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Universidad Agraria del Ecuador

Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia

Trabajo de Bioqumica
Temas:
Identificacin de presencia de Carbohidratos en muestras por medio de
Reacciones Qumicas.

Reaccin de Lugol
Reaccin de Benedict
Reaccin de Molish
Reaccin de Selivanoff
Reaccin de Fehilng
Reaccin de Barfoed
Autora: Mara Fernanda Mora Navarrete
Curso: 2do Semestre B
Profesor: Dr. Alfredo Bruno
Guayaquil Ecuador
2014- 2015

ndice
1

Universidad Agraria del Ecuador


Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
Nombre: Mara Fernanda Mora Navarrete
Curso: 2do Semestre
Fecha: 30/10/2014
Paralelo: B

Identificacion de carbohidratos por reacciones fisicas y quimicas.................2


2. Tipos de reacciones para identificar carbohidratos ms usadas................3
2.1 Reaccin de Lugol.............................................................................. 3
2.2 Reaccin de Benedict.........................................................................3
2.3 Reaccin de Molish............................................................................ 3
2.4 Reaccin de Selivanof.......................................................................3
2.5 Reaccin de Fehilng...........................................................................3
2.6 Reaccin de Barfoed..........................................................................3
2.7 Procedimientos y Fundamentos........................................................3
3. Notas.......................................................................................................... 6
4. Bibliografa................................................................................................. 7

Informe 1
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Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
Nombre: Mara Fernanda Mora Navarrete
Curso: 2do Semestre
Fecha: 30/10/2014
Paralelo: B

Identificacin de carbohidratos por reacciones fsicas y


qumicas.
Objetivos

Diferenciar mediante reacciones cualitativas los monosacridos,


disacridos y polisacridos.
Reconocer y analizar las reacciones que se llevan en cada una de las
pruebas de Molish, Fehling, Lugol, Benedict, Barfoed, Seliwanof e
hidrlisis de sacarosa en los carbohidratos.
Reconocer la capacidad oxido-reductora de los monosacridos.
Identificar los carbohidratos en una muestra problema.

Planteamiento del problema


Qu diferencia existe entre azcares reductores y no reductores?
Cmo se diferencian en su composicin los monosacridos,
disacridos y polisacridos?
Cmo se puede justificar el hecho de que la glucosa, al igual que la
fructosa, sean azcares reductores?
Podemos realizar este experimento en casa?

Materiales
Reactivos
Reactivo de Lugol
Reactivo de Benedict
Reactivo de Molish
Reactivo de Selivanof
Reactivo de Fehilng
Reactivo de Barfoed
Muestras de 5ml de Fructosa, Glucosa, Maltosa, Lactosa, Sacarosa y
Almidn.
Insumos
Tubos de Ensayo.
Gradilla.
Guantes.
Cronmetro o reloj.
Bao mara o recipientes para Bao Mara.
Mechero.

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Procedimiento
Reaccin de Molish.
Colocar 2 ml. de muestra problema. Luego adicionar II gotas de reactivo
de Molish, mezclar. Lentamente deslizar por las paredes del tubo, 1 ml.
de cido sulfrico concentrado, (reaccin exotrmica). La formacin de
un anillo de color violeta o prpura indica presencia de glcidos.
Fundamento de la prueba de Molish.
Es una reaccin general para carbohidratos que contienen ms de 5
tomos de carbono.
La aparicin de un anillo violeta-rojizo en el sitio de contacto de los dos
lquidos, indica que la muestra contiene carbohidratos.

Reaccin de Benedict.
Depositar 2.5 ml de Reactivo de Benedict, calentar hasta ebullicin por 2
minutos. Si no hay cambio de color se adicionan 5 gotas de muestra
problema, luego se coloca en bao mara hirviendo durante 3 minutos,
luego se deja enfriar.
La aparicin de una coloracin o, precipitado amarillo anaranjado o rojo
indica presencia de glcidos reductores
Fundamento de la prueba de Benedict
Es una prueba especfica para las sustancias reductoras con grupos
carboxilos libres.
La aparicin de un precipitado verde, amarillo o rojo indica la presencia
de un azcar reductor. La reaccin o prueba de Benedict identifica
azcares reductores (aquellos que tienen su OH anumrico libre), como
la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas,
pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la
solucin alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.
El reactivo de Benedict consta de:
* Sulfato cprico;
* Citrato de sodio;
* Carbonato anhidro de sodio.
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* Adems se emplea NaOH para alcalinizar el medio.


