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UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO

Facultad de Ciencias de la Salud

Carrera Profesional de Farmacia y Bioqumica

Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de

Satureja nubigena Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

Cinthya Lisbeth Snchez Soto.

Rosa Delia Bustamante Bautista.

Asesora:

Mg. Q.F. Jssica Nathalie Bardales Valdivia.

Co-Asesor:

Q.F. Jaime Alexander Quijada Acua.

Cajamarca Per

Mayo 2015
UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO

Facultad de Ciencias de la Salud

Carrera Profesional de Farmacia y Bioqumica

Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de

Satureja nubigena Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

Tesis presentada en cumplimiento parcial de los requerimientos para optar el Ttulo

Profesional de Qumico Farmacutico.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto.

Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista.

Asesora: Mg. Q.F. Jssica Nathalie Bardales Valdivia.

Co-Asesor: Q.F. Jaime Alexander Quijada Acua.

Cajamarca Per

Mayo - 2015
COPYRIGHT 2015 by
CINTHYA LISBETH SNCHEZ SOTO.
ROSA DELIA BUSTAMANTE BAUTISTA.
Todos los derechos reservado.
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

PRESENTACIN

Seores del Jurado Dictaminador; dando cumplimiento a lo establecido por el

Reglamento de Grado y Ttulos de la Universidad Privada Antonio Guillermo

Urrelo, se somete a vuestra consideracin y elevado criterio profesional el

presente trabajo de investigacin intitulado:

Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de

Satureja nubigena Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

Para poder obtener el ttulo profesional de Qumico Farmacutico.

Es propicia esta oportunidad para manifestar el sincero reconocimiento hacia la

Universidad y su plana docente, que gracias a ellos y su buena voluntad han

contribuido en nuestra formacin profesional.

Dejamos a vuestro criterio, seores miembros del jurado dictaminador, la

calificacin del presente trabajo de investigacin.

Cajamarca, Mayo del 2015.

Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Rosa Delia Bustamante Bautista.


Bach.en Farmacia y Bioqumica. Bach. en Farmacia y Bioqumica.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. I
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUMICA

APROBACIN DE TESIS PARA OPTAR TTULO

PROFESIONAL.

Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite

esencial de Satureja nubigena pachachamcua frente a

Sporothrix schenckii.

Blgo. Hctor Emilio Garay Montaez.


PRESIDENTE.

Q.F. Fredy Martos Rodrguez.


MIEMBRO.

Mg. Q.F. Jssica Nathalie Bardales Valdivia.


ASESORA.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. II
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

DEDICATORIA

A MIS PADRES:

Julio Snchez Murrugarra y Mara Magdalena Soto Velsquez. Por ser lo ms

grande y valioso que Dios me ha regalado, por ser mi fuente de inspiracin y

razn que me impulsa a seguir adelante por el camino del bien.

A MI HERMANO:

Julio Manuel Snchez Soto. Por ser la persona que me motivan e impulsan a

seguir adelante y conseguir mis metas con su apoyo, consideracin, cario y

respeto.

Cinthya Lisbeth Snchez Soto.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. III
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

DEDICATORIA

A MIS PADRES:

Adolfo Bustamante Sempertigue y Mara Bautista Lpez. Porque hicieron todo

para que yo pudiera lograr mis sueos y por darme la mano cuando senta que el

camino terminaba, a ustedes por siempre mi agradecimiento.

A MI HERMANA:

Flor Elita Bustamante Bautista. Por ser lo ms grande y valioso que Dios me ha

regalado, quienes han sido mi inspiracin para ser mejor cada da de mi vida.

Rosa Delia Bustamante Bautista.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. IV
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

AGRADECIMIENTOS

Al culminar un trabajo tan rduo y lleno de dificultades como es el desarrollo de

una tesis para la obtencin de nuestro ttulo profesional, es inevitable que nos

llene de mucha felicidad y nos asalte un muy humano egocentrismo que nos lleva

a concentrar la mayor parte del mrito en el aporte que hemos hecho. Sin

embargo, este aporte hubiese sido imposible sin la participacin de personas e

instituciones que han facilitado las cosas para que este trabajo llegue a un feliz

trmino. Por ello, es para nosotros un verdadero placer utilizar este espacio para

ser justos y consecuentes con ellas, expresndoles nuestro agradecimiento.

Primeramente dar gracias a Dios, por estar con nosotros en cada paso que damos,

por fortalecer nuestro corazn e iluminar nuestra mente y por haber puesto en

nuestro camino a aquellas personas que han sido nuestro soporte y compaa

durante todo el periodo de estudios.

Agradecemos de manera especial y sincera a la Mg. Q.F. Jssica Nathalie

Bardales Valdivia, por aceptarnos para realizar esta tesis mediante su asesora. Su

apoyo y confianza en nuestro trabajo y su capacidad para guiar nuestras ideas ha

sido un aporte invaluable no solamente en el desarrollo de esta tesis, sino tambin

en nuestra formacin como investigadoras. Las ideas propias, siempre enmarcadas

en su orientacin y rigurosidad, han sido la clave del buen trabajo que hemos

realizado juntos, el cual no se puede concebir sin su siempre oportuna

participacin. Le agradecemos tambin el habernos facilitado siempre los medios

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. V
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

suficientes para llevar a cabo todas las actividades propuestas durante el desarrollo

de esta tesis. Muchas gracias profesora.

Gracias a nuestros amigos por su apoyo incondicional y por su amistad brindada

durante la poca de estudiantes universitarios que hemos compartido.

A nuestra querida Alma Mater, la Universidad Privada Antonio Guillermo Urrelo,

y a sus profesores, por los aprendizajes recibidos para nuestra formacin

profesional y por haber permitido el uso de equipos y materiales del laboratorio

para la realizacin del presente trabajo de investigacin.

Cinthya Lisbeth y Rosa Delia.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. VI
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

RESUMEN

El presente trabajo de investigacin estuvo enfocado en determinar el efecto

antifngico in vitro del aceite esencial de las hojas de Satureja nubigena

Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii en sus dos fases de crecimiento

levaduriforme y filamentoso.

En el diseo metodolgico se tuvieron en cuenta un grupo control y cinco grupos

problema para cada forma de crecimiento. El aceite esencial de las hojas de

Satureja nubigena Pachachamcua se coloc a concentracin de 5, 10, 20, 40,

80 L/mL, en las placas con agar Sabouroud; luego se procedi a sembrar las

cepas de Sporothrix schenckii en sus dos formas de crecimiento de levadura y

filamento y se trabaj por duplicado; procedindose despus a incubar a 37 C,

con una lectura posterior a las 24 y hasta 48 horas para el crecimiento

levaduriforme y a 25 C con una lectura posterior a las 24 horas hasta los 15 das

para el crecimiento filamentoso.

Segn los resultados obtenidos se concluy que el aceite esencial de las hojas de

Satureja nubigena Pachachamcua presenta efecto antifngico in vitro

inhibiendo completamente el crecimiento del hongo en sus dos formas.

Los resultados obtenidos fueron contrastados con la prueba estadstica no

paramtrica U de MANN-WHITNEY la cual compar los resultados obtenidos

de los diferentes grupos de estudio obtenindose un valor de p 0,05 al comparar

los grupos problema con el control, concluyendo que existe diferencia

significativa entre los grupos problema y el grupo control.

Palabras clave: Satureja nubigena, efecto antifngico, Sporothrix schenckii.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. VII
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

ABSTRACT

This research was focused on determining the antifungal effect in vitro of

essential oil from the leaves of Satureja nubigena "pachachamcua" against

Sporothrix schenckii in its two growth phases.

The methodological design took into account one control group and five problem

groups for each growth form. The concentrations of oil leaves of Satureja

nubigena pachachamcua was placed at concetration of 5, 10, 20, 40, 80 L/mL

in Sabouraud agar plates; then it was proceeded to plant Sporothrix schenckii

strains in its two forms of growth; yeast and filamentous in duplicate; proceeding

then to incubate at 37 C, further reading at 24 and up to 48 hours for yeast

growth and a subsequent reading 25 C to 24 hours to 15 days for filamentous

growth.

According to the results it was concluded that the essence oil of Satureja

nubigena leaves "Pachachamcua" has antifungal effect in vitro, completely

inhibiting growth of the fungus in its two forms.

The results were compared with the nonparametric statistical test "MANN-

WHITNEY" which compared the results obtained from the different study groups

obtaining a value of p 0,05 when comparing the problem group with the control

groups, concluding that there is significant difference between problem groups

and the control group.

Keywords: Satureja nubigena, antifungal effect, Sporothrix schenckii.

