Uriel Quijano Jurez

martes, 17 de noviembre de 2015

 Grasas totales.
Extraccin semicontinua con un disolvente

orgnico.

Disolvente: se calienta, se volatiliza y

condensa goteando sobre la muestra la cual

queda sumergida en el disolvente.

El contenido de grasa se cuantifica por

diferencia de peso.

La cantidad y composicin de los lpidos

extrados depender del solvente utilizado.

(Nielsen, 2003)

 Costo bajo.
Extraccin de alto

porcentaje de grasas y
aceites.

Requiere entre 3-8

horas.

Equipo especial.

 Mtodo fsico de separacin con alta

resolucin.

Dos fases: estacionaria y mvil.

La fase mvil transporta los

componentes a distintas velocidades por

el lecho estacionario.

Alta reproducibilidad

Alta sensibilidad
rapidez

 Dos fases: estacionaria activa y otra mvil lquida interactiva.

 Utiliza el movimiento de iones en

campos elctricos y magnticos para

clasificarlos de acuerdo a su relacin
masa-carga.

Tcnica analtica por medio de la cual

los lpidos se identifican separando los

iones gaseosos en campos elctricos y
magnticos.

Brinda informacin cualitativa y

cuantitativa acerca de la composicin

de los materiales.

1.

Ionizar la sustancia a analizar.

2.

Rompe en trozos.

3.

Separacin de trozos en base a la

relacin masa/carga.

 Lisis alcalina: fcil, barato y reproducible.

Miniprep: cultivo pequeo 2ml
Maxiprep:
Electroforesis: migracin de molculas de ADN a travs de un campo elctrico.
Gel de agarosa
Bromuro de etidio (colorante)

1.

Cultivo

2.

Concentracin de bacterias por centrifugaciones.

3.

Resuspender botn.

4.

Lisis de bacterias con detergente aninico como Dodecilsulfato de sodio (SDS),

NaOH provoca desnaturalizacin de ADN genmico.

5.

Neutralizacin con cido actico, Acetato de potasio.

6.

El ADN precipita con ARN y protenas.

7.

En la fase lquida est el ADN plasmdico.

8.

Se agrega alcohol

 Detecta la presencia o ausencia de genes

especficos en el ADN entre una mezcla de

otras secuencias.

Identifica el tamao del fragmento de

restriccin que contiene dicha secuencia.

Emplea la tcnica de electroforesis en gel de

agarosa con el fin de separar los fragmentos

de ADN de acuerdo a su longitud y, despus,
una transferencia a una membrana en la cual
se efecta la hibridacin de la

1.

Obtencin de ADN.

2.

Corte con enzimas de restriccin.

3.

Separacin electrofortica.

4.

Traspaso a membrana de nylon o

nitrocelulosa.

5.

Hibridacin con sonda radioactiva.

6.

Revelado por autoradiografa.

 Tcnica usada para el estudio de expresin gentica, deteccin y cuantificacin de

mRNA.

El ARN aislado realiza una electroforesis en un gel de agarosa que contiene

formaldehdo el cual separa dos especies de ARN por tamao.

1.

Aislamiento del RNA.

2.

Electroforesis en gel de agarosa.

3.

Transferencia (blotting) a membrana de nylon o nitrocelulosa.

4.

Hibridacin con sonda radioactiva.

5.

Lavado

6.

Visualizacin de RNA.

Southern blotting

Northern blotting

Separacin

DNA

RNA

Desnaturalizacin

Necesaria

No es necesaria

Membranas

Filtro de nitrocelulosa

Papel filtro Amino

benzyloxymethyl

Hibridacin

DNA-DNA

RNA-DNA