PURIFICACIN DE LPIDOS DE YEMA DE HUEVO

Allison Natalia Lancheros Amado, Paula Alejandra Torres Rojas

Facultad de Ingeniera. Ingeniera Qumica.
Universidad de la Sabana. Cha, Cundinamarca.
OBJETIVOS:
Extraer de una emulsin de yema de huevo los lpidos presentes
Separar por medio de una columna de los triglicridos, el colesterol y los
fosfolpidos.
Determinar por cromatografa de capa delgada los lpidos recolectados en cada
fraccin obtenida de la separacin por columna.
INTRODUCCIN:
Los lpidos son un grupo de compuestos heterogeno que incluyen grasas, aceites, ceras,
entre otros. Entre sus caractersticas principales esta su insolubilidad en el agua y su
solubilidad en solventes no polares (ter, cloroformo, etc.). Los lpidos se clasifican segn
su complejidad, es decir:
Lpidos simples: son steres de cidos grasos con diversos alcoholes, en estos se
encuentran las grasas y las ceras
Lpidos complejos: son steres de cidos grasos que contienen ms grupos aparte de
un alcohol y un cido graso. En estos se encuentran los fosfolpidos (contienen
adems de cidos grasos y alcohol un residuo de cido fosfrico), glucolpidos
( contienen un cido graso, esfingosina y carbohidrato) y otros ms complejos
(sulfolpidos, aminolpidos y lipoprotenas).
Lpidos precursores y derivados: Son aquellos que contienen cidos grasos, glicerol,
esteroides, alcoholes, aldehdos, aldehdos grasos, cuerpos cetnicos, hidrocarburos,
vitaminas liposolubles y hormonas.
Por otra parte, lo lpidos cumplen funciones vitales para el organismo como lo son:
Funcin energtica: los lpidos constituyen la reserva energtica del organismo
debido a que su contenido calrico es muy alto y representan una forma compacta y
anhidra de almacenamiento de energa.
Funcion estructural: los lpidos forman bicapas lipdicas de las menbranas.
Recubren rganos y le dan consistencia, o protegen mecnicamente como el tejido
adiposo de pies y manos.
Funcin biocatalizadora: Los lpidos facilitan las reacciones qumicas que se
producen en los seres vivos. Cumplen esta funcin las vitaminas lipdicas, las
hormonas esteroideas y las prostaglandinas.
Funcin transportadora: El transporte de lpidos desde el intestino hasta su lugar de
destino se realiza mediante su emulsin gracias a los cidos biliares y a los
proteolpidos.
MATERIALES Y MTODOS
Materiales y reactivos
1M NaCl

Eter etilico

metanol / cloroformo (2: 1 en

volumen)
5% de metanol en cloroformo
9: 1 de ter de petrleo y ter
etlico
cloroformo / metanol / agua (1: 3:
1 en volumen)
cloroformo
columna empacada con 2ml de
silica gel en 4 ml de ter de
petrleo.
ter de petrleo / ter etlico /
cido actico (75: 25: 1 en
volumen)
cloroformo / metanol / cido
actico (65:25:10 en volumen).
sulfato de amonio al 20%, pipeta
pasteur o gotero.

tubos de centrifuga con tapa rosca

de 15 ml.
Placas silica gel
Lecitina de soya
Aceite de pescado
Capilares
Micropipetas de 1ml
Centrifuga
Plancha de calentamiento
Vortex
Pipetas de 5 y 10 ml
Rotaevaporador
Crisoles
Balanza analtica
Cmara de extraccin
Beakers, papel aluminio
Pinzas
Probetas de 10 ml.

Mtodos:
1. Extraccin de lpidos: se mezclaron 0,8 ml de la dispersin de lpidos con 3 ml
de metanol/cloroformo en un tubo de centrifuga, despues de agitar se aadi 1
ml de NaCl y cloroformo y se llevo a centrifugar para separar las fases. La fase
acuosa se desecho y la otra se paso a un crisol guardando 100 microlitros en un
tubo de microcentrigufa, se llev el crisol a la cmara de extraccin con el fin de
elimiar el disolvente restante y posteriormente se pes, as se obtuvo la cantiad
de lpidos obtenidos.
2. Cromatografa en columna: se prepar una columna empacada con 2ml de silica
gel en 4 ml de ter de petroleo en una jeringa con tapn de lana de vidrio. Se
realizaron varios lavados con 3 mezclas de solventes distintas y as se
obtuvieron 3 soluciones para posteriormente realizar la cromatografa en capa
fina.
3. Cromatografa en capa fina: se virtieron en la placa las soluciones obtenidas (A
a D) junto con una muestra de lectina de soya y otra de aceite de pescado. La
cromatografa se desarrollo en 10 ml de cloroformo / metanol / cido actico
(65:25:10 en volumen). Al tener la corrida completa se retir la placa y se
adicion una solucin de sulfato de amonio al 20%, posteriormente se llevo a
una plancha de calentamiento para revelar la corrida.
RESULTADOS Y DISCUSIN
Peso lpidos peso crisol conlpidospeso crisol
23795,0 mg23784,6 m g
10,4 m g
Peso tubo (org): 5700,4 mg
SLN A= 16498,6 mg 16455,4 mg
43,2 m g
SLN B 10897,1mg 10893,5 mg
3,6 m g
SLN C 10749,5 mg 10727,8 mg
21,7 m g
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