Tema 13.

Maduracin de Linfocitos

Tema 13: Maduracin de los linfocitos B y T: papel de la

mdula sea y el timo. Tolerancia Inmunolgica.
-Maduracin de los Linfocitos B
-Maduracin de los linfocitos T
-Tolerancia inmunolgica
Tolerancia en los Linfocitos T
Tolerancia en los linfocitos B
El proceso de desarrollo y formacin de linfocitos efectores
capaces de dar una respuesta adecuada al antgeno pasa por tres
fases fundamentales:
1.- Produccin de los linfocitos hasta alcanzar el estado maduro
2.- Activacin por el antgeno especifico, que llevara a la
proliferacin y expansin clonal.
3.- Diferenciacin en clulas efectoras. Son los estados funcionales
de los linfocitos y los que ejercen la verdadera lucha contra los
patgenos.
Produccion y maduracin de los linfocitos B
A expensas de las Clulas Madre hematopoyeticas
pluripotenciales CMPH se diferencian los distintos Progenitores,
entre los que est el progenitor linfoide comn (PLC), a partir del
que se generan los linfocitos B y T. Parece que la seal generada a
travs de un receptor de membrana (llamado Notch 1) induce la
diferenciacin hacia la lnea T, mientras que la falta de esta seal
lleva, por defecto, a los linfocitos B.
A lo largo de su vida, cada linfocito B pasa por una serie de
estados de maduracin y diferenciacin. El repertorio primario de
receptores tipo B esta constituido por un nmero de clones de
clulas B que existen antes de la inmunizacin, es decir los
linfocitos que son especficos para diferentes antgenos, se
desarrollan antes de su exposicin a esos antgenos.
Como ya se ha mencionado, todos los linfocitos B surgen de
la mdula sea a partir de una clula madre.
A partir de esta surgen los denominados las clulas Pro-B,
que son clulas progenitoras con capacidad limitada de autorenovacin y que derivan directamente de las clulas
pluripotenciales. Se caracterizan por la unin D-J (Pro-B tempranas)
y V-DJ (Pro-B tardas). Esta unin se intenta primero con un
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cromosoma. Si no tiene xito se utiliza el otro cromosoma, en un

proceso conocido como exclusin allica, que garantiza que solo se
exprese la cadena H de uno de los dos alelos del cromosoma. A
partir de estas se forman las clulas pre-B grandes, existentes
tan slo en los tejidos hematopoyticos, y que ya expresan a nivel
citoplasmtico cadenas pesadas constituidas por una regin
variable productiva y una constante. Hay que resaltar que estos
pre-B grandes no expresan IgM de membrana y por tanto son
incapaces de reaccionar con al antgeno. Estas cadenas se asocian
a unas protenas homologas a las cadenas ligeras pero que
carecen de la regin variable y que son idnticas en todas las
clulas pre-B. Los complejos formados por esas cadenas pesadas y
las protenas homologas, denominadas cadenas ligeras
sustitutivas, (5) se pueden expresar en pequeas cantidades en
la superficie celular formando el Receptor pre-B.
Este complejo receptor Pre-B se expresa solo
transitoriamente, posiblemente porque la produccin de 5 cesa
inmediatamente despus de su formacin. Este complejo es un
punto de chequeo importante en el desarrollo de las clulas B; si
no se forma se bloquea el desarrollo tras el reordenamiento de los
genes de la cadena pesada., es decir, proporciona las seales
necesarias para la maduracin de los linfocitos B, aunque no se
conoce, an, el modo como dicha accin se efecta.
Esto permite a la clula dividirse para dar lugar a las clulas
Pre-B pequeas, en las que comienza el reordenamiento de las
cadenas Ligeras. En este aspecto la cadena , solo se produce
cuando falla la cadena k. Una vez terminado el proceso, la
molcula de IgM resultante se expresa en la superficie celular junto
a las cadenas Ig e Ig. En general el 65% de los linfocitos B
expresa la kappa y el 35 restante la lambda
Estas clulas B con el receptor de membrana ya formado
sern los linfocitos B inmaduros. Estos, salen de la mdula
sea dirigiendose al bazo donde completan su maduracin.
Durante el trayecto y antes de convertirse definitivamente en
linfocitos B maduros estos linfocitos reciben el nombre de
Linfocitos transicionales (BTr), con dos subpoblaciones (BTr1 y
BTr2). (Los BTr1 se encuentran alrededor de la arteriola central y
los BTr2 en los folculos esplnicos). Durante su etapa de
maduracin, los linfocitos B sufren dos procesos de seleccin
negativa, por el que son eliminados aquellos linfocitos que
reaccionan o reconocen molculas propias. El primero de esos

