Bioqumica

Instituto Superior
Daniel Alcides Carrin
Laboratorio Clnico
3ML41
Alumno:
Granados Cirilo Andrs

Determinacin de pH.
Buffer. Accin
amortiguadora
La determinacin del pH (potencial de iones
Hidronios) es importante dentro del mbito del
laboratorio clnico, pues una pequea variacin del
pH en un sistema determinar la manifestacin de
una patologa. Por tal motivo se hace necesario el
aprendizaje del manejo de potencimetros y la
utilizacin de indicadores para determinar el pH de
una solucin.

El pH es una medida de acidez o alcalinidad de una disolucin. El pH indica la concentracin de

iones hidronio [H3O]+presentes en determinadas disoluciones.
El trmino "pH" se ha utilizado universalmente por lo prctico que resulta para evitar el
manejo de cifras largas y complejas. En disoluciones diluidas, en lugar de utilizar la actividad
del ion hidrgeno, se le puede aproximar empleando la concentracin molar del ion
hidrgeno.
Por ejemplo, una concentracin de [H3O+] = 1 107 M (0,0000001) es simplemente un pH de
7, ya que pH = log [107] = 7
En disolucin acuosa, la escala de pH vara, tpicamente, de 0 a 14. Son cidas las disoluciones
con pH menores que 7 (el valor del exponente de la concentracin es mayor, porque hay ms
iones en la disolucin) y alcalinas las de pH superiores a 7. Si el disolvente es agua, el pH = 7
indica neutralidad de la disolucin.
En productos de aseo y limpieza se suele usar la expresin "pH neutro". En este caso la
neutralidad hace referencia a un nivel de pH 5,5. Debido a las caractersticas de la piel humana,
cuyo pH es 5,5[cita requerida], se indica neutralidad de pH en este tipo de productos que estn
destinados a entrar en contacto con la piel para destacar su no agresividad. Si se aplicaran
productos de pH 7 a la piel se producira una variacin del pH cutneo con posibles
consecuencias negativas.

Determinacin de pH de algunas muestras cualitativamente. Uso de

indicadores.
Aprender mtodo de calibracin del pH-metro.
Determinacin del pH de algunas sustancias cuantitativamente. Uso del pHmetro.

Naranja de metilo

MEDICION DEL PH
PH-METRO. Es un sensor utilizado en el mtodo electroqumico para medir el eh de
una disolucin. PH es el potencial que se desarrolla a travs de una fina membrana de
vidrio que se sepa dos soluciones con diferentes concentraciones de protones.
Buffer son las disoluciones reguladoras de pH conocido.
Un potencio metro necesita (para hacer los clculos) de unas pequeas cositas
llamadas CELDAS, estas son sumergidas en la disolucin del pH que necesitamos. Lo
que tambin necesita un pH-metro es un electrolito, son sustancias que en solucin
acuosa dan lugar a la formacin y conducen la corriente elctrica.

Electrolitos fuertes: totalmente ionizados

Electrolitos dbiles: parcialmente ionizados representacin de la disociacin del
agua.
METODOS PARA DETERMINAR EL pH.

A. METODOS VISUALES:
1. Indicadores. Son sustancias que pueden utilizarse en formas de solucin o
impregnadas en papeles especiales y que cambian de color segn el carcter del
pH.
2. Papel Tornasol. El papel tornasol es un indicador de pH que se colorea de rojo
sumergido en un cido o la base, ms intenso ser el color del indicador.
B. METODOS ELECTROMETRICOS:
La actividad de iones H+ se puede determinar potencio mtricamente para ello se
introduce una clula electroqumica con un electrodo indicador y otro de
referencia, sumergidos en la solucin a la cual se le quiere determinar el pH, para
generar una diferencia Potencial, que es registrada por el sistema de medicin
donde se transforma a la escala de pH.
El medidor de pH-metro consiste en:

Electrodo de referencia
Electrodo indicador
Sistema de medicin.

Los electrodos, indicador y de referencia, pueden presentarse separados o bien en

una misma unidad, llamndose en este caso electrodos de pH combinados.
Solucin buffer es una solucin compuesta por cidos dbiles y sus sales o de bases
dbiles sus sales.

MANTENIMIENTO.

