UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIAPAS

Facultad De Ciencias Qumicas

Campus IV
Tapachula, Chiapas.

LIC. QUIMICO FARMACOBIOLOGO

MATERIA:
Laboratorio De Inmunologa I.

CATEDRTICA:
Dra. Marisol Espinoza Ruiz.

PRCTICA No. 1:
Manejo e inmunizacin de animales.

EQUIPO #6:

SEMESTRE:
6

GRUPO:
A
 NDICE

MARCO TERICO:....................................................................1

OBJETIVOS:.............................................................................. 1

METODOLOGA........................................................................1

OBSERVACIONES:....................................................................2

RESULTADOS:..........................................................................2

DISCUSIN:.............................................................................3

CONCLUSIN:..........................................................................3

BIBLIOGRAFA:.........................................................................3
 MARCO TERICO:

DOSIS DE ANTGENO Y MTODO DE ADMINISTRACIN 1. Dosis: hay una

dosis ptima para cada antgeno y el protocolo de administracin tambin
influye. 2. Va de administracin: Determina a qu rgano linfoide ir a parar el
antgeno, y tambin influye en la naturaleza de la respuesta inmune. 3.
ADYUVANTES: Son ciertas sustancias que cuando se mezclan y se inoculan con
un antgeno mejoran e intensifican la respuesta inmune frente a l. Hay cuatro
categoras: Adyuvantes oleosos: Adyuvante de Freund (completo e
incompleto). Sales minerales. Polmeros sintticos. Adyuvantes naturales:
producidos por hongos, parsitos y bacterias. El mecanismo de accin de los
adyuvantes se puede deber a varios efectos: Aumentan la persistencia del
antgeno completo. Incrementan la dispersin del antgeno desde el lugar de
inoculacin hacia los rganos linfoides. Estimulan formacin de granulomas.
Algunos adyuvantes estimulan la proliferacin inespecfica de linfocitos.
Apuntes de Inmunologa. Curso 2009-2010.Tema 5 4 ANTGENOS TIMO-
DEPENDIENTES Y TIMO-INDEPENDIENTES Son los tipos de antgeno en funcin
de la necesidad de la intervencin de los linfocitos Th para la produccin de
anticuerpos por los linfocitos B. Antgenos T-dependientes La estimulacin de
los linfocitos B depende de la activacin de los linfocitos Th y su
coestimulacin. De naturaleza proteca. Presentan en su molcula pocas
copias de muchos epitopos diferentes. La coestimulacin por LTh induce
cambio de isotipo en las Ig y memoria inmunolgica. Inducen respuestas
inmunes secundarias. Antgenos T-independientes Estimulan directamente a
los LB. Son polmeros que presentan los mismos epitopos repetitivos:
lipopolisacridos, polisacridos, acidos nuclecos. Generalmente son ms
resistentes a la degradacin. Estimulan muy dbilmente a los linfocitos T.
La respuesta primaria ms dbil que la producida por los antgenos
Tdependientes, y alcanza antes su nivel mximo. No producen cambio de
isotipo de Ig No inducen memoria inmunolgica ni respuesta inmune
secundaria Los T-independientes de clase 1 (TI-1) inducen a altas
concentraciones una activacin policlonal de LB maduros e inmaduros
(mitgenos policlonales de LB), independientemente de su especificidad. Los
T-independientes de clase 2 (TI-2) inducen una respuesta especfica por
entrecruzamiento de BCR por su unin con epitopos repetidos y activan LB
maduros. Respuesta monoclonal. Epitopos repetitivos TI-2 Apuntes de
Inmunologa. Curso 2009-2010.Tema 5 5 SUPERANTGENOS Los mitgenos son
activadores policlonales de linfocitos, es decir, sustancias capaces de inducir
en los linfocitos B y T una proliferacin celular de tipo policlonal, en oposicin a
la expansin clonal de LB y LT tras el encuentro y reconocimiento especfico
con un Ag. Un superantgeno es un Ag, fundamentalmente de origen
microbiano, que acta como mitgeno especfico de LT, estimulando la

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proliferacin desmesurada de estas clulas junto con la sntesis de grandes
cantidades de citoquinas. Interacciona con las partes exteriores del TCR y del
CMH II

OBJETIVOS:

! Realizar las diferentes tcnicas de inmunizacin con un conejo.

