Enzimas

FAC. DE C.
QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV
Universidad Autnoma de Chiapas

Facultad de Ciencias Qumicas
Campus IV
BIOQUIMICA CLINICA II
TEMA 2. ENZIMAS
SERICAS DEL PLASMA
TITULAR DEL CURSO :
M.C. CONSUELO CHANG RUEDA
CICLO ENERO - DICIEMBRE - 2015

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV
UNIDAD II.- ENZIMAS CELULARES DEL SUERO
Objetivos Especficos:
Reconocer las principales enzimas sricas del plasma
Identificar
las
principales
aplicaciones
clnicas
de
las
enzimas
organoespecficas y no organoespecficas.
Conocer los mtodos de diagnostico enzimtico para l diagnostico de

enfermedades cardiacas, pancreticas, hepticas, etc.
2.1 Origen y significado.
2.2 Caractersticas.
2.3 Unidades de actividad enzimtica
2.4 Clasificacin y distribucin.
2.4.1
Principales enzimas celulares de diagnstico.
2.4.2
Destino de las enzimas celulares.
2.4.3
Enzimas sricas ms importantes y su significado.
2.5 Metodologa enzimtica.

2.5.1
Tcnicas calorimtricas.
2.5.2
Tcnicas cinticas.
Tiempo Estimado:
6 hrs.
DEFINICION Y CARACTERISTICA DE LAS ENZIMAS.

Las enzimas son protenas, o sea substancias orgnicas producidas por la
clula viva, con funciones catalticas especificas. Como catalizadores tienen las
siguientes propiedades:
1.- Producen efectos en cantidades mnimas.
2.- Resultan inalterables de la reaccin .
3.- En cantidades pequeas respecto al substrato, las enzimas no afectan el
equilibrio de la reaccin reversible, sino aumentan la velocidad con la cual se
alcanza el equilibrio.
Las enzimas poseen todas las propiedades caractersticas de las protenas.
Se conocen hasta unas 2000 enzimas, de las que mas de 100 se han
podido cristalizar. Los pesos moleculares oscilan entre 12,700 (ribonucleasa) y
1,000,000 (glutamato-deshidrogenasa).
ESTRUCTURA Y CLASIFICACION.
En los ltimos aos ha sido posible aclarar en muchos casos la
composicin y la estereoestructura de la enzimas. Muchas de estas contienen un
grupo prosttico (por ejemplo una vitamina o un metal) que no es de naturaleza
proteica. La parte proteica de las enzimas constituye como otras protenas, un
componente polmero con estructura polipeptdica. La cadena polipeptidica, a su
vez se compone de aminocidos unidos entre si a travs de enlaces peptdicos
(enlaces amidicos) en los que los restos aminocido estn alineados a los lados.
REPRESENTACION ESQUEMATICA DEL ENLACE POLIPEPTIDICO
H
I
N
C
II
O
O
II
C
C
I
R1
O
II
C
N
I
H
H
I
N
C
I
R2
R4
I
C
C
II
O
N
I
H
Se distinguen:
ESTRUCTURA PRIMARIA : Correspondiente a la secuencia de aminocidos en

la cadena proteica, la cual esta acondicionada por enlaces covalentes que pueden
ser no solo peptdicos sino tambin pueden haber enlaces bisulfuro. La estructura
primaria la determinan los enlaces covalentes amidicos y carboxlicos. Ejemplo:
Papana, la Quimiotripsina.
ESTRUCTURA SECUNDARIA: Correspondiente a la reticulacin transversal por
puentes de hidrogeno entre grupos CO y NH. En la naturaleza la estructura
secundaria que ms se encuentra es la alfa espiral.
ESTRUCTURA TERCIARIA: Esta se origina por el acomodamiento de la cadena
poli peptdica en forma compacta tridimensional (en el caso de las enzimas, esta
es un glbulo esfrico). La cadena poli peptdica tiende a acomodarse de tal
manera que sus partes hidrofobias de los residuos de los aminoacidos se
escondan buscando de esta forma manera el equilibrio termodinamico; ademas en
la formacin de esta estructura tridimensional participan otros tipos de enlaces;
entre ellos tenemos: enlaces por puentes de hidrogeno entre grupos peptdicos,
puentes de H entre grupos laterales, en lace ionico, interacciones hidrofobicas.
ESTRUCTURA CUATERNARIA: Correspondiente a la composicion de grandes
moleculas de subunidades. Se presenta cuando la macromol proteica tiene ms
de una cadena polipeptidica y no estan unidas entre si por enlaces covalentes sino
tambien por los enlaces arriba mencionados.
Las estructuras secundarias y terciarias ocasionan cierto plegado y
enrrollado de la proteina enzimatica.
Se extiende por complejo multienzimatico, una forma de organizacin
todavia ms elevada, constituida por varias enzimas muy juntas en el espacio ,
que hace discurrir por orden, una tras otra toda una cadena de reacciones. Este
complejo se encuentra en las estructuras subcelulares. Por ejemplo, las enzimas
que participan en la sintesis de acidos grasos en el citosol.
De suma importancia para la enzimologia es la relativa inestabilidad de ls
estructura enzimatica (proteica). Una alteracion en la estructura o
desnaturalizacion son equivalentes auna perdida enzimatica
( de actividad). La estabilidad depende, entre otras cosas, de la temperatura, la
concentracion de iones H (pH) y de la concentracion de sales.
Segn su accion catalitica, las enzimas se dividen en 6 clases:
1.- OXIDOREDUCTASAS.
2.- TRANSFERASAS
3.- HIDROLASAS
4.- LIASAS
5.- ISOMERASAS
6.- LIGASAS
(Lactado deshidrogenasa, etc)

(Alanina aminotransferasa)
(Colinesterasa)
( Aldolasa)
( Fosfoglucosa isomerasa, PGI)
(Piruvato carboxilasa).
4
Las protenas son electrolitos multivalentes que contienen grupos

