MATERIALES, EQUIPO Y REACTIVOS

MATERIALES: REACTIVOS:
o Cajas petris o Agar Dextrosa Saboraud
o Tubos de ensaye o Azul-Algodon
o Portaobjetos y cubreobjetos.
o Asa bacteriologica
o Algodn
o Papel estraza
o Aluminio
o Gasas
o Cinta masking
o Cinta testigo
o Matraz elermeyer
o Pipetas
o Tripie
o Mechero de bunsen
o Agitadores

EQUIPOS: MUESTRAS BIOLOGICAS:

o Incubadora o Harina de maiz de la marca
o Microscopio Diconsa.
METODOLOGIA.

Preparacin de la muestra.

1.- Se pesara 10 gr. de muestra que es la harina de maz marca

Diconsa en una caja de Petri estril.
2.- Transferir la muestra pesada a un vaso de licuadora estril.
3.- Adicionar 90 mL de solucin salina estril.
4.- Homogeneizar por 10 segundos en licuadora a velocidad mnima.
5.- Realizar diluciones decimales hasta 10-3 (el nmero de diluciones est
en funcin de la procedencia de la muestra) en tubos de 16 x 150 mm
conteniendo cada tubo 9. mL del mismo diluyente.
7.- Transferir 0.1 mL de las diluciones 10-1, 10-2 y 10-3 a cajas de Petri con
agar previamente marcadas.

Mohos

Preparacin de la colonia

1. Se disuelve el agar dextrosa sabourand, en 40 ml de agua

destilada para cada agar, se hidrata por 20 minutos y
posteriormente se pasa a flama hasta el 1er hervor, una vez listo se
esteriliza a 120C y 1 kg/cm2.
2. Se coloca en la caja Petri un 1 ml. de la disolucin con la muestra
en el centro de la caja Petri y se le adiciona el agar dextrosa
sabouraud.
3. La tcnica a utilizar ser la de vaciado en placa se dieron 30 giros
a la derecha y 30 a la izquierda a cada caja con el fin de que
quedara bien diluido el agar con la muestra, se esper su
solidificacin y se encub durante 24 horas de 28 a 29C.
4. Se observara el crecimiento de los mohos por 24 hr. 48 hr y 72 hr.

Da 2 (24 horas)

Se hace una observacion de las cajas, y se observa el crecimiento de

nuestras cajas.

Da 3 (48 horas)
Se vuelve a hacer un segundo recuento de colonias en las mismas cajas,
y se observa el crecimiento en el microscopio.
Da 4 (72 horas)

Se observ el crecimiento de los mohos y se realiza la tincin para

obtener el tipo de hongo y su identificacin.

Tincin de Mohos

1. Con una asa bacteriolgica se toma la muestra de hongo

tomndola desde la base, de preferencia tomando un poco del
material biolgico.

2. Se coloca la muestra en un porta objetos con mucho cuidado sin

tallar ni desbaratar la muestra.

3. Se le coloca 1 gota de azul de algodn y se cubre con un cubre

objetos.

4. Se lleva la muestra a un microscopio y se procede a observar e

identificar.

LEVADURA

Preparacin de la colonia

1. Se disuelve el agar dextrosa sabourand en 40 ml de agua destilada

para cada agar, se hidrata por 20 minutos y posteriormente se pasa
a flama hasta el 1er hervor, una vez listo se esteriliza a 120C y 1
kg/cm2.

2. Se coloca en la caja Petri un 1 ml. de la disolucin con la muestra

en el centro de la caja Petri y se le adiciona el agar dextrosa
sabouraud.

3. Utilizamos la tcnica de vaciado en placa se dieron 30 giros a la

derecha y 30 a la izquierda a cada caja con el fin de que quedara
bien diluido el agar con la muestra, se esper su solidificacin y se
encub durante 72 horas de 35C.
 4. Se observara el crecimiento de los mohos por 24 hr. 48 hr y 72 hr.

Da 2 (24 horas)

Se hace una observacion de las cajas, y se observa el crecimiento de

nuestras cajas.

Da 3 (48 horas)

Se vuelve a hacer un segundo recuento de colonias en las mismas cajas,

y se observa el crecimiento en el microscopio.
Da 4 (72 horas)