Aplicaciones de la nanotecnologa para la regeneracin y neuroprotecn del

sistema nervioso central

Resumen
La nanotecnologa es la ciencia e ingeniera que se ocupa del diseo, sntesis y
caracterizacin de los materiales y dispositivos que tienen una organizacin
funcional en al menos una dimensin en la escala de los nanmetros (es decir,
una milmillonsima parte de un metro). La habilidad de manipular y controlar
ingeniera de auto-ensamblaje de sustratos a estas escalas produce
consecuencias macroscopicas fsicas y/o qumicas que el material en bulto no
posee a causa de su composicin de molculas fundamentales por si solas.
Esto resulta en un grado de integracin funcional entre los sustratos de
ingeniera y la celula o sistemas fisiolgicos no alcanzados previamente. La
nanotecnologa aplicada destinada a la regeneracin y la neuroproteccin del
sistema nervioso central (SNC) se beneficiar significativamente de
investigacin en nanotecnologa bsica llevada a cabo en paralelo con los
avances de la biologa celular, la neurofisiologa y neuropatologa. En ltima
instancia el objetivo es desarrollar nuevas tecnologas que directa o
indirectamente ayudar a proporcionar neuroproteccin y / o un ambiente
permisivo y las seales de sealizacin activos para el crecimiento guiado del
axn. En algunos casos, se espera que se requiera el neurocirujano para
administrar estos sustratos para el paciente. Como tal, para que las
aplicaciones de la nanotecnologa dirigidos a trastornos neurolgicos puedan
desarrollar todo su potencial, ser importante que los neurocientificos,
neurocirujanos y neurlogos para participar y contribuir al proceso cientfico
junto con colegas de ciencias e ingeniera fsica. Esta revisin se centrar en
las nuevas aplicaciones clnicas destinadas a la regeneracin y la
neuroproteccin del SNC lesionado, y discutir otras plataformas tecnolgicas
que tienen un importante potencial para ser adaptado para aplicaciones de
neurociencias clnicas.
1. Introduccin
La nanotecnologa es la ciencia e ingeniera que se ocupa del diseo, sntesis y
caracterizacin de los materiales y dispositivos que tienen una organizacin
funcional en al menos una dimensin en la escala de los nanmetros (es decir,
una milmillonsima parte de un metro) que van desde unos pocos hasta
aproximadamente 100 nm. Un nanmetro es 3 rdenes de magnitud menor
que un micrmetro, 10-9 vs 10-6, respectivamente y es ms o menos la escala
de tamao de las molculas (por ejemplo, una molcula de ADN es de
aproximadamente 2,5 nm de largo, mientras que un tomo de sodio es de
aproximadamente 0,2 nm). En particular, el impacto potencial de la
nanotecnologa de auto-ensamblaje en la ciencia, molculas a medida que se
auto-ensamblan o auto-organizan en estructuras de mayor orden en respuesta

