PRIMERA PRCTICA CALIFICADA DE BIOINGENIERIA

Calculo de crecimiento de Batch de la cintica:

Consideremos una fermentacin batch de una cepa de bacillus subtillis
utilizada como pesticida. El cultivo fue realizado en un fermentador de 300 L,
infinitamente mezclado y suficiente aireado. Las fuentes de carbono y nitrgeno
fueron la glucosa y peptona, respectivamente. Siendo la glucosa el sustrato
limitante. La temperatura (30C) y el pH (7) fueron constantes. Se obtuvieron
de materia seca celular X en g/L y de la glucosa S mediante HPLS on line en
g/L.

Calcular los parmetros cinticos correspondientes:

rx (g/L *h)
rs (g/L *h)
(h-1)
Graficar:
X,S Vs t
Log X,S Vs t

1
1
Vs
S

 DISCUSIONES

El crecimiento microbiano el aumento del nmero de microorganismos a lo

largo del tiempo. Por tanto, no nos referimos al crecimiento de un nico
microorganismo (ciclo celular), sino al demogrfico. El crecimiento de una
poblacin es el aumento del nmero de clulas como consecuencia de un
crecimiento individual y posterior divisin. Este proceso continua hasta que
algn nutriente del medio de cultivo se agota y el crecimiento se detiene.

Cin
tic
a
de

crecimiento celular

La grfica 1 se puede diferenciar 3 etapas:

Latencia
Cuando una poblacin bacteriana es inoculada en un medio
fresco el crecimiento no suele comenzar de inmediato, sino

despus de un tiempo llamado latencia. La fase de latencia

representa un periodo de transicin para los microorganismos
cuando son transferidos a una nueva condicin. En esta fase
se producen las enzimas necesarias para que las clulas
puedan crecer en un nuevo medio ambiente. En esta fase no
hay incremento de clulas, pero hay gran actividad
metablica, aumento en el tamao individual de las clulas, en
el contenido proteico, ADN y peso seco de las clulas. (=0)

Exponencial o logartmica
Es el periodo de la curva del crecimiento donde hay un =
max despus el microorganismo crece exponencialmente (
=max) , es decir que cada vez que pasa un cierto tiempo de
generacin la poblacin se duplica. Bajo condiciones
apropiadas la velocidad de crecimiento es mxima. Las
condiciones ambientales afectan la velocidad de crecimiento
exponencial.

Fase estacionaria
En cultivos en recipientes cerrados una poblacin no puede
crecer indefinidamente de forma exponencial. Las limitaciones
de crecimiento ocurren ya sea por agotamiento de algn
nutriente esencial (sustrato) , por acumulacin de productos
txicos, porque se alcance un nmero de clulas elevado para
el espacio disponible o por combinacin de las causas
anteriores. (= 0)

Las tres fases de crecimiento se pueden diferenciar mejor

representndolo en el siguiente grafico viendo cmo es que va
el crecimiento las clulas de bacillus subtillis y agotamiento del
sustrato. Para lo cual utilizamos un logaritmo neperiano frente al
tiempo.

En el grafico la curva de color azul representa el crecimiento de la

cepas de bacillus subtillis en un tiempo t y la curva de color rojo
representa el agotamiento sustrato (glucosa) en el mismo tiempo
t.

efectos de la concentracin de sustrato


De la grfica 3 podemos decir que:
Esta grafica nos permiten relacionar el crecimiento de bacillus y la
concentracin de sustrato. El sistema tiene un limitante y este es
el sustrato (glucosa) , una vez que ste empiece a escasear el
cultivo de microorganismos termina de crecer, por lo que su
crecimiento tiene un lmite donde se diferencia un fase de
crecimiento y de deceleracion.
El grfico representa la variacin del crecimiento de bacillus a lo largo del
tiempo. En este cultivo, se va consumiendo un substrato cuya
concentracin decrece de forma proporcional al crecimiento celular. A la
tasa especfica de consumo de substrato (qs) la podemos considerar la
velocidad con la que el organismo consume el substrato. Evidentemente,
cuanto mayor sea la tasa de consumo mayor ser la tasa de crecimiento
().
Asimismo, cuanto mayor sea el rendimiento del substrato consumido,
tambin mayor ser la tasa de crecimiento. Sin embargo, puede darse el
caso que haya una cierta compensacin entre la tasa de consumo del
substrato y el rendimiento de forma que las clulas que tienen altas tasas
de consumo de substrato tengan rendimiento ms bajo (o cuando se dan
las condiciones para una alta tasa y el rendimiento disminuye). A esta
relacin inversa se le conoce con el nombre defecto Pasteur.