ionizables. El grado de ionizacion influye en la actividad de una enzima y depende
del pH.
En forma de electrolitos, las proteinas se desplazan en el campo electrico.
Las moleculas con carga positiva se desplazan hacia el catodo y las cargas
negativas hacia el anodo. Cuando mas alta es la carga neta, tanto ms rapida es
la migracion de la molcula. Una mezcla de protenas con diferentes cargas netas
puede, por ello, fraccionarse electroforticamente. Este procedimiento se usa para
la separacion de isoenzimas.
LAS ENZIMAS desde el punto de vista clnico son protenas , o sea
sustancias orgnicas, producidas por la clula via. La vida va unida a complejas
transformaciones materiales que estn acopladas energticamente unas con
otras y que transcurren a temperatura constante, relativamente baja.- Esta
peculiaridad esta posibilitada por la accin de las enzimas, que pueden designarse
como catalizadores biolgicos. La mayora de ellas catalizan especficamente una
reaccin qumica determinada; la sustancia transformada se denomina
SUSTRATO, y la susbstancia resultante de la reaccin
se denomina
PRODUCTO.
Otras obran menos especficamente y aceleran diversas reacciones, por lo
general anlogas. En muchos casos, la misma reaccin puede estar catalizada por
enzimas diversas que se producen en clulas distintas. La mayora de la enzimas
pueden definirse adems como CATALIZADORES QUIMICOS: Aceleran ls
reaccin en ambos sentidos, es decir tanto adelante como hacia atrs, sin
consumirse en ella.
IN VITRO: La reaccin catalizada transcurre hasta que se llega al estado
de equilibrio que se instaurara sin catalisis (equilibrio qumico).
IN VIVO: En la clula viva, la actividad cataltica de las enzimas esta
gobernada por la regulacin biolgica.
Una enzima se combina temporalmente con la sustancia (SUBSTRATO)
sobre el cual actua para formar un complejo SUBSTRATO ENZIMA que se
rompe para formar los productos de raccion y libera a la enzima para continuar su
funcin catalitica. Como todo catalizador las enzimas participan directamente en la
reaccin y permanecen inalteradas.
SUBSTRATO (S) + ENZIMA (E) =
E
S +
E
+
P
Una enzima es activa porque posee un sitio espcifico que tiene afinidad
por el substrato. A este sitio se le llama CENTRO O SITIO ACTIVO DE LA
ENZIMA. Es el responsable de la actividad de la enzima, cada enzima puede tener
varios centros o sitios activos, dependiendo de la naturaleza de la misma. El sitio
activo puede ser de naturaleza proteca, constituyendo parte de la molcula misma
de la enzima, o bien pued eser de naturaleza no proteca, llamandosele
COENZIMA y por si mismo no es activo. El resto de la molecula proteca
(APOENZIMA) no es activa y solso se convierteen enzima activa (HALOENZIMA)
al combinarse con su coenzima.
LA COENZIMA constituye en estos casos el centro activo de la haloenzima.
La coenzima puede estar unida fuertemente a la proteina, es decir, a la parte
proteca dela enzima (APOENZIMA) y entonces se le denomina GRUPO
PROSTETICO. Por lo tanto puede diferenciarse entre la coenzima ( la parte no
proteca de la enzima) que no esta unido a esta tan firmemente, y el grupo
prstetico que si esta unido firmemente al resto de la proteina y no puede
separarse facilmente de ella.
Para ejercer su efecto, muchas requieren en grupo prstetico de bajo
pesomolecular llamadas coenzimas. Cuando se trata de un in inorganico se
habla de un ACTIVADOR O COFACTOR. Si esta substancia esencial es un
componente organico complejo, hidrosoluble de naturaleza no prteica se llama
COENZIMA.
Las enzimas son muy labiles, de tal forma que pueden alterarse
presentandose 2 fenomenos principalmente la INACTIVACION Y LA
DESNATURALIZACION. La inactivacin es un proceso reversible que puede
reestablecerse al desaparecer el agente causante de la misma, pero la
desnaturalizacion es un proceso irreversible, practicamente una vez que se ha
desnaturalizado una enzima no es posible que esta recupere su actividad,
especialmente cuando esta desnaturalizacion ha sido muy profunda al grado de
romper los enlaces peptdicos de las protenas.
En los organismos vivos, las enzimas son degradadas rpidamente y el
organismo repone su suministro de enzimas por nuevas sintesis.
Las enzimas se producen intracelularmente y van a parar al plasma y a los
fluidos del organismo, no se sabe con certeza porque se encuentran en la sangre.
Algunas actuan en ella, pero la presencia de la mayora probablemete abecede a
la constante destruccin celular.
VARIANTES ENZIMATICAS: Las variantes enzimaticas moleculares se
subdividen en tres grupos.
ISOENZIMAS: Enzimas de funcion semejante, tipicas de los tejidos , organos y
organelas celulares de la misma especia, pero poseen diferentes propiedades
fisicas y quimicas (detrminadas geneticamente) ejemplo LDH.
HETEROENZIMAS: Enzimas de funcion semejante, especificas de las diversas

especies biologicas ejemplo: LDH del hombre y LDH del conejo.
ALOENZIMAS: Variantes de enzimas e isoenzimas condicionadas genticamente
que slo aparecen en parte de los componentes de una especie. La mayora de la
aloenzimas no conducen a manifestaciones patolgicas, por ejemplo las
aloenzimas de la fosfatasa alcalina , entre otras. Sirven para caracterizar el tipo
bioqumico de un individuo y son de utilidad prctica en Medicina legal y en
Gentica.
Todas las enzimas se caracterizan por su:
1.- ACTIVIDAD.
2.- ESPECIFICIDAD. Actuan sobre substratos espcificos en condiciones
particulares. El grado de espeficidad varia de una enzima a otra,Algunas muestran
especificidad absoluta, otras tienen especificidad
de grupo, otras tienen
estereoespecificidad.
3.- SENSIBILIDAD. A la influencia del pH, temperatura, concentracin del
substrato y tiempo de exposicin de la enzima sobre el substrato, que son los
factores que gobiernan la velocidad de reaccion enzimatica.
Su cantidad en el plasma es muy baja, y como se parecen mucho
quimicamente, no se estudian por su concentracin sino por su actividad, la que
se expresa en unidades. Las unidades en que se expresan los resultados son
arbitrarias y varian segn el mtodo empleado. El empleo de unidades diferentes
para expresar los resultados en cada laboratorio hace que realmente sea dificil
comparar los resultados y evaluar los datos existentes en la literatura por lo que en
la actualidad se pugna por el empleo de ua UNIDAD INTERNACIONAL (UI) para
expresar los valores de actividad enzimatica.
La UNIDAD INTERNACIONAL es la cantidad de enzima (actividad
enzimatica) que reacciona con un micromol (nM) de substrato por minuto en
condiciones optimas de concentracion de substrato y pH, as como temperatura a
la cual se lleve acabo la reaccin.
La actividad enzimatica deber indicarse como mU/ml, o bien como U/l. La
unidad enzimatica no es una medida de la concentracion de la enzima, sino un
dato de la actividad de la misma, en un volumen deteminado, por ello debe
indicarse como unidad volumen.
Es necesario tomar en cuenta que aun cuando los resultados de una

deteminacin enzimatica se expresan en UI, solo se podran obtener resultados
similares en los diferentes laboratorios si las determinaciones se hacen siguiendo
el mismo mtodo y condiciones es decir empleando el mismo substrato, tampon,
temperatura, pH optimo, etc.
Utilizando otros mtodos de estudio, electroforesis, cromatograficos e
inmunologicos, se ha podido apreciar el hecho de que enzimas con la misma
especificidad puedan tener diferente estructura si proceden de diferentes rganos.
A los grupos enzimas con esos caracteres, se les conoce como isoenzimas; las
fosfatasas alcalinas, por ejemplo, abarcan varias isoenzimas: seas, placentarias,
hepticas, intestinal.
Desde el punto de vista de diagnostico, es conveniente clasificar a las
enzimas segn su origen y funcin en:
1.- Enzimas especificas del plasma.
2.- Enzimas de secresin.
3.- Enzimas celulares.
Las enzimas especficas se originan en el hgado pero son liberadas
activamente al plasma, donde llevan acabo su actividad catalitica. Son de interes
clinico porque se encuentran en el plasma a niveles ms bajos que los normales
como resultado de lesion en el hgado. La pseudocolinesterasa o colinesterasa
srica y las enzimas de la coagulacion son ejemplos clinicos importantes. Actuan
en el propio plasma sanguineo.
La enzimas de secrecion y las enzimas celulares se localizan en el plasma
sanguineo, en concentraciones mucho mas bajas que sus concentraciones en
ciertos tejidos, pero no desempean funciones fisiologicas importantes en el
plasma. Entre las enzimas de secresion se encuentran la amilasa., lipasa y las
fosfatasas. Aunque se secretan a alta velocidad, se dispone rapidamente de ellas
y son eliminadas por loscanales de eliminacin usuales como la orina, bilis y el
tracto intestinal, y a sus niveles normales son relativamente bajos y constantes.
Sin embargo, si esta bloqueado alguno de los caminos usuales de eliminacion, o
se acelera subitamente la velocidad con que son liberadas al liquido extracelular,
puede ocurrir aumento importante de los niveles de estas enzimas an plasma.
Las enzimas de metabolismo celular estan situadas en el interior de las
celulas tisulares y en ellas estan presentes en concentraciones muy altas. Algunas
existen libres en el liquido celular y otras estan contenidas en estructuras celulares
como mitocondrias y lisosomas. Cuando las enzimas se localizan exclusivamente
en un solo sitio, se llaman enzimas uniloculares, como GTP y GLDH en citoplasma
y GLDH en mitocondria. Cuando pueden estar localizadas en 2 o mas sitios
diferentes se les llama biloculares, como GOT y MDH en citoplasma y mitocondria.
Si una enzima est presente en concentraciones apreciables solo en un