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Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. VIII
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

NDICE

PRESENTACIN I

APROBACIN DE TESIS II

DEDICATORIA III

AGRADECIMIENTO V

RESUMEN VII

ABSTRACT VIII

LISTA DE TABLAS XI

I. INTRODUCCIN 1

II. MARCO TERICO 4

2.1 Esporotricosis 4

2.1.1 Epidemiologa 4

2.1.2 Etiologa 6

2.1.3 Sporothrix schenckii 7

2.2 Genero Satureja 15

2.3 Satureja nubigena Pachachamcua 17

2.2.1 Clasificacin taxonmica 17

2.2.2 Caractersticas morfolgicas 18

2.2.3 Origen y distribucin 18

2.2.4 Estado de conservacin 18

2.2.5 Utilidad mdica 18

2.2.6 Composicin qumica 18

III. METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN 21

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Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. IX
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

3.1 Unidad de anlisis, universo y muestra 21

3.2 Mtodo de investigacin 22

3.3 Tcnica de investigacin 22

3.4 Equipos, instrumentos, reactivos y/o sustancias 28

3.5 Tcnica de anlisis de datos estadstico 29

IV. RESULTADOS 30

V. DISCUSIN 38

VI. CONCLUSIONES 45

VII. RECOMENDACIONES 46

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 47

ANEXOS 52

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

LISTA DE TABLAS

Tabla N 01: Resultados obtenidos de todos los medios de cultivo de la


fase de crecimiento levaduriforme del hongo Sporothrix
schenckii 30

Tabla N 02: Prueba estadstica U de MANN-WHITNEY de los


resultados obtenidos de los diferentes grupos estudiados de
la fase de crecimiento levaduriforme del hongo Sporothrix
schenckii 33

Tabla N 03: Resultados obtenidos de todos los medios de cultivo de la


fase de crecimiento filamentoso del hongo Sporothrix
schenckii 34

Tabla N 04: Prueba estadstica U de MANN-WHITNEY de los


resultados obtenidos de los diferentes grupos estudiados de
la fase de crecimiento levaduriforme del hongo Sporothrix
schenckii 37

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. XI
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

LISTA DE GRFICOS

Grfico N 01: Resultados obtenidos de todos los grupos estudiados de


la forma de crecimiento levaduriforme del hongo
Sporothrix schenckii 31

Grfico N 02: Resultados obtenidos de todos los grupos estudiados de


la forma de crecimiento filamentoso del hongo
Sporothrix schenckii 35

LISTA DE FIGURAS

Figura N 01: Estructuras qumicas del Carvacrol y el Timol 43

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

I. INTRODUCCIN

La esporotricosis es una infeccin mictica de evolucin subaguda o crnica,

adquirida por inoculacin traumtica o por inhalacin de conidios de alguna de las

especies del complejo, Sporothrix schenckii. La enfermedad puede afectar a

humanos y animales. Se caracteriza por la presencia de lesiones nodulares en piel

y tejido subcutneo. Frecuentemente sigue el trayecto de los vasos linfticos y

ocasionalmente otros rganos, huesos y articulaciones. Se localiza principalmente

en cara y en extremidades torcicas y plvicas.19

Es as que uno de los recursos ms utilizados por los seres humanos en distintas

pocas a lo largo de su historia, son las plantas medicinales, las mismas que han

permitido prevenir, tratar y curar mltiples problemas de salud. En los sistemas de

salud de los pases subdesarrollados o en desarrollo, las plantas representan una

alternativa teraputica de diversas afecciones del ser humano y animales.16

La Organizacin Mundial de la Salud (OMS), estim que ms del 80 % de la

poblacin mundial usa la medicina tradicional para cubrir sus necesidades en la

atencin primaria, con el empleo de extractos de plantas o sus principios activos.

Algunas plantas medicinales empleadas en pases del primer mundo cuentan con

estudios farmacolgicos que avalan su uso y determinan sus mecanismos de

accin, estando sus monografas incorporadas en diversas farmacopeas, en la

OEA y en la Comisin Europea sin embargo, en nuestro pas se utilizan ms

frecuentemente plantas autctonas, que cuentan con menor cantidad de estudios

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

farmacolgicos experimentales y clnicos, de manera que hay poca bibliografa

disponible.16

El Per no es ajeno a esta situacin, ya que cuenta con una gran diversidad en su

flora, donde habra alrededor de 80 mil especies vegetales (20 % de las existentes

en la tierra), y de las cuales solamente 2 000 se vienen empleando con fines

curativos. Siendo necesario evaluar las propiedades medicinales de estas plantas.10

La farmacopea peruana tiene muchas plantas con aplicaciones curativas. Diversos

investigadores han sealado que existen ms de 3 000 especies. La Regin Nor-

andina de Cajamarca, Per, ocupa una superficie de 33 317,54 km2 y en ella

existen variados ecosistemas, el tropical, el templado y el fro; es por estas

caractersticas que podemos encontrar en Cajamarca una biodiversidad inmensa e

invaluable que el hombre a lo largo de su estancia ha logrado manipular y

aprovechar.14

Por tales motivos decidimos comprobar el efecto antifngico del aceite esencial

de las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii

para contribuir con una fuente de informacin acerca de su actividad y a la

disminucin de la incidencia de este problema que afecta a un alto porcentaje de

la poblacin as como los problemas econmicos que ocasiona para su tratamiento

farmacolgico que conlleva a presentar diferentes reacciones adversas para los

pacientes tratados.

Por lo anteriormente expuesto se formul la siguiente pregunta:

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

Presenta actividad antifngica in vitro el aceite esencial de las hojas de

Satureja nubigena Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii?

Teniendo como objetivos a los siguientes:

Objetivo General.

Determinar la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de las

hojas de Satureja nubigena Pachachamcua frente a Sporothrix

schenckii.

Objetivos Especficos.

Determinar la concentracin ptima del aceite esencial de las hojas de

Satureja nubigena Pachachamcua para obtener la inhibicin de

Sporothrix schenckii en su forma de levadura.

Determinar la concentracin ptima del aceite esencial de las hojas de

Satureja nubigena Pachachamcua para obtener la inhibicin de

Sporothrix schenckii en su forma de filamento.

Con el propsito de dar respuesta al problema de investigacin planteado, se

formul la siguiente hiptesis:

El aceite esencial de las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua presenta

actividad antifngica in vitro frente a Sporothrix schenckii.

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Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

II. MARCO TERICO

2.1 Esporotricosis.

La esporotricosis es una infeccin mictica subaguda o crnica, causada por

el hongo dimrfico Sporothrix schenckii presente en los suelos. El cual

incluye hasta cinco clases diferentes, distribuidas por regiones geogrficas

diversas, tales son: S. schenckii, S. brasiliensis y S. globosa, capaces de

causar enfermedad humana y animal; las otras dos son S. mexicana y S.

albicana no asociadas con ninguna enfermedad.20

Esta micosis se propaga particularmente en pacientes inmunocomprometidos.

Se localiza preferentemente en cara y extremidades y se caracteriza por

ndulos que dan lugar a lesiones fijas verrugosas o linfangticas.20

2.1.1 Epidemiologa.

Todas las formas de esporotricosis humana son ocasionadas por la

especie Sporothrix schenckii, la forma cutnea ha sido reportada en

zonas tropicales cuya altitud vara entre 890 y 3129 m.s.n.m, y entre 9

y 33 C de temperatura.6

Esta micosis se conoce como cosmopolita debido a su amplia

distribucin. En Amrica, los pases con mayor nmero de casos

publicados son: Brasil, Mxico, Colombia, Per, Uruguay, Venezuela,

Costa Rica, Guatemala y los Estados Unidos de Norteamrica;

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Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

Australia en Oceana; en Asia son Japn, India, China oriental y Corea

del Sur. En frica slo la Repblica de frica del Sur. En Europa se

conocen focos endmicos pequeos en Italia del Sur, Espaa y las

Islas Britnicas.20

En el Per, es la micosis subcutnea ms frecuente, en reas rurales y

agrcolas de la sierra como La Libertad, Cajamarca, Ayacucho,

Ancash, Cusco y Apurmac. Las estadsticas ms altas de la infeccin

se reportan en la sierra andina de Otuzco en la Libertad y el valle

interandino de Abancay en Apurmac.15

Los datos de esporotricosis diagnosticados por el Laboratorio de

Referencia Nacional de Micologa del Instituto Nacional de Salud del

Per revelan, en un periodo de 10 aos, un total de 472 casos, de los

cuales 235 (50 %) procedan de Abancay, 204 (43 %) de Cajamarca y

como nuevas zonas Amazonas, Arequipa e Iquitos.21

El distrito de Cajamarca, es una zona propicia para el desarrollo del

hongo Sporothrix schenckii ya que su flora es a base de eucaliptos,

sauces, molles, rboles con espinas, cactus diversos y abundantes

rosales.6

La Revista Peruana de Medicina Experimental de Salud Pblica 2014

report que Cajamarca presenta 18,1 24,5 % de pobreza extrema as

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como un alto indice de enfermedades infecciosas no atendidas entre

las cuales resalta la esporotricosis.1

2.1.2 Etiologa.

El agente causal es Sporothrix schenckii, hongo dimrfico que vive

como saprfito del suelo, materia orgnica, vegetales y otros sustratos.

Posee una pared celular compuesta por beta-glucanos y glucopptidos.

