Introduccin.

En el presente trabajo tratar acerca de la determinacin de manganeso a

nivel de trazas. Para determinar este elemento a tal concentracin es
necesario utilizar mtodos instrumentales, con los que debemos tener mucho
trabajo a la hora de trabajar por el manejo de instrumentos de alta precisin.
El mtodo por excelencia

es el espectrofotomtrico, dentro del que

estudiaremos la espectrofotometra de absorcin atmica uv- visible y tambin

la de espectrometra de absorcin atmica, mtodo diferente al anterior.
Ambos mtodos poseen gran sensibilidad, lo que es bsico para trabajar a
nivel de trazas. El manganeso es un metal muy importante que se utiliza en
una gran variedad de aplicaciones diferentes, tanto a leyes altas como a ppm,
a esta ltima concentracin lo podemos encontrar en aceros y aguas, las que
sern utilizadas para el desarrollo del informe.
La presente monografa se enfocar en explicar cada uno de los mtodos,
fundamentarlos y sealar como realizarlos.

Dedicatoria

Dedico el presente a trabajo a

mi familia en especial a mis,
quienes da a da me alientan a
superarme .y dar lo mejor de
m.

Marco terico espectrometra de absorcin atmica a la

llama.
Los mtodos espectromtricos son un amplio grupo de mtodos analticos que
se basan en las espectroscopias atmica y molecular. La espectroscopia es un
trmino general para la ciencia que trata de las distintas interacciones de la
radiacin con la materia. Histricamente las interacciones de inters se
producan entre la radiacin electromagntica y la materia, sin embargo, ahora
el termino espectroscopia se ha ampliado para incluir las interacciones entre la
materia y otras formas de energa.
Ejemplos de ellos son las ondas acsticas y los haces de partculas como
iones o electrones. La espectrometra y los mtodos espectromtricos hacen
referencia a la medida de la intensidad de la radiacin mediante un detector
fotoelctrico o con otro tipo de dispositivo electrnico.
Teora sobre Absorcin Atmica.
El principio en el cual se basa la espectroscopia de absorcin atmica (E.A.A.)
es el siguiente:
La muestra es aspirada y atomizada a travs de una llama; mediante un
monocromador se dirige un rayo de luz a travs de la llama y sobre un detector
se mide la cantidad de luz absorbida.
La absorcin depende de los tomos libres no excitados, pero en general la
relacin entre tomos no excitados y tomos excitados, en un momento
determinado, es muy alta. Como la longitud de onda del rayo de luz es
caracterstica solamente de cada metal por determinar, la energa luminosa
absorbida por la llama es una medida de la concentracin del metal en la
muestra.
Cuando a un tomo se le suministra energa suficiente para que sus electrones
de la capa exterior salten a un nivel de mayor energa, se produce una
absorcin de luz que le permite permanecer en un estado llamado excitado.
E + energa = E excitado.
Una vez que el electrn alcanza un nivel superior de energa, permitiendo la
existencia del tomo excitado, queda en capacidad de regresar a la capa
externa, o sea retornar a su nivel normal, emitiendo una energa igual a la
absorbida cuando fue excitado.
E excitado = E + energa

La atomizacin de la solucin sobre una llama permite eliminar sustancias

interferentes que podran acompaar los iones que se quieren analizar. La
fuente de luz facilita la irradiacin de los tomos con luz de longitud de onda
igual a la requerida para excitarlos y de esta manera la luz absorbida es
proporcional a la concentracin del metal.
En la siguiente figura se muestra ms con exactitud el proceso de atomizacin
de la muestra al momento de ser aspirada.

Figura 1. Procesos que tienen lugar en la atomizacin

La fuente de luz emite un rayo de luz intensa y estable, de una longitud de

onda determinada; cada elemento que se analiza posee una longitud de onda
caracterstica, la cual absorber fcilmente; por ellos para cada elemento debe
usarse una fuente diferente de luz, lo cual constituye una desventaja del
mtodo.
Inicialmente se hace pasar el rayo de la luz a travs de la llama sin muestra y
luego con muestra. Como la absorcin de luz es proporcional a la
concentracin del metal, la disminucin en intensidad observada por el aparato
permite medir la concentracin del metal en la muestra ya sea directamente o
por comparacin con curvas de calibracin preparadas con anterioridad.6
Los mtodos cuantitativos basados en la absorcin requieren de dos medidas
de potencia: una, antes de que el haz de luz haya pasado a travs del medio
quecontiene el analito Po y la otra, despus P. la transmitancia y la
absorbancia son La fuente de luz emite un rayo de luz intensa y estable, de
una longitud de onda determinada; cada elemento que se analiza posee una
longitud de onda caracterstica, la cual absorber fcilmente; por ellos para
cada elemento debe usarse una fuente diferente de luz, lo cual constituye una
desventaja del mtodo.

Inicialmente se hace pasar el rayo de la luz a travs de la llama sin muestra y

luego con muestra. Como la absorcin de luz es proporcional a la
concentracin del metal, la disminucin en intensidad observada por el aparato
permite medir la concentracin del metal en la muestra ya sea directamente o
por comparacin con curvas de calibracin preparadas con anterioridad.
Los mtodos cuantitativos basados en la absorcin requieren de dos medidas
de potencia: una, antes de que el haz de luz haya pasado a travs del medio
que contiene el analito Po y la otra, despus P. la transmitancia y la
absorbancia son los dos trminos que se utilizan ampliamente en la
espectrometra de absorcin y se relacionan por la razn Po y P.
La velocidad de desplazamiento de la energa de un haz de energa radiante,
se denota con el smbolo Po para el rayo incidente y P para la cantidad de
energa que queda sin absorber despus de haber pasado la muestra o
material absorbente. La relacin del poder de radiacin transmitido por la
muestra al poder de radiacin incidente en la misma es la Transmitancia (T).
T=

P
P0

El Logaritmo (base 10) de la reciproca de la transmitancia es la Absorbancia

(A):
A=log 10 T =log 10

1
T

La ley fundamental que rige la fotometra de absorcin se Llama ley de Beer.

