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I.

- INTRODUCCIN
Bacterifago, tambin llamado virus bacteriano o, abreviadamente, fago, virus
capaz de infectar las bacterias. Son virus que fueron descubiertos de forma
independiente por los microbilogos Frederick W. Twort en 1915 y Flix
dHrelle en 1917. Siendo esta la ltima clase principal de virus en ser
descubierta; este tipo de virus constituye un sistema simple y de gran
abundancia en la naturaleza. En esencia, los bacterifagos se encuentran de
manera ubicua en el ambiente y en el lugar en que se encuentre su clula
husped. Los bacterifagos lticos son virus que infectan y se multiplican en la
bacteria, llevando a la destruccin la clula hospedera con la liberacin de
bacterifagos que re-infectan otras bacterias.

Los bacterifagos fueron descubiertos en las primeras dcadas del siglo XX,
pero su uso clnico no se extendi en pases occidentales sino hasta la dcada
del 80, debido a diferentes razones. En 1980, de nuevo se empezaron a usar
los bacterifagos en animales de experimentacin en los pases occidentales.
En este sentido, los trabajos de Smith y Huggins en la dcada del 80 se
pueden considerar como un punto de inflexin, al retomar de nuevo la
importancia de los bacterifagos en la terapia animal, ya que de estos se
haban obtenido resultados muy esperanzadores. Los bacterifagos se
componen de un solo tipo de cido nucleico (ARN o ADN) encapsulado por una
cubierta proteica que exhibe los elementos estructurales necesarios para una
infeccin especfica (Dini, 2011). Algunos presentan una envoltura lipdica que
se deriva de la clula hospedera.

La conformacin y organizacin proteica de sus cpsides les confiere la


habilidad de permanecer viables por largos perodos de tiempo en el ambiente
en condiciones adversas, como la exposicin a ADN-asas, variaciones de pH y
temperatura. Los bacterifagos han sido tomados como modelo para el estudio
de la gentica bacteriana y los mecanismos de control de la expresin gnica,
debido a que los hospederos bacterianos son fcilmente cultivables y
manejables en el laboratorio, se emplean actualmente como vectores de
clonacin en el campo de la ingeniera gentica, as mismo su estudio tiene
aplicaciones importantes en la medicina y otras ramas, en concreto en la
comprensin de las infecciones virales, defectos genticos, problemas de
desarrollo, causas del cncer y la resistencia de las bacterias a los
antibiticos(Reynolds, 2002). Se consider importante el uso de aguas servidas
para este estudio debido a su composicin o naturaleza. Las aguas servidas
consisten de dos componentes: un efluente lquido y un constituyente slido en
el que se asocian diferentes tipos de materiales particulados como sedimentos
de residuos biolgicos, lodo y otras sustancias. A este tipo de material se
asocian microorganismos como bacterias, hongos y virus, los cuales tienen
como sustrato los contenidos de este tipo de aguas (Lindqvist, 1998).

Debido a que, por el grado de contaminacin que presentan, en las aguas


residuales se encuentra gran cantidad de bacterias de diferentes especies y se
espera encontrar tambin los bacterifagos que infectan estas mismas
bacterias, ya que estos ltimos constituyen un control biolgico para las
colonias bacterianas.

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II.- RESULTADOS:
No hubo presencia de contaminacin en las placas, fue un
aislamiento puro de Pseudomonas aureginosa.
Despus de 72 horas, observamos la presencia de calva (crculo
amarillo) aproximadamente de 7 cm, formado por la accin de
los virus lticos, en la prueba de lisis.
Aislamos bacterifagos en nuestra suspensin filtrada.

