VISIN GLOBAL DE LA

CLULA E
INVESTIGACIN
CELULAR
Dr. Joaqun Daz Brito, Ph.D.

SUMARIO
ORIGEN Y EVOLUCIN DE LAS CLULAS
CLULAS COMO MODELOS
EXPERIMENTALES

TCNICAS E INSTRUMENTOS EN BIOLOGA

CELULAR

L
U
L
A

ORGANISMO
Es una unidad del mundo vivo, con estructuras,
funciones y desarrollo propios, que reacciona
como un todo a los cambios del medio ambiente
e intercambia sustancias y energa.

CLULA
UNIDAD BSICA DE TODOS LOS ORGANISMOS, TANTO DE
ESTRUCTURA COMO DE FUNCIN, QUE SE ENCUENTRA EN
CONTINUO MOVIMIENTO Y SUJETA A UNA INTERACCIN
CONSTANTE CON EL MEDIO AMBIENTE

UNICELULARES
ORGANISMOS
MULTICELULARES

Contienen muchos tipos distintos de clulas, que se

diferencian unos de otros en su tamao, forma y funcin.
Independientemente del tamao y la complejidad de un
organismo, cada una de sus clulas retiene un cierto
grado de individualidad y autonoma

Tipos de clulas

Procariotas:
Carecen de ncleo.
Presentan escasos orgnulos.

Eucariotas:

Tipo de clula que carece de envoltura

nuclear, por lo cual los componentes
nucleares se encuentran localizados en
el citoplasma

Tipo de clula que presenta envoltura

nuclear. Presenta numerosas estructuras
en el citoplasma.

Presentan ncleo.
Presentan gran variedad de orgnulos citoplasmticos.

EVOLUCIN DE LAS CLULAS

Todos los organismos presentes hoy da en la
biosfera han evolucionado a partir de progenitores
ancestrales unicelulares.
Dos grandes grupos de procariotas existentes hoy
en da evolucionaron a partir de estas formas
iniciales: ARQUEOBACTERIAS y EUBACTERIAS.

El registro fsil empieza a mostrar evidencias de

organismos mayores y ms complejos hace
aproximadamente 1.500 millones de aos,
probablemente las primeras clulas eucariticas.

MOMENTOS PRINCIPALES EN LA
EVOLUCIN DE LA VIDA EN LA TIERRA

ALGUNAS CLULAS EUCARITICAS PRIMITIVAS

DIERON LUGAR A DIVERSOS PROTISTAS
Despus de la aparicin de las primeras clulas eucariticas, la
evolucin condujo a la formacin de una tremenda diversidad de
organismos unicelulares (PROTISTAS).
Algunos posean cloroplastos y eran parecidos a los modernos
protistas fotosintticos como Euglena y Chlamydomonas.
Otros protistas no fotosintticos eran ms parecidos a Paramecium o
Dictyostelium.
Los eucariotas unicelulares son muy abundantes, y las clulas de
todos los hongos, plantas y animales multicelulares son eucariticas.
Existen tan slo unos pocos miles de especies procariticas y en
cambio, hay millones de especies de organismos eucariticos.

REPRESENTACIN DEL MODO EN QUE LAS PLANTAS MODERNAS,

LOS ANIMALES, LOS HONGOS, LOS PROTISTAS Y LAS BACTERIAS
COMPARTEN UN PRECURSOR EVOLUTIVO COMN

ORGANISMOS VIVOS DIFERENTES COMPARTEN

CARACTERSTICAS COMUNES
Entre un majestuoso roble, un guila que
remonta el vuelo por encima de su copa,
una bacteria del suelo que crece entre sus
races y los seres humanos parece en
principio que debe haber muy pocas cosas
en comn .
Sin embargo, comparten las mismas
unidades estructurales bsicas o sea LAS
CLULAS, y los mismos tipos de
MACROMOLCULAS compuestas por los
mismos tipos de subunidades monomricas.
Adems tienen
evolutivos.

los

mismos

ancestros

UTILIDAD DE LAS CLULAS

Las clulas se consideran excelentes modelos
experimentales para los estudios morfo funcionales.
Todas las clulas vivas comparten ciertas similitudes
fundamentales a causa de haber evolucionado a partir de los
mismos progenitores.
Un cuidadoso anlisis bioqumico de un pequeo nmero de
clulas, independientemente de sus diferencias en detalles
bioqumicos y de variedad de sus apariencias superficiales,
debera permitir deducir principios generales aplicables a
todas las clulas y organismos.
Los conocimientos adquiridos en el campo de la biologa en
los ltimos 150 aos han confirmado una y otra vez estas
proposiciones.