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procesos tiene lugar en la mdula y el segundo en el bazo en el

paso de BTr1 a BTr2
Este proceso de maduracin, esta regulado entre otros por
factores solubles entre los que habra que destacar:
SCF (Stem Cell Factor): Est presente en la membrana de las
clulas estromales, mientras que los precursores B expresan
su ligando (c-kit), que es un receptor con actividad tirosinkinasa.
IL-7: Indispensable para el desarrollo B y T
SDF (Factor derivado del Estroma): Quimiocina que se
expresa de modo constitutivo por las clulas estromales y
acta como factor de crecimiento B.
La IL-7, esta producida por las clulas del estroma y es un
factor de crecimiento para las clulas pre-B. El factor derivado del
estroma, (PBSF/SDF-1) que se produce constitutivamente por las
clulas estromales, tiene un papel importante en las primeras
fases del desarrollo (los ratones que carecen del gen para esta
quimioquina no consiguen que se desarrolle la lnea B).
Una vez completada su maduracin los linfocitos B se
convierten en Linfocitos B maduros virgenes. Las clulas B
pasan a los rganos linfoides secundarios (a travs de las vnulas
endoteliales altas), para comenzar su recirculacin entre los
rganos linfoides y la sangre. En esta fase los linfocitos coexpresan
en su membrana los receptores IgM e IgD, estando, ahora si
preparados para interaccionar con el antgeno. De hecho la
mayora de los linfocitos B circulantes son IgM e IgD positivos. Si
estos linfocitos no encuentran un antgeno entran en apoptosis en
pocas semanas.
Adems de la seleccin negativa en la mdula sea las clulas B
sufren un proceso de seleccin positiva en los rganos linfoides
secundarios, como consecuencia de la interaccin con el antgeno.
Cuando las clulas B vrgenes se encuentran con el antgeno y
reciben las seales coestimuladoras apropiadas, se activan y
pasan a formar parte de los centros germinales. All proliferan y
experimentan mutaciones puntuales. Al azar, en los genes de las
regiones variables. El destino de estas clulas va ligado a la
afinidad resultante de las mutaciones: las clulas con gran afinidad
por el antgeno sobrevivirn y se expandirn, mientras que las de
baja afinidad sufrirn la apoptosis
Poblaciones de Linfocitos B
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Dentro de la poblacin de linfocitos se pueden distinguir