III.- INTERPRETACIN:
Un fago es ante todo un parsito bacteriano que puede persistir por s mismo
pero es incapaz de desarrollarse y reproducirse fuera de una bacteria. Los
genes presentes en los fagos codifican para una diversidad de protenas, sin
embargo todos ellos necesitan de la maquinaria de su clula husped como
ribosomas, factores para sntesis de protenas y sistemas de produccin de
energa para poder replicarse. En otras palabras, un fago slo puede crecer en
una bacteria metablicamente activa como los es un cultivo joven de 6 9 h de
Pseudomonas aureginosa (Dulbecco, 1990), infectan y se multiplican en la
bacteria, llevando a la destruccin la clula hospedera con la liberacin de
bacterifagos, cumpliendo su cliclo de vida como un fago ltico, por lo que
observamos la formacin de una placa ltica o calva. La formacin de placas
lticas se debe a que cada virus infecta una bacteria, se multiplica y libera
varios centenares de virus nuevos. Estos virus recin producidos infectan otras
bacterias en la vencidad inmediata, y se producen ms virus nuevos. Despus
de varios ciclos de multiplicacin viral todas las bacterias de la zona que rodea
al virus original estn destruidas. Esto produjo diversos claros, o placas,
visibles en el cultivo bacteriano sobre la superficie del agar. En teora cada
placa corresponde a un nico virus de la suspensin inicial

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III.- DISCUSIN:
En la publicacin Tcnica para aislamiento de bacterifagos especficos
para E.coli DH5 a partir de aguas residuales (Gaviria G. et al. 2012) y en
la tesis doctoral Aislamiento y caracterizacin molecular de bacterifagos
de bacterias enteropatgenas para biocontrol de enfermedades
transmitidas por alimentos (ETA) (Dini C. et a. 2011) en la metodologa de
aislamiento del fago emplearon una tcnica de enriquecimiento previo al
sembrado de placa vertida a diferencia de ellos en nuestro trabajo no se
realiz un enriquecimiento del fago por lo que probablemente se observ
una sola placa de lisis.
En la metodologa utilizada por Gaviria G. se emple un fago control (T4)
para la comparacin con los fagos encontrados en las aguas residuales,
en la metodologa empleada para nuestro trabajo como control solo se
utiliz a la cepa sembrada en caldo (TSB) y en el sembrado por
incorporacin de placa vertida no se utiliz control.

IV.- CONCLUSIN:
La muestra tomada de aguas servidas del DREN 1000- playa Pimentel,
presenta bacterifagos especficos para la cepa trabajada, por lo que se
demuestra en los resultados obtenidos.
La presencia de bacterifagos en aguas servidas se explica,
adems, por el hecho de que en el agua dulce, que constituye su base

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primaria, la abundancia de bacterifagos es de 10 a 20 veces mayor que
la de la clula hospedera
Por la presencia de calva en la placa, afirmamos que hemos obtenido un
bacterifago ltico, por lo cual aislamos en nuestra suspensin filtrada
fagos, ya que esta fue utilizada para la prueba de lisis.

V.- REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS


Dini C. Aislamiento y caracterizacin molecular de bacterifagos de
bacterias enteropatgenas para biocontrol de enfermedades
transmitidas por alimentos (ETA) [Tesis para optar el grado de Doctor].
Buenos Aires: Universidad Nacional de la Plata; 2011.
Dulbecco R, Ginsberg H. Parte 5: Virologa. En: Tratado de
Microbiologa. 3ra. Edicin. Mxico: Salvat Mexicana de Ediciones S.A,
1990.
Lindqvist H. Bacteriophage and gene transfer. APMIS 1998; (Suppl
84):15-8.
Reynolds, K. Tratamiento de aguas residuales en Latinoamrica. Agua
Latinoamerica 2002; 12:1-4.
Hernndez A. Aislamiento, caracterizacin y deteccin precoz de
bacterifagos de Streptococcus thermophilus en la industria Lctea.
[Tesis doctorado en ciencias]. Oviedo: Universidad de Oviedo; 2007.
Gaviria G. Tcnica para aislamiento de bacterifagos especficos para
E.coli DH5 a partir de aguas residuales. MVZ Cordoba. 2012: 17(1).
2852-2860.

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VI. - ANEXOS

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