Para una radiacin monocromtica, la absorbancia es directamente
proporcional al camino ptico b a travs del medio y la concentracin C de la
especie absorbente.
Estas relaciones estn dadas por:
A= a b C
Donde a es una constante de proporcionalidad denominada absortividad. La
magnitud de a claramente depender de las unidades utilizadas para b y C.
con frecuencia para disoluciones de una especie absorbente, b se da en
centmetros y C en gramos por litro. Las unidades de la absortividad en ese
caso son L g-1 cm-1.

Esquemticamente, se muestra a continuacin una figura de las partes que

componen un espectrofotmetro de absorcin atmica.

Instrumentacin.
Los instrumentos para espectroscopia de absorcin atmica consisten en una
fuente de radiacin, una zona de muestra, un selector de longitud de onda, un
detector y un procesador de la seal y de la lectura de salida. La zona de
muestra en los instrumentos de absorcin atmica es el atomizador que
contiene la muestra gaseosa atomizada.

En la espectroscopia de absorcin atmica, se hace pasar por la llama la

radiacin de una fuente externa de luz, que emite la lnea espectral
correspondiente a la energa necesaria para una transicin electrnica del
estado normal a un estado excitado. Los gases de la llama se consideran como
un medio que contiene tomos libres y no excitados, capaces de absorber
radiacin de una fuente externa, cuando dicha radiacin corresponde
exactamente a la energa requerida para una transicin del elemento
investigado de un estado electrnico normal a un estado mayor de excitacin.
La radiacin no absorbida pasa entonces a travs del monocromador, que asla
la lnea espectral excitante de la fuente de luz y se enva hacia el detector. La
absorcin de radiacin de la fuente de luz depende de la poblacin del estado
normal, la cual es proporcional a la concentracin de la solucin rociada en la
llama. La absorcin se mide por medio de la diferencia entre las seales
transmitidas en presencia y ausencia del elemento analizado.
Los mtodos espectromtricos requieren los siguientes componentes:
reguladores de presin (compresores), rotmetros para el combustible y los
gases oxidantes, sistema de quemador y nebulizador; sistema ptico y
detectores fotosensibles; el amplificador y el sistema de lecturas con sus
respectivas fuentes de energa. Adems para la absorcin atmica, se necesita
una fuente de luz apropiada paracada elemento que se vaya a determinar.

Reguladores de Presin y Rotmetro.

Para mantener un ambiente trmico constante en la llama, es imperativo que
las presiones de los gases y los flujos de los mismos se mantengan constantes
mientras se usa el espectrofotmetro de llama. Con los instrumentos de haz
doble, este requisito ya no es tan necesario. Se deben instalar reguladores de
presin doble de doble diafragma (de 10 lb/plg2 para el combustible y de 30
lb/plg2 para el suministro de oxidante), seguidos por un rotmetro y una vlvula
de aguja en las tuberas que van de los cilindros de gas al conjunto de
nebulizador y quemador.
Los flujos normales varan entre 1 a 4 litros por minuto. El conocimiento de los
flujos individuales de combustible y el oxidante permite al operador seleccionar
varias mezclas que van desde llamas pobres hasta llamas ricas en
combustible.

Sistema Nebulizador-Quemador
El componente ms importante en cualquier espectrmetro de absorcin de
llama o absorcin atmica es el sistema del nebulizador y el quemador. Este
sistema transforma a la sustancia de la solucin en vapor atmico. No debe
existir efecto de memoria; es decir, el contenido de una muestra no debe

afectar el resultado de otra muestra. Los otros requisitos del sistema son:
facilidad de limpieza, resistencia a la corrosin y facilidad de ajuste.
Debido a que la regin optima de la llama que se vaya a usar varia para
diferentes elementos, es esencial que la altura del quemador sea ajustable
para asegurar la mxima seal de absorcin.
El quemador es un quemador de flujo laminar o de premezclado. El aerosol se
produce dentro de una cmara de mezclado donde se separan las gotas
gruesas de las finas. Las gotas finas son prcticamente una neblina, se
mezclan con los gases de la llama y despus se vaporizan. (Ver figura 1)
La cabeza del quemador consiste en una ranura donde arde la llama para
absorcin atmica la cabezas de los quemadores son alargadas para obtener
la mxima cantidad de gases de la llama en la trayectoria de la luz. Este tipo de
quemador es apropiado para llamas con velocidades de quemado bajas, tales
como aire propano, aire acetileno, xido nitroso acetileno.
El quemador es por lo regular una ranura de 10 cm, sencilla o triple, de 0.38 a
0.6 mm de ancho en una cabeza fabricada de aluminio o de acero inoxidable;
la ranura se acorta a 5 cm cuando se emplea una llama de xido nitroso
acetileno.
Para prevenir la reversin hacia el quemador y una explosin en la cmara de
mezclado, la velocidad de corriente de la mezcla de combustible y oxidante a
travs del quemador debe ser por lo menos igual a la velocidad de quemado;
sin embargo, para asegurarse de contar con un margen de seguridad y
conseguir una llama razonablemente firme, la velocidad de corriente de los
gases debe ser varias veces mayor que la velocidad de quemado.

Fuentes de luz para Absorcin Atmica.

