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Optimizacin de las condiciones de tratamiento PDA del follaje de
yuca para la obtencin de concentrados proteicos.
MARACAIBO, 2008
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C.I. 17.649.662
C.I. 18.394.438
Telfono: (0261)764-0936
mtmrubio@cantv.net
daniel.rodriguez86@gmail.com
Dedicatoria
DEDICATORIA
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A Dios, todopoderoso que me ha dado la
oportunidad de cumplir todas las metas que me
he propuesto en la vida.
A mis padres y mis hermanas, quienes son la
luz de mi vida.
A la Familia Al Abdallah Massoud, quienes
han compartido durante todos estos aos mi
xito y alegras.
A mi compaero de tesis, quien me brind su
compaerismo y amistad durante la carrera y la
colaboracin para la realizacin de este trabajo.
A todos mis profesores y
haberme
dado
la
mi tutor, por
oportunidad
de
poder
Montiel (2008)
Dedicatoria
DEDICATORIA
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apoyo en mi vida.
A mi abuela por ser un ejemplo de vida
A mi compaero de tesis, por el apoyo,
amistad, durante toda la carrera y colaboracin
para
la
realizacin
de
este
trabajo
de
investigacin.
A todos mis profesores y
haberme
dado
desarrollarme
la
como
mi tutor, por
oportunidad
profesional
de
poder
poder
Muchas gracias!
Rodrguez (2008)
VI
Agradecimientos
AGRADECIMIENTOS
el camino, por
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bsqueda del xito.
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A mis padres Jorge y Yasmn quienes son las dos personas mas importantes
en mi vida, quienes siempre han estado ah conmigo , son el ejemplo ms
grande a seguir gracias a ambos por ensearme todo lo que s hoy , este
triunfo es el primero de muchos y sin ustedes a m lado no hubiera sido
posibleLos quiero
A mis tas Angela y Nivia por haberme dado siempre una palabra de aliento,
apoyndome incondicionalmente en todo lo que hago, gracias hacerme sentir
como un hijo para ustedes.
A mi tutor Dr. Alexis Ferrer, al Ing. Daniel Surez, Ing. Alonso Ramrez, al
I.N.I.A Zulia, al Taller mecnico Tecnimoca y al Laboratorio de
VII
Agradecimientos
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en la realizacin de este trabajo de
RE
Sinvestigacin
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Josybell Ros, Lic. Jos Peters, Lic. David Chacon por todo el apoyo prestado
Rodrguez (2008)
VIII
Agradecimientos
AGRADECIMIENTOS
A Dios Todopoderoso por representar siempre una luz en
el camino, por
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mi vida, quienes siempre
han
estado
ah conmigo , son el ejemplo ms grande
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A mis padres Marco y Stella quienes son las dos personas mas importantes en
a seguir gracias a ambos por ensearme todo lo que s hoy , este triunfo es el
primero de muchos y sin ustedes a m lado no hubiera sido posibleLos
quiero.
A toda mi familia por parte materna y paterna que sin ellos no lo hubiera
logrado.
A mis abuelas Lesbia de Montiel y Anastolia de Rubio, que sin las enseanzas
que me dieron en mi vida no seria la persona que soy. Las quiero.
A mis abuelos Marco Montiel H. y Henry Rubio, que dios los tenga en su santa
gloria y se que estaran orgullosos de mi
De Turris Humberto
A mi tutor Dr. Alexis Ferrer, al Ing. Daniel Suarez, Ing. Alonso Ramirez, al
I.N.I.A Zulia, al Taller mecnico Technimoca y al Laboratorio de
Instrumentacin Analtica de la Universidad del Zulia por haberme dado todo el
IX
Agradecimientos
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DCoello, Al Ing. Abraham Ramirez, Adolfo Salazar, Zadig Finol y al
Al T.S.U Lus
en la realizacin de este trabajo de investigacin
Montiel (2008)
Resumen
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E alternativos para la produccin
SR
La yuca es uno deC
los
recursos
naturales
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de concentrados
proteicos debido al elevado contenido de protenas y
minerales que poseen sus hojas. El objetivo del presente trabajo fue
optimizar las condiciones de tratamiento PDA (Presurizacin y
Despresurizacin Amoniacal) del follaje de la yuca para la obtencin de
concentrados proteicos. Para obtener dichas condiciones se aplic el
tratamiento PDA a diferentes condiciones de temperatura (75 y 90C),
humedad (30 y 60%) y carga de amonaco (0: 0,25:0,5:1 kg NH3/kg de
materia seca) teniendo un total de 16 muestras de follaje tratadas y la no
tratada como muestra de control. El follaje de yuca recolectado en el
Municipio Perij-Edo.-Zulia se sec, moli y posteriormente, se procedi a
caracterizar el material tratado y no tratado en lo referente al porcentaje
de humedad mediante la norma Covenin 1156, protena cruda y nitrgeno
(mtodo de Kjeldhal), y celulosa, hemicelulosa y lignina (mtodo Van
Soest). Luego se procedi a extraer las protenas utilizando como agente
extractante una solucin de hidrxido de calcio, a una relacin slidolquido (1:10), temperatura (90C), tiempo de 5 min., pH de 12,5 para el
follaje de yuca no tratado y pH 10 para el follaje tratado. Las extracciones
se realizaron por triplicado con 2 g de materia seca en erlenmeyers de
250 mL con agitacin constante. El contenido de protena soluble se
determin por el mtodo de Lowry Modificado. La condicin que produjo
el mximo rendimiento de extraccin de protenas, 23,6%, fue la de
1:60:75, siendo 2,86 y 1,23 veces mayor a los rendimientos del follaje no
tratado y el mejor de los acuosos (0:60:90), respectivamente, mostrando
la efectividad del tratamiento PDA para aumentar el rendimiento de
extraccin de las protenas. En esta condicin la hemicelulosa y la lignina
se solubilizaron aproximadamente en un 20%. Una humedad de 60%
result adecuada tanto para la efectividad del tratamiento como para
reducir los costos de recuperacin del amonaco de la biomasa. Una
temperatura de 90C fue en general demasiado elevada para los
tratamientos amoniacales.
Palabras clave: follaje de yuca, concentrados proteicos, protenas,
tratamiento amoniacal.
XI
Abstract
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XII
ndice General
INDICE GENERAL
DEDICATORIA
AGRADECIMIENTOS
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ABSTRACT
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D
RESUMEN
CONTENIDO
NDICE GENERAL
NDICE DE FIGURAS
NDICE DE TABLAS
INTRODUCCIN
V
VII
XI
XII
XIII
XIII
XVII
XX
XXII
CAPTULO I. EL PROBLEMA
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
1.2 OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN
1.2.1.Objetivo General
1.2.2. Objetivos Especficos
1.3 JUSTIFICACIN DE LA INVESTIGACIN
1.4 ALCANCE
1.5 DELIMITACIN DE LA INVESTIGACIN
1.5.1. Delimitacin Espacial
1.5.2.Delimitacin Temporal
25
27
27
27
28
29
29
29
29
31
33
37
37
37
38
40
40
41
42
44
49
XIII
ndice General
Reproduccin de la yuca
2.3.2 Procesos de Pretratamiento
2.3.3 Proceso de Presurizacin y Despresurizacin
Amoniacal (PDA)
2.3.4 Planta piloto de Presurizacin y Despresurizacin
Amoniacal (PDA)
2.3.5 Materiales Lignocelulsicos
Celulosa
Hemicelulosa
Lignina
2.3.6 Protenas
Clasificacin y estructura
Estructura
Estructura Primaria
Estructura Secundaria
Estructura Terciaria
Estructura Cuaternaria
Funciones
2.3.7 Tecnologa de Extraccin de Protenas
2.4 DEFINICIN DE TRMINOS BSICOS
2.5 MAPA DE VARIABLES
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50
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72
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78
78
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78
79
79
80
80
82
86
88
89
89
90
90
90
91
91
91
92
92
92
92
92
93
93
XIV
ndice General
en el proceso
3.6.1.6 Operacin de la planta piloto
3.6.2 Fase II. Aplicar el tratamiento PDA a diferentes
condiciones (temperatura,% humedad, carga de
amonaco)
3.6.2.1 Humedad Inicial de la muestra no tratada
3.6.3 Fase III. Caracterizar el material tratado y no
tratado con PDA en lo referente al porcentaje de
humedad, nitrgeno, protena cruda, celulosa,
hemicelulosa, lignina
3.6.3.1 Humedad
3.6.3.2 Protena Cruda
3.6.3.2.1 Determinacin de Amonaco restante
3.6.3.3 Determinacin de celulosa, hemicelulosa,
lignina
3.6.4 FASE IV Establecer las condiciones ptimas del
tratamiento PDA basadas en el rendimiento de
extraccin de protenas.
