INTRODUCCIN

Bajo el microscopio ptico el citoplasma se observa como

una estructura relativamente vaca.
Cuando apareci el microscopio electrnico empezaron a
identificar estructuras limitadas por membranas.
Encontraron canales largos delimitados por membranas
que irradiaban por el citoplasma para formar una red
interconectada de canas y sacos aplanados, delimitados
por membranas llamadas cisternas
- A medida que examinaron ms tipos de clulas,
observaron que los compartimientos membranosos del
citoplasma formaban organelos que podan
identificarse en diversas clulas
- Hay que tener presente que los organelos
citoplsmicos pueden parecer estructuras estables pero
de hecho son compartimientos dinmicos con un flujo
continuo
QE ES EL SISTEMA ENDOMEMBRANOSO?
Es una serie de organelos que interaccionan entre el
ncleo y la membrana plasmtica.

Lpidos,
protenas y
enzimas
LAS VESCULAS DE TRANSPORTE
 VA BIOSINTTICA
Se sintetizan protenas en el Retculo Endoplsmico, se
modifican a su paso por el Aparato de Golgi y se
transportan a varios destinos.

Tambin se conoce como va secretora porque

muchas protenas sintetizadas en el retculo
endoplsmico se secretan de la clula.
CONSTITUTIVA

REGULADA
VA ENDOCTICA
 CMO SE DA EL TRANSPORTE?

Patrones Seales Protenas

de clasificadoras solubles
trnsito.

Las protenas motoras y los elementos del citoesqueleto tienen

papeles clave en los movimientos de las vesculas de transporte.
 DEL RETCULO
ENDOPLSMICO AL
APARATO DE GOLGI: PRIMER
PASO EN EL TRANSPORTE
VESICULAR.
 Los sitios de salida de las cisternas del RER estn desprovistos de
ribosomas, y en ellos se forman las primeras vesculas de transporte de
la va biosinttica.

Despus de desprenderse de la membrana del ER, las vesculas de

transporte se fusionan entre s y forman vesculas ms grandes y tbulos
interconectados en la regin entre el ER y el aparato de Golgi.

Compartimiento intermedio entre el retculo endoplsmico y el aparato de Golgi

(ERGIC)
Imagen 1: Se observa el Aparato de Golgi, el REG y el compartimento que existe entre estos (ERGIC), adems de las vesculas que
salen del REG.
Imagen 2: Se observa el Aparato de Golgi, el REG y el compartimento que existe entre estos (ERGIC), adems de las vesculas que
salen del REG.
EL APARATO DE
GOLGI

Imagen 3: Aparato de Golgi.

 Camillo Golgi, bilogo italiano.

Tincin metlica Clulas nerviosas

Aparato de Golgi.

Centro de controversia:

Organelo

Artefacto

Clulas sin fijacin, preparadas por

congelamiento y fractura. Imagen 4: Camillo Golgi.
Descubri una red teida de negro.

Invent nuevos procedimientos de tincin

1898 para revelar la organizacin de las clulas
nerviosas dentro del SNC.
 Morfologa caracterstica

Cisternas membranosas aplanadas, con bordes dilatados,

vesculas y tbulos asociados.

Cisterna (0.5 y 1.0 micras) Pila (menos de 8 cisternas)

Clula individual (unas-miles de

pilas)

En clulas de los mamferos las pilas estn conectadas entre s por

tbulos membranosos y forman un solo complejo.

Se divide en varios compartimentos con funciones diferentes, desde

cara cis o de entrada, hasta cara trans o de salida.
 VESICULAS

CISTERNAS
Imagen 5: Aparato de Golgi. Se observa la pila compuesta por cisternas de donde se desprender vesculas. Cara cis y
trans de Golgi.
 Cara ms cis del organelo: Red cis de Golgi (CGN).

Funciona como estacin de clasificacin.

Cisternas cis

Cisternas mediales

Cisternas trans

Cara ms trans del organelo: Red trans de Golgi(TGN)

Funciona como estacin de clasificacin.

Planta procesadora
Imagen 6: Se observan los diversos compartimento del Aparato de Golgi; Cara cis o de entrada y cara trans o de
salida.
GLUCOSILACIN EN EL
APARATO DE GOLGI
 La funcin definida con mayor claridad del complejo de
Golgi es el ensamblado de carbohidratos.
Sitio donde se concluye el ensamblado de
oligosacridos a glucoprotenas y glucolpidos.
Sitio de sntesis de la mayor parte de los complejos
polisacridos de la clula.
Estacin principal de procesamiento a lo largo de la va
biosinttica.
Glucoprotenas solubles Pierden residuos y se aaden
y de membrana. secuencialmente otros azcares.

Enzimas, que transfieren un

Glucosiltransferasas monosacrido especfico procedente de
un azcar donador apropiado a un
azcar aceptor apropiado.
Imagen 7: Etapas en la glucosilacin de oligosacridos de mamfero N enlazados en el complejo de Golgi.
 EL MOVIMIENTO DE
MATERIALES A TRAVS DEL
APARATO DE GOLGI
 Desde hace mucho se estableci que los materiales se
mueven por los diversos compartimientos del Aparato de
Golgi; dos nociones de la forma en la que esto ocurre han
dominado durante aos.

MODELO DE MADURACIN DE LAS CISTERNAS

1980 Se aceptaba que las cisternas de Golgi eran
estructuras transitorias. Se presupona que tales cisternas
formaban la cara cis de la pila mediante la fusin de los
portadores membranosos desde el ER y ERGIC y que
cada cisterna se mova fsicamente desde el extremo cis al
trans de la pila y cambiaba de composicin conforme
avanzaba.
Imagen 8: Modelo de maduracin de cisternas.
 MODELO DE TRANSPORTE VESICULAR
1980-1990 Propona que las cisternas de una pila de
Golgi permanecan en su sitio como compartimientos
estables.
El cargamento (protenas secretoras, lisosmicas y de
membrana) se lanza a travs de la pila de Golgi, desde
CGN hasta TGN, en vesculas que se desprenden de
un compartimiento contiguo ms avanzado en la pila.

Aunque ambos modelos aun tienen defensores, el

consenso de opinin regres al modelo de maduracin
de cisternas.
Imagen 8: Modelo de transporte vesicular.
Tipos de transporte en vesculas
y sus funciones.
 La va biosinttica de una clula eucariota consiste en una
serie de distintos organelos limitados por membrana que
participan en la sntesis, modificacin e integracin de
protenas solubles y membranosas en su destino
apropiado en la clula.
Los materiales son transportados entre compartimientos
por vesculas que se desprenden de membranas
donadoras y se fusionan con membranas receptoras.
Cada yema cubierta se desprende para formar una
vescula cubierta.
 Las cubiertas de protena tienen por lo menos 2
funciones:
1.- Actan como deposito mecnico que hacen que la
membrana se curve y forme una vescula desprendible.
2.- Proporciona un mecanismo para seleccionar los
componentes que transportar la vescula, estos
incluyen:
A) Protenas secretoras, lisosmicas y de membrana.
B) La estructura necesaria para dirigir y conectar la
vescula con la membrana correcta.
 En ambos casos la cubierta esta formada por 2
capas distintas de protenas:
Una jaula externa o andamiaje que forma el marco
de la cubierta y una capa interna de adaptadores
que sirve para unir la cara externa de la bicapa
lipdica con el cargamento de la vescula.
 Los 3 tipos de vesculas cubiertas
mejor estudiadas son:
 Vesculas cubiertas con COP II
Desplazan materiales del RE hacia adelante al ERGIC y al
aparato de Golgi.
Seleccionan y concentran ciertos componentes para
transportar en vesculas.
Las protenas seleccionadas por las vesculas incluyen:
(1) Enzimas que actan en etapas avanzadas de la va
biosinttca
(2) Protenas de membrana participantes en acoplamiento y
fusin de la protena con el compartimiento blanco.
(3) Protenas de membrana que pueden unirse a cargamento
soluble.
 Entre las protenas de cubierta COP II se encuentra
una pequea protena G llamada: Sar1, que es
reclutada especficamente en la membrana del RE.
Tiene una funcin reguladora, en este caso, el
inicio de la formacin de la vescula y la regulacin
del ensamblaje de la cubierta de la vescula.
 Vesculas cubiertas con COP I
Mueven materiales en sentido retrgrado del ERGIC y
pila de Golgi hacia atrs al RE y de las cisternas
Golgi trans de regreso a las cis.
 Conservacin y recuperacin de las protenas
residentes del retculo endoplasmtico.
1.- Retencin de las molculas residentes que se
excluyen de las vesculas de transporte.
2.- Recuperacin de las molculas prfugas para
devolverlas a su compartimiento correspondiente.
Seal de recuperacin en su extremo C:
KDEL (lys-asp-glu-leu)
 Ordenamiento de protenas en la TGN
Ordenamiento y transporte de enzimas lisosmicas.
Las protenas lisosomicas se sintetizan en ribosomas unidos
con la membrana en el RE y se transportan al aparato de
Golgi, ciertas enximas reconocen a las enzimas lisosomicas
solubles y catalizan la adicin de un grupo fosfato en dos
pasos a ciertos azucares manosa de las cadenas de
carbohidratos con enlaces N.
Por lo tanto las enzimas lisosomicas actan como seales de
clasificacin.
 Las enzimas lisosomicas se transportan desde la
TGN en vesculas abiertas con clatrina.
Estas vesculas movilizan materiales de a TGN a
los endosomas, lisosomas y vacuolas vegetales.
Tambin mueven materiales de la membrana
plasmtica a los compartimientos citoplasmticos a
lo largo de la va endoctica, y tambin en el transito
de los endosomas y lisosomas.
 Direccionamiento de las vesculas a un
compartimiento particular

1.- Movimiento de la vescula hacia el compartimiento

blanco especfico.
2.- Fijacin de las vesculas al compartimiento blanco.
-Protenas G Rab
 3.- Acoplamiento de las vesculas al compartimiento
blanco:
SNARE, SNARE-v, SNARE-t
4.- Fusin entre las membranas de la vescula y el
blanco.
SNARE-v-SNARE-t
 Exocitosis
La fusin de una vescula secretora o granulo secretor
con la membrana plasmtica y la descarga
subsiguiente de su contenido se llama EXOCITOSIS.
Casi siempre inicia por la liberacin de Ca+2
Poro de fusin.
Cuando una membrana plasmtica se fusiona con una
vescula citoplasmtica, la superficie luminal de la
membrana de la vescula se vuelve la superficie
externa de la membrana plasmtica, mientras que la
superficie citoslica de la membrana de la vescula se
vuelve la cara interna.
Lisosomas-Fagocitosis
 Lisosomas: reciclado de desechos
Descubiertos por de Dube (Blgica) durante los 50s.
Liseyn (gr.) disolver. Soma (gr.) cuerpo.
Digestin celular.

Caractersticas
Tamao: 0,1 1,0 m
Membrana simple
pH ptimo: 5 (cido)
Contenido: hidrolasas cidas
Ez principal: Fosfatasa cida
Funcin: degradacin de sustancias
 Lisosomas: fosfatasa cida

Separa grupos P

Pueden precipitarse bajo iones plomo (Pb )

+2

Pueden aislarse mediante centrifugacin de densidad.

Puede comprobarse su alto contenido (bioqumica Por

determinacin espectrofotomtrica)
 Lisosomas: digestores universales
Endocitosis/fagocitosis

exterior

Heterofagia

Lisosomas
(degradacin)
Autofagia
(componentes
celulares) Catabolismo
Citosol
interior (producto)
Renovacin de
componentes celulares

Formacin de
Novo Anabolismo
(reciclaje)
 Agrupacin de enzimas lisosmicas por especificidad:
Glucosidasas
Proteasas
Nucleasas (DNA-,RNA)
Lipasas, fosfolipasas
Fosfatasas, fosfolipasas
Lizosima (deg. De saco de murena, bac. Gramm +)

pH: generado por bombeo de protones (gasto de ATP)

Necesario pH cido para activacin (5)

Se evita autodigestn por la glicosilacin de la cara interna del

lisosoma y fijacin de sus ez)
 Lisosomas: reciclado perfecto

Degradaci reconstrucc
n in

monmer
Sustanc
os
ia

Catabolismo Anabolismo
Membrana
lisosmica
Biognesis de lisosomas
A.Golgi:
Trans. De P-
residuo de
manosa C6

Vulven
Man- 6P: alerta
receptores:
sobre prot.
reciclaje, vesculas
lisosmica
sin clatrina

Snt. Y
glicosilacin
en RE
A. De Golgi:
rugoso
Lisosomas Red Trans Golgi,
primarios/tardos receptores de
man-6P

Ez primarias: Vesculas
adhesin -clatrina
 Lisosoma o endosoma?

Biognesis
de Derivados de vesculas
lisosomas
maduros desde lisosomas tardos
(eq.a lisosomas).
Maduracin gradual sin
vesculas.

Esa es la cuestin
Lisosomas: papel defensa contra
patgenos

Fagosoma + Endosoma
bacterias tardo

Exposicin
Lisosoma (citosol)

Presentacin Macrfagos
de antgenos

Linfocitos

Respuesta
Anticuerpos humoral
 Desmantelacin de componentes
celulares.
Ez
Protena Protena lisosmi
s/organ s/organ cas
elos elos
R R
E E

Algunas sustancias indigeribles proliferan y

perduran en organismos que envejecen. Ej:
manchas cutneas pigmentos de la vejez.
 Resumen
Regulacin decreciente de receptores
Desintegracin:
Orgnulos envejecidos/daados
De clulas envejecidas
De bacterias fagocitadas
Preparacin de antgenos
LA RESPIRACIN AERBICA Y
LA MITOCONDRIA
 En los primeros 2000
millones de aos, la
atmsfera estaba formada
con molculas reducidas:
H2, NH2, H2O
El planeta estaba formado
por organismos anaerobios
 Hace 2400- 2700 millones de aos, aparecieron
las cianobacterias
Las cianobacterias realizaban un nuevo proceso
fotosinttico
Despus de su aparicin, la atmsfera acumul
cantidades significativas de oxgeno.
ESTRUCTURA Y FUNCIN DE LA MITOCONDRIA
 Segn el tipo celular, las mitocondrias
pueden tener una estructura general
muy diferente
Forma arrionada, long. 1-4 m
Organelos dinmicos capaces de sufrir
cambios en su forma
-Se conocen principalmente por su funcin
en la generacin de ATP

Para lograrlo se relacionan con material

oleoso que contiene cidos grasos de las
que obtiene materia prima para oxidar.

