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HEMATOCRITO

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HEMATOCRITO

HEMATOCRITO
1. OBJETIVOS

Calcular el valor de hematocrito a partir de una muestra de sangre venosa


2. INTRODUCCION
El valor de hematocrito
indica
el
porcentaje
volumtrico de eritrocitos en
sangre.
El
mtodo
de
referencia
para
la
determinacin del hematocrito
es la centrifugacin. Mediante
la centrifugacin se separan
los componentes slidos de la
sangre de los lquidos y se
envasan
hermticamente.
Este mtodo est establecido en la norma DIN 58933-11). A continuacin,
los tubos capilares de vidrio se centrifugan hasta que el producto alcance
una aceleracin centrfuga relativa mnima que acte sobre los eritrocitos
(RCF > 5.000) y un valor numrico de tiempo de centrifugado en minutos
de por lo menos 100.000.
Entonces el hematocrito casi siempre se ordena como parte de un
conteo sanguneo completo (hemograma). Para la realizacin de esta
prueba, con el macromtodo, la sangre se extrae tpicamente de una vena,
por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano. Cuando
se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un
dolor moderado, mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin
de picadura. Posteriormente, puede haber algo de sensacin pulstil. Un
volumen de sangre se deposita en un tubo de Wintrobe, por medio de una
pipeta, hasta la marca del 10 y se debe de centrifugar. Al terminar la
prueba, deben de quedar separados el plasma de la sangre y las clulas,
depositndose en el fondo y presentando un color rojo intenso. Para la
realizacin del micromtodo, se utilizan unos tubos de un calibre muy
delgado, llamados capilares, y pueden ser llenados con la misma sangre
venosa o de capilar. Este ltimo es el ms usado, por ser ms rpido y
menos riesgoso al usar sangre capilar. Para su lectura se usa una escala
estandarizada.
3. FUNDAMENTO TEORICO
Es un estudio de laboratorio que nos orienta para los diagnsticos y
alteracin en la sangre porque nos va a determinar en trminos de
porcentaje solo la concentracin de los glbulos rojos. Recordemos que los
glbulos en su interior llevan la hemoglobina que es una molcula que va
servir para llevar oxgeno a las clulas de los diferentes rganos. El mtodo

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de preferencia para la determinacin de Hto es la micro centrifugacin de
sangre total en tubo capilar (micro mtodo), es una tcnica sencilla, barata
y accesible a laboratorios de baja complejidad. Aunque tambin puede
emplearse un tubo de Wintrobe (macromtodo), este procedimiento no es
tan recomendable debido a su mayor inexactitud e imprecisin. Ambos
mtodos se basan en medir el empaquetamiento de la columna de
eritrocitos cuando la sangre total con anticoagulante se somete a la accin
de una fuerza centrfuga. Por ello entre sus factores de error est el plasma
que queda atrapado entre los eritrocitos empaquetados y el posible efecto
de leucocitos y plaquetas en la lectura. Importancia clnica: El hematocrito
es una medicin de la fraccin volumtrica de hemates. Se trata de un
indicador clave del estado corporal de hidratacin, anemia o prdida grave
de sangre, as como la capacidad de la sangre para transportar oxgeno.
4. MARCO TEORICO
a) Hematocrito

Es el nombre que se da a la fraccin de volumen eritrocitario Es el volumen


ocupado por los eritrocitos en relacin con el volumen total de sangre Est
directamente relacionado con la concentracin de hemoglobina El valor
diagnstico del Hto depende de que el volumen plasmtico sea normal El
hematocrito obtenido en sangre venosa es siempre inferior al obtenido en
sangre capilar Por tanto, las punciones digitales suministrarn valores
ligeramente ms elevados que la puncin venosa El Hto, la Hb y el
recuento eritrocitario se relacionan entre s mediante los ndices
eritrocitarios VCM, HCM y CHCM. Estos ndices son indispensables para
el estudio de la anemia.
b) El ndice hematocrito
Es el porcentaje del volumen de la sangre que ocupa la fraccin de los gl.
Rojos. Las cifras normales de hematocrito son:
H: 40,8 a 50,3%
y
M: 36,1 44,3%
Se pueden obtener valores alterados segn:
Valores bajos: anemia, hemorragia, insuficiencia de la mdula sea;
destruccin de los glbulos rojos, leucemia, desnutricin o deficiencia
vitamnica en dieta, mieloma mltiple, artritis reumatoide.
Valores altos: deshidratacin, quemaduras, diarrea, eritrocitosis, niveles
bajos de oxgeno en sangre, policitemia vera.
c) El hematocrito se basa
Al centrifugar el capilar, la parte ms densa de la sangre (los hemates)
sedimentan en el fondo del tubo, mientras que arriba queda la parte
plasmtica.
Calcularemos el porcentaje que hay en el capilar de glbulos rojos.
Hay medidores, pero nosotros utilizaremos una regla graduada y
situaremos el capilar de modo que la plastilina quede en la base 0.