Se le ha relacionado filogenticamente con Ophiostoma (Ceratocystis)

stenoceras. Se adquiere principalmente por inoculacin traumtica y

rara vez penetra por inhalacin.20

Se describe cuatro factores de patogenicidad: la termotolerancia

(dimorfismo), la presencia de melanina, la capacidad de adherencia a

clulas epiteliales, endotelialales y a la matriz extracelular y la

presencia de perxido de ergosterol (compuesto protectivo).20

La distribucin universal del S. schenkii y los bajos registros de

enfermedad, indican que hay una elevada resistencia a la enfermedad,

podemos pensar que su padecimiento estara relacionado con: la

exposicin al agente infecciosos, la que debe ser repetida o en altas

dosis, la profundidad del traumatismo, la respuesta inmunitaria del

husped adems del alcoholismo y la desnutricin, considerndoselos

como los factores predisponentes ms importantes. La exposicin a

grandes concentraciones de conidios favorece la enfermedad mientras

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que el contacto con bajas dosis confiere inmunidad (hipersensibilidad

cutnea en reas endmicas en el 85 % de la poblacin).20

2.1.3 Sporothrix schenckii.2

Hongo dimrfico, es decir, se desarrolla de forma distinta en funcin de

la temperatura de crecimiento, en forma de levadura a 37 C en tejidos

animales o humanos y como hongo filamentoso a 25 C en la naturaleza.

Se encuentra en la vegetacin y se inocula en la piel cuando sta

pierde continuidad, por ejemplo mientras se estn manejando

materiales de jardn como rosales, zarzas o tierra abonada. Puede ser

una enfermedad ocupacional para granjeros y horticultores entre otros.

2.1.3.1. Clasificacin taxonmica.2

Reino: Fungi.

Phylum: Ascomycota.

Clase: Euascomycetes.

Orden: Ophiostomatales.

Familia: Ophiostomataceae.

Gnero: Sporothrix.

Especie: S.schenckii.

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2.1.3.2. Fase filamentosa.2

Morfologa de la colonia: Crece a temperaturas inferiores a

37 C. Presenta colonias de crecimiento lento (3 - 5 das)

inicialmente claras, hmedas o levaduriformes, que

posteriormente se convierten en colonias duras y arrugadas

de color marrn o negro en su totalidad o por zonas, debido

a la produccin de conidios pigmentados. La coloracin

puede ser inconstante y variar no slo entre los

aislamientos, sino que incluso puede perderse tras mltiples

pases.

Morfologa microscpica: En el examen microscpico, se

observan hifas delgadas de 1 - 2 mm de dimetro, con

conidiforos perpendiculares cuyo extremo distal se dilata

formando una vescula denticulada, de la que nacen

simpoidalmente conidios hialinos de 2 - 3 mm por 3 - 6 mm

que se agrupan en forma de ramillete o margarita. A medida

que el cultivo envejece, la conidiacin aumenta y aparecen

conidios ssiles a lo largo de los conidiforos e incluso

hifas no diferenciadas. Algunas cepas forman conidios de

mayor tamao, triangulares, pigmentadas y de pared gruesa,

ms resistentes llamados raduloconidios.

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2.1.3.3. Fase levaduriforme.2

Morfologa de la colonia: La levadura crece a 37 C en

medios enriquecidos y en los tejidos parasitados. La colonia

tiene aspecto cremoso y brillante que se torna de color gris

o crema.

Morfologa microscpica: Se observan clulas

levaduriformes redondeadas o con forma de cigarro, con

mltiples gemaciones de 3 - 5 m de dimetro. El cuerpo

asteroide es muy sugestivo de esporotricosis, pero tambin

puede observarse en otras infecciones fngicas. Est

constituido por una clula levaduriforme redonda u oval,

rodeada de un material eosinoflico radiado constitudo por

un complejo antgeno-anticuerpo. Estos cuerpos se observan

con mayor frecuencia en las lesiones secundarias, del

cerebro y del ojo.

2.1.3.4. Distribucin geogrfica.2

La esporotricosis es una micosis subcutnea muy estudiada

producida por un gnero fngico que presenta una gran

capacidad adaptativa al medio ambiente, ocasionando

numerosos casos en todo el mundo. Sporothrix es un gnero se

desarrolla en clima templado, hmedo y clido tropical, con

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una temperatura promedio de entre 20 C y 25 C, es resistente

a la desecacin, pero lbil a la luz solar y al fro, puede crecer

en diversos sustratos, principalmente de origen vegetal . Es una

enfermedad cosmopolita (exceptuando los polos), en la

actualidad las zonas ms afectadas son frica, Amrica

Central y Amrica del Sur. Generalmente se diagnostican

casos aislados pero tambin se han registrado epidemias

familiares. Aunque hacen falta ms estudios, las especies del

gnero presentan diferentes distribuciones geogrficas:

Sporothrix brasiliensis se ha localizado casi exclusivamente en

Brasil, mientras que Sporothrix globosa presenta una

distribucin cosmopolita, si bien la mayora de cepas han sido

aisladas de la India.

Aunque esta enfermedad puede afectar a cualquier persona,

quienes manipulan plantas espinosas, musgo o fardos de heno

contaminados con este hongo en particular, corren mayor

riesgo de contraer la enfermedad. Se han producido brotes de

esporotricosis entre trabajadores de guarderas infantiles,

jardineros que cuidan rosas, nios que juegan con fardos de

paja y trabajadores de invernaderos que manipulan espinas de

agracejos contaminados por el hongo (principalmente en el

hemisferio norte).

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Tiene predominio en frica del Sur, Japn y Amrica en la

zona intertropical.

2.1.3.5. Distribucin de acuerdo a sexo y edad.2

La esporotricosis se presenta en ambos sexos y en todas las

edades. En muchas regiones se han observado diferencias

significativas en cuanto al sexo est relacionado con la dupla

ocupacinexposicin al agente. Algunos autores indican un

predominio en el sexo masculino de hasta 3:1, mientras que

otros muestran una relacin 1:1.

Se puede presentar a cualquier edad, sin embargo se ha

reportado mayor frecuencia en personas entre 15 y 35 aos.

Esta patologa no presenta diferencia con relacin a la etnia. La

poblacin ms afectada pertenece a sectores socioeconmicos

bajos, siendo la desnutricin, el alcoholismo, diabetes, SIDA

los principales factores predisponentes.

La infeccin por Sporothrix ha aumentado de manera

importante en sujetos inmunocomprometidos, principalmente

aquellos VIH (+). S. schenckii es un hongo dimrfico saprfito

cuyo hbitat es suelo, vegetales en descomposicin, se lo asla

de heces de animales y de madrigueras de armadillos (en

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nuestra zona). Muchos animales como perros, gatos, caballos,

jabales, armadillos, entre otros, son portadores o pueden

padecer la enfermedad. Son pocos los casos descriptos de

transmisin animales enfermos, hombre.

2.1.3.6. Fuentes de infeccin y transmisin.2

Tradicionalmente se conoce a la esporotricosis como la

enfermedad de los floristas, especialmente de los manipulan

rosas, o jardineros. Otras profesiones o actividades laborales

como pescadores, granjeros, horticultores, cazadores, amas de

casa, microbilogos, etc estn igualmente relacionadas con

esta enfermedad, pero en todos los casos el paciente no

recuerda el momento de la injuria.

Existen casos en los que el modo de transmisin no est claro y

estos estn relacionados con zonas endmicas como por

ejemplo en Per. All los pacientes presentan factores

predisponentes comunes como la convivencia con gatos

enfermos, las actividades al aire libre y el bajo nivel socio-

econmico. La transmisin interhumana es muy rara, al igual

que las epidemias.

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2.1.3.7. Cuadro clnico.2

La esporotricosis presenta un perodo de incubacin variable

de pocos das hasta 3 meses.

Las manifestaciones clnicas de la enfermedad son diversas y

estn relacionadas con el sitio de inoculacin, la carga del

inoculo, la respuesta inmunitaria del husped, la profundidad

del traumatismo y la tolerancia trmica del agente causal. Las

vas de penetracin del microorganismo son diversas pero la

inoculacin es la ms frecuente, seguido por la va inhalatoria.

Clasificacin de la enfermedad:

Cutnea:

o Linfocutnea o linfangtica.

o Cutnea fja.

Extracutnea:

o Pulmonar.

o Mucosa o sistmica.

o Multifocal o diseminada osteoarticular.

Generalmente la esporotricosis involucra piel y vasos linfticos

adyacentes al sito de inoculacin y la diseminacin a otros

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tejidos o localizaciones est directamente relacionada con la

condicin inmunolgica del paciente.

La forma linfocutnea es la manifestacin ms frecuente de

esta enfermedad, representa en el 75 % de los casos. Entre los

7 o 30 das de producido el trauma e inoculacin del S.

schenkii complex penetra en la piel se observa una ppula

indurada de 2 - 4 cm de dimetro, llamado chancro de

inoculacin. Esta lesin puede progresar y formar ndulos con

o sin ulceracin, a lo largo de la cadena ganglionar contigua al

sitio de inoculacin.

