de alteraciones
electrocardiogrficas e incrementos transitorios de los niveles sricos de las enzimas
liberadas por el miocardio. En dicho sndrome, la oclusin trombtica sbita y total de una
arteria coronaria, causa un infarto que generalmente compromete todo el espesor del
segmento de la pared ventricular irrigado por la arteria comprometida.
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Figura 7: Perfil plasmtico tpico de las enzimas liberadas durante el infarto agudo de
miocardio.
es un indicador muy sensible pero poco especifico de infarto del miocardio, pues algunas
entidades pueden producir incrementos plasmticos de LDH, como sucede en los pacientes
con hemlisis, anemia megaloblstica, leucemia, enfermedad o congestin heptica,
enfermedad renal, tumores, embolismo pulmonar, miocarditis, enfermedades del msculo
esqueltico. Existen 5 isoenzimas de LDH (numeradas de 1 a 5 de acuerdo con su capacidad
de migracin electrofortica), cuya medicin puede mejorar la capacidad diagnstica del
estudio, pues la LDH1 se encuentra principalmente en el corazn, mientras que la LDH4 y la
LDH5 estn en el hgado y el msculo esqueltico. La elevacin de LDH1 precede a la
elevacin de LDH total en aproximadamente 8 horas. Como la hemlisis puede tambin
incrementar los niveles de esta isoenzima, se debe tener mucho cuidado en el manejo de la
sangre al obtener la muestra para anlisis en el laboratorio. La medicin de las isoenzimas de
LDH puede ser muy til cuando se espera que los niveles de CK-MB se encuentren bajos
(infartos de 2 a 4 das de evolucin), pero la titulacin rutinaria de estas isoenzimas no se
justifica en todos los pacientes.
2. Glutmico-oxalactico transaminasa o aspartato aminotransferasa (GOT o
AST): los niveles plasmticos de esta enzima se empiezan a elevar a las 8 a 12 horas del
infarto y alcanzan un pico a las 24-48 horas, normalizndose en 3-4 das.
3. Creatn fosfoquinasa (CK): es una enzima dimrica formada por monmeros que
pueden ser de dos tipos: M y B. Por lo tanto la CK tiene 3 isoenzimas: CK-MM o CK3
(localizacin muscular), CK-MB o CK2 (localizacin cardaca) y CK-BB o CK1 (localizacin
cerebral) (Tabla 7). Se utiliza la medicin en suero de la isoenzima CK-MB como marcador
de IAM.
Creatn fosfoquinasa
Tipo Composicin Localizacin
CK1 BB Cerebro
CK2 MB Corazn
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compuestos que deben ser eliminados de nuestro organismo. Contiene un gran nmero de
enzimas, pero las que tienen mayor inters clnico son las transaminasas, la fosfatasa
alcalina, la -glutamil transpeptidasa y la 5-nucleotidasa.
3. Fosfatasa alcalina: La FAL srica tiene varios orgenes (hgado, rin, placenta,
intestino, huesos, leucocitos), aunque las fuentes ms importantes son el hgado, los huesos y
el intestino. Durante el crecimiento, los niveles sricos son altos debido al aumento dela
fraccin sea, que traduce la actividad osteoblstica en el hueso. Lo mismo ocurre durante el
embarazo, sobre todo en el tercer trimestre, en el que las elevaciones se deben a la FAL de
origen placentario. La FAL tiene tres isoenzimas, una de origen placentario, una intestinal y
una no placentaria/no intestinal. El aumento de la FAL de origen heptico revela
obstruccin biliar, con ictericia (color amarillento de la piel y mucosas, producidas por el
aumento de bilirrubina por encima de 2 mg/dl) o sin ella, o la existencia de un proceso
heptico expansivo, infiltrativo o de naturaleza granulomatosa. Su sntesis est regulada por
la presencia de sales biliares; un aumento de la concentracin intracelular de sales biliares
estimula la sntesis de FAL y por esta razn se elevan en la colestasia intra o extracelular.
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La Pancreatitis Aguda (PA) se define como inflamacin del pncreas y del tejido peri-
pancretico en forma aguda. Las principales causas de pancreatitis son las enfermedades de
las vas biliares (obstruccin del coldoco por clculos biliares) y el alcoholismo crnico. Es
importante distinguir entre su forma leve y grave. La primera se caracteriza por la presencia
de inflamacin local que se traduce en edema de la glndula y con mnima repercusin
sistmica. En la pancreatitis aguda grave, en cambio, la glndula puede tener necrosis,
formaciones de pseudoquistes o abscesos, y muchas veces aparece falla orgnica con
repercusin sistmica importante.
pancreticas a la circulacin entre las que se encuentran el tripsingeno-2 que puede ser
valorado en el suero y la orina.
intestinales agudos.
ENZIMURIA
La utilizacin de las enzimas en la orina es limitada ya que debe asegurarse que su presencia
no procede de eritrocitos, leucocitos, clulas epiteliales y microorganismos.
Las enzimas presentes en la orina pueden tener por tanto diferentes orgenes:
- Procedentes del rin por destruccin celular.
- Reacciones de rechazo al trasplante de rin.
- En un rin sano, su presencia en la orina est limitada por los pesos moleculares. Las
protenas con un peso molecular menor de 60 kDa pueden ser filtradas por el rin y se
excretan en la orina.
La presencia de enzimas en la orina puede servir tambin como criterio de evolucin en las
afecciones renales agudas.
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