3.7 INSTRUMENTOS DE MEDICION
a. Determinacin de Humedad
b. Determinacin de nitrgeno y protena cruda
c. Mtodo de extraccin de protenas
d. Mtodo de Lowry
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112
113
113
119
119
XV
ndice General
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120
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121
122
123
125
CONCLUSIONES
130
RECOMENDACIONES
132
BIBLIOGRAFIA
133
ANEXOS
137
XVI
ndice de Tablas
INDICE DE TABLAS
44
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SlaRrazEy del follaje de la yuca 46
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Tabla 3. Composicin
qumica
de
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Tabla 2.Contenido de materia seca (%) y protenas total en
diferentes productos utilizados en alimentacin animal
45
47
47
48
94
94
106
de calibracin.
120
121
122
XX
ndice de Tablas
124
137
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Tabla 15. Curva de Calibracin Mtodo
138
S RdeELowry Modificado.
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Tabla 16. Porcentaje de Rendimiento de Protena en base a los
139
XXI
Indice de Figuras
INDICE DE FIGURAS
Fig.1 Tubrculo de Yuca
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Fig. 4 Bomba
de
Amoniaco
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56
58
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60
60
61
62
63
63
64
65
66
67
Fig. 16 Tuberas
68
68
69
70
71
XVII
Indice de Figuras
73
75
96
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Fig. 25 Desecador
100
100
Fig. 26 Balanza
101
Fig. 27 Digestor
103
Fig. 28 Digestin
104
104
105
106
Fig. 32 Phmetro
107
Fig. 33 Centrifugador
107
108
110
110
111
125
XVIII
Indice de Figuras
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S RE
HO
Figura 42. D
Diagrama
de control.
EREdeCpanel
follaje de yuca.
140
141
XIX
Introduccin
INTRODUCCIN
La elaboracin de alimentos concentrados proteicos para aves,
cerdos y otros animales de estmago simple se ha visto limitada, dada la
escasez de materia prima como soya, maz, sorgo y trigo en el pas,
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REal uso de productos de importacin.
S sto
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mercado
interno,
conllevando
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XXII
Introduccin
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S
El follaje debe
ser
aprovechado
S RE en los pases tropicales
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y en
XXIII
Capitulo I: El Problema
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CAPITULO I
EL PROBLEMA
Capitulo I: El Problema
Captulo I
El Problema
S
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S
S RE
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En Venezuela,
al
igual
que en otros pases, se presenta dficit de
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nutritiva.
25
Capitulo I: El Problema
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Ees el rompimiento de las barreras de
beneficio que presenta el tratamiento
PDA
SR
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D donde la protena citoplasmtica y parte de la protena que
la pared celular,
26
Capitulo I: El Problema
establecer las
condiciones
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D de la Investigacin
Objetivos
1.2
hemicelulosa y lignina.
27
Capitulo I: El Problema
1.3
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S
Econstituye una fuente abundante de
protenas. Por otra parte, el follajeS
de R
yuca
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desecho enD
el pas. Con la realizacin de este proyecto se esperan obtener las
debilitamiento de la matriz lignocelulsica que facilita la extraccin de
28
Capitulo I: El Problema
1.4
Alcance de la Investigacin
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condiciones de tratamiento delSfollaje
RE de yuca para la obtencin de
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Dproteicos realizado en el Laboratorio de Instrumentacin Analtica
concentrados
El trabajo de investigacin abarca el proceso de optimizacin de las
1.5
Delimitacin
29
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CAPITULO II
MARCO TERICO
CAPITULO II
MARCO TERICO
En este captulo se incorporan los antecedentes bsicos que incluyen
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E con todas las interpretaciones
indicadores, y la definicin de trminos
S Rbsicos
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necesarias D
que dan sentido y significado al estudio denominado Optimizacin
investigaciones previas, las bases tericas, el sistema de variables con sus
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incentive la participacin de toda
en tareas de produccin
S laRcomunidad
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intelectual. D
32
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presin social ejercida a travsS
de R
los E
medios de comunicacin social y por
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algunos organismos
no gubernamentales de corte ambientalista. Modestia
protenas
33
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25C y rendimientos de 90,15%.
contenido de protena cruda en el
S ElRE
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Dfue de 35,37%. Los rendimientos incrementaron 1,5 veces para la
concentrado
rendimiento de un 29,10%, mientras que las de precipitacin fueron pH 3,5 a
34
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realmente satisfactorios, lo que certific
S RelEptimo funcionamiento de la planta.
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(2) Ing. Urribarr, Lauris (2003), realiz el trabajo de grado para optar por el
titulo de Magster Scientarium en Qumica titulado Extraccin de protenas
de materiales lignocelulsicos tratados con amonaco. El objetivo de este
trabajo fue establecer las condiciones de extraccin y precipitacin de las
protenas de las hojas de pasto enano de elefante tratado y no tratado con PDA
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proteicos para alimentacin de animales
S REde estmago simple, donde se utiliz
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Dextractante una solucin de hidrxido de calcio a dos relaciones
como agente
36
de este estudio se obtuvo que el pasto enano de elefante tiene un alto potencial
para la produccin de azcares econmicos que luego podran ser convertidas
en etanol, as como en la produccin de alimento para animales y produccin
de cidos orgnicos.
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2.3.1 La yuca
2.3 Bases Tericas
Definicin
La yuca (Manihot esculenta Crantz) es una planta tropical conocida
tambin con los nombres comunes de tapioca, casava, manioca y mandioca,
entre otros (Buitrago, 1990). Se desarrolla en una gran diversidad de
condiciones tropicales, desde tierras bajas y calientes de los trpicos
americanos que van del Noreste de Suramrica (Venezuela y Colombia), hasta
el Noreste de Brasil; es originaria de la Amazonia Americana, cultivada
extensamente por los aborgenes y difundida como alimento por los
conquistadores a Asia y a frica tropical.
Es un arbusto perenne cuyo tamao vara de 1 a 5 metros de altura,
perteneciente a la familia Euphorbiaceae. Es una de las principales plantas
alimenticias del mundo, con una produccin mundial que alcanza las 160
millones de toneladas por ao. Es cultivada principalmente en tres regiones:
frica, la zona tropical de Sur Amrica, y el Sur y Sureste de Asia. Se siembra
en ms de 60 pases, siendo para stos una de las principales fuentes
energticas. Histricamente ha sido un cultivo de agricultores de pequea
escala y en aos recientes en plantaciones de mayor rea.