organo, un aumento en el nivel de la enzima apuntara a la fuente de la enzima y
de este modo identificaria la enfermedad o el organo afectado. Estas enzimas
reciben el nombre de ENZIMAS-ORGANO-ESPECIFICAS. Ejemplo de ella se
tienen la Fosfatasa cida presente en glandula prosttica.
Debe considerarse que las enzimas celulares o enzimas organo especificas
sern eliminadas de su lugar de origen en una proporcion mayor a lo normal, solo
cuando se presente dao celular o una alteracion de la permeabilidad celular.
Ademas es importante considerar que el aumento de los niveles enzimaticos no
siempre debe asociarse a una necrosis celular, ya que existen tambien daos
reversibles o que permiten la elevacion de los niveles enzimaticos temporal, por
ejemplo en hepatitits aguda, existe una relacion directa entre el incremento de la
actividad enzimatica del suero y la gravedad de una lesion ocurrida. Lo que
constituye la base fundamental del diagnostico enzimatico.
DESTINO DE LAS ENZIMAS CELULARES.
La salida, distribucion y transporte de enzimas en el espacio extracelular
son cuestiones investigadas hasta el momento, pero la explicacion hasta el
momento es la siguiente: Antes de que las enzimas lleguen al plasma sanguineo,
deben pasar la membrana celular. Las enzimas especificas del plasma pueden
pasar activamente a travez de la membrana celular. Contra un gradiente de
concentracin en el espacio extracelular por lo que se realiza un trabajo que
implica gasto de energia por parte de la clula.
Por el contrario las enzimas inespecifias del plasma son diseminadas y
difundidas en el plasma inespecificamente, inmediatamente despues de su salida
se producen modificaciones de la actividad catalitica de las enzimas, la que puede
disminuir o aumentar y as mismo sufrir modificaciones en su camino. Cuando
existen condiciones patologicas (enfermedades, intoxicaciones), la membrana
puede ser lesionada de forma reversible o irreversible. Tras la lesion irreversible
de la membrana celular aparece rapidamente la muerte celular. Las celulas
necroticas colaboran, si es que lo hacen en muy escasa medida al aumento de las
enzimas en suero; la parte principal procede de celulas todavia vivas.
Normalmente se encuentra en el plasma un nivel de enzimas muy constante, con
las oscilaciones que dependen por ejemplo de la edad, peso, etc. La
concentracin de las enzimas celulares se mantienen la desintegracion normal de
las clulas, es decir la destruccin celular fisiolgica.
Todas las proteinas estan sometidas a transformacion constante. As
tambien las enzimas del organismo vivo se neoforman y transforman
continuamente ( por ejemplo la activacion del tripsinogeno a tripsina) y finalmete
se inactivan y descomponen. Al igual que las restantes proteinas del plasma
sanguineo, se supone que muchas enzimas se desintegran hasta el grado de
aminoacido y despues se vuelven a utilizar.
TEORIA DEL TEST ENZIMATICO.

La determinacion de las actividades enzimaticas en suero o plasma
sanguineo, celulas sanguineas, orina o extractos y homogenados tisulares,
constituye actualmente un instrumento muy importante en el diagnostico clinico.
Las enzimas altamente purificadas y cristalizadas que se encuentran en el
comercio, facilitan la determinacion cuantitativa y especifica de metabolitos en
liquidos corporales y extractos tisulares.
En esta exposicion vamos a describir la teoria que forma base de la
ejecucion eficaz y ptima de los test enzimaticos en el laboratorio clinico-quimico.
ENZIMAS COMO AYUDA AL DIAGNOSTICO
Las actividades de las numerosas enzimas presentes en cada clula
corporal se mantienen a niveles relativamente constantes por un equilibrio entre la
sntesis de las enzimas y su degradacin . Una pequea fraccin de algunas de
las enzimas pasa continuamente a travs de las membranas celulares y puede
comprobarse en los lquidos corporales. Por ejemplo en el plasma sanguneo.
En el suero y plasma, las actividades de las enzimas varan slo en lmites
relativamente estrechos, incluso en los individuos sanos.
En muchas enfermedades aumenta la cesion enzimatica desde las celulas
del organo ebfermo, sea debido a la permeabilidad elevada de la membrana
celular, sea por la descomposicion ms o menos completa de la estructura celular.
Alteraciones de las actividades enzimaticas en el plasma (suero) no solo son
indicativos de transtornos sino que constituyen ademas ayudas muy valiosas en el
diagnostico diferencial, pronostico y valoracion de la eficacia de la terapeutica.
Las determianciones en plasma o suero y a veces en otros liquidos
corporales, pertenecen a la rutina del laboratorio clinico, las detreminaciones
tisulares (muestras) estan confinadas o reservadas al laborarorio especializado.
ENZIMAS COMO REACTIVOS:Hoy en dia se encuentra en el comercio gran
numero de enzimas cristalizadas o por lo menos altamente purificadas en los test
enzimaticos copulados y como catalizadores especificos para la determinacion
cuantitativa de metabolitos.
PRINCIPIOS DE MEDICION: La porcion cuantitativa de enzimas en las proteinas
totales del plasma o del suero es tan diminuta, que no puede ser separada y
diferenciada con los metodos usuales.
Para medirlas se sirve por ello de su funcion, su capacidad de catalizar
determinadas reacciones quimicas. La velocidad de reaccion catalizada es la
medida de la llamada actividad enzimatica, que puede ser equiparada en la
practica a la cantidad de enzima.
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Fundamentalmente, hay 2 caminos para medir una actividad enzimatica:

1.- Mediante la determinacion del consumo de un substrato transformado en la
reaccion enzimatica, bajo condiciones exactamente definidas y estrictamente
controladas.
2.- Mediante la medida dl producto formado en la reaccion enzimatica
(concentracion del metabolito).
Cada uno de los 2 caminos permite por su parte 2 procedimientos de medicion:
1.- Medida en dos puntos: Reaccion parada.
Todos los participantes en la reaccion son incubados con el suero
conteniendo las enzimas, durante un periodo fijo, al cabo del cual se interrumpe la
reaccion enzimatica midiendose, ya sea la cantidad de substrato no transformado
para el primer caso, en el cual el substrato debe tener una concentracion alta, y
solo una pequea parte de este deber consumirse durante el tiempo de medicion.
Para el segundo caso sea la medicion del producto formado, y esto va aser
posible solo despues de una segunda transformacion quimica del producto o
substrato a una compuesto coloreado.
2.- Medicion continua: Metodo cinetico.
Si en una reaccion intervienen las coenzimas NAD o NADP como
suministradores o receptores de hidrogeno, se puede seguir la reaccion
enzimatica directamente en el fotometro, por que tales compuestos absorben la
luz uv en su estado reducido, pero no en su estado oxidado, se decir despues de
ceder el H.
Esto se basa en el hecho de que los nicotinamida-adenin-dinucleotidos en
forma reducida (NADH y NADPH) absorben la luz con al pico entre 338.5 y
340.5nm, mientras que las formas oxidadas NAD y NADP no muestran absorcion
entre 300 y 400 nm.
La prueba conteniendo enzimas, se incuba con todos los participantes en la
reaccion, midiendose en intervalos de tiempo regulares el cambio de extinsion
originado por la coenzima que recibe y libera hidrogeno. La velocidad de las
variaciones de coenzima es proporcional a la actividad enzimatica buscada.
Mediante la copulacion de la reaccion con un sistema de deshidrogenasa,
el test ptico puede servir tambien para la medicion de reacciones enzimaticas
que no son dependientes de nicotinamida-adenin-dinucleotidos.
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Por ejemplo la determinacion de la actidad de GOT tenemos que GOT cataliza la

reaccion.
GOT
Aspartato + alfacetoglutarato ---------------->
Glutamato + oxalacetato
Para dicha determinacion de la actividad con el test optico, se aaden
NADH y un exceso de MDH a la solucion reactiva y la reaccion prosigue de la
manera siguiente:
MD
Oxalacetato + NADH + H ----------------
malato + NDH
Por cada mol de aspartato transformado en oxalacetato se forma un mol de

NAD, la velocidad de la disminucion de extinsion es el parametro de la actividad
de GOT. La reaccion MDH sirve de reaccion indicadora.
Si la reaccion enzimatica investigada no es posible la copulacion con una
reaccion dependientede NAD y NADP, se tratara de emplear substratos sinteticos
cuyo cambio de extincion puede leerse directamente en el espectro visible (con
menor frecuencia en el ultravioleta).
ENZIMAS SERICAS DE INTERES DIAGNOSTICO.
Aunque se han podido identificar ms de 50 enzimas en la sangre, algunas
no tienen valor clinico o solo lo poseen en casos especiales, como la
ceruloplasmina (degeneracion hepatolenticular de Wilson). Las que tienen mayor
aplicacin y que se determinan rutinariamente en el laboratorio comun son las
siguientes: Transaminasas, Fosfatasas acida y alcalina, Deshidrogenasa lacticas,
Creatinfosfoquinasa, lipasa y amilasa. Generalmente se prefieren las
determinaciones hechas en los sueros a las realizadas en plasma, ya que algunos
anticoagulantes usados para obtencion del plasma interfieren en la actividad
enzimatica.
Las cuales sern descritas a continuacin para estudiar su principal
aplicacin en la deteccin de enfermedades
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MARCADORES PANCREATICOS:
LIPASA:
ES UNA ENZIMA QUE HIDROLIZA LOS TRIGLICERIDOS EMULSIFICADOS.
Las cadenas de steres de los carbonos 1 y 3 del glicerol son preferentemente
divididos, liberando dos moles de cadenas largas de cidos grasos y 1 mol de 2acilmonoglicrido por mol de triglicrido.
El pncreas es el principal rgano productor de lipasa la cual es secretada en el
jugo pancretico junto con otras enzimas digestivas. Algunas lipasas se
encuentran en mucosa gstrica e intestinal.
Normalmente el suero contiene baja actividad de lipasa srica se eleva
rpidamente en pancreatitis aguda y permanece elevada por un periodo ms largo
de tiempo que la amilasa.
ALFA AMILASA.
En el humano la alfa amilasa es una enzima que rompe los enlaces alfa 1-4
glucosdicos presentes en las cadenas de almidn, rompiendolo en varias
unidades. El producto final es una mezcla de glucosa, maltosa y dextrinas.
La alfa amilasa es excretada por las glndulas salivales y pancreticas en sus
respectivos jugos los cuales entran al tracto gastrointestinal. Esta enzima es
importante para la digestion e ingestin del almidn ; pero la amilasa del pancreas
juega un papel ms importante ya que la amilasa de la saliva es inactiva en las
condiciones cidas que prevalecen en el estomago.
La alfa amilasa en sangre es excretada por el rin y depurada renalmente con
una estimacin de 1-3 mL por minuto.
Los valores normales son generalmente consideradas entre 60 y 150 Unidades
Somogyi; valores normales de alfa amilasa en orina son de 35 a 260 unidades por
hora.
La elevacion de la alfa amilasa en suero ocurre por pancreatitis aguda y otras
condiciones caracterizadas por edema e inflamacin del pancreas, por incremento
en la presion interna. Otras condiciones en las que la elevacion ha sido
reportada incluye trauma cerebral, embarazo ectpico, ruptura esplenica,
carcinoma broncognico y pneumona.
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MARCADORES HEPATICOS:
TRANSAMINASAS
Desde el punto de vista catabolico los aminocidos (a.a.) constan de dos
fracciones : el grupo amino y el resto de la molcula.
La perdida del grupo amino se efectua por : 1) transaminacion, 2) desaminacion.
1) transaminacion: Es el intercanbio que lleva a cabo un a.a. y un alfa cetoacido

cambiando el grupo amino por el grupo cetona y viceversa.
Las enzimas encargadas de este proceso son las aminotransferasas y por lo
general su accin es reversible, tiene como coenzima el fosfato de piridoxal.
La trasaminacion se desarrolla en la siguiente secuencia:
1) El fosfato de piridoxal con el grupo aldehido se une al radical amino del a.a.
con perdida de una molcula de agua y formacion de doble enlace.
2) Hay reacomodo del doble enlace .
3) Finalmente por la introduccion de una molcula de agua se separa el grupo
amino y se forma un grupo cetona.,el piridoxal queda como piridoxamina.
En la segunda fase de reaccin el fosfato de piridoxamina se une a un
cetoacido sediendo una molcula de agua, se reacomoda el doble enlace con
la introduccion de una molcula deagua, el radical amino queda en el cido y
se reconstruye el fosfato de piridoxal.
Hay dos transaminasas cuya elevacion sanguinea se correlaciona con la
clnica de diagnostico,pronostico y evolucion del padecimiento.
TRANSAMINASA GLUTAMICA OXALACETICA ( TGO).
E n la actualidad se le denomina como aspartato aminotranferasa; cambia de
manera reversible el grupo amino del glutamato al oxalacetato para dejar alfa
cetoglutarato y aspartato.
Su elevacion sanguinea se encuentra en casos de inflamacion del higado o en
un infarto del miocardio.
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TRANSAMINASA GLUTAMICA PIRUVICA (TGP).