En los adultos la zona de inoculacin ms frecuente es en los

miembros mientras que en los nios es en el rostro.

La esporotricosis fija se caracteriza por placas nicas

ulceradas, verrucosas o acneiformes. Generalmente no se

extienden o diseminan a otras partes de la piel.

La forma osteoarticular se presenta con sinovitis, periostitis o

con artritis mono articular. Con el tiempo aparece la lesin se

agrega dolor, edema y rigidez.

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Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

La presentacin pulmonar es la frecuente de las extracutneas

manifestndose con tos productiva, con o sin hemoptisis, fiebre

y prdida de peso.

En la enfermedad cutnea diseminada se observan mltiples

lesiones en piel sin diseminacin sistmica.

La infeccin diseminada puede afectar SNC (meningitis) o

neuropatas por compromiso de los nervios perifricos, y se

asocia a pacientes inmunocomprometidos, siendo el pronstico

grave.

En pacientes portadores de VIH o con SIDA se observan las

formas ms graves de la enfermedad.

2.2 Gnero Satureja.

Epling C (1927), realiz su primer informe del gnero Satureja, para Amrica

del Sur. El bosquej solamente tres secciones, Gardoquia, Hesperothymus, y

Xenopoma con un total de 39 especies. El hizo la mayor parte de su trabajo

en el Missouri Botanical Garden y luego en la Universidad de California. Los

ngeles durante 1925; en ese tiempo fueron muy pocas las representaciones

an comunes y ampliamente distribuidos los gneros. Durante 1927 y 1928

cuando l estuvo en Kew y en otros herbarios europeos, encontr suficiente

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Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

evidencia como para modificar las disposiciones que haba hecho en 1925,

incrementando ms tarde un informe en varias publicaciones.5

Es un gnero ampliamente diseminado en Los Andes. Sin embargo, los

especmenes disponibles para identificacin cientfica han sido tan escasos,

hasta hace poco tiempo, que los modos de variacin y diferenciacin

especfica del gnero pudieron ser estimados solamente con mucha dificultad.

Durante estos ltimos aos, gracias al creciente nmero de botnicos en los

pases andinos, sus activas investigaciones, as como tambin sus intercambios

de especmenes, suficiente material ha venido a mano para poder caracterizar

los modos de variacin con tolerable certidumbre los diferentes grupos de

especies de este gnero.5

Habita en el pramo, es una hierba pequea, postrada, de hojas muy pequeas,

pubescentes y flores de corola blanca; axilares algunas veces solitarias; en un

extremo hierbas postradas y delicadas, en el otro, frtices erectos de hasta 2

cm de altura; lminas foliares diversiformes y pecolos variables en longitud;

flores a veces agrupadas conjuntamente formando ms o menos espigas

interrumpidas; tubo del cliz en la mayor parte con carpostegio, limbo general

y notablemente menor, algunas veces subigual en flores menudas; dientes

superiores connados ms o menos hasta la mitad; tubo de la corola casi

siempre ms largo que el limbo; 4 estambres en pares situados arriba de la

mitad del tubo extendindose ms o menos hacia el exterior, rama posterior

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Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

del estilo ms corta que la anterior; forma colonias o cojines pequeos en

bordes de caminos y entre las macollas de pasto.5

Las partes areas de estas especies tienen sabor distinto y pueden ser

agregados a rellenos, y en salsas como sazonador. Las hojas, flores y tallos

por los fitoconstituyentes que contienen como aceites esenciales, taninos,

carvacol, timol. Son usados en infusin, medicina tradicional, para tratar

dolores musculares, nusea, diarrea y enfermedades infecciosas.4

2.3 Satureja nubigena Pachachamcua.

2.3.1 Clasificacin taxonmica.18

Reino: Plantae.

Filo: Angiospermae.

Clase: Magnoliopsida.

Orden: Lamiales.

Familia: Lamiaceae.

Gnero: Satureja.

Especie: S. nubigena.

Autor: (Kunth) Briq.

Altitud: 3000 y 4000 m.s.n.m.

Regin: Sierra.

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Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

2.3.2 Caractersticas morfolgicas.18

Planta herbcea, postrada, pequea, de 10 25 cm de largo y

aromtica, presenta tallos delgados y radicantes, flores blancas y hojas

pequeas.

2.3.3 Origen y distribucin. 18

Originaria del Per; se encuentra en la parte alta de los andes, entre los

3000 y 4000 m.s.n.m; crece entre pajonales, en espacios abiertos y

caminos abandonados.

2.3.4 Estado de conservacin. 18

Escasa, de rea de distribucin reducida.

2.3.5 Utilidad media. 18

Parte utilizada. Toda la planta.

Principios activos. Aceites esenciales, taninos.

Accin farmacolgica. Es relajante nervioso, estomquico,

carminativo, usado contra el soroche o mal de altura y para

contrarrestar el frio y no es txica.

2.3.6 Composicin qumica.

La proporcin de cada componente influye el estado de desarrollo de

la planta, as como los factores climticos y ecolgicos.8

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
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Existen diferentes quimiotipos de Saturejas y sus componentes

principales son los siguientes: Aceite esencial rico en carvacrol y p-

cimeno en menor proporcin se encuentra el timol, y terpineno, y -

pineno, limoneno, borneol, terpineol, carvona (la altitud disminuye

la concentracin en aceite esencial) tenemos: cidos terpnicos

(oleanlico, urslico), cidos fenlicos (cafeico y rosmarnico);

taninos.12

El aceite esencial posee una potente actividad antifngica, bactericida,

antisptica, aperitiva, digestiva, carminativa, colagoga, espasmlitica,

balsmica y ligeramente antidiurtica. Los cidos fenlicos refuerzan

la accin antisptica.12

Gilardoni G, et al (2011) (Concluyen que los componentes y

cantidades de aceites esenciales, varan segn el lugar en el que se

encuentren las diferentes especies de Saturejas. Satureja boliviana de

Las Tacanas y Las Juntas presentan uniformidad en sus compuestos

voltiles, predominando E-cariofileno y germacreno-D; deltacadineno,

espatulenol, cadinolepi-alfa cadinol-alfa

El aceite esencial de Satureja odora de Taf del Valle tiene idntico

compuesto mayoritario, E-citral que la Satureja parvifolia de la misma

zona. Las poblaciones de Satureja parvifolia de abra del Infiernillo y

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
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Los Cardones tienen como compuestos voltiles mayoritarios

carvacrol y acetato de carvacrol respectivamente.8

Satureja odora. Linalol, isomentona, Eisocitral, pulegona, carvacrol,

Ecariofileno, biciclogermacreno. Satureja parvifolia: p-cimeno, 1,8-

cineol, Eisocitral, pulegona, carvacrol, piperitenona. Acetato de

carvacrol. Aceites comunes de Satureja boliviana y Satureja

parvifolia: p-cimeno. Aceites comunes de Satureja odora y Satureja

parvifolia: Eisocitral, pulegona, carvacrol.8

La composicin del aceite esencial de Satureja odora de Taf del

Valle con un compuesto mayoritario, cuyo ndice de Kovats lo indican

como Eisocitral (estructura a confirmar por RMN), es diferente al

quimiotipo determinado previamente en dos localidades de Crdoba

(xido de piperitona como compuesto principal. Las tres poblaciones

de Satureja parvifolia de Tucumn son distintas en la qumica de sus

aceites esenciales, y presumiblemente pertenecen a tres quimiotipos

diferentes: Eisocitral, pulegona, carvacrol, acetato de carvacrol,

piperitenona. Lo mencionado confirma la evidencia de variabilidad

qumica en estas especies.8

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

III. METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN

3.1 Unidad de anlisis, universo y muestra.

3.1.1 Unidad de anlisis: Hojas de Satureja nubigena Pachachamcua del

Distrito Jos Sabogal, Provincia de San Marcos, Regin de Cajamarca;

cultivadas orgnicamente y cepas de Sporothrix schenckii obtenidas del

Laboratorio Referencial del Hospital Regional de Cajamarca.

3.1.2 Universo: Estuvo constituido por todas las plantas de la especie

Satureja nubigena Pachachamcua y por las cepas de Sporothrix

schenckii.

3.1.3 Muestra:

3.1.3.1 Vegetal: Aceite esencial, extrado de 15 kg de la especie

Satureja nubigena Pachachamcua la cual fue obtenida del

distrito Jos Sabogal, provincia de San Marcos, Regin de

Cajamarca.

a. Criterios de inclusin: Especies vegetales frescas, libres de

impurezas y sin contaminaciones.

b. Criterios de exclusin: Especies vegetales que no cumplan

con los criterios de inclusin.

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3.1.3.2 Hongo: Se trabaj con el hongo Sporothrix schenckii aislado en

el Laboratorio Referencial del Hospital Regional de Cajamarca.

a. Criterios de inclusin: Cepas aisladas en el laboratorio

referencial del Hospital Regional de Cajamarca.

b. Criterios de exclusin: Cepas que no cumplan con los

criterios de inclusin.