Se adapta bien a las condiciones marginales que predominan en los
trpicos, pero no tolera encharcamientos en el suelo ni condiciones salinas
(Montaldo, 1979, Buitrago, 1990).
37
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a la harina de soya, que es la fuente
S RdeEeleccin de los pases desarrollados
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para dietasD
de rumiantes y contiene alrededor de 5,9% de lisina (Savon, 1998).
38
50 veces ms HCN que la anterior, aunque las dulces por exceso de nitrgeno
o falta de potasio en el suelo pueden volverse amargas (Buitrago, 1999).
Las yucas dulces, son directamente consumibles luego de su coccin y
las yucas bravas o amargas, o mandiocas, exigen un complejo proceso de
transformacin y detoxificacin antes de poder ser consumidas. Segn las
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REtolerancia al estrs bitico (plagas,
La yuca es un cultivo
conS
altsima
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D
enfermedades), se siembra por estacas al comenzar las lluvias y se recoge
regiones hay preponderancia por la utilizacin de unas u otras.
39
Toxicidad de la yuca
Cuando se suministra yuca a los animales de variedades amargas, sin
ser procesadas, o altos niveles de yuca fresca de variedades dulces que no se
conozca el nivel de HCN, puede producrseles intoxicacin.
sta se produce de la siguiente manera: la destruccin por la
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Sla R
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contenida en
la
clula
de
la
planta,
linamarina
en presencia de la linamarasa
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D
volatiliza y puede ser expulsado por los gases de la rumia y otra parte es
absorbida y pasa al torrente sanguneo convirtindose parte en tiocianato, que
es un compuesto mas fcil de eliminar y de menos toxicidad, y otra parte forma
complejos con los glbulos rojos y bloquean la capacidad de transporte de
oxgeno en la sangre; si el HCN ingerido fuese mayor a 2 miligramos por
kilogramo de peso corporal, pudiera ser causa de muerte (Tewe, 1985) del
animal.
Hay que notar que niveles altos de HCN, aunque no lleguen a producir
sintomatologa de intoxicacin, pueden inhibir la debida absorcin de
carbohidratos y protena (Tewe, 1985). En caso de intoxicacin el tratamiento
es suministrar vinagre va oral o tiosulfato de sodio o nitrato de sodio inyectado
No solamente la yuca puede contener HCN, otros productos como el
sorgo, semillas de manzana, duraznos, Estrella Africana, productos lcteos y
carnicol tambin lo pueden tener. (Tewe 1985).
40
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S yResEuna buena fuente proteica, alrededor
contenido de materia
seca
delO
18%
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aceptado por los animales tanto en poca lluviosa como en sequa; tiene un
del 24% (Preston, 1999); el 32% de esta protena es sobrepasante y el resto se
fermenta en el rumen; posee un buen contenido de aminocidos esenciales
con excepcin de metionina (FAO), tiene un nivel de fibra detergente neutra
(FDN) de 32% y de fibra detergente cida (FDA) de 27% (Preston, 1999) con
un nivel de taninos condensados del 3% que tiene efecto antihelmntico
(Nenapat, 2004); adems se ha reportado en Tailandia que la leche de las
vacas que consumen heno de yuca puede retrasar su deterioro entre 8 y 24
horas (Wanapat, citado por Preston, 1999) debido a niveles tolerables de
tiocianato endgeno segregados en la leche; al oxidarse los iones de
Tocianato por la enzima Lactoperoxidasa en presencia de Perxido de
Hidrgeno, se eliminan bacterias que se encuentran en la leche (Ponce y col.,
2000).
Formas de suministrarse:
a) Forraje de yuca: se suministra picado y oreado un da antes, es de
muy buena aceptacin por los animales, se les ha suministrado at libitum a
terneros y a vacas paridas.
b) Heno de yuca: tiene buena aceptacin por los animales pero inferior
al forraje oreado, hay varias formas de producirlo, puede ser secando al sol los
tallos y las hojas de cultivos para forraje (Wanapat, 2001), pero la que ha dado
mejor resultado es un mtodo utilizado por campesinos de Cienaga de Oro
Colombia para secar los chips de races de yuca (Cruz Arroyo, 1999). Consiste
41
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S RyEel mundo
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Importancia
de
la
yuca
en
Venezuela
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Sadecuadamente
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ya que es posible
que
se
produzca
en suelos de baja fertilidad
E
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lugar destacado dentro de los cultivos adaptados a una agricultura sustentable,
43
2000
2001
2002
2003
2004
40.000
Rendimiento (t/ha)
12,250
Produccin (t)
S490.000
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S R2005
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Fuente: FAO/FAOSTAT
Agricultura.
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Valor Nutricional de la yuca
La raz de yuca contiene menores cantidades de grasa y protena que el
arroz, maz u otros cereales. Dado que las dietas, tanto para alimentacin
humana como para los animales, se componen de combinaciones de nutrientes
o mezclas de stos, la yuca representa un gran aporte en el mejoramiento de la
alimentacin de las zonas tropicales, donde el rendimiento por hectrea es
superior al de los cereales (Montaldo, 1979).
La raz y el follaje del cultivo de la yuca son dos subproductos que,
balanceados con otros componentes de la dieta, son de alto valor nutritivo. La
raz es fundamentalmente rica en carbohidratos y el follaje es uno de los
materiales vegetales verdes con mayor concentracin proteica, y contiene ms
grasa y fibra que las races. Normalmente las hojas contienen ms del doble de
protenas que los tallos, y tambin son ms ricas en caroteno, calcio y fsforo.
En el caso de la yuca la concentracin de fsforo es mayor en la raz, mientras
la de calcio es mayor en el follaje (Tablas 2 y 3) (Buitrago, 1990; Montaldo,
1979).
La produccin de follaje de yuca por hectrea, cuando el cultivo se
destina
exclusivamente
la
produccin
de
este
material,
es
de
44
harina de follaje (hojas y tallos) con 12% de humedad, que contiene a su vez
unas 6 toneladas de protena.
Tabla 2. Contenido de materia seca (%) y protena total en diferentes
productos utilizados en alimentacin animal.
Protena
S
O
D
A
V
R
(%)
(g/kg)
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
Dde yuca
Raz fresca
35,0
12
Producto
Materia seca
90,0
34
28,0
65
90,0
220
30,0
17
90,0
51
23,0
21
90,0
82
20,0
10
90,0
45
90,0
87
90,0
95
90,0
80
90,0
380
45
En las races
En el follaje
S seca
Base hmeda
Base
O
D
A
V
R
E
S
RE
28,00
100,00
ECHOS100,00
ER35,00
Base hmeda
Base seca
1,10
3,10
6,80
24,00
ENN
31,70
90,50
10,60
37,70
Extracto
0,47
1,30
1,80
6,50
Fibra cruda
1,10
3,10
5,80
20,60
Ceniza
0,70
1,90
1,70
6,0
Calcio
0,10
0,33
0,43
1,50
Fsforo
0,5
0,44
0,08
0,27
Materia
seca
Protena
cruda
etreo
Nota: Follaje = hojas y tallos tiernos. Los tallos representan menos del 20%
del peso del follaje.
Fuente: Buitrago, 1990
46
Vitamina
En el follaje
Base
S
O
D
seca
A
V
R
E
S
E
HOS R
Vitamina A D
(UI)EREC
19,50
55,00
20,00
70,00
Tiamina (B-12) (mg)
0,05
0,16
0,13
0,46
Riboflavina (B-2)
0,3
0,08
0,26
0,91
Niacina (mg)
0,06
0,17
1,60
5,70
cido ascrbico
30,00
86,00
290,00
980,00
(mg)
(mg)
Fuente: Buitrago, 1990
Tabla 5. Principales minerales en las races y hojas de yuca.
