09/09/2011

CONTENIDO

Enzimologa Clnica
Dra. Mara Mercedes Sobern L

Mapas o modelos enzimticos tisulares

(enzimogramas tisulares)
Isoenzimas
Caractersticas
Origen gentico
Distribucin
Utilidad el diagnostico clnico
Terapia enzimtica

Mapa o modelo enzimtico tisular

Mapa o modelo enzimtico tisular.
(Enzimogramas tisulares)
Est constituido por la cantidad de cada
una de las enzimas que contienen todas
las clulas de un determinado rgano.
(Schmidt y Schmidt (1966a, 1996b, 1972))

Cul es el objetivo?
Lograr la especificidad bioqumica de los
rganos.

Cuanto mayor sea la cantidad de enzimas

que se determinen ms completo ser el
mapa y mejor se podrn evidenciar las
diferencias existentes en cuanto a la riqueza
enzimtica de los diversos rganos.

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Cmo realizar una correcta interpretacin de

cualquier mapa enzimtico srico ?
1) Existencia de
diferencias
cuantitativas y
cualitativas para una
misma enzima en los
diferentes rganos.
2) Localizacin
intracelular de una enzima
puede variar de un rgano
a otro, y dentro del mismo
rgano.

ALT predomina en hgado. AST

es ms abundante en rin,
corazn, msculos cardaco y
esqueltico y en el suero

AST mitocondrial (m-AST,

catdica) , citoplasmtica (sAST, andica). Determinacin
de m-AST en suero es til para
detectar dao mitocondrial y
evaluar enfermedades
hepticas y severidad de
infarto cardaco.

Qu Informacin clnica que se pueden

obtener de un patrn enzimtico srico
alterado?

Informacin

Que se obtiene al

3. La severidad y la gravedad Relacionar entre si las

de la lesin celular
enzimas citoplasmticas y las
mitocondriales.
4. La fase evolutiva de una
afeccin aguda y/o el
reconocimiento de una
enfermedad crnica

Relacionar entre si las

enzimas de vida larga en
plasma (TGP, LDH1,
-hidroxibutrico deshidrogenasa,
HBDH) con las de vida corta (TGO,
LDH5, CPK)

Qu Informacin clnica que se pueden

obtener de un patrn enzimtico srico
alterado?
Informacin

Que se obtiene al

1. El rgano de origen de las

enzimas alteradas en el suero

Relacionar entre s las

modificaciones de las
enzimas celulares presentes
en todos los tejidos y las de
las enzimas especficas para
un rgano o grupos de
rganos

2. localizacin de la
lesin celular

Relacionar entre si las

enzimas sricas con
diferentes distribuciones en
los tejidos.

Informacin

Que se obtiene al

5. El estadio de una dolencia En el caso del hgado, la

crnica
reduccin de su masa funcional se
deduce al comprobar en sangre,
disminucin de enzimas plasmaespecficas de origen
heptico (ej. colinesterasa o CHE)
6. En enfermedades
Hepticas, el volumen de la
colestasis, la presencia de
una lesin ocupante de
espacio o la existencia de
una lesin txica que cursa
con la induccin de esas
enzimas (ej. alcoholismo)
y/o lesiones de vas biliares.

Relacionar las enzimas

"indicadoras o marcadoras de
colestasis" y las otras
enzimas celulares "indicadoras o
marcadoras de lesin hepatoctica"

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Cocientes enzimticos basados en

las actividades enzimticas
particulares
Objetivo
facilitar el enjuiciamiento y permitir una
aproximacin diagnstica con grupos de
afecciones ms o menos importantes.

La actividades enzimticas en suero llegan a ser

un instrumento valioso tan slo cuando se
valoran respecto del hallazgo clnico y de otros
parmetros clnico-qumicos y se ponen en
relacin, asimismo, las actividades entre s.

Cociente de De Ritis (AST)/(ALT)

De Ritis et al. sugirieron el cociente TGO/TGP como
medio para distinguir lesiones predominantemente
inflamatorias de procesos necrticos.
Valor normal de la relacin = 0.70-0.88.

Valores muy inferiores a 1 (por debajo de 0.7) indican

inflamacin (hepatitis viral, hepatitis txica, ictericia
obstructiva reciente, etc.)
Cocientes superiores a 1 sugieren necrosis, debido a
que la TGO se libera de mitocondrias (cirrosis
heptica descompensada, carcinoma heptico
primario, etc.).