Para la absorcin atmica, las lneas espectrales de resonancia deben ser
angostas comparadas con el ancho de la lnea de absorcin que se vaya a
medir.
La luz de un elemento especfico no debe sufrir interferencia de otras lneas
espectrales no resueltas por el espectrmetro, tales como las lneas que se
originan de elementos de impurezas, materiales de los electrodos o de gases
portadores. Todas las fuentes de luz deben tener un calentamiento previo, para
que su seal de salida sea constante, de aproximadamente de 15 a 30
minutos.

Sistema ptico.
La funcin del sistema ptico consiste en seleccionar una cierta lnea en el
espectro de emisin y aislarla de las dems lneas. Es posible lograr un mejor
aislamiento de la energa espectral con un prisma o un monocromador de
rejilla, el cual tambin produce una seleccin continua de longitudes de onda y
una oportunidad para medir la radiacin de fondo adyacente a una lnea
analtica. La anchura de la rendija espectral del monocromador est
determinada por el ancho de la lnea de emisin de la fuente. El monocromador
se usa solo para aislar la lnea deseada de otras lneas de emisin y para
reducir notablemente el flujo total de luz que llega al detector. Cuando es
factible, las rendijas se pueden ensanchar para permitir la entrada de ms luz,
esto se traduce en una mejora en la precisin y en el lmite de deteccin.

Sistema de Fotodetector, Amplificador y de

Lectura.
El detector ideal debe tener una elevada sensibilidad, una elevada relacin
seal/ruido y una respuesta constante en un intervalo considerable de
longitudes de onda. Adems, debe tener un tiempo de respuesta rpido y una
seal de salida igual a cero en ausencia de iluminacin. Por ltimo, la seal

10

elctrica producida por el transductor debera ser directamente proporcional a

la potencia radiante P.
Todos los detectores de fotones (tambin denominados detectores
fotoelctricos) tienen una superficie activa que es capaz de absorber radiacin.
Para una alta sensibilidad y precisin, es esencial contar con un fototubo
multiplicador y su correspondiente suministro de energa. Se requieren fuentes
de energa estables. Las fluctuaciones de corta duracin se pueden manejar
algunas veces con un sistema integrador en el cual la seal de salida del
detector se alimenta ya sea a un condensador por un tiempo fijo (unos 30
segundos), midindose la seal resultante, o a un registrados durante 1 a 2
minutos, promediando los trazos. Los instrumentos de lectura pueden ser
anlogos o digitales.

Interferencias en Espectrometra de Absorcin Atmica.

En los mtodos de absorcin atmica se presentan dos tipos de interferencias.
Las interferencias Espectrales se producen cuando la absorcin o emisin de
una especie interferente se solapa o aparece muy prxima a la absorcin o
emisin del analito, de modo que su resolucin por el monocromador resulta
imposible. Las interferencias qumicas se producen como consecuencia de
diversos procesos qumicos que ocurren durante la atomizacin y que alteran
las caractersticas de absorcin del analito.

Interferencias Espectrales.
Dado que las lneas de emisin de las fuentes de ctodo hueco son muy
estrechas, es rara la interferencia debida a la superposicin de las lneas. Para
que exista esta interferencia, la separacin entre las dos lneas tendra que ser
menor de aproximadamente 0.1 Armstrong (A).
Las interferencias espectrales tambin se producen debido a la presencia de
productos de combustin, que poseen bandas de absorcin anchas, o de
productos en forma de partculas que dispersan la radiacin. Ambos
disminuyen la potencia del haz transmitido y dan lugar a errores analticos
positivos. Cuando la procedencia de estos productos es la mezcla de
combustible y oxidante, se puede realizar fcilmente la correccin midiendo la
absorbancia de un blanco. Esta correccin es necesaria tanto en los
instrumentos de haz sencillo como en los de doble haz, ya que estos ltimos el
haz de referencia no pasa a travs de la llama.
Cuando la absorcin o la dispersin se deben a la matriz de la muestra,
entonces el problema es ms complicado. En este caso, la potencia del haz
transmitido, Po, se reduce por la presencia de los componentes de la matriz,
mientras que la potencia del haz incidente, P, no resulta afectada; por ello, se
produce un error positivo en la absorbancia y por consiguiente en la
concentracin.

11

Afortunadamente, en la atomizacin por llama las interferencias espectrales

que provienen de los componentes de la matriz no siempre se producen, y con
frecuencia se pueden evitar modificando los parmetros analticos, como la
temperatura y la relacin combustible/oxidante.

Interferencias Qumicas.
Las interferencias qumicas son ms comunes que las espectrales.
Frecuentemente sus efectos pueden minimizarse escogiendo las condiciones
de trabajo adecuadas.
El tipo ms comn de interferencia es probablemente el producido por aniones
que forman compuestos de baja volatilidad con el analito y reducen as su
velocidad de atomizacin, lo que origina resultados menores a los esperados.
En muchas ocasiones pueden eliminarse o atenuarse las interferencias debidas
a la formacin de especies poco voltiles aumentando la temperatura. Tambin
se pueden emplear agentes liberadores (buffers de ionizacin), que son
cationes que reaccionan preferentemente con el interferente e impiden su
interaccin con el analito.
Las posibles interferencias que se pueden presentar en el trascurso de la
validacin, pueden derivar de la matriz de la muestra puesto que se trata de
matrices complejas que pueden contener aparte de materia orgnica, partculas
que formen compuestos con el analito de inters e interfieran con la
cuantificacin del mismo, por lo que para evitar estas interferencias se sigue el
procedimiento descrito en la siguiente pgina de este documento con el fin de
cuantificar el analito en su totalidad.
En cuanto a interferencias fsicas o espectrales son pocas las posibilidades de
que se presenten este tipo de interferencias puesto que el equipo de absorcin
atmica cuenta con sistemas de correccin de fondo de doble haz el cual no
permite que cierta longitud de onda se encuentre cerca o se solape (se
sobreponga) sobre la longitud de onda correspondiente a cada analito y los
metales a analizar en esta validacin su correspondiente longitud de onda se
encuentran muy separadas por lo que no se corre riesgo de esta clase de
interferencia.

