Scribd Logo
Cargar

¡Te damos la bienvenida a Scribd!

  • Modulo 3

    Cargado por

    Carolina García Gutiérrez
    17 vistas142 páginas
    módulo 3 del diplomado

    Derechos de autor

    © © All Rights Reserved

    Formatos disponibles

    PDF o lea en línea desde Scribd

    ¿Le pareció útil este documento?

    ¿Este contenido es inapropiado?

    Denunciar este documento
    módulo 3 del diplomado

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PDF o lea en línea desde Scribd
    Marcar por contenido inapropiado
    17 vistas142 páginas

    Modulo 3

    Cargado por

    Carolina García Gutiérrez
    módulo 3 del diplomado

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PDF o lea en línea desde Scribd
    Marcar por contenido inapropiado
    de 142
    WHO/GPA/CNP/93.2D Distr.: Limitada Orig.: Ingles Componentes Seguros Modulo 3 Grupos Sanguineos @ Organizacion Mundial de la Salud Ginebra Este documento no esta destinado al ptiblico en general y todos los derechos pertenecen a la Organizacién Mundial de la Salud (OMS). No puede ser modificado, resumido, citado, reproducido 0 traducido, en parte o en su totalidad, sin autorizacién expresa de la OMS. No puede ser almacenado en ningun sistema, ni transmitido a través de ningun medio electrénico, mecanico, etc., sin autorizacién expresa de la OMS. Las opiniones vertidas en este documento son responsabilidad de los autores. Contenidos 1 INTRODUCCION 14 1.2 13 1.4 15 Programa de educaci6n a distancia Antes de comenzar el médulo MOdulo 3: Grupos sanguineos Objetivos del médulo Planificaci6n del estudio 2 COMPONENTES Y FUNCIONES DE LA SANGRE 24 2.2 23 24 25 26 27 Sangre total Gl6bulos rojos (eritrocitos) Hemoglobina Gl6bulos blancos (leucocitos) Plaquetas (trombocitos) Coagulacion Indicaciones de las transfusiones de sangre 3. INMUNOLOGIA BASICA DE LOS GRUPOS SANGUINEOS 3.1 Antigenos 3.2 Anticuerpos 3.3 Respuesta inmune 3.4 Reacciones antigeno-anticuerpo eritrocitarias 3.5 Complemento 4 SISTEMA DE GRUPO SANGUINEO ABO 44 42 43 44 45 Grupos sanguineos ABO Bases genéticas de los grupos sanguineos ABO Demostraci6n de los grupos sanguineos ABO Desarrollo de los antigenos eritrocitarios A y B Subgrupos del antigeno A ORRWN B BRBEEEE @ONBRE 13 16 16 18 19 22 25 26 29 30 31 46 47 48 AntiAB y anti-A Estado secretor Anti-A y anti-B IgM e IgG (naturales e inmunes) ‘SISTEMA DE GRUPO SANGUINEO Rh 5.1 Grupos sanguineos Rh 5.2 Genética basica del sistema Rh 5.3 Importancia de la compatibilidad Rh D 5.4 Antigeno Rh DU PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD Y SANGRE PARA TRANSFUSION 6.1 Estudios de compatibilidad 62 63 64 65 66 67 68 69 6.10 6.41 6.12 6.13 Solicitud de sangre Selecci6n de la sangre Pesquisa de anticuerpos irregulares Pruebas de compatibilidad Rotulaci6n 34 32 32 35 36 36 38 38 4a 42 42 43 47 47 47 Sistema de determinaci6n del grupo y reserva de unidades 48 Selecci6n y entrega de sangre en situacién de urgencia 49 Entrega de sangre plasma del banco ‘Administracion de sangre o plasma Reacciones transfusionales Registros Organizaci6n del banco de sangre TECNICAS DE DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD TA 7.2 7.3 74 75 76 1 78 79 7.10 TAL 712 7.13 7.14 Introduccion Higiene y seguridad Equipo Solucién salina Pipeta de Pasteur Portaobjetos, tubos y microplacas Lectura de las reacciones Definicion de la potencia de Ia reaccién Reactivos de grupo sanguineo Gl6bulos rojos para determinaci6n del grupo sanguineo Conservaci6n de los antisueros y globulos rojos Evaluaci6n de los antisueros y glébulos rojos, Determinacién de los grupos ABO y Rh D Errores en la determinacién del grupo sanguineo 50 53 55 57 61 7! 72 72 73 14 74 74 76 76 7 7 78 78 79 80 7.45 7.16 TAT 7.18 7.19 7.20 Métodos de deteccién de anticuerpos eritrocitarios inmunes Prueba de antiglobulina indirecta Prueba de antiglobulina directa Prueba de la albtmina Técnicas enzimaticas Pruebas de compatibilidad 8 PLAN DE ACCION 84 8.2 83 Evaluaci6n del progreso Preparaci6n del plan de accién implementacién del plan de accién Listas de control de actividades y respuestas Respuestas a las preguntas de autoevaluacion Glosario Apéndices 81 82 85 85 85 90 91 92 92 96 aa. 116 123 Introduccion La finalidad de esta seccién es presentar el médulo 3, Grupos san- guineos, que se dedica a la determinaci6n del grupo sanguineo y las Pruebas de compatibilidad. ee aaa ae Después de completar esta secci6n, el estudiante sera capaz de: 1. Explicar la finalidad del médulo 3. 2. Identificar al “tutor” que pueda brindarle apoyo durante el desarrollo de este médulo. 3. Determinar sus conocimientos, aptitudes y experiencia en relaci6n con los objetivos del médulo. 4 Formular un plan de estudio realista. SECCION 1 14 PROGRAMA DE EDUCACION A DISTANCIA EI m6dulo 3 - Grupos sanguineos ~ forma parte del curso de educa- cién a distancia Sangre y componentes seguros, desarrollado por el Programa Global de! SIDA de la Organizacion Mundial de la Salud (OMS/GPA). Esta destinado a capacitar al personal de servicios de Medicina transfusional, bancos de sangre hospitalarios y laboratorios, que no puede acceder a cursos de entrenamiento convencionales. Los otros médulos son: | Médulo introductorio: Guias y principios para una practica transfusional segura Ml Médulo 1: Donacién segura de sangre I Médulo 2: Pesquisa del VIH y otros agentes infecciosos. Después de finalizar el médulo introductorio y otros de esta serie, el estudiante estara familiarizado con el mecanismo operativo del pro- grama de educaci6n a distancia. Deberé leerlo antes de comenzar, Para comprender la organizaci6n. Deberé analizar sobre todo la sec- cin 1, que explica el papel del instructor y el tutor, asi como también el empleo del material de aprendizaje, en especial la seccién 1.2, que describe las siguientes caracteristicas de los médulos: ™ objetivos secciones objetivos de aprendizaje actividades lista y plan de accion resumen autoevaluacion control del progreso glosario apéndices separatas. Utilizacién del médulo 3 Este médulo es Gti! para quienes trabajan en servicios de medicina transfusional, bancos de sangre hospitalarios o centros de salud pé- blica y participan en la determinaci6n del grupo sanguineo ABO y Rh y las pruebas de compatibilidad También reviste interés para el personal médico 0 técnico responsa- ble de la capacitacin o supervision de los encargados de los estu- dios serol6gicos. En este caso, el médulo ofrece material basico y ac- tualizado para uso individual y como recurso que puede integrarse a otros programas de entrenamiento. INTRODUCCION Algunos puntos del médulo 3 podrian ser nuevos para el estudiante. Deberd destinar todo el tiempo necesario a la lectura de cada sec- ci6n y sefialar los aspectos probleméticos. Luego podra volver atras y analizarlos en detalle. Si las dudas persisten, deberé solicitar ayuda al instructor, el tutor u otro colega. Este asesoramiento es esencial Porque los temas a aprender son muy importantes y redundaran en beneficio del centro en el que se desempeiia. Parte del material podria tener valor a modo de revisién y actualiza- cién de los conocimientos. En este caso, el estudiante debera leer estas secciones y responder a las preguntas de autoevaluaci6n. Tam- bién debera completar las actividades para verificar su comprensi6n y perfeccionar su labor. 1.2 ANTES DE COMENZAR EL MODULO EI estudiante habré completado el médulo introductorio y quizas al- gin otro. Se habré mantenido en contacto con el instructor y discuti- do el desarrollo del médulo 3; en caso contrario, deberé comunicarse con él antes de comenzar. Al iniciar el m6dulo introductorio habra identificado a una persona, en lo posible el supervisor, para que actie como “tutor”. Habra encon- trado a alguien dispuesto a evaluar su progreso y brindar asesora- miento y apoyo, sobre todo durante la preparacién e implementacion del plan de acci6n. Ahora debera elegir un tutor para este médulo, quizés la misma persona u otra con experiencia en la determinaci6n de grupos sanguineos y la realizacion de pruebas de compatibilidad. OF Piense en alguna persona, en particular su supervisor u otros cole- aS, que podria asesorarlo durante el desarrolio de! médulo 3. identi fique a alguien con quien pueda reunirse en forma periédica para ha- blar de su trabajo y resolver problemas. Recuerde que es importante elegir a alguien dispuesto a discutir sus ideas acerca de los medios para perfeccionar el servicio y ayudarlo a planificar e implementar los cambios que crea necesarios, Averigiie si la persona elegida acepta colaborar. Si es un nuevo tutor, expliquele el mecanismo operativo del programa y el papel que debe- 14 desempefiar. Muéstrele el médulo para que se familiarice con el contenido y enfoque. Cuando prepare el plan de estudio, acuerde reu- niones para analizar el progreso. Sino encuentra un tutor apropiado, solicite ayuda al instructor. ‘AGn cuando fa principal fuente de asistencia sera el tutor, es Atil exa- minar el médulo con los colegas, en particular los involucrados en la determinacion de grupos sanguineos y