Contenidos (%)
Minerales
En la races
En el follaje
Base
Base
Base
Base seca
hmeda
seca
hmeda
Potasio (%)
0,25
0,72
0,35
1,23
Magnesio
0,03
0,08
0,12
0,42
Hierro (ppm)
17,00
48,00
246,00
859,00
Cobre (ppm)
2,00
6,,00
3,00
12,00
Zinc(ppm)
14,00
41,00
71,00
249,00
Manganeso
3,00
10,00
72,00
252,00
76,00
213,00
51,00
177,00
(%)
(ppm)
Sodio (ppm)
47
S
O
D
A
V
R
E
S
E
Sel R
O
H
C
E
R
escolar, y muy
especialmente
para
adulto.
E
D
Necesidades estimadas
Med.
Ref.
Lactante FAO
Escolar
Composicin
Observada
Adulto
YUCA
Histidina
26
19
19
16
21
Isoleucina
46
42
28
28
13
28
Leucina
93
49
66
44
19
40
Lisina
66
42
58
44
16
41
Metionina +
42
40
25
22
17
27
72
56
63
22
19
41
Treonina
43
28
34
28
26
Triptfano
17
14
11
12
Valina
55
42
35
25
13
33
Total + Histidina
460
339
241
127
269
Total Histidina
434
313
320
222
111
248
85
Cistena
Fenilalanina
Tirosina
Cmputo qumico
Aminocido
AAA
limitante
Cmputo qumico =(mg de aminocido en protena de ensayo / mg de aminocido en
cuadro de necesidades) x100
AAA = aminocidos aromticos (fenilalanina tirosina)
Fuente: Datos de la Organizacin Mundial de la Salud, citado por Ortega (1998)
48
S
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D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Tanto las races como el follaje (hojas, pecolos y tallos tiernos) son
productos primarios de la planta que se pueden utilizar como alimento para
animales. En ciertos lugares de frica las hojas de yuca tambin se usan en la
alimentacin humana, como verduras frescas. Adems de estos productos
primarios de la yuca, existen otros derivados que tienen tambin buen potencial
como alimento para animales, especialmente los subproductos de los procesos
de industrializacin (el bagazo o ripio, la cscara o corteza) (Buitrago, 1990).
Es importante sealar que existen diferencias entre las variedades de
yuca dependiendo de la concentracin de cido cianhdrico (HCN); as, una
variedad de yuca puede ser amarga y altamente txica si el contenido es alto
(mas de 100 mg de HCN/100 g de peso), o puede ser dulce si ste es bajo
(menos de 50 mg de HCN/100 g de peso). Sin embargo, la diferenciacin entre
variedades amargas y dulces no siempre es exacta, ya que el contenido de
cido cianhdrico no es constante y depende de la variedad, el ambiente, la
sequa, la fertilidad del suelo y la deficiencia en potasio, pudindose encontrar
variedades dulces que en ciertas condiciones se comportan como amargas y
viceversa (Montaldo, 1979). Dependiendo de este carcter se determina su uso
final: las amargas mediante un procesamiento adecuado pueden ser de uso
industrial o procesamiento tradicional, mientras que las dulces se usan para
consumo fresco, aunque en algunas casaberas las usan para la produccin del
casabe cuando no existe en el mercado suficiente yuca amarga.
49
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
Harina
panificable
de
yuca
E
D
Pudn de yuca
Buuelos de yuca
Rosquitas
Torta de yuca
Pur de yuca
Reproduccin de la yuca
La propagacin del cultivo de la yuca se hace por mtodos asexuales,
utilizando trozos de tallos llamados estacas. De esta forma, un clon conservar
su estabilidad gentica y, por lo tanto, todos sus caracteres hereditarios. Es
importante resaltar que en esta planta a travs del tiempo se ha producido una
seleccin natural, formndose de esta manera una gran variedad de ecotipos
(Luciani, 1996). Por otra parte, las estacas usadas para la plantacin provienen
de siembras repetidas que los agricultores han perpetuado, originando diversas
identidades para los clones existentes, los cuales en algunos casos es
probable que se conozcan con diferentes nombres segn el sitio donde se
planten o donde se haya adquirido el material.
50
S
O
D
A
V
R
E
S
E
SR
O
Un procesoR
deEpretratamiento
eficaz debe reunir ciertas caractersticas,
H
C
E
D
Los
lignocelulsicos se
procesos
de
pretratamiento
de
los
materiales
generan inhibidores de
51
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
RECHdeOsustratos
aumento deD
la E
digestibilidad
(Reid, 1989).
52
S
O
D
A
V
R
E
S
RE
S
O
H
C
E
R
rea superficial
causado
por
la
liberacin
violenta de vapores de amonaco
E
D
Los efectos qumicos del amonaco sobre las fibras y el crecimiento del
entre
hemicelulosas
ligninas),
desacetilacin
de
la
hemicelulosa y el aumento del rea interfacial del material (provocado por una
despresurizacin sbita), contribuye a separar el material vegetal y permite casi
la conversin cuantitativa de la celulosa y hemicelulosa a sus azcares
53
S
O
D
A
V
R
E
S
RE
OS
ECHas
tratamientoD
PDA
permitiendo
el acceso del agua en la estructura fibrilar; lo
ER
El ordenamiento de la estructura de la fibra es afectado por el
54
S
O
D
A
V
R
E
S
las variables de operacin. El S
material
REremanente en el reactor se seca
O
H
C
E
R
E
Dy est listo para continuar con procesos para la produccin de
parcialmente
nitrgeno para hacer las pruebas, y un panel de control que permite controlar
55
S
O
D
A
V
R
E
S
procede a la despresurizacin mediante
S REuna vlvula de expansin, donde el
O
H
C
E
R
E
amonaco D
pasa al tanque de expansin y al tanque de agua para su
transcurrido el tiempo establecido de acuerdo a cada tipo de material, se
gatos
neumticos,
una
vlvula
de
expansin,
un
tanque
de
56
S
O
D
A
V
R
E
S
condiciones de presin, temperatura
flujo, y observar el efecto que estos
S Ry E
O
H
C
E
R
E
D sobre la operacin de la misma, buscando la combinacin de
cambios tienen
Adicionalmente, el propsito de esta planta es obtener informacin, modificando
Bomba de Amonaco
La necesidad de bombear un fluido surge de la necesidad de transportar
stos de un lugar a otro, a travs de un canal. Una bomba se disea para que
su rendimiento sea ajustable, de ese modo pueden ser cambiados los radios
del material descargado.
La bomba de amonaco utilizada en la planta piloto es una bomba
centrfuga, consiste de un impulsor que gira dentro de una carcasa, que consta
de cierta cantidad de hojas montadas sobre un eje que se proyecta al exterior
de la carcasa, el cual va a impulsar el amonaco controlando la presin por
medio de un manmetro.
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O
D
A
V
R
E
S
S RE
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C
E
R
E
D
Fig. 4 Bomba de Amoniaco
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R
E
S
S RE
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C
E
R
E
D
Fig. 5 Caldern y visor de vidrio
Fuente: Montiel, Rodrguez 2007.
Compresor de Aire
Un compresor es el encargado de convertir la energa mecnica, en
energa neumtica comprimiendo el aire.
El principio de funcionamiento es igual al de una bomba centrfuga, y su
diferencia principal es que el gas manejado en un compresor es compresible,
mientras que los lquidos con los que trabaja una bomba son prcticamente
incompresibles.
La unidad motriz de este compresor es un motor elctrico. Suministra el
oxgeno a las bombonas y tiene un filtro de aire de 2 pulgadas de dimetro.
