Determinacin de los iones sulfatos por

Espectrofotometra
1. Objetivo

Determinar por espectrofotometra, la cantidad de iones sulfato que contiene

una muestra de agua.
2. Fundamento
La meta de un anlisis qumico de aguas es generar resultados correctos y confiables, siendo la
validacin de ensayos uno de los aspectos ms importantes para conseguir este propsito; adems
constituye un factor clave para la prestacin de servicios analticos. La determinacin de ion sulfato
en aguas es una de las metodologas analticas ms discutidas que se conoce en el mbito cientfico
tcnico del anlisis de aguas, principalmente, por las desventajas que presentan los mtodos
aceptados internacionalmente (gravimtrico, turbidimtrico y cromatogrfico). En el presente estudio
se hizo la evaluacin del mtodo analtico espectrofotomtrico, para la determinacin de sulfatos en
aguas; el objetivo de este trabajo fue incluir una modificacin al mtodo estandarizado y confirmar
correctamente la aplicacin del mtodo modificado para el anlisis de aguas. Se trabajaron muestras
de un tipo de agua: potable, siguindose estrictamente los protocolos de validacin. Se encontraron
resultados satisfactorios en precisin y exactitud con el fin de emitir resultados confiables y reales de
la muestra analizada.
La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las investigaciones biolgicas.
El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida
por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad
conocida de la misma sustancia.
Todas las sustancias pueden absorber energa radiante, aun el vidrio que parece ser completamente
transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe
fuertemente en la regin del infrarrojo.
La absorcin de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las
molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida; la energa radiante no
puede producir ningn efecto sin ser absorbida.
El color de las sustancias se debe a que stas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca
que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbida.
MTODOS FOTOMTRICOS DE ANLISIS

I.

NATURALEZA DE LA RADIACIN ELECTROMAGNTICA

La Radiacin Electromagntica es una forma de Energa radiante que se propaga en forma

de ondas. En este fenmeno ondulatorio se define:
a) Longitud de onda ( ): es la distancia entre dos mximos de un ciclo completo del
movimiento ondulatorio.
b) Frecuencia ( n ): es el nmero de ciclos por segundo. Es inversa a la longitud de
onda.
c) Fotones: la luz est formada por fotones, y estos son paquetes discontinuos de E. La E
de un fotn depende de la frecuencia y de la longitud de onda, segn la siguiente expresin:

E=h x n=h

C
6,62 1027 erg/seg . .
n (h = Cte. de Planck =

La Energa Electromagntica se mide el Ergios. La relacin entre la longitud de onda y la

Energa es inversa, por lo tanto a menor longitud de onda mayor Energa y viceversa.
d) Espectro Electromagntico: cubre un amplio intervalo de E radiante, desde los rayos g
de longitud de onda corta hasta las ondas de radio, de longitud de onda larga. Se divide en
varias regiones, las ms interesantes para nosotros son:
Regin Ultravioleta: = 10-380 nm
Regin Visible:
Regin Infrarroja:

= 380-780 nm
= 780-30.000 nm

En la Regin Visible, la luz se descompone en colores. La luz blanca contiene todo el

espectro de longitudes de onda. Si interacciona con una molcula puede ser dispersada o
absorbida.
La Energa Electromagntica se mide el Ergios. La relacin entre la longitud de onda y la
Energa es inversa, por lo tanto a menor longitud de onda mayor Energa y viceversa.

II.

FENMENOS DE INTERACCIN ENTRE LUZ Y MATERIA

A. FENMENO DE ABSORCIN
Cuando una partcula que se encuentra en estado de reposo o estado fundamental
interacciona con un haz de luz, absorbe E y se transforma en una partcula en estado
excitado. La molcula absorbe la E de la onda y aumenta su energa, y ese aumento de
energa es igual a la E de la Radiacin Electromagntica absorbida (E = h n ). La
partcula en estado excitado tiende a volver de forma espontnea a su estado de reposo
desprendiendo la E absorbida en forma de calor.
Espectro de Absorcin. Cada especie absorbente, que recibe el nombre de cromgeno,
tiene un determinado espectro de absorcin. El espectro de absorcin es un grfico donde
se representa en ordenadas la Absorbancia y en abscisas la longitud de onda. La medida de
la cantidad de luz absorbida por una solucin es el fundamento de la espectrofotometra de
absorcin.
Por eso es importante trabajar a la longitud de onda a la que la sustancia estudiada absorbe
la mayor cantidad de luz (a mayor cantidad de luz, mayor cantidad de sustancia).
B. FENMENO DE EMISIN
Algunos compuestos, tras ser excitados por la luz, vuelven al estado fundamental
produciendo la emisin de energa radiante. En este caso, lo que se mide es la energa
emitida y, en este fenmeno se basa la fotometra de llama o la fluorescencia.
III.