a una sustancia qumica definida o a una seal fsica, incluidas las aplicaciones
de la biologa y la medicina, se derivan del hecho de que estos materiales y
dispositivos de la nanoingeniera exhiben mesoescala mayor (es decir, la
escala de rango medio entre micro y macro) y qumica a microescala y las
propiedades fsicas que el material en bulto no posee a causa de su
composicin de molculas fundamentales por si solas. Esta es una propiedad
emergente debido a que los materiales de ingeniera y dispositivos a escala
nanomtrica implican controlar la manipulacin del componente individual
(nanoescala) y por lo tanto (al menos en parte) el control sobre su sntesis
molecular y su ensamblaje. Como tal, las aplicaciones de la nanotecnologa a
la medicina y biologa permiten la interaccin e integracin de las clulas y los
tejidos con sustratos de nanoingeniera en un nivel molecular (es decir,
subcelular) con un alto grado de especificidad y el control funcional. Este
artculo representa el segundo de una serie de Surgical Neurologydedicated a
la revisin de las aplicaciones emergentes de la nanociencia y la
nanotecnologa para la neurociencia clnica. El primer artculo (Surg Neurol
2004; 61:. 216 a 220) proporciona una introduccin a la nanotecnologa, una
visin general de los enfoques de sntesis, algunos de los principales desafos
tcnicos asociados con aplicaciones de la nanotecnologa en desarrollo, y una
discusin de aplicaciones orientado a diferentes reas de la medicina y la
biologa. En este artculo se describen las aplicaciones de la nanotecnologa
dirigidas a la neuroproteccin y las regeneraciones funcionales del SNC
despus de insultos traumticas o degenerativas emergentes. Adems, se
analizan otras tecnologas de plataforma en desarrollo, que puede resultar
tener amplias aplicaciones en la medicina y la fisiologa, incluyendo algunos
que se estn desarrollando para rescatar o reemplazar anatmica y / o
estructuras del SNC funcionales.
2. Las aplicaciones de la nanotecnologa en el sistema nervioso central
Aplicaciones clnicas de la nanotecnologa en el sistema nervioso central (SNC)
estn muy relegadas con respecto a aplicaciones a otras reas de la medicina
y la biologa, tales como, aplicaciones ortopdicas, ADN/sensores genmicos y
drogas nuevas y enfoques de administracin de genes (vase, por ejemplo, las
referencias . [1,14,26,27,40,41,45,52,72,73,87]).(La nica excepcin a esto son
enfoques para la administracin de frmacos a travs de la barrera
hematoenceflica [20,35,36,44], que ser el tema del prximo artculo de esta
serie). Esto es en parte debido a algunos de los desafos nicos impuestas por
el SNC tales como el acceso restringido y difcil anatoma, un ambiente celular
y molecular extremadamente heterogneos, y las complejidades de cableado
anatmico y funcional del sistema y procesamiento de la informacin asociada.
A pesar de estos desafos, los beneficios potenciales de las nanotecnologas
para el tratamiento de ambos trastornos perifricos y del sistema nervioso
central son enormes y, finalmente, pueden ofrecer al paciente nuevas opciones
teraputicas y clnicas que simplemente no existen en la actualidad. Fiel a la

naturaleza altamente interdisciplinaria de esta rea de investigacin, es

importante que los avances tecnolgicos se produzcan en conjuncin con los
avances de la neurociencia bsica y clnica. Por lo tanto, tres cosas deben
ocurrir en paralelo para aplicaciones de la nanotecnologa en neurologa y
neurociruga para llegar a buen puerto: (1) los avances en la qumica y la
ciencia de los materiales que producen enfoques cada vez ms sofisticados de
sntesis y caracterizacin; (2) avances en el biologa molecular, la
neurofisiologa, y neuropatologa del sistema nervioso; y (3) el diseo y la
integracin de aplicaciones nanoingeniera especficas en el sistema nervioso
que se aprovechan de los dos primeros puntos. A medida que estas reas se
desarrollan de manera integrada y en paralelo, las aplicaciones basadas en la
nanotecnologa para los trastornos del sistema nervioso deberan empezar a
llegar a la clnica.
3. Neuroproteccin
Se sabe que la lesin mediada por radicales libres juega un papel importante
en el proceso de las enfermedades de trastornos isqumicos, traumticos,
degenerativos y en el SNC [8,19,43,46,49,60,64,82,85]. Especies qumicas
tales como superxido (O2- ), hidroxilo (OH), el peroxinitrito (ONOO-), y
perxido (H2O2) pueden producir una gran cantidad de oxidativo mediando
cambios perjudiciales en las clulas, incluyendo la fragmentacin del ADN,
peroxidacin de los lpidos de la membrana celular, disminucin mitocondrial
de la produccin de energa y de la protena transportadora de inactivacin
[16,46,64,85]. Un enfoque que se est desarrollando para hacer frente a esto
es el desarrollo de neuroprotectores basadas en fullerenos C 60 [15-17,28]. Los
fulerenos son molculas compuestas de grandes matrices de 3-dimensiones de
tomos de carbono espaciados uniformemente, similar al patrn producido por
la rombos sobre un baln de ftbol.Los Fullerenoles son derivados de fullerenos
funcionalizados con grupos hidroxilo(es decir, OH) (Fig. 1) y se ha demostrado
que poseen propiedades antioxidantes y de captacinde radicales libres que los
hacen capaces de reducir glutamato, NMDA, AMPA, y muerte celuar inducida
por kainita por exocitosis y apotsis (Tabla 1) [15-17,28]. El mecanismo de
neuroproteccin mediada por fullerenol se basa, al menos en parte a la
inhibicin de canales de glutamato, ya que ni la GABA (A) o los receptores de
taurina se ven afectados. Adems, los fullerenoles parecen reducir los
aumentos inducidos por glutamato de las concentraciones intracelulares de
calcio, un mecanismo crtico de excitotoxicidad en las neuronas [15-17,28].
Otros enfoques para la neuroproteccin farmacolgica, entre ellos, la terapia
gnica, y fisiolgica, siguen siendo reas de investigacin muy activa con una
importante clnica potencial [2,24,25,30,32,33,51,53,57,61,70, 79]. Los
fullerenoles complementan estos enfoques mediante la representacin de los
mtodos de sntesis novedosas para el desarrollo de nuevos compuestos
neuroprotectores basados en la manipulacin qumica controlada y
funcionalizacin de estas estructuras sintticas altamente ordenadas. Dado el

