Cromatografa de Gases

1. Historia
Archer John Porter Martin, que fue galardonado con el Premio Nobel por su trabajo en
el desarrollo de la cromatografa lquido-lquido (1941) y de papel (1944), sent las
bases para el desarrollo de la cromatografa de gas y ms tarde de la cromatografa
lquido-gas (1950).
La cromatografa de gases fue inventado por AJP Martin, quien, con RLM Synge en
1952, propusieron que la fase lquida mvil utilizada en la cromatografa lquida podra
ser reemplazado por un gas adecuado. La base de esta recomendacin fue que,
debido a difusividad de los gases es mucho ms alta de solutos en los gases en
comparacin con los lquidos, el equilibrio en un proceso cromatogrfico sera mucho
ms rpido y por lo tanto, las columnas mucho ms eficiente con tiempos de
separacin mucho ms cortos. As, el concepto de cromatografa de gases fue
concebido hace ms de cincuenta aos.

2. Cromatografa
Es una tcnica de separacin en la cual, los componentes de la muestra, se
distribuyen entre dos fases de diferente naturaleza, como consecuencia de la variacin
de velocidad que se establece al ser arrastrados por una fase mvil, lquida o
gaseosa, a travs de una fase estacionaria, slida o lquida.
La cromatografa de gases es el procedimiento comnmente utilizado en el anlisis
qumico, consiste en una muestra que se vaporiza y se inyecta en la cabeza de la
columna cromatografca. La muestra se transporta a travs de la columna por el flujo
de fase inerte, mvil gaseosa. La propia columna contiene una fase lquida
estacionaria que se adsorbe sobre la superficie de un slido inerte.
Esta tcnica utiliza la separacin por elucin, es decir, proceso por el cual todos los
solutos terminan por abandonar la columna
3. Tipos de Cromatografa de gases
Cromatografa gas-slido (GSC): la fase estacionaria es slida y la retencin
de los analitos en ella se produce mediante el proceso de adsorcin.
Precisamente este proceso de adsorcin, que no es lineal, es el que ha
provocado que este tipo de cromatografa tenga aplicacin limitada, ya que la
retencin del analito sobre la superficie es semipermanente y se obtienen picos

de elucin con colas. Su nica aplicacin es la separacin de especies

gaseosas de bajo peso molecular

Cromatografa gas-lquido (GLC): es la que se utiliza ms ampliamente, y que
se puede llamar simplemente cromatografa de gases (GC). La GLC utiliza
como fase estacionaria molculas de lquido inmovilizadas sobre la superficie
de un slido inerte.

4. Equipo

Esquema general de un cromatgrafo de gases se muestra. Figura 1

Los componentes fundamentales de un cromatgrafo de gases, son:

Fuente de gas.
El gas portador cumple bsicamente dos propsitos: Transportar los componentes de
la muestra, y crear una matriz adecuada para el detector. Un gas portador debe reunir
ciertas condiciones:

Debe ser inerte para evitar interacciones (tanto con la muestra como con la fase
estacionaria)

Debe ser capaz de minimizar la difusin gaseosa

Fcilmente disponible y puro

Econmico

Adecuado al detector a utilizar...

El gas portador debe ser un gas inerte, para prevenir su reaccin con el analito o la
columna.

Generalmente

se

emplean

gases

como

el helio, argn, nitrgeno, hidrgeno o dixido de carbono, y la eleccin de este

gas en ocasiones depende del tipo de detector empleado. Luego tenemos un sistema
de manmetros y reguladores de flujo para garantizar un flujo estable y un sistema de
deshidratacin del gas, como puede ser un tamiz molecular.
Sistema de inyeccin.
La introduccin de la muestra donde esta presentes los hidrocarburos se
hace mediante una micro jeringa graduada en micro litros (1 micro litro =
10-6 litros), provista de una aguja hipodrmica con la cual se atraviesa un
tapn de caucho. Al presionar el mbolo la muestra es depositada en una
cmara de inyeccin, la muestra se puede introducir mediante vlvulas,
circuitos cerrados o en forma automatizada para minimizar errores en la
cantidad inyectada.
Horno y columna cromatogrfica
La columna efecta la separacin, siendo sta el objetivo primario de la
cromatografa de gases. El escoger la columna apropiada es una decisin
importante y difcil en una buena tcnica para cromatografa de gases.
Dentro de ella se encuentra la fase estacionaria lquida dispuesta bien sea
sobre un relleno slido denominado soporte o sobre el lado interior de la
pared.
Sistema de deteccin
El detector cromatogrfico es un dispositivo que mide la concentracin de
cada uno de los componentes de la muestra y genera una seal elctrica
proporcional a dicha concentracin. Los detectores son diversos, y
constituyen una parte muy importante del cromatgrafo de gases.
Sistema de registro.

Sistemas de introduccion de muestras

En esencia, los dispositivos de inyeccin de muestras para cromatografa de gases
tienen la misin de vaporizar la muestra a analizar e incorporarla a la corriente de gas
portador que se dirige hacia la columna. La vaporizacin e introduccin de las
muestras en el sistema, debe realizarse cumpliendo una serie de requisitos:

1. La vaporizacin de la muestra debe ser lo ms rpida posible.

2. La vaporizacin debe realizarse sin discriminar ningn componente de la
muestra.
3. La muestra debe llegar a la columna como una banda lo ms fina posible.