realizacién de pruebas de compatibilidad. SECCION 1 1.3 MODULO 3: GRUPOS SANGUINEOS Las transfusiones generalmente salvan vidas. Sin embargo, existen ‘ocasiones en que ellas pueden causar morbilidad y aGin mortalidad. Es lamentable, pero algunas de estas fatalidades se deben a errores en la determinaci6n del grupo sanguineo o los estudios de compatibili- dad, porque la persona que lleva a cabo las pruebas ignora los princi- pios cientificos o no interpreta los resultados con exactitud. En otras ocasiones resultan de la selecci6n o entrega incorrecta de la sangre 0 el plasma. Por lo tanto, este médulo esta destinado a fortalecer los conocimien- tos y aptitudes acerca de este tema, para que la sangre destinada a transfusiones sea segura. Secci6n 1: introducci6n ~ que menciona los contenidos de! médulo e incluye actividades preparatorias. ‘Seccién 2: Componentes y funciones de la sangre - que describe los elementos constitutivos de la sangre y su relevancia. Secci6n 3: Inmunologia basica de los grupos sanguineos - que expli- ca los antigenos, anticuerpos, respuesta inmunolégica de anticuer- pos inmunes y reacciones antigeno-anticuerpo. Secci6n 4: Sistema de grupo sanguineo ABO - que destaca la impor- tancia del sistema ABO en medicina transfusional. Discute la genéti- ca bsica y la herencia de los grupos sanguineos, el desarrollo de los antigenos eritrocitarios A y B, los subgrupos del antigeno A y los titu- los elevados de anticuerpos. Secci6n 5: Sistema de grupo sanguineo Rh ~ que sefiala la relevancia del sistema Rhesus (Rh) en medicina transfusional. Considera la ge- nética del sistema Rh, el valor de la tipificacién Rh D y la deteccién del antigeno DU. Seccién 6: Pruebas de compatibilidad y sangre para transfusi6n - que se ocupa de los estudios de compatibilidad y los procedimientos de selecci6n y distribucién de la sangre en situaciones de rutina y de emergencia. También menciona los métodos de investigacién de las reacciones transfusionales, registros y administraci6n de las existen- cias de sangre y plasma. Secci6n 7: Técnicas de determinaci6n del grupo sanguineo y pruebas de compatibilidad - que trata sobre las técnicas utilizadas para esta- blecer el grupo sanguineo y la compatibilidad. Las instrucciones se detallan en el apéndice 1. Secci6n 8: Plan de acci6n - que propone revisar la lista de accién y formular un plan de accién para perfeccionar la labor del estudiante. La lista de acci6n de! médulo 3 se encuentra en la pagina 93. 1.4 OBJETIVOS DEL MODULO Este médulo plantea seis objetivos generales que los estudiantes de- ben cumplir como resultado de Ia lectura del texto, respuesta a las INTRODUCCION Preguntas de autoevaluaci6n, realizaci6n de las actividades y formula- ci6n del plan de accién individual. Al finalizar el médulo, el estudiante sera capaz de: Secci6n 2 Explicar las funciones de los principales componentes de la ‘sangre y su importancia en medicina transfusional. Seccién 3 Explicar la reacci6n antigeno-anticuerpo eritrocitaria y los facto- res que la afectan. Secci6n 4 Explicar el sistema ABO y utilizar los resultados de las pruebas para identificar los grupos sanguineos de donantes y pacientes. Secci6n 5 Explicar el sistema Rh y sefialar en qué casos debe transfundir- se sangre Rh D positiva o negativa y cuando debe investigarse la presencia de DU, Secci6n 6 Explicar la importancia de las pruebas de compatibilidad y de- sarrollar y mantener procedimientos y registros apropiados para Solicitar, seleccionar y distribuir la sangre en forma adecuada en situaciones de rutina y de emergencia. Seccién 7 Explicar los principios de las técnicas empleadas en la determi- acion del grupo sanguineo y la compatibilidad y realizarlas con precision. UE Antes de comenzar la secci6n 2, podria ser dtil evaluar sus conoci- mientos, aptitudes y experiencia actuales en relaci6n con los objeti- vos del médulo y fijar la meta a alcanzar. Analice los objetivos y deter- ‘mine si su nivel de conocimientos, aptitudes y experiencia es: 1 - Elevado 2- Razonable 3 - Regular 4- Escaso 0 nulo Los objetivos se repiten en la tabla de la pagina 6. Anote el puntaje correspondiente (1 a 4) y agregue los comentarios que crea necesa- ios. Sefiale los objetivos vinculados con tareas que no realiza. El estudiante ya identificé las Greas de revision y las que requieren especial atenci6n. Los objetivos estan destinados a facilitar la SECCION 1 Objetivos del médulo Puntaje ) Comentarios Seccln 2 Explicar las funciones de los principales compo- nentes de la sangre y su importancia en medic na transfusional. Seccién 3 Explicar la reacci6n antigeno-anticuerpo eritroci- taria y los factores que la afectan. Secclén 4 Explicar el sistema ABO y utilizar los resultados de las pruebas para identificar los grupos san- guineos de donantes y pacientes. Secclon 5 Explicar el sistema Rh y sefialar en qué casos debe transfundirse sangre Rh D positiva o nega- tiva y cuando debe investigarse la presencia de oy. Seccion 6 Explicar la importancia de las pruebas de com- patibilidad y desarrollar y mantener procedimien- tos y registros apropiados para solicitar, selec- cionar y distribuir la sangre en forma adecuada en situaciones de rutina y de emergencia. Secclon 7 Explicar los principios de las técnicas emplea- das en la determinacion del grupo sanguineo y la compatibilidad y realizarlas con precision. INTRODUCCION evaluaci6n del progreso. Al finalizar el médulo deberé decidir si los cumplié. Lo mas importante es que el estudiante se pregunte si co- mo resultado, puede desempefiar mejor su labor. Si piensa que debe perfeccionar sus conocimientos, aptitudes y comprensién, deberé de- finir los temas que quiere dominar y consultar al tutor, supervisor 0 instructor acerca de los medios para lograrlo. 1.5 PLANIFICACION DEL ESTUDIO Como el estudiante ya habré completado el médulo introductorio y quizas algin otro, podria estimar cuanto tiempo le demandara éste. Las actividades requieren dedicacion, pero podra realizarlas durante su jornada laboral habitual. OTe) Hojee las otras secciones del libro para tener una idea de! contenido, nivel y enfoque y decidir qué cantidad de material es nuevo. Mire al- gunas actividades para apreciar el tipo de trabajo involucrado. Intente estimar cudnto tiempo le demandaré el estudio de cada sec- ci6n, incluyendo la respuesta a las preguntas de autoevaluaci6n y ac- tividades. Recuerde que debera reunirse con el tutor y el instructor y preparar el plan de accién. Luego hable con el supervisor acerca de las horas semanales o mensuales que puede dedicar al médulo 3. Complete el plan de estudio de la pagina 8. Anote los puntajes con- signados en la actividad 2, que le indicaran el tiempo que le deman- dar cada secci6n. Fije las fechas en que estima que podré comple- tarlas, de acuerdo con sus conocimientos, aptitudes y experiencia ac- tuales. Después de acordar las fechas de reuniones con el instructor y el tutor, agréguelas al plan. RESUMEN 1 El médulo 3 se centra en la determinacion del grupo sangui- neo y las pruebas de compatibilidad, asi como también en la distribuci6n correcta de la sangre para transfusi6n. 2. El estudiante deberd elegir un tutor personal que le brinde apoyo durante el desarrollo de este médulo. 3. Antes de comenzar el médulo 3, el estudiante deber eva- luar sus conocimientos, aptitudes y experiencia en relacion con los objetivos propuestos. 4 Elplan de estudio realista facilitaré la organizacion de la tarea. SECCION 1 PLAN DE ESTUDIO paeea | een Fecha de reuniones Seccién 4) de término | conel instructor ‘con el tutor Secctin 2 Componentes y funcio- nes de la sangre Secetén 3 Inmunologia basica de los grupos sanguineos Seccién 4 Sistema de grupo san- guineo ABO Secclon 5 Sistema de grupo san- guineo Rh Seccién 6 Pruebas de compatibili- dad y sangre para transfusion Seccion 7 Técnicas de determina- cién del grupo sangut- neo y pruebas de com- patibilidad Secciin 8 Plan de accion Notas INTRODUCCION Ce mess Antes de pasar a la secci6n 2, el estudiante debera decidir si cumpli6 con los objetivos de aprendizaje de la secci6n 1: 1 Explicar la finalidad de! médulo 3. 2. Identificar al “tutor” que pueda asesorario durante el desa- rrollo del médulo. 3 Evaluar sus conocimientos, aptitudes y experiencia en rela- cién con los objetivos del médulo. 4 Formular un plan de estudio realista. Si piensa que comprendié todos los puntos con claridad, puede proseguir. Si necesita mas informaci6n acerca del médulo 3 0 el programa de educaci6n en general, comuniquese con el ins- ‘tructor para discutir el tema o hable con el tutor. Componentes y Funciones de la Sangre La finalidad de esta secci6n es facilitar la comprensi6n de los compo- nentes de la sangre y sus funciones. OBJETIVOS DEL APRENDIZAJE Después de completar esta secci6n, el estudiante sera capaz de: 1 Deseribir los principales componentes de la sangre. 