LEYES DE ABSORCIN

Cuando un haz de luz pasa a travs de un medio, se registra una cierta prdida de
intensidad, debido a la absorcin por parte de la sustancia.
Se llama TRANSMITANCIA (T) a la relacin entre la luz incidente y la luz transmitida:
T = Is /I 0 ; %T = (Is /I 0)x 100
Se puede perder intensidad por la interaccin con la cubeta o el solvente. Para evitar este
error se hace una primera medida con una solucin de referencia o BLANCO, que contiene
todos los posibles compuestos que intervienen en la lectura menos el que vamos a medir.
Todas las medidas que se hagan con posterioridad sern referidas a esta medida inicial y se
harn en la misma cubeta que se utiliz en la medida del blanco.

La Transmitancia se usa poco, se emplea ms la Absorbancia (A) porque la relacin entre A

y la concentracin de una solucin es directamente proporcional y la de la T es
inversamente proporcional.
La relacin entre la absorbancia y la transmitancia es la siguiente:

Si el

%T = 100

Si el % T

=0

A = 2-log T = 2-log 100 = 0

A = 2-log 0 = y

En los aparatos que se usan actualmente se presentan absorbancias, pero el aparato lo que
mide realmente es %T que luego transforma a absorbancia.

LEY DE BEER

La absorbancia de una solucin es directamente proporcional a la

concentracin y a la longitud del paso de la luz.

A=e . b . c
Siendo:
A: absorbancia. No tiene unidades.
e: el coeficiente de extincin molar, tambin llamado coeficiente de
absorcin. Es constante para un compuesto dado siempre que se fijen
condiciones de longitud de onda, de pH, de temperatura, de solventes,
etc. Sus unidades son 1/ (mol/cm).
b: es la longitud de paso de la luz, en cm.
c: es la concentracin del absorbente. Se mide en mol/L.

IV.

ESPECTROFOTMETRO
Se distinguen dos tipos de aparatos:
Fotmetro o Colormetro: se caracterizan porque utilizan filtros que solo permiten el
paso de una determinada longitud de onda.
Espectrofotmetros: utilizan cromadores. Con ellos se obtiene un haz de luz
monocromtico cuya longitud de onda se vara a voluntad. Los monocromadores
pueden ser de dos tipos: prismas y redes de difraccin.

COMPONENTES DEL ESPECTROFOTMETRO

1. Fuente de luz: proporciona energa radiante en forma de luz visible o no visible.
Tipos de lmparas:
Lmparas de filamento de tungsteno: se utilizan para longitudes de onda
del espectro visible y el ultravioleta prximo. Son fuentes de un espectro
continuo de energa radiante entre 360-950 nm.
Lmparas de filamentos de haluros de tungsteno: son de mayor duracin y
emiten energa radiante de mayor intensidad.
Lmparas de Hidrgeno y Deuterio: producen un espectro continuo en la
regin ultravioleta entre 220-360 nm.
Lmparas de vapores de Mercurio: Emiten un espectro discontinuo o
espectro de lneas que se utilizan para calibracin de longitudes de onda,
se emplean solo para espectrofotmetros y cromatografa HPLC.
2. Rendija de entrada: tiene como funcin reducir al mximo la luz difusa y evitar que la luz
dispersa entre en el sistema de seleccin de longitud de onda.
3. Monocromadores:
Pueden ser:
Prismas: son fragmentos con forma de cua de un material que permite el paso de
la luz. Ej. De vidrio para trabajar en el espectro visible o cuarzo para trabajar en el
ultravioleta lejano.