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Veremos que hay hematocrito y parte no celular. Mediremos el hematocrito
(Y) y todo el capilar (X).
Miraremos el porcentaje de X mediante regla de tres:
100

Y=2,1 y X= 6,1 cm
Por lo tanto: 2,1100 = 34,8%
6,1
Se trata de una mujer por lo que el resultado, aunque bajo, se acerca a los
valores fisiolgicos

d) Determinacin del hematocrito con tubos capilares


estndar

El llenado
Al llenar los tubos capilares hay que tener en cuenta que el extremo
opuesto al orificio de llenado de estos permanezca seco. Para determinar
el hematocrito se llenarn los tubos capilares hasta un 75 % aprox. De su
capacidad.
Cierre
Hay que cerrar el extremo seco de los tubos capilares con masilla. Para
ello, los tubos capilares deben pincharse en la masilla de manera vertical
hasta que el borde de los tubos capilares toque el fondo de la placa de
masilla. Incline ligeramente los tubos capilares hacia un lado y squelos de
la masilla.
Centrifugado
Colquelos con el extremo cerrado hacia afuera en el rotor de hematocrito
y ponga la tapa del rotor. La frmula para calcular el tiempo de centrifugado
es:

e) Lectura del valor de hematocrito


Determine el valor de hematocrito mediante el disco de lectura que, a su
vez, es la tapa del rotor.

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f) Determinacin
autosellantes

del

hematocrito

con

tubos

capilares

Llenado
Introduzca la sangre por el extremo abierto y deje mque la columna de
sangre baje en direccin al tapn. La sangre debe tocar el tapn.

Cierre
Golpee los tubos capilares con el extremo cerrado tres veces contra la
mesa de laboratorio. Esto intensifica el contacto con el material del tapn y
favorece el proceso de sellado. Slo de este modo se sellan los tubos
capilares.
g) Informacin sobre los distintos tubos capilares
Dependiendo del modelo, los tubos capilares tienen distintos volmenes y
dimensiones:

h) Limpieza y desinfeccin del rotor de hematocrito


En dicho caso, le rogamos que proceda como sigue:
a) Extraiga con cuidado las cpsulas de recepcin del rotor de hematocrito.
Ponga el rotor, la tapa y las cpsulas de recepcin en agua fra hasta que
los restos de sangre se hayan desprendido por completo.
b) A continuacin, ponga todas las piezas en una solucin desinfectante
adecuada.
c) Enjuague las piezas con agua fra y squelas.
d) Ahora puede volver a colocarlas en la centrfuga.
i) Manera de proceder en caso de rotura del vidrio

Atencin: riesgo de herida.


Lo ms recomendable es que trabaje con guantes dobles. Por si acaso
saltaran cristales, pngase gafas de seguridad y mascarilla protectora.
a) Quite la tapa del rotor con cuidado.

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b) Quite los cristales ms grandes con las pinzas.
Extraiga el rotor. Saque lentamente y con cuidado, con ayuda de las
pinzas, las cpsulas de recepcin afectadas o el anillo de obturacin (en
modelos ms antiguos).