Cociente de De Ritis (AST)/(ALT)

Inferior a 1:

Hepatitis viral aguda y persistente, Hepatitis txica

(en parte), Mononucleosis infecciosa
Hgado graso leve, Ictericia obstructiva reciente
Hepatosis colestsicas

Alrededor de 1:

Forma colestsica de la hepatitis viral

Hepatitis crnica por higado graso
Hepatitis crnico-agresiva (en parte)
Hepatitis reactiva, Ictericia obstructiva antigua
Colangitis

Superior a 1:

Forma necrotizante de hepatitis viral

Hepatitis txica (en parte)
Hepatitis crnico-agresiva (en parte)
Cirrosis
Hgado de estasis
Intoxicaciones agudas

Cociente CPK/AST:
Inferior a 9: Lesin del miocardio,
especialmente infarto cardaco.
Superior a 9: Lesin de la musculatura
esqueltica, especialmente shock.

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AST + ALT
Cociente ---------------GLDH

(*) GLDH= glutmico

dehidrogenasa

Superior a 50: Hepatitis viral aguda, incluida la forma

de curso colestsico, Hepatitis txico-alcohlica
aquda

Isoenzimas - Caractersticas
Variantes de una misma enzima
Pueden existir en un nico rgano o en un solo
tipo de clula.

Generalmente presentan est.cuaternaria

20-50:
Brotes agudos en las hepatitis crnicas, Hepatosis
colestsicas

Principal caracterstica :

Inferior a 20:
Ictericia obstructiva, Hgado metastsico, Cirrosis
biliares

Propiedades fsico-qumicas diferentes:

Isoenzimas dimricas y tetramricas pueden estar

formadas por subunidades o polipptidos iguales o
diferentes.
1.- Homodmeros: formada por dos polipptidos
idnticos.
2.- Homotetrmero: constituida por cuatro
cadenas polipeptdicas iguales.
3.- Homopolmeros: formadas por mltiples
cadenas polipeptdicas idnticas.
4.- Heterodmero: constituida por dos
polipptidos diferentes.
5.- Heterotetrmero: tetrmero constituido por la
unin de cuatro polipptidos diferentes,
pudiendo ser los cuatro distintos , ser
tres diferentes , o tener dos tipos
distintos .

Deben tener la misma especificidad de

sustrato.
Resistencia a inactivacin al calor,
Movilidad electrofortica

Origen Gentico de las Isoenzimas

Pueden
deberse a
existencia de
ms de un
locus
gentico que
codifica la
estructura de
la protena
enzimtica

Un locus con dos alelos activos

Heterocigoto

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Los diversos genes que determinas un grupo

particular de isoenzimas, pueden estar
ubicados en un mismo cromosoma o en
diferentes cromosomas

Crom. 1

Amilasa
salival

Crom 7
Crom 2

MDH cit

Amilasa
pancretica
MDH mit

1.- Variabilidad
tisular

distintos tejidos u rganos de un mismo

individuo muestran diferentes formas
moleculares o distintas cantidades relativas
de las mismas isoenzimas
LDH

2.- Variabilidad
ontognica

un mismo tejido u rgano en distintos

momentos del desarrollo muestra diferentes
formar moleculares o distintas cantidades
relativas de las mismas isoenzimas.
LDH ratn: 5 das antes del nacimiento,
LDH5, ms abundante en rin, mientras
que en el individuo adulto isoenzimas ms
abundantes son LDH1 y LDH2

3.- Variabilidad
poblacional

distintos individuos en el mismo tejido u

rgano y en el mismo estado de desarrollo
presentan diferentes isoenzimas.
Alcohol deshidrogenasa

IUB recomienda que ISOENZIMA se aplique

nicamente a aquellas formas que se originen
por genes que codifican las estructuras de las
protenas de la enzima

Alozimas o Alelozimas, empleado para referirse a

las distintas formas moleculares de una misma
enzima producidas por distintos alelos del mismo
locus.