Como dispositivo de seguridad tiene un clutch que se dispara a lo que las
bombonas de aire alcanzan 130 libras de presin, y se vuelve a encender
cuando alcance 50 libras de presin.
59
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D
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V
R
E
S
S RE
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H
C
E
R
E
D
Fig. 6 Compresor de aire
Fuente: Montiel, Rodrguez 2007.
Gatos Neumticos
Son los encargados de abrir y cerrar el reactor mediante 2 tapas
sellndolo hermticamente. Las medidas de los gatos neumticos son:
superior, 40 x 13cm, inferior, 55 x 13cm. Estn hechos de un material resistente
(acero inoxidable 316) y son comandados por medio del panel de control para
su apertura y cierre. Estos gatos trabajan con la presin del aire, por eso se les
llama neumticos.
60
Manmetro de Presin
Este instrumento indicador de presin est elaborado bajo condiciones
especiales de precisin. Consiste en un conjunto de fuelle y muelle opuesto a
un fuelle sellado al vaco absoluto. El movimiento resultante de la unin de los
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Panel de Control
Es el comando general de la planta piloto. Se divide en dos partes; la
que controla las operaciones en el reactor, la cual se denomina panel de
control del reactor PDA, y la que controla las operaciones elctricas de la
planta, la cual se denomina panel de control. En este ltimo se controla las
aberturas de los 4 solenoides, el encendido de la vlvula de expansin, la
apertura y cierre de los gatos neumticos, etc. En el panel de control del
reactor PDA se controla el encendido del compresor de aire, la temperatura del
reactor, la presin del reactor, el encendido del motor del reactor, el encendido
de la mezcla en el reactor, etc.
61
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O
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V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
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D
Reactor Presurizado
Es un equipo de alta presin de forma cnica (capacidad 2Kg equivalente
a 10 Kg./h) donde se aloja el material lignocelulsico fabricado de acero
inoxidable 316 cuyos dimetros son 45 cm (superior) y 20 cm (inferior), y lleva
una tapa superior ajustada con 30 tornillos de igual torque (90 libras). El sistema
externo de la regulacin de la temperatura es una resistencia elctrica que
calienta directamente la pared del reactor que se regula mediante el panel de
control. El sistema de cierre del reactor, tanto superior como inferior, es de
apertura y de cierre rpido, ideales cuando se necesita procesar muestras
frecuentemente en tiempos cortos. Consta de 2 gatos neumticos que ejercen
la presin adecuada en las tapas de entrada y salida del material lignocelulsico
en el reactor. Los dimetros de las tapas de entrada (superior) y salida (inferior)
son de 12 y 20 cm. respectivamente.
62
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A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Regulador de Aire
Es el que se encarga de controlar el paso de aire proveniente de las
bombonas a una presin mxima de 80 lbs, que es la presin ptima para el
funcionamiento de los gatos neumticos (estos funcionan con una presin
mnima de 60 libras). Posee un recipiente pequeo con aceite de motor para
lubricar la parte interna de los gatos neumticos, y obtener una operacin
ptima de los mismos.
63
Tanque de Expansin
Recipiente
cerrado
diseado
para
soportar
una
presin
interna
S
O
D
A
V
R
E
S
entrada y salida del amonaco delS
tanque,
REy un elemento de temperatura para
O
H
C
E
R
E
D y as controlarla en el interior del tanque. El tanque est hecho
poder medirla
presin se estabiliza a 15 libras. Tiene 2 vlvulas de paso que controlan la
de un material muy resistente (acero inoxidable 316) al igual que todos sus
accesorios.
Tanque de Amonaco
Un recipiente a presin de almacenamiento suele ser casi siempre una
instalacin permanente. El almacenamiento de gas a presin no solo reduce su
volumen, sino que, en muchos casos, lo lica a temperatura ambiente. Uno de
los gases que se almacenan en este tipo de tanques es el amonaco.
Es la fuente de alimentacin que suministra amonaco a la planta. La
planta opera ptimamente con 180 psi de amonaco.
64
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D
Fig. 13 Tanque de Amonaco
Fuente: Montiel, Rodrguez 2007
Tanque de Nitrgeno
Es un recipiente de color gris, lleva este color indicando que en su interior
hay nitrgeno. Tiene un regulador que consta de dos manmetros, stos hacen
cada uno una funcin distinta. Uno mide la presin del tanque la cual es de 0 a
5000 psi y el otro mide la presin de salida del nitrgeno a la planta la cual es
de 20 a 600 psi
El nitrgeno se utiliza para hacer el chequeo o la prueba de fugas en toda
la planta, sto no se puede hacer directamente con el amonaco ya que ste es
un producto qumico txico y no puede ser inhalado por las personas ni ser
vertido directamente al ambiente.
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D
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V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Tanques de aire
Son los que suministran aire a los gatos neumticos. Estos son llenados
mediante un compresor de aire. La planta posee dos bombonas conectadas
entre si mediante una tubera. La primera bombona contiene un presostato
como dispositivo de seguridad que va conectado al panel de control (el cual
controla la presin de las bombonas), la segunda bombona lleva un manmetro
que mide la presin de las bombonas. La capacidad de las bombonas es de
aproximadamente 3000 libras de presin.
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E
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H
C
E
R
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D
Fig. 15 Tanques de Aire
Fuente: Montiel, Rodrguez 2007
Termocupla
Es uno de los sensores ms sencillos y comn para determinar la
temperatura de un proceso. Bsicamente est constituida por 2 metales, esto
forma un circuito elctrico por el cual fluye corriente como resultado de la
fuerza electromotriz generada, que es proporcional a la diferencia de
temperatura entre los dos extremos del circuito los cuales se les conocen como
unin de medida o caliente y unin de referencia o fra. Una de las ventajas que
sta posee es que las son econmicas y resistentes. En este caso es de tipo
PT-100.
Tuberas
Las tuberas son conductos compuestos de tubos que cumplen la funcin
de transportar agua u otros fluidos. Se suelen elaborar con materiales muy
diversos. Cuando el lquido transportado es petrleo, se utiliza la denominacin
especfica de oleoducto. Cuando el fluido transportado es gas, se utiliza la
denominacin especfica de gasoducto. Tambin es posible transportar
67
S
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V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Fig. 16 Tuberas
Fuente: Montiel, Rodrguez 2007
Vlvula de Expansin
Dispositivo que permite el traslado del fluido que se encuentre en el
reactor al tanque de expansin, estos fluidos pueden ser amonaco o nitrgeno
cuando se estn haciendo las pruebas de fugas. La vlvula de expansin vaca
el reactor despresurizndolo, es decir, eliminando la presin dentro del reactor
y as pudindolo abrir para obtener el material lignocelulsico ya tratado para
analizarlo. Est constituida por un solenoide que acciona un actuador
neumtico.
68
Vlvulas de Control
Realizan la funcin de variar el flujo y/o caudal de un fluido, que a su vez
modifica las condiciones internas del proceso.
La vlvula contiene en su interior el obturador y los asientos, y est
provisto de roscas o bridas para conectar la vlvula a la tubera. El obturador es
S
O
D
A
V
R
E
S
direccin de su propio eje o bien
REun cuerpo rotativo. Est unido a un
Stener
O
H
C
E
R
E
Dpasa a travs de la tapa del cuerpo y que es accionado por el
vstago que
quien realiza la funcin de control de paso del fluido y puede actuar en
servomotor.