Advertencia
Le rogamos que no vuelva a utilizar las cpsulas de recepcin afectadas o
el anillo de obturacin. Es casi imposible eliminar todas las esquirlas de
estas piezas y las que queden provocarn ms roturas del vidrio.
j) Causas de error en la determinacin
hematocrito por centrifugacin

del

Empleo de una relacin sangre:


anticoagulante incorrecta ( retraccin del
hemate ) del Hto. Poca cantidad de
anticoagulante Extraccin defectuosa de
la sangre (hemoconcentracin ) Retraso
mayor a 6 horas despus de la
extraccin ( falso aumento del Hto )
Cuando
la
sangre
se
obtiene
directamente de un catter ( dilucin )
Temperatura elevado y se utiliza
heparina Empleo de una fuerza
centrfuga
insuficiente
Tiempo
inadecuado Recalentamiento de la
centrifuga a > 40C ( hemlisis ) Error en
la identificacin del tubo Capilar inadecuado Homogenizacin defectuosa de
la muestra antes de llenar el capilar
ndice Bajo

ndice Alto

Anemia
Fallos en la mdula sea
Embarazo
Hemorragias
Hipertiroidismo
Hemolisis Leucemia
Problemas de alimentacin
Artritis reumatoide

Cardiopatas
Deshidratacin
Eclampsia (en el embarazo)
Enfermedades pulmonares
Exceso de formacin de
hemates (Eritrocitosis)
Policitemia vera Choque
(shock)

k) Hemoglobina
La hemoglobina es una protena que contiene hierro y que le otorga el color
rojo a la sangre. Se encuentra en los glbulos rojos y es la encargada del
transporte de oxgeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos.

HEMATOCRITO
La hemoglobina tambin transporta el dixido de carbono, que es el
producto de desecho del proceso de produccin de energa, lo lleva a los
pulmones desde donde es exhalado al aire.

l) El anlisis de la hemoglobina
Se realiza normalmente en un estudio completo de hematimetra, con el
recuento de glbulos rojos o hemates.
La hemoglobina es una de las variables de mayor importancia dentro de la
biometra hemtica, se mide en gramos por decilitro (g/dL), lo que
representa la cantidad de esta protena por unidad de volumen. Sus cifras
normales o de referencia son variables, y dependen de la edad, sexo, raza,
altitud sobre el nivel del mar del lugar de residencia, ocupacin, entre otras
variables. Por otra parte, el hematocrito, Tras una centrifugacin de la
sangre total se pueden apreciar dos niveles, uno con el depsito de los
glbulos rojos, principalmente, y otro nivel del plasma total. La relacin
porcentual entre ambos es lo que describe el hematocrito y describe el
porcentaje de clulas transportadoras de oxgeno con respecto al volumen
total de sangre.
m) Funciones
Componente funcional mas importante del hemate. Mediante la Hb el
eritrocito realiza su funcin transportadora de oxigeno (O 2) desde los
pulmones hacia los tejidos Transporta el CO 2 en sentido inverso En los
pulmones, el O2 se fija a la Hb y da lugar a la formacin de oxihemoglobina
(HbO2).
n) Estructura
Es una protena conjugada con un peso molecular
cercano a los 64,500. la molcula es casi esfrica
con un dimetro mximo de 6.4nm. Es un tetrmero
que consta de dos pares de cadenas poli peptdicas
(2 cadenas A y 2 cadenas b) Cada una de estas tiene
adosado un grupo prosttico muy coloreado, el hem,
un complejo de hierro y protoporfirina. La porcin
proteica se denomina Globina.

Disminuido en :

Anemias primarias
Cncer,Embarazo
Enfermedades renales y autoinmunes
Hemorragias yLinfomas
Problemas de alimentacin

Aumentado en :

HEMATOCRITO
Cardiopatas
Deshidratacin
Enfermedades pulmonares
crnicas
Estancias en lugares de
mucha altitud

5. MATERIALES

MATERIALES
.Tubos con anticuagulante
.Ligadura y algodon
.Aguja numero 21
.Lancetas
.Tubos capilares sin y con
heparina
.1pizeta
.Gradilla

EQUIPO
.Centrifuga

6. PROCEDIMIENTO EXPERIENTAL
6.1.

Extraccin de muestra de sangre venosa

manos y se coloco los guantes nuestro compaero que nos extrajo la


sangre venosa.
2.Luego ubico la ligadura por encima del sitio que se va a punzar para
que la vena sea ms visible, se lacalizo la vena mediante inspeccin.
y se pidio al compaero que abra y cierre su puo.
3. Se desinfecto el rea que se va a punzar con algodn y el alcohol.
4. Seguido punzo la vena en direccin contraria al flujo sanguneo y se
coloco el tubo con anticuagulante EDTA o citrato sodico.