-Contienen ms de mil protenas diferentes

-Ocupan del 15-20% del volumen de una

clula heptica
 Fusin(unirse) y fisin(dividirse).

El equilibrio entre estos procesos es un

factor determinante de cantidad,
longitud y grado de interconexin.
 Son notables en distintas clulas vegetales
Son principales productores de ATP en
tejidos no fotosintticos
Y fuente de ATP en clulas de hojas
fotosintticas en periodos de oscuridad
 Sitio de sntesis de muchas sustancias
includos aa. Y grupos Hem1)

Participa en proceso de apoptosis2.

Junto con el RE funciona en la

regulacin de Ca+ del citosol.

2 1
 Membranas mitocondriales

Membrana Membrana
mitocondrial mitocondrial
Espacio
externa interna
intermembranal

Porinas1

I. Membrana II. Membrana de

1 limitante interna las crestas

Uniones de las crestas

Matriz
mitocondrial
Membrana mitocondrial externa: Rodea por completo la
mitocondria, sirve como lmite externo.

Membrana mitocondrial interna: Se subdivide en dos

dominios interconectados estrechamente.

-Membrana limitante interna: Envoltura externa de doble

membrana que contiene protenas encargadas de
transporta protenas mitocondriales

-Crestas: Alojan la maquinaria necesaria para la

respiracin aerbica y formacin de ATP.
Las membranas de la mitocondria dividen al organelo en 2 compartimentos
acuosos:

Al interior de la mitocondria: Matriz, conc. De protenas solubles

Entre membrana interna y externa: Espacio intermembranal, participan en
apoptosis.

Propiedades de las membranas

Membrana Externa: -Lpidos
-enzimas importantes en oxidacin de adrenalina, degradacin
de triptfano, y elongacin de cidos grasos.

Membrana Interna: Compuesta por ms de 100 polipptidos diferentes, rica en

cardiolipina. Es impermeable.
 Porinas
Se encuentran tambin en la membrana mitocondrial externa y Consisten
en un barril de hoja beta, forman aperturas que a travs de ellas pueden
penetrar molculas de tamao moderado

Pueden realizar un cierre reversible

Cuando los canales estn abiertos, hay una permeabilidad a molculas

como ATP, NAD y Coenzima A.
Estructura interna
tridimensional1 y corte
delgado2 de
mitocondria de tejido
cardiaco bovino.
 Matriz mitocondrial
o En la matriz mitocondrial tienen lugar diversas rutas metablicas
como el Ciclo de TCA y la beta oxidacin de los cidos grasos.

o Las mitocondrias tienen su propio material gentico (ADNmt) y sus

propios mecanismos para producir ARN y protenas
o El ADN mitocondrial humano codifica dos ARN ribosmicos y
22 ARN de transferencia(ARNt)

o Evolutivamente el ADNmt, probablemente desciende de

genomas, que fueron englobadas por un antiguo ancestro de
las clulas eucariotas
Metabolismo oxidativo en la mitocondria
A partir de la glucosa, el proceso oxidativo lo levan a cabo las enzimas de la glucolisis que se
encuentran en el citosol.
En presencia de oxgeno, cada molcula de piruvato producida en la gluclisis se transporta
hacia la matriz y forma un grupo acetilo de 2 carbonos y se transfiere con coenzima A: acetil-
CoA, pasa por el ciclo TCA y se generan NADH y FADH2. Pasan por cadena transportadora
de , hasta llegar a O2.
La energa liberada se usa para la formacin de ATP.
Va de gluclisis
Ciclo del cido tricarboxlico (TCA)
Los electrones retirados de los sustratos se
transfieren al FAD y NAD+ para formar FADH2 y
NADH
Los transferidos de los sustratos al FADH2 y
NADH pasan por una cadena de portadores de ,
hasta el O2.

Se libera energa que se emplea para generar un

gradiente electroqumico a travs de la membrana
mitocondrial interna
LA FUNCIN DE LA MITOCONDRIA
EN LA FORMACIN DE ATP
 Extraen energa de materiales
orgnicos y almacenan -> elctrica

Gradiente inico Atraves de

membrana mitocondrial
interna

Para impulsar actividades

que requieren energa

Sntesis de ATP
 Fosforilacin oxidativa

Formacin de ATP se impulsa con la energa

liberada de los electrones retirados durante la
oxidacin del sustrato
2x1026 molculas de ATP en el cuerpo cada da.
Potenciales de oxidacin-
reduccin.
 Poder reductor: menor
Poder oxidante: mayor afinidad por los
afinidad por los electrones (potencial
electrones. para transferir
electrones)

Los agentes reductores y oxidantes se

encuentran en parejas como NAD+ y NADH
Los agentes reductores potentes se unen con
agentes oxidantes dbiles.
Para una pareja determinada se mide
potencial de oxido-reduccin
Transporte de electrones
 Se transfieren por
CADENA
Los electrones de Relacionados con una serie de
TRANSPORTADORA
alta energa FADH y NADH portadores
DE ELECTRONES
especficos

Flavo protenas
Citocromos
tomos de cobre
(complejo 5)
Ubiquinona
Protena de
hierro y azufre
Di nucletido de flavina
adenina

Mono nucletido de
flavina
Cuando alternan:
 Contiene una
cadena
hidrfoba larga

Unidades
isoprenoides
de 5 carbonos
 Y luego Forma agua
Los portadores estn Se oxida por la
en orden de potencial perdida de electrones
Transportador se
reduce con la
ganancia de
a favor del portador
que sigue Acepto
Redox positivo
electrones del
portador precedente Electrones pierden
r final
energa con forme de
creciente
desplazan O2
Ubiquinona y
citocromo c no son
parte de ninguno de
los 4 complejos.
 Se mueven dentro o
a lo largo de la
La Ubiquinona existe
El citocromo c es una membrana y
como parte de una
protena soluble en transfieren
reserva de molculas
el espacio electrones entre los
disueltas en la
intermembranal complejos
bicapa lipdica.
protenicos grandes
e inmviles.
 Gradiente de protones
para impulsar sntesis de
ATP

Energa liberada
BOMBAS DE se conserva se
3 sitios en los que la transferencia PROTONES conserva por
de electrones se acompaa de translocacin de
una liberacin notable de energa. protones
Ocurre entre portadores de los
complejos I, III y IV
Complejos transportadores de
electrones
 Puerta de entrada
Conglomerado
1 par de
enorme con forma
electrones =
4 protones de L que contiene
por lo menos 45
subunidades
diferentes

Transferencia de
electrones de NADH a
Ubiquinona (UQ) para
formar ubiquinol
(UQH2)
 Consiste en 4
polipptidos:
2 subunidades hidrfobas
3 cmulos
2 Subunidades hidrofilias
diferentes
hace que se
muevan los
electrones

Va par alimentar a
los electrones de baja
densidad
Ubiquin
ona

FA
DH
No translocacin de
protones

Succinato a
Ubiquinona y FAD
 Tres subunidades contienen grupo Redox:
Citocromo b (2 molculas de hem B)
Citocromo c1
Protena con hierro y azufre

Transferencia d electrones de
ubiquinol a citocromo C

Se bombean 4 protones por cada par de

electrones.

2 protones de la molcula de ubiquinol

que ingreso al complejo

2 protones se retiran de la matriz y

trasladan como parte de una segunda
molcula de ubiquinol.
 Transferencia sucesiva de
electrones del citocromo C
reducido al oxigeno

4 cit c^2 + 4H + O2 -> 2 cit

C3 + 2 H2O
Aumen
to

Por cada molcula O2

reducida se captan 8
protones de la matriz

Expulsi
n de 4 formacin de 2 molculas
H -> de agua (produce 300 ml de
cada agua metablica) SUSTRATO
de PH

4 se trasladan Atraves de la
membrana y se liberan
BOMBEADO
Translocacin de protones y establecimiento
de una fuerza motriz para protones
 Gradiente electroqumico:
Gradiente de PH: Diferencia
de concentracin de iones
La energa Translocacin es hidrogeno
Voltaje: por la separacin de
libre producida electro gnica.
cargas Atraves de la
membrana.
durante el
transporte de Cargas positivas
electrones se en espacio
intermembranal y Fuerza motriz:
utiliza para citosol. Energa presente en ambos
componentes del gradiente
mover electroqumico al combinarse (220
mV)
protones. Cargas negativas 80% componente de
dentro de matriz voltaje
20% diferencia de
concentracin de
protones
Mecanismos para la formacin
de ATP
 Efram Racker ATP-
Humberto
Fernndez Facto de asa
Moran acoplamiento
1 (F1)
La estructura de la sintasa de ATP
 Forma
alternada
(polipptid
os)
Peroxisomas

La respiracin aerbica y la mitocondria.

Parada Huerta Jess

Quebrado Bentez ngel Sebastin
Cruz Kevin
Seccin 07
Origen
Formacin de la tierra

2 000 millones de aos 2 400 a 2 700 millones

Anaerobios Cianobacterias
(glucolisis/ fermentacin) (fotosntesis)

Seleccin Natural
Cantidad limitada de energa
Aerobios.

Oxidacin completa
Etanol/C3H6O3

Procariotas y Eucariotas

Mitocondria
(bacteria aerobia) en anaerobia
 ESTRUCTURA Y FUNCIN DE LA MITOCONDRIA

1 a 4 m.

Forma arrionada.

Red tubular interconectada.

15 a 20% del volumen de una clula heptica.

Pueden fusionarse entre s o dividirse (fisionarse).

+fisin = ms numerosas, pequeas y distintivas.

+fusin = tienden a volverse ms alargadas e interconectadas.

Pueden sufrir mutaciones en genes que de fusin. (Enfermedades neurolgicas

hereditarias).
 Funcin.
Generan ATP. Se relacionan con cidos grasos, a partir de los cuales
obtienen materia prima para oxidar.

En conjunto con el Retculo Endoplsmico, regulan la concentracin

de Ca2+ del citosol.

Participan en captacin y liberacin de Ca2+ (iniciadores de

actividades celulares).

Sitio de sntesis de ciertos aminocidos y los grupos hem.

Productoras de ATP en fase oscura.

Regula fenmenos de apoptosis.

Membranas mitocondriales
Matriz. (500 mg/ml) de E.IM: Protenas que
protenas hidrosolubles. participan en apoptosis.

Mitocondrial
lmite externo
externa

MEMBRANAS
MITOCONDRIALES

Protenas
Membrana limitante interna Envoltura externa de importadoras
doble membrana

Mitocondrial
interna
Crestas Aloja Respiracin aerbica
(uniones de las formacin de ATP
crestas) (invaginaciones) maquinaria
 Membrana Membrana
Externa. Interna

+100 polipptidos diferentes

lpidos y enzimas 1protena/15fosfolpidos

Oxidacin de adrenalina Cardiolipina

Degradacin del triptfano (fosforilacin oxidativa)
Elongacin de cidos grasos (vestigio)

Porinas.
(Protenas integrales)
Canales abiertos (M. Externa) M. Interna es impermeable

Permeable: ATP, NAD y coenzima A Molculas e iones requieren

transportadores.
Metabolismo energtico mitocondrial.
LA RESPIRACIN AERBICA Y LA MITOCONDRIA.
Matriz mitocondrial

Tienen mecanismos para producir su propio RNA y protenas.

Su DNA codifica polipptidos mitocondriales (13 en humanos).

DNA humano codifica dos RNA ribosmicos y 22 tRNA.

RNA polimerasa es una enzima de una sola subunidad

El mtDNA puede ser usado para rastrear linaje.

 METABOLISMO OXIDATIVO EN LA MITOCONDRIA
Revisin del metabolismo de los
carbohidratos.

La gluclisis piruvato/NADH.
Sin O2, piruvato se reduce por
NADH a lactato
El NAD+ se reutiliza.
Con O2, piruvato va hacia la matriz
(con un transportador de
membrana)
Piruvato se descarboxila, acetil,
se une a CoA acetil-CoA.
Se genera NADH.
NADH dona sus electrones a un
compuesto que cruza la membrana
M.Interna
CoA pasa por el ciclo TCA.
Se genera NADH y FADH. Sus
electrones pasan a la cadena de
transporte de electrones.
1glu=36 ATP
Revisin de la glucolisis.

Fosforilacin por un ATP, reordenamiento estructural, fosfato de fructosa, se

fosforila por un segundo ATP. Ambos fosfatos se sitan en C1, C6.

Fructosa 1,6-difosfato se divide en Gliceraldehido 3-fosfato (2).

El aldehdo se oxida , forma un acido. los electrones retirados reducen a NAD+ en

NADH. El acido C1 se fosforila , forma fosfato de acilo (puede transferir un grupo
de alto fosfato)

El fosfato de C1 se transfiere a ADP, forma ATP por fosforilacin. Se forman dos

ATP por C/Glu.

Se produce reacomodo y deshidratacin del sustrato, formando un fosfato de enol

C2 (puede transferir un grupo de alto fosfato.)

El fosfato se transfiere al ADP , forma ATP por fosforilacin, generando una cetona
en C2. Se forman dos ATP por cada glucosa oxidada.