3.2 Mtodos de investigacin.

La presente investigacin est basada en un procedimiento experimental

diseado para manipular variables en condiciones especiales que permitan

poner en juego algunas variables para observar su comportamiento y lograr as

descubrir la esencia del objeto de estudio, segn el fin que persigue es bsica

estuvo encaminada a la resolucin de problemas prcticos, con un margen de

generalizacin limitado.

3.3 Tcnicas de investigacin

Esta prueba llamada dilucin en agar se bas en la inhibicin del crecimiento

fngico, mediante la dilucin del aceite esencial de las hojas de Satureja

nubigena pachachamcua en agar sabouroud, y posteriormente se evidencia

por la ausenci de crecimiento en las placas.1

3.3.1 Recoleccin de la especie vegetal. Se acudi al distrito Jos Sabogal,

provincia de San Marcos de la regin Cajamarca.

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3.3.2 Seleccin de la especie vegetal. Recolectada la especie vegetal, se

procedi a la seleccin de hojas que cumplan los criterios de

inclusin, para posteriormente proceder a la extraccin de su aceite.

3.3.3 Extraccin del aceite esencial: Se pesaron 5 kg de la especie vegetal

y se coloc en el alambique destilador y se agreg 16 L de agua en el

tanque generador de vapor, posteriormente se acopl los tres

componentes del equipo, dejando correr el agua por el refrigerante y

se extrajo el aceite esencial, por un tiempo de 4 horas

aproximadamente.

Transcurrido el tiempo de la extraccin, luego con una micropipeta se

elimin los restos de agua presentes en el aceite esencial para atrapar

los restos de agua. Posteriormente se midi y se recogi el aceite

esencial en un frasco de color mbar con tapa, almacenndolo en

refrigeracin hasta su utilizacin para evitar reacciones oxidativas que

pudieran alterar su composicin.

3.3.4 Elaboracin de los medios de cultivo.

3.3.4.1 Preparacin del agar saburoud: Fue elaborado diluyendo 65g

del agar en 1 000 mL de agua destilada procedindose a

autoclavar para luego ser servidas en las placas Petri estriles.

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3.3.4.2 Siembra de los medios de cultivo:

Siembra de Sporothrix schenckii para su forma de

levadura

o Grupo control: se sirvi el agar en 1 placa Petri estril, se

dej solidificar para luego sembrar la cepa de Sporothrix

schenckii. Se incub por 37 C por 48 horas, el trabajo se

realiz por duplicado.

o Grupo problema N 01: Se sirvi el agar saburoud en 1

placa Petri estril y se agreg 5 L/mL de aceite esencial

de Satureja, se uniformiz y se dej solidificar para luego

sembrar la cepa de Sporothrix schenckii. Se incub a

37 C por 48 horas, el trabajo se realiz por duplicado.

o Grupo problema N 02: Se sirvi el agar saburoud en 1

placa Petri estril y se agreg 10 L/mL de aceite esencial

de Satureja, se uniformiz y se dej solidificar para luego

sembrar la cepa de Sporothrix schenckii. Se incub a

37 C por 48 horas, el trabajo se realiz por duplicado.

o Grupo problema N 03: Se sirvi el agar saburoud en 1

placa Petri estril y se agreg 20 L/mL de aceite esencial

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de Satureja, se uniformiz y se dej solidificar para luego

sembrar la cepa de Sporothrix schenckii. Se incub a

37 C por 48 horas, el trabajo se realiz por duplicado.

o Grupo problema N 04: Se sirvi el agar saburoud en 1

placa Petri estril y se agreg 40 L/mL de aceite esencial

de Satureja, se uniformiz y se dej solidificar para luego

sembrar la cepa de Sporothrix schenckii. Se incub a

37 C por 48 horas, el trabajo se realiz por duplicado.

o Grupo problema N 05: Se sirvi el agar saburoud en 1

placa Petri estril y se agreg 80 L/mL de aceite esencial

de Satureja, se uniformiz y se dej solidificar para luego

sembrar la cepa de Sporothrix schenckii. Se incub a

37 C por 48 horas, el trabajo se realiz por duplicado.

Siembra de Sporothrix schenckii para su forma de

filamento.

o Grupo control: se sirvi el agar en 1 placa Petri estril, se

uniformiz y se dej solidificar para luego sembrar la cepa

de Sporothrix schenckii. Se incub por 25 C por 15 das,

el trabajo se realiz por duplicado.

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o Grupo problema N 01: Se sirvi el agar saburoud en 1

placa Petri estril y se agreg 5 L/mL de aceite esencial

de Satureja, se uniformiz y se dej solidificar para luego

sembrar la cepa de Sporothrix schenckii. Se incub a

25 C por 15 das, el trabajo se realiz por duplicado.

o Grupo problema N 02: Se sirvi el agar saburoud en 1

placa Petri estril y se agreg 10 L/mL de aceite esencial

de Satureja, se uniformiz y se dej solidificar para luego

sembrar la cepa de Sporothrix schenckii. Se incub a

25 C por 15 das, el trabajo se realiz por duplicado.

o Grupo problema N 03: Se sirvi el agar saburoud en 1

placa Petri estril y se agreg 20 L/mL de aceite esencial

de Satureja, se uniformiz y se dej solidificar para luego

sembrar la cepa de Sporothrix schenckii. Se incub a

25 C por 15 das, el trabajo se realiz por duplicado.

o Grupo problema N 04: Se sirvi el agar saburoud en 1

placa Petri estril y se agreg 40 L/mL de aceite esencial

de Satureja, se uniformiz y se dej solidificar para luego

sembrar la cepa de Sporothrix schenckii. Se incub a

25 C por 15 das, el trabajo se realiz por duplicado.

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o Grupo problema N 05: Se sirvi el agar saburoud en 1

placa Petri estril y se agreg 80 L/mL de aceite esencial

de Satureja, se uniformiz y se dej solidificar para luego

sembrar la cepa de Sporothrix schenckii. Se incub a

25 C por 15 das, el trabajo se realiz por duplicado.

3.3.5 Tcnica de Siembra e incubacin del hongo Sporothrix schenckii.

3.3.5.1 Fase levaduriforme: La siembra se realiz con la tcnica

llamada piquetes la cual consisti en transferir e inocular con

el asa de siembra, previamente esterilizada y fra, tres

pequeas muestras de la colonia a cada uno de los medios de

cultivo para luego ser incubados a 37 C.

3.3.5.2 Fase filamentosa: La siembra se realiz con la tcnica

llamada piquetes la cual consisti en transferir e inocular con

el asa de siembra, previamente esterilizada y fra, tres

pequeas muestras de la colonia a cada uno de los medios de

cultivo para luego ser incubados a 25 C.

3.3.6 Lectura de resultados obtenidos.

3.3.6.1 Fase levaduriforme: La lectura de los resultados se realiz a

las 48 horas para determinar si existe presencia de crecimiento

del hongo Sporothrix schenckii en todos los medios de cultivo.

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3.3.6.2 Fase filamentosa: La lectura de los resultados se realiz a los

15 das para determinar si existe presencia de crecimiento del

hongo Sporothrix schenckii en todos los medios de cultivo.

3.4 Equipos, instrumentos, reactivos, y/o sustancias

3.4.1 Equipos:

Autoclave de acero inoxidable.

Alambique destilador de acero inoxidable modelo industrial.

Balanza analtica adventure TEMNAR 2140 modelo explorer.

Cocina elctrica de una ornilla modelo HP 102- D4- 1.

Destilador de agua GFL 200 .

Estufa Memmer.

Refrigeradora electrolux.

3.4.2 Instrumentos:

Programas de anlisis estadstico prueba de U de MANN

WHITNEY.

Instrumentos de uso comn de laboratorio.87

3.4.3 Reactivos

Agar saburoud.

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3.5 Tcnicas de anlisis de datos estadstico.

Los datos obtenidos fueron ingresados en una base de datos en el programa de

anlisis estadstico de computador segn la Prueba U de MANN-WHITNEY.

Prueba no paramtrica para comparar dos grupos de estudio entre los cuales

tenemos el grupos problema vs grupos control en el resultado obtenido fue un

valor de p < 0,05 el cual indica que existe una diferencia significativa y al ser

comparados los grupos problema vs grupos problema el resultado obtenido fue

un valor de p > 0,05 el cual indica que no existe una diferencia significativa.

La representacin de nuestros resultados fue en tablas simples de contingencia

y en grficos.

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IV. RESULTADOS

TABLA N 01: Resultados obtenidos de todos los medios de cultivo de la fase de


crecimiento levaduriforme del hongo Sporothrix schenckii.

Sporothrix schenckii.
GRUPOS CONTROL FORMA DE LEVADURA
(37 C por 48 h)
Libre de aceite esencial de las
hojas de Satureja nubigena
Pachachamcua PLACA N 01 PLACA N 02
0 L/mL (+) (+)

GRUPOS PROBLEMAS FORMA DE LEVADURA


(37 C por 48 h)
Concentracin del aceite esencial
de las hojas de Satureja nubigena
Pachachamcua PLACA N 01 PLACA N 02
5 L/mL (-) (-)
10 L/mL (-) (-)
20 L/mL (-) (-)
40 L/mL (-) (-)
80 L/mL (-) (-)

*Fuente. Tabla elaborada por las investigadoras.

