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Guia Implantacion Validacion y Verificacion de Metodos Analiticos Inecc 2013 PDF
Guia Implantacion Validacion y Verificacion de Metodos Analiticos Inecc 2013 PDF
LABORATORIOS ABC
QUMICA INVESTIGACIN Y ANLISIS S.A. DE C.V.
DICIEMBRE 2009
Este documento pertenece al INECC-CCA citar como:
INECC-CCA, (2010). GUA PARA LA IMPLANTACIN, VALIDACIN Y VERIFICACIN DEL DESEMPEO
CONTINUO DE UN MTODO ANALTICO. Mxico, p.27.
CONTENIDO
1.0 INTRODUCCIN
2.0 OBJETIVOS
4.0 BIBLIOGRAFIA
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1.0 INTRODUCCIN
Todos los laboratorios analticos y en especial los de la Red de PRONAME se deben
obligar a seguir los 6 Principios bsicos de buenas prcticas de mediciones
analticas (ref. 3)
2.- Las mediciones analticas deben ser realizadas usando mtodos y equipos
que han sido probados para asegurar que son adecuados para el propsito de
la medicin.
3.- El personal que realiza las mediciones analticas debe ser calificado y
competente para llevar a cabo sus tareas.
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Las 3 definiciones tienen en comn en que la validacin es el proceso para
demostrar que el desempeo en un laboratorio determinado con un mtodo analtico
especfico cumple con las especificaciones necesarias para las necesidades de
medicin especificadas.
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Los parmetros de una validacin completa de un mtodo analtico (ref. 3) son los
siguientes:
Recuperacin
Sensibilidad
Selectividad / Especificidad
Robustez
Lmite de deteccin
Lmite de cuantificacin
Intervalo lineal y de trabajo
Reproducibilidad
Repetibilidad
Sesgo (En algunos casos evaluado a partir de la Recuperacin)
Incertidumbre inicial
PARMETRO INDICADOR
Pruebas estadsticas en diferentes
Selectividad / Especificidad
matrices con diferentes interferencias
Pruebas Interlaboratorios con
Robustez variaciones en las condiciones de
prueba
Sensibilidad Lmite de deteccin
Repetibilidad, Reproducibilidad e
Precisin
Incertidumbre
Exactitud Recuperacin y sesgo
Lmite de Cuantificacin, Intervalo
Intervalo lineal y de Trabajo
lineal, curva de calibracin
Recuperacin
Sensibilidad
Lmite de deteccin
Lmite de cuantificacin
Intervalo lineal y de trabajo
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Reproducibilidad
Repetibilidad
Sesgo (En algunos casos evaluado a partir de la Recuperacin)
Incertidumbre inicial
Los criterios de cuando se debe realizar una Validacin Parcial o Completa son los
siguientes:
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Establecer un mtodo en un laboratorio
Parcial
diferente
Establecer un mtodo con diferente
Parcial
instrumentacin
Establecer un mtodo con diferente operador Parcial
Esta PIDA puede ser utilizada por el laboratorio para evidenciar que su mtodo sigue
validado a travs del tiempo.
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Para la estimacin de la incertidumbre se debe utilizar un estudio de precisin
que cumpla con lo siguiente:
o Nmero de muestras de QC mayor a 20
o Todas dentro de control estadstico
o Que pertenezca a una distribucin normal
o Que se hayan elaborado a travs de todo el intervalo de trabajo del
mtodo de ensayo (diferentes concentraciones).
Los valores obtenidos en la Validacin Parcial del Mtodo deben cumplir con
los de la Validacin del Mtodo de Referencia y son la base para establecer
los Criterios de Aceptacin y Rechazo del Laboratorio (pueden ser mejores
que los del Mtodo de Referencia pero no peores).
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2.0 OBJETIVOS
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En este capitulo se presentan los procedimientos especficos para realizar todos los
parmetros de una validacin parcial, no se presentan los procedimientos para
determinar la Especificidad, Robustez por estar fuera de los alcances de un
laboratorio de ensayo.
