METODOS DE ESTUDIO EN BACTERIOLOGIA

FUNDAMENTO TEORICO:
EXAMEN DIRECTO:
Significa la observacin microscpica de la muestra extendida en un
portaobjeto, que puede ser al fresco o con tincin (Gram, Ziehl Neelsen,
Tinta China). Este procedimiento es rpido alrededor de 10 minutos.

MUESTRA DE ORINA

Orina de una sola miccin (Elemental de orina) La muestra idnea es la

primera miccin de la maana, ya que es la ms concentrada. No obstante,
en determinaciones urgentes, se recoger la primera orina que realice el
paciente. Es suficiente un volumen de orina de 5-10 mL.
Normalmente el propio paciente recoger la muestra de orina por lo que se
le debe explicar los pasos a seguir: 1) Se lavar las manos con agua y jabn.
2) A los hombres, se les indicar que deben retraer completamente el
prepucio, mantenindolo retrado hasta que se haya recogido la muestra de
orina.
A las mujeres se les explicar que deben sujetar el frasco sin que ste tome
contacto con la vulva, la pierna o la ropa. 3) La orina debe recogerse, tras
desechar los primeros 20-25 mL, en recipientes estriles. En nios y nias
mayores, la recogida se realiza de forma similar a la de los adultos. En los
nios ms pequeos se recoger en colectores o bolsas estriles
especialmente diseadas para ello.
La sistemtica es: 1) Lavado de los genitales y rea perineal con agua y
jabn. 2) Colocar la bolsa de plstico o el colector. 3) Vigilar la bolsa cada 30
minutos, y tan pronto como el nio haya orinado, se retirar y enviar al
laboratorio. Si la miccin no se ha realizado en una hora, se repite la
operacin colocando una nueva bolsa. En pacientes ingresados con

imposibilidad de recoger la muestra por s mismos, se proceder a realizar

sondaje vesical con las medidas aspticas habituales.

En pacientes con sonda vesical permanente la recogida de orina se realizar

de la siguiente manera: 1) Limpiar una zona del catter con una gasa
humedecida en alcohol o solucin yodada; dejar secar completamente. 2)
Pinchar directamente el catter con aguja y jeringa a travs de la zona
desinfectada, aspirando 5-10 mL. 3) Pasar la orina a un recipiente estril. No
recoger nunca orina de la bolsa de recoleccin.
La orina debera llegar al laboratorio en el plazo de una hora desde su
recogida. Cuando, por cualquier motivo, ello no sea posible, debe
mantenerse refrigerada a 4C hasta su envo.

PUNCIN SUPRAPBICA
Es un procedimiento mdico. Indicaciones. Evidencia clnica de infeccin
urinaria con recuentos bajos o nulos, neonatos y lactantes y urocultivos
repetidos con dos o ms bacterias. La puncin suprapbica requiere un
buen conocimiento de la tcnica y de las precauciones que hay que adoptar,
con rigurosa asepsia, descartando problemas de hemostasia y con la vejiga
palpable y previa desinfeccin y anestesia local; se punciona sta a 1,5 cm
de la snfisis pubiana, en la lnea media, estando el paciente en decbito
supino, con una jeringa de 10 ml y con aguja larga (calibre 19) se aspira el
contenido vesical. En caso de orina obtenida por puncin suprapbica se
enviar al laboratorio lo antes posible. Colocar la muestra en frasco estril.
Se debe indicar en la hoja de pedido la tcnica empleada para su extraccin
(dato importante a la hora de valorar el recuento de colonias).

VOLUMEN MNIMO DE LA MUESTRA. Es suficiente un volumen de orina de 510 ml.

TRANSPORTE. La orina debe llegar al laboratorio en el plazo de una hora.

Cuando esto no sea posible debe refrigerarse a 4C durante un tiempo
mximo de 12 horas.

OBSERVACIONES. Para la bsqueda de micobacterias, la orina se recoge por

tcnica de chorro medio, durante 5 das consecutivos. En este caso el
volumen de orina no debe ser inferior a 300 ml por muestra. Se elegir
preferentemente la primera miccin de la maana.