mecanismo propuesto de neuroproteccin inducida por el fullerenol, ser

interesante ver lo que desarrollan las aplicaciones clnicas de la lesin
secundaria despus de trastornos del SNC traumticas.
4. Neurorregeneracin
El trabajo postdoctoral del autor en colaboracin con sus colegas se centr en
un enfoque nanotecnolgico para la regeneracin del SNC despus de la lesin
de la mdula espinal y la degeneracin de la retina neural [71,76-78].
Molculas anffilas tipo pptidos, es decir, las molculas a base de pptidos con
una cola hidrfoba y el grupo de cabeza hidrfilo, fueron diseados para autoensamblarse para formar una red de nanofibras tipo andamios slo cuando se
presentn en condiciones inicas fisiolgicas [22,23,54]. La superficie de las
nanofibras, compuestos de los grupos de cabeza hidrfilos de las molculas de
anffilo pptido alineados, consista en secuencias de pptidos fisiolgicamente
activos diseados para participar en la sealizacin celular, actuando como
ligandos para receptores de la superficie celular. En nuestro caso la secuencia
del pptido principal exploramos era la matriz extracelular con secuencia de
isoleucina-valina-lisina-alanina-valina-neuronal especfica laminina-derivado
(IKVAV) [76-78], que es conocido por promover el crecimiento y desarrollo de
neuritas [11,12,29,39,47,59,81,84,86]. Las molculas de pptido anffilo
existan en una solucin de agua hasta que se encontraron con
concentraciones fisiolgicas de cationes como el calcio, lo que desencaden su
auto-ensamblaje en nanofibras que contenan las molculas de agua en su
lugar, macroscpicamente formar un sustrato de tipo gel. Debido a esta
propiedad nica, hemos sido capaces de encapsular clulas progenitoras
neurales o clulas de la retina neural en estos geles mediante la mezcla de
suspensiones de cultivo celular con las soluciones de anffilo pptido,
atrapando las clulas en el interior de los geles. Debido a que la secuencia de
pptido funcional formada la superficie exterior de las nanofibras, permiti la
sealizacin funcional de las clulas encapsuladas en tres dimensiones .
Los resultados fueron bastante dramticos (Fig. 2), y en el caso de las clulas
progenitoras neurales encapsuladas incluidos diferenciacin ms rpido y ms
robusto en fenotipos neuronales maduros en comparacin con los controles.
Por 1 y 7 das in vitro, 30% y 50%, respectivamente, de las clulas progenitoras
neurales expresado la madura marcador neurona -tubulina III [76]. Tambin
nos sorprendi observar casi una exclusin total del desarrollo de astrocitos en
ests cultivos (menos de 1% y el 5% a 1 y 7 das in vitro, respectivamente [76])
a pesar del carcter pluripotente de las clulas progenitoras. Esto sugiere
nuevos enfoques para limitar los efectos de gliosis reactiva y la cicatrizacin
glial despus de sucesos traumticos o degenerativos mediante el trasplante
de clulas del donante in vivo con los sustratos de pptido anffilo. Se
observaron resultados similares con clulas de la retina encapsulado. La visin
final es que las soluciones de pptido anffilo a ser (mnimamente invasiva)