Cromatografa de Gases
Cromatografa de Gases acoplada a Espectrometra de
Masas
Cromatografa de Lquidos de Alta Presin
Espectrofotometra UV/VIS
Espectrofotometra de Absorcin Atmica
Espectrometra de Emisin ptica con Plasma Inducido
Acoplado (ICP/OES)
Espectrometra de Masas con Emisin de Plasma Inducido
Acoplado (ICP/MS)
NOTA IMPORTANTE:
ESTE PROCEDIMIENTO NO SE DEBE APLICAR A TCNICAS
GRAVIMETRICAS, VOLUMTRICAS, POTENCIOMETRICAS Y
CONDUCTIMETRICAS, PARA ESTAS TECNICAS LA CANTIDAD MINIMA
DETECTABLE ES EQUIVALENTE AL LIMITE PRACTICO DE CUANTIFICACION
INSTRUMENTAL.
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-Calcule la media y la desviacin estndar de los resultados obtenidos.
-El Lmite de Deteccin del Mtodo que se obtenga, debe ser igual o
menor al que se presenta en el Mtodo Fuente. Cuando el LDM no
puede ser igual o menor al del mtodo fuente, pero es menos de 10
veces el valor del Lmite Mximo Permisible (LMP) o del criterio
ambiental aplicable, ste puede ser aceptado.
Ejemplo 1:
LMP: 0,20 mg/L
Curva de calibracin: 0,04; 0,10: 0,20; 0,40; 1,0
Intervalo de trabajo: 0,04 1,0 mg/L
LMP: 0,20 mg/L Pb para agua potable y 1,0 mg/L para agua residual
Curva de calibracin: 0,04; 0,10; 0,20; 0,40; 1,0; 2,0; 5,0 mg/L
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Intervalo de trabajo: 0,04 5,0 mg/L
-La curva de calibracin debe ser lineal (r2 > 0,997 con 5 puntos de
curva y 0,98 con 3 puntos de curva).
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donde:
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-Compare los valores obtenidos del promedio y la desviacin estndar
del %R y del Sesgo con los que se presentan en el mtodo de
referencia, si existen.
donde:
DPR = Diferencia Porcentual Relativa
X1 = Valor medido de la muestra original
X2 = Valor medido de la muestra duplicada (apareada)
-Si los valores no cumplen con los especificados, determine las causas
y corrija los errores, documente adecuadamente las incidencias y
acciones correctivas e inclyalas en el expediente del mtodo.
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Donde:
DPR = Diferencia Porcentual Relativa
X1 = Valor medido de la muestra original
X2 = Valor medido de la muestra duplicada (apareada)
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presenta un acercamiento de como poder obtenerla, existen otros, los cuales
pueden ser igualmente vlidos.
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trasciende regularmente a los alcances del servicio que estos laboratorios
proporcionan. Adems, regularmente tampoco se pueden evaluar las incertidumbres
relativas a las condiciones de almacenamiento, ya que en la mayora de los casos,
las determinaciones analticas solo se pueden dentro de un periodo de tiempo corto
(holding times). Lo anterior debe ser claramente definido en los informes de prueba.
NO es posible con estos conceptos determinar cuales son las causas del error
o de la variabilidad, ya que estn basadas en el clculo de solo un nmero
final, normalmente por el uso de MRs o MRCs.
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PROCEDIMIENTO PARA LA ESTIMACION DE LA
INCERTIDUMBRE EXPANDIDA (U)
Definir el Mensurando
Estimar correlaciones
Toma de la muestra
Condiciones de almacenamiento de la muestra
Efectos instrumentales
Pureza de reactivos
Estequiometra asumida del analito
Preparacin de la muestra
Condiciones de la medicin
Efectos de la muestra (interferencias de matriz)
Efectos de las computadoras (modelos de curvas de calibracin, cifras
significativas en los clculos, etc.)
