Anlisis

de

Resultados.

El VIH para poder reproducirse

infecta a clulas especficas del
sistema inmunitario, los linfocitos
T CD4+, la funcin de estas
clulas es activar la respuesta de
los linfocitos B una vez detectado
el virus por su envoltura (cpside
vrica) para que stos linfocitos
produzcan los anticuerpos que
marcan al VIH y que sean
destruidos por otras clulas como
los macrfagos o NK. El VIH utiliza
los mecanismos bioqumicos de los
linfocitos
T
CD4+
para
reproducirse. Al transcribir su
material gentico a esta clula,
ocurren muchos errores al azar
que resultan en mutaciones de la
envoltura de los virus de la
siguiente
generacin.
Tantas
variaciones
impiden
que
el
sistema
inmunitario
responda
eficientemente. Estas mutaciones
son resultado del proceso normal
de reproduccin de los retrovirus
como el VIH. (Hernndez M. et al.
2002)
La prueba confirmatoria Western
Blot Accutrack HIV-1 se basa en los
procedimientos
clsicos
de
Western
Blot
que
estn
previamente realizados por el
fabricante
(traslado
de
los
antgenos
a
membranas
por
tcnicas
electroforticas,
conformando las tiras) para poder
realizar las determinaciones. El
fundamento de la prueba es una
reaccin Ag-Ab la cual se revela
con un Ab asociado a una enzima,
la cual al ser estimulada con su
sustrato,
genera
productos
coloridos.

En el caso de la reaccin Ag-Ab,

los Ab generados por los pacientes
infectados con el virus reaccionan
con ciertos Ag de las tiras. La
reaccin Ag-Ab permite que el Ab
exponga su Fc la cual es
reconocida por la IgG anti-Humano
que se agrega en la metodologa.
La
IgG
est
acoplada
a
una fosfatasa alcalina la cual al
entrar en contacto con su sustrato,
genera la coloracin en las
bandas.
Para el caso de los pacientes:
Toledo Ortiz Manuel y Hernndez
Hernndez Omar, se tiene que son
positivos para la prueba, al
presentar
anticuerpos
contra
algunas protenas vricas, las
cuales se especifican en la tabla 1.
Mientras que para la paciente Len
Ramrez Ericka, el resultado es
negativo, al no observar ninguna
banda
(imagen
1).
En cambio, el kit InmunoComb II
HIV 1 Y 2 Combfirm, es un ensayo
inmunoenzimtico indirecto de
fase slida (EIA). La fase solida es
un peine con 12 proyecciones
(dientes). Cada peine tiene 6 pares
de dientes, con seis puntos de
antgeno por par (3 puntos en
cada diente). El diente izquierdo
de cada par tiene un punto
superior
sensibilizado
con
inmunoglobulina humana (control
interno), y los Laboratorio de
Inmunologa
Aplicada
Prctica

07

dos marcadores p24 y p31. El

diente derecho tiene tres puntos

de protena derivadas
gp41,
gp120
y

de

env
gp36.

La bandeja de desarrollo tiene 6

filas (A-F), cada fila contiene una
solucin reactiva lista para su uso
en diferentes fases del anlisis. La
prueba se desarrolla por fase,
desplazando el peine de una fila a
otra, con incubacin en cada una
de
las
fases.
En esta prueba se ponen en
manifiesto los anticuerpos antiVIH, si estn presentes en las
muestras
se
enlazaran
especficamente a los antgenos
de VIH sobre los dientes del peine.
La
fosfatasa
alcalina
unida
reaccionar
con
componentes
cromognicos y los resultados se
visualizan como puntos grises en
la superficie de los dientes del
peine.
Al observar el peine, se tiene que
en
los
dientes
5
y
6
(correspondientes a la paciente
Len
Ramrez
Ericka), no se observan puntos,
por lo que la prueba es negativa.
Sin embargo para el siguiente par
de dientes (7 y 8) se observa en el
izquierdo, el 7, solo un punto,
correspondiente al control interno,
y en el derecho se observan dos
puntos: el del gp120 y gp41. Por lo
que se interpreta como positivo
para
HIV-1.
Siguiendo con el par 9 y 10, se
observa algo inusual, puesto que
en el 9 se observa el punto de
control y adems ligeramente el
correspondiente a p24, mientras
en el diente 10 se aprecian el

gp120 y gp41. Este resultado no

cuadra
con
la
tabla
de
interpretacin del inserto. Por lo
que este dato no es confiable y la
prueba
debe
repetirse.
Finalmente los puntos 11 y 12 se
observan muy similares a los pares
anteriores, solo que para este
caso, en el diente izquierdo (11) se
observa mejor el punto para p24
(imagen 3). De igual manera, este
resultado no es confiable y la
prueba debe repetirse, por lo que
no se puede dar un resultado
certero. El error presente en estos
ltimos dos resultados puede
deberse muy probablemente a que
el kit haba pasado su fecha de
caducidad
al
momento
de
emplearlo.
Conclusin.
Se lograron identificar mediante
dos kits distintos varios casos de
probable infeccin por VIH-1, con
la
tcnica
de
western
blot
asociando
la
agrupacin
de
bandas que indica la generacin
de anticuerpos por parte de los
pacientes infectados, contra los
antgenos encontrados en dichas
bandas. Y mediante un ensayo
inmunoenzimtico indirecto de
fase
slida,
respectivamente.
En el caso de los pacientes con
una interpretacin indeterminada,
es necesario repetir la prueba y
que
se
realicen
pruebas
confirmatorias para descartar que
sea un posible portador de VIH.
Encontrar una vacuna contra el
virus
de
Inmunodeficiencia
Humana (VIH) es uno de los

compromisos de los cientficos en

la actualidad, puesto que desde su
deteccin hasta ahora, ninguno de
los seropositivos de los ms de 60
millones de infectados se ha
curado de manera natural o con
medicamentos.
Bibliografa.
-Hernndez M., Dimas E. (2002)
La infeccin por el virus de
inmonodeficiencia humana (VIH):

estudio descriptovo y experimental

del compromiso de rganos y
sistemas, infecciones y Laboratorio
de
Inmunologa
Aplicada
Prctica

07

neoplasias Consejo de desarrollo

cientfico y humanstico de la
Universidad Central de Venezuela,
Caracas, Venezuela. pp: 63-66 y
139.