Inyectores para columnas empaquetadas

La inyeccin de muestras en columnas empaquetadas no presenta problemas
particulares; este tipo de columnas admiten cantidades de muestra relativamente
elevadas.

Esquema de un inyector para columnas empaquetadas. Figura 2

Bsicamente, un inyector est formado por un bloque metlico, buen conductor del
calor, provisto de un sistema de calentamiento (figura 2). En ste, el gas portador,
previamente calentado, pasa de forma continua por el sistema; la muestra es
inyectada en el interior de la cmara, por medio de una microjeringa de precisin,
a travs de un diafragma perforable (septum) con capacidad de autosellado en el
momento en que se retira la aguja; una vez inyectada la muestra, sta es
vaporizada de forma instantnea, mezclndose con el gas portador en una cmara

de mezcla (liner) construida de un material lo ms inerte posible (acero

inoxidable, nquel, vidrio o cuarzo). La muestra, una vez vaporizada, es arrastrada
rpidamente por la corriente de gas portador en direccin a la columna.
Inyectores para columnas capilares
Los sistemas de introduccin de muestras utilizados para trabajar con columnas
capilares, estn basados sobre los mismos principios de los inyectores utilizados
para columnas empaquetadas, por lo que las consideraciones generales sobre
ellos siguen siendo vlidas.
La diferencia fundamental entre los sistemas que utilizan columnas empaquetadas
y los que utilizan columnas capilares, radica en que la cantidad de muestra que
estas ltimas pueden separar es mucho menor que en el primer caso; por otra
parte, las columnas capilares son muy afectadas por los disolventes, de forma que
los volmenes que se pueden inyectar en ellas son extremadamente bajos. Dado
que no existen jeringas capaces de medir con precisin volmenes inferiores a 0,1
l, los inyectores utilizados para trabajar con este tipo de columnas, adems
vaporizar la muestra y mezclarla con el gas portador, debern ser capaces de
introducir en la columna slo una alcuota de la muestra total inyectada
Inyeccin con divisin de muestra
Este tipo de inyeccin (ms conocida como inyeccin split), es el ms sencillo de
los que se utilizan en cromatografa capilar. El inyector de split (figura 4), consta
bsicamente de los mismos elementos que un inyector normal, con la nica
adicin de un sistema de divisin de flujo a la salida de la cmara de mezcla. Por
medio de este tipo de inyector, el flujo de gas portador que pasa a travs del
inyector (y por lo tanto tambin la muestra vaporizada), se divide en dos; una parte
es introducida en la columna y la otra escapa fuera del sistema a travs de una
vlvula de aguja que permite regular la proporcin de gas que es introducido en la
columna

Esquema de un inyector de split. Figura 4

Los inyectores de este tipo presentan dos inconvenientes; en primer lugar la

divisin de la muestra da lugar a que las cantidades de analito que son separadas
y llegan al detector sean muy pequeas, por lo que los lmites de deteccin
aumentan bastante, lo que es un gran inconveniente a la hora de realizar anlisis
de trazas. Por otra parte, los inyectores de split pueden en algunos casos dar
lugar a discriminacin entre los componentes de la muestra.
Inyeccin splitless
En la tcnica de inyeccin splitless, la totalidad de la muestra inyectada es
dirigida hacia la columna, que se mantiene durante la inyeccin a una temperatura
inferior al punto de ebullicin del componente ms voltil de la muestra.
La utilizacin de la tcnica de splitless supone dos importantes ventajas. En
primer lugar, dado que no existe divisin de muestra, permite un aumento notable
de la sensibilidad, por lo que es muy adecuada para el anlisis de trazas. Por otra
parte, la reconcentracin de la muestra en la cabeza de la columna origina que las
prdidas de eficacia debidas a una inyeccin inadecuada sean de mucha menor
importancia que en otras tcnicas de inyeccin.

El diseo de un inyector splitless es bsicamente el mismo que el del inyector de

split (figura 4), pudindose realizar la purga del inyector bien a travs de la
vlvula de split, bien a travs de una vlvula de purga adicional situada cerca del
septum. La mayora de los inyectores de split comerciales, estn diseados para
poder trabajar tambin en modo splitless.
Inyeccin en columna
Los sistemas de inyeccin en columna (normalmente conocidos por su nombre
ingls de on-column), han sido diseados para posibilitar la introduccin de
muestras directamente en el interior de columnas capilares.
La caracterstica bsica de un inyector on-column (figura 5), es la utilizacin de
un sistema de vlvulas y tubos de gua que permitan la introduccin en el sistema
de una aguja extremadamente fina.

Figura 5. Esquema de un inyector on-column

El mtodo de trabajo utilizado en la inyeccin on-column recuerda en alguna

forma al utilizado en la inyeccin splitless; la muestra es introducida directamente
en la columna, mantenindose sta a una temperatura inferior al punto de
ebullicin del componente ms voltil de la muestra. Una vez introducida la
muestra, se inicia el programa de calentamiento de la columna para proceder a la
separacin.
La gran ventaja que ofrece el sistema de inyeccin on-column, es que reduce la
discriminacin entre los componentes de la muestra prcticamente a cero,
obvindose adems todos los problemas que presentan las restantes tcnicas de
inyeccin.