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FACULTAD DE TECNOLOGA
ESCUELA DE QUMICA
PEREIRA
2015
1
DESARROLLO DE LA TCNICA DE CROMATOGRAFA DE GASES (GC-FID)
PARA LA DETERMINACIN DE CONTAMINANTES EMERGENTES TIPO
PRODUCTOS FARMACUTICOS
Director:
Qumico, M. Sc
FACULTAD DE TECNOLOGA
ESCUELA DE QUMICA
PEREIRA
2015
2
NOTA DE ACEPTACIN DEL TRABAJO DE GRADO
Presentado por:
Los suscritos director y jurado del presente trabajo de grado, una vez
revisada la versin escrita y presenciado la sustentacin oral, decidimos
otorgar:
Director:
Jurado:
Firma _______________________________________
Jurado:
Firma _______________________________________
3
AGRADECIMIENTOS
Queremos agradecer a todas aquellas personas que con su ayuda han colaborado
en la realizacin de este proyecto, en especial a nuestras familias, por su apoyo
incondicional, por ser quienes nos motivan a seguir adelante con nuestros sueos.
4
TABLA DE CONTENIDO
5
4.8. EXTRACCIN POR SORCIN BARRA MAGNTICA AGITADORA (SBSE) ... 41
4.9. ESTANDARIZACIN ..................................................................................................... 42
4.9.1. Curva De Calibracin ............................................................................................. 42
4.9.2. Registro De Datos O Sistema De Datos ............................................................. 43
4.9.3. Parmetro De Calidad ........................................................................................... 43
4.9.4. Exactitud .................................................................................................................. 43
4.9.5. Precisin .................................................................................................................. 44
4.9.6. Lmite De Deteccin Y Selectividad..................................................................... 44
4.9.7. Lmite De Deteccin Y Lmite De Cuantificacin ............................................... 45
4.9.8. Linealidad Y Rango ................................................................................................ 47
4.9.9. Sensibilidad ............................................................................................................. 48
4.9.10. Porcentaje De Recuperacin (% REC) ........................................................... 48
4.9.11. Repetitividad ........................................................................................................ 49
4.9.12. Reproducibilidad ................................................................................................. 49
4.10. NORMATIVIDAD GENERAL .................................................................................... 50
5. METODOLOGIA ..................................................................................................................... 52
5.1. COMPRA DE ESTNDARES Y REACTIVOS ......................................................... 52
5.1.1. Seleccin Y Compra De Estndares Disponibles ............................................. 52
5.1.2. Seleccin y Compra de Reactivos Y Estndares .............................................. 52
5.1.3. Compra y Prstamo de Equipos y Materiales .................................................... 52
5.2. DESARROLLO DE LAS CURVAS DE CALIBRACIN ............................................ 53
5.3. DESARROLLO DE LA TCNICA DE EXTRACCIN EN FASE SOLIDA ............ 55
5.4. ANLISIS DE MUESTRAS REALES .......................................................................... 57
5.4.1. Contaminacin Con Las Muestras Reales ........................................................ 57
5.5. CARACTERISTICAS DEL CROMATGRAFO DE GASES ................................... 58
5.5.1. Gas De Portador ..................................................................................................... 58
5.5.2. Mtodo Cromatogrfico ......................................................................................... 60
5.5.3. Columna cromatografa ......................................................................................... 60
5.5.4. Calibracin ............................................................................................................... 60
5.5.5. Control de calidad ................................................................................................... 61
6. RESULTADOS Y DISCUSIN ............................................................................................. 62
7. TRATAMIENTO ESTADSTICO .......................................................................................... 72
6
8. CONCLUSIONES ................................................................................................................... 73
9. RECOMENDACIONES.......................................................................................................... 74
10. BIBLIOGRAFIA ................................................................................................................... 75
11. ANEXO ................................................................................................................................. 81
CONTENIDO TABLAS
CONTENIDO DE ECUACIONES
7
CONTENIDO DE GRAFICOS
CONTENIDO DE IMAGENES
CONTENIDO DE FIGURAS
8
1. INTRODUCCIN
9
Por sus caractersticas intrnsecas, los productos farmacuticos son sustancias
altamente solubles en agua, que se liberan al medio ambiente va excrecin, ya
sea metabolizados o no metabolizados, por vertido de los productos no utilizados
o caducados, o bien procedentes, como residuos, de los procesos de produccin,
por lo que pueden estar presentes en todas las etapas de un ciclo de vida del
agua puntual y referido a su uso. Si bien no se trata de compuestos persistentes,
stos si son constantemente utilizados y vertidos, y los sistemas de tratamiento
convencionales de agua potable y de aguas servidas muchas veces no son
capaces de eliminarlos (Henrquez, 2012).