12

MATERIALES Y EQUIPOS.

Equipos.
Espectrofotmetro de Absorcin Atmica THERMO M SERIES
Lmpara de Ctodo Hueco del elemento a determinar.
Quemador de 100 mm.
Plancha de Calentamiento para digestin de muestras E & Q.
Agitador Magntico HEIDOLPH MR 3000.
Agitadores de Tefln.
Cabina Extractora de Gases C-180X.

Reactivos.
Patrn Estndar Certificado de 1000 mg/L del elemento a analizar
cidoNtrico grado Analtico al 65% (Concentrado).
Agua Destilada Acidulada.
Material de Vidrio.
Erlenmeyer Clase A de 100 mL.
Balones Aforados Clase A de 2000, 200, 100 y 50 mL.
Beakers de 250 y 100 mL.
Pipetas Aforadas de 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20 y 25 mL.
Pipetas Graduadas Clase A de 5 y 10 mL.
Probetas Graduadas Clase A de 50 y 100 mL.
Embudos Analticos.

PROCEDIMIENTO (Tratamiento de Muestra).

Preservacin de la Muestra.
. Limpiar cuidadosamente los recipientes para muestra con solucin jabonosa
no inica, libre de metales, enjuagar con agua de grifo y luego con agua
destilada acidulada.
. Las muestras de Agua (superficial, subterrnea, residual) deben ser
almacenadas en envases de Vidrio o Plstico.
. Tomada la muestra, Acidular con HNO3 hasta un pH menor a 2.
. Conservar la muestra despus de acidulada a 4 C.
. La preservacin de las muestras para anlisis de metales pesados dura 6
meses, analizar lo antes posible.
Tratamiento de Muestra.
Se hace con el objetivo de destruir la materia orgnica para poder obtener el
analito de inters libre de cualquier interferencia.
Varias tcnicas instrumentales requieren que las muestras tengan un trato
adecuado a niveles de trazas porque la variacin de la concentracin es muy
ancha por lo que se presenta un mtodo de acercamiento de anlisis a niveles

13

de concentracin altos > 1.0 mg/L y otro a niveles de trazas 0.1 mg/L del
analito de inters. Para el tratamiento de la muestra observar el siguiente
esquema:
Figura 6. Esquema general del tratamiento de muestra tomado del
SMWW, edicin 21, 2005.

14

Validacin de Manganeso (Mn).

Parmetros instrumentales para la determinacin de Manganeso:
Longitud de Onda ():
2 79.5 nm.
Ancho de Banda:
0.2 nm.
Corriente de lmpara (CH):
75% uso normal.
Correccin de Fondo: Lmpara de Deuterio (D2).
Tipo de llama:
Aire/Acetileno.
Intervalo flujo de combustible:
0.9 a 1.2 L/min.
Curva de Calibracin de Manganeso (Mn).
Estandarizacin de la curva de calibracin definiendo rango de trabajo.
Curva de calibracin para Manganeso.

Altura del quemador:

7.8 mm.

Flujo de Gas (Aire/Acetileno): 1.3 L/min.

15

Sensibilidad.
Promedio de las pendientes de las curvas de calibracin.

Sensibilidad del mtodo: 0.017 mg/L de Mn.

Factor de respuesta de la concentracin del analito frente al mtodo.
Lmite de Deteccin Instrumental.
Datos para el lmite de deteccin.

16

Lmite de Cuantificacin.

Se comprob el lmite de cuantificacin midiendo diez rplicas de

concentracin arrojando los resultados dados en la siguiente tabla:
Lmite de Cuantificacin de 0.1 mg/L de Mn.

17

Se pasaron diez patrones de concentracin terica con el fin de determinar el

lmite de cuantificacin. Para el rango de trabajo establecido, el lmite de
cuantificacin que se obtuvo fue de 0.1 mg/L de Mn.
Parmetros Estadsticos de la Validacin de Manganeso (Mn).

18

Espectrometra ultravioleta-visible.
La espectrometra ultravioleta-visible o espectrofotometra UV-Vis implica la
espectroscopia de fotones en la regin de radiacin ultravioleta-visible. Utiliza
la luz en los rangos visible y adyacentes (el ultravioleta (UV) cercano y el
infrarrojo
(IR)
cercano.
En esta regin del espectro electromagntico, las molculas se someten a
transiciones
electrnicas.
Esta tcnica es complementaria de la espectrometra de fluorescencia, que
trata con transiciones desde el estado excitado al estado basal, mientras que la
espectrometra de absorcin mide transiciones desde el estado basal al estado
excitado.

APLICACIONES
La espectrometra UV/Vis se utiliza habitualmente en la determinacin
cuantitativa de soluciones de iones metlicos de transicin y compuestos
orgnicos muy conjugados.

Soluciones de iones metlicos de transicin.

Las soluciones de iones metlicos de transicin pueden ser coloreadas (es
decir, absorben la luz visible) debido a que los electrones en los tomos de
metal se pueden excitar desde un estado electrnico a otro. El color de las
soluciones de iones metlicos se ve muy afectado por la presencia de otras
especies, como algunos aniones o ligandos. Por ejemplo, el color de una
solucin diluida de sulfato de cobre es muy azul; agregando amonaco se
intensifica el color y cambia la longitud de onda de absorcin mxima.

