Glucosa-LS

Reactivo lquido para la determinacin

biolgicos

Cdigos: 8001504
8001503
8001502
enzimtica de Glucosa en suero, plasma y otros fludos

PRESENTACION 1x500 ml / 1x250 ml / 1x100 ml

L.O. 505 (500-546)

LIQUIDO ESTABLE

La glucosa es estable en suero o plasma 5 horas a 30C y 24 horas a

4C. Para perodos mas prolongados, congelar a -20C.

Para uso en el diagnstico in vitro.

SIGNIFICANCIA CLINICA

EQUIPO REQUERIDO
La medicin de la Glucosa sanguinea es importante en el diagnstico y
tratamiento de la diabetes y otras patologas, tales como hipoglicemia,
problemas renales, etc.

Espectrofotmetro o fotocolormetro de filtros capaz de medir

absorbancias a 505 nm. (rango 500 - 546 nm.), bao termoregulado,
timer y pipetas.

FUNDAMENTOS DEL METODO

TECNICA
La glucosa reacciona con el reactivo enzimtico que contiene una
mezcla de las enzimas Glucosa Oxidasa (GOD) y Peroxidasa (POD).
En la primera etapa la Glucosa es oxidada a Ac. Glucnico por la
accin de la enzima GOD, liberndose como producto H2O2, el cual en
una reaccin mediada por la enzima POD, reacciona con el Ac. PHidroxibenzoico y 4-Aminoantipirina producindose un compuesto
coloreado con un mximo de absorcin a 505 nm., en cantidad
proporcional a la cantidad de Glucosa presente en la muestra.
D-Glucosa
GOD
> Acido D-Glucnico + H2O2
H2O2 + p-HBA + 4-AAP POD > H2O + Complejo Coloreado
REACTIVOS
Conservado entre 2 y 8C., estable hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta. El reactivo con el tiempo puede tomar un leve
color rosado que no afecta los resultados. Descartar el reactivo si su
absorbancia contra blanco de agua a 505 nm. es superior a 0.4 D.O.
Preparacin: El reactivo se provee listo para su uso.
Componentes del reactivo enzimtico:
Buffer fosfato pH 7.0
Glucosa Oxidasa (Aspergilus Niger)
Peroxidasa
4-Aminoantipirina
Acido p-Hidroxibenzoico
Azida sdica
Estabilizantes y preservantes no reactivos
Solucin Standard
D-Glucosa en Ac. Benzoico saturado

Llevar el reactivo a la temperatura que se realizar el ensayo. Las pipetas

a utilizar deben estar lmpias y libres de residuos para no contaminar el
reactivo.
Blanco
Standard
Muestra
Muestra
(ml)
--0.01
Standard
(ml)
-0.01
-Reactivo
(ml)
1.00
1.00
1.00
Mezclar e incubar 5 minutos a 37C. 10 minutos a temperatura
ambiente (20C.). Leer las absorbancias llevando a cero el
espectrofotmetro con el blanco de reactivo. El color resultante es estable
por a lo menos treinta minutos.
CALCULOS
FACTOR=

100
Absorbancia Standard
Glucosa (mg/dl)= Factor x Abs. Muestra
OBSERVACIONES

75 mM
15000 U/l
2000 U/l
0.5 mM
10 mM
0.1 g/dl
c.s.

La reaccin es lineal hasta 600 mg/dl.

Para valores superiores, diluir la muestra con suero fisiolgico y el
resultado obtenido se multiplica por el factor de dilucin.
En el caso de sueros muy hiperlipmicos, deber hacerse un blanco
muestra con suero fisiolgico para eliminar la posible interferencia
por la turbidez del suero.

RANGO DE REFERENCIA
100 mg/dl
60 a 110 mg/dl

MUESTRAS
BIBLIOGRAFIA
La muestra a utilizar puede ser tanto suero como plasma, lquido
cerebro espinal, orina y otros fludos biolgicos. Separar el suero o
plasma a la brevedad posible de las clulas para evitar una
disminucin de la glucosa debido a la glicolisis.
En caso de utilizar plasma, utilizar como anticoagulante fluoruro de
sodio que acta como inhibidor de la glicolisis.

1.
2.
2.

Trinder, P., Ann Clin Biochem. 6(24) ,1969.

Henry, R.J., Clinical Chemistry, Principles and Technics
Harper and Row Publishers. New York, 1964.
Yong D.S, Et al. Clin. Chem. 18 (10) 1972

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