alanina amino tranferasa: por transaminacion reversible toma glutamato y
oxalacetato para dejar alfa cetoglutarato y aspartato.
Su elevacion en la sangre indica el mismo tipo de lesiones que el anterior.
Estas dos enzimas no son especificas de algn tejido por lo que sirve poco en
el diagnostico, pero sirve mucho en el pronostico para controlar la evolucion del
padecimiento.
Los
a.a.
que
sufren
transaminacion
son:
alanina,arginina,aspartato,cisteina,fenilalanina,glutamato,lisina,triptofano,tirosin
a y valina.
TRANSAMINASAS.
TGO (AST) TGP (ALT)
Son enzimas representadas por protenas simples, conjugadas y sentetizadas por

clulas de diferentes tejidos: Hepatocito,Miocardio,Renal,Nervioso y Musculo
estriado. Las cantidades de estas enzimas son pequeas.
En el suero hay mas TGO que TGP . En el hapatocito la tgp se encuentra en el
citoplasma y la tgo se encuentra en el citoplasma y mitocondrias.
TGP:Se indica en todo proceso inflamatorio necrotico del higado principalmente,
es empleada para descartar hepatitis viral activa.
Esta enzima tiene una concentracin muy elevada en el higado mientras que en el
corazon,musculo y rion estas concentraciones son relativamente vajas.
Es una enzima citoplasmatica del hepatocito, que se livera facilmente cuando
existe una alteracion celular. Su elevada manifestacion en la ictericia de origen
viral. Y su aumento ligeramente en el infarto del miocardio e intensamente se
predomina la estasis hepatica por insuficiencia cardiaca.
VALORES NORMAL ES: Adultos: 7 a 56 U/L
Nios: 10 a 35 U/L
Neonatos: 6 a 50 U/L
Los valores son ligeramente mayores en varones y en negros; en el recien nacido
se encuentra mas elevada debido a la mayor permeabilidad del hepatocito.
Los valores bajos: Corresponden a la baja nutricion con piridoxina (vitamina B6).
Tambien en la mujer que toma anticonseptivo y en paciente que se les practica
hemodialisis.
Esta prueba se utiliza para diagnosticar hepatopatias y vigilar la evolucion del
tratamiento del hepatitis, cirrosis pos neocrotica activa y los efectos del
tratamiento.
SIGNIFICADO CLINICO: (elevacion moderada o alta)
La tgp ayuda a distinguir entre ictericia hemolitica y ictericia producida por
problemas hepaticos.
Enfermedades que causan elevacion:
*Enfermedades hepatocelulares.
*Cirrosis activa (elevacion leve)
15
*Tumor hepatico metastasico (elevacion leve).

*Ictericia obstructiva biliar (elevacion moderada)
*Hepatitis viral(30 a 50 veces mayor que lo normal).
*Infarto al miocardio.
*Pancreatitis(elevacion leve).
*Quemaduras graves.
TGO: Esta presente en la epidermis de la piel, miocardio,musculo esqueletico
estriado.pancreas,riones,cerebro,higado,bazo y pulmones. Los G.R. contienen
unas diez veces mas tgo que en el suero.
Esta enzima es liberada en la circulacion cuando hay lesion o muerte celular.
Cualquier enfermedad que provoque cambios metabolicos, provoca aumento de la
TGO.
VALORES NORMALES: Edad.:0 a5 dias=35 140 U/L;6 dias-3aos:20 a60 U/L;3 a
6 aos de 15 a20 U/L; DE 6 A 12 aos: 10 a 50 U/L;12 a18 aos; de 10 a40
U/L.;Adultos: 5 a40 U/L.
SIGNIFICADO CLINICO:La tgo se utiliza para diagnosticar enfermedades
cardiacas y hepaticas .
ENFERMEDADES:
Infarto al miocardio.
Hepatitis aguda y cronica.
Mononucleosis infecciosa.
Traumatismo o radiacion del musculo esqueletico.
Dermatomitosis.
Gangrena.
NOTA: Todas estas causan elevacion de la tgo.
ENFERMEDADES:
*Hiperrazohemia.
*Dilisis renal cronica.
*Ligeramente durante el embarazo.
NOTA: Todas estas causan disminucion de la tgo.
FOSFATASAS:
A las fosfatasas que se activan mejor a un ph de 9- 11 se les llama alcalinas. Los
huesos son ricos en ellos por que abundan en los osteoblastos. Normalmente la
fosfatasa alcalina total en suero consiste de isoenzimas de origen heptico, sea,
y en algunos individuos de intestino. Elevaciones fisiolgicas de fosfatasa alcalina
se observan en la infancia y en tercer trimestre del embarazo. En esta ltima es a
expensas de la isoenzima placentaria.
16
Esta enzima cataliza la hidrlisis de monsteres del c. Fosfrico;

sus valores normales por litro en suero son de 15 69 unidades internacionales (
U.I ) la cifra de 100 unidades se aceptan como mximo normal del incremento y en
la etapa final del embarazo.
La principal utilidad clnica de esta prueba reside en el estudio de los
problemas hepticos, porque la fosfatasa alcalina se eleva mucho ( 100 400 U.I )
en los procesos obstructivos de las vas biliares ( litiasis, tumores ) y en las
lesiones ocupantes del espacio de la glndula ( carcinoma heptico primario o
secundario, abscesos ); en cambio en las hepatitis y en las cirrosis, y la elevacin
es moderada ( 70 100 U:I ).
No se conoce la razn del ascenso de sta enzima en los problemas
hepatobiliares; es posible que exista una mayor formacin de fosfatasa alcalina
por los hepatocitos o las clulas de los canalculos biliares junto con un obstculo
a la excrecin.
Sin embargo, se ha visto que las cifras no se elevan en la atresia congnita de las
vas biliares extraheptica.
Tambin se observan elevacin importante en todas las lesiones que
se acompaan de actividad osteoblstica: ostetis deformante, raquitismo,
osteomalacia, hiperparatiroidismo, metstasis de carcinomas. En la consolidacin
de fracturas, el ascenso es moderado.
Ejemplo de fosfatasa alcalina normal es en una enfermedad sea
generalizada es el mieloma mltiple
FOSFATASA CIDA:SIGNIFICACIN CLNICA:Las fosfatasas cidas se encuentra presente en casi todos los tejidos
del organismo, siendo particularmente altas las cantidades de estas enzimas en
prstata, estomago, hgado, msculo, bazo, y eritrocitos y plaquetas. Las distintas
isoenzimas se diferencian entre si por su ph ptimo, P.M. , y requerimiento de
activadores e inhibidores. La fosfatasa cida prosttica (FacP ) constituye un
valiosos auxilar en el diagnstico de cncer prosttico pero en etapas avanzadas,
cuando el tumor ha hecho metstasis, una de las formas neoplsicas de mayor
mortalidad, por lo cual en si no ha sido utilizada com prueba oportuna para dicho
diagnstico. En este sentido, la determinacin cintica de FacP usando x-naftil
fosfato como sustrato ha mostrado sensibilidad y especificidad comparable a las
tcnicas radioinmunolgicas, con semejante poder discriminatorio y evidente
ventajas de orden prctico.
17
COLINESTERASA
la colinesterasa se origina en el higado y cundo existe alteracion hepatica, su
concentracion disminuye en relacion directa
con los hepatocitos
alterados.
existen dos tipos : la colinesterasa verdadera o acetilcolinesterasa, cuya funcin

es hidrolizar la acetilcolina en la placa motora principal. se encuentra
principalmente dentro de los eritrocitos y en las terminaciones nerviosas de los
nervios colinergicos. es capaz de producir crisis de apnea postanestesicas,
cuando hay deficiencia de esta y metabolismo insuficiente de la succinil colina.
frecuencia 1/1500 pacientes . la otra es la colinesterasa del suero o plasma ,
conocida como pseudocolinesterasa que esta influenciada por los insecticidas
especialmente fosforados. su deficiencia inhibe la actividad de la colinesterasa del
suero y desencadena transitoriamente
transtornos visuales con obnubilkacion
mental, por lo que es de importancia en pilotos fumigadores.