Leyenda: (-) No crecimiento. (+) Crecimiento.

Interpretacin: La presente tabla muestra que para el grupo control hubo

crecimiento del hongo Sporothrix schenckii y para los grupos problema hubo

inhibicin completa.

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Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

*Fuente. Tabla elaborada por las investigadoras.

Leyenda: ( ) crecimiento ( ) inhibicin S.n: Satureja nubigena.

GRFICO N 01: Forma de crecimiento levaduriforme del hongo Sporothrix


schenckii, resultados obtenidos de todos los grupos estudiados de la forma de
crecimiento levaduriforme del hongo Sporothrix schenckii. En el cual se muestra
los resultados obtenidos a diferentes concentraciones del aceite esencial de
Satureja nubigena, observndose una inhibicin completa del hongo Sporothrix
schenckii en comparacin con el control.

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FOTOGRAFA N 01: Resultados obtenidos de los cultivos de la fase de


crecimiento levaduriforme a las 48 h posterior a la siembra e incubacin a 37 C.

GRUPO PROBLEMA N 01

GRUPO PROBLEMA N 02

GRUPO CONTROL

GRUPO PROBLEMA N 03

GRUPO PROBLEMA N 04

GRUPO PROBLEMA N 05

*Fuente: Fotografa elaborada por las investigadoras.

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TABLA N 02: Prueba estadstica U de MANN-WHITNEY de los resultados


obtenidos de los diferentes grupos estudiados de la fase de crecimiento
levaduriforme del hongo Sporothrix schenckii.

RESULTADOS
COMPARACION DE GRUPOS. INTERPRETACIN.
OBTENIDOS DE p

Control vs Problema N 01 0,025 P 0,05 Existe diferencia significativa.


Control vs Problema N 02 0,025 P 0,05 Existe diferencia significativa.
Control vs Problema N 03 0,025 P 0,05 Existe diferencia significativa.
Control vs Problema N 04 0,025 P 0,05 Existe diferencia significativa.
Control vs Problema N 05 0,025 P 0,05 Existe diferencia significativa.
Problema N 01 vs Problema N 02 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 01 vs Problema N 03 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 01 vs Problema N 04 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 01 vs Problema N 05 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 02 vs Problema N 03 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 02 vs Problema N 04 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 02 vs Problema N 05 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 03 vs Problema N 04 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 03 vs Problema N 05 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 04 vs Problema N 05 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.

*Fuente: tabla elaborada por las investigadoras.

Interpretacin: En la presente tabla se muestra los valores de p en las

diferentes comparaciones en las cuales entre los grupos control y problema existe

diferencia significativa y entre las comparaciones de los grupos problema no

existe diferencia significativa estos resultados se obtuvieron mediante la prueba de

U de MANN-WHITNEY.

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

TABLA N 03: Resultados obtenidos de todos los medios de cultivo de la fase de


crecimiento filamentoso del hongo Sporothrix schenckii.

Sporothrix schenckii.
GRUPOS CONTROL FORMA DE FILAMENTO
(25 C por 15 Das)
Libre de aceite esencial de las
hojas de Satureja nubigena
Pachachamcua PLACA N 01 PLACA N 02
0 L/mL (+) (+)

GRUPOS PROBLEMAS FORMA DE FILAMENTO


(25 C por 15 Das)
Concentracin del aceite esencial
de las hojas de Satureja nubigena
Pachachamcua PLACA N 01 PLACA N 02
5 L/mL (-) (-)
10 L/mL (-) (-)
20 L/mL (-) (-)
40 L/mL (-) (-)
80 L/mL (-) (-)

*Fuente. Tabla elaborada por las investigadoras.

Leyenda: (-) No crecimiento. (+) Crecimiento.

Interpretacin: La presente tabla muestra que para el grupo control hubo

crecimiento del hongo Sporothrix schenckii y para los grupos problema hubo

inhibicin completa.

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

*Fuente. Tabla elaborada por las investigadoras.

Leyenda: ( ) crecimiento ( ) inhibicin S.n: Satureja nubigena.

GRFICO N 02: Forma de crecimiento filamentoso del hongo Sporothrix


schenckii, resultados obtenidos de todos los grupos estudiados de la forma de
crecimiento filamentoso del hongo Sporothrix schenckii. En el cual se muestra los
resultados obtenidos a diferentes concentraciones del aceite esencial de Satureja
nubigena, observndose una inhibicin completa del hongo Sporothrix schenckii
en comparacin con el control.

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

FOTOGRAFA N 2: Resultados obtenidos de los cultivos problema y control


de la fase filamentosa a los 15 das incubado a 25 C.

GRUPO PROBLEMA N 01

GRUPO PROBLEMA N 02

GRUPO CONTROL

GRUPO PROBLEMA N 03

GRUPO PROBLEMA N 04

GRUPO PROBLEMA N 05

*Fuente: Fotografa elaborada por las investigadoras.

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

TABLA N 04: Prueba estadstica U de MANN-WHITNEY de los resultados

obtenidos de los diferentes grupos estudiados de la fase de crecimiento

filamentoso del hongo Sporothrix schenckii.

RESULTADOS
COMPARACION DE GRUPOS. INTERPRETACIN.
OBTENIDOS DE p

Control vs Problema N 01 0,025 P 0,05 Existe diferencia significativa.


Control vs Problema N 02 0,025 P 0,05 Existe diferencia significativa.
Control vs Problema N 03 0,025 P 0,05 Existe diferencia significativa.
Control vs Problema N 04 0,025 P 0,05 Existe diferencia significativa.
Control vs Problema N 05 0,025 P 0,05 Existe diferencia significativa.
Problema N 01 vs Problema N 02 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 01 vs Problema N 03 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 01 vs Problema N 04 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 01 vs Problema N 05 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 02 vs Problema N 03 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 02 vs Problema N 04 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 02 vs Problema N 05 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 03 vs Problema N 04 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 03 vs Problema N 05 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.
Problema N 04 vs Problema N 05 1,000 P 0,05 No existe diferencia significativa.

*Fuente: tabla elaborada por las investigadoras.

Interpretacin: En la presente tabla se muestra los valores de p en las

diferentes comparaciones en las cuales entre los grupos control y problema existe

diferencia significativa y entre las comparaciones de los grupos problema no

existe diferencia significativa estos resultados se obtuvieron mediante la prueba de

U de MANN-WHITNEY.

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

V. DISCUSIN

En la presente investigacin se determin la actividad antifngica in vitro del

aceite esencial de las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua frente a

Sporothrix schenckii en sus dos fases de crecimiento, el mtodo empleado fue el

de dilucin en agar, mtodo referido del estudio titulado Evaluacin de

parmetros para pruebas de susceptibilidad antifngica en hongos filamentosos

mediante la tcnica de difusin en agar realizado por Trejos E (2009)18, el cual

indica que se trata de un mtodo en el cual se puede determinar el efecto

antifngico in vitro de una sustancia o frmaco a diferentes concentraciones, las

diferentes concentraciones con las que se trabaj en la presente investigacin

fueron referidas del estudio titulado Efecto inhibitorio de los aceites esenciales

de las hojas de Origanum vulgare L. (organo) en Sporothrix schenckii in vitro

realizado por Carrera M y Miranda R (2011)3, donde se muestra el empleo del

aceite esencial del organo a concentraciones de 5, 10, 20, 40 y 80 L/mL de agar

saburoud.

El mtodo refiere que se debe contar con un grupo control el cual debe constar del

medio de cultivo sin sustancia o frmaco de estudio para poder obtener un

resultado positivo en lo que respecta a crecimiento del hongo.18

Los resultados obtenidos del presente estudio comprueban la hiptesis

mencionada en la parte introductoria del informe demostrando que el aceite

esencial de las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua presenta actividad

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

antifngica in vitro a concentraciones de 5, 10, 20, 40 y 80 L/mL frente a

Sporothrix schenckii en sus dos fases de crecimiento, resultados que se obtuvieron

en el caso de la fase filamentosa a los 15 das de su siembra e incubacin a 25 C

(tabla N 03), mientras que en el caso de la fase levaduriforme los resultados se

obtuvieron a las 48 horas de su siembra e incubacin a 37 C (tabla N 01).

De los resultados obtenidos de la fase filamentosa podemos describir que en la

lectura a los 15 das posterior a su siembra e incubacin a 25 C se observ que

en todos los grupos no hubo presencia de crecimiento en esta fase en los medios

de cultivo que tuvieron en su composicin el aceite esencial de las hojas de

Satureja nubigena Pachachamcua a diferentes concentracines lo que demuestra

que el aceite de las hojas de Satureja nubigena Pachachancua presenta actividad

antifngica frente a Sporothrix schenckii desde la concentracin de 5 hasta

80L/mL en su fase de crecimiento filamentoso orientado por un grupo control en

el cual si hubo crecimiento del hongo debido a que en este medio de cultivo no se

cont con el aceite de las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua resultado

que se puede apreciar en la tabla N 03.