! Determinar la va de inmunizacin idnea de acuerdo al tipo de antgeno a

administrar.

METODOLOGA

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Paso 1. A partir de un cultivo en placa de Proteus spp., resembrar en caldo
nutritivo de tioglicato, incubando durante 24 horas.

Paso 2. Esterilizar a durante minutos.

Paso 3. Centrifugar a 1500 r.p.m durante 5 minutos y decantar el

sobrenadante.

Paso 4. Re-suspender el botn celular agregando 2.5 mL de solucin salina

estril formalinizada al 0,3% y agitar vigorosamente hasta obtener
una suspensin homognea.

Paso 5. Centrifugar a 1500 r.p.m durante 5 minutos y decantar el

sobrenadante.

Paso 6. Repetir tres veces ms los pasos 3 y 4, hasta igualar su turbidez con
el del tubo nmero 3 del Nefelometro de McFarland.

Paso 7. Envasar el antgeno en un frasco mpula esteril, etiquetar y guardar

a -20C hasta su posterior uso

PROTOCOLO DE INMUNIZACIN:

Utilizar Proteus spp., ajustada a una concentracin equivalente al tubo nmero

3 del Nefelmetro de McFarland (aproximadamente 900 millones de
bacterias/mL de suspensin).

Inmunizar al conejo de acuerdo al siguiente protocolo.

PROTOCOLO DE INMUNIZACIN DE ANTIGENOS BACTERIANOS

PARTICULADOS
NMERO DE TIEMPO FECHA DOSIS VA
INYECCIN (DAS)
1 0 0.5 mL. Subcutnea.

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 2 4 1.0 mL. Intradrmica.
3 8 2.0 mL. Intradrmica.
4 12 3.0mL. Intradrmica.
Sangrado. 18

OBSERVACIONES- RESULTADOS:

NMERO DE FECHA SINTOMAS

INMUNIZACIN
1 El da de dicha inmunizacin, el
conejo presento diarrea y
febrcula.
2 Aqu nicamente hubo una ligera
falta de apetito durante ese y los
dos das prximos.
3 Durante ese da hubo presencia
de fiebre.
4 Aparentemente no se present
ningn sntoma.

DISCUSIN:

Existen varios factores que determinan las concentraciones y vas de

administracin a utilizar para obtener una buena respuesta inmunolgica, estos
pueden ser la naturaleza qumica del antgeno, tipo de antgeno y dosis
administrada.

De acuerdo al tipo de antgeno a utilizar, en este caso Proteus spp., la mejor

va de administracin es la subcutnea o intradrmica, debido a que se trata de un
antgeno particulado y con esto se cubrira una mayor superficie, lo cual
aumentara la probabilidad de presentacin antignica en los ganglios linfticos.

Otro factor muy importante es la dosis administrada del antgeno, esto se

debe a que si las dosis son muy bajas podra presentarse una falta de respuesta

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ya que a lo mejor no existira estimulacin de los linfocitos o bien si la dosis fuera
demasiado alta se provocara un estado activo de tolerancia inmunolgica.

Adems dado que una sola dosis del antgeno utilizado no inducira una
respuesta inmunolgica ptima, se necesit de 3 inmunizaciones ms, las cuales
debern incrementar la proliferacin clonal de clulas B o T especificas del
antgeno y, de esta manera aumentar la poblacin de linfocitos especficos para
dicho inmunogeno.

CONCLUSIN:

Se realizaron las diferentes tcnicas de inmunizacin, adems de que se

logr determinar la va de administracin idnea para el tipo de antgeno utilizado,
realizando inmunizaciones de acuerdo a un protocolo establecido para obtener
una respuesta inmunolgica idnea por parte del conejo.

BIBLIOGRAFA:
! J. R. Regueiro Gonzales. Inmunologa, Biologa y patologa del
sistema inmunitario (4 edicin). Editorial medica
panamericana.

! Owen, Punt, Stranford. Kuby inmunologa (7 edicin). Editorial

Mc Graw Hill Education.

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