CLULAS COMO MODELO EXPERIMENTAL

Ciertas clulas, tejidos y organismos han sido de mayor
utilidad que otros en estudios experimentales.

Un cultivo masivo de clulas bacterianas o protistas (E. coli,

Saccharomyces o Chlamydomonas), todas ellas derivadas de la
misma clula progenitora por divisin, rene todos los requisitos
que debe cumplir una fuente de material rica y homognea.

La simplicidad de una estructura o funcin hace que una clula en

ocasiones resulte atractiva como sistema experimental. Por
ejemplo: el eritrocito maduro ha sido la clula favorita para estudios
sobre la estructura y funcin de la membrana plasmtica.

DIMENSIONES CELULARES
Las clulas son de tamao microscpico.
El dimetro tpico de las clulas animales y
vegetales es de unos 10 a 30 m.

Muchas bacterias tienen una longitud de tan slo

1 a 2 m.
Existen algunas excepciones interesantes a la
idea general de que las clulas deben ser
pequeas. El alga gigante Nitella tiene clulas que
miden varios centmetros.

TCNICAS E INSTRUMENTOS EN BIOLOGA

CELULAR
MICROSCOPA
PTICA
MICROSCOPA
ELECTRNICA
FRACCIONAMIENTO
SUBCELULAR

MICROSCOPIO PTICO

MICROSCOPIO
ELECTRNICO

ULTRACENTRIFUGA

MICROSCOPA
Microscopa es el conjunto de tcnicas y mtodos
destinados a hacer visible los objetos de estudio que
por su pequeez estn fuera del rango de resolucin del
ojo normal.
Por lo general el poder resolutivo del ojo humano es de
0.2mm (200 m), o sea la menor distancia vista o
resuelta por el ojo humano es de dos lneas separadas
1mm de distancia; si hay dos lneas a 200 m de
distancia, veremos una sola lnea.
Los microscopios se utilizan para mejorar la resolucin.
Las clulas son las unidades bsicas de los seres
vivos, y la mayora de ellas son de pequeo tamao por
lo que es indispensable el uso de instrumentos como
los microscopios para su visualizacin.

La invencin del microscopio en el siglo

XVII
El desarrollo de este aparato suele asociarse con los
trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Los microscopios de
Leeuwenhoek constaban de una nica lente pequea y
convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo
para sujetar el material que se iba a examinar.
El primer microscopio compuesto fue desarrollado por
Robert Hooke. A partir de ste, los avances tecnolgicos
permitieron llegar a los modernos microscopios de
nuestro tiempo, los que existen de varios tipos y son
usados con diferentes fines. Hooke, utiliza un
microscopio compuesto para estudiar cortes de corcho y
describe los pequeos poros en forma de caja a los que
l llam "clulas".

MICROSCOPIO PTICO
LENTES DE LA
ILUMINACIN

OCULAR
OBJETIVO

SUJECIN
DEL OBJETO

PORTADOR DEL
OBJETO
ESPEJO DE LA
ILUMINACIN

Este instrumento ha sido de gran utilidad, sobre todo en los

campos de la ciencia en donde la estructura y la
organizacin microscpica es importante, incorporndose
con xito a investigaciones dentro del rea de la qumica (en
el estudio de cristales), la fsica (en la investigacin de las
propiedades fsicas de los materiales), la geologa (en el
anlisis de la composicin mineralgica y textural de las
rocas) y, por supuesto, en el campo de la biologa (en el
estudio de estructuras microscpicas de la materia viva),
por citar algunas disciplinas de la ciencia.
Hasta ahora se da uso en el laboratorio de HISTOLOGA y
ANATOMA PATOLGICA, donde la microscopa permite
determinadas aplicaciones diagnsticas, entre ellas el
diagnstico de certeza del CNCER, numerosas estructuras
cristalinas, pigmentos, lpidos, protenas, depsitos seos y
depsitos de amiloide, entre otros.

Si bien el microscopio es el elemento central de la

microscopa, el uso de este requiere, para producir las
imgenes adecuadas, de todo un conjunto de mtodos
y tcnicas afines pero extrnsecas al aparato. Algunas
de ellas son, tcnicas de preparacin y manejo de los
objetos de estudio, tcnicas de salida, procesamiento,
interpretacin y registro de imgenes, entre otras.

Un microscopio con iluminacin por lmpara de

mercurio para microscopa de fluorescencia, con
cmara digital acoplada y conectado a un ordenador.