Un electrodo es de vidrio necesita ser inmune las interferencia del color,

turbieza, material coloidal, oxidante y reductor.
El electrodo no da una buena medida cuando est sucio con grasa o material
orgnico insoluble en agua.
El electrodo tiene que ser enjuagados con agua destilada, este no se seca con
un trapo, solo se coloca en un papel para que se seque.
Tienden a ser calibrados peridicamente para asegurar la precisin.

PRECAUSIONES.

El electrodo siempre tiene que estar hmedo.

No guardarlos o dejarlos todo el tiempo en agua destilada, ya que este
resbalara a los iones con el bulbo de vidrio y el electrodo se volver intil.
No son medidas presos, todo depende del sentido de la vista de cada uno.
Existen diferentes tipos de pH-metros

CALIBRACIN.
Para verificar la calibracin en el intervalo de pH 4.00 a 10.00, se conect el calibrador
HAN NA y se seleccionaron los pH 4.00, 5.5, 7.00, 8.5 y 10.00 y se registraron en el pHmetro los valores de potencial correspondientes en mili voltios a una temperatura
ajustada a 25 C. Una vez verificado el buen funcionamiento, se conectaron los
electrodos de vidrio y de referencia, se sumergi en una solucin de pH 7.00 termos
atizada a 25C con una precisin de 0.1, y se realiza lectura en mili voltios. Luego se
introdujeron electrodos en las soluciones de referencias de pH 4.00 y 10.00 y se
realizaron las lecturas correspondientes en mili voltios. Se hicieron 5 lecturas en mili
voltios para cada valor de pH. Para verificar la calibracin se realizaron las lecturas de
las soluciones de referencia en el modo pH, se obtuvo el modelo de calibracin y se
evaluaron la pendiente y el intercepto es importante que recuerde tener suma
responsabilidad con este tipo de material, mas con las cosas ms pequeas, por
ejemplo las celdas de vidrio.

PH-METRO
CALIBRACION DEL PH-METRO
1.
2.
3.
4.
5.

6.
7.
8.
9.

Encender el sistema
Luego el medidor dar el pase para ingresar a la medicin.
Presionar CALL. Dar el men de calibracin.
Introducir en la solucin Buffer de pH 7 el electrodo de pH y temperatura.
Agitar y esperar a que se apague.
Cuando aparezca en la pantalla la sigla SFM (CFM), presionar en el teclado SFM.
Automticamente el calibrador pedir una segunda solucin Buffer que puede
ser de pH 4 pH 10.
Enjuagar con agua destilada, sumergir el electrodo en el nuevo Buffer que pidi
el potencimetro.
El medidor reconocer el Buffer automticamente y dar el valor
correspondiente.
Esperar hasta que el smbolo se apague y presionar nuevamente SFM para
confirmar el segundo punto de pH.
El medidor regresar a la forma de medicin manual, saque el electrodo y
enjuague con agua abundante.

MEDICION DEL PH
1. Introducir el electrodo en la muestra, agitar brevemente y esperar que la
lectura se establezca.
2. La pantalla mostrar la lectura del pH equilibrado con temperatura, saque el
electrodo de la muestra y lave con agua destilada antes de realizar la lectura de
una segunda muestra.

PAPEL TORNASOL

1. Sumergir el papel tornasol dentro de la

muestra.
2. Apreciar el cambio de color.

INDICADORES
A. NARANJA DE METILO:
1. Agregar dos gotas de naranja de metilo a cada muestra.
2. Observar resultados.

Naranja de metilo

B. FENOFTALEINA:
3. Agregar dos gotas de fenolftalena a cada muestra.
4. Observar resultados.

ACCIN ANTICIDA
1. Medir el pH de diferentes sustancias (agua, coca cola y Sprite) y anotarlas.
2. Agregar una cucharada de bicarbonato a cada una de las sustancias.
3. Nuevamente medir el pH de las sustancias y anotarlas.
4. Comparar los pH medidos antes y despus de agregar el bicarbonato y anotar
discusiones.

