TemasselectosdeCalidadenSerologa

(aplicacinenelbancodesangre)

Validacinyverificacindemtodos
deexamencuantitativos

IgnacioReyesRamrez
entidad mexicana de acreditacin, a.c.

Introduccin

Sedescribirnlospuntosaconsiderarparala
validacinyverificacindelos
procedimientosdeexamencuantitativos,
paraelcumplimientoyevaluacindelpunto
5.5.2 delanormaNMXEC151892008.

 Conformealasdirectricesestablecidasenla
Guaparalavalidacinylaverificacindelos
procedimientosdeexamencuantitativos
empleadosporellaboratorioclnico.

AlcancedelaGua

Ladebenaplicarloslaboratoriosclnicosque
seencuentranenalgunaetapadelprocesode
acreditacinantelaentidadmexicanade
acreditacin,a.c. atodoslosprocedimientos
deexamencuantitativosdelalcancedela
acreditacin

Descripcin

Yaqueexistendiversostipodemtodos
analticos disponiblesenelmercado.
Esimportantequeellaboratorioevale los
diferentesmtodosyseleccioneaquelque
mejorseadecuealasnecesidadesyrecursos.

Validacin

Sedefinecomo:
LaConfirmacinmedianteelsuministrode
evidenciaobjetivadequesehancumplido
losrequisitosdelmtodoparauna
utilizacinoaplicacinespecificaprevista.
(NMXCH152IMNC2005)

 Losdatosdela
validacindelmtodo
losinformael
fabricanteensus
instructivosyestos
puedencomprender
porsuaplicacin:

Linealidad.
Precisin.
Veracidad.
Limitededeteccin.
Selectividad.
Sensibilidadanaltica.
Intervalodetrabajo.
Especificidadanaltica.
Incertidumbre.

 Siseutilizanmtodos
desarrolladosporel
laboratoriooalguno
fuemodificado,se
deberealizarla
validacincompletay
presentarlas
evidencias
correspondientes.

Linealidad.
Precisin.
Veracidad.
Limitededeteccin.
Selectividad.
Sensibilidadanaltica.
Intervalodetrabajo.
Especificidadanaltica.
Incertidumbre.

 Lavalidacin compruebalaaptituddelos
procedimientosdeexamen yreflejalas
condicionesrealesdelaaplicacindelos
mismos.

Verificacin

Laconfirmacinmediantelaaportacinde
evidenciaobjetivadequesehancumplidolos
requisitosespecificadosparaunmtodo.
(NMXCC9000IMNC2005)

 Laverificacinconsisteenevaluarel
desempeodelmtodo parademostrarque
cumpleconlosrequisitosparaelusoprevisto,
quefueronespecificadoscomoresultadode
suvalidacin.(NMXCH152IMNC2005)

VE= Valor Esperado del Reactivo.

VO= Valor Observado del Reactivo.

Parmetrosdedesempeo
Ellaboratoriodebe
realizarlaverificacin
delosmtodosy
evidenciarsicumplen
conlascaractersticas
dedesempeoenlas
condicionesdel
laboratorio.

Linealidad.
Precisin.
Veracidad.
Incertidumbre.

EvaluacindelosParmetros
Linealidad

Evaluarelintervalo
analticodelmtodo
enellaboratorio.
Elcomportamiento
lineal.
Laverificacindebe
tomarencuentalos
puntosdedecisin
clnica.

 Precisin.
Valordelamagnitud.
Estimacindelvalor
delmensurando.
Errordemedida
(aleatorioy
sistemtico).

Veracidad.
Concordanciaentrela
mediaaritmticayel
valorverdaderoo
aceptadocomo
referencia.
Errorsistemtico
(sesgo).

 Errorsistemtico. Mediaqueresultadeun
nmeroinfinitodemedicionesdelmismo
mensurando,efectuadobajocondicionesde
repetibilidad,menosunvalorverdaderodel
mensurando. (NMXZ055IMNC)

 Exactituddemedicin. proximidaddela
concordanciaentreelresultadodeuna
medicin yunvalorverdaderodel
mensurando.(NMXCH152IMNC2005)

EjemplodeExactituddemedicin.

EXACTITUD

ERROR DE MEDIDA

ERROR ALEATORIO

ERROR SISTEMATICO

PRECISIN

VERACIDAD

Relacin entre los distintos tipos de error y los correspondientes

conceptos cualitativos

 Incertidumbre.

Intervalodentrodelcualseespera
queseencuentrelacantidad
medida,teniendoencuentatodas
lasfuentesdeerror.
Incertidumbreestndar(u).
1DS
Incertidumbreexpandida(U).
U=u xk
IncertidumbreCombinada(Uc).
Errorcuadrticomedio(ECM).

 Incertidumbredemedicin. Parmetro
asociadoalresultadodeunamedicinque
caracterizaladispersindelosvaloresque
podranrazonablemente,seratribuidosal
mensurando.(NMXCH152IMNC2005)

VRS

O
media

O
O
O

OO

VRI

Incertidumbredemedicin.