REACCION NETA:
Glucosa + 2 NAD+ + 2 ADP + 2 Pi = 2 Piruvato + 2 ATP + 2 NADH + 2 H+
+ 2 H2O
30 ATP. En mitocondria
Ciclo del acido tricarboxilico (TCA).
CoA transfiere un acetilo (2C) al Oxalacetato
(4C)= citrato (6 C)
Acido ctrico pierde H2O=Aconitato.
Aconitato recoge H20, citrato se reorganiza
=isocitrato (6C)
La deshidrogenasa mitocondrial depende de
NAD+ y de Mn2+ o Mg2+. Es catalizada la
oxidacin del isocitrato a oxalsuccinato=NADH
a partir de un NAD+.
Descarboxilacin, sale CO2=alfa-
cetoglutarato (5C) (dos carboxilos en
extremos) y una cetona en posicin alfa.
El alfa- cetoglutarato sufre descarboxilacin
oxidativa (unin de una CoA con el alfa-
cetoglutarato)=succinil CoA.
CoA se retira del succinil CoA=succinato.
Por oxidacin del succinato al hallar FAD =
fumarato y FADH2.
fumarato Reacciona H2O por Fumarasa=
malato.
Malato se oxida al encontrarse con un NAD=
oxaloacetato y un NADH+
La importancia de las coenzimas reducidas
en la formacin de ATP
Los productos primarios del ciclo del TCA son las
coenzimas reducidas FADH2 y NADH.
Las mitocondrias no son capaces de importar el NADH
formado en el citosol durante la gluclisis. En lugar de
eso, los electrones de NADH se usan para reducir un
metabolito de bajo peso molecular que puede
1) entrar a la mitocondria y reducir ah el NAD+ a NADH.
2) transferir sus electrones a FAD para producir FADH2.
 Paso 1 . Los electrones de alta energa
pasan de FADH2 o NADH a lo largo de
la cadena respiratoria en reacciones
que liberan energa. Como resultado, la
energa liberada se almacena en forma
de un gradiente electroqumico de
protones a travs de la membrana.
Paso 2 El movimiento controlado de
protones de regreso a travs de la
membrana mediante una enzima que
sintetiza ATP proporciona la energa
necesaria para fosforilar ADP en ATP
 5.3 LA FUNCIN DE LA MITOCONDRIA
EN LA FORMACIN DE ATP
La energa obtenida de los sustratos se utiliza para generar
un gradiente inico a travs de la membrana mitocondrial
interna
Fosforilacion oxidativa es el proceso por el cual el flujo de
electrones por la cadena respiratoria genera ATP
Potenciales de oxidacin-reduccin

Ms potente es el agente
oxidante mientras mayor sea su
afinidad a los electrones
El agente reductor es ms fuerte
cuando tiene mayor facilidad para
liberar los electrones .
Los agentes reductores potentes
se unen con agentes oxidantes
dbiles y viceversa.
 El potencial redox de la pareja estndar, E0, para una
pareja determinada se designa como el voltaje producido
por una media clula en la que cada miembro de la pareja
est presente en una concentracin estndar en
condiciones normales. Las concentraciones estndar son
1.0 M para los solutos e iones y 1 atm para los gases a
25C.
 El cambio estndar de energa libre durante una reaccin puede
calcularse a partir de los potenciales redox estndar de las dos
parejas de la reaccin de acuerdo con la siguiente ecuacin:
G' = nF E'0
donde n es el nmero de electrones transferidos en la reaccin,
F es la constante de Faraday (23.063 kcal/V mol)
E'0 es la diferencia en voltios entre los potenciales redox estndar
de las dos parejas.
 NADH + 1/2O2 + H+ H2O + NAD+
Los potenciales redox estndar de las dos parejas son:
1/2O2 + 2 H+ + 2e H2O E'0 = +0.82 V
NAD+ + 2 H+ + 2e NADH + H+ E'0 = 0.32 V
El cambio de voltaje para la reaccin total es igual a la diferencia
entre los dos valores de E'0 (E'0):
E'0 = +0.82 V (0.32 V) = 1.14 V
 G'0 = (2) (23.063 kcal/V mol) (1.14 V) = 52.6 kcal/mol
de NADH oxidado
El descenso de energa libre de un par de electrones a su
paso de NADH al oxgeno molecular (G = 52.6
kcal/mol) debe ser suficiente para impulsar la formacin de
varias molculas de ATP (G' = +7.3 kcal/mol)
 Transporte de electrones

Cinco de las reacciones del ciclo de Krebs estn

catalizadas por deshidrogenasas. Cuatro de estas
reacciones generan NADH, una produce FADH2
Las molculas de NADH, que se forman en la matriz
mitocondrial, se disocian de sus deshidrogenasas
respectivas y se unen con la deshidrogenasa de NADH,
una protena integral de la membrana mitocondrial interna.
 Tipos de portadores de electrones

La cadena transportadora de electrones se compone de

cinco tipos de portadores de electrones unidos con la
membrana: flavoprotenas, citocromos, tomos de cobre,
ubiquinona y protenas con hierro y azufre.
 Las flavoproteinas

Contienen flavina mononucletido (FMN)o

flavina adenina dinucletido (FAD) como grupos
prostticos, se forman a partir de riboflavina
Las principales flavoprotenas de las
mitocondrias son la deshidrogenasa de NADH
de la cadena de transporte de electrones y la
deshidrogenasa de succinato del ciclo del TCA.
 Los citocromos

Citocromos: hemoproteinas que contienen hierro, el

cual oscila entre
Fe3+
Fe2+
Hay tres tipos distintos de citocromo, a, b y c, en la
cadena transportadora de electrones que difieren
entre s por las sustituciones dentro del grupo hem
 Tres tomos de cobre que se
localizan dentro de un solo complejo
proteico de la membrana mitocondrial
interna aceptan y donan un solo
electrn cuando alternan entre los
estados de oxidacin Cu2+y reduccin
de Cu1+.
La ubiquinona puede aceptar y donar
dos electrones y dos protones.
 Las protenas con hierro y azufre
Los centros ms frecuentes
contienen dos o cuatro tomos
de hierro y azufre, designados
[2Fe-2S] y [4Fe-4S], y
enlazados con la protena en
los residuos de cistena.
Aunque un solo centro puede
tener varios tomos de hierro,
el complejo entero es capaz de
aceptar y donar un solo
electrn.
 Complejos transportadores de electrones

Pueden aislarse los diversos portadores de electrones

como parte de cuatro complejos distintos asimtricos que
cruzan toda la membrana y que se identifican como
complejos I, II, III y IV
Complejo I (deshidrogenasa de NADH)
Cataliza la transferencia de un par de electrones de NADH a la
ubiquinona (UQ) para formar ubiquinol (UQH2).
El complejo I incluye una flavoprotena con FMN que oxida al NADH,
por lo menos ocho centros de hierro-azufre distintos y dos molculas
unidas de ubiquinona.
Se cree que el paso de un par de electrones por el complejo I se
acompaa del movimiento de cuatro protones de la matriz haciabel
espacio intermembranal.
Complejo II (o deshidrogenasa de succinato)

En el complejo II, se forma FADH2 durante la

conversin de succinato en fumarato en el ciclo del
cido ctrico y a continuacin los electrones se
pasan por medio de varios centros Fe-S hacia Q
 Complejo III (o citocromo bc ) 1

El complejo III cataliza la transferencia de

electrones del ubiquinol al citocromo c. Las
evaluaciones experimentales sugieren que se
bombean cuatro protones a travs de la membrana
por cada par de electrones que se transfiere por el
complejo III
Se cree que el proceso incluye citocromos c1, bL y
bH, y un Fe-SRieske.
 Complejo IV (o citocromo oxidasa c)

El complejo IV cataliza la reduccin de O2, este

complejo es una enorme estructura de polipptidos
conocida como citocromo oxidasa.
Se cree que por cada molcula de O2 reducida por
la citocromo oxidasa se captan ocho protones de la
matriz.
5.4 TRANSLOCACIN DE PROTONES Y
ESTABLECIMIENTO DE UNA FUERZA
MOTRIZ PARA PROTONES
 La translocacin de protones a traves de la membrana interna
es electrogenica porque aumenta la cantidad de cargas positivas
en el espacio intermembranoso y el citosol, asi como una mayor
cantidad de cargas negativas dentro de la matriz.
Por lo tanto, hay dos componentes del gradiente de protones
que deben considerarse. Uno de ellos es la diferencia en la
concentracion de iones hidrogeno entre un lado de la
membrana, es decir, un gradiente de pH.
 El otro componente es el voltaje () que se produce por
la separacin de carga a travs de la membrana. Un
gradiente que tiene un componente de concentracin y
otro elctrico es un gradiente electroqumico.
La energa presente en ambos componentes del gradiente
electroqumico puede combinarse y expresarse como
fuerza motriz de protones (p).
 Peter Mitchell propuso la "hiptesis quimiosmtica" en
1961. Esta teora propone esencialmente que la mayor
parte de la sntesis de ATP en la respiracin celular, viene
de un gradiente electroqumico existente entre la
membrana interna y el espacio intermembrana de la
mitocondria, mediante el uso de la energa de NADH y
FADH2 que se han formado por la ruptura
de molculas ricas en energa, como la glucosa.
 La contribucin del potencial elctrico a la fuerza motriz de
protones comparada con la contribucin que hace el
gradiente de pH depende de las propiedades de
permeabilidad de la membrana interna.

Ejemplo, si el movimiento de protones hacia el exterior

durante el transporte de electrones se acompaa de iones
cloro con carga negativa, el potencial elctrico () se
reduce sin afectar el gradiente de protones (pH).
 El voltaje transmembranoso a travs de la membrana
mitocondrial interna puede visualizarse con tintes
liposolubles de carga positiva que se distribuyen a travs
de las membranas en proporcin con el potencial elctrico.
 El papel del DNP
Cuando las clulas se tratan con cierto tipo de agentes
liposolubles, en particular 2,4-dinitrofenol (DNP), contina
la oxidacin de sustratos sin poder generar ATP.
Tiene la capacidad de aislar el flujo de los electrones y
el bombeo de H+ de la sntesis de ATP. Esto significa
que la energa de la transferencia de electrones no se
puede usar para la sntesis de ATP.
En otras palabras, el DNP desacopla la oxidacin de la
glucosa y la fosforilacin del ADP.
5.5 MECANISMOS PARA LA FORMACIN
DE ATP
 A principios de 1960, Humberto Fernandez Moran,
examin mitocondrias aisladas con la tcnica de
tincin negativa
Efraim Racker, aisl las esferas de la membrana
interna, a las que llam factor de acoplamiento 1, o
F1. Racker descubri que las esferas F1 se
comportaban como una enzima que hidroliza el ATP,
es decir, una ATP-asa.
Una enzima que utiliza la energa obtenida de la hidrlisis del
ATP para exportar Na+ e importar K+ contra sus gradientes
respectivos. En la clula, esta es la nica funcin de la
enzima
 La estructura de la sintasa de ATP

Es un complejo protenico en forma de hongo

conformada por dos componentes principales: una
cabeza F1 esfrica y una seccin basal, llamada
F0, incrustada en la membrana interna.
La base F0 contiene un canal por el cual se
conducen los protones desde el espacio
intermembranal a la matriz.
La presencia de un canal transmembranoso
Las partculas submitocondriales intactas son capaces de
realizar la oxidacin de sustrato, la formacin de un
gradiente de protones y la formacin de ATP.
 La base de la formacin de ATP de acuerdo
con el mecanismo de cambio de unin

Paul Boyer de la UCLA public una hiptesis

innovadora en 1979 denominada mecanismo de
cambio de unin.
 1. La energia liberada con el movimiento del
proton no se usa para impulsar la fosforilacion
del ADP en forma directa, sino que se emplea en
cambiar la afinidad de union del sitio activo por
el producto ATP.
Se demostr que una vez que el ADP y el Pi se
unen dentro del sitio cataltico de la ATP sintasa, los
dos reactivos se condensan con facilidad para
formar una molcula de ATP unida con firmeza sin
el ingreso de energa adicional.
 Esto no significa que el ATP pueda formarse del
ADP sin gasto energtico, sino que se requiere
energa para la liberacin del producto que est
unido con fuerza al sitio cataltico y no para el
fenmeno mismo de fosforilacin.
 2. Cada sitio activo progresa de manera
sucesiva por tres diferentes conformaciones
con afinidades distintas por los sustratos y los
productos.

Cada F1 posee tres sitios catalticos para la sntesis

de ATP, uno en cada subunidad , estos tres sitios
mostraron diferentes propiedades qumicas.
 En cualquier instante, un sitio est en la
conformacin laxa o L, en la que el ADP y el Pi
estn unidos con soltura.
Un segundo sitio est en la conformacin
ajustada o T, sustratos ADP + sustratos Pi o
producto ATP estn unidos con fuerza.
El tercer sitio est en la conformacin abierta u
O, que permite la liberacin del ATP porque posee
una afinidad muy baja por los nucletidos.
 3. El ATP se sintetiza por catalisis rotatoria, en
la que una parte de la ATP sintasa rota en
relacion con otra parte.
Para explicar los cambios secuenciales en la
conformacin de cada uno de los sitios catalticos,
Boyer propuso que las subunidades y de F1,
giran en relacion con el tallo central.
En este modelo, que se conoce como catalisis
rotatoria.
 Evidencia que apoya el mecanismo de cambio en la
unin y catlisis rotatoria
La publicacin que hicieron John Walker de un modelo
atmico detallado de la cabeza F1
Primero, revel la estructura de cada uno de los sitios
catalticos en una enzima esttica
Segundo, revel que la subunidad de la enzima mantiene
una posicin perfecta dentro de la ATP sintasa El extremo
apical de la subunidad es asimtrico y en cualquier instante
determinado diferentes caras de la subunidad interactan
con las distintas subunidades , lo que hace que adopten
conformaciones diferentes (L, T y O).
 Masasuke Yoshida
Primero, prepararon una versin
con modificaciones genticas de
la porcin operativa de la ATP
sintasa, consistente en tres
subunidades , tres subunidades
y una subunidad (33). Este
complejo polipptido se fij por su
cabeza a un cubreobjetos de
vidrio y se conect un pequeo
filamento de actina, con marca
fluorescente al extremo de la
subunidad que se proyectaba
hacia el medio
La preparacin se incub con ATP
y se observ al microscopio,
Uso del gradiente de protones para impulsar los
mecanismos catalticos: la funcin de la porcin F0 de la
ATP sintasa.
1. Las subunidades c de la base F0 se ensamblaban en un
anillo que se encuentra dentro de la bicapa de lpidos.
2. El anillo c est unido con la subunidad gamma del tallo.
3. El movimiento colina abajo de los protones por la
membrana impulsa la rotacin del anillo de subunidades c.
4. La rotacin del anillo c de F0 proporciona la fuerza de
torsin (torque), impulsa la rotacin de la subunidad gamma.
 Durante la explicacin siguiente del modelo hay
que tener en mente:
1) que las subunidades del anillo c pasan en forma
sucesiva por una subunidad estacionaria a.
2) que los protones se recogen del espacio
intermembranal uno a la vez por cada subunidad c
y se transportan por completo alrededor de un
circulo antes de liberarse en la matriz.
 Cada subunidad a tiene dos medios canales Un
medio canal conduce del espacio intermembranal
hacia el centro de la subunidad a
Otro del centro de la subunidad a hacia la matriz.
 La asociacin/disociacin de cuatro protones en la
forma descrita movera el anillo 120. El
movimiento del anillo c en 120 impulsara la
rotacin correspondiente de la subunidad gamma,
lo cual posibilitara la liberacin de una molcula
recin formada de ATP por el complejo F1.
 PEROXISOMAS.