diferentes subpoblaciones que difieren tanto fenotpicamente, (por
las molculas que expresan en su membrana), como por su
funcin. Dentro de ellas podemos distinguir:
Poblacin B2:
Es la poblacin clsica, siendo la mas abundante en la
circulacin y en los tejidos linfoides secundarios. Es una poblacin
que solo se divide tras su interaccion con el antgeno y para la que
es necesaria la cooperacion con los linfocitos Th
Poblacin B1
Su desarrollo es anterior al de las clulas B2. Surgen de una
clula troncal muy activa en el periodo prenatal. Los minigenes V
utilizados son muy escasos (solo los ms cercanos a los D). Esto
unido a no tener en el proceso de unin nucletidos N, al carecer
esa clula en el periodo prenatal de TdT, hace que su diversidad
sea menor. Por ello los anticuerpos secretados sean de baja
afinidad, presentando adems una propiedad que es la
poliespecificidad. Despus del nacimiento se siguen produciendo
clulas B1 en la mdula, usando ya una repertorio ms amplio de
segmentos V y presentando nucletidos N. Con el tiempo la
mdula deja de producir clulas B1, mantenindose la poblacin,
en los adultos, de la divisin de la poblacin B1 existente. Esta
divisin o proliferacin la efectan en ausencia de antgeno,
diferencindose en esto de la poblacin B2, que solo se divide tras
su interaccin con el antgeno
Son escasos en bazo y ganglios linfticos pero son la
poblacin B predominante en la cavidad peritoneal y pleural.
Constituyen aproximadamente de un 5 a un 10% de la poblacin B.
Se caracteriza por presentar el marcador CD5. El hecho de que la
poblacin sea autorrenovable explicara las causa de que casi
todas las leucemias linfocticas crnicas derivan de esta poblacin
CD5+.
Secretan frecuentemente de forma espontnea IgM y
reaccionan frecuentemente con antgenos propios.
Estos
anticuerpos se denominan anticuerpos naturales. Asimismo
tambin secretan IgA secretora, siendo los responsables de gran
parte de la presencia de este tipo de anticuerpo en las mucosas. La
fuente de estimulacin antignica, se atribuye a la flora microbiana
del tubo digestivo.
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Las B1 contribuyen poco a la respuesta adaptativa frente a

los antgenos proteicos pero mucho frente a al respuesta frente a
antgenos timo independientes de tipo 2, es decir frente a los
antgenos hidrocarbonados repetitivos y lipopolisacaridos. Su
funcin inmunitaria parece estar relacionada con su unin a
polisacridos bacterianos comunes, es decir parecen haber
evolucionado para el reconocimiento de antgenos bacterianos
comunes, permitindoles as contribuir a la fase inicial de la
respuesta inmune.
Una de sus caractersticas es que para su activacin no
requieren la colaboracin con los linfocitos T. Aunque esta
activacin no es suficiente para que se diferencien a clulas
productoras de anticuerpos.
En este aspecto existen semejanzas notables entre el
desarrollo de las clulas B1 y el de la segunda lnea de clulas T,
las T. Estas tambin presentan un repertorio limitado de
receptores, no hay adicin de nucletidos y son las primeras en
producirse durante la ontogenia.
De esta forma, los linfocitos gamma-delta, el complejo no
clsico CD1 y esta poblacin linfocitaria, constituye un sistema
paralelo, mucho mas ancestral, evolutivamente hablando, y que
reacciona frente a antgenos muy comunes de los organismos
patogenos.
Poblacin de la zona marginal del Bazo (BZM)
Esta tercera poblacin est especialmente adaptada para
producir grandes cantidades de IgM, en los tres o cuatro das
posteriores a la estimulacin antignica. Esto es debido a que por
su ubicacin esta poblacin es la primera en entrar en contacto
con los antgenos que circulan por la sangre. Al igual que los B1,
tampoco necesitan las seales coestimuladoras proporcionadas
por los linfocitos T y responden preferentemente a antgenos
polisacridos. Uno de los factores que intervienen en la activacin
de esta poblacin es el complemento. El CD21 es una molcula de
superficie propia de los linfocitos B tambin denominado receptor-2
del complemento (CR2) y que junto con el CD19 y CD81 forman el
"complejo correceptor". Al unirse el CD21 con un fragmento del
complemento (C3bi), ocasiona la activacin de los linfocitos B,
proporcionando la segunda seal coestimuladora. La transduccin
de la seal se realiza a travs de las molculas CD19 y CD81,,
mientras que la unin a la ligando es realizado por CD21. Por eso,
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el CD21 es considerado un "correceptor". Es una molcula que