Segn lo establecen las Guas para la Calidad del Agua Potable, el agua para
consumo no debe ocasionar ningn riesgo significativo para la salud cuando se
consume durante toda la vida, teniendo en consideracin las diferentes
vulnerabilidades que pueden presentar las personas en las distintas etapas de su
vida. La finalidad de dichas guas es bsicamente apoyar el desarrollo y la
ejecucin de estrategias de gestin de riesgos que permitan asegurar la inocuidad
del abastecimiento de agua, mediante el desarrollo de normas nacionales o
regionales basadas en informacin cientfica que proporcionan las Guas, y que
consideran un anlisis de riesgos y beneficios. Considerando que los frmacos
son considerados contaminantes emergentes su incorporacin especfica en las
Guas de la OMS an no se ha registrado, encontrndonos incluso con que ni
siquiera son mencionados en stas (Henrquez, 2012). De modo que queda
totalmente justificada la necesidad de implementar nuevos procedimientos que
permitan la eliminacin de estos contaminantes de las aguas para consumo.
10
2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIN
11
El desarrollo de este trabajo va a servir para el avance de nuevas y futuras
investigaciones ya que aqu se da el primer paso de la investigacin obteniendo
las curvas de calibracin, pero con el apoyo de semilleros podrn otros
estudiantes continuar con los estudios hasta quizs llegar a tcnicas de
depuracin y descontaminacin de aguas dndonos como triunfo a las estudiantes
encargadas del proyecto no solo la formacin de talento como profesionales sino
tambin el orgullo por el aporte realizado.
12
3. OBJETIVOS
13
4. MARCO TERICO
14
contaminantes es escasa, debido al desconocimiento de sus efectos, adems de
que no se tiene un inventario de todas las especies qumicas presentes en una
muestra ambiental, por limitaciones analticas (Becerril, 2009).
4.2. FRMACOS
15
para diferentes organismos de prueba, encontrndose que los analgsicos como
el Diclofenaco, resultan txicos para los crustceos y dainos para los peces. Por
otro lado de acuerdo a la clasificacin del peligro ambiental y valoracin de riesgo
de ingredientes farmacutico en Suecia (2002), el diclofenaco est clasificado
como peligroso para el ambiente, y se considera adems potencialmente
bioacomulable (Valdez, 2009).
Toda vez que sus acciones son muy similares, estos frmacos generalmente se
suelen clasificar con base en su estructura qumica. Las drogas clsicas, como la
aspirina, el diclofenaco y el ibuprofeno son inhibidores no selectivos de la
ciclooxigenasa.
4.2.1. Diclofenaco
16
Tabla 2. Frmacos y caractersticas
Cl
no]fenil}actico
O CH3
N
1,3,7-trimetil- Sigma 99 H3C N
1H-purina- Aldrich
Cafena 58-08-21 O N N
2,6(3H,7H)-
diona CH3
1,3,7-
trimetilxantina
17
4.2.2. Cafena
4.2.3. Ibuprofeno
4.2.4. Carbamazepina
18
4.2.5. Comportamiento Ambiental De Los Frmacos
Para poder comprender cmo los frmacos llegan finalmente al medio ambiente,
cuando son excretados por el ser humano, es necesario primeramente tratar de
conocer los mecanismos que regulan su comportamiento dentro del organismo.
19
La velocidad a la que un frmaco es absorbido y su biodisponibilidad, depende
directamente de las caractersticas fisicoqumicas del frmaco, de los procesos
fisiolgicos y de las alteraciones patolgicas que pueda presentar la persona que
toma dicho frmaco (Henrquez, 2012).
