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superficie para remover los solutos de la fase mvil y adsorberlos de manera temporal por
medio de fuerzas electroestticas (Gennaro, A. R ,2003).
La adsorcin se define como la retencin de una especie qumica en los sitios
activos de la superficie de un slido (adsorbente) que constituye la fase estacionaria,
quedando delimitado el fenmeno a la superficie que separa las fases. Esta ocurre en la
superficie de la partcula de la fase estacionaria y es debida a la atraccin entre soluto y
adsorbente por fuerzas intermoleculares (Lamarque, A. ,2008).
Entre los tipos de cromatografa de adsorcin se pueden mencionar el de capa fina
y el de columna. En la cromatografa de capa fina, la fase mvil asciende por capilaridad
a travs de una capa delgada de adsorbente (gel de slice) adherida a un soporte (placa de
aluminio o vidrio). Esta tcnica permite separar componentes de una mezcla, determinar
el grado de pureza de un compuesto, comparar composiciones de diferentes muestras y
relizar el seguimiento de una reaccin (Lamarque, A. ,2008).
Para realizar una cromatografa de capa fina, se coloca la muestra en el
adsorbente, se puede colocar en una lnea o un punto, luego se ubica la placa en forma
vertical en el interior de una cmara que contiene disolvente (Lamarque, A. ,2008).
Cuando el disolvente asciende por la placa, los componentes de la muestra se
distribuyen a travs de la fase estacionaria y la mvil y se separan debido a la diferencia
de velocidades, estas se definen por la solubilidad en el disolvente y el grado de retencin
del adsorbente. La placa se debe retirar cuando el disolvente alcanza el frente.
(Lamarque, A. ,2008).
Si los componentes de la mezcla no son coloreados, estos no se pueden observar a
simple vista. Existen varios mtodos de revelado para que estos se coloreen y poder
apreciarlos. Uno de ellos es la cmara de yodo, los vapores de este al entrar en contacto
con la placa, tien los componentes separados de amarillo o marrn. Otro mtodo es la
lmpara UV, esta se puede utilizar para compuestos que fluorecen y permite visualizarlos
como manchas brillantes. (Lamarque, A. ,2008).
El Rf es el factor que caracteriza el comportamiento de un soluto en un sistema
cromatogrfico plano. Este factor se define como la relacin de la velocidad de
desplazamiento del soluto y la velocidad de desplazamiento de la fase mvil. A un tiempo
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dado, esta expresin se transforma en una relacin de espacios (Valcrcel .C & Gmez.
A, 1988).
Sus valores se encuentran entre 0 y 1. Cuando R f = 0 el soluto no migra (no es
soluble en la fase mvil), cuando es igual a 1 el soluto no es retenido por la fase
estacionaria y se mueve con el frente del disolvente (Garritz. A & Chamizo. A , 2001)
La cromatografa de columna fue descubierta por Tswett, un botnico ruso, que
coloc un extracto de pigmentos de vegetales en la parte superior de una columna de
vidrio rellena de yeso pulverizado y al agregar ter observ que de la mezcla original se
separaban, en el interior de la columna, diversas bandas de colores. En esta los
componentes de la mezcla interactan en diferente forma tanto con el disolvente que se
aade y recorre la columna, como con la sustancia empacada (gel de slice). El resultado
es que bajan ms rpidamente unos que otros y se pueden
Mtodo Experimental
A) Cromatografa de Capa Fina (TLC).
Se marc con un lpiz la lnea de aplicacin y los puntos de aplicacin en la placa
de cromatografa de capa fina de 6x6 (aluminio recubierto de gel de slice).
