BURROWS

1.- Medidas de bioseguridad. Tenemos las 3 muestras con deposiciones. Mezclarlas

suavemente.
2.- Las muestras previamente mezcladas se deben tamizar (colar) a travs de una malla
metlica (colador) a un vaso de vidrio (NO es un vaso precipitado) para obtener un tamizado.
En este tamizado pesquisamos gusanos visibles. Lo ideal es que el tamizado sea homogneo
(ni muy diluido ni muy duro). Debemos revisar el tamizado ya que es la nica forma de
pesquisar gusanos visibles, si encontramos alguno, lo dejamos en un vaso con agua para
lavarlo y le haremos un corte histolgico (corte horizontal), lo pondremos en un portaobjetos, le
haremos tincin y encima le pondremos el cubreobjetos para posteriormente analizarlo al
microscopio.
3.- Colocar 10 ml aproximado del tamizado en un tubo cnico (este tipo de tubo permite un
mejor sedimento) o tubo de centrfuga, centrifugar a 1500 rpm durante 4 minutos. Vamos a
obtener un sedimento y un lquido sobrenadante.
4.- Eliminar el lquido sobrenadante (en el desage y dejando correr el agua) y resuspender con
una piseta el sedimento en NaCl 0,9% (suero fisiolgico), hasta completar 10 ml (llenar con
suero el tubo con el sedimento). Podramos utilizar agua corriente PERO sta tiene una
densidad diferente, lo que daara al sedimento. Repetir la centrifugacin (1500 rpm durante 4
minutos) las veces que sea necesario (3 veces), hasta obtener un lquido sobrenadante
relativamente limpio. Entre ms claro sea el lquido sobrenadante, mejor ser el sedimento.
Cada vez que se vuelve a centrifugar, se debe eliminar el lquido sobrenadante y volverle a
agregar suero fisiolgico.
5.- Eliminamos el lquido sobrenadante limpio (en el desage y dejando correr el agua) y
colocar una gota del sedimento sobre un portaobjetos marcado o enumerado (con el nombre
del paciente) y una gota de colorante MIF (constituido por 0,1 ml de Lugol, 0,15 ml de
formaldehdo y 0,75 ml de tintura de merthiolate al 1:1000, que debe prepararse a diario) o
Lugol (se divide el portaobjetos en cuatro: en un cuarto se coloca la gota de sedimento y en
otro, la gota de colorante), mezclar con la punta del cubreobjetos y luego colocar sobre el
portaobjetos con la mezcla lista. Llevar a cmara hmeda, bandejas con humedad en las que
colocamos papel absorbente, le aplicamos agua y lo dejamos en una rejilla sobre la muestra de
modo que el agua caiga (fase trofozoica: vamos a ver trofozoitos), esta cmara permite que la
muestra no se seque o deshidrate. Lo importante de esta preparacin es que no debe quedar
con burbujas, no debe salirse del cubreobjetos ya que se puede contaminar.
6.- Resuspender el sedimento con suero fisiolgico 0,9% y agregar 1 ml de ter Etlico con
pipeta de vidrio (este lquido se trabaja en la campana de bioseguridad y se utiliza para limpiar
el sedimento ya que elimina grasas o cidos grasos), tapar la boca del tubo con parafilm y
agitar enrgicamente hacia arriba. Sacar el parafilm y centrifugar a 1500 rpm durante 4
minutos.

7.- Eliminar el lquido sobrenadante y colocar una gota del sedimento en el portaobjetos debajo
de la fase trofozoica y agregar una gota de tincin MIF o Lugol (esto se hace en el mismo
portaobjetos utilizado para la mezcla de la fase trofozoica, en el espacio restante), mezclar y
llevar a cmara hmeda (fase qustica). Estas preparaciones pueden mantenerse hasta 24
horas en cmara hmeda a 4C.
8.- Observamos la muestra al microscopio para el diagnstico.
TELLEMAN MODIFICADO
1.- Tamizar la emulsin fecal a travs de una malla metlica a un vaso de vidrio y
posteriormente tomar una gota de este tamizado para hacer la preparacin directa en el
portaobjetos, sin tincin. (Fase Trofozoitica).
2.- Colocar aproximadamente 10 ml de emulsin fecal tamizada en un tubo cnico o tubo de
centrfuga, agregar 1 ml de ter etlico y agitar enrgicamente bajo campana de bioseguridad
tapando la boca del tubo con parafilm y centrifugar por 4 minutos a 1500 rpm.
3.- Eliminar el sobrenadante y colocar una gota del sedimento en el portaobjeto debajo de la
fase trofozoitica y agregar una gota de tincin MIF o Lugol, mezclar y llevar a cmara hmeda
(Fase Qustica).
4.- Estas preparaciones pueden mantenerse hasta 24 horas en cmara hmeda a 4C.