caracteriza a los linfocitos B maduros y en recin nacidos y
lactantes su expresin est disminuida.
El bazo, al ser un rgano donde conviven las clulas BZM y
las clulas B2, ha proporcionado un lugar idneo para comparar el
comportamiento de ambas ante la estimulacin antgenica. En
estos estudios se ha visto que la poblacin de clulas BZM, es
especialmente til en las etapas tempranas de la infeccin. En
estos casos, las clulas BZM responden mejor y ms rpidamente
a la estimulacin antignica, diferencindose mas rpidamente a
clulas plasmticas. Esto hace que esta poblacin, con una
extensa expresin de CD24 sea mayoritariamente responsable de
la secrecin temprana de IgM en los estadios tempranos de la
infeccin frente a patgenos sanguneos. Por el contrario la
poblacin B se hace mayoritaria pasadas las 48 horas de la
infeccin
En definitiva estas dos poblaciones B1 y BZM, por su
localizacin anatmica, son ideales como primera lnea de defensa
para antgenos que entran por va area o digestiva y por va
hemtica respectivamente.
Recientemente se est considerando a estas dos ltimas
poblaciones como clulas B del sistema Innato, representando un
puente entre la defensa innata y la adaptativa
Maduracin de los Linfocitos T en el Timo
Como en el caso de los linfocitos B, las clulas T derivan de la
clula madre pluripotencial en la mdula sea. En este lugar se
originan los precursores de las clulas T, que an no expresan el
receptor TCR, pero que ya estn comprometidas hacia la lnea de
linfocitos T. Estos precursores abandonan la mdula sea y
penetran en la corteza tmica.
En el proceso de maduracin de los linfocitos T, tiene lugar la
recombinacin somtica, la expresin de los genes seleccionados
para formar el receptor TCR, la proliferacin celular, la seleccin
inducida por los antgenos para adquirir finalmente la competencia
funcional.
En este conjunto de acontecimientos es fundamental el paso
de los linfocitos inmaduros por el Timo, como demuestra el hecho
de que ratones recin nacidos timoctizados no consiguen
desarrollar linfocitos maduros.
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Un aspecto interesante es que el timo involuciona con la

edad, siendo prcticamente indetectable despus de la pubertad.
Seguramente los restos tmicos son suficientes para permitir una
cierta maduracin de los linfocitos T. En cualquier caso la
necesidad de generar linfocitos T es menor en el adulto, toda vez
que los linfocitos T de memoria duran mas de 20 aos y se
acumulan con la edad. Por otro lado la timectomia en el adulto no
se acompaa de una perdida apreciable de la funcion T
Los linfocitos T en desarrollo localizados en el timo se
conocen como timocitos. Los mas inmaduros no expresan ni el
receptor TCR ni el complejo receptor acompaante ni las molculas
CD4 ni CD8. Al principio, los timocitos, migran por la corteza del
Timo y comienzan expresando la molcula CD44. En el siguiente
paso se comienza a expresar la cadena del receptor IL-2,
conocida como CD25, comenzando a disminuir la expresin de la
molcula CD44. Durante esta etapa tampoco expresan los
marcadores de poblacin CD4 ni CD8, razn por lo cual estas
clulas reciben el nombre de Dobles negativos. En esta fase la
estructura de los genes del receptor es todava la propia de la lnea
germinal. Todava en la zona cortical del Timo, los timocitos
comienzan el reordenamiento de los genes que darn lugar a la
expresin de los receptores. Parece que el reordenamiento y
comienza prcticamente al mismo tiempo, dependiendo de que se
forme uno u otro receptor de cul de ellos se reodene con xito
antes. Si el reordenamiento tiene xito se paraliza la cadena
beta, continundose con la expresin del receptor . Sin
embargo, el primer reordenamiento con xito suele ser el de la
cadena beta, razn por la cual la mayora de los timocitos son
desviados hacia la poblacin , silencindose la transcripcin del
.
Al igual que ocurre con los linfocitos B, con las cadenas 5, en
los linfocitos T ocurre un fenmeno similar. La cadena se asocia
con una cadena pre-T, siendo el conjunto expresado en la
superficie. Esta unin tiene dos funciones primordiales, por un
lado favorecer la expresin de las molculas CD4 y CD8, y por otro
estimular la proliferacin de esas clulas. De este modo en las
clulas hijas se reordenan los genes de la cadena y se expresan
las molculas CD4 y CD8, en el timocito, que se convierte as en
una clula Doble positiva. Finalmente y despus de la expresin
de estas dos molculas tiene lugar, durante la fase de migracin
de la zona cortical a al medular, la expresin del receptor
definitivo. De este modo, las clulas dobles positivas representan
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el 80% de los timocitos del Timo. De esta poblacin la mayora va a