20
1892 Reed: Separacin en columna en tubos de kaoln usados para la separacin
de FeCI3 y el CuSO4.
21
4.4. FUNDAMENTOS DE LA CROMATOGRAFA
22
KD=
23
4.5.1. Cromatografa de gases de alta velocidad
24
A diferencia de la mayora de las tcnicas de separacin cromatogrfica, la fase
mvil en la cromatografa de gases no interacta con los componentes de la
muestra, toda vez que su nica funcin es transportar los componentes de la
misma a travs de la columna. La cromatografa gas-slido se fundamenta en una
fase estacionaria slida en la cual los analitos son retenidos gracias al fenmeno
de la adsorcin, y su aplicacin es limitada a separar compuestos de bajo peso
molecular. Los materiales finamente divididos como carbn activado, almina
activa o silica-gel microporosos con una gran rea superficial activa (superficie de
contacto) son fuertes adsorbentes, motivo por el cual son muy empleados como
fases estacionarias en la cromatografa gas-slido. Esto se debe al fenmeno de
adsorcin preferente, que ocurre cuando las molculas de dos o ms sustancias
estn presentes en un material adsorbente y las molculas de una de esas
sustancias pueden ser retenidas ms fcilmente que las de las otras. Estos
materiales tambin suelen ser empleados como soportes de la fase estacionaria
lquida, en la cromatografa gas-lquido (Castro, 2010).
25
costo.
El contenido de O2 en el gas de arrastre no debe superar las 20 ppm, toda
vez que existe el riesgo de que al estar en contacto con la mezcla durante
un tiempo a elevadas temperaturas, se pueda producir una degradacin o
algn tipo de alteracin de la muestra (Rodrguez, 2011).
Empacadas
Capilares
27
La columna se encuentra ubicada en el interior de un recinto termostatizado u
horno. Esto se debe a que la temperatura influye de manera importante en la
retencin de los componentes por la columna, y por ende en la separacin de
stos. Por tal motivo, la temperatura debe ser uniforme a lo largo de la columna y
fcilmente controlable. Se consigue uniformidad en la temperatura a lo largo de la
columna haciendo circular aire caliente por todo el recinto que la contiene. Esto se
hace por medio de un ventilador. En la mayora de los equipos la temperatura se
puede regular de un modo continuo a un valor deseado. De igual forma en algunos
equipos se acopla un programador lineal de temperatura para calentar la columna
con una o varias rampas de calentamiento.
28
rpidos y completos al momento de alcanzar el equilibrio. Esta condicin
excluye por defecto, cualquier reaccin qumica entre los componentes de
la muestra y la fase estacionaria.
4.5.7. Detectores
1. Sensibilidad adecuada.
2. Buena estabilidad y reproductibilidad.
3. Respuesta lineal para los solutos que se extienda a varios rdenes de
magnitud.
4. Intervalo de temperaturas desde la temperatura ambiente hasta al menos 400C
5. Tiempo de respuesta corto independiente de la tasa de flujo.
6. Alta confiabilidad y manejo sencillo. El detector debera estar a prueba de la
impericia de operadores inexpertos, si es posible.
7. Respuesta semejante para todos los solutos o, por el contrario, una respuesta
selectiva y altamente predecible para uno o ms tipos de solutos.
8. No debe destruir la muestra.
Por desgracia, no hay un detector que rena todas estas caractersticas (Skoog,
2008).
29
Algunos de los detectores ms usados se describen a continuacin.
30
4.5.7.3. Detectores termoinicos de llama (FTD)
31
En el modo de azufre, el gas para la reaccin es aire, el cual transforma los
compuestos que contienen azufre en SO2. El solvente de conductividad es alcohol
metlico con una pequea cantidad de agua. El SO2 se convierte en sulfito y en
iones sulfato en presencia de agua. Los compuestos que contienen nitrgeno se
transforman en N2 y xidos de nitrgeno y manifiestan poca o ninguna respuesta.