5. Luego se retiro la ligadura y se recogio la sangre.

HEMATOCRITO

6. Por ultimo se saco la aguja a presin suave, se coloco un


pedazo de algodon en el sitio que fue punzado.

6.2.

Introduccin de la sangre venosa en l un tubo de capilar

1. una vez que se obtuvo las muestras de sangre de los alumonos en


los tubos con anticuagulante EDTA se rotularon cada una de ellas.
2. Seguido se introdujo un tubo de capilaridad en el tubo con la
muestra de sangre venosa y se dejo que se llene por capilaridad.
3. Luego se sello uno de los extremos del tubo capilar con sellador de
cera para que se evite la salida de sangre durante la centrifugacin.
4. A continuacion se coloco el tubo de capilar dentro de un tubo para
proceder a la centrfugacion.
5. Por ultimo se centrifugo durante 5 minutos a 3500 rpm.

Medicin del hematocrito

1. Una vez centrifugadas se hallo el hematocrito teniendo en cuenta


los datos siguientes:
A: longitud total de la sangre en el tubo
B: Longitud de la fraccin celular
X: Hematocrito en % .

7. RECOMENDACIONES
Se debe limpiar la mesa de trabajo donde realizara la prctica con alcohol o
leja al 10%.
Lavarse las manos y usar los guantes antes de realizar la prctica de
extraccin de sangre venosa
Calibrar la centrifuga y mantenerla prendida por lo menos 30min antes de
su uso.
Antes de centrifugar asegurar de que el peso est equilibrado. Esto
significa que siempre que pongamos un tubo, deber haber otro en el lado
opuesto. Si las muestras no son pares, rellenaremos con tubos vacos.
Si llegase a romperse los tubos capilares tener cuidado al limpiar los tubos
donde fueron colocados. Por ultimo eliminar todos los materiales (jeringas,
lancetas otros) en el tacho respectivo para evitar contaminacin.

8. DISCUSION

HEMATOCRITO
En el cuadro # 1 se especifican las valores de hematocrito en % como de
la hemoglobina en gr/dl, teniendo ya los datos de cada alumna se interpret
si cada valor calculado se encuentra dentro del rango establecido: Valor
Hto: Mujer=33-39% / Hombre= 35-41%
Valor Hg: Mujer=11-13gr/dl / Hombre= 12-14 gr/dl
De acuerdo a los datos referenciales cada alumna se encuentra dentro de
los valores normales, lo que indica que no se diagnostic si se presenta
anemia o policitemia.
9. CONCLUSION

Se aprendi a calcular y medir el hematocrito expresados como un


porcentaje de volumen de sangre, el porcentaje de clulas que transportan
oxgeno frente al volumen total de sangre, determinado por proceso de
centrifugacin.
As tambin se logr determinar la hemoglobina teniendo como valor el
hematocrito y el valor referencial ya que con estos datos nos permiti
calcular el valor de la hemoglobina.
Adems se conoci su importancia en el diagnstico de enfermedades
principalmente de las anemias y la policitemia en ambos casos.
Cabe sealar que normalmente, el valor hematocrito se realiza en un
anlisis completo de hematimetra, donde consta el recuento de hemates.
Por ltimo los patrones de los valores del hematocrito dependen de la edad
y del sexo, as como de la altitud geogrfica donde se puede encontrar el
paciente.

10. CUESTIONARIO
10.1. Cules son los lugares de puncin para recolectar muestra en
un recin nacido?
En pediatra por ejemplo se cuenta con diferentes tcnicas para obtener
muestras sanguneas:

Punciones
Venosas:
Cuero cabelludo:
Venas superficiales
del crneo.
Cuello:
externa.

Yugular

Axila: Vena axilar.

Fosa antecubital:
Vena
baslica,
ceflica y mediana.
Antebrazo:
Vena
radial, cubital y
mediana.
Mano:
dorsales
mano.

Venas
de
la

Tobillo:
Safena
interna y externa.

10

Pie:
Venas
dorsales del pie.