Orgnulos citoplasmticos que contienen oxidasas y

catalasas. Slo se encuentran en clulas eucariotas.
 Caractersticas.
Vesculas.
0.1 y 1 m.
Contienen +50 enzimas. Cmulo.
Fisin/Fusin o biognesis en retculo endoplsmico.
Tienen peroxinas (ingreso de PTS1 o PTS2).
Contienen luciferasa.
Aminotransferasa.
 Funcin.
Acorta cidos grasos (24-26C).
Sntesis de plasmalgenos.
Oxidacin de la cadena lateral del colesterol.
Glioxisomas.
Sntesis de steres lipdicos del glicerol.
Urato oxidasa, glucolato oxidasa y oxidasas de aminocidos generan
H2O2
Evita descontrol del ciclo celular.
 Enfermedades consecutivas a la funcin anormal
de peroxisomas
Sndrome de Zellweger
Anomala hereditaria.
Alteraciones: neurolgicas, visuales y hepticas
Muerte en la lactancia temprana.
Mutacin en 12 genes.
Las clulas hepticas y renales tienen peroxisomas
vacos.
Suprarrenoleucodistrofia (ALD)

Exposicin en parte intermedia de la infancia.

Alteraciones: insuficiencia suprarrenal y disfuncin

neurolgica.

Se debe al defecto de la protena trasportadora de

cidos grasos de cadena muy larga (VLCFA).
Destruccin de vainas de mielina.
 Enfermedades consecutivas a la funcin anormal
de mitocondrias

La mayor parte de estas enfermedades se caracteriza

por degeneracin del tejido muscular o cerebral, ya que
los dos utilizan cantidades enormes de ATP
La gravedad de estos trastornos vara desde
enfermedades que causan la muerte durante la
lactancia, hasta los que causan convulsiones, ceguera,
sordera y/o episodios parecidos a un accidente
vascular cerebral, y hasta trastornos leves
caracterizados por intolerancia al ejercicio o
espermatozoides inmviles.
 Se cree que los cambios degenerativos en la
funcin mitocondrial contribuyen a varias
enfermedades neurolgicas frecuentes de inicio en
el adulto, en particular la enfermedad de Parkinson
Desde hace mucho se ha especulado que la
acumulacin gradual de mutaciones en el mtDNA
es un factor causal importante en el envejecimiento
humano.
 BENEMERITA UNIVERSIDAD AUTONOMA DE PUEBLA

BIOLOGIA CELULAR
MC. JOSE FERNANDO HUERTA ROMANO
EQUIPO #4 RESPIRACION AEROBIA Y LA MITOCONDRIA
BOTELLO ANGELES LIZBETH
COTA DURAN MIRIAM SAMANTHA
5.1 Estructura y funcin de la
mitocondria
 Las membranas de la mitocondria dividen al organelo en
dos compartimientos acuosos, uno en el interior de la
mitocondria, llamado matriz, y el segundo entre las
membranas interna y externa, llamado espacio
intermembranal. La matriz tiene una consistencia
gelatinosa por la elevada concentracin (hasta 500
mg/ml) de protenas hidrosolubles.
Las protenas del espacio intermembranal son mejor
conocidas por su participacin en el inicio del suicidio
celular o apoptosis
 MEMBRANAS MITOCONDRIALES
La membrana mitocondrial externa y la membrana bacteriana externa
contienen porinas, que son protenas integrales que poseen un canal interno
relativamente grande (2 a 3 nm) rodeado por un barril de cadenas .
porinas de la membrana mitocondrial externa no son estructuras estticas,
como alguna vez se pens, sino que pueden realizar un cierre reversible
como respuesta a las condiciones dentro de la clula.
Cuando los canales de porina estn abiertos, la membrana externa es
permeable a molculas como el ATP, NAD y coenzima A, que tienen
funciones clave en el metabolismo energtico dentro de la mitocondria. En
cambio, la membrana mitocondrial interna es impermeable; todas las
molculas e iones requieren transportadores de membrana especiales para
ingresar a la matriz.
La membrana mitocondrial interna se subdivide en dos dominios interconectados.

Uno de stos, la membrana limitante interna, se encuentra justo por dentro de

la membrana mitocondrial externa, forma una envoltura externa de doble
membrana.
El otro dominio de la membrana mitocondrial interna se encuentra en el interior
del organelo como una serie de hojas membranosas invaginadas, llamadas
crestas.
 Matriz mitocondrial

la matriz mitocondrial contiene ribosomas (de tamao mucho menor

a los que se encuentran en el citosol) y varias molculas de DNA, el
cual es circular en plantas superiores y animales. Por lo tanto, las
mitocondrias tienen su propio material gentico y los mecanismos
para producir su propio RNA y protenas.
Este DNA no cromosmico es importante porque codifica un
pequeo nmero de polipptidos mitocondriales (13 en los seres
humanos) que se integran a la membrana mitocondrial interna con
los polipptidos codificados por genes que se encuentran en el
ncleo.
Imagen de matriz mitocondrial
 Estructura de la mitocondria

Mitocondria vista en
microscopio electrnico.
 funcin
Aunque el metabolismo energtico ha sido el centro de inters en el
estudio de las mitocondrias, estos organelos tambin participan en
otras actividades no relacionadas. Por ejemplo, las mitocondrias son el
sitio de sntesis de muchas sustancias, incluidos ciertos aminocidos.
Tambin tienen una participacin vital en la captacin y liberacin de
iones calcio, que son iniciadores esenciales de actividades celulares y
junto con el retculo endoplsmico, las mitocondrias tienen un funcin
importante en la regulacin de la concentracin de Ca2+ del citosol.
El proceso de muerte celular, que tiene un sitio enorme en la vida de
todos los animales multicelulares, tambin se regula en gran medida
por fenmenos que ocurren en las mitocondrias
 Fusin y fisin mitocondrial
Es probable que el equilibrio entre la
fusin y la fisin sea un factor determinante
de la cantidad, longitud y grado de
interconexin de las mitocondrias. Cuando
la fusin se vuelve ms frecuente que la
fisin, las mitocondrias tienden a volverse
ms alargadas e interconectadas, mientras
que el predominio de la fisin conduce a la
formacin de mitocondrias ms
numerosas, pequeas y distintivas.
Varias enfermedades neurolgicas Resultado de una microscopia de
hereditarias se deben a mutaciones en fluorescencia que marca especficamente las
los genes que codifican los mitocondrias de un fibroblasto de un ratn.
componentes de la maquinaria de
fusin mitocondrial.
La culminacin del proceso de fusin viene dirigida por opa1, una gtpasa ubicada en la
propia membrana interna de la mitocondria. la sobre-expresin de esta protena conlleva
un incremento de la fusin y su deficiencia conduce a la fisin de las mitocondrias
mediante la reduccin y desorganizacin de la membrana de las crestas mitocondriales.
este proceso puede afectar severamente la capacidad respiratoria de la mitocondria y
sensibilizar la clula a la apoptosis.

LAS PRINCIPALES PROTENAS IMPLICADAS

EN LA FUSIN DE LA MEMBRANA EXTERNA
DE LA MITOCONDRIA SON LAS GTPASAS
MITOFUSINAS 1 Y 2 (MFN1 Y MFN2,
RESPECTIVAMENTE), QUE SE UBICAN EN LA
PROPIA MEMBRANA EXTERNA.
Drp1 tambin es una protena GTPasa pero, a diferencia de las mitofusinas y de Opa1, se
ubica en en el citoplasma de la clula en casi su totalidad. Durante la fisin, Drp1 es reclutada
por dos posibles receptores a la membrana externa de la mitocondria.
la fisin mitocondrial es importante para muchos procesos habituales de la propia clula. En
consecuencia, se est viendo que el reclutamiento de Drp1 es un proceso verdaderamente
complejo ya que incluye toda una serie de modificaciones post-traduccionales distintas segn
el contexto celular.
Durante la fisin, Drp1 se agrupa en la mitocondria y, mediante la oligomerizacin de muchos
dmeros de Drp1, procede al estreimiento de la membrana de una forma dependiente de GTP.
Una mala regulacin de Drp1 puede dar lugar a patologas como obesidad,
enfermedades neurodegenerativas, diabetes y cncer.
5.2 Metabolismo oxidativo en la
mitocondria
 Ciclo del cido tricarboxlico

tambin se llama ciclo de Krebs en honor del

cientfico que lo formul o bien ciclo del cido
ctrico por el primer compuesto que se forma en l.
La importancia de las coenzimas reducidas en la formacin de
ATP

A partir de la ecuacin neta del ciclo del TCA resulta

evidente que los productos primarios de la va son las
coenzimas reducidas FADH2 y NADH, que contienen
los electrones de alta energa retirados de varios
sustratos durante su oxidacin. El NADH tambin es
uno de los productos de la gluclisis (junto con el
piruvato).
Las mitocondrias no son capaces de importar el NADH formado en
el citosol durante la gluclisis. En lugar de eso, los electrones de
NADH se usan para reducir un metabolito de bajo peso molecular
que puede:
1. entrar a la mitocondria (mediante una va llamada lanzadera
de malato-aspartato) y reducir ah el NAD+ a NADH
2. transferir sus electrones a FAD (por una va llamada lanzadera
de glicerol fosfato) para producir FADH2.
Ambos mecanismos permiten que los electrones del NADH
citoslico ingresen a la cadena mitocondrial de transporte de
electrones y se utilicen en la formacin de trifosfato de adenosina
5.3 LA FUNCIN DE LA MITOCONDRIA
EN LA FORMACIN DE ATP.
 Se describen como plantas energticas en miniatura,
es decir, extraen la energa de materiales orgnicos y
la almacenan por un tiempo en forma de energa
elctrica.
La energa obtenida de los sustratos se utiliza para
generar un gradiente inico a travs de la membrana
mitocondrial interna.
Fosforilacin oxidativa:
Las mitocondrias emplean un gradiente inico a travs de su membrana
interna para impulsar muchas actividades que requieren energa, en
particular la sntesis de ATP. Cuando la formacin de ATP se impulsa con
la energa liberada de los electrones retirados durante la oxidacin de un
sustrato.
Oxidacin = Prdida de electrones = Reduccin = Ganancia de electrones =
Aumento del nmero de oxidacin Disminucin del nmero de oxidacin
 Potenciales de oxidacin-reduccin

Comparando varios agentes oxidantes, pueden ordenarse

en una serie de acuerdo con su afinidad por los
electrones: mientras mayor sea la afinidad, ms potente
es el agente oxidante.
Los agentes reductores tambin pueden clasificarse
segn sea su afinidad por los electrones: mientras menor
sea la afinidad (mayor facilidad para liberar los
electrones), ms fuerte es el agente reductor.
 Dicho en trminos cuantificables, se ordenan por el
potencial para trasferir electrones.
NADH Agente reductor potente.
H2O Agente reductor dbil.
 Los agentes oxidantes y reductores se encuentran
en parejas, como NAD+ y NADH.

Los agentes reductores potentes se unen con

agentes oxidantes dbiles y viceversa.
Por ejemplo, NAD+ (de la pareja NAD+-NADH) es un
agente oxidante dbil, mientras que el O2 (de la pareja
O2-H2O) es un agente oxidante fuerte.
 La afinidad de las sustancias por los electrones se
mide para una pareja determinada a travs del
potencial de oxidacion-reduccion (o potencial redox).

Nota: Pareja estndar

hidrgeno (H+ -H2).
 El cambio estndar de energa libre durante
una reaccin del tipo siguiente:
A(ox) + B(red) A(red) + B(ox)
A partir de los potenciales redox estndar de
las dos parejas de la reaccin la ecuacin es
de tipo:
G' = nF E0
donde n es el nmero de electrones transferidos en la reaccin, F es la constante de Faraday (23.063 kcal/V
mol) y E'0 es la diferencia en voltios entre los potenciales redox estndar de las dos parejas.
 Por ejemplo:
NADH + O2 + H+ H2O + NAD+
Los potenciales redox estndar de las dos parejas
pueden escribirse como sigue:
O2 + 2 H+ + 2e H2O E'0 = +0.82 V
NAD+ + 2 H+ + 2e NADH + H+ E'0 = 0.32 V
El cambio de voltaje para la reaccin total es igual a la
diferencia entre los dos valores de E'0 (E'0):
E'0 = +0.82 V (0.32 V) = 1.14 V
Si se sustituye este valor en la ecuacin previa:
G'0 = (2) (23.063 kcal/V mol) (1.14 V)
= 52.6 kcal/mol de NADH oxidado
 Transporte de electrones

Las molculas de NADH, que se forman en la matriz

mitocondrial, se disocian de sus deshidrogenasas
respectivas y se unen con la deshidrogenasa de NADH,
una protena integral de la membrana mitocondrial interna.