Los compuestos que contienen halgeno se transforman en HX y se tienen que
eliminar mediante un depurador despus de reaccionar y antes de la deteccin. En
la modalidad de azufre, se puede detectar alrededor de 2 pg S/s con un intervalo
lineal de tres rdenes de magnitud. En el modo de nitrgeno se utiliza hidrogeno
como gas de reaccin, como en el modo de halgeno. No obstante, en este caso
se usa agua que contiene una pequea cantidad de un solvente orgnico como
solvente de conductividad. En este solvente el NH3 producido se transforma en
NH4 +. El HX y el H2S producidos a partir de compuestos que contienen halgenos
y azufre se eliminan con un depurador despus de la reaccin. El lmite de
deteccin es de ~4 pg N/s con un intervalo lineal de tres rdenes de magnitud
(Skoog, 2008).
32
4.5.7.6. Detectores de emisin atmica (AED)
Con la fotometra de flama se han detectado otros elementos, entre los que estn
los halgenos, nitrgeno y diversos metales, como estao, cromo, selenio y
germanio (Skoog, 2008). Este detector ha permitido la determinacin de
pesticidas organofosforados y de compuestos orgnicos de estao en el agua de
mar.
33
4.5.7.8. Detectores de espectrometra de masas
34
A esta tcnica se le conoce como supervisin de un ion selecto. Los espectros de
masas de iones seleccionados que se obtienen durante un experimento
cromatogrfico se conocen como cromatogramas de masas (Skoog, 2008).
Otros tipos de detectores para cromatografa de gases son tiles para aplicaciones
especficas. El detector de quimioluminiscencia del azufre se basa en la reaccin
entre ciertos compuestos azufrados y el ozono. La intensidad de la luminiscencia
resultante es proporcional a la concentracin de azufre. sta demostrado que este
35
detector es especialmente til en la deteccin de contaminantes como los
mercaptanos. En el detector de quimioluminiscencia del azufre el eluyente se
mezcla con hidrogeno y aire, y se produce la combustin igual que en el detector
de ionizacin por flama. Los gases as obtenidos se mezclan luego con ozono y se
mide la intensidad de la emisin resultante. El intervalo lineal es de alrededor de
cinco rdenes de magnitud y el lmite de deteccin para el azufre es de casi 0.5
pg/s. El detector de quimioluminiscencia del azufre tambin ha sido adaptado a la
cromatografa de fluidos supercrticos (Skoog, 2008).
La extraccin en fase slida (SPE) es una tcnica conveniente para evitar el uso
de grandes cantidades de disolventes orgnicos en los pasos de pre-
concentracin y extraccin. Se utiliza principalmente para el enriquecimiento de
muestras de agua con ventajas sobre la extraccin lquido-lquido (LLE), tales
como:
c) Eficacia de extraccin.
37
Figura 3. Diagrama de proceso SPE
38
(LLE), la extraccin en fase slida (SPE) y la microextraccin en fase slida en la
modalidad de espacio de cabeza (HS-SPME). Estos tratamientos de muestra se
complementan con anlisis por cromatografa de gases acoplada a espectrometra
de masas (GC-MS) y cromatografa de lquidos acoplada a espectrometra de
masas (LC-MS). Estas investigaciones han arrojado como resultado que en la
LLE y SPE se consiguen mejores resultados en cuanto a sensibilidad y nmero de
compuestos medibles. La SPE es un proceso que consume menos tiempo y es
ms respetuoso con el medioambiente que la LLE, ya que utiliza una menor
cantidad de disolvente. Dependiendo de la naturaleza qumica de las distintas
familias de compuestos seleccionadas la tcnica de extraccin es diferente
(Molina, 2014).