Redes de difraccin: son un gran nmero de lneas paralelas situadas a distancias

iguales entre s y son hendiduras sobre un vidrio o una superficie metlica. Cada
una de estas hendiduras se comporta como un pequeo prisma.
4. Rendija de salida: Tiene como funcin impedir que la luz difusa atraviese la cubeta de la
muestra, que provocara desviaciones a la Ley de Beer.
5. Cubeta: Es el recipiente donde se coloca la muestra para la medicin. Pueden ser de
distintos tipos y tamaos (cuadradas, rectangulares, redondas). Se obtienen mejores
resultados usando cubetas de bordes paralelos. Si se utilizan cubetas redondas se deben
marcar e introducir en el aparato siempre en la misma posicin. Suelen estar fabricadas en
vidrio o en plstico.
6. Detector: Puede ser de dos tipos:

Fotoclulas o clulas fotovoltaicas:

Es una lmina de Cobre sobre la que se extiende una capa de Selenio o de xido de
Cobre. A esto se le conoce como semiconductor. Sobre el semiconductor hay una capa
de metal transparente que sirve de electrodo. La luz incide sobre el Selenio y ste
desprende electrones, que pasan a la placa de Cobre originando una diferencia de
potencial por existir carga negativa sobre el Cobre y positiva sobre el Selenio. El
conjunto se conecta a un ampermetro que seala el paso de corriente.
Caractersticas: son resistentes; econmicas; sensibles desde el ultravioleta hasta los
1.000 nm. de longitud de onda; no se requiere batera externa, ni vaco,...; la corriente
producida es directamente proporcional a la Energa que llega y tienen efecto fatiga,
es decir, que presentan una subida inicial de corriente, que luego decrece
progresivamente hasta el equilibrio. Por eso hay que esperar entre 30-60 segundos
entre una lectura y otra.

Fototubos multiplicadores:

Un fototubo multiplicador es un tubo que contiene un ctodo que emite electrones de

forma proporcional a la Energa que incide sobre l. Tiene un nodo que recoge los
electrones y la corriente se multiplica varias veces al chocar los electrones sobre
sucesivos nodos que van teniendo un voltaje superior al precedente. La seal se
amplifica en cientos o miles de veces.
Caractersticas: el tiempo de respuesta es muy rpido, no tienen efecto fatiga tan altos
como la anterior y son muy sensibles.
7. Medidor: son sistemas de lectura de la Energa elctrica que recoge el detector y que
puede ser lectura directa (se utiliza una clula fotovoltaica) o puede ser amplificadores de

seal como en el caso del fototubo multiplicador. Los actuales aparatos incorporan lectura
digital y clculos automticos de concentraciones con relacin a las curvas de calibracin.

TIPOS DE APARATOS
ESPECTROFOTMETRO DE HAZ SIMPLE: es igual que la descripcin dada para
el espectrofotmetro en general. Consta de los mismos elementos (Ej.
Bilirrubinmetro: para determinar bilirrubina directa en capilar).
ESPECTROFOTMETRO DE DOBLE HAZ EN EL ESPACIO: todos los
componentes estn duplicados, menos la lmpara y el medidor. Dos haces de luz
pasan al mismo tiempo por los distintos componentes separados en el espacio.
Esto compensa las variaciones de intensidad de luz y de absorbancia.
ESPECTROFOTMETRO DE HAZ DOBLE EN EL TIEMPO: utilizan los mismos
componentes que el espectrofotmetro de haz simple. Dos haces de luz pasan por
los mismos componentes pero no al mismo tiempo. Emplean un Chopper
consistente en un interruptor rotativo del haz luminoso colocado a continuacin de
la rendija de salida. Un sistema de espejos dirige la porcin de luz reflejada por el
chopper a travs de una cubeta de referencia y de ah al detector comn. El
detector lee alternativamente el haz procedente de la muestra y el de la cubeta de
referencia. Esto compensa la variacin de energa radiante.

3. Esquema experimental
Al igual que los cloruros el contenido en sulfatos de las aguas naturales es muy variable y puede ir
desde muy poco miligramos por litro hasta cientos de miligramos por litro. Los sulfatos pueden tener
su origen en que las aguas atraviesan terrenos ricos en yesos o a la contaminacin con aguas
residuales industriales.
La determinacin del contenido de sulfatos puede hacerse por diferentes mtodos .Uno de ellos es el
test rpido de los sulfatos .El mtodo gravimtrico, mediante precipitacin con cloruro de bario, es un

10 mg
mtodo muy preciso y aplicable a concentraciones superiores a
.
l
El mtodo nefelomtrico, mediante turbidmetro nefelomtrico, es menos preciso que el gravimtrico
para concentraciones a

10 mg
l

.Se recomienda, preferentemente, para la determinacin de

sulfatos en aguas con contenidos superiores a

60 mg
l

y siempre que se disponga de

turbidmetro.