La cadena de transporte de electrones (o cadena

respiratoria) de la membrana mitocondrial interna.
 Tipos de portadores de electrones

La cadena transportadora de electrones se

compone de cinco tipos de portadores de electrones
unidos con la membrana:
Las flavoproteinas consisten
en un polipptido unido con
fuerza a uno de dos grupos
prostticos relacionados, ya
sea dinucletido de flavina
adenina (FAD) o
mononucletido de flavina
(FMN).
 Los citocromos son
protenas que contienen
grupos prostticos hem.
Hay tres tipos distintos
de citocromo, a, b y c, en
la cadena transportadora
de electrones que
difieren entre s por las
sustituciones dentro del
grupo hem.
 Tres tomos de cobre que se localizan dentro de
un solo complejo proteico de la membrana
mitocondrial interna aceptan y donan un solo
electrn cuando alternan entre los estados de
oxidacin Cu2+y reduccin de Cu1+.
 La ubiquinona (UC o coenzima Q) es una
molcula liposolubleque contiene una cadena
hidrfoba larga compuesta de unidades
isoprenoides de cinco carbonos. Al igual que las
flavoprotenas, cada ubiquinona puede aceptar y
donar dos electrones y dos protones.
 Las proteinas con hierro y azufre son protenas que
contienen hierro en las que los tomos de este metal no
se localizan dentro de un grupo hem, sino que estn
unidos con tomos de azufre inorgnico como parte del
centro de hierro-azufre.
El potencial redox depende de la hidrofobicidad y la carga
de los residuos de aminocidos que constituyen su
ambiente local.
 Los portadores de la cadena transportadora de electrones
estn dispuestos en orden de potencial redox positivo
creciente. Cada transportador se reduce con la ganancia de
electrones a partir del portador precedente en la cadena y
luego se oxida por la prdida de electrones a favor del
portador que le sigue.
La tendencia de los electrones a transferirse de un
transportador al siguiente depende de la diferencia de
potencial entre los dos centros redox, pero la velocidad de
transferencia guarda relacin con las actividades catalticas
de las protenas implicadas.
 Complejos transportadores de electrones Cuando se rompe la
membrana mitocondrial interna con un detergente pueden aislarse los
diversos portadores de electrones como parte de cuatro complejos
distintos asimtricos que cruzan toda la membrana y que se identifican
como complejos I, II, III y IV.
Dos componentes de la cadena transportadora de electrones, citocromo
c y ubiquinona, no son parte de ninguno de los cuatro complejos.
 Cuando el NADH es el donador de electrones, stos entran a la
cadena respiratoria a travs del complejo I, el cual transfiere
electrones a la ubiquinona y genera ubiquinol.
A diferencia del NADH, que puede difundirse lejos de estas
deshidrogenasas solubles, FADH2 permanece unido con un
enlace covalente a la deshidrogenasa de succinato, un
componente del complejo II. Cuando el donador es FADH2, los
electrones pasan de manera directa a la ubiquinona y evitan el
paso a travs del extremo final de la cadena, que tiene un
potencial redox demasiado negativo para aceptar los electrones
con menor energa del nuclotido de flavina.
 La energa disponible, liberada cuando los electrones
pasan por estos tres sitios (I, III y IV), se conserva por la
translocacin de protones de la matriz a travs de la
membrana interna hacia el espacio intermembranal.
Se describen a menudo como bombas de protones.
 El proceso bsico del transporte de electrones durante la
respiracin ha permanecido sin cambios desde su
evolucin hace miles de millones de aos en los
ancestros procariotas.

Complejo I (o deshidrogenasa de NADH) El complejo I es

la puerta de entrada a la cadena transportadora de
electrones y cataliza la transferencia de un par de
electrones de NADH a la ubiquinona (UQ) para formar
ubiquinol (UQH2).30
 El complejo I incluye una flavoprotena con FMN que
oxida al NADH, por lo menos ocho centros de hierro-
azufre distintos y dos molculas unidas de ubiquinona.
El paso de un par de electrones por el complejo I se
acompaa del movimiento de cuatro protones de la
matriz hacia el espacio intermembranal.

La importancia de la disfuncin del complejo I

como causa de neurodegeneracin
 Complejo II (o deshidrogenasa de succinato)
Consiste en cuatro polipptidos: dos subunidades
hidrfobas que fijan la protena a la membrana y dos
subunidades hidroflicas que comprenden la enzima
del ciclo del TCA deshidrogenasa de succinato. El
complejo II suministra una va para alimentar a los
electrones de baja energa (los cercanos a 0 mV) del
succinato a FAD y ubiquinona.
 Complejo III (o citocromo bc1) Cataliza la transferencia de
electrones del ubiquinol al citocromo c. Las evaluaciones
experimentales sugieren que se bombean cuatro protones a travs
de la membrana por cada par de electrones que se transfiere por
el complejo III. Los protones se liberan hacia el espacio
intermembranal en dos pasos separados impulsados por la
energa que se libera cuando dos electrones se separan entre s y
pasan por diferentes vas a travs del complejo. Dos protones
provienen de la molcula de ubiquinol que ingres al complejo.
Dos protones ms se retiran de la matriz y se trasladan a travs
de la membrana como parte de una segunda molcula de
ubiquinol.
 Complejo IV (o citocromo oxidasa c) El paso final en el
transporte de electrones en una mitocondria es la
transferencia sucesiva de electrones del citocromo c
reducido al oxgeno de acuerdo con la siguiente reaccin:

2 cit c2+ + 2 H+ + O2 2 cit c3+ + H2O

Para reducir una molcula de O2:

4 cit c2+ + 4 H+ + O2 2 cit c3+ + 2 H2O

 El complejo IV cataliza la
reduccin de O2, este
complejo es una enorme
estructura de polipptidos
conocida como citocromo
oxidasa.
 Los seres humanos producen unos 300 ml de agua
metablica mediante esta reaccin al da. Se
puede sealar que varios venenos respiratorios
potentes, incluidos el monxido de carbono (CO),
azida (N3) y cianuro (CN) ejercen su efecto
txico mediante la unin con el sitio hem a3 de la
citocromo oxidasa.
 Una mirada ms cercana a la citocromo oxidasa La
citocromo oxidasa consta de 13 subunidades, tres de
las cuales son codificadas por el genoma mitocondrial
y contienen los cuatro centros redox de la protena.
Lo ms importante es que el proceso debe ser muy
eficiente porque la clula trata con sustancias muy
peligrosas; la liberacin accidental de las especies
de oxgeno parcialmente reducidas puede daar todas
las macromolculas de la clula.
 5.4 TRANSLOCACIN DE PROTONES
Y ESTABLECIMIENTO DE UNA FUERZA
MOTRIZ PARA PROTONES
 La translocacin de protones a travs de la membrana interna
es electrognica (produce voltaje) porque aumenta la cantidad de
cargas positivas en el espacio intermembranal y el citosol, as
como una mayor cantidad de cargas negativas dentro de la
matriz.
Uno de ellos es la diferencia en la concentracin de iones
hidrgeno entre un lado de la membrana y el otro, es decir, un
gradiente de pH (pH). El otro componente es el voltaje () que
se produce por la separacin de carga a travs de la membrana.
Un gradiente que tiene un componente de concentracin
(qumico) y otro elctrico (voltaje) es un gradiente electroquimico.
 Fuerza motriz de protones (p), que se mide en
milivoltios. En consecuencia:

p = 2.3 (RT/F) pH

Como 2.3 RT/F es igual a 59 mV a 25C, la

ecuacin puede escribirse como sigue:

p = 59 pH
 Para que se mantenga una fuerza motriz de
protones es necesario que la membrana
mitocondrial interna permanezca muy impermeable
a stos. De lo contrario, el gradiente establecido
por el transporte de electrones se disipa en poco
tiempo por el escape de protones de regreso a la
matriz, lo que conduce a la liberacin de energa
en forma de calor.
5.5 mecanismos para la formacin
de ATP
A principios del decenio de 1960, Fernandez Moran descubri una capa de
esferas unidas a la cara interna (matriz) de la membrana interna que
sobresalan de la membrana y se unan a sta mediante tallos con la tcnica
para entonces nueva de tincin negativa. Unos cuantos aos despus, Efraim
Racker aisl las esferas de la membrana interna, a las que llam factor de
acoplamiento 1, o tan slo F1. Racker descubri que las esferas F1 se
comportaban como una enzima que hidroliza el ATP, es decir, una ATP-asa. A
primera vista, parece ser un hallazgo peculiar.
Por qu tendran las mitocondrias una enzima predominante que hidroliza la
sustancia que se supone producen?
Si se considera que la hidrlisis del ATP es la reaccin inversa a su formacin,
la funcin de las esferas F1 se torna ms evidente; contiene el sitio cataltico en
el que ocurre normalmente la formacin de ATP. Por consiguiente, la direccin
de una reaccin catalizada por enzimas en un momento determinado depende
de las condiciones prevalecientes.
 ESTRUCTURA DE LA ATP SINTASA

La enzima productora de ATP, la

sintasa de ATP, es un complejo
protenico en forma de hongo
conformada por dos componentes
principales: una cabeza F1 esfrica
(de casi 90 de dimetro) y una
seccin basal, llamada F0, incrustada
en la membrana interna. Las
micrografas electrnicas de alta
resolucin revelan que las dos
porciones se conectan mediante un
tallo central y uno perifrico.
Mecanismos de cambio de unin para la
sntesis de ATP
Formacion de ATP en partculas
submitocondriales
 Base de la formacin de ATP de acuerdo con el
mecanismo de cambio de unin
1. La energa liberada con el movimiento del protn no se usa para
impulsar la fosforilacin del ADP en forma directa, sino que se
emplea en cambiar la afinidad de unin del sitio activo por el
producto ATP.
2. Cada sitio activo progresa de manera sucesiva por tres
diferentes conformaciones con afinidades distintas por los
sustratos y los productos. Recurdese que el complejo F1 tiene
tres sitios catalticos, uno en cada una de las tres subunidades .
3. El ATP se sintetiza por catlisis rotatoria, en la que una parte de
la ATP sintasa rota en relacin con otra parte.
 Uso del gradiente de protones para impulsar los mecanismos
catalticos: la funcin de la porcin F0 de la ATP sintasa

1. Las subunidades c de la base F0 se

ensamblaban en un anillo que se
encuentra dentro de la bicapa de lpidos.
2. El anillo c est unido con la subunidad
gamma del tallo.
3. El movimiento colina abajo de los
protones por la membrana impulsa la
rotacin del anillo de subunidades c.
4. La rotacin del anillo c de F0
proporciona la fuerza de torsin (torque)
que impulsa la rotacin de la subunidad
gamma unida, lo que conduce a la sntesis
y liberacin de ATP.
Modelo en el cual se une la
difusin de protones con la
rotacin del anillo c del complejo
F0
 Otras funciones para la fuerza motriz de
protones adems de la sntesis de ATP
Aunque la produccin de ATP puede ser la actividad ms
importante de las mitocondrias, estos organelos participan en
muchos otros procesos que requieren el ingreso de energa.
las mitocondrias dependen de una fuente alternativa de energa: la
fuerza motriz de protones.
la fuerza motriz de los protones puede usarse como fuente
energtica para jalar iones calcio hacia el interior de la
mitocondria; para impulsar los fenmenos de la fusin mitocondrial,
y para hacer que polipptidos especficos seleccionados entren a
la mitocondria desde la matriz.
5.6 PEROXISOMAS
 Los peroxisomas son vesculas simples limitadas por
membranas, con un dimetro de 0.1 a 1.0 micras que pueden
contener un centro denso y cristalino de enzimas oxidativas
.
Los microcuerpos, como se les llama tambin, son organelos
multifuncionales y contienen ms de 50 enzimas que
participan en actividades tan diversas como la oxidacin de
cidos grasos de cadena muy larga y la sntesis de
plasmalgenos.
 Los plasmalgenos son muy abundantes en las
vainas de mielina que aslan los axones del cerebro.
Las anomalas en la sntesis de plasmalgenos
pueden dar origen a disfuncin neurolgica grave.
 Estos organelos se llamaron peroxisomas porque
son el sitio a partir del cual se sintetiza y degrada el
perxido de hidrgeno (H2O2), un agente oxidante
muy reactivo y txico. El perxido de hidrgeno se
produce por accin de varias enzimas peroxismicas,
incluida la urato oxidasa, glucolato oxidasa y oxidasas
de aminocidos, que utilizan oxgeno molecular para
oxidar sus sustratos respectivos
 Los peroxisomas tambin existen en las plantas. Las
plantas de semillero contienen un tipo especializado
de peroxisoma, llamado glioxisoma
 Bibliografa:

Biologa Celular y molecular.