2. Explicar la funcién de los componentes de la sangre y su im- portancia en medicina transfusional. COMPONENTES Y FUNCIONES DE LA SANGRE plasma: Porcion liquida de la sangre que transporta las, células y otros componen- tes — proteinas, factores de coagulacién y sustancias ‘quimicas. eritrocttos: Globulos rojos (las células mas numero- '8a5), que contienen el pig- mento rojo hemoglobina y ‘son responsables del trans- porte de oxigeno a los tej dos. leucocitos: Giobulos bian- 60s nucleados involucrados en la defensa contra la in- feccién y la produccién de ‘anticuerpos. trombocitos: Plaquetas, que desempefian un papel fundamental en el mecanis- mo de la coagulacion. ‘coagulacién: Coagulacién de la sangre que tiene lugar ‘cuando se recolecta en un recipiente seco 0 alcanza una herida abierta. sistema reticuloendotelial: Conjunto de células endote- Hiales que producen macr6- fagos 0 mononucleares /grandes. Se encuentra en la médula 6sea, higado, bazo 'y ganglios linféticos. hemogiobina: tiquido roji presente en los eritrocitos, ‘constituido por hierro (hem) y cadenas polipeptidicas (globina). Figura 1: Vistas de perfil y ‘superior de un glébulo rojo ‘normal, que ilustran su forma bicéneava 2.4 SANGRE TOTAL La sangre es un complejo constituido por células suspendidas en un liquido amarillento denominado plasma. Los elementos formes con- sisten en una mezcla de gl6bulos rojos (eritrocitos), globulos blancos (leucocitos) y plaquetas (trombocitos). El plasma contiene miltiples Proteinas, sustancias quimicas, factores de coagulaclén y numero- sos compuestos metabilicos. La sangre acttia como medio de transporte de sus distintos compo- nentes a diversas estructuras del organismo. 2,2 GLOBULOS ROJOS (ERITROCITOS) Cuando se observan los glébulos rojos en el microscopio, tienen as- ecto de discos biconcavos (figura 1). Son muy pequefios; tienen un diametro de 7,2 micrones. Existen alrededor de 5 millones de eritroci- tos por milimetro cGbico de sangre (5 x 10 12/1), Se producen en la médula 6sea y cuando maduran, ingresan en el torrente sanguineo, en el que sobreviven 120 dias. Luego se degradan y las células del sistema reticuloendotellal los remueven. Estas células son muy es- pecializadas y se distribuyen en todo el organismo. Predominan en la médula 6sea, higado, bazo y ganglios linfaticos. Los gl6bulos rojos contienen hemoglobina y su funcién consiste so- bre todo en llevar oxigeno a los tejidos. 2.3 HEMOGLOBINA La hemoglobina es una molécula compleja grande formada por frac- ciones que contienen hierro (hem), que se fijan a cadenas polipeptid- cas (globina). Es un liquido rojizo que se encuentra en los eritrocitos. Puede combinarse en forma reversible con el oxigeno y el dixido de carbono. Se ocupa de transportar el oxigeno a los tejidos para propor- cionarles energia y calor. El oxigeno se capta en los pulmones y el co- raz6n lo envia a los tejidos. El oxigeno utilizado se reemplaza por dié- xido de carbono, que llega a los pulmones a través de los glébulos ro- jos y una pequefia cantidad por el plasma. Alli se elimina y reemplaza Por oxigeno, para reiniciar el ciclo circulatorio, Los niveles de hemoglobina se expresan en gramos por decilitro de sangre. En los varones la concentracién de hemoglobina es algo mas elevada, con un promedio de 13,5 a 17 g/dl, mientras que en las mujeres es de 12 a 16 g/dl. C—) Peril Vista superior ranulocite: Giébulo blanco’ (leucocito) que contiene gré- nulos neutréfilos, eosinéfi- los 0 basé6filos en el cito- plasma, linfoctte: Leucocito formado en los ganglios linfaticos. Se distinguen dos tipos: B, que producen anticuerpos circulantes y T, responsa-’ bles de la respuesta inmu- ne celular. ‘monoeito: Leucocito grande ‘que ingiere bacterias y otros, ‘cuerpos extrafios. neutréfilo: Leucocito involu- crado en la lucha contra la infecci6n. ‘eosinéfilo: Leucocito involu- crado en la lucha contra la infeccién. baséfilo: Leucocito involu- crado en la lucha contra la infeccion, SECCION 2 La hemoglobina se mide con distintas técnicas, pero las més apropia- das son la colorimétrica 0 la fotométrica. También puede estimarse comparando su densidad con la de una solucién de sulfato de cobre de potencia conocida. Este método se usa mucho en medicina trans- fusional y es muy til cuando el suministro eléctrico es escaso 0 ine- xistente. En muchos paises, los niveles minimos de hemoglobina aceptados por los centros de hemoterapia son: ™ varones: 13,5 g/dl mujeres: 12,5 g/dl. Estos valores se confirman colocando una gota de sangre en una so- lucién de sulfato de cobre de densidad 1.055 para los varones y 1.053 para las mujeres y apreciando su descenso. El apéndice 1 del médulo introductorio incluye un procedimiento estandar para preparar solucién de sulfato de cobre y el apéndice 5 del modulo 4, presenta ejemplos al respecto. Ee) eCuales son los niveles minimos de hemoglobina aceptados en su servicio? Describa los métodos empleados para determinarios. 2.4 GLOBULOS BLANCOS (LEUCOCITOS) Los leucocitos constituyen una familia de células nucleadas integrada por granulocitos, IInfocitos y monocitos. Existen tres tipos de granu- locitos: neutréfilos, eosinéfilos y baséfilos. En condiciones normales, los granulocitos derivan de la médula 6sea. Algunos linfocitos también se producen en la médula 6sea, pero la mayoria proviene del tejido linfatico y el timo. EI origen de los monoci- tos es incierto, pero podrian formarse en el tejido reticuloendotelial, en particular en el bazo. El nGmero de leucocitos circulantes es muy inferior al de eritrocitos. En el adulto sano la cifra es de 4000 a 11.000 leucocitos por milime- tro ctibico (mms) de sangre (4 x 10 9/l — 11 x 10 9/1), con la siguien- te distribucion: 1 neutr6filos: 1500-7500/mm3 (1,5 x 10 9/1 - 7,5 10 9/1) @ eosinéfilos: O-400/mm3 (0 - 0,4 x 10 9/1) I basofilos: 0-200/mm3 (0 - 0,2 x 40 9/I) I infocitos: 100-4500 /mms (1 x ¥en = 4,5 x 10 9/l) @ monocitos: 0-800/mms (0 - 0,8 x 10 9/1) A diferencia de los gl6bulos rojos, los leucocitos son células nuclea- das y su sobrevida es mucho mas breve. Los granulocitos perduran 3 a5 dias. No se ha definido con certeza la sobrevida de los linfocitos, COMPONENTES Y FUNCIONES DE LA SANGRE [fagocitosis: Proceso por el cual ciertos glébulos blan- cos ingieren bacterias y| otros cuerpos extratios. fibrina: Filamentos protel- cos delicados que se for- man cuando la trombina ac- {Ga sobre el fibrindgeno so- luble, durante la coagula-| i6n de la sangre. ‘suero: Liquido que rodea a los globulos rojos coagule- dos. {fibrindgeno: Sustancia invo-| lucrada en ta coagulacion de la sangre. pero podria ser de pocos dias a muchos ajios. Los monocitos aban- donan la circulacién después de pocos dias. Los granulocitos se ocupan sobre todo de combatir las infecciones. Los linfocitos desempefian un papel relevante en la sintesis de anticuerpos contra antigenos extrafios y en la defensa contra las virosis. Los mono- citos a menudo se denominan basureros porque ingieren bacterias y otros cuerpos extrafios. Este proceso se denomina fagocitosis. 2.5 PLAQUETAS (TROMBOCITOS) Las plaquetas son mucho mas pequefias que los glébulos rojos y blancos y en el adulto normal varian entre 150.000 y 500.000 por milimetro cabico de sangre (150 x 10 9/1 - 500 x 10 9/1). Son funda- mentales en la coagulacién. A nivel de las lesiones o heridas liberan una sustancia y se combinan con otros factores de coagulaci6n de! plasma para producir filamentos proteicos delicados (fibrina). La fibri- fa, por su parte, opera como una red que atrapa a los eritrocitos pa- ra formar un coagulo y evitar la hemorragia adicional. La sobrevida de las plaquetas conservadas de manera correcta puede llegar a 5 dias y de 9 a 11 dias en la circulaci6n. 2.6 COAGULACION Suero y plasma Cuando se extrae sangre con una jeringa y se coloca en un tubo se- co, se coagula y forma una masa semisOlida de células rodeada de n Ifquido que se denomina suero. No obstante, si se recolecta en un tubo con anticoagulante - compuesto que impide la coagulacién — las células sedimentan en el fondo y el liquido circundante es el plasma. Por lo tanto, el suero es el liquido que rodea a los globulos rojos coa- gulados y el plasma, el que circunda a los no coagulados. Mecanismo de coagulaclén La coagulaci6n de la sangre es un proceso muy complejo y la explica- cién detallada de las vias intrinseca (contacto) y extrinseca (dafio tis lar) esta fuera del alcance de este modulo. Sin embargo, en términos simples, la lesion de un vaso sanguineo desencadena la cascada de la coagulaci6n, que lleva a la conversi6n del fibrinégeno soluble en fibrina y la formaci6n de un coégulo estable que evita la hemorragia adicional, 2.7 INDICACIONES DE LAS TRANSFUSIONES DE SANGRE La sangre y sus productos se utilizan con fines miltiples, pero las tres indicaciones principales son: 1 corregir una anemia (concentracién de hemoglobina baja) MH reemplazar la sangre perdida por hemorragia, durante una operacién o a causa de un accidente | reemplazar otros componentes de la sangre, por ejemplo factores de coagulacién. SECCION 2 oes Identifique las indicaciones de Ia transfusi6n de las Gitimas 20 unida- des de sangre entregadas por su banco. ¢Cudles fueron las mas co- munes? Debe poder averiguar los motivos consultando los registros 0 a sus colegas. Sino puede obtener esta informaci6n, anote las indicaciones de la transfusi6n de las préximas 20 unidades de sangre solicitadas a su banco. RESUMEN 1 La sangre total contiene una mezcla de glbulos rojos (eri- trocitos), glébulos blancos (leucocitos) y plaquetas (trombo- citos), suspendidos en plasma. 