El fundamento de esta reaccin radica en que en un medio alcalino, el
ion cprico (otorgado por el sulfato cprico) es capaz de reducirse por
efecto del grupo Aldehdo del azcar (CHO) a su forma de Cu+. Este
nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al
xido cuproso (Cu2O).
El medio alcalino facilita que el azcar est de forma lineal, puesto que
el azcar en solucin forma un anillo de piransico o furansico. Una vez
que el azcar est lineal, su grupo aldehdo puede reaccionar con el ion
cprico en solucin.
En resumen, se habla de azcares reductores cuando tienen su OH
anumrico libre, y stos son los que dan positivo en la prueba de
Benedict

Reaccin de Selivanoff.
En un tubo de prueba se coloca 3 ml de solucin clorhdrica de resorcinol
y 6 ml de Muestra problema. Luego se coloca en Bao de Mara hirviente
por unos minutos. El desarrollo inmediato de una coloracin anaranjado
rojizo indica presencia de pentosas.
Fundamento de la prueba de Selivanoff.
Es especfica para cetosas que contengan 5 o ms tomos de carbono,
pero se usa casi exclusivamente para identificar fructosa.

Reaccin de Lugol
Depositar 5ml de la muestra problema.
Adicionar III gotas de lugol.
Fundamento de la prueba de Lugol
Es una prueba que se usa para identificar almidn. El color azul, se debe,
posiblemente a la formacin de un complejo: Ioduro de almidn.
Reaccin de Fehling.

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El
el
la
El

reactivo de Fehling, es una solucin descubierta por


qumico alemn Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para
determinacin de azcares reductores.
licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas:

Sulfato cprico cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml.

Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 173 g; solucin


de hidrxido de sodio al 40%, 3 g; agua, hasta 500 ml.

Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar


la precipitacin del hidrxido de cobre (II).
Fundamento de la prueba de Fehling.
El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del
grupo carbonilo de un aldehdo. ste se oxida a un cido carboxlico y
reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a xido de cobre (I), que forma
un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reaccin es que
la forma aldehdo puede detectarse fcilmente aunque exista en muy
pequea cantidad. Si un azcar reduce el licor de Fehling a xido de cobre
(I) rojo, se dice que es un azcar reductor.
Esta reaccin se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunos
compuestos no reductores como la fructosa (que contiene un grupo cetona)
puede enolizarse a la forma aldehdo dando lugar a un falso positivo.

Reaccin de Barfoed.
Es un ensayo qumico utilizado para detectar monosacridos. Esta prueba
fue descrita por primera vez por el qumico dans Christen Thomsen
Barfoed1 y se utiliza principalmente en botnica.4 La prueba es similar a
la prueba de Fehling. El reactivo de Barfoed se compone de una solucin de
0.33 molar de acetato de cobre neutro en una solucin de 1% de cido
actico. No es recomendable guardar el reactivo, sino prepararlo
previamente a su uso.

Fundamentos Reaccin Barfoed.


Se basa en la reduccin de cobre (II) (En forma de acetato) a cobre (I) (En
forma de xido), el cual forma un precipitado color rojo ladrillo.1 2
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RCOH + 2Cu+2 + 2H2O RCOOH + Cu2O + 4H+


Los disacridos tambin pueden reaccionar, pero en forma ms lenta. El
grupo aldehdo del monosacrido que se encuentra en forma de hemiacetal
se oxida a su cido carboxlico correspondiente. Muchas sustancias, entre
ellas el cloruro de sodio,3 pueden interferir en la prueba.