Gerald Karp.
6ta. Edicin.
 Biologa Celular.
Capitulo 8: Sistemas de membrana citoplsmica:
estructura, funcin y trnsito en la membrana
 Bajo el microscopio ptico se crea que el citoplasma era una estructura
relativamente vaca.
En 1940 con la llegada del microscopio electrnico que pudieron ver
vesculas limitadas por membranas de dimetros variables, que contenan
material con diversa densidad electrnica, canales largos delimitados por
membranas que se irradiaban por el citoplasma para formar una red
interconectada de canales y sacos aplanados delimitados por membranas
llamadas cisternas
 Las cisternas formaban organelos que podan identificarse
en diversas clulas, cada uno de estos organelos contiene un
complemento particular de protenas y esta especializado en
actividades especificas que pueden trabajar de manera
independiente.
 8.1 Revisin del sistema endomembranoso

Los organelos del sistema endomenbranoso (aparato

de golgi, endosomas, lisosomas y vacuolas) son parte
de una red dinmica integrada, en la que los materiales
se envan y regresan de una parte de la clula a otra
mediantes pequeas vesculas de transporte
 Las vesculas de transporte salen de un compartimiento donante de
membrana.
Se mueven por el citoplasma y a menudo son tiradas por protenas
motoras que operan a travs de los microtubulos y microfilamentos del
citoesqueleto
Se funcionan con la membrana del compartimiento receptor, el cual resive
el cargamento soluble de la vescula y su envoltura membranosa.
 Se han identificado distintas
vas a travs del citoplasma
Via biosinttica o secretora
Via endoctica

Ambos tipos de transporte

requieren patrones de
transito para asegurar que
los materiales se entreguen
de manera precisa y en los
sitios adecuados.
 Va biosinttica o Secretora.
Se sintetizan protenas (pueden
ser solubles expulsadas,
integrales de varias membranas
o solubles que residen dentro de
varios compartimentos) en el
retculo endoplsmico.
Se modifican a su paso por el
aparato de Golgi
Del aparato de Golgi son
transportadas a varios lugares
 Secrecin constitutiva: los materiales
se transportan en vesculas secretoras
de los sitios donde se producen al
espacio extracelular.
Tambin se le llama
secretora porque muchas de
las protenas sintetizadas en
RE se secretan de la celula
Secrecin regulada: los materiales se
almacenan en paquetes delimitados
por la membrana y se descargan solo
como respuesta a un estimulo
apropiado.
(Ej. En los acinos pancreticos que
liberan enzimas digestivas
 Va endoctica.

Los materiales se mueven

de la superficie externa al
compartimiento en el interior
del citoplasma.
APROXIMACIONES AL ESTUDIO DE LAS
ENDOMEMBRANAS. 8.2
Inicios del microscopio
Electrnico:
--Retrato de estructuras
--No mostraba las funciones de
Los componentes que observaban
 Para identificar las funciones, se necesitaban nuevas
tcnicas y experimentos innovadores.
Los primeros esfuerzos en estas reas fueron obra de
los ganadores del premio Nobel (1974):

Christian De Duve Albert Claude George Palade

INFORMACION OBTENIDA DE LA AUTORRADIOGRAFIA

Autorradiografa- sirve para visualizar procesos qumicos,

permitiendo localizar materiales con marcas radioactivas
dentro de una clula.
Los cortes con istopos radioactivos se cubren con emulsin
fotogrfica, la cual se expone por la radiacin emanada por
los radioistopos del tejido.
Los sitios de la clula que contengan radioactividad se revelan
al microscopio por los granos de plata de la emulsin
aplicada.
 Clulas acinares del pncreas, cuentan con una
endomembrana extensa.
Su funcin es la sntesis y secrecin de enzimas digestivas.
Despus de la secrecion pancretica, las enzimas se envan
al intestino
delgado donde degradan
el alimento ingerido.
 Para conocer donde se sintetizan las protenas secretoras
(Palade y Jamieson):
Incubar tejido pancretico en una solucin con
aminocidos radioactivos por poco tiempo. Las clulas los
incorporan a las enzimas digestivas sintetizadas en los
ribosomas.
*Esta tcnica da al RE como el sitio donde se sintetizan las
protenas secretoras
 Para determinar la va intracelular que siguen las
protenas desde el RE hasta donde se descargan
(PULSO-PERSECUCIN):
Lavar el tejido para quitar el exceso de istopos.
Poner el tejido en un medio con aminocidos no marcados.
Pulso= Incubacin breve con radioactividad durante la cual los
aminocidos marcados se incorporan en la protena
Persecucin=lapso en que el tejido est en el medio no
marcado y se sintetizan protenas con aminocidos sin marca
 Mientas mayor sea el tiempo de la persecucin, ms
lejos estarn las protenas radioactivas producidas
durante el pulso.
*Con esta tcnica es posible seguir los movimientos de las
molculas recin sintetizadas mediante el material radioactivo
que se mueve por los organelos.
INFORMACIN OBTENIDA A PARTIR DE
LA PROTENA FLUORESCENTE
 Permite a los investigadores seguir con sus propios
ojos los movimientos de protenas especficas.

Se usa un gen aislado de una medusa, y codifica la

PROTENA VERDE FLUORESCENTE (GFP)
 PROCEDIMIENTO
DNA que codifica GFP + DNA que codifica la protena
que se quiere estudiar = DNA quimrico (compuesto)
Dentro de la clula, el DNA quimrico produce
protenas quimricas
 EXPERIMENTO
Se infect una clula con el virus de la estomatitis
vesicular (VSV)
Una vez infectada, se producen grandes cantidades de
protena VSVG en el RE.
VSVG viaja por el aparato de Golgi, y de ah a la
membrana plasmtica.
Se incorporan en envolturas virales.
INFORMACIN OBTENIDO DEL ANLISIS
BIOQUMICO DE LAS FRACCIONES
SUBCELULARES
 Albert Claude y Christian de Duve pioneros en homogeneizar
clulas y aislar organelos.
Fraccionamiento subcelular:
Las membranas citoplasmticas se fragmentan.
Los fragmentos se fusionan para formar vesculas.
Las vesculas obtenidad de diferentes organelos tienen
diferentes propiedades
 Vesculas membranosas derivadas del sistema endomembranoso
forman microsomas.
La fusin microsmica puede segmentarse en membrana lisa o
rugosa.
De la fraccin microsmica puden aislarse enzimas especficas
Una vez aislado el organelo, es posible extraer sus protenas
Reconocer protenas = retrato molecular de cualquier organelo
 EJEMPLOS
Se encontr que vesculas derivadas del aparato de
Golgi contienen enzimas que agregan azcares al
final de carbohidratos

Se encontr un fagosoma que contiene mas de 160

protenas diferentes que participan en la fagocitosis.
INFORMACIN OBTENIDA A PARTIR
DE SISTEMAS LIBRES DE CLULAS
 SISTEMAS LIBRES DE CLULAS

No contienen clulas completas.

Posibilitan el estudio de procesos complejos que en

una clula intacta no se puede.
 EJEMPLO
George Palade y Philip Siekevitz queran aprender
ms sobre fraccin microsmica rugosa.
Liberaron una preparacin MR y las partculas
aisladas (ribosomas) sintetizaban protenas,
liberndolas al medio acuoso.
Realizaron lo mismo en una clula intacta pero sta
no liberaba las protenas
 Notaron que, la membrana microsmica
No es necesaria para la incorporacin de aminocidos a
las protenas.
Es necesaria para secuetras prottenas secretoras
sintetizadas en el RE

Actualmente se utiliza para identificar los papeles de

protenas encargadas del trnsito de membrana.
INFORMACON OBTENIDA DEL ESTUDIO
DE MUTANTES GENTICOS.
 Mutante = organismo cuyos cromosomas contiene
genes que codifican protenas anormales.
La protena se vuelve incapaz de realizar su funcin
y la clula presenta una deficiencia caracterstica
Identificar una mutacin proporciona informacin
sobre la funcin correcta de una protena.
 Las levaduras son suceptibles a
estudios genticos.
Las vesculas van del RE al
aparato de Golgi.
-Para identificar los genes de la
protena que ayuda al paso de las
vesculas (genes SEC), se debe
buscar clulas mutadas con una
distribucin anormal de vesculas.
8.3 Reticulo endoplasmico
 Es una red de membranas que abarca gran parte del citoplasma
Dentro de este hay un espacio extensor o luz, separado del citosol
vecino por la membrana del reticulo endoplasmico
Se divide en dos:
-Reticulo endoplasmico rugoso: tiene ribosomas unidos a su superficie
citoslica, este se continua con la membrana externa de la envoltura nuclear, los cuales
tambien tienen ribosomas en su superficie citoslica, contiene una red de sacos
aplanados (cisternas).
-Reticulo endoplasmico liso: Carece de ribosomas y sus elementos son curvos y
tubulares, las cuales forman un Sistema de tuberias Interconectadas que ondulan por
todo el citoplasma.
 Ambos retculos tienen sus membranas
interconectadas, comparten muchas proteinas y
realizan actividades communes

Las celulas contienen proporciones diferentes de

ambos tipos de reticulos segun sean sus
necesidades*
 Reticulo endoplsmico liso

Desarrollado en diversos tipos celulares (Musculo

esqueletico, tubulos renales y glandulas endocrinas
productoras de esteroides)
Funciones
Sintesis de hormonas esteroideas en celulas
endocrinas y de la corteza suprarenal.
Desintoxicacion en el higado de compuestos
organicos.
Secuestro de iones de calcio en el citoplasma celular
 Reticulo
endoplasmico
rugoso

Es el punto inicial de la via

biosintetica: es el punto donde se
sintetizan las proteinas, cadenas de
carbohidratos y fosfolipidos que viajan
por compartimientos membranosos
de la celula
 Sntesis de protenas en ribosomas unidos a la membrana o
en ribosomas libres
Los polipptidos se sintetizan en dos puntos distintos en la
clula
La tercera parte de las protenas codificadas por el genoma de
los mamferos son sintetizados en ribosomas unidos a
superficies citoslicas de las membranas
Otros polipptidos se sintetizan en ribosomas libres y luego se
liberan al citosol (enzimas de la gluclisis y del citoesqueleto y
tambin protenas perifricas)
 Sintesis de proteinas secretoras, lisosomicas o vacuolares
vegetales en los ribosomas unido a membranas
-La sintesis inicia cuando un ARNm se une con un ribosoma libre
-Conforme a la secuencia seal emerge del ribosoma se une a la SRP y detiene la traduccin
hasta que el complejo SRP ribosoma puede hacer contacto con la membrana del retculo
endoplsmico, despus el complejo -SRP choca y se une con un receptor SRP
-Seguida de la union viene la liberacion del SRP y el enlace del ribosoma con un translocn
de la membrana de retculo endoplsmico
-El peptido seal se une al interior del translocn, dezplazando el tapn del canal y
permitiendo que el resto de polipeptidos se transponga a travez de la membrana de manera
contraduccional
-Despues el polipptido se corta la peptidasa seal y la protena se pliega con ayuda de
carabinas del retculo endoplsmico como BiP
 Procesamiento de protenas recin
sintetizadas en el retculo endoplsmico
Conforme entra a la cisterna del RER, un polipptido
naciente es sujeto de la actividad de diverzas enzimas
situadas dentro de la membrana o en la luz del RER
La porcin amino-terminal que contiene el pptido
seal se retira por la mayor parte de los polipptidos
nacientes por accin de una enzima proteoltica, la
peptidasa de seal.
Los carbohidratos se unen a la protena por la enzima
oligosacariltransferasa
 Planta procesadora de protenas importantes
La luz del RER esta empapada con protenas chaperonas moleculares
que reconocen protenas, en buen y mal estado y dan oportunidad de
adquirir su estructura tridimensional correcta
La luz del retculo endoplsmico contiene varias enzimas procesadoras
de protenas como la disulfuro isomerasa de protenas
Las protenas entran en la luz de Recon residuos de cisteina en estado
reducido y salen con muchos de estos residuos unidos entre s como
disulfuros oxidados (el reordenamiento es catalizada por la PDI)
El enlace de disulfuro tienen una funcin esencial en el mantenimiento
de la estabilidad de las protenas de la superficie extracellular
La luz de las cisternas del RE proporciona un ambiente local y
especializado que favorece la modificacin, el ensamblaje de un subtipo
seleccionado de protenas de la clula.
Sntesis de protenas integral de membrana en
los ribosomas unidos a la membrana
Usan el mismo mecanismo descrito en la sntesis de protenas
secretoras y lisosmicas
Durante la translocacin, las protenas integrales de la membrana
contienen uno o mas segmentos transmembranosos hidrfobos, que son
desviados del canal del translocn hacia el interior de la bicapa lipdica.
Biosntesis de membrana en el retculo endoplsmico.

Las membranas surgen de las membranas preexistentes

Creecen conforme las proteinas y lipidos recien
sintetizados se insertan en membranas existentes en el
reticulo endoplasmico y los componentes de la membrana
pasan de reticulo endoplasmico a todos los demas
compartimientos de la celula.
Cuando la membrana se mueve de un compartimiento a
otro sus proteinas y lipidos se modifican por las enzimas
que residen en los distintos organelos de la celula
 Sintesis de los lipidos de la membrana