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se
agreg
una
capa
de
arena
fina
de
Resultados
Estructura
Distancia Recorrida
Rf
Incgnita 1
(cm)
1,75
0,38
Incgnita 2
0,65
Aspirina
2,9
0,63
Ibuprofeno
1,4
0,30
Acetaminofn
2,5
0,54
Cafena
1,7
0,38
Disolvente
4,6
(Acetato de etilo
95% - cido actico
5%)
Figura 3. Cromatografa de capa delgada de espinaca con distintos eluentes (de izquierda
a derecha: B: ter de petrleo-acetato de etilo 50:50, A: ter de petrleo-tolueno-acetato
de etilo 45:1:5)
[1]
Discusin
Se realizaron las cromatografas de capa fina y la de columna. Estas tcnicas
difieren en la forma en la que se soporta el adsorbente. En ambas es comn utilizar gel de
slice o almina como fase estacionaria y un disolvente orgnico como fase mvil o
eluente. Sin embargo, en la cromatografa en columna el adsorbente se introduce en un
tubo de vidrio, en cambio, en la cromatografa de capa delgada esta se coloca en una
placa de vidrio, aluminio o plstico.
Esta cromatografa se realiz con 30g de espinaca. Para empezar, se hizo una mezcla de
esta con etanol y luego se filtr la disolucin, esto con el fin de quitarle el agua (Corts.
D, 2004), deshidratar la espinaca, ya que el etanol utilizado era de 95%, sustancia muy
fuerte que sec la espinaca. Posteriormente, se coloca lo obtenido en un bao de agua
caliente y se evapora la mezcla que contiene la filtracin, seguido se procedi a la
separacin de los pigmentos por cromatografa de columna.
Anteriormente se mencion que una de las utilidades de la cromatografa de capa delgada
es monitorear las condiciones de , una cromatografa de columna. En efecto, esta tcnica
se utiliz para determinar cual sistema de disolventes era mejor para la separacin de los
pigmentos de espinaca por medio de cromatografa de columna.
Para la extraccin de espinaca se realizaron las pruebas con ter de
petrleo:tolueno:acetato de etilo 45:1:51 y ter de petrleo: acetato de etilo 50:50 para
determinar cual era el mejor sistema de disolvente para colocar en la columna. En la
figura 3 se muestran los resultados de la cromatografa de capa delgada con cada eluente,
result mejor la elucin con ter de petrleo: acetato de etilo 50:50, se dio una mejor
separacin de los compuestos debido a que el ter de petrleo: acetato de etilo son menos
polares que la fase estacionaria que es un adsorbente polar( slice) por lo que los
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Esto sucede porque al colocar el papel filtro con los colorantes aplicados el disolvente
(95% acetato de etilo-5% cido actico ) sube por el papel por capilaridad, a su paso va
arrastrando las molculas de los pigmentos que tena el colorante, como las molculas no
son iguales en tamao ni en composicin, no viajarn a la misma velocidad y de ah que
se separen.
Conclusiones
1. La cromatografa de capa delgada permite obtener una separacin cualitativa
con el fin de identificar los pigmentos o ingredientes activos de sustancias.
2. Los disolventes que se utilicen deben ser de naturaleza polar distinta a la del
compuesto adsorbente para evitar que se forme una disolucin entre stos.
3. El Rf es una relacin de la distancia de desplazamiento de la fase mvil sobre
la estacionaria y cunto avanza la sustancia de inters.
4. La cromatografa de columna permite separar e identificar los pigmentos
presentes en sustancias de origen vegetal.
5. La TLC sirve para identificar la mejor mezcla de disolventes que pueden ser
empleados en la columna, es decir monitorear las condiciones de este tipo de
cromatografa.
Bibliografa
1. Durst, D., Gokel, G. (2007). Experimental Organic Chemistry. 2 edicin. McGrawHill: New York
2. Gennaro, A. R. (2003). Remington Farmacia. Editorial Mdica Panamericana: Buenos
Aires
3. Lamarque, A. (2008). Fundamentos Terico-Prcticos de Qumica Orgnica. Editorial
Brujas: Crdoba
4. Garritz, A.; Chamizo, J. A. (2001). T y la Qumica. Pearson Educacin: Naucalpan de
Juarez
5. Valcrcel Cases, M., Gmez Hens, A. (1988). Tcnicas Analticas de Separacin.
Revert: Barcelona.
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