2. Los eritrocitos poseen hemoglobina. Su funcién principal consiste en transportar oxigeno a los tejidos. 3. Los leucocitos constituyen una familia de células nucleadas que incluye granulocitos, linfocitos y monocitos. 4 Las plaquetas desempefian un papel destacado en ta coa- gulacion. 5 El suero es el lfquido que rodea a los glébulos rojos coagu- lados y el plasma, el que circunda a los no coagulados. 6 La coagulaci6n se inicia por dos vias: intrinseca (contacto) y extrinseca (dafo tisular). Tare 1 ZCul es la sobrevida promedio de los gidbulos rojos en la circulacion? éCual es la funci6n principal de la hemoglobina? eCual es la funci6n de los linfocitos? éCudles son las tres indicaciones principales de las transfu- siones de sangre? Cees encour ‘Antes de pasar a la secoi6n 3, el estudiante deberé decidir si cumplié con los objetivos de aprendizaje de la secci6n 2: 1 Describir los principales componentes de la sangre. 2 Explicar la funci6n de los componentes de la sangre y su im- portancia en medicina transfusional. COMPONENTES Y FUNCIONES DE LA SANGRE Si comprendié todos los puntos con claridad, puede proseguir. Si necesita dedicar mas tiempo a esta seccion, repase los pun- tos mas complejos 0 dificiles. Podria ser (til comunicarse con el tutor u otros colegas para discutir el tema. Inmunologia Basica de los Grupos Sanguineos La finalidad de esta secci6n es facilitar la comprensi6n de los antige- nos, anticuerpos, interacciones antigeno-anticuerpo y factores que afectan estos fenomenos. Solo brinda informacion basica que sera utilizada ms adelante, de manera que no incluye actividades. ee a ela eee Después de completar esta secci6n, el estudiante sera capaz de: 4. Definir los antigenos y anticuerpos. 2 Explicar las respuestas inmunes primaria y secundaria y el desarrollo de anticuerpos naturales. 3. Explicar las reacciones antigeno-anticuerpo y los factores que las afectan. 4. Describir los principios de las técnicas que llevan a sensibi- lizaci6n y aglutinacion de los glébulos rojos. INMUNOLOGIA BASICA DE LOS GRUPOS SANGUINEOS ‘antigeno: Cuaiquier sustanr] 3.1 ANTIGENOS fa reconodi j / , , fismo cone oxrohey ce| Un antigeno es cualquier sustancia que cuando ingresa en el organis- estimula una respuesta in- mo y Se reconoce como extrafia, provoca una respuesta inmune. Esta mune. podria inducir la producci6én de anticuerpos especificos que determi- nan una reacci6n observable. ntlcuerpo: Proteina protec- nares tora producida por la res-| 3.2 ANTICUERPOS. Puesta inmune del individu a la estimulacién resuttante| Un anticuerpo es un producto de la respuesta inmune que reacciona de una proteina extraiia. Re] con el antigeno correspondiente en forma observable. ‘conoce los antigenos de los efitrocites extrafios y podria| LOS anticuerpos son Inmunoglobulinas (Ig) y se encuentran en la frac- causar aglutinacion in vo y| cin gammagiobullna de las proteinas plasmaticas. Existen cinco ca hemélisis. tegorias de inmunoglobulinas: IgG, IgM, IgA, IgD e IgE. Este m6dulo inmunoglobulina: Molécula| Se Centra en las IgG e IgM. de anticuerpo sintetizada Los anticuerpos son proteinas integradas por cadenas de aminodci- or linfocitos especializados ‘i 4 en respuesta a un antigeno. dos unidas por puentes peptidicos. Los anticuerpos IgG poseen cua "| tro cadenas, dos pequefias 0 “livianas” y dos mas grandes o “pesa- ‘ammagiobulina: Clase de| das”, Por contraste, los IgM se componen de 10 cadenas livianas y Proteinas séricas que incl) 10 pesadas. La figura 2 ilustra la diferencia entre las dos moléculas. ye a las moléoulas de anti a SC Figura 2: Estructura Cadena pesada ‘Cadena liviana simplificada de las moléculas de IgG e gM ‘Cadena pesada fenformedad hemolitica dei] Antlcuerpos IgG reclén nacido: Cuadro en el i . ual los anticuerpos mater | LOS anticuerpos IgG constituyen alrededor de! 73% de las inmunoglo- nos cruzan la placenta y| __bulinas totales. Tienen un peso molecular de s6lo 150.000. Por su atacan a los eritrocitos feta-| tamafio, atraviesan con facilidad la placenta y en consecuencia, a {2s que poseen los antige-] menudo se asocian a un cuadro denominado enfermedad hemolitica nos correspondientes. agutinaclon: Proceso por et| __#@! Feelén nacido (EHRN). Este problema tiene lugar cuando los anti cual los gldbulos rojos se| CUerPOS maternos cruzan la placenta y atacan a los eritrocitos fetales unen y ligan entre que poseen los antigenos correspondientes. See cease Celle) Los anticuerpos |gG no causan aglutinacién de los gldbulos rojos an- pero no aglutinads, "| tigénicos suspendidos en soluci6n salina; s6lo los recubren y sensibF ‘complemento: Proteina pre-| __lizan. La sobrevida de la IgG es de 60-70 dias. sente en el suero humano pos IgM normal. A menudo participa aioe ‘en reacciones de grupo san-| Los anticuerpos IgM constituyen alrededor del 8% de las inmuno- ulneo y alteraciones innw- globulinas totales. Son mucho m&s grandes que los IgG y tienen nologicas. late: Destrccén (isi) | UN PESO molecular de 900.000. No pueden atravesar la placenta, toa monbena eitectere| — d@ manera que no provocan enfermedad hemolitica del recién na- aque libera el contenido: nem] cdo. Aglutinan con facilidad los glébulos rojos suspendidos en so- y.globina. Resulta de lareac-| —_Iucién salina y su sobrevida es de apenas 10 dias. Durante las {i6n entre un anticuerpo he ; ; fi a i i molto y el antigeno ertroc-| _ Teacclones antigeno-anticuerpo, a menudo activan el complemen- tario correspondiente, en to y en consecuencia, causan heméllsis de los eritrocitos, mas Presencia de complemento, que aglutinacién. Tespuesta Inmune primarta: Respuesta del organismo ante el primer encuentro con un antigeno extraio. respuesta Inmune secunda- ila: Incremento del titulo de anticuerpos ante el segun- do encuentro con el antige- no en cuestién. Figura 3: Respuestas inmu- nes primaria y secundaria SECCION 3 Tabla 1: Diferencias entre los anticuerpos |gG e IgM IgG lem % de inmunoglobulinas totales 73 8 Peso molecular 150.000 900.000 Aglutinaci6n eritrocitaria no si Cruce placentario si no Activaci6n de! complemento si si Reacci6n optima a 37°C 4c Tipo de anticuerpo inmune natural 3.3. RESPUESTA INMUNE Cuando el organismo se expone por primera vez a un antigeno ex- trafio, monta una respuesta primaria. Esta se desarrolla con lenti- tud y podrian pasar varios meses hasta la aparicién de anticuerpos detectables. E! segundo contacto con el mismo antigeno determina una respuesta secundaria. Esta es mucho més espectacular y en general, se sintetizan concentraciones considerables de anticuer- pos en poco tiempo. La respuesta primaria a menudo se asocia a niveles bajos de IgM, mientras que en la secundaria predomina la IgG (figura 3). Respuesta secundaria: IgG ‘Respuesta primaria: IgM Nivel de anticuerpos + 4 Tempo Primera Segunda a eRigero al antic exrato. exaho antlcwerpo natural: Anti- Jcuerpo que aparece en el {torrente sanguineo en au-| sencia de un estimulo anti- ‘génico conocido. Figura 4: Reacci6n de los eritrocitos con los anticuerpos IgM, que lleva a aglutinacién INMUNOLOGIA BASICA DE LOS GRUPOS SANGUINEOS Anticuerpos “naturales” e Inmunes Si analizamos el suero de una persona normal, encontramos anti- cuerpos de grupo sanguineo ABO. Por contraste, el suero de! cordén umbilical 0 de! recién nacido revela concentraciones minimas o nulas de anticuerpos de este tipo. No obstante, si examinamos el suero del lactante 12-20 semanas mas tarde, observamos titulos moderados, Estos aparecen sin inmunizacién obvia del bebé con antigenos de grupo sanguineo A 0 B. Por lo tanto, estos anticuerpos se consideran naturales, es decir, que surgen en ausencia de un estimulo antigéni- co conocido. Como ya se dijo, los anticuerpos se sintetizan como re- sultado del ingreso de un antigeno, de modo que el término “natural” podria crear confusi6n. Ahora se sabe que los virus, bacterias y mu- chos alimentos poseen antigenos AB muy similares a los de los gru- Pos sanguineos humanos. Es asi que estos anticuerpos “naturales” se deben a antigenos que entran al organismo y promueven la res- puesta adecuada, casi siempre de tipo IgM. Los anticuerpos inmunes de grupo sanguineo suelen ser IgG y se producen en presencia de an- tigenos eritrocitarios extrafios. Este evento puede tener lugar como consecuencia de una transfusi6n de sangre o en el caso de la emba- razada, por pasaje de sangre fetal a la circulacion materna. 