Los resultados de la fase filamentosa fueron sometidos a la prueba estadstica U

de MANN-WHITNEY para determinar mediante el valor de p si existe diferencia

significativa entre los grupos de estudio de esta fase; al comparar el grupo control

con los grupos problema (tablas N 02) se obtuvo un valor de p = 0,025 resultado

que indica que existe diferencia significativa entre ellos debido a que en el grupo

control hubo presencia de crecimiento a diferencia de los grupos problema donde

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
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no se present crecimiento por la presencia del aceite de las hojas de Satureja

nubigena Pachachamcua mientras que al comparar los grupos problema entre si

(tablas N 02) se obtuvo un valor de p = 1,000 resultado que indica que no existe

diferencia significativa al comparar los resultados de los grupos problema debido

a que en ellos no hubo crecimiento del hongo en su fase filamentosa.

En el caso de los resultados de la fase levaduriforme se obtuvieron a las 48 horas

despus de su siembra e incubacin a 37 C, los cuales fueron semejantes a los de

la fase de crecimiento filamentoso al ser ledos todos los grupos problema no

presentaron crecimiento debido a la presencia del aceite de las hojas de Satureja

nubigena Pachachamcua, mientras que el grupo control present crecimiento de

esta fase (tabla N 03).

De igual manera los resultados de esta fase fueron sometidos al anlisis estadstico

de MANN-WHITNEY para determinar mediante el valor de p si existe diferencia

significativa entre los grupos de estudio de esta fase en el cual al comparar el

grupo control con los grupos problema (tablas N 04) se obtuvo un valor de

p = 0,025 resultado que indica que existe diferencia significativa entre ellos

debido a que en el grupo control hubo presencia de crecimiento a diferencia de los

grupos problema donde no se present crecimiento por la presencia del aceite de

las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua mientras que al comparar los

grupos problema entre si (tablas N 04) se obtuvo un valor de p = 1,000 resultado

que indica que no existe diferencia significativa al comparar los resultados de los

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

grupos problema debido a que en ellos no hubo crecimiento del hongo en su fase

levaduriforme.

No se ha podido encontrar la suficiente informacin de los aceites esenciales de

Satureja nubigena para justificar el efecto obtenido en el presente trabajo de

investigacin, pero posiblemente contenga algunos de los aceites esenciales

presentes en las diversas Saturejas estudiadas. Estos resultados podran

contrastarse con las siguientes investigaciones:

Mahboubi M y Kazempour N (2011) evaluaron la composicin qumica y la

actividad antimicrobiana de los aceites esenciales de Satureja hortensis y

Trachyspermum copticum, contra diferentes tipos de microorganismos in vitro,

teniendo como resultado que los principales componentes de los aceites son el

timol, p-cimeno, -terpineno y carvacrol. La evaluacin antimicrobiana fue

mediante el ensayo de micro dilucin en caldo, estas diluciones se prepararon en

una placa de micro titulacin de 96 pocillos. De los cuatro compuestos que

contienen el aceite esencial, el timol es ms txico contra los microorganismos

que los otros tres componentes, mientras que el carvacrol y p-cimeno son de

mejor inhibicin.11

Zurita W (2008) evaluaron las propiedades antifngicas de 20 extractos etanlicos

de plantas medicinales de Nuevo San Juan Parangaricutiro Michoacan, Mxico,

contra Sporothrix schenckii mediante el mtodo de difusin en agar; teniendo

como resultado que solo dos de ellos presentaron una inhibicin considerada

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

como mxima una de ellas fue Saturaja macrostema la cual se someti a

separacin por cromatografa en capa fina obtenindose 6 fracciones, estas fueron

sometidas a cromatografa de gases y espectrofotometra determinndose como

componentes principales que le brindan la actividad a los terpenos pulegona y el

timol.22

Hadian J (2012): Composicin y actividad antibacteriana in vitro de los aceites

esenciales de cuatro Satureja (S. bachtiarica, S. khuzistanica, S. mutica y S.

rechingeri). De acuerdo con los resultados del anlisis todas las muestras de aceite

se componen principalmente de carvacrol y timol. La determinacin de las

actividades antibacterianas por el mtodo de difusin en disco.9

Skocibusic M y Bezi N (2009): Anlisis de la actividad antimicrobiana in vitro

de dos especies Satureja. la actividad antimicrobiana in vitro de los aceites

esenciales de las partes areas de Satureja montana y Satureja cuneifolia. Segn

el estudio realizado determinaron que el efecto antimicrobiano de los aceites de

Satureja cuneifolia, Satureja montana. tienen una actividad de amplio espectro

contra los patgenos resistentes a mltiples frmacos, el aceite esencial de

Satureja cuneifolia tiene mayor actividad antimicrobiana frente patgenos de

importancia mdica; posiblemente de all sea la explicacin de los resultados

obtenidos.17

Naturforsch C. (2009): Actividad antibacteriana y composicin del aceite esencial

de Saturejas picigera de Irn. El estudio se realiz de las hojas de Satureja; el

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Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

aceite esencial se aisl por hidrodestilacin. Se identificaron catorce compuestos,

de los cuales carvacrol (53,74 %) y timol (36,03 %) fueron los principales

constituyentes. Los resultados de difusin en disco, indican una alta actividad

inhibidora frente a los microorganismos de prueba.13

Algunos de los principales fitoconstituyentes de la familia Satureja son el timol y

el carvacrol de los cuales podemos mencionar que:

CARVACROL TIMOL

Figura N 01: Estructuras qumicas del Carvacrol y el Timol.

*Fuente: Garca R y Palou E. Mecanismo de accin antimicrobiana de


Timol y Carvacrol sobre microorganismos de interes en alimentos.
Universidad de las Amricas Departamento de Ingeniera Qumica y
Alimentos. Temas Selectos de Ingeniera de Alimentos. Mxico. (2008); 2 (2):
41 51.7

El carvacrol de todos los agentes antimicrobianos naturales es uno de los que ms

atencin ha recibido en su mecanismo de accin; es capaz de desintegrar la

membrana externa, permitiendo la salida de lipopolisacaridos e incrementando la

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Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

permeabilidad de la membrana citoplasmtica provocando con ello la salida del

ATP, inhibicin de la actividad de las ATPasas y disminucin de la fuerza motriz

del protn. Es importante mencionar que cuando la concentracin de carvacrol

aumenta, mayor cantidad de este componente es acumulado en la membrana y por

consiguiente el dao en la membrana es mayor.7

El timol ha sido reportado como uno de los agentes antimicrobianos ms activos

de los constituyentes de los aceites esenciales. Su mecanismo de accin del timol

es semejante a la del carvacrol (figura N 01), ya que su estructura qumica es

similar, incrementando la permeabilidad de la membrana citoplasmtica dejando

que filtren los constituyentes qumicos que son esenciales para el metabolismo,

tales como iones, ATP, cidos nucleicos y aminocidos.7

Por tal motivo se puede mencionar que las propiedades antifngicas del aceite de

las hojas de Satureja nubigena Pachachamcua podran estar mediadas por la

presencia de estos dos componentes presentes en las especies vegetales de la

misma familia las cuales tienen efecto antimicrobiano ya estudiado apoyando a la

hiptesis de estudio del presente trabajo la cual refiere que el aceite de las hojas de

Satureja nubigena Pachachamcua presentan efecto antifngico frente a

Sporothrix schenckii concluyendo que el aceite de las hojas de Satureja nubigena

Pachachamcua presenta efecto antifngico frente a Sporothrix schenckii en sus

dos fases de crecimiento desde la concentracin de 5 hasta 80 L/mL de agar

mostradas claramente en las fotografas N 01 y 02.

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VI. CONCLUSIONES

Del anlisis y discusin de los datos obtenidos podemos concluir lo siguiente:

Se determin la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de las hojas de

Satureja nubigena Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

Se determin que el aceite esencial de Satureja nubigena Pachachamcua a

las concentraciones de 5 L, 10 L, 20 L, 40 L, 80 L inhibe el crecimiento

del hongo Sporothrix schenckii en su forma de levadura.

Se determin que el aceite esencial de Satureja nubigena Pachachamcua a

las concentraciones de 5 L, 10 L, 20 L, 40 L, 80 L inhibe el crecimiento

del hongo Sporothrix schenckii en su forma de filamento.

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VII. RECOMENDACIONES

Realizar estudios in vivo, ya que Sporothrix schenckii muestra una marcada

susceptibilidad in vitro frente al aceite de las hojas de Satureja nubigena

Pachachamcua, y en su uso rutinario por parte de la poblacin podra estar

ocurriendo lo mismo.

Realizar marchas fitoqumicas para determinar los aceites esenciales que se

encuentran en la composicin de Satureja nubigena Pachachamcua.

Hacer de conocimiento los resultados obtenidos en el presente trabajo de

investigacin a las autoridades Regionales de Salud de Cajamarca, para

involucrar en las medidas de prevencin a tomar.