La dimensin de una vlvula depende del flujo que se va a manejar. El
cuerpo de la vlvula debe resistir la temperatura y la presin del fluido sin
prdidas, tener un tamao adecuado para el caudal que debe controlar y ser
resistente a la erosin o a la corrosin producida por el fluido. El obturador y los
asientos son de acero inoxidable.
materiales
lignocelulsicos,
tambin
llamados
biomasa
lignocelulosica, contienen un 25-60% de celulosa, 10-40% de hemicelulosa y 125% de lignina. Los materiales lignocelulsicos residuales representan una
69
S
O
D
A
V
R
E
S
presentes en las vas digestivasS
deR
losEanimales. Esta compleja estructura
O
H
C
E
R
E
D muy difcil de digerir o degradar.
vegetal resulta
digestin depende de la flora microbiana y de los complejos enzimticos
Celulosa
La estructura de la celulosa se forma por la unin de molculas de glucosa mediante enlaces -1,4-O-glucosdico (Figura 18). Es una hexosana
que por hidrlisis da glucosa. La celulosa es una larga cadena polimrica de
peso molecular variable, con frmula emprica (C6H1005)n, con un valor mnimo
de n= 200.
70
S
O
D
A
V
R
E
S
E
contiguos, estabilizados debido S
a la
de puentes de hidrgeno
Rformacin
O
H
C
E
R
E
D estableciendo una restriccin en la libre rotacin del enlace
intramoleculares,
residuo glicosilo presenta una rotacin de 180 con respecto a los residuos
71
S
O
D
A
V
R
E
S
E rumiantes, de otros herbvoros y de
los gases indeseables en el intestino
S deRlos
O
H
C
E
R
E
termitas. D
mezclarse con las heces, facilita la digestin y defecacin. Tambin previene
Hemicelulosa
La hemicelulosa es el carbohidrato ms abundante en la naturaleza
despus de la celulosa. Es un heteropolmero de azcares tales como
galactosa, manosa, xilosa y arabinosa, con algunos de ellos acetilados y la
glucosa presente principalmente como cido urnico (Holtzapple, 1993). La
hemicelulosa no posee una composicin qumica homognea, est constituida
por una cadena central de xilosa unida por enlaces (1-4) glicosdicos con un
alto grado de polimerizacin y ramificacin (figura 20). Los sustituyentes ms
comunes presentes en los residuos de la cadena de D-xilopiranosilos son los
grupos acetilos que esterifican los carbonos dos y tres (C2 y C3) de la xilosa, la
L-arabinosa que se une mediante enlace glucosdico a la cadena central de
xilosa, y el cido glucurnico que se une a travs de enlace (1-2) a los
residuos de xilosa. Forma parte de las paredes de las diferentes clulas de los
tejidos del vegetal, recubriendo la superficie de las fibras de celulosa y
permitiendo el enlace de pectina. Tambin es importante considerar que este
compuesto vara dependiendo de la edad y variabilidad de las especies
cultivadas y mejoradas.
72
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D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
COOH
COOH
H3C O
HO
HO
OH
HO
H3C O
OH
HO
OAc
O
H OH2 C
HO
o
OH
OH
o
O
o
HO
HO
OH
OAc
OH
H OH2C
OH
OH
OH
Polmero
de Hemicelulosa
Hemicelulosa
73
S
O
D
A
V
R
E
S
RE
Snotablemente
O
H
C
E
R
un
material
que
es
resistente a los impactos,
E
D
la pared celular y acta como puente de unin entre las clulas de la madera
creando
74
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V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
75
qumicos que hasta ahora solo se generan a partir del petrleo. Esto representa
un desafo tecnolgico, principalmente en el procesamiento biolgico de la
biomasa celulsica y los pretratamientos que deben aplicarse para aumentar la
capacidad de hidrlisis de la celulosa (Lynd y col., 1999). Esta limitacin puede
ser subsanada si el material vegetal sometido a pretratamientos, con la
S
O
D
A
V
R
E
S
hinchamiento en la fibra. Esto aumenta
S REsu reactividad, de manera que sus
O
H
C
E
R
E
D quedan expuestos a cualquier tratamiento qumico o enzimtico
constituyentes
finalidad de romper los enlaces entre hemicelulosa y lignina, y /o produciendo
76
S
O
D
A
V
R
E
S
E por la FAO con la composicin
de referencia" es una protena terica
S Rdefinida
O
H
C
E
R
E
D satisfacer correctamente las necesidades proteicas. Se han
adecuada para
77
Clasificacin y Estructura
Estructura
La organizacin de una protena viene definida por cuatro niveles
estructurales
denominados:
estructura
primaria,
estructura
secundaria,
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
EstructuraD
Primaria
informa de la disposicin de la anterior en el espacio.
La a(alfa)-hlice
La conformacin beta
78
Estructura Terciaria
La estructura terciaria informa sobre la disposicin de la estructura
secundaria de un polipptido al plegarse sobre s misma originando una
conformacin globular. En definitiva, es la estructura primaria la que determina
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
EstaD
conformacin globular facilita la solubilidad en agua y as realizar
Estructura Cuaternaria
Esta estructura informa de la unin, mediante enlaces dbiles (no
covalentes) de varias cadenas polipeptdicas con estructura terciaria, para
formar un complejo proteico. Cada una de estas cadenas polipeptdicas recibe
el nombre de protmero.
El nmero de protmeros vara desde dos como en la hexoquinasa,
cuatro como en la hemoglobina, o muchos como la cpsida del virus de la
poliomielitis, que consta de 60 unidades proteicas.
Las protenas poseen veinte aminocidos, los cuales son: glicina,
alamina, valina, leucina, isoleucina, fenil, alanina, triptfano, serina, treonina,
tirosina, prolina, hidroxiprolina, metionina, cistena, cistina, lisina, arginina,
histidina, cido asprtico y cido glutmico.
79
Funciones
Las protenas determinan la forma y la estructura de las clulas y dirigen
casi todos los procesos vitales. Las funciones de las protenas son especficas
de cada una de ellas y permiten a las clulas mantener su integridad,
S
O
D
A
V
R
E
S
E
HOSsu R
RECrealizan
etc. Todas D
lasE
protenas
funcin de la misma manera: por unin
defenderse de agentes externos, reparar daos, controlar y regular funciones,
tanto
las
propiedades
funcionales
como
los
beneficios
de
alimentacin
de
animales
especialmente
de
monogstricos.
80
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
81
2.4
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
fiber
explosion
(AFEX).
D
licuable bajo
Biomasa
Celulsica:
corresponden
los
materiales
82
S
O
D
A
V
R
E
S
E Nutrition.
Science, Food Technology
S Rand
O
H
C
E
R
E
D
que
forman
una
cadena
lineal
ramificada.
www.wikipedia.com
especficas
Castellanos,
Leyrik;
sobre
Zlotkowski,
sus
respectivos
Daniel
(2006)
substratos.
Manual
de
83
S
O
D
A
V
R
E
S
(1993) Lignin in, Encyclopedia
S RE of Food Science, Food Technology
O
H
C
E
R
E
Dand Nutrition.
Leyrik;
Zlotkowski,
Daniel
(2006)
Manual
de
84
S
O
D
A
V
R
E
S
de cierre hermtico
hechas
REdel mismo material. Adems posee
S
O
H
C
E
R
E
Duna resistencia que permite mantener la temperatura deseada.
cnica fabricado de acero inoxidable 316 el cual posee dos tapas
85
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
CAPITULO III
MARCO METODOLOGICO
CAPTULO III
MARCO METODOLGICO
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
condicionesD
de tratamiento PDA (Presurizacin y Despresurizacin Amoniacal)
El presente trabajo de investigacin, dirigido hacia la optimizacin de las
88
S
O
D
A
V
R
E
S
S RdelEcomportamiento de las diferentes
O
H
C
E
R
directa
mediante
el
anlisis
E
D
89
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D de recoleccin de datos
3.4. Tcnicas
3.4.2
Entrevistas no Estructuradas:
90
S
O
D
A
V
R
E
S
E determinado por medio de la
determinar ciertas variables de S
un R
sistema
O
H
C
E
R
E
D distintas leyes o principios de alguna Ciencia Pura (Balestrini,
aplicacin de
Los Procedimientos Experimentales son las tcnicas a seguir para
2001).