USOS
De screen en el preoperatorio de pacientes con sensibilidad a los
anestecicos donde la succinil colina no despolariza los relajantes musculares y
origina crisis de apnea . en los pilotos fumigadores que emplean insecticidas a
base de fosforo o carbamato. para valorar el dao del hepatocito en hepatitis viral
y atrofia aguda, donde sus niveles son tanto ms bajos cuanta mayor sea la
alteracin hepatica .
RANGOS NORMALES
son variables segn el metodo empleado. con el sistema cinetico con
butiriltiocolina como substrato, las cifras normales fluctuan entre 3200 a 9000
unidades internacionales.
INTERPRETACION
las pacientes que toman estrogenos o contraceptivos bajan sus niveles. la
colinesterasa verdadera es estable en el medio ambiente hasta 80 dias, se debe
mantener en congelador hasta el momento de procesarla.
PREPARACION DEL PACIENTE
no se requiere ninguna preparacion
18
TOMA DE MUESTRA
no es necesario estar en ayunas y se puede emplear el suero o plasma usando
anticuagulante edta
VALOR CLINICO
de utilidad en pilotos fumigadores y en anestecia
GAMMA-GLUTAMILTRANSFERASA
Es una enzima microsomal que regula el transporte de aminocidos a travs de
la membrana celular, catalizando la transferencia de un grupo glutamilo desde el
glutatin a aminocidos libres. Aunque se encuentra en la mayora de los rganos
corporales con la excepcin del msculo, la actividad plasmtica se atribuye
fundamentalmente a la isoenzima heptica. Puede estar implicada en el transporte
de pptidos a travs de las membranas celulares como pptidos gammaglutamilo.
Las gammaglutamil-transferasa tiene una mala especificidad para las
enfermedades hepticas e incluso en un paciente con ictericia ayuda poco a la
informacin obtenida de la medida de la AST y FAL.
Sin embargo, su medida puede ser til en dos circunstancias particulares.
Primero, cuando el origen de una FAL srica elevada es dudoso, una elevacin
concomitante en la gamma-glutamiltransferasa sugiere que la FAL es de origen
heptico.
En segundo lugar se refiere al rea controvertida de la relacin de la gammaglutamiltransferasa con el consumo crnico de alcohol. La gammaglutamiltransferasa puede elevarse en pacientes con alcoholismo crnico debido a
la induccin enzimtica por el alcohol y al dao heptico. La gammaglutamiltransferasa se eleva ms en alcohlicos con enfermedad heptica y existe
una tendencia a que los niveles se mantengan altos despus de la abstinencia.
Contrariamente, en pacientes alcohlicos sin enfermedad heptica,
aproximadamente la mitad tienen una gamma-glutamiltransferasa elevada y
generalmente vuelve a lo normal despus de 8 semanas de abstinencia.
El aumento de la gamma-glutamiltransferasa no se relaciona ni con la cantidad
de alcohol consumido ni con la duracin de su consumo. De esto se deduce la
escasa eficiencia de la gamma-glutamiltransferasa como rastreo en poblaciones
19
con consumo excesivo de alcohol. Se observan resultados falsos positivos en los

que toman frmacos inductores de la enzima y resultados falsos negativos en los
que no tienen enfermedad heptica. Sin embargo, el hallazgo de una gammaglutamiltransferasa muy elevada, ms de 5 veces el lmite superior de referencia,
es una buena razn para indagar acerca de un posible abuso de alcohol. La
gamma-glitamiltransferasa sigue mantenindose como la mejor de las pruebas de
deteccin precoz de laboratorio y, dependiendo de la poblacin estudiada, la
sensibilidad es el orden de un 50% y la especificidad de un 85%.
La gamma-glutamiltransferasa puede detectarse en suero en 3 formas
enzimticas principales, aunque estas determinaciones no suelen realizarse
rutinariamente. La forma de elevado peso molecular aparece en suero normal as
como en la obstruccin biliar y ms frecuentemente en la infiltracin maligna del
hgado. Una forma de peso molecular intermedio consta de dos fracciones, la ms
importante se detecta en enfermedades hepticas y la otra se encuentra en la
obstruccin biliar. La tercera forma es un componente de bajo peso molecular de
importancia desconocida. En nuestra experiencia, la determinacin de estas
fracciones carece de la suficiente sensibilidad y especificidad como para que se
introduzcan en las pruebas de rutina de los laboratorios.
MARCADORES CARDIACOS
Dentro de los marcadores cardiacos tenemos a las enzimas que principalmente se
encuentran en el musculo cardaco y por lo cual apuntan hacia dicho rgano como
son:
DESHIDROGENASA LACTICA (LDH)
Se encuentra en todos los tejidos; la diferencia entre uno y otro tejido
es la proporcin de LDH (isoenzimas). Los glbulos rojos y blancos contienen
grandes cantidades de esta enzima, as como la piel, msculo cardiaco, rin e
hgado.Reaccin que cataliza:
CH3COCOOH
+ NAD|-H2
CH3CHOHCOOH
+ NAD
La LDH es un tetrmero compuesto por 2 cadenas de polipptidos

diferentes que se han llamado H y M. La combinacin de estas dos cadenas da
lugar a diferentes isoenzimas identificadas por electroforesis en gel de agar o
acetato de celulosa:
20
LD 1 (H4)
LD2 (H3M1)
LD3 (H2M2)
LD4 (HM3)
LD5 (M4)
Una isoenzima contiene 4 de estas unidades cada una con un PM

vecino de 35 000. LD1 y LD2 se encuentran en concentraciones elevadas en el
msculo cardiaco, los glbulos rojos y la corteza renal. LD5 se encuentra en
concentraciones mximas en msculo esqueltico, hgado, leon y piel.
Una sexta isoenzima la LDH, que se encuentra en el testculo humano
despus de la pubertad, posee otro tipo de subunidad monomrica; su estrecha
afinidad con el grupo LDH del suero se traduce por la capacidad de la subunidad
monomrica H y M de combinarse con las de la variedad testicular de LDH,
formndose una nueva serie de tetrmeros , con propiedades distintas respecto a
la electroforesis y otras caractersticas.
En el infarto agudo de miocardio la elevacin de la LDH puede ser