Por medio de esta tcnica se realiz un estudio en Espaa donde el objetivo fue
evaluar el comportamiento de una variedad de contaminantes orgnicos, de los
cuales fueron identificados 14 contaminantes emergentes en un humedal de flujo
superficial a gran escala alimentado con un efluente secundario. Los compuestos
encontrados fueron frmacos como (cido clofbrico , carbamazepina , cafena ,
ketoprofeno , diclofenaco , ibuprofeno y naproxeno), fragancias (metil
dihidrojasmonato , galaxolide y tonalide ), herbicidas ( mecoprop , MCPA y
terbutilazina ) y medicamentos veterinarios ( flunixina ) clofbrico. (Matamorros,
2008)
39
4.7. EXTRACCIN LQUIDO-LQUIDO (LLE)
Uno de los proyectos utilizados con esta tcnica para frmacos se desarroll y
optimiz por medio del mtodo Microextraccin en Fase Slida seguido de
Cromatografa de Gases-Espectrometra de Masas (MEFS-CG-EM) para la
determinacin de ibuprofeno, naproxeno, clorofeno, triclosn y bisfenol
catalogados dentro de los contaminantes emergentes o productos farmacuticos
de cuidado personal en aguas residuales (Pea, 2015).
Es una tcnica de extraccin que est basada en los mismos principios que la
SPME pero viene a mejorarla en algunos aspectos. Su aparicin data del ao
1999 cuando se public la informacin acerca de la teora y prctica de este nuevo
proceso de extraccin. Consiste en poner en contacto la muestra acuosa
directamente o por espacio de cabeza con una barra magntica que est
recubierta por una pelcula de polmero de PDMS. Seguidamente esta barra se
aclara con agua, se seca y se introduce en un tubo de vidrio el cual se coloca en la
unidad de desorcin trmica (desarrollada comercialmente para su acoplamiento
con el sistema de inyeccin del cromatgrafo) para la introduccin de los analitos
normalmente en un GC por desorcin trmica. Esta desorcin tambin se puede
producir por accin de un disolvente (Robles, 2014).
41
de varios parmetros: tiempo de agitacin, la fuerza inica, la presencia de
modificadores orgnicos, pH, y el volumen del agente de derivacin. El protocolo
optimizado mostr porcentajes aceptables de recuperacin (50-100%) y los lmites
de deteccin por debajo de 1 ng L-1 para la mayora de los compuestos (Pintado,
et al, 2014).
4.10. ESTANDARIZACIN
42
partir de la curva de calibracin se calcula la cantidad de muestra presente en el
material desconocido.
Los parmetros de calidad son los criterios cuantitativos que se utilizan para
decidir si un mtodo es adecuado o no para resolver un determinado problema
analtico. Son por lo tanto los criterios que se utilizan en la validacin de los
mtodos analticos (para demostrar su validez en la resolucin de un problema de
este tipo). Los parmetros de calidad son la materializacin, expresin numrica
de caractersticas o indicadores de calidad de los mtodos tales como la
precisin, exactitud, sensibilidad, selectividad, linealidad, rango, lmite de
deteccin y lmite de cuantificacin (Sierra et al., 2010).
4.10.4. Exactitud
43
mtodo se calcula mediante estudios de porcentajes de recuperacin, pero
tambin se puede determinar por anlisis de un material estndar o de referencia,
as como por comparacin con un mtodo previamente validado.
4.10.5. Precisin
44
Esto sucede cuando la distancia entre ybl y M es aproximadamente 3 veces la
desviacin estndar del blanco, de forma que la mnima seal analtica
distinguible, ym seria:
El intervalo til de los mtodos analticos deber ser, al menos, de dos rdenes de
magnitud.
Los mtodos instrumntales son ms sensibles que los mtodos qumicos. Esto
implica que son capaces de detectar y determinar cantidades de analito mucho
ms pequeos que los mtodos clsicos, lo cual los hace particularmente tiles
para el anlisis de trazas, de gran importancia, por ejemplo, en muestras
biolgicas y medio ambientales (Hernandez, 2002).
45
obtenidos en muestras blanco y se establece que el LOD es la concentracin que
proporciona una relacin S/R de 2 o 3 y que el LOQ es la concentracin que
proporciona una relacin S/R de 10. En otros casos se estiman a travs de la
desviacin estndar multiplicada por un factor de 10 proporciona una estimacin
de la seal mnima cuantificable, siendo este ltimo el modo ms usado para
obtener este parmetro estadstico (Filho et al., 2010).
46
4.10.7.3. Mtodo Basado en la Extrapolacin de la Recta de Calibrado a
concentracin Cero.
