TALLER REGIONAL

TRANSFERENCIA TECNOLGICA Y
ESCALAMIENTO PRODUCTIVO DEL CULTIVO
DE PECES PLANOS EN AMRICA LATINA
PROYECTO: PRODUCCIN DE SEMILLA DEL LENGUADO
Paralichthys adspersus EN CAUTIVERIO:

I MEJORAMIENTO DE LA CALIDAD Y CANTIDAD DE DESOVES

Contrato N 051-FINCyT-PIBAP-2009

Ing. Lili Carrera Santos

Lima, 26 al 28 de setiembre del 2012

OBJETIVO
Mejorar la cantidad y calidad de los desoves del
lenguado en cautiverio.

OBJETIVOS ESPECFICOS
Formacin de un stock de reproductores de lenguado.
Evaluacin de tcnicas de criopreservacin de
espermatozoides
Estandarizacin de tcnicas induccin hormonal.
Estandarizacin de tcnicas de evaluacin de calidad de
huevos y larvas.

COMPONENTES
I. Formacin del stock de reproductores.
II. Acondicionamiento de reproductores
al cautiverio.
III. Criopreservacin de espermatozoides.
IV. Induccin del desove y perfil
bioqumico de huevos y larvas.
V. Divulgacin de resultados.

I. Formacin del stock de

reproductores

Biofiltro
Lmpara UV
Sensor TC
(bomba calor)

SRA

Sistema
Iluminacin

II. Acondicionamiento de
reproductores al cautiverio
Alimentacin

Control de calidad de agua

Seguimiento de la madurez gonadal

Alimentacin
Alimento
semi-hmedo

100%

Alimento Administrado (%)

Preparacin de
racin de
anchoveta

Administracin

90%
80%
70%
60%
50%
40%
30%

Formulado

20%

Fresco

10%
0%

Tiempo (meses)

Alimento consumido promedio ((% PT)

S1
S2
S3

S4

Tiempo (meses)

Calidad de agua Sistema 3

2,5

12
NAT

2,25

NO2-

NO310

1,5
1,25

NO3 (ppm)

NAT y NO2 (ppm)

1,75

0,75
0,5

0,25
0

1
9
17
25
37
45
54
65
73
81
92
114
122
130
138
149
157
166
179
192
206
214
235
243
253
268
276
284
298
306
318
330
339
347
360
369

CO2

12

O2

10

20

15

10

1
9
17
25
37
45
54
65
73
81
92
114
122
130
138
149
157
166
179
192
206
214
235
243
253
268
276
284
298
306
318
330
339
347
360
369

25

24

O2 (mg/L)

30

CO2 (mg/L)

Control de calidad
de agua
Nitrgeno amoniacal total (NAT)
Nitrito (-NO2)
Nitrato (-NO3)
Dixido de carbono (CO2)
Oxgeno disuelto (O2)
Temperatura (T)
pH
Intensidad luminosa (Lux)

Sistema 3
21
20

22

19

20

18

18

17

16

16

15
14

12

1
9
17
25
37
45
54
65
73
81
92
114
122
130
138
149
157
166
179
192
206
214
235
243
253
268
276
284
298
306
318
330
339
347
360
369

Temperatura (C)

T agua

Tiempo en cautiverio (das)

0,60

Tasa
de
crecimiento
especfico Hembras: min.
0,007%/da y mx.. de
0,086%/da.
Machos: min. -0,147%/da
y mx. 0,196%/da.

SGR (% PTi da-1)

0,50
0,40
0,30
H

0,20

0,10
0,00
-0,10
260

321

371

412

455

489

516

544

582

610

Tasa de crecimiento relativo (%PTi)

Tiempo (das)
30

20

H
M

10

0
200

300

400

500

Tiempo (das)

600

700

Tasa de crecimiento relativo:

Hembras: min. 1,68%/da y mx.. de
26,83%.
Machos: min. 2,98%/da y mx. de
26,99%.

Seguimiento de la madurez gonadal

Estadio 0

Estadio II

Estadio III

Estadio IV

Nmero de peces

S4
15
10
5

III

0
I

II

III

NM

Muestreo

Escala de madurez gonadal

lenguado Paralichthys adspersus

del

Volumen

Concentracin
Motilidad

Criopreservacin

Evaluacin de la Calidad
Espermtica

III. Criopreservacin de
espermatozoides
Toxicidad
Crioprotectores
Congelamiento
Descongelamiento

Evaluacin de la calidad espermtica

Evaluacin de la concentracin y
motilidad espermtica

Extraccin de muestra de semen y

determinacin
del
volumen
espermticos

100

Motilidad

80
60
40
0

20

Motilidad Espermtica (%)

Concentracin

y = -14.74x + 69.219
R = 0.9718
r= -0.989
p < 0.05

Tiempo post-activacin en AMFE (min)

Clase de Motilidad

4
3
2
1
0
1

6
Individuo

10

11

Criopreservacin de espermatozoides
Toxicidad de
Crioprotectores

Clase de Motilidad Espermtica

5
4
a

ab

DMSO

ab
b

EG

abc

GLY

PG

1
0
0

Tiempo Post-activacin en AMFE (min)

Motilidad espermtica post-incubacin en crioprotectores a concentracin 1.5 M.

Congelamiento y Descongelamiento

Semen: Solucin Crioprotectora (1 : 3)

Tasa de congelamiento a -10 C/min
Tasa de descongelamiento a 50 C.