3.4 REACCIONES ANTIGENO-ANTICUERPO ERITROCITARIAS La mayorfa de las técnicas empleadas en el banco de sangre para de- tectar las reacciones entre antigenos y anticuerpos, se basan en la aglutinacién y en ocasiones, la lisis de los glébulos rojos (hemélisis). La aglutinaci6n resulta de la fijacién de los anticuerpos a los antige- nos de varios eritrocitos, que forma una red o trama que mantiene unidas a las células. Este proceso se divide en dos etapas: Paso 1 Los anticuerpos se fijan a los antigenos eritrocitarios en cuanto toman contacto con ellos. Este fenémeno no causa aglutina- ci6n, sino s6lo recubre 0 sensibiliza a los globulos rojos. Paso 2 Se forma una red que determina aglutinacion. Esta etapa es continuaci6n de la 1, en la cual, si las condiciones son apropia- das, los anticuerpos provocan aglutinaci6n fisica de las células. Los anticuerpos IgM son grandes y exhiben 10 puntos de combina- cién antigénica. Pueden sensibilizar y producir la aglutinacién de los globulos rojos de manera directa. La figura 4 ilustra esta situacion. SECCION 3 Figura 5: Eritrocitos sensibili- zados por anticuerpos IgG Tm vive: Reaccion que tiene lugar en el organismo, como ppor ejemplo en la anemia he- molitica autoinmune. In vitro: Reacci6n que tiene lugar fuera del organismo, es decir, en un tubo de ensayo. Los anticuerpos IgG son mas pequefios y no aglutinan los glébulos ro- jos en forma directa; s6lo los recubren y sensibilizan (figura 5). Para averiguar si se produjo cobertura eritrocitaria y reacci6n antige- no-anticuerpo, se emplean los siguientes procedimientos indirectos: 1 AlbGmina (u otros polimeros cargados) 2. Reactivos antiglobulinicos 3. Enzimas proteoliticas Algunos anticuerpos IgM y unos pocos IgG hemolizan los glébulos ro- Jos. Cuando los anticuerpos se fijan a los antigenos (véase mas ade- lante), el complemento podria activarse e inducir ruptura y destruc- cién de los gldbulos rojos. Por Io tanto, la lisis también indica la pre- sencia de una reaccién antigeno-anticuerpo de grupo sanguineo y co- mo la aglutinaci6n, debe consignarse. Factores que afectan las reacciones antigeno-anticuerpo eritrocitarias Carga Iénica eritrocitarla En el organismo (In vivo) o en un tubo de ensayo (In vitro), los glo- bulos rojos nunca contactan entre si en condiciones fisiologicas normales porque tienen carga eléctrica negativa. Como las cargas iguales se repelen y las opuestas se atraen, los eritrocitos se re- chazan y no se tocan. La distancia que los separa es minima, pero suficiente para evitar que las moléculas pequefias de IgG se inter- pongan entre las células y las aglutinen, como se aprecia en la fi- gura 5. Sin embargo, las moléculas de IgM mas grandes, podrian unirlas, como se muestra en la figura 4. En consecuencia, los anti- cuerpos IgM pueden provocar aglutinacién directa de los globulos rojos, pero los IgG s6lo los recubren y sensibilizan. La carga negativa de los eritrocitos deriva de los grupos de 4cido neu- raminico de la membrana. La fuerza que mantiene la separacién en- tre las células a veces se denomina “potencial zeta”. Temperatura Cada anticuerpo tiene su temperatura de reaccién preferida. Por ejemplo, los de grupo sanguineo ABO actdan mejor a 4°C y los Rh, a 37°C. INMUNOLOGIA BASICA DE LOS GRUPOS SANGINEOS solucién salina de baja fuerza lénica (LISS): Cuan- do se reduce la potencia i6- nica de la solucién salina normal al 0,2%, en glucosa al 7%, el titulo de la mayoria de los anticuerpos de grupo sanguineo aumenta. Ahora se expende LISS ya prepa- rada. prueba antigiobulinica: Téc- nica que emplea reactivo antiglobulfnico para detectar la presencia de globulina humana en los gl6bulos rojos sensibilizados. pH El pH 6ptimo de la mayoria de los anticuerpos de grupo sanguineo es de 6,5 a 7,5. Cuando el pH es demasiado Acido o demasiado alcali- no, las reacciones se inhiben. Antigiiedad del suero y los erltrocitos Las reacciones ms satisfactorias se obtienen cuando se emplea suero y eritrocitos frescos. Se aconseja entonces usar glébulos rojos recién preparados y conservar el suero a -20°C o menos. Proporcién entre anticuerpos y antigenos La proporcién entre anticuerpos y antigenos es importante. Cuan- to mayor es la concentracién de anticuerpos en relaci6n con la de antigenos eritrocitarios, més intensa es la reacci6n. Por lo tanto, la potencia de la suspensi6n de glébulos rojos es esencial, por- que si es excesiva, podria enmascarar la presencia de anticuer- pos débiles. Para las pruebas de aglutinacién, la cifra mas ade- cuada es del 2-4%, Potencla Iénica Cuando se reduce la potencia i6nica del medio en el que suspenden los globulos rojos, la reaccién antigeno-anticuerpo se acelera. Si se utiliza soluci6n salina de baja fuerza lonica (SSBFI o LISS), el periodo de incubacién de la prueba antiglobulinica se abrevia a 15 minutos. Aglutinactén de los giébulos rojos recublertos de anticuerpo Como ya se dijo, los bancos de sangre utilizan tres métodos para de- tectar las reacciones antigeno-anticuerpo. Albimina Las moléculas cargadas grandes como la albGmina, aproximan los globulos rojos, de manera que los anticuerpos IgG pueden fijarse a los antigenos de células adyacentes y formar aglutinados. Si los eri- trocitos no estén recubiertos de anticuerpos, la albGmina no acta. A veces se agrega albimina a los reactivos para incrementar su acti- Vidad aglutinante o se emplea en la técnica en dos pasos (véase sec- cién 7 y apéndice 1). En este procedimiento se incuban los glébulos rojos con suero para que los anticuerpos los recubran. Luego se afi de albGmina para aglutinarlos. Reactivos antiglobulinicos La prueba antiglobulinica usa reactivos antiglobulinicos para identifi- car la presencia de globulina humana en los eritrocitos sensibiliza- dos. Se divide en tres etapas: Paso 1: Sensibilizacion Se incuban los globulos rojos con suero para que los anticuer- pos se fijen a los antigenos eritrocitarios. Paso 2: Lavado Se lavan los globulos rojos varias veces en abundante cantidad de soluci6n salina, para eliminar las proteinas o inmunoglobull- nas libres. SECCION 3 reactive antiglobulinico (AHG): compuesto que reacciona en forma especifi- ca con Ia globulina humana. Figura 6: GlObulos rojos sensibilizados aglutinados or el suero antiglobulinico. ‘enzima: Sustancia capaz de remover algunas protet- nas y sustancias quimicas que rodean a los globulos rojos y reducir as las fuer- zas de atracci6n circundan- tes (potencial zeta). Este fenémeno incrementa la sensibilidad de los eritroci- tos suspendidos en solu- cién salina, a ta aglutina- cién a cargo de los anti- cuerpos IgG. Paso 3: Agregado de reactivo antiglobulinico Se afiade reactivo antiglobulinico (AHG). Si los gidbulos rojos estan recubiertos de anticuerpos IgG (0 componente C3 del complemento), el reactivo los agiutina. En ausencia de anticuer- Pos no se produce aglutinaci6n, La prueba antiglobutinica se detalla en la secci6n 7 y el apéndice 1. YY “19 metecules Y = antiglobulin molecules La figura 6 muestra los globulos rojos sensibilizados aglutinados por el suero antiglobulinico. Las moléculas negras corresponden a los an- ticuerpos IgG y las blancas, a los antiglobulinicos. Enzimas proteoliticas La carga negativa de los gl6bulos rojos los mantiene separados. Este fenémeno se debe a la presencia de grupos quimicos — acido neura- minico — en la superficie de las células. Algunas enzimas como la pa- paina y la bromelina, remueven parte del acido neuraminico y dismi- nuyen la carga negativa. Los eritrocitos se aproximan y los anticuer- pos IgG los aglutinan. Los anticuerpos IgM también aglutinan los eri- trocitos tratados con enzimas y su reacci6n podria ser mas intensa, como en el caso de los anti-A y anti-B. Advertencia: Las enzimas eliminan algunos antigenos eritrocitarios. En consecuencia, las técnicas enzimaticas no detectan todos los an- ticuerpos. Por lo tanto, se las considera auxiliares y no suplantan a las basicas (solucién salina, albmina y antiglobulina) que se descri- ben en la seccién 7 y el apéndice 1. 3.5 COMPLEMENTO Como ya se dijo, algunos anticuerpos provocan lisis celular. Los com- plejos antigeno-anticuerpo activan una secuencia compleja de compo- nentes — el complemento — que lleva a destrucci6n de los eritrocitos © revestimiento con C3. El complemento es una proteina de! suero Figura 7: ActivaciOn de la via de! complemento simplificada INMUNOLOGIA BASICA DE LOS GRUPOS SANGUINEOS humano normal. A menudo participa en reacciones de grupo sangut- neo y alteraciones inmunologicas. Algunos gldbulos rojos recubiertos de C3 se eliminan cuando pasan por el higado, pero otros permanecen en la circulacién y se detectan en la prueba antiglobutinica. Los componentes del complemento son labiles y se desnaturalizan con celeridad; la actividad declina durante la conservaci6n y desapa- rece cuando se calienta el suero a 56°C durante 30 minutos. ‘Complejo antigeno-anticuerpo + C1. Gl6bulos rojos recublertos de C3 C3-> Lisis eritrocitaria La via del complemento es compleja, pero Ia figura 7 ilustra los pa- sos principales. RESUMEN 1 Los antigenos son sustancias que cuando ingresan en el organismo y se reconocen como extrafias, desencadenan una respuesta inmune que podria llevar a la sintesis de anticuerpos especificos que reaccionan-en forma obser- vable. 