DETERMINACION DE PH DE AGUA CUANTITATIVAMENTE (PH-METRO)

Cuadro de Resultados de pH Agua

Tipo de agua

pH

Amortiguador

Accin Amortiguadora (pH)

Agua hervida

Bicarbonato

7.86

Agua San Luis

7.56

Bicarbonato

8.19

Agua de Pozo

7.04

Bicarbonato

8.04

Agua San Mateo

7.03

Bicarbonato

7.79

Agua Cielo

7.11

Bicarbonato

8.02

DISCUSIN DE RESULTADOS: Una de las evaluaciones que deben cumplir todos los
alimentos embotellados son los anlisis fisicoqumicos, entre otros como
microbiolgicos, etc. Una de las evaluaciones fisicoqumicas es la medicin de pH que,
segn la norma guiada por los mtodos APHA 2005 Mtodos Normalizados para el
Anlisis de Aguas Potables y Residuales E.E.U.U., debe estar entre 6.5 a 8.5. Como se
observ en los resultados todos los valores de las aguas analizadas estn dentro del
lmite establecido. Sin embargo no quiere decir esto que sean aptas para el consumo
humano, adems de los anlisis fisicoqumicos se deben realizar anlisis
microbiolgicos de aguas para determinar m. o. que podran estar contaminando dicha
agua. Al agregar el bicarbonato se observ el incremento de pH lo que demuestra que
esta sustancia es un buen anticido, que podra ser usado en nuestra dieta, pero de
forma controlada.

DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUANTITATIVAMENTE

(PH-METRO)

Cuadro de Resultados de pH de diferentes muestras

#

Muestra

pH

Amortiguador

pH Bibliografa

Bicarbonato

Accin Amortiguadora
(pH)
-

CH2COOH

NaOH

Bicarbonato

Varia

HCl

Bicarbonato

Vara

Leche de Vaca

7.27

Bicarbonato

6.2-6.8

Leja

12.45

Bicarbonato

12.4

Shampoo

8.16

Bicarbonato

8.5

Vino

3.77

Bicarbonato

2.9 4.2

Caf

4.94

Bicarbonato

5.0

Leche magnesia

9.75

Bicarbonato

10

10

Jugo de Tmate

4.45

Bicarbonato

4.2 4.5

11

Limn

2.16

Bicarbonato

2.4

12

Agua de Azahar

8.35

Bicarbonato

5 - 7.9

13

Sprite

3.43

Bicarbonato

7.04

2.5

14

Coca Cola

2.57

Bicarbonato

6.61

2.5

Varia

DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUALITATIVAMENTE

(PAPEL TORNASOL)

Muestra

pH

Tornasol azul

Tornasol Rosado

CH2COOH

Rosado

No vir

NaOH

No vir

Azul

HCl

Rosado

No Vir

Leche de Vaca

7.27

Rosado

No vir

Leja

12.45

No vir

Azul

Shampoo

8.16

Rosado

No vir

Vino

3.77

Rosado

No vir

Caf

4.94

Rosado

No vir

Leche magnesia

9.75

No vir

Azul

DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUALITATIVAMENTE

(TIRA DE MEDICION DE PH)

Leche Magnesia pH = 10
Caf

pH = 5

DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUALITATIVAMENTE

INDICADORES DE PH

Naranja de metilo

Grupo 1

Indicadores
#
1
2

Naranja de Metilo
Fenolftalena

Muestras

NaOH
Amarillo
Rosella

HCL
Rojo
Incoloro

CH2COOH
Naranaja
incoloro

Grupo 2

Indicadores
#
1
2

Naranja de Metilo
Fenolftalena

Muestras
Shampoo
Amarillo
incoloro

Limn
Rosado
Incoloro

Grupo 3

Indicadores
#
1
2

Naranja de Metilo
Fenolftalena

Muestras
Sprite
Naranja oscuro
incoloro

Vino
Rojo claro
Ligeramente
incoloro

Grupo 4

Indicadores
#
1
2

Naranja de Metilo
Fenolftalena

Muestras
Coca cola
Rojo oscuro
incoloro

Leche
Incoloro
Incoloro

http://tesis.unjbg.edu.pe:8080/bitstream/handle/unjbg/135/29_Zavalaga_Talledo_EN
_FACI_Biologia_Microbiologia_2012_Resumen.pdf?sequence=2

es.wikipedia.org/wiki/PH-metro