Los carbohidratos son derivados aldehidicos o cetnicos de alcoholes superiores polivalentes
( ms de un OH). se clasifican en base al nmero de molculas que los componen.
Monosacridos (azcares simples) no se pueden hidrolizar en molculas ms sencillas, pueden subdividirse en triosas, tetrosas, pentosas, hexosas etc. segn el nmero de tomos de carbono qu tengan. disacridos. Son compuestos que estn formados por dos molculas de monosacridos, Oligosacridos. Estn formados de 3 a 6 molculas de monosacridos. Polisacridos. Al ser hidrolizados dan ms de 6 molculas de monosacridos. La identificacin de los carbohidratos en base a sus propiedades, Las muestras a identificar son las siguentes: agua como testigo negativo, glucosa, fructosa, galactosa, sacarosa, almidn, amilosa, lactosa y arabinosa. Prueba de Molisch La prueba de Molisch es una prueba cualitativa para la presencia de carbohidratos en una muestra de composicin desconocida. Para determinar la cantidad y naturaleza especfica de los carbohidratos se requieren otras pruebas. Esta prueba sirve para detectar la presencia de grupos reductores presentes en la muestra. (Clark 1964) Todos los glcidos por accin del cido sulfrico concentrado se deshidratan formando compuestos furfricos (las pentosas dan furfural y las hexosas dan hidroximetilfurfural). Estos compuestos furfricos reaccionan positivamente con el reactivo de Molish (solucin alcohlica de alfanaftol). (Clark 1964) Prueba de Molish - Esta es una prueba general para todos los monosacridos que contienen 5 6 tomos de carbono-Es una reaccin general para los carbohidratos ya que se basa en la formacin furfural y sus derivados al combinarse con el reactivo de alfa-naftol para formar un complejo prpura, se utiliza el H2SO4 el cual hidroliza y deshidrata al carbohidrato para reaccionar posteriormente con el alfa-naftol. La prueba de Molish es positiva con aldehdos y algunos cidos como el frmico, oxlico, lctico, ctrico etc. y las cetonas. Esta reaccin es muy sensible, pues es positiva con soluciones de glucosa al 0.001 % y de sacarosa al 0.0001%. La Reaccin de Molisch es una reaccin que tie cualquier carbohidrato presente en una disolucin. Se utiliza -naftol al 5% en etanol de 96. En un tubo de ensayo, se deposita la solucin problema y un poco del reactivo de Molisch. A continuacin, se le aade cido sulfrico e inmediatamente aparece un anillo violeta que separa al cido sulfrico, debajo del anillo, de la solucin acuosa en caso positivo. 1. REACCION DE FEHLING. Esta reaccion nos identifica carbohidratos con capacidad reductora, se basa en que algunos azcares en un medio fuertemente alcalino y en presencia de oxgeno o de diversos agentes oxidantes ej. Cu, Ag dan las reacciones de reduccion que dependen de la existencia de un grupo carbonilo libre como glucosa, galactosa, fructosa, maltosa y lactosa. Fundamento. si calentamos una solucion de Cu(OH)2 en un medio alcalino formamos oxido cuprico (negro) CuO y en presencia de sustancias reductoras se precipita como oxido cuproso de color caf rojizo pardo Solucion A contiene sulfato de cobre Solucion B contiene tartrato de sodio y potasio e Hidroxido de potasio El reactivo de Fehling, tambin conocido como Licor de Fehling, es una disolucin descubierta por el qumico alemn Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinacin de azcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa en la orina. El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas: * Sulfato de cobre cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml. * Sal de Seignette(Tartrato mixto de Potasio y Sodio), 150 g; solucin de hidrxido de sodio al 40%, 3; agua, hasta 1.000 ml. Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitacin del hidrxido de cobre (II). El ensayo con el licor de Fehling se funda en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehdo. ste se oxida a cido y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a xido de cobre (I), que forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reaccin es que la forma aldehdo puede detectarse fcilmente aunque exista en muy pequea cantidad. Si un azcar reduce el licor de Fehling a xido de cobre (I) rojo, se dice que es un azcar reductor. Se utiliza como reactivo para la determinacin de azcares reductores, y es til para
demostrar la presencia de glucosa en la orina, y tambin para detectar derivados de la
glucosa como la sacarosa o la fructosa. Al reaccionar con monosacridos (glucosa), se torna verdoso; si lo hace con disacridos, toma el color del ladrillo.Prueba de Fehling. En esta prctica vamos a reconocer glcidos reductores mediante la prueba de Fehling. Los que vamos a analizar son: glucosa, lactosa, sacarosa y almidn. Despus de estudiar dichos glcidos, podemos dar unos resultados hipotticos: GLUCOSA: la prueba da positivo porque el OH del carbono carbonilo est libre, por lo que reacciona con el sulfato de cobre del Fehling (azul y soluble) reducindolo a xido de cobre (rojo anaranjado y menos soluble). LACTOSA: la prueba da positivo porque el OH del carbono carbonilo (que no participa en el enlace o-glucosdico) est libre, al igual que en ala glucosa. SACAROSA: la prueba da negativo porque, en este disacrido, ambos grupos OH de los carbonos carbonilos participan en el enlace o-glucosdico. ALMIDN: la prueba da negativo, porque, aunque el OH del ltimo carbono carbonilo de cada molcula de almidn est libre, este glcido es muy grande en comparacin con los anteriores, y la cantidad de OH libres no es suficiente para que la prueba d positivo. Experimentacin Tenemos 4 disoluciones de glcidos diferentes: Tubo G (disolucin de glucosa) Tubo L (disolucin de lactosa) Tubo S (disolucin de sacarosa) Tubo A (disolucin de almidn) Aadimos reactivo de Fehling y calentamos cada tubo hasta llevar la disolucin a ebullicin. Retiramos y observamos si su color ha cambiado: Resultados El color de la disolucin de glucosa ha cambiado de azul claro a rojo ladrillo, lo que significa que el CuSO4 ha reaccionado con los grupos OH libres de los carbonos carbonilos, reducindose a CuO. La disolucin de lactosa tambin cambia hasta alcanzar un color anaranjado intenso. Aunque es un disacrido, por cada molcula de lactosa aparece un OH libre con poder reductor. La sacarosa tambin es un disacrido, pero no tiene poder reductor ya que ambos OH de los carbonos carbonilos de la -glucosa y la -fructosa participan en el enlace, por tanto la prueba da negativo. El color verdoso de la disolucin despus de llevarla a ebullicin se debe a que se han roto algunos enlaces o-glucosdico. La disolucin de almidn no cambia de color, lo cual significa que no tiene poder reductor. Nuestras hiptesis han sido verificadas.