Jackeline Torres Ramos

1017-15-4984

Accin Enzimtica: Actividad de

la Catalasa
Muchos organismos pueden descomponer el perxido de hidrgeno (H2O2) por la
accin de las enzimas. Las enzimas son protenas globulares responsables de la
mayor parte de la actividad qumica de los organismos vivos. Actan como
catalizadores, que son sustancias que aceleran las reacciones qumicas sin ser
destruidas o alteradas durante el proceso. Las enzimas son extremadamente
eficientes y se pueden utilizar una y otra vez repetidamente. Una enzima puede
catalizar miles de reacciones en cada segundo. Tanto los valores de pH como de
la temperatura a los que trabaja la enzima son extraordinariamente importantes.
La mayora de los organismos tienen un intervalo de temperatura preferente en el
cual sobreviven y sus enzimas funcionan mejor dentro de dicho intervalo de
temperatura. Si el ambiente donde se encuentra la enzima es demasiado cido o
demasiado bsico, la enzima puede desnaturalizarse de forma irreversible o
transformarse de modo que su forma no le permita ms realizar su funcionamiento
apropiado.
El H2O2 es txico para la mayora de los organismos vivos. Muchos organismos
son capaces de destruir el H2O2 mediante la accin de enzimas antes de que
pueda realizar mucho dao.
El H2O2 se convierte en oxgeno y agua segn la siguiente reaccin:
2 H2O2 2 H2O + O2
Aunque esta reaccin ocurre espontneamente, las enzimas incrementan la
velocidad de reaccin de forma considerable. Se conoce que al menos dos
enzimas diferentes catalizan esta reaccin: a) catalasa, que se encuentra en
animales y protistas; b) peroxidasa, que se encuentra en las plantas. Mucho se
puede aprender sobre las enzimas mediante el estudio de la rapidez de
reacciones catalizadas por enzimas. La rapidez de una reaccin puede estudiarse
de muy diversas formas como:
Midiendo la presin de los productos que aparecen (en este caso, O2) Midiendo
la velocidad de desaparicin del substrato (en este caso, H2O2)
Midiendo la velocidad de aparicin del producto (en este caso, O2 que se
desprende como gas)
El perxido de hidrgeno (H2O2) se forma de forma natural en los organismos vivos, pero
es muy Desglosado inmediatamente por varias enzimas incluyendo la catalasa. Esta
enzima cataliza la Descomposicin de perxido de hidrgeno en agua y oxgeno.

Materiales y reactivos
Materiales Cantidad
Beakers 50ml
Bureta 50ml 1
Pipetas de 10ml 2
Pipeta de 1ml 1
Pipeta de 5ml 1
Aspirapipeta 1
Erlenmeyer 250ml

Reactivo Cantidad
H2SO4
KMnO4
H2O2 al 3%

Diseo del Experimento

En este experimento, se investigar la velocidad a la que la enzima catalasa convierte el

sustrato en producto. Permitir que la catalasa reaccione con perxido de hidrgeno
durante cantidades variables de tiempo y luego detenga las reacciones aadiendo
H2SO4.
Para determinar la cantidad de perxido de hidrgeno que queda despus de la reaccin,
se realizar una titulacin con KMnO4. En tal valoracin, agrega lentamente un producto
qumico (KMnO4) que causar un cambio de color hasta que se consiga un color objetivo.
Titulacin
Para determinar la cantidad de perxido de hidrgeno (sustrato) ha sido descompuesto
por la catalasa en diferentes tiempos, se mide la cantidad de perxido que queda en cada
matraz.
Se aade lentamente KMnO4, que es de color prpura, al frasco. El perxido en el matraz
hace que el KMnO4 pierda color cuando la solucin se mezcla a fondo. Cuando todo el
perxido ha reaccionado con KMnO4, cualquier KMnO4 adicional se mantendr de color
marrn claro o rosado incluso despus de que la mezcla se agite. Este es el punto final.
Registre la cantidad de KMnO4 que ha utilizado. (Cuanto ms use KMnO4, ms perxido
est en el matraz).
Procedimiento experimento 1
1. Llene cada tubo de ensayo marcado aproximadamente 1/3 con perxido de hidrgeno
fresco.
2. Aada una pequea cantidad de material a ensayar.
3. Observe si se producen o no burbujas.
Materiales Tubos de ensayo (uno para cada material a ensayar ms extra para control)
Perxido de hidrgeno (H2O2) (solucin al 3%) Surtido de tejidos vivos: patata cruda en
rodajas, carne molida, hgado, clulas de levadura, hojas tiernas jvenes Material no vivo:
Pieza de papa al horno o hgado cocido, etc. (Tenga cuidado con las rocas o Arena,
algunos "
Procedimiento experimento 2
1. Agregar 10ml de H2O2 a cada uno de los beakers marcados con el tiempo de
espera.
2. Agregar 1ml de Catalasa en orden creciente al tiempo.
3. Permita que transcurra el tiempo segn la etiqueta del beaker.
4. Despus del periodo de tiempo, detener la reaccin con 10ml de H2SO4.
5. Repetir el procedimiento para cada beaker.

6. Titulacin
1. Tomar 5ml de la muestra y trasferir a un Erlenmeyer.
2. Apuntar el volumen inicial de KMNO4
3. Agregar KMnO4 hasta que persista un tenue color marrn. Este es el punto
final de la titulacin.
4. Tomar el volumen final de la bureta
5. Calcular el volumen utilizado para la titulacin.
6. Repetir con los dems beakers.
https://web.stanford.edu/group/lpchscience/cgi-
bin/wordpress/images/Enzyme-T.pdf
http://www.ableweb.org/volumes/vol-6/10-miller.pdf
http://www.accessexcellence.org/AE/ATG/data/released/0334-
RobertGoodman/index.html
https://www.biologycorner.com/worksheets/enzyme_lab.html
http://www.chem.purdue.edu/teacher/table_of_contents/spectronic
%20educator/enzyme.pdf
http://media.collegeboard.com/digitalServices/pdf/ap/bio-manual/Bio_Lab13-
EnzymeActivity.pdf
http://www.phschool.com/science/biology_place/labbench/lab2/burette.html
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http://www2.vernier.com/sample_labs/CMV-03-enigma.pdf