La mayor parte los lpidos de la membrana se sintetizan

por completo en el retculo endoplasmtico.
Las enzimas participantes en la sntesis de fosfolpidos
son protenas integrales de la membrana del Retculo
endoplsmico y sus sitios activos son dirigidos al citosol
Los fosfolpidos recin producidos se insertan en la mitad
de la bicapa dirigidos al citosol, algunas se giran mas
tarde hacia la hoja contraria por la accin de la flipasa
 Glucosilacin en el RER
Protenas producidas en los ribosomas unidos a la
membrana se convierten en glucoprotenas
Ya sea que sean componentes de la membrana, enzimas lisosmicas
solubles, o partes de la matriz extracellular
Los grupos de carbohidratos tienen papeles claves en la
function de glucoprotenas, como en los sitios de unin con
otras macromolculas, tambin ayudan al plegamiento
correcto de la protena a la que se unen
La secuencia de azucares que comprenden los
oligosacridos de las protenas son muy especficas
 La adicion de azucares esta catalizada por glucosiltransferasa que es
una enzima que esta en la membrana. Se tranfieren a un monosacarido
especifico como GDP-manosa o UDP-N- acetilglucosamina
La parte central no se ensambla sobre la proteina misma, sino
independientemente sobre un lipido portador, el fosfato de dolicol, el cual
esta en la membrana del reticulo endoplasmico
Los azucares se unen a la molecula del fosfato de dicol por las
glucosiltranferasa
En las celulas de mamiferos comienza con la tranferencia de N-
acetilglucosamina 1-fosfato, despues va la N-acetilglucosamina y 9
moleculas de manosa y 3 unidades de manosa
Estos 14 azucares se transfieren por la enzima oligosacariltransferasa,
del fosfato del dolicol a ciertas asparanginas en el polipeptido naciente,
en tanto el polipeptido se traslada hacia la luz de reticulo enoplasmico
 Enfermedades congenitas de la glucosilacion
Son causadas por la ausencia de N-glucosilacion y
provoca la muerte de los embriones
Las mutaciones que producen la interrupcion parcial de
la via de glucosilacion en el reticulo endoplasmico
causan transtornos hereditarios que afectan casi
cualquier Sistema o aparato.
La CDG1b es la deficiencia de la enzima isomerase de
fosfomanosa que cataliza la conversion de fructose 6-
fosfato en manosa 6-fosfato.
 Cada glucoproteina es evaluada por un Sistema de control de calidad
La modificacion del oligosacarido central comienza en el RE con la eliminacion
de 2 de 3 residuos terminales de glucosa
Cada glucoproteina se une a la carabina del reticulo endoplasmico
Se elimina la glucosa restante por la glucosidasa II
Si una glucoproteina esta mal plegada o no se completa una enzima de
vigilancia (GT) la reconoce y le agrega un solo residuo de glucosa a uno de los
residuos de manosa en el extremo opuesto del oligosacarido recien ajustado
Se reconocen por que las proteinas mal plegadas exponen residuos hidrofobos
que no se detectan en la proteinas bien plegadas
Una vez con el residuo de glucosa las moleculas chaperonas reconocen a la
glucoproteina marcada y hay oportunidad para plegarse correctamente
Despues se quita la glucosa y la proteina chaperona la revisa de nuevo
Si aun no esta bien, el proceso se repite hasta que quede correctamente o se
destruye
Mecanismos que aseguran la destruccion de las
proteinas mal plegadas
Las proteinas mal plegadas no se destruyen en el reticulo endoplasmico,
mas bien se transportan al citosol por medio de la transposicion inversa
En el citosol, las cadenas de oligosacaridos se retiran y las proteinas mal
plegadas se degradan en los proteasomas, que son maquinas
destructoras de proteinas.
Proceso conocido como degradacion vinculada al reticulo endoplasmico
Respuesta de proteina no plegada (UPR), es un plan de accion que la
celula toma cuando hay una acumulacion de proteinas letal para la celula
La molecula BiO sale del reticulo endoplasmico y se recluta al servicio
como chaperonas para las proteinas defectuosas, lo que las hace
incapaces de inhibir los sensores.
 Del reticulo endoplasmico al aparato de Golgi:
primer paso en el transporte vesicular.
Los sitios de salida del RER estan desprovistos de ribosomas, y en estos se forman
las primeras vesiculas de transporte de la via biosintetica.
El viaje desde el RE al aparato de Golgi se puede observar si las proteinas se marcan
con la proteina verde fluorecente.
Poco despues del RE las vesiculas de transporte se fusionan para formar vesiculas
mas grandes y tubulos interconectados entre el RE y el aparato de Golgi,
compartimiento intermedio entre el RE y el aparato de Golgi, los transportadores
vesiculotubulares que se forman se denominan VTC
Una vez formados los VTC se alejan del RE hacia el aparato de golgi.
 8.4 Aparato de Golgi.
El aparato de Golgi fue descubierto en 1898 por
Camilo Golgi (Nobel 1906)
Camilo Golgi invento nuevos procedimientos de
tincin, aplic una tincin metlica a las clulas
nerviosas del cerebro y ah descubri una red cerca
del ncleo celular.
 El aparato de Golgi esta formado por cisternas membranosas
aplanadas, vesculas y tbulos.
Las cisternas estn dispuestas en una pila ordenada, cada
pila contiene normalmente 8 cisternas.
Se cree que las vesculas se desprenden de un dominio
tubular perifrico de cada cisterna (Un dominio perifrico
consiste en una red tubular de la cual se desprenden yemas
cubiertas con protenas)
El aparato de Golgi tiene varios compartimos con funciones
especficas
Cara cis: de entrada mas cercana al
RE, formada por una red de tubulos
conectados entre s llamada Red cis de
Golgi o CGN, funciona como estacin de
clasificacin, distingue entre las protenas
que deben ir de regreso al RE y las que
pueden avanzar.
Serie de cisternas grandes y aplanada
(cis, mediales y trans)
Cara trans: cara de salida, formada por
una red de tubulos y vesculas llamada
Red trans del Golgi o TGN, clasifica las
protenas en diferentes tipos de vesculas
que se dirigen a la membrana o a varios
destinos intracelulares.
 Se cree que el aparato de Golgi cuenta con un soporte mecnico de un
esqueleto perifrico de la membrana o un andamiaje compuesto por
varias protenas como la espectrina, anquirina y actina (Presentes
tambin en partes del esqueleto de la membrana)
La estructura del aparato de Golgi puede mantener un enlace fsico con
protenas motoras que dirigen el movimiento de las vesculas y tbulos
que entran y salen del aparato de Golgi. Se piensa que un grupo
separado de protenas fibrosas forma una matriz de Golgi que tiene un
papel clave en el desarmado y rearmado del aparato de Golgi durante la
mitosis.
 Aparato de Golgi una planta procesadora
Del RE salen las protenas de la membrana recin
sintetizadas, as como las protenas secretoras y
lisosmicas.
Entran al aparato de Golgi por su cara cis
Pasan a travs de la pila de cisternas en donde estas
protenas sufren varias modificaciones especificas por
una serie de reacciones enzimticas secuenciales.
Terminan en la cara trans del aparato de Golgi.
 Glucosilacin del aparato de Golgi
El aparato de Golgi tiene un papel importante en el ensamble del
componente carbohidrato en las glucoprotenas y glucolpidos.
Tambin se sintetiza la mayora de los polisacridos de la clula.

En el RE Sntesis de cadenas de carbohidratos

Las nuevas glucoprotenas solubles van a entrar al aparato de
Golgi por la cara cis
En las cisterna cis y media se retiran mas residuos de manosa
de los oligosacridos centrales y se agregan otros azucares en
forma secuencial por la accion de la glucosiltransferasa.
 El Movimiento De materiales a travs del aparato de Golgi.

Modelo de maduracin de cisternas

(1980): Cisternas de Golgi, estructuras
Los materiales se mueven transitorias.
por los diferentes
compartimentos del aparato
de Golgi
Modelo de transporte vesicular (1990):
Los cargamentos se lanzan a travs de la
pila de Goldi desde CGN hasta TGN por
medio de vesculas.
 Modelo de maduracin de cisternas.
Se puede demostrar que ciertos materiales que se
producen en el retculo endoplsmico y viajan por el
aparato de Golgi permanecen en las cisternas de Golgi y
nunca aparecen dentro de las vesculas de transporte
relacionadas con el aparato de Golgi.
Estudios con clulas de levadura vivas en gemacin que
contenan protenas de Golgi con tincin fluorescente han
mostrado de manera directa que la composicin de una
cisterna de Golgi individual puede cambiar con el tiempo.
(antergrado y retrgrado
 Modelo de transporte vesicular.

Cada cisterna de la Pila de Golgi tiene una poblacin

distinta de enzimas.
A travs del microscopio es posible ver las vesculas
que se desprenden de los bordes de las cisternas.
(Antergrado)
 TIPOS DE TRANSPORTE EN
VESCULAS Y SUS FUNCIONES 8.5
 VA BIOSINTTICA
Consiste en una serie de organelos que participan
en:
Sntesis
Modificacin
Entrega
De protenas solubles y membanosas a su destino en la
clula.
 Entre compartimientos, el material se transporta por
vesculas.
Se desprenden de membranas donantes y se fusionan
con una receptora.
Mientras las vesculas se desprenden, estan cubiertas
por una capa electrodensa.
El ensamblaje se inicia por una protena G
Al desprenderse se forma una vescula cubierta.
 Cubiertas de protenas:
Actua como dispositivo mecnico (la membrana se curvea)
Mecanismo de seleccin de componentes transportados
por la vescula:
1.- Protenas secretoras, lisosmicas y de membrana
2.-estructura necesaria para dirigir y conectar la vescula con
la membrana receptora correcta
 DIREFENTES CLASES DE VESCULAS CUBIERTAS

Se distinguen por sus protenas en su cubierta y y su

papel en el trnsito celular.
Cubiertas con COP-II: desplazan materiales del RE al
ERGIC y al aparato de Golgi.
Cubiertas con COP-I:
Del ERGIC y Golgi hacia el ER
De las cisternas de Golgi trans a las cis
-Cuibiertas con clatrina: moviliza materiales a endosomas,
lisosomas y vacuolas vegetales.
 VESCULAS CUBIERTAS DE COP-II: TRANSPORTE
DE CARGAMENTO DEL RE AL APARATO DE GOLGI
Del ER al ERGIC y a la red de Golgi cis.
Seleccionan y concentran componentes para el
transporte vesicular.
Protenas de exportacin del RE interactan con con
protenas del COP-II.
Mutaciones con estos receptores causan problemas
en la coagulacin (trastorto hemorrgico hereditario).
 Sar1 (protena G, que se encuentra en la cubierta de
la COP-II) es reclutada en el RE

Sar1 regula la formacin de vesculas y ensamblaje

de la cubierta de las mismas.
 1) Sar1 reclutada en RE unida a GDP que luego cambia
por GTP (Guanosn). Se inserta en la bicapa del RE
2) La membrana se dobla y cambia los lpidos de sta
pues el Sar1 extiende una hlice a.
 3) los polipptidos Sec23 y Sec24 aumentan la curvatura
y se unen a Sec1. Se acumulan receptores.
4)los polipptidos restantes (Sec13 y 31) se unen al
complejo para formar la capa estructural externa.
 VESCULAS CUBIERTAS EN COP-1: TRANSPORTE DE
PROTENAS ESCAPADAS DE REGRESO AL RE

Se acumulan en presencia de un anlogo de GTP no

hidrolizable.
Median transporte retrgado.
 Las protenas se mantienen en un organelo por:
Retencin de molculas
Recuperacin de molculas fugitivas.
Aminocidos en el extremo C de las protenas = seales de
recuperacin.
La recuperacin es mediante receptores especficos.
Seal de recuperacin lis-asp-glu-leu (KDEL).
 ORDENAMIENTO DE PROTENAS EN EL TGN

TNG = red trans de Golgi clasificadora.

La va ms conocida es la que lleva enzimas
lisosmicas.
Las protenas lisosmicas se sintetizan en ribosomas
en el RE
Enzimas L. cuentan con residuos de manosa
fosforilados que son seales de reconocimiento
 1)Residuos de manosa se fosforilan en el A. de Golgi.
2)Se incorporan en forma selectiva en vesculas cubiertas por
clatrina en la TGN
3)Receptores de manosa 6-fosfato:
Interactan de forma especfica con enzimas lisosmicas y
adaptadores en la superficie de la vescula.
4)Los receptores se separan de las enzimas
5)Regresan al A. de Golgi
6) Las enzimas quedan a disposicin de un endosoma y
luego de un lisosoma.
 Cubiertas de vesiculas con clatrina:
Celosa externa formada por clatrina (soporte estructural)
Capa interna formada por adaptadores de protena dirigida
al citosol
Son flanqueadas por protenas adaptadoras GGA
GGA se une a clatrina (extremos exteriores)
GGA se une a seales clasificadoras para manosa 6-
fosfato
 DIRECCIONAMIENTO VESICULAR
Las vesculas contienen protenas especficas que
regulan movimiento y potencial de fusin.

1)Mov. de la vescula al compartimiento blanco

especfico: mov. Mediados por microtbulos.

2)Fijacin de vesculas al compartimiento blanco:

mediante protenas fibrosas extendidas (protenas de
unin con GTP llamadas Rab).
 3) Acoplamiento de vesculas al compartimiento
blanco: protenas clave SNARE. Motivo SNARE de 60
a 70 aminocidos.
SNARE-v se incorporan durante el desprendimientos de las
vesculas
SNARE-t en membranas de compartimiento blanco
La escisin de SNARE neuronales por toxinas bloquea la
liberacin de neurotransmisores, causa parlisis.
 4) Fusin entre membrana vesicular y blanco:
interacciones entre SNARE-t y v fusionan bicapas de
lpidos.
Los diversos tipos de protenas permiten una gran
especifidad.
 EXOCITOSIS
Fusin de vescula secretora con membrana
plasmatica, provoca la descarga del contenido
vesicular (exocitosis)
Se envan protenas y diversos materiales a la
membrana plasmtica y espacio extracelular.
En algunos casos, la exocitosis se inicia por la
liberacin de Ca+2
Contacto Vescula-MP forma un poro de fusin
 8. 6 Lisosomas
Son organelos digestivos, cada uno contiene cerca de
50 enzimas hidroliticas diferentes producidas en el RER
En conjunto las enzimas lisosomicas pueden hidrolizar
todo tipo de macromoleculas biologicas
Son hidrolasas acidas (alcanzan su actividad optima en
ph acido) el ph se aproxima a 4.6
Sus membranas contienen proteinas muy Glucosidadas,
las cadenas de carbihidratos forman un recubrimiento
protector contra el ataque de las enzimas
Su apariencia no es uniforme
 Su funcin ms estudiada es la degradacin de materiales,
que llegan a la clula desde el ambiente extracelular
Muchos organismos ingieren partculas de alimento que
luego se degradan por medios enzimticos en el lisosoma
Los nutrientes obtenidos pasan por la membrana
lisosmica hacia el citosol
Los macrfagos y neutrfilos funcionan como eliminadores
que ingieren los detritus y microorganismos que pudieran
ser peligrosos.
Las bacterias casi siempre se desactivan por el pH cido
del lisosoma.
 Autofagia
Los lisosomas tambien tienen una funcion clave en el
recambio de organelos
En este proceso un organelo es rodeado por una
doble membrana para hacer una vescula secuestrante,
llamada autofagosoma
La membrana externa una vez formada se fusiona
con un lisosoma y forma un autolisosoma (hay
degradacion interna del autofagosoma y el contenido en
su interior)
Una vez completado el proceso digestivo en el
autofagolisosoma, el organelo se conoce como cuerpo
residual
Segun sea el tipo celular, el contenido del cuerpo
residual puede eliminarse por exocitosis o conservarse
por tiempo indefinido como un granulo de lipofucina.
8.8 LA VA ENDCRINA: MOVIMIENTO DE
MEMBRANA Y MATERIALES DENTRO DE
LA CLULA
 ENDOCITOSIS