2. Los anticuerpos son proteinas protectoras producidas por la respuesta inmune a la estimulaci6n inducida por una prote- na extrafia y que reaccionan con los antigenos en forma ob- servable, 3 Los anticuerpos son inmunoglobulinas, de las que existen cinco categorias: IgG, IgM, IgA, IgD e IgE. 4 Después de la exposici6n a un antigeno, la respuesta prima- ria a menudo se asocia a niveles bajos de anticuerpos IgM, mientras que en la secundaria predominan los |g. 5 En la primera etapa de la aglutinaci6n, los anticuerpos que se fijan a los antigenos recubren o sensibilizan a los glébu- los rojos. El segundo paso es Ia aglutinacién fisica de los eritrocitos. 6 Los anticuerpos IgM pueden sensibilizar y aglutinar los glé- bulos rojos. 7 Los eritrocitos recubiertos de anticuerpos IgG s6lo se agluti- nan cuando se utiliza alguna de las siguientes técnicas indi- rectas: ™@ albamina (u otros polimeros cargados) 1 reactivos antiglobulinicos ™@ enzimas proteoliticas. SECCION 3 8 Los complejos antigeno-anticuerpo activan una secuencia de componentes — el complemento ~ que lleva a lisis de los lébulos rojos o revestimiento con C3. Barra 5 O000000000 &§ QQQOOOOOOO'! Figura 24; Placa esténdar de 96 pozos Como se aprecia en la figura 25, existen tres tipos de cubetas: menv Mm planas menu. Figura 25: Cubetas enV, plana yen U SECCION 7. Para los estudios serolégicos se prefieren las cubetas en U porque facilitan la lectura de los resultados. La ventaja de las microplacas radica en que suplantan a 96 tubos de ensayo, de manera que requieren mucho menos antisuero y reducen los costos. Las placas pueden reutilizarse, pero es crucial lavarlas y secarlas pa- ra eliminar todas las proteinas extrafias. Es aconsejable no usar una placa para diferentes reactivos, sino separarlas, por ejemplo, para trabajar con anti-A empleando siempre las mismas microplacas. 7.7 LECTURA DE LAS REACCIONES Técnica del portaobjetos o azulejo ‘Se mezclan los glbulos rojos y el suero en un drea de 2 cm de diéme- tro. Luego se inclina el portaobjetos para observar la presencia de aglutinacion. La reaccion debe leerse antes de los 2 minutos para evi- tar que los reactivos se sequen y brinden resultados falsos positivos. Técnica del tubo Se deja depositar los glébulos rojos en el fondo del tubo. Si no se centrifugan, este proceso demora por lo menos 45 minutos. Se eva- Ida un tubo por vez, colocndolo contra un fondo blanco bien ilumina- do, un negatoscopio con luz difusa 0 un espejo cncavo. Si se advier- te hem@lisis, se consigna. Se inclina el tubo y se agita con suavidad para movilizar los glébulos rojos sedimentados. Se analiza la presencia de aglutinaci6n. El em- pleo de una lupa (2x 0 5x) facilita la lectura. Antes de proseguir se re- gistra el resultado. Técnica de la microplaca Como en el caso de los tubos, se deja depositar los glébulos rojos 0 se centrifuga la placa a baja velocidad. Se examina en busca de he- mOdlisis y luego se movilizan las células sedimentadas mediante un agitador o golpeteando el borde de la placa con la palma de la mano. Los resultados se leen en forma directa 0 con el auxilio de un lector especial. Existen otros métodos, pero requieren centrifugacion. Este es simple pero satisfactorio. 7.8 DEFINICION DE LA POTENCIA DE LA REACCION Cuando se leen los resultados es necesario contar con un sistema que diferencie la potencia de las reacciones; en general se utilizan puntajes. Por ejemplo: 4a = aglutinacién completa de todas las células 3+ = aglutinaci6n de la mayoria de las células TECNICAS DE DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO 2+ = aglutinaci6n a simple vista tt = positividad débil a simple vista; neta cuando se emplea una lupa 0 espejo céncavo Negativo = no se observa agiutinacion L = lisis de los glébulos rojos 7.9 REACTIVOS DE GRUPO SANGUINEO Los reactivos de grupo sanguineo se preparaban a partir de anticuer- os policlonales naturales o inmunes de sangre humana y en ocasio- nes animal. Ahora se obtienen de anticuerpos monoclonales derive dos de cultivos de células secretoras o hibridomas. La ventaja de los reactivos monoclonales es que proporcionan mon- tos casi ilimitados de anticuerpos idénticos, muy especificos y libres de contaminantes que podrian generar resultados falsos positivos. También estan exentos de virus como los VIH y de la hepatitis. No obstante, deben conservarse y usarse de acuerdo con las instruccio- nes del proveedor, porque se preparan con un diluyente estandariza- do y son susceptibles a los cambios de pH y otros factores. Algunos reactivos sufren modificaciones quimicas; es asi que se alte- ran los anticuerpos IgG para que se comporten como IgM aglutinan- tes 0 se mezclan con otros anticuerpos no tratados para producir reactivos “combinados”. Es esencial cumplir con las especificaciones del proveedor. 7.10 GLOBULOS ROJOS PARA DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO Los glébulos rojos que se utilizan en la determinacién del grupo san- guineo pueden necesitar lavarse con soluci6n salina para remover el plasma o suero y los coégulos que podrian provocar resultados falsos Positivos si se confunden con aglutinados. Este procedimiento tam- bién elimina los eritrocitos hemolizados. Los glébulos rojos de la san- gre coagulada requieren un lavado y los de la anticoagulada, dos. El Sobrenadante del ditimo lavado no debe mostrar hemélisis. Las c6lulas lavadas se suspenden en soluci6n salina para aleanzar la concentracién adecuada, en general del 2~4%. Esta proporcién es fun- damental y para lograrla se necesita préctica. Para obtener una suspen- sion al 3% se agrega 1 gota de gl6bulos rojos sedimentados (centrifu- gados) a 30 gotas de soluci6n salina (véase técnica 1 del apéndice 1). Cuando se analizan muchas muestras, aun los tubos bien rotulados Podrian mezclarse e inducir a error, Si se evalGan muestras frescas, es aceptable preparar la suspensi6n al 2-3% en forma directa, pero cuidando que los glébulos rojos no ingresen en la pipeta con dema- siado suero. Si la muestra pertenece a un paciente con anemia, se lavan los eritrocitos para remover el exceso de suero, asi como tam- bién cuando parece haberse producido hemOlisis. SECCION 7 Preparacion de glébulos rojos A, B y 0 para la prueba inversa Estos gl6bulos rojos pueden prepararse a partir de muestras frescas y sies factible, provenientes de dos individuos. En lo posible se usan células A Rh D negativas, B Rh D positivas y 0 Rh D positivas. Tam- bién pueden utilizarse para controlar los sueros de determinacion de los grupos ABO y Rh. CTs Lea la técnica 1 del apéndice 1. Tome cinco muestras de sangre ya tipificadas y empleando la técnica 4, prepare una suspension al 3% de cada una. Necesitaré estas sus- pensiones para la pr6xima actividad. Solicite al supervisor que verifique si las suspensiones de glébulos rojos que acaba de preparar son correctas. 7.41. CONSERVACION DE LOS ANTISUEROS Y GLOBULOS ROJOS En general los antisueros se conservan a 4°C, pero es preciso leer y seguir las instrucciones del proveedor. Los sueros no deben descon- gelarse y congelarse en forma reiterada porque se alteran. En condi- ciones ideales, se descongelan una sola vez y se mezclan bien, por- que las proteinas tienden a separarse del agua. En lo posible, los glébulos rojos que se utilizan en la determinacion inversa del grupo sanguineo deben prepararse a diario. Si se conser. van a 4°C, pueden emplearse durante dos dias. Si exhiben hemdlisis © decoloracién, deben descartarse. Si el banco de sangre recibe reactivos (antisueros 0 giébulos rojos) de otra institucion, es menester consignar la siguiente informacién: fecha de recepcién origen condiciones de conservacién fecha en que comenzaron a usarse numero de lote fecha de vencimiento comentarios 0 problemas derivados de los reactivos. 7.42 EVALUACION DE LOS ANTISUEROS Y GLOBULOS ROJOS Antes de usar los antisueros en estudios de rutina es necesario evaluarlos con una bateria de controles para garantizar los resultados correctos, Luego deben evaluarse con cada lote de pruebas 0 por lo menos una vez por dia. TECNICAS DE DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO Los glébulos rojos deben analizarse de la misma manera que los anti- sueros. 