hasta 10 veces lmite superior normal, ste se inicia aproximadamente 1224 hrs tras el inicio del dolor pectoral, y alcanza un mximo a las 48-72 hrs.
La LDH se encuentra en la mayora de los tejidos, lo que reduce la utilidad
de su medida para el diagnstico de IM. La medida de las isoenzimas de
LDH puede aumentar la especificidad de las determinaciones de LDH.
Lmites de valores normales:
Con el mtodo colorimtrico midiendo la reaccin antes sealada son
normales de 200 a 600 u/ml. La reaccin se vigila a travs de la disminucin de la
absorbancia a 340 nm por transformacin de HAD.H2 en NAD. En el mtodo
colorimtrico los valores dependen de la tcnica empleada. Cuando se mide la
desaparicin de piruvato, a travs de la disminucin de formacin de hidrazona
coloreada con 2,4-dinitrofenilhidracina, los lmites normales son de 100-350
U/ml.En nios de menos de 1 semana de edad pueden alcanzar 1800U/ml.
Significado Clnico:
Por la ubicuidad de la LDH en tejidos y glbulos rojos , es dudoso su
valor clnico, y en caso que los resultados sean altos indica que el paciente
presenta una enfermedad activa, como podra deducirse de una sedimentacin
acelerada. Las mediciones simultnes de TGO, LDH y bilirrubina han sido tiles
21
para distinguir un infarto pulmonar de uno al miocardio; en los 1ros TGO es normal
, pero se elevan LDH y Bilirrubina; en los 2dos TGO y LDH son elevados pero
Bilirrubina se mantiene normal.
La medicin de los niveles de LDH y de Fosfatasa alcalina en orina
permite ciertos diagnosticos diferenciales del rin.
LDH elevado en orina
Pielonefritis crnica, glomerulonefritis aguda,nefritis luposa,
glomeruloesclerosis diabtica.
LDH elevado en orina y Fosfatasa alcalina Normal
Carcinoma de la vejiga, pielonefritis crnica, hipertensin maligna y
glomerulonefritis esclerosante.
LDH y Fosfatasa alcalina elevadas en orina
Cncer de rin y prstata, adenomas y carcinomas suprarrenales.
Medicin de la LDH en Suero:
Incubar 0.1 ml de una dilucin de suero1 a 6 con 1.0 ml de substrato de

piruvato amortiguado, en un frasco que contiene 1.0 mg de NADH muy
puro, durante 30' a 37 C.
Aadir 1.0 ml de 2,4-dinitrofenilhidracina, y dejar 20 ' a T ambiente.
Aadir 10 ml de Na OH 0.40 N.
A los 5' leer en la longitud de onda.
Creatinfosfoquinasa (CPK) .
La creatina kinasa (CK) es una enzima intramuscular constituida por
una subunidad M (msculo) y otra subunidad B (cerebro)que s combinan dando
lugar a isoenzimas:
1. CK-MM (MUSCULAR)
2. CK-BB (CEREBRAL)
3. CK-MB (MIOCARDICA)
Dentro del conjunto de actividades enzimticas que pueden valorarse
en la enfermedad muscular, el indicador ms sensible es la CK. Esta es una
enzima que requiere de Mg, debido a esto no debe utilizarse como anticoagulante
citrato porque sobrepone la quelacin de Mg y se inhibe la actividad de la enzima.
En un paciente con IM hay aumento de CK de 6-8 hrs, mximo en 15 y vuelve a la
normalidad en 3-5 das. Con el dao muscular aumenta la actividad de CK total y
una proporcin es del tipo CK-MB (menos del 6%). CK muy elevada con una
fraccin mayor del 6% de CK-MB indica dao al miocardio.
22
Causas de elevacin de CK:

Diferentes tipos de operaciones
Administracin intramuscular de drogas
Tos violenta
Ejercicio (cuando se hace a p atmosfricas elevadas)
Consumo de cantidades elevadas de alcohol
Convulsiones
Infarto cerebral o hemorragia
Necrosis o regeneracin del msculo
Recomendaciones :
Conservar los sueros para anlisis de CK a 4C o congelarlos y
analizarlos a los pocos das. Evitar muestras hemolizadas. Protegerlas de la luz
azul.
La CK-MB est confinada principalmente al corazn (representa 620% de la actividad total) pero existen cantidades medibles en el msculo
esqueltico.
TROPONINAS
Muchos estudios se han centrado en la utilizacin de la determinacin de
troponina T (TnT) y troponina I(TnI)para el diagnostico de IM. La troponina es un
complejo de tres proteinas que regulan la interaccion de la miosina con la actina
en el proceso contrctil:1)troponina T (39 Kda),responsablemente de la union del
complejo a la tropomiosina,2)troponina1(26.5Kda) un inhibidorde la actomiosina
ATPasa.que bloquea la contraccin en ausencia de calcio y 3) troponina C (18
Kda),que une calcio en el inicio de la contraccin La troponina C tiene solo una
forma y se encuentra en los musculos,mientras que la Ty la I tiene cada una
isoforma de musculos esqueletico y cardiaco.
Aunque la mayoria de la TnT se encuentran asociadas con la tropomiosina
como una proteina miofibrilar, tambien se encuentra en un conjunto citosolico.
Esta distribucin se refleja en una liberacin bisafacica de la TnTdel msculo
cardiaco daado;esto se explica por una liberacin inicial como consecuencias del
dao de membrana durante la isquemia grave (inicindose a las 3 horas) y
continua una lenta disociacin y degradacin de miofilamentos , lo que conduce a
una liberacin continua durante 3-5 dias. Devido asu liberacin relativamente
rapida , tras la mioglobina y antes de la CK-MB,se le a dado un papel de marcador
precoz de IM, y debido a su liberacin prolongada tambien se utiliza pa ra
suministrar undiagnostico tardio de IM. Los datos actuales sugieren que es
probable que realice con la CK-MB como marcador de IM con una eficiencia
diagnostica de un 98% en el diagnostico de IM para la TnT ( con un punto de
corte de 0.2ug/Ly un tiempo de 12-24Horas) comparado con la CK-MB(masa) con
23
una eficiencia del 99% (a las 8 horas ). El aumento de la TnT en el IM es mucho