Compuestos orgnicos.
Los compuestos orgnicos, especialmente aquellos con un alto grado de
conjugacin, tambin absorben luz en las regiones del espectro
electromagntico visible o ultravioleta. Los disolventes para estas
determinaciones son a menudo el agua para los compuestos solubles en agua,
o el etanol para compuestos orgnicos solubles. Los disolventes orgnicos
pueden tener una significativa absorcin de UV, por lo que no todos los

19

disolventes son adecuados para su uso en espectrometra UV. El etanol

absorbe muy dbilmente en la mayora de longitudes de onda. La polaridad y
el pH del disolvente pueden afectar la absorcin del espectro de un compuesto
orgnico. La tirosina, por ejemplo, aumenta su mximo de absorcin y su
coeficiente de extincin molar cuando aumenta el pH de 6 a 13, o cuando
disminuye
la
polaridad
de
los
disolventes.
Aunque los complejos de transferencia de carga tambin dan lugar a colores,
stos son a menudo demasiado intensos para ser usados en mediciones
cuantitativas.
La ley de Beer-Lambert establece que la absorbancia de una solucin es
directamente proporcional a la concentracin de la solucin. Por tanto, la
espectrometra UV/VIS puede usarse para determinar la concentracin de una
solucin. Es necesario saber con qu rapidez cambia la absorbancia con la
concentracin. Esto puede ser obtenido a partir de referencias (las tablas de
coeficientes de extincin molar) o, con ms exactitud, determinndolo a partir
de
una
curva
de
calibracin.
El espectrofotmetro UV/Vis puede utilizarse como detector para la
Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (CLAR). La presencia de un analito
da una respuesta que puede ser proporcional a la concentracin. Para
resultados precisos, la respuesta del instrumento al analito debe compararse
con la respuesta a un estndar, lo que es muy similar al uso de curvas de
calibracin. La respuesta (por ejemplo, el pico de altura) para una
concentracin particular se conoce como factor de respuesta.

LEY DE BEER-LAMBERT
La espectrometra UV-Vis se utiliza con mayor frecuencia en forma cuantitativa
para determinar las concentraciones de especies absorbentes en solucin,
usando
la
Ley
de
Beer-Lambert:
donde A es la absorbancia medida, I0 es la intensidad de la luz incidente a una
determinada longitud de onda, I es la intensidad de transmisin, L la longitud de
ruta a travs de la muestra, y c la concentracin de las especies absorbentes.
Para cada especie y longitud de onda, es una constante conocida como
absortividad molar o coeficiente de extincin. Esta constante es una propiedad
fundamental molecular en un solvente dado, a una temperatura y presin

20

particular, y tiene como unidades 1/M * cmo, a menudo, U/M * cm.

La absorbancia y extincin a veces son definidas en trminos de logaritmo
natural
en
lugar
de
logaritmo
de
base
10.
La ley de Beer-Lambert es til para la caracterizacin de muchos compuestos,
pero no sirve como relacin universal para la concentracin y absorcin de
todas las sustancias. En molculas complejas de gran tamao, como los tintes
orgnicos (Xylenol Naranja o Rojo Neutro, por ejemplo), a veces se encuentra
una relacin polinmica de segundo orden entre la absorcin y la
concentracin.

ESPECTROFOTMETRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE
El instrumento utilizado en la espectrometra ultravioleta-visible se llama
espectrofotmetro UV-Vis. Mide la intensidad de luz que pasa a travs de una
muestra (I), y la compara con la intensidad de luz antes de pasar a travs de la
muestra (Io). La relacin I / Io se llama transmitancia, y se expresa
habitualmente como un porcentaje (%T). La absorbancia (A) se basa en la
transmisin:

A = - log (%T)

Las partes bsicas de un espectrofotmetro son una fuente de luz (a menudo

una bombilla incandescente para las longitudes de onda visibles, o una
lmpara de arco de deuterio en el ultravioleta), un soporte para la muestra, una
rejilla de difraccin o monocromador para separar las diferentes longitudes de
onda de la luz, y un detector. El detector suele ser un fotodiodo o un CCD. Los
fotodiodos se usan con monocromadores, que filtran la luz de modo que una
sola longitud de onda alcanza el detector. Las rejillas de difraccin se utilizan
con CCDs, que recogen la luz de diferentes longitudes de onda en pxeles.
Un espectrofotmetro puede ser nico o de doble haz. En un instrumento de un
solo haz (como el Spectronic 20), toda la luz pasa a travs de la clula
muestra. La Io debe medirse retirando la muestra. Este fue el primer diseo, y
todava est en uso en la enseanza y laboratorios industriales.
En un instrumento de doble haz, la luz se divide en dos haces antes de llegar a

21

la muestra. Un haz se utiliza como referencia, y el otro haz de luz pasa a travs
de la muestra. Algunos instrumentos de doble haz tienen dos detectores
(fotodiodos), y el haz de referencia y el de la muestra se miden al mismo
tiempo. En otros instrumentos, los dos haces pasan a travs de un bloqueador
que impide el paso de un haz. El detector alterna entre la medida del haz de
muestra
y
la
del
haz
de
referencia.
Las muestras para espectrofotometra UV-Vis suelen ser lquidas, aunque la
absorbancia de los gases e incluso de los slidos tambin puede medirse. Las
muestras suelen ser colocadas en una clula transparente, conocida como
cubeta. Las cubetas suelen ser rectangulares, con una anchura interior de 1
cm. Esta anchura se convierte en la longitud de ruta, L, en la Ley de BeerLambert. Tambin se pueden usar tubos de ensayo como cubetas en algunos
instrumentos. Las mejores cubetas estn hechas con cuarzo de alta calidad,
aunque son comunes las de vidrio o plstico. El cristal y la mayora de los
plsticos absorben en el UV, lo que limita su utilidad para longitudes de onda
visibles.

ESPECTRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE

Un espectro ultravioleta-visible es esencialmente un grfico de absorbancia de

luz frente a una longitud de onda en el rango del ultravioleta o la luz visible.
Este espectro puede ser producido directamente con los espectrofotmetros
ms sofisticados, o bien pueden registrarse los datos de una sola longitud de
onda con los instrumentos ms simples. La longitud de onda se representa con
el smbolo . Del mismo modo, para una determinada sustancia, puede hacerse
un grfico estndar del coeficiente de extincin () frente a la longitud de onda
(). Este grfico estndar sera efectivamente "la concentracin corregida" y,
por tanto, independiente de la concentracin. Para una sustancia determinada,
la longitud de onda en la cual se produce el mximo de absorbancia en el
espectro

se

llama

max,

se

pronuncia

"lambda-max".

Las reglas de Woodward-Fieser son un conjunto de observaciones empricas

que pueden utilizarse para predecir max, la longitud de onda de la absorcin
UV-Vis, para compuestos orgnicos conjugados como dienos y cetonas.

22

Las longitudes de onda de los picos de absorcin pueden correlacionarse con

los tipos de enlace en una determinada molcula, y son valiosos para
determinar los grupos funcionales dentro de la molcula. La absorcin UV-Vis
no es, sin embargo, una prueba especfica para ningn compuesto
determinado. La naturaleza del disolvente, el pH de la solucin, la temperatura,
la concentracin de electrolitos, y la presencia de sustancias interferentes
pueden influir en los espectros de absorcin de los compuestos, as como las
variaciones en la anchura de la hendidura (ancho de banda efectivo) en el
espectrofotmetro.

FUNDAMENTO
El manganeso en pequeas cantidades se determina oxidndolo a cido
permangnico:
Mn2+ + Oxidante MnO4- + Productos reducidos
2Mn2+ 5IO4- +3H2O2MnO4 -+ 5IO3- +6H+
El anin del cido permangnico (permanganato) presenta un color violeta
intenso en disolucin y, por lo tanto, puede ser medido por espectrofotometra
visible.
Los oxidantes comnmente empleados son: bismutato de sodio, dixido de
plomo con ntrico, persulfato de sodio o amonio en presencia de nitrato de plata
y peryodato de potasio.

Determinacin de manganeso en acero.

Material:
1 Erlenmeyer de 250 mL
1 probeta de 50 mL

23

1 hornillo
1 pipeta de 50 mL, 1 de 25 mL y 1 de 10mL
3 matraces aforados de 100 mL y 5 de 50 mL
2 vidrios de reloj

Reactivos y Muestras:

Patrn de Mn de 100 mg/L (0,2877 g KMnO4/L)

Disolucin de HNO3 (1:3)

Persulfato amnico

Disolucin de sulfito sdico al 10 % (1 g Na 2SO3 en 9 mL de agua)

Disolucin de cido fosfrico al 85 %

Metaperyodato de potasio

Muestra de acero

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1.- Preparar 5 disoluciones patrn para realizar la curva de calibrado, a partir
del patrn de Mn de 100 mg/L, utilizando los matraces de 50 mL. Las
concentraciones deben estar en el rango de 1-10 mg/L, (1, 3, 5, 7, 10).
2.- Pesar 0,2000 g de muestra y transferirlos a un matraz Erlenmeyer de 250
mL. Agregar 50 mL de cido ntrico (1:3), calentar hasta disolucin y dejar
hervir unos minutos hasta expulsar los xidos de nitrgeno.

24

A continuacin, aadir 1 g de persulfato de amonio y hervir durante 10 minutos.

Si aparece color prpura o se forman xidos de manganeso, agregar gota a
gota una disolucin de sulfito de sodio al 10 % hasta que se aclare, y dejar
hervir 5 minutos para expulsar el SO2.
Dejar enfriar y pasar la muestra a un matraz aforado de 100 mL, aadir 20 mL
de cido fosfrico (85%) y enrasar con agua destilada.
3.- Tomar 2 porciones de 50 mL de la muestra tratada. Agregar a una de ellas
0,5 g de metaperyodato de potasio y hervir durante 5 minutos. La otra porcin
se tomar como blanco, aforando previamente ambas disoluciones a 100 mL
antes de medir las absorbancias.
4.- Realizar un espectro de cualquiera de los patrones del calibrado para
determinar la longitud de onda mxima.
5.- Medir la absorbancia de las 5 disoluciones patrn y construir la recta de
calibrado. Medir la absorbancia de la disolucin problema y del blanco y
calcular la concentracin de manganeso en la muestra utilizando la recta de
calibrado. Tener en cuenta las diluciones en los clculos y expresar el resultado
en porcentaje en peso.

PRECAUCIN:
.El tratamiento de la muestra de acero ha de realizarse en vitrina.
Vais a utilizar cidos concentrados para disolver la muestra, que son muy
corrosivos para la piel y la ropa. Tened mucho cuidado en el manejo de estas
sustancias.
Al agregar el persulfato y el peryodato, aadid unos cristales y dejad la
disolucin tranquila antes de agregar el resto. Tened cuidado. Estas
disoluciones tienen una cierta tendencia a entrar en erupcin.

25

 Informad de posibles derrames inmediatamente. Enjuagad la piel expuesta

con agua inmediatamente. Los humos producidos durante la etapa de
disolucin, tambin son perjudiciales (vapores marrones de NO 2).
Usad guantes a lo largo de todo el experimento.

RESIDUOS:
Cualquier disolucin que contenga manganeso ser depositada en el
correspondiente recipiente de recogida de residuos al final del experimento.
El exceso de reactivos slidos (KIO 4 o (NH4)2S2O8) ser recogido por
los docentes al final del experimento. Mantened estos reactivos bien
etiquetados y separados.