Correccin por blancos de reactivos
Efectos de los analistas
Efectos aleatorios
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Todas las fuentes de incertidumbre tienen variabilidad y sus propias incertidumbres,
las cuales se deben expresar en trminos de la desviacin estndar, pero
normalmente en unidades diferentes (C, ml, mg, etc.)
donde:
o u(xi) = desviacin estndar experimental de la media
o Esta u(xi) representa un intervalo centrado en el mejor estimado del
mensurando (media aritmtica) que contiene el valor verdadero con
una probabilidad p del 68.27% (si los datos siguen una distribucin
Normal)
s/1 = Normal
s/2 = Normal (k=2)
s/3 = Rectangular (especificaciones simtricas, sin lmites de confianza y
donde se pueden esperar valores limtrofes, +- x% como en el material de
vidrio)
s/6 = Triangular (especificaciones simtricas, sin lmites de confianza y
donde no se esperan valores limtrofes, pero con datos de alguna distribucin
estadstica, como en el material de vidrio anterior pero verificado en el
laboratorio y donde no se aprecian valores en los extremos de la
especificacin)
Se debe determinar la relacin entre las magnitudes de entrada, de tal forma que se
conozca si existe o no correlacin entre ellas, con objeto de utilizar el modelo
matemtico pertinente para el clculo de la incertidumbre combinada.
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de modelo matemtico que se emplea para calcular la concentracin del
mensurando:
1.- Para modelos donde en la formula de clculo solo existan sumas y restas:
donde:
uc = incertidumbre combinada de y respecto a p,q,r
u(p) = incertidumbre estndar de p
u(q) = incertidumbre estndar de q
u(r) = incertidumbre estndar de r
p = valor de r
q = valor de r
r = valor de r
p,q,r = fuentes de incertidumbre
Puede ser otro nmero dependiendo del nmero de datos utilizados, en poblaciones
pequeas se utiliza la t de Student de una tabla de 2 colas.
Incertidumbre Expandida = U = uc k
donde:
uc es la incertidumbre combinada
k es el factor de cobertura, este factor es generalmente 2, el cual
equivale a 2 desviaciones estndar y por lo mismo a una
probabilidad del 95.45%.
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EJEMPLO DE LA DETERMINACION DE LA INCERTIDUMBRE DE LA NOM 009 SSA1 1993
Preparacin
Acondicionamiento
de la superficie
Lixiviacin por 24
hs.
Preparacin de
Homogeneizacin
Estndares de
del lixiviado
Calibracin
Resultado
I.- r (Masa de Cadmio lixiviado por unidad de area mg/dm2) = ((Co * Vl) / Av) * d * Facido * Ftiempo * Ftemp
II.- Co = (Ao-Bo)/Bi
Ao Absorbancia del metal en la muestra
Bo Intercepcin de la curva de calibracin
Bi Pendiente de la curva de calibracin
Por lo tanto:
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2.2- Identificacin de todas las fuentes de incertidumbre (a travs de un diagrama causa-efecto)
Co Vl
Av d
Curva de calibracin:
Area (Av):
Longitud 1 (altura):
La superficie se calculo en 2.37 dm2, se estima que la medicin est +- 2 mm al 95% de confianza (LC)
si la altura es de 1 dm entonces la Ustd = 2 mm/2 por ser LC 95% = 1 mm
Longitud 2 (ancho):
idem anterior Ustd = 1 mm = 0.01 dm
Area:
Ya que no es exactamente geomtrico se utiliza una Uc=5% al 95% LC,
Ustd= 5/2 = 2.5 dm2
Area = 2.37 dm2
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CALCULO DE LA INCERTIDUMBRE POR LA CURVA DE CALIBRACION
n 5 No de datos
X 0,5 Media de X
Y 0,1292 Media de Y
r 0,9983
b 0,2410
a 0,0087
Efecto de temperatura:
El efecto de la temperatura est publicado y es 5%/grado C (ver ref 1-5 Eurachem) para el rango de +- 2 que permite
el metodo, el Ftemp sera 1+-0.1
Efecto de Tiempo:
Un estudio (ref 1 eurachem) 1.8 mg/l en 86 mg/l = 0.3%/h por el rango de +- 0.5h en 24 h el Ft = 1+-(0.5x0.003) = 1+- 0.0015
Ustd del Facido = 0.008 x 0.1 = 0.0008, como esta en Ustd, no se hacen mas calculos 0,008 mg/L
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PASO 4 CALCULO DE LA INCERTIDUMBRE ESTANDAR COMBINADA:
r (Masa de Cadmio lixiviado por unidad de area mg/dm2) = ((Co * Vl) / Av) * d * Facido * Ftiempo * Ftemp
U = Uc * t95 0,00694
RESUMEN:
Magnitud de Incertidumbre Incertidumbre
Valor Fuente de Incertidumbre Tipo de Incertidumbre Coeficiente de
Smbolo Entrada o Fuente de Unidades Calculo de la Us Estndar Estndar
Estimado (x) Informacin Original Distribucin Estndar Sensibilidad
Incertidumbre Combinada Relativa U(x)/x
Concentracin de Concentracin de Curvas de
mg/L 0,26 0,017801 0,06847
Cadmio (Co): Cadmio (Co): calibracin
No se hizo
Diluciones (D) Diluciones (D) #DIV/0!