EXUDADO NASAL
Esta muestra solo se utiliza para buscar portadores de S.aureus o en el
diagnstico etiolgico de imptigo. No es til para el diagnstico etiolgico
en casos de rinitis, rinosinusitis ni en casos de otitis media ni cuadros
respiratorios altos prolongados Recordamos que alrededor del 30% de la
poblacin es portadora de este microorganismo a nivel nasofarngeo por lo
cual su hallazgo no tiene habitualmente significancia clnica salvo en
situaciones especiales. En el personal de salud slo se realizar la bsqueda
de portadores en el caso de brotes de infecciones en los que no se ha
encontrado otra fuente de infeccin. Este tipo de investigacin se realizar
en coordinacin con el Comit de Infecciones Hospitalarias, quien
determinar la oportunidad de su realizacin.

MATERIAL NECESARIO. - Hisopo de algodn con medio de transporte.

TCNICA. Tomar muestra profunda de ambas fosas nasales con el mismo

hisopo, previamente embebido en suero fisiolgico estril.

NMERO DE MUESTRAS Y/O VOLUMEN. Basta con un hisopo.

TRANSPORTE Y CONSERVACION. Envo inmediato al laboratorio (no superior

a 2 horas).

OBSERVACIONES. Se deber consignar en el boleto de pedido si hay lesiones

o costras a nivel nasal. (muy importante)

EXPECTORACIN
En las condiciones habituales de la clnica diaria, no es una muestra
representativa de la situacin existente en el tracto respiratorio inferior por
su mezcla con secreciones procedentes de todo el rbol traqueo-bronquial y
con la flora saprfita de la orofaringe.

MATERIAL NECESARIO. - Frasco estril de boca ancha y hermtico. - Suero

fisiolgico estril y nebulizador ocasionalmente.

TCNICA O METODOLOGA DE OBTENCIN DE LA MUESTRA. - Enjuagar la

boca con agua destilada estril o solucin salina. - Obtener el esputo tras
una expectoracin profunda luego de un esfuerzo de tos, preferentemente
matinal. - La muestra debe provenir del sector bajo del tracto respiratorio.
La saliva no sirve para realizar este estudio. - De no producirse
expectoracin espontnea, puede inducirse el esputo con nebulizaciones de
suero fisiolgico estril tibio (15 ml durante 10 minutos), siendo til adems
realizar un drenaje postural o fisioterapia respiratoria.

VOLUMEN MNIMO. De 2 a 10 ml, si es posible.

TRANSPORTE Y CONSERVACION. Envo inmediato al laboratorio (no superior

a 2 horas).

OBSERVACIONES. - Es preferible realizar la toma antes de instaurar el

tratamiento antibitico. - No es til para anaerobios. - No son inoculables las
secreciones de sospechosa procedencia. - La expectoracin debe rechazarse
hasta obtener un esputo de calidad suficiente (mas de 25 leucocitos
polimorfonucleares y menos de 10 clulas epiteliales por campo 100x). - Si
no se obtiene muestra representativa del tracto respiratorio inferior, es intil
insistir con esta tcnica diagnstica. - Si el pedido incluye baciloscopa se
deben recoger 3 muestras en 3 das sucesivos. Mientras conservar en la
heladera a 4C hasta el tercer da y llevar las 3 muestras juntas al
laboratorio

SECRECION FARINGEA

Se utiliza para el diagnstico de faringitis estreptocccica.

Excepcionalmente se pueden requerir bsqueda de otros patgenos (por
ejemplo: Neisseria gonorrhoeae) consultar con el laboratorio.

MATERIAL NECESARIO. - Bajalenguas ( imprescindible) - Hisopo de algodn

con medio de transporte. ( Stuart , Amies)

TCNICA. Bajo visin directa, con la ayuda del bajalengua, se tocar con el
hisopo en todas las partes con exudado, membranas o inflamacin. Se
deben frotar las criptas tonsilares y la faringe posterior. En lo posible no
tocar la mucosa oral, lengua, vula ni dientes.

NMERO DE MUESTRAS Y/O VOLUMEN. Basta con un hisopo.

TRANSPORTE Y CONSERVACION. Envo inmediato al laboratorio (no superior

a 2 horas). Si no es posible, conservar en heladera a 4C hasta 12 horas.

OBSERVACIONES. Se investigar rutinariamente la presencia de

Streptococcus beta-hemoltico del grupo A (S. pyogenes) y otros grupos
beta hemolticos como C y G.