O
O

Aplicacindelaverificacin
Objetivo
Verificareldesempeodelmtodoanaltico
paralacuantificacindeAc.rico enun
equipoautomatizadoconformealo
establecidoenlaGuadeValidacinde
mtodoscuantitativos.

Caractersticasdelreactivo
IntervaloBiolgicodeReferencia:
2,0a7,0mg/dL (hombre).
2,0a5,0mg/dL (mujeres).
Reproducibilidad:
Nivel:3,7mg/dL,DS: 0,23mg/dL,CV%:0,61
Nivel:6,2mg/dL,DS: 0,37mg/dL,CV%:0,60
Nivel:10,0mg/dL,DS: 1,60mg/dL,CV%:1,60
Recuperacin:
Entre97a101%paraunniveldeUricemia de10
mg/dL.

Lmitededeteccin:
Enespectrofotmetroelestndarde10,0mg/dL
proporcionaunalecturaaproximadade0,290
D.O.
Loquesignificaqueelcambiomnimode
concentracindetectableenesascondiciones
para0,001D.O.ser aproximadamentede0,03
mg/dL.
Linealidad:
Lareaccineslinealhasta20mg/dL

Linealidad
VERIFICACION DE LA LINEALIDAD DEL
AC. URICO

No.

Dilucin %

Concentracin
minima y
maxima
(mg/dL)

20

25

8.66

10

1.34

0.13

50

4.57

0.43

0.09

75

2.28

2.5

0.22

0.09

100

1.21

1.25

0.04

0.03

Promedio

0.08

1.25

Valor
obtenido
mg/dL

Valor
Teorico (X)
mg/ dL

Sesgo

% Error

17.83

20

2.17

0.11

[ ] mg/ dL Ac. Urico

Grafico de Linealidad
20.00

17.83

15.00
10.00

8.66

5.00
2.28

1.21

0.00
0

4.57

20

40

60

80

Dilucin
Ensayo de Linealidad

100

120

Datosdela
CorrelacinLineal

Valor obtenido
mg/dL

Regresion Lineal
Constante [A]

0.060

coeficiente de
regresion [b]

0.884

coeficiente de
correlacin [r]

0.999

coeficiente critico
de correlacion [r2]

0.999

Ecuacin de la
recta

y = (0.884)x + (0.60)

r2 = 0.999

Valor obtenido [ ] mg/dL

Ac. Urico

Grafico de Linealidad
20.00
15.00
10.00
y = (0.884)x + (0.60)
r2 = 0.999

5.00
0.00
0

10

15

20

Valor asignado [ ] mg/dL Ac. Urico

Ensayo de Linealidad

25

Criteriosdeaceptabilidad
Calcularlapendiente(1)ylaordenadaal
origen(0).
Compararelsesgooelporcentajede
errorparacadadilucinycompararcon
elfabricante.
Tomarladecisindeaceptarorechazar.

Decisin
Elmtodoanalticoenlascondicionesdel
optimasdellaboratoriopresentaunrango
linealconfiablede1,12a17,83mg/dL.
Elcoeficientedecorrelacinlineal(r2)de
0,999 loqueindicaqueelintervalo
evaluado,lafuncindecalibracines
lineal.

VERIFICACION DE LA LINEALIDAD DEL AC. URICO

No.

Dilucin
%

Valor 1

Valor 2

Valor 3

Media

DS

17.50

18.00

18.00

17.83

0.24

25

8.50

9.00

8.50

8.66

0.24

50

4.50

4.70

4.50

4.57

0.09

75

2.30

2.25

2.30

2.28

0.02

100

1.25

1.20

1.17

1.21

0.03

Promedi
o

0.08

 Alcompararladesviacinestndardecada
dilucinseobservaunpromediode0,08.
El%Errornosuperael0,08%.
Porloqueelrangoevaluadoparaelmtodo
eslinealsegnloestablecidoporel
fabricante,yaqueaconcentracionesbajas
permiteunadesviacinde 0,23mg/dLy
altasa 1,60mg/dL.