7.13 DETERMINACION DE LOS GRUPOS ABO Y Rh D En general, la determinaci6n de los grupos ABO y Rh D es simul- tanea. En el caso del grupo ABO, casi siempre se utiliza una técnica con so- luci6n salina a temperatura ambiente. El empleo de los antisueros Rh D varia. Algunos reactivos monoclona- les requieren el mismo procedimiento que los ABO y si se usan mi- croplacas, puede llevarse a cabo la determinacién de los grupos ABO y Rh D al mismo tiempo. Otros deben incubarse a 37°C y suelen ser més adecuados para los estudios en tubos de ensayo. Determinacién del grupo sanguineo de los donantes EI grupo de los donantes debe determinarse cada vez que donan san- gre, empleando anti-A, anti-B y anti-AB y globulos rojos A, By 0. Se utiliza por lo menos un reactivo anti-D. En las muestras negativas se investiga la presencia de DY, Determinacién del grupo sanguineo de los pacientes Los glébulos rojos del paciente se estudian con anti-A y anti-B y el suero o plasma, con células A, B y 0. Se usa un anti-D y aunque no es imprescindible, en algunos centros se busca D! en las muestras negativas. Como en Ios nifios el suero no contiene anti-A ni anti-B, no es necesa- rio efectuar la determinacién inversa en nifios menores de tres meses. Determinacién de los grupos ABO y Rh en tubos La determinaci6n de los grupos ABO y Rh en tubos se describe en la técnica 6 del apéndice 1. Determinacién de los grupos ABO y Rh en microplacas La determinacién de los grupos ABO y Rh en microplacas se describe en la técnica 7 del apéndice 1. Investigacién de D® La investigaci6n de DU se describe en la técnica 8 del apéndice 1. ‘seudoagiutinacién: Agiuti- nacion falsa que suele de- berse a alteraciones de la proporcion albGmina/globu- linas. pilas de monedas: Reac- ci6n en la cual los globulos rojos parecen aglutinarse. Por lo tanto, se trata de tuna seudoaglutinacién (véase antes). Figura 26: Agiutinacién verdadera (vista microscépica) Figura 27: Formacién de pilas de monedas (vista microscépica) SECCION 7 Lea las técnicas 2-8 del apéndice 1. Mediante la técnica 6 0 7, determine los grupos ABO y Rh de las muestras ya tipificadas (suspensiones celulares preparadas en la ac- tividad 26). Anote los resultados utilizando el sistema de puntaje que se detalla en la secci6n 7.8. Compare sus resultados con los obtenidos con anterioridad. ¢Coinci- den con los grupos ABO y Rh originales? Si no es asi, intente explicar el motivo de la discrepancia. Solicite al supervisor que verifique los resultados. 7.44 ERRORES EN LA DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO Es preciso conocer los errores potenciales en la determinacién det grupo sanguineo, que podrian generar resultados falsos positivos o falsos negativos. Estandarlzaci6n o conservacién Incorrecta de los antisueros Es muy importante evaluar todos Ios lotes de antisueros antes de utt lizarlos. Para evitar los resultados falsos negativos, siempre deben conservarse a la temperatura indicada por el proveedor. Los antisue- ros infectados pueden inducir resultados falsos positivos. Formaclén de “pilas de monedas” La formacién de pilas de monedas a menudo se denomina seudoa- glutinaci6n. Para detectarla se requiere préctica. La figura 26 ilustra la aglutinaci6n y la 27, la formaci6n de pitas de monedas. Este fend- meno suele observarse en el suero de pacientes con proporcion albG- mina/globulinas anormal. Ante la duda, es esencial consultar a un profesional experimentado. Si se agrega 1 gota de solucién salina hi- pert6nica (1,5%), las pilas de monedas desaparecen pero la agiutina- cién verdadera no. TECNICAS DE DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO Muestras de sangre contaminadas Las muestras de sangre contaminadas pueden afectar los resulta- dos. En general (pero no siempre) se reconocen por el olor desagra- dable. Ademas, cuando se preparan las células para determinar el grupo, se advierte hemélisis. En estas circunstancias es preferible solicitar una nueva muestra. Gelatina de Wharton La gelatina de Wharton es la sustancia que recubre el cuerpo y cordén umbilical del recién nacido y a menudo se identifica en las muestras de sangre del cordén umbilical obtenidas en forma directa y No a través de una jeringa. Este material mucoide contamina las muestras y puede provocar formaci6n de pilas de monedas. Para eli- minarlo, se lavan las células en soluci6n salina calentada a 37°C. Autoanticuerpos y anticuerpos de reaccién en frio La sangre de algunos pacientes contiene autoanticuerpos que reac- cionan con las células A, B y 0 en la determinacién inversa del grupo. En estos casos se incuba la preparacién a 37°C antes de leer los re- sultados. Como muchos de estos anticuerpos actian a temperaturas inferiores a la corporal, se advierten reacciones ABO verdaderas. A veces los anticuerpos son potentes y causan hemélisis a 37°C. Si es asi, se realiza una prueba antiglobulina directa (véase técnica 11 del apéndice 1). Es preciso informar al médico de cabecera, porque el Paciente podria tener una anemia hemolitica autoinmune. Técnica incorrecta La mayoria de los errores en la determinacion del grupo sanguineo deriva de la técnica inadecuada, en particular: ™@ colocaci6n de los antisueros 0 células en los tubos equivo- cados ™ falta de apreciacién de la importancia de la temperatura y el tiempo de incubacion ™ transcripci6n incorrecta de los resultados. Si se aplica el procedimiento indicado y se efectdan los controles co- rrespondientes, es factible evitar muchos errores. 7.15 METODOS DE DETECCION DE ANTICUERPOS ERITROCITARIOS INMUNES La mayoria de las muertes vinculadas con las transfusiones se debe a incompatibilidad ABO, de manera que es esencial llevar a cabo con gran cuidado la determinacién del grupo sanguineo del donante y el Paciente y asegurar a compatibilidad. Sin embargo, después de transfusiones o gestaciones algunas personas desarrollan anticuer- SECCION 7 pos inmunes (en general IgG). Es fundamental detectar estos anti- cuerpos y encontrar sangre compatible. Los anticuerpos inmunes se identifican cuando se evaléa el suero 0 los glébulos rojos del paciente o cuando se realiza la compatibilidad ‘ABO y Rh D. El procedimiento mas apropiado es la prueba antiglobuli- na indirecta (de Coombs). En lo posible, debe utilizarse en todos los estudios de compatibilidad. Si las existencias de reactive son limita- das, se reserva la prueba antiglobulina indirecta (PAI) para los pacien- tes que recibieron transfusiones con anterioridad o las mujeres que pudieran haber desarrollado anticuerpos inmunes durante un embara- z0. En los demas enfermos puede recurrirse a una técnica con albG- mina (véase secci6n 7.18). El estudio no s6lo debe reconocer los anticuerpos inmunes, sino tam- bién la incompatibilidad ABO debida a la selecci6n de una unidad de sangre inadecuada. Ademés de la PAI y la técnica de la albamina, se agrega otra con solucién salina a temperatura ambiente o compatibili- dad en tubo, centrifugacion inmediata y PAI. Estos procedimientos se describen en el apéndice 1. 7.46 PRUEBA DE ANTIGLOBULINA INDIRECTA La prueba de antiglobulina indirecta (PAI) 0 de Coombs es un método de aglutinacién en tubo en el cual el suero antigiobulinico demuestra la combinacién de los anticuerpos incapaces de provocar aglutinacion directa, con los receptores eritrocitarios correspondientes. En la seccin 3 se sefial6 que la PAI consiste en tres pasos: Paso 1: Sensibilizaci6n e incubacién Paso 2: Lavado Paso 3: Agregado del reactivo antiglobulinico. ‘También se indicé que diversos factores como el pH y la potencia i6- nica, afectan las reacciones antigeno-anticuerpo. Paso 1: Sensibilizacion En la fase 1 se incuba el suero y los glébulos rojos a 37°C. Si se utili zan eritrocitos suspendidos en solucién salina (véase la técnica 9), la incubacién se prolonga 45-60 minutos, pero si se emplea solucin salina de baja potencia iénica (LISS) (véase la técnica 10.1), se redu- ce a 15 minutos porque Ia fijacion de los anticuerpos a las células se acelera. La proporcién entre suero y glébulos rojos es importante; en presen- cia de anticuerpos de reacci6n débil se requieren 3-4 gotas de suero por cada gota de suspensién celular al 2~4%. Si se usa LISS, los vo- IGmenes deben ser iguales para corregir el medio i6nico. Por lo tanto, por cada 2 gotas de suero se afiaden otras 2 de células al 2-4% en uss. TECNICAS DE DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO Como alternativa, se recurre al “agregado de LISS” (véase la técnica 10.2). Es esencial seguir las instrucciones del proveedor, pero en ge- neral se utilizan 3 gotas de suero y 1 de células al 2~4% en soluci6n salina y luego se agregan 3 gotas de LISS. Se mezcla bien y se incu- ba a 37°C durante 15 minutos. Después de Ia incubaci6n y antes de lavar los gl6bulos rojos se ins- pecciona el tubo en busca de hemdlisis y aglutinacion, Paso 2: Lavado El lavado es fundamental porque debe eliminar todo vestigio de suero de los glébulos rojos. Por lo tanto, se repite la operacién cuatro ve- ces. El pH de la solucién salina debe ser de 6,5-7,5. En caso contra- rio, el lavado podria remover los anticuerpos que recubren a los eri- trocitos. Paso 3: Agregado del reactivo antiglobulinico Los reactivos antiglobulinicos (AHG) deben usarse de acuerdo con las. instrucciones del proveedor. En general se aconseja afiadir 2 gotas de AHG y centrifugar de inmediato. Si se emplea menos AHG, podrian pasarse por alto las reacciones débiles. Los resultados deben leerse y consignarse con cuidado (véase la seccion 7.7). Los resultados falsos negativos suelen deberse a lavado incorrecto de los glébulos rojos y neutralizacion de la AHG por parte del suero remanente. Para evitar este problema, se agregan eritrocitos recu- biertos de IgG a las pruebas negativas (véase la técnica 12 del apén- dice 4), se mezcian y se centrifugan. Debe observarse aglutinacion, que confirma que el estudio es negativo. Si no se produce aglutina- ci6n, la AHG se neutraliz6 y los hallazgos no son confiables. En con- secuencia, es necesario repetir la prueba. Si se presta atencion a los detalles y se lleva a