47
impurezas se suelen utilizar sucesivas diluciones ya que normalmente se trabaja
en niveles de concentracin muy bajos y esto dificultara las pesadas (Lpez,
2008).
4.10.9. Sensibilidad
48
El porcentaje de recuperacin (% R) se calcula de la siguiente manera:
Dnde:
4.10.11. Repetitividad
4.10.12. Reproducibilidad
49
4.11. NORMATIVIDAD GENERAL
Siendo este decreto tan claro y con toda la problemtica mencionada es evidente
que la calidad del agua se afecta y no se est ejerciendo el control ni tratamiento
con el fin de remediar la contaminacin por frmacos como contaminantes
emergentes. Las aguas o residuos lquidos provenientes del uso domstico,
comercial e industrial se introducen en las aguas superficiales, subterrneas,
interiores y marinas y estas alteran los ecosistemas, el ciclo del agua y el sano
desarrollo de especies vivas que consumen y son dependientes de este recurso
natural.
As mismo otra normatividad que aplica es la resolucin 2115 de 2007 por medio
de la cual se sealan caractersticas, instrumentos bsicos y frecuencias del
sistema de control y vigilancia para la calidad del agua para consumo humano.
50
El ciclo del agua repercute y no hay tratamientos eficientes para los contaminantes
emergentes en las plantas de tratamiento lo que conllevan a que el recurso hdrico
que se dirige a nuestros hogares en forma de agua potable llega con trazas de
estos componentes y terminamos siendo nosotros mismos quienes los
consumimos.
51
5. METODOLOGIA
Ibuprofeno
Diclofenaco
Carbamazepina
Cafena
Estufa
52
Bomba al vaco
Colector de SPE al vaco de doce puestos
Equip para filtracin al vaco
Cabina para gases
Pinzas para soporte universal
Soporte universal
Aro analtico
Papel filtro cualitativo
Papel indicador de pH
Par de guantes
Probeta de 200 mL
Probeta de 1000 mL
Beacker de 500 mL
Beacker de 100 mL
Beacker de 200 mL
Pipetas aforadas de 2 mL
Pipetas aforadas de 5 mL
Pipetas aforadas de 10 mL
Micropipeta
Microjeringa
Jeringa
Filtro de jeringa (filtro Banda azul de 0,45 m)
Vidrio de reloj
Varilla agitadora
Embudo de vidrio pequeo
Cartucho de ENVICARB para la SPE.
53
Figura 4. Mtodo cromatogrfico de gases
54
Imagen 1. Estndares analticos y soluciones madre
55
Imagen 3. Filtracin al vaco
Del litro contaminado se tomaron 200 mL, esta cantidad se filtr al vaco (imagen
3) para eliminar partculas en suspensin y se acidifico la muestra de agua con
HCL concentrado a pH 2 y paralelo a este procedimiento se iban acondicionando
los cartuchos SPE (imagen 4) percolando primero con 3 mL de MeOH, luego 3 mL
de H2O y finalmente con 3mL de H2O acidificado a pH 3 con HCL a una velocidad
de flujo de 10 mL/min.
56
A travs de un colector de SPE se filtraron al vaco los 200 mL de muestra en
cartuchos de SPE nombrados anteriormente donde su objetivo consisti en pasar
la muestra a travs de la fase estacionaria, enriquecida previamente, para luego
proceder a percolar los analitos all retenidos eluyndolos con 5 mL de (5% Acido
formico) en MeOH, luego se desorbi el extracto evaporando hasta sequedad
bajo una corriente suave de nitrgeno, adicionalmente se reconstituyo en 1,5
mL de metanol para su preparacin a la siguiente tcnica Cromatografa de gases.
57
Despus de reconstituidas las muestras se procedi a filtrar cada una de ellas
(imagen 6) con el fin de evitar contaminantes que puedan haberse adquirido
durante el procedimiento y que pudiesen afectar el equipo.