Po

Po > P

Transmitancia

T1=

P
Po

A=log ( T )

Absorbancia
A travs de Beer

A=a b c=K c

Donde:
a= absortividad
b=paso ptico
c=ppm
El ion sulfato

2
SO 4

precipita en un medio cido actico, con el ion

cristales de sulfato de bario

2+
Ba de modo que forma

BaSO 4 de tamao uniforme, los que deben mantenerse en

suspensin homogneas durante un periodo de tiempo que resulte suficiente para medir la
absorbancia que la misma produzca .El contenido de

2
SO 4

de la curva de calibrado previamente obtenida.

Seal analtica
C

de cada muestra se obtiene a partir

2+ BaCl2 BaSO 4 (s)

SO 4

Luego:

A=0.02+ 0.25[ ]
[]

+5.8 ppm

[]=5.8

50 ml
5 ml

En esta tcnica interfieren fundamentalmente el color y la turbidez .Esta puede

Micropipeta
eliminarse por filtracin
o centrifugacin. La interferencia del color Pizeta
puede subrayarse
Sustancia
stock
utilizando la muestra coloreada como testigo.

4. Reactivos ,Equipos y materiales

Solucin

Fiola

Solucin Tampn

Equipo: Espectrofotmetro de absorcin molecular

Espectrofotmetro

5. Procedimiento
H 2 O destilada.

A las 7 fiolas, agregar 25 ml de

Agregar

l de solucin stock

2
SO 4 1000 ppm solo a 5 de las fiolas,

teniendo cuidado en usar correctamente la micropipeta.Para saber qu cantidades

agregar sacarlas con la siguiente formula:

50 ml ( y) ppm=1000 V

V =x ml
Agregar 1 ml de

HCl1 M

la Muestra.
Agregar nuevamente
Aforar con

a todas las muestras, y 5 ml

de agua de cao a

5 ml de solucin tampn a todas las fiolas.

H 2 O a 50 ml cada fiola, y agregar 1cda. BaCl 2

Llevar cada fiola al espectrofotmetro, la cual en el equipo obtendrn datos y la

curva de calibracin correspondiente.

Realizar clculos
Para saber cuntos

l decol, stock

SO 4 :

50 ml 5 ppm=1000 V
V =0.25 ml

Entonces para:
l

de sol. Stock

2
SO 4
1

250

500

750

1000

2000

De acuerdo con el anlisis espectrofotomtrico:

Sustancia en blanco

1000 ppm

 Primera muestra de fiola

Segunda muestra de fiola

 Tercera muestra

Cuarta muestra

De la curva de calibracin

De la grfica de calibracin se obtiene:

Soluciones(fiolas)
1

Abs

% Error

0.12504
40.45

2
3
4
5
M

0.16284

5.50

0.23576

2.09

0.31192

1.33

0.59773
-

2.90

De la grfica de calibracin se obtiene:

Hallamos un promedio de absorbancia

a=0.2867

Reemplazando los datos:

0.2867=0.0132 x0.024

x=18.522

Determinar la concentracin de
2 mlaforados

2= ppp SO 4 (c)
ppm SO 4(m )
2=18.522 50

ppm SO 4 (m )

2=926.079

ppm SO 4 (m )

6. Conclusiones

2
SO 4

a partir de relacin

De acuerdo con el anlisis espectrofotomtrico y los clculos realizados

obtenemos la cantidad de sulfatos en el agua

926.079 ppm .

Utilizamos el mtodo turbidimtrico para lograr encontrar nuestro de la prctica.

7. Bibliografa
Hobart H. Willard, Lynne L. Merrit, JR, Jhon A. Dean METODOS
INSTRUMENTALES DE ANALISIS.
Wikipea Enciclopedia Virtual, 2007.
Prcticas de Laboratorio de Anlisis Qumico .

8. Linkografa

http://www.monografias.com/trabajos59/potenciometria/potenciometria2.shtml#ixzz3BMceUaNJ