LDH-1 presente
mayormente en
corazn,
eritrocitos,
cerebro, rin

Diferencias en
cuanto a estabilidad
al calor. LDH-4,
LDH-5 presentan
mayor estabilidad al
calor.
LDH-3
LDH-1 ms sensible
predominante en a inhibicin por
Lactato
leucocitos
exceso de piruvato
que LDH-5
Deshidrogenasa
LDH-5
LDH-1, LDH-2 slo
predominante en pueden utilizar 2msculo
hidroxibutirato
esqueltico,
como sustrato
hgado.
alternativo

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Fosfatasa
cida

FA de prstata inhibida
por tartrato.
FA eritrocito inhibida por
formaldehido
Diferencias en cuanto a
actividad, frente a
sustratos fenilfosfato,
glicerol-2-P y
timolftalein-P

Patrn
electrofortico
complejo
Enzima
heptica es
Fosfatasa ms catinica
alcalina

Enzima de placenta
presenta mayor estabilidad
al calor
Fenilalanina inhibe
preferentemente a enzima
de placenta e intestino
rea inhibe
preferentemente enzima de
hueso
Compuesto levamisol
inhibe preferentemente
enzima de hueso e hgado

+
La CK se presenta en forma de tres
isoenzimas especficas de tejido:

MM
Cerebro, pulmn , tiroide,
preferentemente CK-1 (BB)

Creatn
quinasa

Msculo esqueltico CK-3

(MM) casi exclusivamente
M. cardiaco, exclusivamente
CK-2 (MB).
CK-2 no debe superar el 6%
de CK total

- Forma MM (msculo esqueltico)

- Forma MB (msculo miocrdico)
- Forma BB (cerebro)

MB
BB

La isoenzima MB es un marcador precoz

de infarto de miocardio. Un nivel muy
elevado es mal pronstico

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Terapia enzimtica
Principales reas de trabajo
- Eliminacin de sustancias txicas de la sangre
- Enfermedades genticas
- Cncer
Degradacin de tejidos necrticos usando enzimas
proteolticas (Tripsina, quimiotripsina, Bromelaina,
Hialuronidasa).
Eliminacin de cogulos usando Estreptoquinasa,
Uroquinasa, etc.
Tratamiento de insuficiencia pancretica (Fibrosis
cstica) utilizando proteasas inmovilizadas

Tratamiento de Enfermedades genticas

Fibrosis cstica
Defecto gentico protena transmembrana (1/2000).
Mucosidad espesa , pulmones, estmago, etc
Conducto pancreticos bloqueado Igual que
pancreatitis. Tubos bronquiales
Dexosirribonucleasa (Mucosidad ADN y
mucopolisacaridos).
Xeroderma pigmentoso
Defecto gentico Individuos muy sensibles a
la radiacin UV
Defecto mecanismo reparador del ADN
Tratamiento enzimas reparadoras del ADN
Aplicacin tpica con liposomas

Tratamiento de Enfermedades genticas

Enfermedades metablicas. Deficiencias
enzimticas
Enfermedad de Gauchers
Glucosilceramidasa
Acumula un glucocerebrosido en los macrfagos
Macrofagos no funcionales Anormalidades
hepticas, seas, y hematolgicas.

Tratamiento enzima de placentas humanas Alto

coste Enzimas recombinantes
Pancreatitis
Extros pancreticos (lipasas, proteasas, amilasas,
etc) Microencapsulados pH 6 liberan

Cncer
Asparraginasa hidroliza la asparragina
Leucemia aguda linfoblstica
Leucemia aguda granuloctica
Tumores Necesitan asparragina
Enzima en plantas, animales y bacterias
Ausente en suero de mamferos
Tratamiento en combinacin con quimioterapia
Fuente es humana, microbiolgica genera
problemas de rechazo.

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Glutaminasa
Serina hidratasa
Fenilalanino amonio
liasa
Leucina
dehidrogenasa

Enzimas en Teraputica: producidas por

recombinacin
Experimentacin
posibles agentes
anticancergenos

Adagen (adenosine deaminase) Enzon, Inc.

Autorizado su uso peditrico en inmunodeficiencias
congnitas.
Ceredase (alglucerase) Genzyme Corp.
Autorizado su empleo en enfermedad de Gaucher tipo 1

Cerezyme (imiglucerase) Genzyme Corp.

Autorizado su empleo en enfermedad de Gaucher tipo 1

Ciertos tipos de cncer no tienen la

capacidad de sintetizar aminocidos y los
obtienen del suero

Pulmozyme (Dnase) Genentech, Inc.

Autorizado su empleo en fibrosis qustica
Activase (recombinant alteplase) Genentech, Inc.
Autorizado en infarto de miocardio y embolia pulmonar

Fin de
la clase!