cabo el procedimiento con el debido cuidado, los fracasos no son frecuentes. La tabla 5 ilustra las causas de reacciones falsas positivas y falsas negativas en la prueba antiglobulina indirecta. Tabla 5: Causas de reacciones falsas positivas y falsas negativas en la prueba de antiglobulina indirecta Resultados falsos positivos ll Presencia de polvo o particulas en los tubos 1 Contaminacién de un tubo a otro '@ Centrifugaci6n muy répida o muy prolongada SECCION 7 Resultados falsos negativos 1 Lavado inadecuado de los gl6bulos rojos Falta de AHG Tubos sucios Presencia de codgulos en el suero o las células Soluci6n salina de pH incorrecto Centrifugacion a velocidad inapropiada Demora en el agregado de AHG Demora en la lectura 7.17 PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA La prueba de antiglobulina directa (PAD) se realiza para saber si los glébulos rojos del paciente se recubrieron de anticuerpos in vi- vo (en el organismo). Este fenémeno es inusual y tiene lugar en la anemia hemolitica autoinmune, las reacciones transfusionales he- moliticas y la enfermedad hemolitica del recién nacido. Los eritro- citos no se incuban con suero, sino que se lavan y mezctan con AHG; es decir, se evalGan en forma directa (véase la técnica 11 del apéndice 1). La tabla 6 enumera los cuadros en los cuales la PAD es positiva. Tabla 6: Cuadros asociados a prueba antigiobulina directa positiva Anemia hemolitica autoinmune Los anticuerpos del paciente que reaccionan con sus propios globulos rojos, provocan destrucci6n eritrocitaria in vivo Reacciones transfusionales hemoliticas Los anticuerpos del paciente que reaccionan con los glébulos rojos transfundidos, provocan destruccién eritrocitaria in vivo Enfermedad hemolitica del recién nacido Los anticuerpos IgG de la madre que atraviesan la placenta, provocan destrucci6n in vivo de los glébulos rojos fetales TECNICAS DE DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO 7.18 PRUEBA DE LA ALBUMINA La prueba de la albGmina no es tan sensible como Ia PAI. No obs- tante, cuando es dificil obtener AHG 0 cuando se emplean ciertos reactivos anti-D, puede suplantar a la PAI. Se lleva a cabo en dos pasos: Paso 1 Se incuba suero y glébulos rojos a 37°C y se deja sedimentar las células. Si existen anticuerpos (IgG 0 IgM), recubren los eri- trocitos. Paso 2 Se agrega albGmina por la pared del tubo. Se incuba durante 10-15 minutos y se observa aglutinacion de los glébulos rojos recubiertos. Albamina en ta PAL Algunos proveedores recomiendan afiadir albGmina al suero y los gl6- bulos rojos para incrementar la sensibilidad de la PAI. Sin embargo, si la técnica es correcta, no es necesario agregar albGmina, 7.19 TECNICAS ENZIMATICAS Las técnicas enzimaticas se emplean para detectar anticuerpos in- munes, pero como las enzimas destruyen algunos antigenos de gru- Po sanguineo, su valor es limitado. Por lo tanto, no reemplazan a la prueba de antiglobulina y s6lo se efecttan como procedimientos de referencia. 7.20 PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD Las pruebas de compatibilidad son fundamentales para garantizar la ausencia de anticuerpos séricos del paciente capaces de reac- cionar con los antigenos de los globulos rojos transfundidos. El procedimiento debe ser lo ms simple posible, sin comprometer la exactitud, porque la complejidad aumenta el riesgo de cometer errores. Existen varios métodos, algunos de los cuales son muy sensibles a ciertos tipos de anticuerpos. La técnica de la soluci6n salina a tem- peratura ambiente detecta la incompatibilidad ABO, pero no los anti- cuerpos debidos a transfusions o gestaciones previas. Sin embargo, la prueba antiglobulina es muy sensible y demuestra casi todos los anticuerpos. Por lo tanto, en lo posible, debe formar parte de todos los estudios de compatibilidad. La evaluaci6n se lleva a cabo en tubos a temperatura ambiente para identificar ta incompatibilidad ABO y a 37°C para reconocer los anti- cuerpos IgG mediante una prueba de inmunoglobulina indirecta. Si la PAI no es factible, se recurre a la técnica de la albamina. SECCION 7 Atenci6n: El método del azulejo blanco no es apropiado porque no ‘siempre revela la incompatibilidad. Para realizar una prueba de compatibilidad es preciso: 1. Verificar si la muestra de sangre del paciente coincide con la solicitud correspondiente. Es esencial garantizar que la sangre del donante es ABO compatible con la del paciente. 2 Determinar el grupo ABO y Rh D en tubos o microplacas, con reactivos confiables (véase el apéndice 1). 3. Efectuar compatibilidad cruzada entre el suero del paciente y los globulos rojos de las unidades de sangre selecciona- das y una prueba de antiglobulina indirecta para detectar anticuerpos inmunes. Se usa solucién salina a temperatura ambiente por “centrifugacién inmediata” (véase la técnica 3), seguida de PAI o solucién salina en tubo. Si no puede realizarse PAI, se emplea soluci6n salina en tubo a tempera- tura ambiente y luego agregado de albamina a 37°C. 4 Si no se observa aglutinacién ni hemélisis, se considera que la sangre es compatible. Se completa y firma el registro pertinente y se rotulan las bolsas con los datos del destina- tario. Si se advierte aglutinacién o hemélisis, se considera que la sangre es incompatible y no puede ser transfundida a ese paciente. 5 En caso de incompatibilidad, controlar los resultados de la determinaci6n del grupo sanguineo. Repetir el estudio en la muestra del paciente y la unidad de sangre donada. Si no existen discrepancias, se reitera el estudio de compatibili- dad y se analizan otras unidades de sangre. Las compati- bles pueden entregarse, pero es aconsejable solicitar al mé- dico que preste atenci6n a la eventual aparicion de signos de incompatibilidad durante la transfusion. Si no se encuentra sangre compatible, es importante solicitar asesoramiento a un profesional de un servicio de medicina trans- fusional. El apéndice 1 describe cuatro técnicas de compatibilidad: 13.4: En tubo — centrifugacion inmediata y PAI 13.2: En tubo con agregado de LISS 13.3: Agregado de albGmina y solucién salina a temperatura ambiente 13.4: De emergencia. TECNICAS DE DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO EES Lea las técnicas 13.1, 13.2, 13.3 y 13.4 del apéndice 1. Utilizando uno de estos procedimientos, realice una prueba de com- patibilidad con suero del grupo 0 y una suspensién de giébulos rojos Ao B, Anote los resultados usando el sistema de puntaje sefialado en la seccién 7.8. Repita el estudio con una técnica de emergencia. Anote los resulta- dos usando el sistema de puntaje sefialado en la secci6n 7.8. Con el mismo método empleado en la primera parte de esta activi- dad, efectiie una prueba de compatibilidad con suero y giébulos rojos del grupo 0. Anote los resultados usando el sistema de puntaje sefia- lado en la secci6n 7.8. Repita el estudio con una técnica de emergencia. Anote los resulta- dos usando el sistema de puntaje sefialado en la secci6n 7.8. Compare los hallazgos y solicite al supervisor que los verifique. RESUMEN 1 Los errores en la determinacin del grupo sanguineo po- drian tener consecuencias graves para el paciente y aun causar la muerte. 2. Es esencial cumplir con las normas de higiene y seguridad en el laboratorio. 3. Para determinar el grupo sanguineo se dispone de tres mé- todos manuales que utilizan: I portaobjetos de vidrio o azulejos blancos tubos de ensayo 1 microcubetas 0 microplacas. La técnica del azulejo es poco sensible y solo se usa antes de la determinacién completa del grupo sanguineo en tubos © microplacas. 4 La potencia de la reacci6n se consigna en una escala de 1+ a 4+ y se emplean los términos Negativo para indicar au- sencia de aglutinaci6n y L para denotar lisis. 5. Es preciso seguir las instrucciones de almacenamiento y uso de los reactivos especificadas por el proveedor. 6 Las causas de resultados falsos positivos y falsos negati- vos incluyen: @ estandarizacion o almacenamiento incorrecto de los antisueros SECCION 7 formacion de pilas de monedas o Rouleaux muestras de sangre contaminadas gelatina de Wharton autoanticuerpos y anticuerpos de reacci6n en frio técnica inadecuada. 7 La prueba de antiglobulina indirecta (PAI) se desarrolla en tres pasos: sensibilizacion B® lavado M agregado de reactivo AHG. 8 La prueba de antiglobulina directa (PAD) detecta la sensibi- lizaci6n in vivo debida a anticuerpos eritrocitarios del pa- ciente. 9 La compatibilidad cruzada se lleva a cabo en tubos a tempe- ratura ambiente para identificar la incompatibilidad ABO y a 37°C para descrubrir los anticuerpos IgG, si es posible me- diante PAI. ST 19 Sefiale dos factores importantes a recordar cuando se usa una pipeta. 20 gPor qué no se aconseja emplear portaobjetos de vidrio 0 azulejos? 21 gPor qué se utiliza un sistema de puntaje para consignar los resultados? 22 gCudl es la causa de la mayorfa de los errores que se co- ‘meten en la determinaci6n del grupo sanguineo? 23 4A qué podria deberse una reacci6n falsa positiva en la prueba antiglobulina indirecta? 24

    También podría gustarte