Por ltimo, nos falta relacionar la velocidad de crecimiento () con la

concentracin de substrato (S). En condiciones de substrato abundante,
la concentracin de este no afecta al valor de ; pero cuando el substrato
se hace limitante, s existe ese efecto. La expresin matemtica que
relaciona ambos parmetros se conoce con el nombre de ecuacin de
Monod y es la siguiente:

efectos de la concentracin de sustrato

El grafico 4 nos muestra la lnea de tendencia del crecimiento

celular la cual nos da una ecuacin lineal, esta nos podr
predecir el futuro crecimiento microbiano que va a ocurrir.

Cintica de consumo
El sustrato consumido por el microorganismo tiene como
finalidad el crecimiento celular, mantenimiento de las
actividades vitales y la generacin de producto, para el caso
donde la formacin de producto no est asociada de forma
directa al metabolismo energtico.

 Es la "velocidad" con la que el organismo consume el

substrato. Evidentemente, cuanto mayor sea la velocidad
de consumo mayor ser la velocidad de crecimiento ().
Asimismo, cuanto mayor sea el rendimiento del substrato
consumido, tambin mayor ser la velocidad de
crecimiento.
La clula necesita del sustrato para dos cosas para
crecimiento
y
va
a
necesitar
sustrato
para
mantenimiento, cuando esa clula se est consumiendo
ese sustrato, se los est consumiendo a una velocidad
determinada regida por las velocidades volumtricas de
crecimiento celular, hay una velocidad de consumo de
sustrato asociado al crecimiento celular. La velocidad de
consumo e sustrato puede expresarce en funcin de
biomasa mediante la siguiente ecuacin.

rs = q s x
Donde:

rs es la velocidad volumtrica de consumo de sustrato.

(rs = -ds/dt)

qs es la velocidad especfica de consumo de sustrato.

la concentracin de biomasa.

Rendimiento:
Rendimientos se definen como la relacin entre el producto
obtenido y el sustrato consumido, usualmente referidos a la
fuente de carbono y energa. El rendimiento celular se define a

travs del concepto de nutriente limitante. Un nutriente

limitante es aquel sustrato que cuyo consumo controla la
velocidad de produccin de biomasa. Es decir que la velocidad
de crecimiento celular es funcin de tal nutriente.

En muchos casos existen ms de un nutriente u otros factores

que intervienen en dicha velocidad, pero para simplificar se
considera siempre que slo uno es el esencial y el ms
importante. A travs de este concepto de sustrato limitante se
puede definir el rendimiento del proceso.

El sustrato normalmente es la fuente de carbono. El

rendimiento est en funcin de tal fuente de Carbono usada y
las condiciones del proceso. Puede variar durante el proceso.
El consumo de sustrato no est dedicado slo a la produccin
de biomasa. ste tiene tres cometidos, para asimilacin de los
microorganismos como material celular, provisin de energa
para la sntesis celular y energa para el mantenimiento del
cultivo. Entonces la siguiente ecuacin representa el consumo
total del sustrato:

Sustrato total = Sustrato empleado asimilacin materia celular

+ Provisin Energa sntesis celular + Energa mantenimiento
cultivo Con la ayuda de la ecuacin 3 y la 4 se tiene:

El rendimiento terico se define como X/ (S)MC que es el

sustrato empleado en la asimilacin de los microorganismos
como material celular. Tambin se llama el rendimiento del
crecimiento. Este rendimiento permanece constante si la
composicin celular se mantiene constante. Sin embargo el
rendimiento global depender de la fraccin de sustrato
consumido en cada una de las actividades celulares. El
rendimiento definido mediante la ecuacin 1 se refiere al
rendimiento celular, existen otros rendimientos referidos a
otros parmetros del proceso o en funcin de otras variables.
Estos pueden ser como los que siguen a continuacin:

Donde rs (mol S/m3 s) es la velocidad de desaparicin de

sustrato, rx ( mol X/m3 s) es la velocidad de aparicin de
biomasa, rp (mol P/m3 s) es la velocidad de aparicin de
producto y rc (mol CO2/m3 s) es la velocidad de aparicin de
CO2. Otra manera de definir el rendimiento es a travs del
calor o la energa de reaccin generada por el consumo de
sustrato. La generacin de calor es el resultado del
metabolismo energtico y de crecimiento, por ello existe una
relacin entre el calor producido y la energa utilizada del
sustrato. Se introduce un nuevo factor de rendimiento, Y
(gramos de biomasa/caloras generada)

Donde HS y HC son las entalpas de combustin del sustrato

y del material celular respectivamente. Esta ecuacin
representa un balance aproximado de energa para un
crecimiento aerobio. Los valores de Y dependen de la especie
celular concreta y del tipo de sustrato consumido.

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