Por volumen (pinocitosis):

Captacin inespecfica de lquidos extracelulares.
Molculas grandes o pequeas
Se pueden visualizar con la adicin de sustancias al medio
de cultivo: tinte amarillo lucifer o la enzima de peroxidasa.
 8.9 Capacitacion de proteinas por peroxisomas,
mitocondrias y cloroplastos despues de la traduccion

Trafico de protinas reculadas por: Seales de clasificacion y receptores

que reconocen estas seales
Cuatro de los principales organelos (Nucleo, mitocondrias, cloroplastos y
peroxisomas importan proteinas a traves de una o mas membranas
limitantes externas.
 Mediada por receptores (RME):
Captacin selectiva de macromolculas.
Las sustancias se juntan con receptores que se unen a
fosos cubiertos (dominios especializados), que son sitios
donde la superficie est hundida
 Protenas de la superficie extra celular forman foso
cubierto (protegido por material electrodenso formado
por clatrina)
El foso se colapsa y forma una yema cubierta
La membrana a punto de serpararse como vescula
con la protena vitelina (sup, extracelular) y clatrina
(sup citoslica).
Vescula que ya no est cubierta a la membrana
plasmtica.
a) Superficie extra celular del foso cubierto (LDL-
colesterol)
b) La cubierta se integra con una red que contiene
clatrina relacionados con la sup internade la
membrana
 Modelo trpode de clatrina (trisquelion)
-Se superponen de manera que cada arista contiene un
centro de otro trisquelion.
 Vesculas cubiertas de clatrina tienen mas de 2
docenas de protenas.
Dinamina:
Necesaria para liberacin de vesculas
A) a partir de un foso cubierto
B) cambia su configuracin para formar una vescula conectada a
la membrana plasmtica suprayacente
C) se forman anillos
D)sus cambios son resultado de hidrlisis del GTP
E-a) conduce a la desarticulacion de la dinamina
E-b)si la gemacin de la vescula pasa en presencia de GTPyS (no
hidrolizable de GTP) se produce un tbulo.
 VA ENDOCTICA
Las molculas captadas por endocitosis se mueven
por vs endocticas especficas.
Receptores domsticos: capta materiales que sern
utilizados en la clula.
Lipoprotena de baja densidad (LDL): median la entrega de
hierro y colesterol.

Receptores de sealizacin: une ligandos

extracelulares que llevan mensajes para cambiar
actividades celulares
 Endocitosis con grupos domsticos: entrega
materiales y regresa a la superficie para ms rondas
de captacin

Endocitosis con grupos de sealizacin: conduce a la

destruccin del receptor (regulacin en descenso del
receptor) y reduce la sensibilidad e la clula. Se
etiquetan con ubiquitina
 Endocitosis con grupos domsticos: entrega materiales
y regresa a la superficie para ms rondas de captacin

Endocitosis con grupos de sealizacin: conduce a la

destruccin del receptor (regulacin en descenso del
receptor) y reduce la sensibilidad e la clula. Se
etiquetan con ubiquitina
 Coltesterol: molcula hidrfoba, se transporta en la sangre
como parte de complejos lipoproteicos. Ej. LDL
Apolipoprotena B-100 se une a receptores de LDL
Componentes protecos de lisosomas degradan LDL y el
colesterol se desenterifica para que la clula pueda utilizarlo.
 Enfermedad de Niemann-Pick tipo C, carece de
protenas patra sacar el colesterol de los lisosomas-
la acumulacin resultante causa degeneracin
nerviosa y muerte en la etapade lactancia temprana.
El nivel de LDL se relaciona con la ateroesclerosis
(forma placas en paredes de arterias y se
dismuminuyen el flujo de sangre.
 FAGOCITOSIS.

Realizada por clulas

especializadas en captacin
de molculas grandes.
No todas las bacterias
ingeridas se destruyen
(Mycobacterium tuberculosis,
Listeria monocytogenes)
 Captacin de protenas en los perixosomas
Los peroxisomas son organelos muy sencillos que tienen dos
compartimientos en los que las proteinas importadas pueden situarse: la
membrana limitante y la matriz interna
Las proteinas destinadas a un peroxisome tienen una seal de direccion
peroxisomica (PTS) ya sea para una proteina de la matriz peroxisomica
o una mPTS para una proteina peroxisomica de la membrana
Los receptores PTS se unen con proteinas destinadas al peroxisomas
en el cytosol y las traslada a la superficie del peroxisome, en el cual
penetran al organelo
Los peroxisomas son capaces de importer proteinas de la matriz
peroxisomica en su conformacion plegada
 Captacin de protenas en las mitocondrias

Cuatro compartimientos a los cuales pueden llegar las proteinas: una membrana
mitochondrial externa (OMM), membrana mitochondrial interna (IMM), espacio
intramembranoso y matriz.
Sintetizan unos cuantos polipeptidos integrals de membrana, al rededor de 99% de las
proteinas del organelo se codifican en el genoma nuclear, se sintetizan en el cytosol y
se importan despues de la traduccion (Esta se limita a las proteinas de ma y la
membrana mitochondrial interna que juntas constituyen la gran matriz mitochondrial
ayoria de las proteinas dirigidas a este organelo)
Las proteinas mitocondriales contiene secuencias de sealizacion que las dirigen al sitio
donde pertenecen, la mayoria contienen una secuencia directriz removable en el
extremo N de la molecula (llamada presecuencia) esta comprende varios residuos con
carga positive
La mayor parte de las proteinas destinadas a la membrana mitochondrial interna tiene
secuencias directrices internas que permanecen en la molecula
 Cuando entra a la matriz un polipeptido interactua con las chaperonas
mitocondriales como mtHsp70 que median la entrada al compartimiento
acuoso
Hay dos propuestas acerca de los mecanismos de estas chaperonas
Una esque actuan como motores heneradores de fuerza que usan energia
deribada de la hidrolisis del ATP para tirar del polipeptido a travez del poro
Otro menciona que las chaperonas ayudan a la diffusion del poliptido a
traves de la membrana

Difusion tendenciosa
Es un mecanismo de accion de las chaperonas en las que mueven
polipeptidos en ambas direcciones como un trinquete browniano, browniano
se refiere a la difucion aleatoria y trinquete es un movimiento que permite el
movimiento en solo una direccion
El citoesqueleto
 Citoesqueleto

Funciones anlogas a las de los vertebrados

Se compones de cuatro estructuras filamentosas:
Microtbulos
Microfilamentos
Filamentos intermedios
Fina red de microtrabculas
 Principales funciones

Brinda soporte estructural

Establece las posiciones de los organelos
Dirige el movimiento intracelular
Mueve a la clula
Divisin celular
 Microtbulos

Estructuras tubulares
huecas, presentes en
la mayora de las
eucariotas.
 Microtbulos

Dimetro externo: 25 nm
Grosor de pared: 4 nm
Formado por la protena tubulina
Compuesto por 13 protofilamentos
Extremo ms- tubulina
Extremo menos- tubulina
 Protenas asociadas con los microtbulos

Denominadas MAP
SE dividen en dos
grupos:
MAP de bajo peso
molecular
MAP de alto peso
molecular:
MAP-1
MAP-2
MAP-3
MAP-4
 Microtbulos como soportes y organizadores estructurales

Son bastante rgidos

Ayuda a mantener la
forma de las clulas
Microtbulos como agentes de movilidad intracelular

Muchas partculas se desplazan por el citoplasma a

una velocidad de micrmetro por segundo. El
transporte celular o movimiento intracelular ms
estudiado es el axnico, sin embargo podemos
observar algunos ms.
 Transporte Axnico

Los microtbulos recorren tanto dendritas como

axones.
Puede ser antergrado o retrogrado.
Necesita de dos protenas para realizar el
transporte
Quinesina
Dinena citoplsmica
Protenas motoras que cruzan el citoesqueleto microtubular

Convierten la energa qumica en energa mecnica.

Pueden agruparse en:
Cinesinas
Dinenas
Miosinas
 Cinesinas

La ms pequea de los motores microtubulares.

Miembro de las KRP.
Es un tetrmero, formado por un par de cabezas
globulares
Transporta organelos.
 Dinena citoplsmica

Encargada de movimientos de cilios y flagelos.

Formada por dos cadenas pesadas y varias
intermedias.
Se mueve de manera progresiva hacia el extremo (-)
Agente generador de fuerza
Un motor microtubular dirigido al extremo (-)
Centros organizadores de
microtbulos.
La nucleacin de los microtbulos es un fenmeno que
ocurre de manera rpida dentro de la clula y en
relacin a diversas estructuras llamadas centros de
organizacin de microtbulos (MTOC).
 Centrosomas.
Mediante el cual los microtbulos desarrollan el ncleo.
- Contiene dos centriolos rodeados por material
pericentriolar electrodenso.
- Los centriolos son estructuras cilindricas que contienen 9
fibrillas espaciadas uniformemente.
- Cada fibrilla se observa como una banda de 3
microtbulos designados como tbulos A, B y C.
- Los centriolos se encuentran por lo general en pares.
Los centrosomas son el sitio de
nucleacin del microtbulo.
Su polaridad siempre es la misma:
Extremo menos-> centrosoma.
Extremo ms->en la punta
contraria.
El extremo creciente (o extremo
ms)puede contener conjuntos
de protenas diferentes que
unen al microtbulo a su
objetivo particular.
 Cuerpos basales y otros MTOC

Los microtbulos externos de los cilios y flagelos

se generan a partir de cuerpos basales que
se encuentra en la base de estos.
Los cuerpos basales tienen estructura idntica a
los centriolos, de hecho pueden dar origen uno
a otro.
 Nucleacin del microtbulo.

La funcin de MTOC es controlar el nmero de

microtbulos, su polaridad, nmero de protofilamentos
que constituyen las paredes y la localizacin del lugar
donde se ensamblarn.
Todos los MTOC comparten un mismo componente
proteico llamado tubulina gamma. La tubulina
gamma solo representa el 0.005% del total de
protenas.
 Cilios y flagelos: Estructura y funcin.

Son similares a los pelos de que

sobresalen de la superficie de diversas
clulas eucariotas.
Un cilio puede compararse con un
remo que mueve la clula en sentido
perpendicular al cilio mismo.
Durante el desplazamiento-> rgido.
En el movimiento de recuperacin ->
flexible.
Los Flagelos tienen diversos
patrones de movimiento
segn el tipo celular.
Si se realiza un corte transversal
del cilio podemos observar en
el centro el axonema.
9 microtbulos dobles en la
periferia del organelo rodeando
a un par central disposicin 9 +
2, teniendo todos la misma
polaridad
Se observa que los tbulos
centrales se encuentran
rodeados por la vaina central
conectada a los tbulos A de los
dobletes perifricos mediante
estructuras radiales.
Las parejas se conectan entre s
formando un puente entre parejas
por medio de la nexina.
 Brazos de Dineina

LA maquinaria para la locomocin

ciliar y flagelar esta dentro del
axonema.
Los brazos de dineina ciliar (o
axonemica) son los encargados
de brindar la energia necesaria
para la locomocin ciliar.
 Mecanismo de locomocin ciliar.
Se propuso que el movimiento Ciliar se
poda explicar cmo el desplazamiento
de parejas de microtbulos adyacentes
entre s, de esta manera los brazos de
dinena actuaran como puentes
colgantes que generan las fuerzas
necesarias para el movimiento ciliar y
flagelar.
Los puentes de nexina limitan la distancia
de desplazamiento de los dobletes
adyacentes uno sobre otro haciendo que
el axonema se doble como respuesta a
la fuerza de deslizamiento.
Filamentos intermedios y
Microfilamentos
 Filamentos intermedios
2 de 3 elementos del citoesqueleto.
Agrupaciones de proteinas fibrosas
Filamentos solidos No ramificados
Celulas animales
Fibras :fuertes y flexibles fuerza mecanica
Grupo de estructuras c/ Composicion quimica heterogenea
-codificados: 70 genes distintos.
Radial
Interconectadas c/otros filamentos
mediante enlaces cruzados.
(proteina dimerica, alargada: plectina)
 Ensamble y desemsamble de FI
Bloque de construccin bsico: Tetrmero cilndrico (x 2
dmeros que se alinean extremo amino y carboxilo
opuestos)
Tetrmero completo carece de : polaridad.
8 tetrmeros se relacionan =filamento con 60 nm de largo.
Relacin de longitudes unitarias de filamentosfilamento
intermedio
 Menos sensibles a agentes qumicos
Difciles de disolver

El ensamble y desemsamble se controla sobre todo por

fosforilacin y desfosforilacin de las subunidades.
-por ejemplo:
Fosforilacion de filamentos de vimentina por accin de la cinasa
A conduce al desemsamble.

Tienen un comportamiento dinamico in vivo.

Tipos de filamentos intermedios
Microfilamentos
 Microfilamentos
Finas fibras de protenas 3-7 nm
Soporte a clula, periferia
Citoesqueleto
Protena contrctil Actina

Estabilidad a la clula
Conjunto con los microtbulos : estructura y movimiento.
Microfilamentos + protena miosina= contraccin celular.
Movimiento celular: desplazamiento,contraccin y citocinesis.
 Ensamble de microfilamentos
Monomero de actina + molecula de ATP.
ATP monomero de actina hidroliza en ADP
 Miosina
Motor molecular
Protena Mecano-qumica.
Convertir la energa qumica (ATP) en mecnica
(movimiento)
NO
Convencionales
convencionales

Incapaz de
ensamblar
Clase ll filamentos in vitros
Miosina l , V

Contraccion
muscular Microvellosidades.
citocinesis
Miosina clase ll (convencional)