morir por apoptosis durante el proceso de seleccin que se
produce en el timo. Finalmente los timocitos se decantan por una
de los poblaciones CD4+ o CD8+, fundamentalmente debido a la
especificidad que presente el receptor del timocito hacia las
molculas de clase I del CMH (CD8+) o hacia las de clase II
(CD4+).
SELECCION TMICA
Los nicos linfocitos validos, serian aquellos que reconozcan
pptidos extraos unidos a las molculas del CMH. Como en el
proceso de maduracin se produce la recombinacion al azar de los
genes, es seguro que durante el mismo se generan TCR que no
sean capaces de reconocer el complejo CMH-pptido y que por lo
tanto resultaran intiles para el sistema. Tambin se formaran
receptores que reconozcan CMH-pptido propio con mucha avidez,
que se traducira en enfermedades autoinmunes. Por ello, el
sistema inmunitario efecta una doble seleccin durante el
proceso de maduracin para eliminar estas poblaciones, que
resultan, bien inutiles o bien perjudiciales
1.- Seleccin positiva:
Es el proceso que hace posible la supervivencia de aquellos
timocitos cuyo TCR es capaz de unirse a los Complejos del CMHpeptido propio (potencialmente dainas) y CMH-peptido extrao,
mientras que entran en apoptosis aquellos que no son capaces de
efectuar dicho reconocimiento. Es decir en este paso se eliminan
todas aquellas clulas T que serian incapaces de reconocer al
antgeno en la periferia. Este reconocimiento se debe,
probablemente, a un reconocimiento debil de los complejos CMHpeptido propio, presentados por las clulas epiteliales del timo. En
este caso son, principalmente las clulas epiteliales del timo las
que actan como clulas presentadoras (CPAs)
2.- Seleccin Negativa:
En este proceso, se elimina aquella poblacin cuyos TCR se
unen con alta afinidad al Complejo CMH-peptidos propios.
Asimismo y de forma causal tambin sern eliminados las clulas T
que se unan con demasiada afinidad al CMH-peptido extrao. De
esta forma se asegura que el repertorio de las clulas T, esta
restringido por el CMH, y es tolerante con los antgenos propios
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presentes en el timo. En este caso la seleccin se debe a un

reconocimiento de alta avidez de los complejos CMH-peptido. En
este caso, la interaccin con macrfagos y clulas dendrticas lleva
a la eliminacin de clones de linfocitos T que reconocen,
principalmente autoantgenos.
En los sujetos jvenes el timo contiene numerosos
precursores T (timocitos) embebidos en un entramado de clulas
epiteliales (estroma tmico), as como clulas dendrticas
intratmicas y macrfagos que proporcionan el microambiente para
el desarrollo de las clulas T.
ToleranciaCentral
Se entiende por tolerancia inmunolgica un estado
adquirido en el cual el SI aprende a no responder
frente a un antgeno concreto, eliminando o anulando
funcionalmente a las clulas especficas para ese antgeno. El
establecimiento de la tolerancia requiere el contacto previo con el
antgeno, que en este caso es denominado tolergeno.
Actualmente se concibe que en la tolerancia de los linfocitos T y B
intervienen dos mecanismos bsicos: la eliminacin (deleccin
clonal) y la anergia clonal, denominados tolerancia Central y
perifrica,
respectivamente,
complementados
por
otros
mecanismos peor definidos.
Una vez formados, son necesarios una serie de mecanismos
de control que aseguren que estos linfocitos no puedan reconocer
molculas propias. El primero de estos procesos, que es la
seleccin negativa, tiene lugar en el ambiente de la mdula sea
dando lugar a la Tolerancia central B. Dado que no todos los
antgenos estn representados en la mdula sea, se hace
necesario un segundo proceso, tambin de seleccin negativa,
para evitar la salida al exterior de clulas autorreactivas,
denominado como induccin de la Tolerancia perifrica y que
tendr lugar en el rgano de maduracin posterior (Bazo)
Tolerancia B
En la Tolerancia central caben tres posibilidades:

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1.- Los linfocitos B que no interaccionan con ninguna molcula, es

decir su BCR no recibe ninguna seal, prosiguen su maduracin.
Las protenas que inducan los reordenamientos desaparecen.
2.- Los linfocitos que interaccionan levemente con ciertas
molculas, es decir interaccionan con molculas solubles, se
inactivan, entrando en un estado de no respuesta, denominado
ANERGIA. Estos linfocitos autorreactivos si bien salen de la
mdula sea y migran hacia el Bazo, no son capaces de activarse
y mueren relativamente pronto.
3.- Los linfocitos B que reciben una seal intensa a travs de su
BCR, por ejemplo por reconocimiento de molculas multivalentes
mueren por apoptosis en la mdula sea.
Como vemos este mecanismo, se realiza para evitar que no
madure ningn linfocito que reaccione contra molculas presentes
en la mdula sea ,que son normalmente molculas propias, y es
una cualidad importantsima para mantener la tolerancia frente a
lo propio.
Los linfocitos que sobreviven a esta seleccin negativa, que
representan solo un pequeo porcentaje del total generado, sale
de la mdula sea dirigindose hacia el bazo, donde culminan su
maduracin. Los linfocitos en circulacin de la mdula al bazo, se
denominan Linfocitos B transicionales (BTr). Dentro de esta
poblacin existen dos subpoblaciones, la BTr1 y la BTr2. La primera
se puede encontrar en la circulacin y alrededor de la arteriola
central del bazo. Durante este estadio estos sufren otro proceso de
seleccin negativa si reciben seales de molculas propias en un
mecanismo denominado induccin de tolerancia perifrica y
que asegura que aquellos linfocitos que han sobrevivido a la
tolerancia central no reaccionen frente a molculas propias. Las
que sobreviven dan lugar a la otra subpoblacin (BTr2)
Tolerancia T
Eliminacin clonal de los linfocitos T.
Se produce, sobre todo, en los estados inmaduros durante su
desarrollo en el timo. Desde el momento en que poseen un TCR
funcional, los timocitos comienzan a interaccionar con las clulas
del estroma tmico (clulas epiteliales, clulas dendrticas y
macrfagos), las cuales les presentan los antgenos que tiene
disponibles, unidos a sus molculas CMH. En lneas generales, se
considera que los antgenos presentados en el timo son
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exclusivamente auto-antgenos pues la barrera hematoenceflica impide la entrada de antgenos extraos en cantidades
suficientes como para que la presentacin sea eficaz.
Como ya hemos mencionado, la seleccin negativa consiste en la
eliminacin de los timocitos cuyo TCR sea capaz de reconocer al
CMH junto con los antgenos presentes en ese momento y en ese
entorno. Este proceso, cuyo objetivo es que los linfocitos T que
salgan del timo no reaccionen frente a los antgenos propios, es
probablemente el mecanismo ms eficaz de tolerancia frente a los
antgenos proteicos propios. Los pptidos presentes en el timo en
concentraciones elevadas deriva, con toda probabilidad de
antgenos proteicos expresados ampliamente en el cuerpo.
Durante este proceso, algunos linfocitos T pueden convertirse, tras
su encuentro con el antgeno en el Timo, en linfocitos
reguladores, cuya funcin es inhibir la respuesta inmunitaria.

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