58
Figura 5. Mtodo SPE para extraccin de los frmacos y clean up
59
Imagen 7. Equipo de cromatografa
5.5.4. Calibracin
60
5.5.5. Control de calidad
61
6. RESULTADOS Y DISCUSIN
Analitos Tiempo de
retencin
Ibuprofeno 18.863
Cafena 24.582
Carbamazepina 25.833
Diclofenaco 28.799
62
Figura 7. Cromatograma de analitos a 5 ppm
63
Figura 9. Cromatograma de analitos a 20 ppm
64
Tabla 7. Datos de analitos a 30 ppm
65
Tabla 9. Datos de analitos a 53,3 ppm
Las curvas de calibracin de todos los compuestos fueron arrojadas por el equipo,
todos los analitos a excepcin del ibuprofeno detectaron las concentraciones
desde 5 ppm, y el equipo al formar las curvas arroja datos como lo indican las
tablas 4,5,6,7,8 y 9 que fueron utilizados para el anlisis estadstico generando as
mayor coherencia y exactitud de estos.
66
Figura 14. Curva de calibracin de la cafena
67
Tabla 12. Curva de calibracin del Carbamazepina
68
de todo el procedimiento indicado en la metodologa se corri la muestra en el
cromatgrafo de gases en el cual se analiz con dichas curvas de calibracin
arrojando las concentraciones recuperadas.
Las curvas de calibracin realizadas con cada uno de los frmacos usados son
estndares analticos de la empresa Sigma Aldrich la cual certificasu pureza y alta
calidad.
69
Tabla 15. Rangos para curva de calibracin
Patrones de Concentracin
cadaanalito (ppm)
1 5
2 10
3 20
4 30
5 46.6
6 53.3
La siguiente grafica est dada por la tabla 16 con el fin de mostrar grficamente
los resultados de porcentajes de recuperacin calculados.
70
Porcentaje de Recuperacin
90,00
80,00
70,00
60,00
50,00
40,00
30,00
20,00
10,00
0,00
1 2 3 4
% Recuperacin
71
7. TRATAMIENTO ESTADSTICO
72
8. CONCLUSIONES
73
9. RECOMENDACIONES
74
10. BIBLIOGRAFIA
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agua de escorrenta en el corregimiento de la florida de la ciudad de pereira-
colombia. Universidad Tecnolgica de Pereira
Sierra. A., Prez. Q., Gmez. R., Morante. Z. 2010. Anlisis instrumental. ISBN
978-84-9475-377-6. pg 5-9
Tanoue, R.; Nomiyama, K; Nakamura, H.; Hayashi, T.; Kim, J.; Isobe, T.;
Shinohara, R.; Tanabe, S. 2014. Simultaneous determination of polar
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Vega, M.; Sosa, F.; Santana, R. 2006. Sample extraction method combining
micellar extraction-spme and hplc for the determination of organochlorine
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7747-7752.
Wang, Y.; Zhu, J.; Huang, H. The Key Laboratory of Water and Sediment
Sciences, Ministry of Education, School of Environment, Beijing Normal University,
No. 19, Xinjiekouwai Street, Beijing 100875, China.
79
Zwir-ferenc, A.; Biziuk, M. 2006. Solid phaseextractiontechniquetrents,
opportunities and applications.polishjournal of environmentalstudies. vol 5. no.5.
80
11. ANEXO
Como anexo a este trabajo de grado se implement una gua de laboratorio que
fue entregada al laboratorio de aguas de la Facultad de Ciencias Ambientales de
la Universidad Tecnolgica de Pereira con el fin de que pudieran implementar su
propia tcnica, ya que contaban con un proyecto de investigacin acerca de
humedales construidos depuradores de contaminantes emergentes y para analizar
la cantidad de contaminantes absorbidos por las plantas era necesario realizar
ciertos anlisis que podan lograr a partir de la presente gua.
CONTENIDO
1. Alcance 2
3. Conceptos / Abreviaturas 3
4. Principio 4
5. Reactivos y materiales 8
6. Equipos 8
7. Muestras y muestreo 9
8. Calibracin 9
9. Control de calidad 10
10. Procedimiento 10
11. Clculos 14
12. Bibliografa 14
81
1. Alcance
82
3. Conceptos / Abreviaturas
4. Principio
84
son separados como consecuencia del reparto entre una fase mvil gaseosa y una
fase estacionaria contenida en una columna. La muestra es vaporizada e
inmediatamente sembrada en la columna, mediante un dispositivo de inyeccin.