91
S
O
D
A
V
R
E
S
para el acondicionamiento y operacin
S RdeEla planta, las cuales se describirn a
O
H
C
E
R
E
D
continuacin:
Para el cumplimiento de esta fase se realizaron diferentes actividades
92
S
O
D
A
V
R
E
S
y el regulador de aire.
S RE
O
H
C
E
R
E
D
PDA
a diferentes condiciones
condiciones:
93
Temperatura
75 C
S
O
D
A
V
R
E
S
E
0OS R0,25
0,5
1
g NH / g MS
H
C
E
R
E
D
Carga de Amonaco
3
Humedad %
30
FYT-0-30
FYT-0,25-30
FYT-0,5-30 FYT-1-30
60
FYT-0-60
FYT-0,25-60
FYT-0,5-60 FYT-1-60
Temperatura
90 C
Carga de
Amonaco
0,25
0,5
g NH3 / g MS
Humedad %
30
FYT-0-30
FYT-0,25-30
FYT-0,5-30 FYT-1-30
60
FYT-0-60
FYT-0,25-60
FYT-0,5-60 FYT-1-60
94
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
30 % Humedad
70 gr. de MS 30 gr. de agua
300 gr. de MS X= 128,57 gr. de agua
La cantidad de agua que se le debe agregar a la muestra sera
H2O= 128,57 -21,75 =106,83 ml
95
60% de Humedad
40 gr. de MS 60 gr. de agua
300 gr. de MS X= 450 gr. de agua
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D por ejemplo, la cantidad de amonaco (en kg.) para las
Para determinar,
H2O= 450 -21,75 =428,25 ml.
0,3
96
al
porcentaje
de
humedad,
protena
cruda,
celulosa,
hemicelulosa y lignina.
Para la caracterizacin del material tratado y no tratado se sigui el
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
3.6.3.1 Humedad
siguiente orden:
%H =
(H 1 H 2 )
(H 1 H 0 )
Donde:
H0: Peso de la cpsula vaca
H1: Peso de la cpsula mas muestra.
H2: Peso de la cpsula mas muestra seca.
3.6.3.2 Protena Cruda
La determinacin de nitrgeno se realiz por el mtodo de Kjeldahl
(A.O.A.C). Para obtener el contenido de protena cruda se multiplica el valor de
nitrgeno determinado por Kjeldahl por un factor de conversin (6,25).
97
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D Detergente (FDN):
Fibra Neutro
% FND = [(Peso del crisol + paredes celulares ) peso del crisol ]x100 x100
peso de la muestra parcialmete sec a ( gr ) x% Materia sec a
% FAD= [( peso del crisol + fibra cida ) peso del crisol tarado ]x100 x100
peso de la muestra parcialmen te sec a ( gr ) x % Materia sec a
la
determinacin
del
mximo
rendimiento
de
extraccin
98
las
S
O
D
A
V
R
E
S
El rendimiento de extraccin
SdeRlasEprotenas se evalu en cada una de
O
H
C
E
R
E
D planteadas anteriormente y se seleccion como condicin
condiciones
a. Determinacin de Humedad
Norma COVENIN 1156-79 para forrajes y alimentos suculentos.
Procedimiento y materiales a utilizar:
1. Cpsulas de Aluminio
a. Estufa de conveccin forzada se deshidratan las capsulas de
aluminio antes de pesar la muestra alrededor de 15-20 min.
b. Colocar las capsulas de aluminio en el desecador durante 5 min.
2. Calibrar la balanza y pesar alrededor de 0.5 gr. de muestra (follaje de
yuca).
3. Colocar las cpsulas de aluminio con la muestra en la estufa en un
rango de temperatura de 103-105C durante 4 horas.
4. Se retiran las cpsulas de la estufa, se colocan en el desecador por 5
min. y se procede a pesar nuevamente una por una.
5. Se colocan las muestras en la estufa durante media hora a la misma
temperatura.
6. Se procede a pesar nuevamente y se repite hasta que la muestra
mantenga un peso constante; en el caso que no lo mantenga se coloca
la muestra en la estufa durante 15 min. y as sucesivamente.
99
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Fig. 24 Estufa de Convencin forzada
Fuente: Montiel y Rodrguez (2007)
Fig. 25 Desecador
Fuente: Montiel y Rodrguez (2007)
100
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Fig. 26 Balanza
Fuente: Montiel y Rodrguez (2007)
101
MTODO DE KJELDHAL
1. Oxidacin (toda la materia en sulfato de potasio y xido de mercurio).
a. El agente oxidante es el cido sulfrico. (Normas Covenin)
b. Peso: Muestra= 0.1 g. K 2 SO4 = 1.9g. HgO = 40 mg.
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
2. Digestin
3. Preparacin de solucin
a. Peso: NaOH =60 g. Na 2 S 2 O3 = 6 g. Agua destilada 100 ml.
5. Destilacin
a. A cada muestra se le agrega 20 ml de agua destilada.
b. Se agregan 10 ml de NaOH.
i. Es importante agregar el NaOH lentamente debido a que la
reaccin es exotrmica y causa la separacin del NH3 y
asegurar que la manguera est sumergida en la solucin de
cido brico.
c. Se destila hasta un volumen de 40 ml en el vaso precipitado de 50
ml.
102
6.
S
O
D
A
V
R
E
S
color original del indicador.
S RE
O
H
C
E
R
E
D
7. Clculos
concentrac in ( HCl )(
a. HCl ( eq ) xP . Eq ( N )(
eq
) * titulacion ( L ) = HCl ( eq )
L
g
) = (g)N
eq
N (g)
* 100
Muestra ( g )
Pc = % N * Factor ( 6 . 25 )
%N =
Fig. 27 Digestor
Fuente: Montiel y Rodrguez (2007)
103
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Fig. 28 Digestin
104
S
O
D
A
V
R
E
S
E
Montiel
y Rodrguez
(2007)
SR
CHO
REFuente:
DE
c.
105
1g
*
* VmL
mL 10 6
g . p.cruda.no.tratada 100 g .M .S
X 2 gr.M .S
protenas total = X
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
( g )P.soluble
% Ext =
*100
( g )P.Total
Concentracin =
Y 0.0941
0.0007
106
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Fig. 32 pHmetro
Fuente: Montiel y Rodrguez (2007)
Fig. 33 Centrfugador
Fuente: Montiel y Rodrguez (2007)
107
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Fig. 34 Extractos lquidos del follaje de yuca.
Fuente: Montiel y Rodrguez (2007)
d. Mtodo de Lowry Modificado
Reactivos Utilizados
1. Solucin DOC (Deoxicolato de Sodio)
2. cido Tricloracetico TCA.
3. Reactivo de Lowry
4. Reactivo de Folin
Procedimiento de medicin de patrones y blancos para la elaboracin de
la curva de calibracin.
1. Agregar la cantidad mostrada en la tabla 9:
Tabla 9. Cantidades de reactivo para la elaboracin de la curva de calibracin.
Nmero de Eppendorf
Solucin
de
Protena
Agua
(L)
Estndar (L)
62,5
437,5
50
125
375
100
250
250
200
375
125
300
500
400
total a agregar
1312,5
1187,5
108
S
O
D
A
V
R
E
S
Dejar reposar 10 min.
S RE
O
H
C
E
R
E
D 100 microlitos de TCA.