inyectado estereotxicamente en combinacin con clulas de donantes, tienen

la forma de la red de nanofibras in situ e in vivo, y proporcionar la sealizacin
celular funcional para ambas clulas del donante y del husped, mientras que
al mismo tiempo limitar los efectos de gliosis reactiva. Este sistema de
nanofibras se est estudiando actualmente para lesiones de la mdula espinal,
derrames cerebrales y trastornos de la retina degenerativas incluyendo la
degeneracin macular relacionada con la edad.
5. Tecnologas de plataforma
Adems de las nanotecnologas dirigidas especficamente a la sustitucin o el
rescate de las clulas del sistema nervioso central, que siguen siendo bastante
limitados, un grupo ms amplio de tecnologas que se estn desarrollando
puede ser
clasificado como tecnologas de plataforma que tienen el potencial tanto para
la neurobiologa bsica y las aplicaciones de la neurologa / neurociruga
clnicos. Un rea que ha recibido una considerable atencin es el crecimiento y
el patrn seleccionado de tipos de clulas neuronales en las superficies
estampadas. An siendo explorado en superficies con caractersticas o
patrones de macromolculas depositados [9-11,84] fsicas microescala, este
enfoque ha sido recientemente
extendido a escala nanomtrica mediante grabado fotolitografa en obleas de
Si-SiO2 recubiertas, que se caracterizan por el microscopio de fuerza atmica y
por microscopa electrnica de barrido [18] (vase tambin la Ref. [75]). Estos
autores determinaron que la capacidad de los cultivos primarios mixtos
derivados de la sustancia negra para crecer y sobrevivir en superficies con
caractersticas nanoescala estaban estrechamente vinculados a las
dimensiones fsicas de la rugosidad de la superficie, con un crecimiento celular
ptimo caer dentro de una estrecha ventana; caractersticas de menos de 10
nm o superior a 70 nm se asocia con una disminucin de la adherencia celular.
Otras aplicaciones se estn aprovechando de algunas de las propiedades
nicas que ofrece nanotubos de carbono para mejorar la estimulacin elctrica
crnica del SNC. Clnicamente, los implantes de estimulacin elctrica funcional
se estn utilizando cada vez ms para tratar el dolor intratable
[34,37,62,69,74] y tambin estn ganando impulso para el tratamiento de
otros trastornos tales como la incontinencia urinaria y trastornos relacionados
parkinsonianos-[3- 6,38,58], en la mayora de los casos de intervencin
neuroquirrgica. Adems, ambos estimulantes y grabacin de electrodos SNC
son importantes herramientas experimentales neurofisiolgicos y
neuropatolgicos [4-6,13,21,42,55,56,63,65-69,80]. Uno de los problemas ms
importantes asociados con el desarrollo de la grabacin o electrodos de
estimulacin crnica del SNC es el fallo del dispositivo asociado a la respuesta

fibrtica mediada por clulas gliales e inmunes [3,6,7,31,50]. Para hacer frente
a esto, algunos grupos se estn centrando en el desarrollo de guas de
electrodos basados en nuevas nanofibras de carbono para los sistemas de
estimulacin neuronal del SNC, ya sea utilizando sus propias comprimidas
estructuras de nanofibras de carbono [48] o en combinacin con otros
materiales, como su utilizacin para reforzar materiales compuestos de
poliuretano [ 48]. Tambin se encuentran en las primeras etapas de ser
desarrollado para una prtesis de retina [83]. En todos los casos, la idea es
utilizar las propiedades elctricas conductoras nicas de nanofibras de carbono
para la estimulacin focal altamente controlado.
6. Conclusiones
La investigacin en nanotecnologa destinada a la regeneracin y la
neuroproteccin del SNC se beneficiar significativamente de investigacin en
nanotecnologa continua en paralelo con los avances de la biologa celular, la
neurofisiologa y neuropatologa. En ltima instancia, el objetivo es desarrollar
tecnologas que directa o indirectamente ayudan a proveer un ambiente
permisivo, claves espaciales y temporales para el crecimiento axonal guiado
despus de los mecanismos de degeneracin o lesin secundaria. En algunos
casos, se espera que se requerir el neurocirujano para proporcionar o
administrar el sustrato de nanoingeniera para el paciente. Al igual que con
todas las estrategias teraputicas para los trastornos del SNC, est la cuestin
de conseguir el material, dispositivo o frmaco en el sitio donde se necesita en
el propio sistema nervioso central. Por ejemplo, el suministro de molculas de
pptido anffilo para la formacin de la red de nanofibras in vivo en modelos de
rata de lesin de la mdula espinal aguda de compresin requiere una
laminectoma y la inyeccin estereotxica. Como tal, para que las aplicaciones
de la nanotecnologa dirigidos a trastornos neurolgicos puedan desarrollar
todo su potencial, ser importante para los neurocirujanos, neurlogos y
neurocientficos participar y contribuir al proceso cientfico junto con colegas de
ciencias, ingeniera y fsica.

Fig. 1. Estructura representativa de un derivado de fullereno neuroprotector

funcionalizado con grupos cido carboxlico unidos a los tomos de carbono de
ciclopropano de la molcula de C60. Adaptado de Dugan et al. Reproducido con
permiso de Parkinsonism Relat Disord.2001; 7: 243-246.