Una vez sembrada en la columna, es eluda a causa del flujo de un gas inerte, que
desempea el rol de fase mvil.
85
dependiendo de investigaciones sobre sus efectos potenciales en la salud y los
datos de monitoreo con respecto a su incidencia. Ejemplos de los compuestos que
han emergido recientemente como particularmente relevantes, son los
surfactantes, productos farmacuticos, productos para el cuidado personal,
aditivos de las gasolinas, retardantes de fuego, antispticos, aditivos industriales,
esteroides y hormonas y subproductos de la desinfeccin del agua. La
caracterstica de estos grupos de contaminantes es que no necesitan persistir en
el ambiente para causar efectos negativos, puesto que sus altas tasas de
transformacin/remocin se pueden compensar por su introduccin continua en el
ambiente. Para la mayora de estos contaminantes emergentes, la incidencia, la
contribucin de riesgo y los datos ecotoxicolgicos, no estn disponibles. As que
es difcil predecir qu efectos de salud pueden tener en seres humanos y
organismos acuticos (Barcel, 2003).
Actualmente existe un inters creciente por las repercusiones que tendrn los
compuestos orgnicos de origen atropognico en el ambiente. El agua es una
fuente importante de estos compuestos para los seres vivos. La regulacin de
estos contaminantes es escasa, debido al desconocimiento de sus efectos,
adems de que no se tiene un inventario de todas las especies qumicas
presentes en una muestra ambiental, por limitaciones analticas [7].
86
y sus metabolitos y productos de degradacin, y las caractersticas de los suelos,
estas sustancias pueden llegar a alcanzar las aguas subterrneas y contaminar
los acuferos o bien quedar retenidas en el suelo y acumularse pudiendo afectar al
ecosistema y a los humanos a travs de la cadena trfica. En consecuencia, para
una evaluacin realista del medio acutico es necesario un estudio integrado
agua subterrnea-suelo/sedimento-agua superficial suelo.
5. Reactivos y materiales
6. Equipos
87
Colector de SPE al vacio de doce Cabina para gases
puestos
Pinzas para soporte universal
Equip para filtracin al vaco
Soporte universal
7. Muestras y muestreo
8. Calibracin
88
8.1. Blanco
Este fue tratado con el mismo mtodo, en las mismas condiciones y con las
mismas curvas de calibracin.
9. Control de calidad
10. Procedimiento
Se tom una muestra de 200 mL del frasco mbar, se filtr al vaco para eliminar
partculas en suspensin y se acidifico la muestra de agua con HCL concentrado a
pH 2.
89
Fig. 3. Diagrama de flujo. Mtodo SPE para extraccin de contaminantes
emergentes tipo farmacuticos y clean up.
90
Un volumen de 1 L de muestra se inyecto en el modo splitless a una temperatura
del inyector de 260 C con una purga del inyector de tiempo de activacin de 1
minuto
91
11. Clculos
Porcentaje de recuperacin
% Recuperacin = x 100 =
Porcentaje de remocin
% Remocin = x 100 =
12. Bibliografa
[1]. http://farmacologia.bligoo.com.mx/definicion-de-farmaco#.U7LmjZR5OSo
[2].http://laboratoriotecnicasinstrumentales.es/analisis-qumicos/cromatografa-de-
gases
[3]. http://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia/parametros
[4]. ZIEF, M.; KISSER, R.Solid phase extraction for sample.J.T. Baker
Manual.Pg.7-15.
[5]. VEGA, M. D.; SOSA, F. Z.; SANTANA, R. J. 2006. Sample extraction method
combining micellar extraction-SPME and HPLC for the determination of
organochlorine pesticides in agricultural soils.Journal of Agricultural and Food
Chemestry.54.Pg. 7747-7752.
92
[7]. Revista Digital Universitaria. 10 de agosto 2009 Volumen 10 Nmero 6
ISSN: 1067-6079
93