Precisin
SueroControldeAc.
ricode5,25y9,01
mg/dL.
20datoscorrida
intrada.
Secalcula:
media
desviacinestndar
%delcoeficientede
variacin

No. de Lectura

Valor Asignado

Ac. Urico
(mg/dL)
Normal

Ac. Urico
(mg/dL)
Patologico

5.25

0.91

5.1587756

8.98855357

DS

0.082078268

0.11357817

CV%

1.591041645

1.26358669

%Error relativo

1.737607617

0.23802924

%Recobro

98.26239238

99.7619708

 DeacuerdoconCLIAparaimprecisin
intraserialointrada,laDSobtenidadebeser
igualomenora delErrorTotalpermitido.
ParaAc.ricoelerrortotalpermitido 5%.
DSIntrada 0,25ET, 1,25%
Sustituyendo
SueroNormal:0,082 1,25%
SueroPatolgico:0,113 1,25%

Veracidad
Laveracidaddelmtodosepuedeestimarpormediodel
errorrelativo.
%deErrorrelativo=[Valorreal Valordelamedicin ]x100
Valorreal

Criterio:
Elvalordelerrorrelativoseamenoroigualalreportado.
Resultados:
SueroNormal:1,73%
SueroPatolgico:0,23%

La veracidad del mtodo se puede estimar por medio del

calculo del porcentaje de recuperacin.
% Recuperacin =

[___Valor obtenido___] x 100

Valor de referencia

Criterio:
El % de recuperacin sean menor o igual al
reportado por el fabricante.
Resultados:
Intervalo del fabricante de 97 al 101 %
Suero Normal:
98,26 %
Suero Patolgico: 99,76 %

Incertidumbre

Mtodoenzimticoparalacuantificacinde
cidoricoespectrofotomtricoconuricasa.
Empleandouncalibradorconunvalorde10
0.005mg/dLconunfactordecoberturak=2
paraunniveldeconfianzadel95%.

Componentesdelaincertidumbre

Variabilidadpremetrolgica.
Incertidumbredelvalordelcalibrador.
Magnitudesinfluyentesendgenas.
Imprecisininterdiaria.

Variabilidadpremetrolgica

Elconjuntodeactividadesrealizadasdesdela
tomadelamuestrahastaquelamuestrade
sueroestalistaparalamedicinprovocaun
coeficientedevariacinpremetrolgicade
0,8%.Estavariabilidadaplicadaalresultado
obtenido(5,25mg/dL)correspondeauna
incertidumbreestandarde0,04mg/dL.

Incertidumbredelvalordelcalibrador

Elvalordelcalibradoresde10mg/dLyla
incertidumbreexpandidaesde0,005mg/dL.
Porlotanto,laincertidumbreestndar
relativadelvalorasignadoalcalibradores
0.05%,queaplicadoalresultadoobtenido
(5,25mg/dL)correspondeauna
incertidumbreestndarde0,002mg/dL.

Magnitudesinfluyentesendgenas
Segnelfabricantedelosreactivoselcriterio
paraaceptarqueunaconcentracinde
bilirrubinas,cidoascrbicoobromurode
hioscinaenelplasmaproduzcaunainterferencia
significativaesquenoaltereelvalordel
mensurandoen 10%.
Losposiblescambiosdelvalorverdaderodel
mensurandoestarnenelintervalo[0%;10%]
[10%;0%],aunqueesmsprobablequeest
mscercade0%quedel10% del0%.

Considerandounadistribucintriangular
rectangular:u=[(ba)2/18]0,5
dondeaybson,respectivamente,loslimites
inferiorysuperiordelintervalo;enestecaso:
u=[(100)2/18]0,5 =2,4%
queaplicadoalresultadode5,25mg/dL,
correspondea0,126mg/dL;ycomoestoes
aplicableatresmagnitudesinfluyentes:
Uc =[3X(0,126mg/dL)2 ]0,5=0,027mg/dL

Imprecisininterdiaria
Esteprocedimientodemedidatieneun
comportamientoheterocedsticoconun
coeficientedevariacinmetrolgico,
aproximadamenteconstantealolargodel
intervalodemedida,igualal1,6%.Esta
imprecisininterdiariaaplicadaalresultado
5,25mg/dLyexpresadacomoincertidumbre
estndar,correspondea0,08mg/dL.

Estimacindelaincertidumbre
uc =(0,042 +0,0022+0,0272 +0,082)0,5=
0,047mg/dL
U=uc xk=0,047mg/dLx2=0,094mg/dL
Resultado:
5,25 0,094mg/dL
Intervalo:
5,15a5,34mg/dL

Datosdelaverificacin
VerificacindelMtodoenzimticode
uricasaparaladeterminacindecidorico.
Linealidad:
Elmtodoeslinealde1,2a17.8mg/dL
Precisin:
SueroNormal:DS=0,08;CV=1,59%
SueroPatolgico:DS=0,11;CV=1,26%

 Veracidad:
ErrorRelativo
SueroNormal:1,73%
SueroPatolgico:0,230
%
Recuperacin
SueroNormal:98,26%
SueroPatolgico:99,76
%

Incertidumbre:
U=0,094mg/dL
Resultadodela
muestra:
5,25 0,094mg/dL
Intervalo:
5,15a5,34mg/dL

Criteriosdeevaluacindela
normaNMXEC15189IMNC
2008/ISO15189:2007
MP-FE009-00
Entrada en vigor 2009-05-08

Requisitos tcnicos

Requisitos tcnicos

Requisitos tcnicos

Requisitos tcnicos

MUCHASGRACIAS