AGUA POTABLE. DETERMINACIN DEL MANGANESO

TOTAL.

INTRODUCCION

El manganeso en aguas superficiales se encuentra en suspensin, en estado

cuatrivalente y en forma trivalente, como complejo soluble relativamente
estable. En aguas profundas, debido a la ausencia de oxgeno en forma soluble
en estado divalente, en las plantas de tratamiento, todo o parte del manganeso
puede estar en un estado de oxidacin mayor.

26

1. OBJETO
1.1 Establecer el mtodo para determinar el contenido total de manganeso en
agua potable. La determinacin no hace distincin entre los diferentes estados
de oxidacin en que puede encontrarse el manganeso.
2. FUNDAMENTO
2.1 La oxidacin de los compuestos solubles de manganeso a la forma de
permanganato se realiza con persulfato en presencia de nitrato de plata. El
color resultante es estable por 24 horas en presencia de exceso de persulfato y
ausencia de materia orgnica.
2.2 El uso de ion mercurio puede controlar la interferencia de una limitada
concentracin de ion cloruro.
3. CONSIDERACIONES GENERALES
3.1 Muestreo y almacenaje. El manganeso puede estar presente en forma
soluble en aguas neutras, el momento de la recoleccin, pero puede oxidarse a
estados ms altos, precipitando, o ser absorbido por las paredes del recipiente.
Hacer la determinacin de manganeso inmediatamente despus del muestreo.
Si la muestra va a ser almacenada, acidificar la muestra a pH <2 con cido
ntrico, el momento de la recoleccin.
3.2 Muestras que han sido expuestas al aire pueden dar resultados bajos,
debido a la precipitacin del dixido de manganeso (MnO2). Aadir a la
muestra una gota de agua oxigenada al 30%, (H2O2), despus de la adicin
del reactivo especial, para redisolver el precipitado.
3.3 El mnimo detectable de manganeso por el mtodo de oxidacin por
persulfato es de 210 g Mn/l cuando se usa una celda de 1 cm, y si se usa
una celda de 5 cm, es de 42 g Mn/l.
3.4 El procedimiento de la oxidacin con persulfato puede usarse en agua
potable con pequeas cantidades de materia orgnica, si el perodo de
calentamiento se aumenta despus de haberse aadido ms persulfato.

27

3.5 La interferencia debido a los cloruros puede prevenirse aadiendo 1 g de

sulfato de mercurio a una muestra de 50 cm3 que contiene 0,1 g de cloruro.
Los yoduros y bromuros, para no causar interferencia, deben estar presentes
slo en trazas.

4. EQUIPOS
4.1 Equipo colorimtrico. Se requiere uno de los siguientes:
4.1.1 Espectrofotmetro, para usar a 525 nm, con un trayecto de luz de 1 cm
por lo menos.
4.1.2 Fotmetro de filtro, con un filtro verde que tenga una transmitancia
mxima a 525 nm, con un trayecto de luz de 1 cm por lo menos.
4.1.3 Tubos Nessler, marcados, 100 cm3 forma alta.
4.2 Material de vidrio comn de laboratorio.
5. REACTIVOS
5.1 Reactivo especial. Disolver 75 g de sulfato de mercurio HgSO4, en 400
cm3 de cido ntrico concentra-do, y aadir 200 cm3 de agua destilada. Aadir
200 cm3 de cido fosfrico, H3PO4, al 85%, y 35 rng de nitrato de plata,
AgNO3 - Enfriar y diluir la solucin a 1 litro.
5.2 Persulfato de amonio, (NH4)2S2O8, slido.
5.3 Solucin estndar de manganeso. Preparar una solucin 0,1 N de
permanganato de potasio, por disolucin de 3,2 g de KMnO4 en agua destilada
y llevar a 1 litro. Guardar por varias semanas al amparo de luz o calentar por
varias horas a temperatura cercana al punto de ebullicin, luego, filtrar a travs
de un crisol de vidrio sinterizado y estandarizar con oxalato de sodio, de la
siguiente forma: pesar varias muestras de 100 a 200 mg; de Na2C2O4 con una
precisin de 0,1 mg y transferir a vasos de 400 cm 3. A cada vaso aadir 100
cm3 de agua destilada y agitar para disolver. Aadir 10 cm3 de

28

H2SO4 1 + 1, y calentar rpida- mente entre 90 y 95C. Titular rpidamente con

la solucin estandarizada de KMnO4, agitando continua-mente hasta un ligero
color rosado, punto final de la reaccin, persistente por lo menos durante 1
minuto. La temperatura no debe ser menor a 85C. Si es necesario, calentar el
vaso durante la titulacin; 100 mg de Na2C2O4 consumirn cerca de 15 cm3
de la solucin de KMnO4. Hacer un blanco con agua destilada y H2SO4 1+1
Normalidad del KMnO =
g Na2 C 2 O4
( AB)0.06701

Siendo:
A = cm3 de solucin usados en la titulacin de la muestra.
B = cm3 de solucin usada en la titulacin del blanco.
Calcular el valor promedio de varias titulaciones.
Calcular el volumen de esta solucin que se necesita para preparar 1 litro de
solucin para que 1,00cm3 =50,0

g, con la siguiente ecuacin:

A este volumen, aadir 2 a 3 cm3 de H 2SO4 y solucin de bisulfato de sodio,

NaHSO3, gota agota, con agitacin, hasta que el color desaparezca. Hervir
para remover el exceso SO2 de esta solucin y diluir para cuantificar pequeas
cantidades de manganeso.
5.4 Solucin estndar de manganeso, (mtodo alternativo). Disolver 1,000
g de manganeso metlico (99,8% de pureza) en 10 cm3 de HNO3 redestilado.
Diluir a 1 000 cm3 con HCI al 1% (V/V), 1 cm3 = 1,000 mg Mn. Diluir 10 cm3 a
200 cm3 con agua destilada; 1 cm3 = 0,05 mg Mn. Preparar diariamente la
solucin diluida.