Agregar
5. Agitar
6. Centrifugar las soluciones a 10000 rpm.
7. Decantar
8. Disolver pellets en 1,0 microlitos de reactivo de Lowry
a. Nota: Transferir sobrenadante a un nuevo eppendorf
9. Enjuagar los tubos de centrifugado con 1000 microlitos de agua
destilada.
10. Mezclar.
11. Dejar los eppendorf con muestra reposar 20 min.
12. Agregar 0,5 microlitos de Folin
13. Permitir el desarrollo de color a la muestra.
14. Transferir soluciones a las celdas de cuarzo de 1 ml.
15. Realizar un barrido UV en 500-600nm
16. Dejar reposar 30 min.
17. Medir con el espectroscopio UV.
18. Elaborar la curva con cantidad de protena (g) vs. absorbancia.
19. Obtener la ecuacin de la lnea recta para el clculo de la concentracin
en funcin de la absorbancia de las protenas a medir.
109
S
O
D
A
V
R
E
S
10. Esperar 30 min. para el desarrollo
de E
color.
SR
O
H
C
E
R
E
D
11. Leer absorbancia
(cubetas de 1 ml).
9. Agregar 200 microlitros del reactivo de Folin.
110
400 Microlitos
Fd=?
40 microlitros DOC.
40 microlitros TCA.
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Fd = factor de
dilucin
Centrifugacin
ppdo
Sobrenadante
400 microlitros
H 2O
111
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
CAPITULO IV
ANALISIS DE RESULTADOS
111
Capitulo IV
Anlisis de los Resultados
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
112
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
Realizar encendido
de
compresor
de aire si es requerido para alcanzar
O
H
C
E
R
E
D
la presin de 120 psi. Despus realizar su apagado.
113
S
O
D
A
V
R
E
S
RdeEsalida. Para estabilizarlo se cierra la
abierto perteneciente
alS
gato
O
H
C
E
R
E
D
solenoide VSS-3 y se procede a cerrar la VPM-001.
aire con la VSS-3, se procede a colocar el interruptor de cerrado a
114
S
O
D
A
V
R
E
S
RE
procede aC
VPM-001.
HOlaS
RE cerrar
E
D
c. Caldern.
d. Bomba de Amonaco.
e. Bombona de Amonaco
115
f. Bombona de nitrgeno
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
nitrgeno en la tubera.
g. Compresor de aire
Abrir la solenoide 3 (VSS-3) de las bombonas de aire que hace pasar el aire
por la tubera, siempre y cuando se encuentre cerrado la VPM-001 que
alimenta el sistema neumtico. En este caso se procede a abrir la solenoide
1 (VSS-1) que permite el paso de aire al reactor; sto se realiza hasta una
presin de 50 lbs. Despus se procede a cerrar las solenoides 3 y 1 para
estabilizar el sistema.
116
S
O
D
A
V
R
E
S
E neumtico. En este
alimenta
OS elRsistema
RECH
DE
caso se
(segn
el
procedimiento
explicado
117
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
comienza el tiempo de reaccin.
118
S
O
D
A
V
R
E
S
compresor de aire.
S RE
O
H
C
E
R
E
D
procede
la
despresurizacin
(mtodo
explicado
en
la
despresurizacin).
4.1.4 Puesta en Servicio
Comienza la presurizacin.
Se procede a la despresurizacin.
119
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE para otra prueba
SeR
repite
todo
elO
procedimiento
H
C
E
E
D
guantes).
4.2
FASE II
Aplicar el tratamiento
PDA
a diferentes condiciones
Temperatura (C)
75
90
0,25 0,50
1
0
0,25 0,50
%H
30
60
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
120
4.3
al
porcentaje
de
humedad,
protena,
celulosa,
hemicelulosa y lignina.
4.3.1 Contenido de Humedad
S
O
D
A
V
R
E
S
La Tabla 11. Muestra
elO
contenido
S REde humedad despus del tratamiento
H
C
E
R
E
D
% Ht
% Hta
No tratado
6,76
7,88
0:30:75
0.25:30:75
0.5:30:75
1:30:75
0:60:75
0.25:60:75
0.5:60:75
1:60:75
0:30:90
0.25:30:90
0.5:30:90
1:30:90
0:60:90
0.25:60:90
0.5:60:90
1:60:90
15,72
21,38
20,16
21,15
55,66
53,48
52,67
53,43
16,65
18,56
20,43
21,65
47,86
51,84
53,24
51,49
9,36
10,02
9,75
9,25
9,36
13,81
12,42
10,70
7,87
9,32
8,76
9,58
11,55
15,14
10,68
13,00
121
S
O
D
A
V
R
E
S
de equilibrio.
S RE
O
H
C
E
R
E
D
% Nitrgeno
% Amonaco
0:0:0
0:30:75
0.25:30:75
0.5:30:75
1:30:75
0:60:75
0.25:60:75
0.5:60:75
1:60:75
0:30:90
0.25:30:90
0.5:30:90
1:30:90
0:60:90
0.25:60:90
0.5:60:90
1:60:90
0,78
3,00
3,20
4,61
4,63
5,24
3,01
3,02
3,17
3,05
3,14
3,79
5,14
5,20
3,02
2,92
2,94
3,07
0,79
0,00
0,20
1,60
1,63
2,24
0,01
0,01
0,16
0,05
0,14
0,79
2,14
2,20
0,01
-0,08
-0,07
0,07
% Protena
Cruda
5,03
18,67
20,02
28,73
29,93
32,77
19,68
18,85
19,79
19,08
19,65
23,67
32,13
32,49
17,26
18,28
17,11
19,33
122
de
Kjeldahl,
transformados
en
contenido
de
amonaco
S
O
D
A
V
R
E
S
Los valores negativos
observados
S REse encuentran dentro del rango del
O
H
C
E
R
E
D
estequiomtricamente.
123
% Celulosa
% Hemicelulosa
%Lignina
FY-NT
18,58 2,02
1,05 0,06
16,78 1,15
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
FY-NT: Follaje
de
yuca
no
tratado
E
R
E
D
FY-T
15,11 2,02
0,85 0,06
13,63 1,15
124
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
0,35
Absorbancia promedio
0,3
0,25
0,2
0,15
0,1
y = 0,0007x + 0,0491
R2 = 0,9942
0,05
0
0
100
200
300
400
500
125
Rendimiento, %
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
25
20
15
60
10
30
Humedad, %
NT
0
NT
0,25
0,5
Carga, kg amonaco/kg ms
126
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
Rendimiento, %
20
15
60
10
30
Humedad, %
NT
0
NT
0,25
0,5
Carga, kg amonaco/kg ms
127
S
O
D
A
V
R
E
S
que en el trabajo
deO
Chacn
S RyEcol. (2007), lo que indica
H
C
E
R
E
D
Por otra parte, el rendimiento del follaje no tratado en este trabajo fue
menor
que es
128
Rendimiento, %
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
20
15
60
Humedad, %
10
5
30
0
75
90
Temperatura, C
129
Conclusiones
CONCLUSIONES
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
lignocelulsica.
Las muestras tratadas con mayor humedad (60%) retienen menos amonaco,
casi despreciable, por lo que son recomendables para optimizar y abaratar el
proceso de recuperacin del amonaco.
130
Conclusiones
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
131
Recomendaciones
RECOMENDACIONES
S
O
D
A
V
R
E
S
RE
S
Se sugiereE
determinar
la digestibilidad
por pepsina a las muestras
O
H
C
R
E
D
tratadas con agua a presin y con amonaco que tuvieron mayor
rendimiento.
132
Bibliografa
BIBLIOGRAFA
S
O
D
A
V
R
E
S
S RE
O
H
C
E
R
E
D
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R
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