TIPOS DE MICROSCOPA PTICA

MICROSCOPA DE CAMPO BRILLANTE
MICROSCOPA DE CAMPO OSCURO

MICROSCOPA
PTICA NORMAL

MICROSCOPA DE
FLUORESCENCIA
MICROSCOPA
CONFOCAL

MICROSCOPA EN CONTRASTE DE FASE

MICROSCOPA DIFERENCIAL DE
CONTRASTE DE INTERFERENCIA (DIC)

MARCAJES CON MLTIPLES

FLUORFOROS
RECUPERACIN DE LA FLUORESCENCIA
DESPUS DEL PHOTOBLEANCHING
TRANSFERENCIA DE ENERGA DE
RESONANCIA FLUORESCENTE (FRET)

Clula de Pisum,
coloracin:
safranina-fastgreen

Imagen en contraste
de fase de un
cultivo de clulas
epiteliales (20X)

Microscopa diferencial de
contraste de interferencia
(DIC)
Clulas epiteliales 200X

Clulas epiteliales , triple coloracin: ncleo

(azul), microtubulos (verdes), actina (rojo). 200X
(izq.) y 1000X (der.).

MICROSCOPA ELECTRNICA
La potencia amplificadora de un microscopio ptico est
limitada por la longitud de onda de la luz visible. El
microscopio electrnico utiliza electrones para iluminar
un objeto. Dado que los electrones tienen una longitud
de onda mucho menor que la de la luz pueden mostrar
estructuras mucho ms pequeas. La longitud de onda
ms corta de la luz visible es de alrededor de 4.000 (1
es 1 X 10 -10 m). La longitud de onda de los electrones
que se utilizan en los microscopios electrnicos es de
alrededor de 0,5 .

MICROSCOPIO ELECTRNICO
Todos los microscopios electrnicos cuentan con varios
elementos bsicos. Disponen de un can de electrones
que emite los electrones que chocan contra el
espcimen, creando una imagen aumentada. Se utilizan
lentes magnticas para crear campos que dirigen y
enfocan el haz de electrones, ya que las lentes
convencionales utilizadas en los microscopios pticos
no funcionan con los electrones. El sistema de vaco es
una parte relevante del microscopio electrnico. Los
electrones pueden ser desviados por las molculas del
aire, de forma que tiene que hacerse un vaco casi total
en el interior de un microscopio de estas caractersticas.
Por ltimo, todos los microscopios electrnicos cuentan
con un sistema que registra o muestra la imagen que
producen los electrones.

TIPOS BSICOS DE
MICROSCOPIOS ELECTRNICOS
Microscopio electrnico de transmisin (MET)
PERMITE LA OBSERVACIN DE MUESTRA EN CORTES ULTRAFINOS
PUEDEN AUMENTAR UN OBJETO HASTA UN MILLN DE VECES

Microscopio electrnico de barrido (MEB)

CREA UNA IMAGEN AMPLIADA DE LA SUPERFICIE DE UN OBJETO
PUEDEN AMPLIAR LOS OBJETOS 200.000 VECES O MS
PRODUCE IMGENES TRIDIMENSIONALES REALISTAS DE LA
SUPERFICIE DEL OBJETO

MICROSCOPIO
ELECTRNICO
DE
TRANSMISIN
(MET)

Mitocondria

MET 60.000X

MICROSCOPIO
ELECTRNICO
DE BARRIDO
(MEB)

MICROSCOPA ELECTRNICA DE
BARRIDO (MEB)

Glbulo rojo

Glbulo blanco

CLULA CORTADA TRANSVERSALMENTE

OBSERVADA AL MEB

REL: retculo endoplasmtico rugoso

ILUSTRACIN ESQUEMTICA DE LOS DOS

TIPOS DE CLULAS EUCARITICAS

ANIMAL

VEGETAL

FRACCIONAMIENTO CELULAR
El desarrollo de mtodos de fraccionamiento celular
constituy un importante avance en el estudio
bioqumico de las clulas.
En un experimento tpico, las clulas o tejidos se
rompen mediante homogeneizacin suave en un medio
isotnico (generalmente solucin de sacarosa 0.2
mol/l). Este tratamiento rompe la membrana plasmtica
pero deja intactos la mayora de los orgnulos.
Los orgnulos difieren en tamao y por tanto
sedimentan a diferentes velocidades
durante la
centrifugacin. Como tambin difieren en densidad
especfica, pueden flotar a diferentes niveles en un
gradiente de densidad.

 Las clulas de un organismo determinan las

caractersticas morfofuncionales del mismo.

Las clulas se originan a partir de otras clulas y

la continuidad se mantiene a travs de la
informacin contenida en el material gentico
celular.