Punciones
Capilares:
Lateral externo o
interno del taln
Caras laterales
de las falanges
distales de los
dedos de la mano

HEMATOCRITO
A travs
Catteres
Centrales.
Vena
interna

de

yugular

Vena subclavia

insercin
perifrica)

Vena baslica y
ceflica (catteres
centrales
de

Vena femoral
Vena umbilical en
neonatos

10.2. Cules son los tipos de micro capilares y la dimensin de los


mismos?

Tubos Capilares para Micro-Hematocritos 100 % de Plstico


Informacin Tcnica:
ID: 0,90 mm 0,05 mm
OD: 1,60 mm 0,05 mm
Longitud: 75 mm 0,5 mm

Velocidad de Giro: 12,000 r. p. m.


en 4 minutos
Material: Polietileno Tereftalato
gGicol (PETG)

Tipos de Tubos:
Sin Tratamiento: Punta Azul
Heparinizado con Amonio: Punta Verde
Heparinizado con Sodio: Punta Roja

Tubos Capilares para Micro-Hematocritos de Vidrio de Borosilicato


Informacin t-Tcnica:
ID: 1,15 mm 0,05 mm
OD: 1,5 mm 0,05 mm
Longitud: 75 mm 1 mm
Volumen: 75 ul
Tipos de Tubos:
Sin Tratamiento: Punta Azul
Heparinizado con Amonio: Punta Verde
Heparinizado con Sodio: Punta Roja

Velocidad de Giro: 14,500 r.p.m.


en 5 min
Material: Vidrio de Borosilicato

Tubos Capilares para Micro-Hematocritos de Vidrio de Borosilicato


Precalibrados
Informacin Tcnica:
ID: 0,55 mm 0,05 mm Volumen:
18 ul
OD: 1,55 mm 0,05 mm

Material: Vidrio de Borosilicato


Longitud: 75 mm 1 mm

10.3. A qu rango segn los hematocritos se denomina policitemia y


anemia?
Rango normal de Hematocrito: Mujer 42 +/-5 (%)

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Hombre 47+/- 6 (%)

HEMATOCRITO
Policitemia: Aumento masa eritrocitaria >32 - 36 mL/Kg (o superior al
53% a mas por superficie corporal).
Criterios de OMS: mujer Hb > 16,5 g/dL varn Hb >18,5 g/dL.
Anemia: disminucin de la masa eritrocitaria y de la concentracin de
hemoglobina. Menos de 37% en mujer y en varon 40%.
Criterios de OMS Hb 13g/dl varon; Hb 12g/dl mujer y Hb
11g/dl mujer embarazada.
10.4. Cules son los valores del hematocrito normal de acuerdo a la
edad y sexo del paciente?
Los recin nacidos:55% a 68%
Una semana de edad:47% a
65%
Un mes de edad:37% a 49%
Tres meses de edad: de 30% a
36%
Un ao de edad: 29% a 41%

Diez aos de edad: 36% a 40%


Hombres adultos: 42% a 54%
Mujeres adultas: 38% a 46%
Gestantes adultas: alrededor del
30% 34% los lmites inferiores y
46% los lmites superiores

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10.5. Qu es la centrifuga?
La centrfuga es el equipo que nos proporciona la tcnica de separacin
basada en el movimiento de partculas por rotacin y aceleracin centrfuga
de modo que, sometidas a altas velocidades durante cortos periodos de
tiempo, permiten la sedimentacin de los componentes de una solucin
homognea segn sus diferentes densidades.
De esta manera, dicha solucin queda finalmente separada en dos
fracciones, la fraccin sobrenadante y la fraccin sedimentada que queda
depositada en el fondo del tubo de centrifugacin.
Extensamente empleada en los campos de la Biologa, la Bioqumica o la
Medicina, la centrfuga es un equipamiento bsico en los laboratorios de
anlisis para la separacin y purificacin de numerosas macromolculas
(protenas, DNA, RNA, clulas o fracciones celulares).
10.6. Cuntas clases de centrifuga conoces?
Existen varias clases bsicas:
Centrfuga de baja velocidad de sobremesa o
clnica: de pequeo tamao y normalmente sin
refrigeracin, alcanzan una velocidad mxima de 6,000
rpm y son tiles para la separacin de partculas
grandes como clulas o precipitado de sales
insolubles.
Centrfugas de alta velocidad: alcanzan velocidades mximas de entre
18,000 y 25,000 rpm (pueden generar alrededor
de 60,000g). Son refrigeradas, pueden o no
tener sistema de vaco para evitar el
calentamiento del rotor a causa del rozamiento
con el aire. Son tiles para la separacin de
fracciones celulares, pero insuficientes para la
separacin
de
ribosomas,
virus
o
macromolculas en general.