Grficos
Reaccin de Molish

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Reaccin de Fehling

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Reaccin de Lugol

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Reaccin de Benedict

Reaccin de Barfoed

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Reaccin de Seliwanoff

Observaciones
Al realizar la prueba con el reactivo de Molish, todas las muestras de
carbohidratos reaccionan. Por lo tanto, podemos concluir que el reactivo de
Molish sirve para identificar cualquier carbohidrato.

Al mezclar el reactivo de Seliwanoff con la fructosa, observamos que


reacciona, cambiando el color a uno rojo. Mientras que con otros
carbohidratos no ocurre nada mientras stos no sean cetosas.
Cuando mezclamos cualquier carbohidrato con el reactivo de Lugol, ste
no reaccionar mientras el reactivo no sea un polisacrido complejo, como
lo es el almidn.

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Comparacin con informacin previa (Explicacin


cientfica)
Los carbohidratos son biomolculas que presenta grupo funcional carbonilo
(aldehdo y cetona) y varios grupos hidroxilos en cada carbono. Los
carbohidratos tambin llamados azcares, osas o sacridos, son
polihidrxialdehidos o polihidroxicetonas o compuestos polimricos que por
hidrlisis producen polihidrxialdehidos y polihidroxicetonas.
Segn el nmero de unidades de azcares sencillos que posean se clasifican
en:
MONOSACRIDOS o azcares sencillos, que a su vez pueden ser ALDOSAS
cuando contienen el grupo aldehdo o CETOSAS cuando contienen el grupo
cetona. Los monosacridos naturales pertenecen a la serie D de los
azcares y pueden tener entre tres y hasta siete tomos de carbono.
DISACRIDOS que estn formados por dos monosacridos unidos entre s
por enlaces
glucosdicos.
OLIGOSACRIDOS que tienen entre tres y diez monosacridos unidos
tambin por enlaces glucosdicos.
POLISACRIDOS que son polmeros naturales con varios miles de unidades
de azcar sencillo ligadas entre s.
De acuerdo con lo anterior, adems de reconocer si un compuesto
pertenece a la familia de los carbohidratos, diferenciaramos si se trata de
un monosacrido tipo aldosa o cetosa, si es fcilmente oxidable o no, es
decir si es un AZCAR REDUCTOR o no lo es, si es de cinco tomos de
carbono (pentosa) o de seis tomos de carbono (hexosa), si es disacrido o
polisacrido.

Conclusiones (Explicacin Lgica)


En este experimento pudimos observar diferentes formas para identificar la
presencia de carbohidratos en una muestra mediante reacciones qumicas
con diferentes reactivos, y evaluando los resultados positivos o negativos
identificamos los diferentes tipos de sacridos de acuerdo a la reaccin a la
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que se refera, y diferenciamos las distintas reacciones en base al


fundamento en que se basan las mismas.

Publicacin
Este trabajo ser entregado el sbado 25 de octubre del 2014 al Dr. Alfredo
Bruno para su respectiva revisin y comprobacin y fue realizado por mi
persona, Srta. Mara Fernanda Mora Navarrete.

Bibliografa
1) Lozano - Galindo. Bioqumica para Ciencias de la Salud. Espaa. Edit.
Mc Graw- Hill- Interamericana de. 2001.
2) Luque L y Hermoza A. Biologa Molecular e Ingeniera Gentica.
Barcelona. Edit. Hartcourt. 2001.
3) Matheus Van Holde. Bioqumica. Mxico. Edit. Mc Graw Hill.2000.
4) Martin, D.W. Bioqumica de Harper. Mxico. Edit. Manual Moderno.
2000.
5) Lehninger, A. Bioqumica. Barcelona .Edit. Omega. 2001.
6) Claros MG, vila C. Gallardo F. Bioqumica de los carbohidratos.
Madrid .Edit. ISBN. 2001
7) http://es.scribd.com/doc/7244232/CARBOHIDRATOS.
8) http://es.scribd.com/doc/52454046/Identificacion-para-carbohidratos.

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