dilucin
Volumen (Vl): Volumen (Vl): L 0,332 0,001829 0,00551
Llenado L Practica 99.5+-0.5% Triangular 0.005*332/6^0.5 0,0007
(2.1e-4*332*2) /
Temperatura L Metodo 22+-2 C Rectangular 0,0001
(3)^0.5
Lectura del
L Practica 1% error Triangular 0.01*332/(6)^0.5 0,0014
Volumen
Calibracin L Especificacion 500+-2.5 ml Triangular 2.5/(6)^0.5 0,0010
Area (Av): dm2 2,37 0,062091 0,02620
Longitud 1 altura dm Practica 2 mm al 95%P Normal 0.02/1.96 0,010
Longitud 2 ancho dm 2 mm al 95%P Normal 0.02/1.96 0,010
Area dm2 5 % error Normal (0.05*2.37)/1.96 0,060
0.1% por %v/v
Estudio + U de la
Concentracin del acido + 0.008% U
mg/L 1 titulacin del 0.008*0.1 0,0080 0,00800
cido actico: de la titulacin con
cido
NaOH
Efecto de Tiempo: mL 1 0,0015 Rectangular 0.0015/(3)^0.5 0,001 0,00100
Efecto de
mg/L 1 0,1 Rectangular 0.1/(3)^0.5 0,06 0,06000
temperatura:
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HOJA DE CALCULO PARA LA ESTIMACION DE LA INCERTIDUMBRE
Concentra
cin de Volumen Concentracin Efecto de Efecto de
Area (Av):
Cadmio (Vl): del cido actico: Tiempo: temperatura:
(Co):
Valor 0,26 0,332 2,37 1 1 1
Incertidumbre Std 0,01780 0,00183 0,06209 0,00800 0,00100 0,06000
Concentracin de Cadmio0,26
(Co): 0,2778011 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26
Volumen (Vl): 0,332 0,332 0,33382877 0,332 0,332 0,332 0,332
Area (Av): 2,37 2,37 2,37 2,432091166 2,37 2,37 2,37
1
Concentracin del cido actico: 1 1 1 1,008 1 1
Efecto de Tiempo: 1 1 1 1 1 1,001 1
Efecto de temperatura: 1 1 1 1 1 1 1,06
Inceridumbre
0,003462
Combinada Uc(r)
r 0,003462
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4.0 BIBLIOGRAFIA
4.- Managers guide to VAM, UK Dept. of Trade and Industry, Valid Analytical
Measurements Programme.
5.- EAL P-11, Validation of Test Methods, European Cooperation for Accreditation
of Laboratories, 1997.
6.- USEPA Guidance for method development and methods validation for the RCRA
Program, 1992.
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measurement uncertainty http://physics.nist.gov/cuu/Uncertainty/international1.html
y 2, 3/09/98
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