En base a estos resultados profundizar otras investigaciones, para determinar

factores de asociacin, respecto a otro tipo de infecciones micticas.

Investigar nuevas formas de tratamiento, para esporotricosis cutnea, en base

a los resultados obtenidos en la presente investigacin.

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VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Cabezas C. Enfermedades infecciosas desatendidas: Un permanente reto para

la salud pblica y la equidad en el Per. 2014; 31 (2): 326 - 35.

2. Carrada T. ESPOROTRICOSIS: Avances recientes en el diagnstico de

laboratorio, histopatologa y la epidemiologa en Mxico. Latinoamer Patol

Clin. 2012; 59 (1): 147 - 171.

3. Carrera M y Miranda R. Efecto inhibitorio de los aceites esenciales de las

hojas de Origanumvulgare L. (organo) en Sporothrix schenckii in vitro.

[Tesis para optar el Ttulo Profesional de Qumico Farmacutico]. Per:

Universidad privada Antonio Guillermo Urrelo, Facultad de Ciencias de la

Salud; 2011.

4. Carrillo N. Actividad antioxidante de Satureja Macrostema. [Tesis para


obtener el Grado de Maestra en Ciencias de Alimentos]. Mxico: Escuela

Nacional de Ciencias Biolgicas; 2009. [Citado 03 de febrero 2014].

Disponible en:

http://tesis.ipn.mx/bitstream/handle/123456789/5823/ACTIVIDAD.pdf?sequ

ence=1.

5. Epling. C, Jtiva. C. Revisin del gnero Satureja en Amrica del Sur.


Department of Botany and Plant Biochesmistry of California. Los ngeles.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. 47
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

[Internet]. [Citado 02 febrero 2015]. Disponible en:

http://www.jstor.org/discover/10.2307/2805308?uid=3738800&uid=2&uid=4

&sid=21103829292487.

6. Garca M, Urquiaga T, Lpez N, Urquiaga J. Esporotricosis cutnea en nios

en un hospital regional del Per. Dermatologa Peruana. 2004; 14 (2): 104

109.

7. Garca R y Palou E. Mecanismo de accin antimicrobiana de Timol y

Carvacrol sobre microorganismos de interes en alimentos. Universidad de las

Amricas Departamento de Ingeniera Qumica y Alimentos. Temas

Selectos de Ingenieria de Alimentos. Mxico. (2008); 2 (2): 41 51.

8. Gilardoni G, Guglielminetti M, Malagn O, Morocho V, Negri R, Tosi S,

Vita P. Evaluacin de la composicin de los aceites esenciales de Satureja

boliviana, S. odora y S. parvifolia, obtenidos de colectas en Tucumn,

Argentina. Revista brasileira de farmacognosia. 2011; 21 (5) [Internet].

[Citado 02 febrero 2015]. Disponible en:

http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=85617508078.

9. Hadian J. Composicin y actividad antibacteriana in vitro de los aceites

esenciales de cuatro Saturejas (S. bachtiarica, S. khuzistanica, S. mutica y S.

rechingeri). Universidad Shahid Beheshti. Iran. Pubmed. 2012; 3 (4):194

200.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. 48
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

10. Lagos R. Determinacin de la Actividad Antibacteriana in vitro del Aceite

Esencial Thymus vulgaris L. Tomillo Frente A Porphyromonas gingivalis

ATCC 33277 Causante de Gingivitis. [Tesis para optar el ttulo Profesional

de Qumico Farmacutico]. Per: Universidad Nacional Jorge Basadre

Broman Tacna. Facultad de Ciencias de la Salud. 2012.

11. Mahboubi M y Kazempour N. Composicin qumica y actividad

antimicrobiana de los aceites esenciales de Satureja hortensis y

Trachyspermum copticum. Irn. J. Microbiol (Iran). 2011; 3 (4): 194 200.

12. Muoz L. Plantas medicinales espaolas: Satureja montana L. (Lamiaceae)

(Ajedrea silvestre) Universidad de la Rioja. [Internet]. 2003 vol. 24:19 - 23.

[Citado 03 febrero 2014]. Disponible en:

http://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=1028549.

13. Naturforsch C. Actividad antibacteriana y composicin del aceite esencial de

Saturejas picigera de Irn. Departamento de Microbiologa - Facultad de

Ciencias Biolgicas de la Universidad Shahid Beheshti. Irn. Pubmed. 2009;

64 (1 - 2): 20 - 24.

14. Promocin del Per (PROMPERU), Instituto Geogrfico Nacional (IGN),

Instituto Nacional de Estadstica e Informtica (INEI), Ministerio de

Comercio Exterior y Turismo (MINCETUR), Ministerio de Transportes y

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. 49
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

Telecomunicaciones (MTC) MINCETUR. Regin Cajamarca (Per). 2006;

24 (1): 1 - 14.

15. Ramirez M, Lizarraga J, Ticona E, Carrin O, Borda S. Perfil clnico-

epidemiolgico de esporotricosis en una clnica de referencia en Abancay,

Per; 2004 2011. Rev Per Epidemiol. 2012; 16 (2): 01 06.

16. sedici.unlp.edu.ar. Etnofarmacologa de plantas medicinales argentinas del

gnero Aloysia, familia Verbenaceae: Mecanismos de accin y relacin con

los principios activos. [sede Web]. Argentina. Universidad Nacional de la

Plata. Facultad de Ciencias Exactas - Departamento de Ciencias. Biolgicas;

2010.[actualizado en abril del 2014; acceso 27 de junio 2014]. Disponible en:

http://sedici.unlp.edu.ar/bitstream/handle/1091

5/2656/Documento_completo__.pdf?sequence=3.

17. Skocibusic M, Bezi N. Anlisis de la actividad antimicrobiana in vitro de

dos especies Satureja. Universidad de Split - Departamento de Biologa.

Croacia. Pubmed. 2004; 18 (12): 967 - 970.

18. Trejos E. Evaluacin de parmetros para pruebas de susceptibilidad

antifngica en hongos filamentosos mediante la tcnica de difusin en agar.

[Tesis para optar el Ttulo Profesional de Bacterilogo]. Colombia: Pontificia

Universidad Javeriana, Facultad de Ciencias; 2009.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. 50
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

19. unal.edu.co. Herbario MEDEL. Satureja Nubigena (Kunth) Briq - Lameacea.

[sede Web] Instituto de Ciencias Naturales; 2007. [actualizado en marzo del

2014; acceso 27 de junio 2014]. Disponible en:

http://www.biovirtual.unal.edu.co/ICN/?controlador=ShowObject&accion=sh

ow&id=53732.

20. unam.mx ESPOROTRICOSIS [sede Web]. Mxico. Universidad Nacional

Autnoma de Mxico - Departamento de Microbiologa y Parasitologa.

2011. [actualizado en febrero del 2014; acceso 27 de junio 2014]. Disponible

en:

http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/micologia/esporotricosis.

html.

21. Zurita S. Esporotricosis y paracoccidioidomicosis en Per: experiencias en

prevencin y control. Rev Per Med Exp Salud Pblica. 2014; 31 (2): 352 -

357.

22. Zurita W. Determinacin de las propiedades antifngicas de extractos de

plantas medicinales de Nuevo San Juan Parangaricutiro Michuacan, Mxico,

contra Sporothrix schenckii.[Tesis para optar el Ttulo Profesional de

Bilogo]. Mxico: Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo,

Facultad de Biologa; 2008.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


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ANEXOS

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GALERA FOTOGRFICA

FOTOGRAFA N 03: Distrito Jos Sabogal, Provincia de San Marcos,


Departamento de Cajamarca.

FOTOGRAFA N 04: Proceso de seleccin de las hojas de Satureja nubigena


Pachachamcua.

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FOTOGRAFA N 05: Armado del alambique destilador para la extraccin del


aceite esencial.

FOTOGRAFA N 06: Obtencin del aceite esencial en la pera de decantacin.

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FOTOGRAFA N 07: Materiales para la elaboracin del agar.

FOTOGRAFA N 08: Elaboracin del agar Sabouraud.

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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

FOTOGRAFA N 09: Material esterilizado para la elaboracin de los medios de


cultivo.

FOTOGRAFA N 10: Medios de cultivo controles y problemas.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. 56
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

FOTOGRAFA N 11: Esterilizacin del aza de siembra.

FOTOGRAFA N 12: Siembra del hongo en el medio de cultivo.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


Bach. Rosa Delia Bustamante Bautista. 57
Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

FOTOGRAFA N 13: Incubacin de la fase levaduriforme.

FOTOGRAFA N 14: Incubacin de la fase filamentosa.

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


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Determinacin de la actividad antifngica in vitro del aceite esencial de Satureja nubigena
Pachachamcua frente a Sporothrix schenckii.

FOTOGRAFA N 15: Resultado del grupo control de la fase levaduriforme.

FOTOGRAFA N 16: Resultado del grupo control de la fase filamentosa.

ggb bgb

Bach. Cinthya Lisbeth Snchez Soto. Facultad de Ciencias de la Salud.


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