100%
Motilidad Espermtica (%)

90%
80%
70%

60%
50%

Pre-congelamiento

40%

Post-congelamiento

30%
20%

10%
0%
1

Individuo

Pruebas de fecundacin
Fecundacin artificial : 0.1 mL de ovocitos
con 50 L de semen criopreservado.

ndice se Supervivencia
Larval (ISL)

100
90

% Fecundacin

80
70
50

40
30

Larvas
iniciales

20
10
0
920736

923083

930226

Control

Cdigo de machos

100
90
80
70
% Eclosin

Nmero
larvas
muertas

Da

60

%
Mortalida
Mortalida
% Larvas
d
d
muertas acumulad
acumulad
a
a

60
50

40
30
20

30
0

0.00

0.00

0.00

0.00

0.00

0.00

0.00

0.00

0.00

3
4

0
0

0.00
0.00

0.00
0.00

0.00
0.00

5
6

0
0

0.00
0.00

0.00
0.00

0.00
0.00

16.67

5.00

16.67

25

83.33

30.00
26.83
25.17

100.00

ISL
ISL promedio

10
0
920736

923083

930226

Cdigo de machos

Control

IV. Induccin del desove y pruebas de

fecundacin

Induccin del desove

19

Implantes
hormonales
Ovaplant (75 g/Kg)

Temperatura (C)

18
17
16
15

T Patrn

14

T trat
13
E F M A M J

J A S O N D E F M A M J
Tiempo (mes)

J A S O N D

Termoperiodo
16

Horas Luz (h)

14

12

10
HL Patrn
HL trat
8
E F M A M J

J A S O N D E F M A M J
Tiempo (mes)

Fotoperiodo

J A S O N D

Hormona
LH-RH
(Acetato
de
Buserelina con una
concentracin
de
0,0042 mg/mL)

Fecundacin

115,153 huevos viables/Kg

901.28 74.72 m
% Fecundacin: 85.40 9.86
138,831 ovocitos ovulados/Kg

Desoves

Determinacin de huevos viables y

porcentajes de eclosin

La eclosin se produjo a las 48 horas a una

temperatura de 17.56 0.48 C con un
porcentaje del 89,10 %.

Determinacin de perfiles bioqumicos

de huevos y larvas

Cromatograma de huevos
46,000

44,000

10A_1.DATA
C16:0

42,000
40,000
38,000
36,000
34,000
32,000

C22:6n-3 (DHA)

30,000
28,000
26,000

22,000

C22:5n-3
C21:5n-3

22

C20:4n-3

20

C20:4n-6

C18:4n-3

C18:2n-6

C16:4n-1

C16:3n-4

C20:1n-9

0
0

C15:0

2,000

TI ON

4,000

SPW 0.10

6,000

C18:3n-6

8,000

C18:0

10,000

C16:1n-7

12,000

C14:0

14,000

STH 0.02 TI OFF

16,000

C18:3n-3

18,000

C18:1n-7

C18:1n-9

20,000

C23:0 (IS)

C20:5n-3 (EPA)

24,000

RT [min]
10

12

14

16

18

24

26

28

30

32

34

Perfil bioqumico de huevos

Otros
(minerales,
EPA (% cidos DHA (% cidos
fibra, vitaminas,
Grasos)
Grasos)
etc.)

Cdigo de
hembra

Humedad

Lpidos

Carbohidratos

Protenas

896298

91,64%

14,55%

2,08%

80,69%

2,68%

13,38%

14,65%

900395

92,22%

14,28%

2,15%

77,41%

6,15%

13,35%

17,97%

896298

92,16%

16,86%

1,22%

35,59%

46,34%

10,16%

22,04%

1091083

94,78%

22,02%

10,10%

22,51%

Perfil bioqumico de larvas

Otros
(minerales,
EPA (% cidos DHA (% cidos
fibra, vitaminas,
Grasos)
Grasos)
etc.)

Cdigo de
hembra

Humedad

Lpidos

Carbohidratos

Protenas

1091083

91,54%

19,53%

6,55%

49,48%

24,44%

10,50%

16,16%

1095766

90,76%

17,92%

6,19%

57,79%

18,10%

11,51%

19,11%

896298

90,51%

16,81%

1,28%

49,98%

31,93%

10,26%

24,03%

1091083

89,54%

18,48%

10,00%

22,45%

V. Divulgacin de resultados
PRODUCCION DE SEMILLA DE LENGUADO Paralichthys adspersus EN
CAUTIVERIO: I MEJORAMIENTO DE LA CALIDAD Y CANTIDAD DE DESOVES.

LNEA DE
SALIDA

PROYECTO

Produccin de semilla del lenguado

Paralichthys adspersus en cautiverio:
I Mejoramiento de la calidad y
cantidad de desoves.
Contrato N 051- PIBAP FINCyT - 2009

INFORME FINAL

2011

Contrato N 051- PIBAP FINCyT 2009

CAPACITACIONES
Tcnicas de criopreservacin
de espermatozoides de peces
marinos

Dra. Carmen Paniagua

CICESE - Mxico

Tcnicas de determinacin
de calidad y composicin
bioqumica de puestas.

Dra. Alicia Estvez

IRTA - Espaa

CONCLUSIONES
Formacin de stock de reproductores, 92 ejemplares
acondicionados al SRA, con una mortalidad
acumulada del 17.85% de los reproductores.
El esperma criopreservado es una alternativa a la poca
produccin de semen.
Se logro obtener ejemplares maduros con el
acondicionamiento de foto y termo periodo.
Se produjo los desoves inducidos con el uso de
hormonas, permitiendo el manejo de los mismos.
Los anlisis bioquimicos permiti conocer la calidad
de huevos y larvas obtenidas sobre el nivel de DHA y
EPA.

Gracias !!!