Ultracentrifugas: Superan las 50,000 rpm, por lo


que tienen sistemas auxiliares de refrigeracin para
refrigerar no solo la cmara del rotor donde estn
las muestras sino tambin el motor. Pueden generar
hasta 60,000 g, las cuales son suficientes para
separar pequeas protenas. Las ultracentrfugas se
pueden dividir en dos tipos: analticas y
preparativas. La diferencia ms importante entre
ellas es que la analtica cuenta con un sistema ptico para visualizar la
sedimentacin de la muestra en tiempo real, por otro lado, la preparativa
se usa para aislar partculas de bajo coeficiente de sedimentacin
(microsomas, virus y macromolculas).

10.7. Cul es la velocidad de centrifugacin que se usa para realizar


los microhematocritos?
La velocidad de centrifugacin es de 11000 18000 rpm, permite obtener
los resultados en el mnimo tiempo posible agilizando el trabajo diario de
laboratorio y adems, el temporizador permite programar el tiempo de
funcionamiento hasta un mximo de 10 minutos.
10.8. Durante cunto tiempo se debe realizar la centrifugacin?
Dependiendo del tipo de centrifuga que se utiliza y que tipo de partcula se
quiere separar u obtener como:
centrfugas de separacin de sueros o plasma de baja velocidad
(Macrocentrfuga, entre 2,000 y 6,000 R.P.M. aproximadamente),
centrfugas para microhematcritos (Microcentrfuga entre 10,000 y
18,000 R.P.M. aprox.)
las ultracentrfugas (de 20,000 hasta 75,000 R.P.M.) para la separacin
de protenas.
10.9. Qu es un hematocrito?
Es un examen y expresa el porcentaje aproximado que representa el
volumen de clulas dentro del volumen de sangre, es otra variable de la
biometra hemtica que ayuda a definir el estado de salud de una persona, y
al igual que la hemoglobina, sus cifras estn influenciadas por la edad, el
sexo y la geografa, entre otras variables.
10.10. Qu factores influyen para que los valores del hematocrito
estn alterados?
Factores como el ambiente, el sexo, la edad y el grupo tnico al que
pertenece la persona modifican los resultados de los anlisis sanguneos, es
por ello que aunque existen rangos y valores referenciales no se puede

hablar de valores normales, sino de valores promedio para poblaciones


determinadas, porque todo influye.

Alteracin en el tamao de los hemates.


Hemodilucin: aumento de la cantidad proporcional de agua en la
sangre.
Deshidratacin: prdida de agua del organismo, que se refleja en la
sangre.
Embarazo: porque se produce hemodilucin.
Residencia a gran altitud: por ejemplo, la gente que vive en el altiplano
andino.
Hemorragia inmediatamente previa a la prueba.
Medicamentos.
La ingestin de algunos alimentos, la actividad fsica y el estrs.
Las personas a las que se les ha extirpado el bazo pueden tener una
elevacin leve y persistente de la cifras normales

11. BIBLIOGRAFIA

Luis Alvarez. Determinacin del valor de hematocrito mediante


centrifugacin.
20/05/2011.
Disponible
en:
http://www.hettichlab.com/documents/22402/824a87b1-56ee-47b9-939aee02fcca679d
Patricio Arroyo . Niveles normales de hematocrito. 2010. Disponible en:
http://www.odon.uba.ar/uacad/fisiologia/docs/Liquidos%20corporales
%20CT8.pdf
Carlos Alonso. CENTRIFUGA. 02/20/2008.Disponible en:
http://www.auxilab.es/documentos/folletos/centrifugas.pdf Patricio
Andrs Ramirez. Parametro normales de hemoglobina y hematocrito.
2009. Disponible en:
http://www.medicasuis.org/anteriores/volumen24.1/Hemoglobina%20y
%20hematocrito.pdf
Jos
Moran.
Hematocrito.
15/08/09.
Disponible
en:
http://wiki.fisiologia.me/images/7/7d/Natalia_Beleta_practica_hematocrito
_5.pdf

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