29

5.5 Perxido de hidrogeno, H2O2, 30%.

5.6 Acido ntrico, HNO3, concentrado.
5.7 Acido sulfrico, H2SO4, concentrado.
5.8 Solucin de nitrato de sodio, disolver 5,0 g de NaNO2 en 95 cm3 de
agua destilada.
5.9 Oxalato de sodio, Na2C2O4, patrn primario.
5.10 Bisulfato de sodio. Disolver 10 g de NaHSO3 en 100 cm3 de agua
destilada.
6. PROCEDIMIENTO
6.1 A una alcuota conveniente de muestra aadir 5 cm3 del reactivo especial y
1 gota de H2O2.
6.2 Concentrar a 90 cm3 por ebullicin o diluir la muestra a 90 cm3.
6.3 Aadir 1 g de (NH4)2 S2Og, y llevar a ebullicin, hervir por 1 minuto; no
usar bao de agua.
6.4 Retirar de la fuente de calor y dejar reposar por 1 minuto; luego, enfriar bajo
el chorro de agua de la llave. La ebullicin demasiado prolongada produce
descomposicin del exceso de persulfato y, consecuentemente, prdida del
color del permanganato; el enfriamiento demasiado lento puede producir el
mismo defecto.
6.3 Diluir a 100 cm3 con agua destilada libre de substancias reductoras y
mezclar.
6.6 Determinar la absorbancia a 525 nm, usando el equipo colorimtrico
indicado en 4.1.1 y 4.1.2 y comparar con la curva obtenida en 7.3 o comparar
visualmente las muestras con patrones en los tubos Nssler que contengan de
5 a 100 g Mn/100 cm3 preparados segn 7.1.

30

6.7 La determinacin debe efectuarse por duplicado sobre la muestra

analizada.

7. CURVA DE CALIBRACION
7.1 Preparar patrones que contengan de 0....a 1 500 g Mn/100 cm3 de volumen
final, tratando varias cantidades de la solucin estndar de manganeso, en la
misma forma que la muestra, como se seala en 6.2 a 6.5.
7.2 Realizar las lecturas fotomtricas usando agua destilada como blanco.
7.3 Usando la longitud del trayecto de luz apropiada, de acuerdo a la Tabla 1,
realizar la curva de calibracin, concentracin de manganeso, versus
absorbancia de los patrones.

Rango de Mn

Trayecto de luz en cm.

5-200

15

20-400

50-1000

100-1500

31

8. CALCULOS
8.1 El contenido de manganeso se determina mediante la ecuacin siguiente:

m(en cm volumen final)

mg
Mn=
l
V

Siendo:
Mn = contenido de manganeso, en mg/I;
m = masa establecida mediante la curva de calibracin, en

g;

V = volumen de la muestra analizada, en cm 3.

9. ERROR ACEPTABLE
9.1 La diferencia entre los resultados de una determinacin efectuada por
duplicado no debe exceder del 3% del promedio de ambos valores; en caso
contrario, debe repetirse la determinacin.
10. INFORME DE RESULTADOS
10.1 Como resultado final, debe reportarse la media aritmtica de las
determinaciones en mg/l de muestra.
10.2 Debe indicarse el mtodo usado y el resultado obtenido; debe
mencionarse, adems, cualquier condicin no especificada en esta norma o

32

considerada como opcional, as como cualquier circunstancia que pueda haber

influido sobre el resultado.

33

Contenido

Introduccin..........................................................................1
Dedicatoria............................................................................2
Marco terico espectrometra de absorcin atmica a la
llama.....................................................................................4
Instrumentacin................................................................7
Reguladores de Presin y Rotmetro...........................8
Sistema Nebulizador-Quemador...................................8
Fuentes de luz para Absorcin Atmica.........................10
Sistema ptico............................................................10
Sistema de Fotodetector, Amplificador y de Lectura.. 10
Interferencias en Espectrometra de Absorcin Atmica.
.........................................................................................11
Interferencias Espectrales...........................................11
Interferencias Qumicas..............................................12
MATERIALES Y EQUIPOS.............................................13
Equipos........................................................................13
Reactivos.....................................................................13
PROCEDIMIENTO (Tratamiento de Muestra)................13
Validacin de Manganeso (Mn)......................................15
Espectrometra ultravioleta-visible.....................................19
APLICACIONES.............................................................19
Soluciones de iones metlicos de transicin..................19
Compuestos orgnicos...................................................19
LEY DE BEER-LAMBERT..............................................20
ESPECTROFOTMETRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE...21

ESPECTRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE..........................22
FUNDAMENTO...............................................................23
Determinacin de manganeso en acero............................23
Reactivos y Muestras:.................................................24
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.............................24
PRECAUCIN:...........................................................25
RESIDUOS:.................................................................26
AGUA POTABLE. DETERMINACIN DEL MANGANESO
TOTAL.................................................................................26
INTRODUCCION............................................................26
1. OBJETO......................................................................26
2. FUNDAMENTO...........................................................27
3. CONSIDERACIONES GENERALES.........................27
4. EQUIPOS....................................................................28
5. REACTIVOS...............................................................28
6. PROCEDIMIENTO......................................................30
7. CURVA DE CALIBRACION........................................31
8. CALCULOS.................................................................31
9. ERROR ACEPTABLE.................................................32
10. INFORME DE RESULTADOS..................................32