mayor que el de lo normal . El rango de referencia es de 0 a 0.1 ng/ml. Como se a
indicado, el incremento es prolongado , lo que permite la deteccin de IM incluso a
los 10 dias del inicio de los sntomas.
Se ha indicado que debido a la naturaleza de su liberacin desde la celula
miociticas,puede ser util en la deteccin de microinfartos y , de forma similar a la
mioglobina ,puede utilizarce para valorar el xito de la reperfucion .
Tras el inicio de los sntomas , en las 4 primeras horas , aumenta de forma muy
notable la concentracin de TnT ; a continuacin , sigue una caida que se
corresponde con la reperfucion y luego aumenta otra vez aproximadamente
durante 4 dias mas , correspondiendo a la liberacin de troponina ligada a los
miocito necroticos.
Tambien se ha estidiado su utilizacin en la angina inestable, que es una isquemia
miocardia grave y transitoria, ocacionada por una estenocis coronaria rapida y
progresiva y que se puede conducir a un IM completo . La TnT se utiliza en este
marco pa ra determinar los pacientes que probablemente progresan a IM . sin
embargo , al igual que la CK-MB, la TnT puede carecer de especificidadcuando
coexiste dao del msculo esqueletico , debido a que los anticuerpos frente a la
TnT cardiaca tambien presentan reacciones cruzadas con la TnT del msculo
esqueletico , y es del orden de un 0.5 a un 2% . por otra parte , en TnT cardiaca
no aumenta o lo hace muy ligeramente .
De forma similar a la TnT , la TnI se libera durante un periodo de tiempo mayor
qque la CK-MBy , por lo tanto, puede utilizarce de forma anloga . estudios
recientes muestra que pueden tener incluso mayor especifidad de la TnT cardiaca
ya que se ha indicado que es normal , por ejemplo,la CK total llega a 74000UL y la
CK-MB es de 280 ug /L, como ocurre en la rabdomilicis ,por lo demas , sus
caractersticas son similares a las de la TnT . la CK total , la CK-MB y la
mioglobina aumenta mucho en la sangre de los maratonianos tras la carrera , a
pesar de no haber ninguna lesion miocardia ; por el contrario , la concentracin
de TnI no aumenta , esta prueba puede resultar muy util para el diagnostico de un
IM en deportistas tras realizar un esfuerzo fisico intenso.
La miosina , otra proteina miofibrilar, interacciona reversiblemente con la actina
durante la contraccin muscular , esta constituida por una cadena pesada con
dos cadenas ligeras en cada extremo ,existen dos tipos de cadenas , cadenas
ligeras :las cadenas ligeras de tipo 1, que tienen un peso molecular de 29 Kda y
las cadenas ligeras de tipo 2 que tienen un peso molecular relativo de 24 Kda y
las cadenas ligeras de tipo 1 no son detectables en sangre de personas sanas .
al igual que la troponina , las cadenas ligeras de miosina se liberan de forma
continua entre las 3 y las 6 horas siguientes al infarto .La concentracin mxima
se alcanza entre los dias 2 y 4, en general la concentracin de la cadenas
pesadas puede aumentar ligeramente tras un esfuerzo fisico intenso. Despus de
un IM las cadenas pesadas tardan en parecer en la sangre periferica , entre 1 y 4
dias tras el inicio de los sntomas . El mximo de concentracin se alcanza tras
unos 6 dias . La vuelta a la normalidad no se observa hasta 3-4 semanas
despus. Uno de los aspectos positivos de las cadenas de miosina es la relativa
insecibilidad de la reperfucion de la zona infartada en caso de recanalizacion de la
24
arteria obstruida , por eso , las cadenas ligeras de miosina pueden ser muy utiles
para la determinacin de la magnitud del infarto.
La Troponina I es la proteina inhibitoria del complejo regulador Troponina tropomiosina que confiere sensibilidad al Calcio al msculo estriado, es por eso la
regulacin de la interaccin de actina y miosina en el msculo estriado.Se prefiere
el uso de Troponina I en el diagnstico de infarto agudo al miocardio.
PRINCIPIO DE LA PRUEBA.
El ensayo de Troponina I de LIFE SIGN MI emplea una tecnologa de
inmunoensayo cromatogrfico de fase slida para detectar cualitativamente la
presencia de Troponina I cardiaca en muestras de sangre humana. La
inmunocromatografa se inicia con la adiccin de muestra en el rea indicada para
la muestra.
La troponina I cardiaca de la muestra, se une al anticuerpo de tincin
conjugado y migra a travs del area de prueba, la cual tiene anticuerpos
inmovilizados y se deslioga del complejo de tincin al migrar fuera de la regin de
prueba. Algunos de estos complejos son capturados despus en el rea de
control.
Una banda horizontal visible rosa- purpura aparecer en la prueba y en el
area de control si la concentracin de Troponina I cardiaca en la muestra est por
encima del valor lmite establecido, indicando un resultado positivo.
PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA.
1.- Agregar 130 L de muestra de sangre completa, suero o plasma.
2.- Leer despues de 15 min. Observando la aparicion o no de la linea horizontal de
color rosa purpura en el rea de prueba.
25
BIBLIOGRAFIA
Carl A. Burtis Edward R. Ashwood, David E Bruns. TIETZ
FUNDAMENTAL OF CLINICAL CHEMESTRY, 6. Ed. (2012).
Gonzalez Hernndez A. PRINCIPIOS DE BIOQUMICA CLNICA Y
PATOLOGA MOLECULAR Ed El Sevier (2012)
Alba Luca Salamanca BIOQUMICA CLNICA. Aproximacin Al Anlisis
Bsico-Clnico De Las Enfermedades Editorial: Universidad Del Rosario.
(2011)
Jacobo Diaz Portillo. BIOQUIMICA CLINICA 3. Ed Ed. Ergon, ( 2010 )
M.A. Castao Lpez, J, Daz Portillo, F.BIOQUMICA CLNICA: DE LA
PATOLOGA AL LABORTORIO. Ed. Ergon. (2008)
Susan King Strasinger. LIQUIDOS CORPORALES Y ANALISIS DE
ORINA. Editorial El Manual Moderno (2007).
Pern Mesa, Salvador (Servicio de Publicaciones de la Universidad de
Mlaga. UMA INTRODUCCIN A LA BIOQUMICA CLNICA
(2007)
1.
Ed
Richard A. Harvey, Pamela C. Champe BIOQUMICA 3a. Ed. (2006) ed.
McGrawHill
26

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FAC. DE C.

Universidad Autnoma de Chiapas

TITULAR DEL CURSO :

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA

CICLO ENERO - DICIEMBRE - 2015

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

UNIDAD II.- ENZIMAS CELULARES DEL SUERO

Reconocer las principales enzimas sricas del plasma

Conocer los mtodos de diagnostico enzimtico para l diagnostico de

Principales enzimas celulares de diagnstico.

Destino de las enzimas celulares.

Enzimas sricas ms importantes y su significado.

2.5 Metodologa enzimtica.

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

DEFINICION Y CARACTERISTICA DE LAS ENZIMAS.

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

ESTRUCTURA PRIMARIA : Correspondiente a la secuencia de aminocidos en

(Lactado deshidrogenasa, etc)

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

Las protenas son electrolitos multivalentes que contienen grupos

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

HETEROENZIMAS: Enzimas de funcion semejante, especificas de las diversas

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

Es necesario tomar en cuenta que aun cuando los resultados de una

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

Si una enzima est presente en concentraciones apreciables solo en un

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

TEORIA DEL TEST ENZIMATICO.

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

Fundamentalmente, hay 2 caminos para medir una actividad enzimatica:

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

Por ejemplo la determinacion de la actidad de GOT tenemos que GOT cataliza la

Por cada mol de aspartato transformado en oxalacetato se forma un mol de

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

1) transaminacion: Es el intercanbio que lleva a cabo un a.a. y un alfa cetoacido

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

TRANSAMINASA GLUTAMICA PIRUVICA (TGP).

TGO (AST) TGP (ALT)

Son enzimas representadas por protenas simples, conjugadas y sentetizadas por

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

*Tumor hepatico metastasico (elevacion leve).

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

Esta enzima cataliza la hidrlisis de monsteres del c. Fosfrico;

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

con los hepatocitos

existen dos tipos : la colinesterasa verdadera o acetilcolinesterasa, cuya funcin

transtornos visuales con obnubilkacion

mental, por lo que es de importancia en pilotos fumigadores.

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

FAC. DE C. QUMICAS/UNACH / CAMPUS IV

con consumo excesivo de alcohol. Se observan resultados falsos positivos en los

La LDH es un tetrmero compuesto por 2 cadenas de polipptidos

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA