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MICROBIOLOGA DE LOS
UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUZ GALLO
ALIMENTOS
I
LAMBAYEQUE
Facultad de Ciencias Biolgicas
PRACTICA N 08
NUMERACIN, AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE
Staphylococcus aureus
DOCENTE:
Dra. Graciela
Albino Cornejo
ALUMNO:
Tarrillo Dvila,
Miguel ngel
cuando
en
los
mismos
se
multiplica
ciertas
cepas
de
en los agentes selectivos que contienen entre los que destacan el selenito
potsico, el cloruro de litio, azida sdica y lisina y Polimixina B; aunque tambin
se utilizan concentraciones elevadas de NaCl.
Los fundamentos para realizar el recuento de S. aureus en los alimentos son:
Analisis de alimentos sospechosos de haber producido intoxicacin
alimentaria por presencia de S. aureuscoagulasa positiva.
El riesgo en que el alimento sospechoso puede producir intoxicacin
alimentaria se mantiene por condiciones que permitan la produccin y
formacin de toxinas.
Para demostrar que ha tenido lugar una contaminacin peligrosa
posterior a la elaboracin de alimentos.
OBJETIVOS
en muestras de queso.
Realizar el recuento de colonias de Staphyloccus aureus.
Confirmar la presencia y determinar la calidad higinica del
alimento.
MARCO TEORICO
Staphylococcus aureus es un buen indicador de los mtodos de limpieza
y desinfeccin utilizados en las industrias y su presencia en alimentos
no es adecuado y su presencia puede implicar intoxicacin alimentaria
aunque es necesaria la demostracin de la enterotoxina.
Los medios a base de yema de huevo S. aureus utiliza la Lipovitelina,
manifestando la aparicin de zonas aclaradas parcialmente de un polvo
blanco que procede de la formacin de sales de calcio y magnesio,
adems de los cidos grasos liberados.
Prueba de coagulasa:
MATERIALES
Muestra: Queso.
Materiales de laboratorio:
Frasco papilla estril
Gradilla
Mechero
Tubos de dilucin
Placas
Medios de cultivo:
Agar Baird Parker
Agar Vogel-Johnson
Agar yema de huevo azida
Agar DNasa.
Caldo triptosa
Diluyente: Agua peptonada
Huevo crudo
PROCEDIMIENTO
1. Diluciones
Pesar 3 gr de la muestra (queso fresco) y agregar 27 mL del diluyente
(agua peptonada + 2% de citrato de sodio) y homogenizar. Esta ser la
dilucin 10-1. Diluir hasta 10-3.
2. Siembra
Con ayuda de una esptula de Drigalsky, sembrar en superficie en
Agar Baird Parker 0.1 mL (2 placas porcada dilucin).
RESULTADOS
Siembra por superficie en Agar Baird Parker
Tincin Gram
CONCLUSIONES
fresco.
Se concluy que el alimento es de buena calidad higinica, por
que se el alimento es apto para el consumo humano.
CUESTIONARIO
1. Cul es el fundamento de la Prueba de Termonucleasa?
La deteccin de la desoxirribonucleasa termoestable estafiloccica
(termonucleasa) en los alimentos, se utiliza como una prueba indirecta de la
presencia de grandes cantidades de Staphylococcusaureus en los
alimentos, as como de la posible formacin de enterotoxina estafiloccica.
La produccin de esta enzima se inhibe en anaerobiosis y se estimula por la
presencia de oxgeno, requiere iones calcio para su actividad enzimtica,
posee un pH ptimo de 8,6 y se precipita de cultivos fluidos con sulfato de
amonio. Su termoestabilidad (resiste temperatura de 130 C por 16,6 min.)
es la nica asociacin con el crecimiento de S.aureus. Esta relacin ha
motivado el desarrollo de diferentes mtodos para detectar esta enzima en
el alimento y utilizarla como pesquisaje en los alimentos susceptibles a la
contaminacin de S. aureus. El azul de toluidina (0.1 M) presente en el
medio vira a rosa por accin del pH formado por la enzima endonucleasas.
2. Fundamento de la Prueba de Coagulasa.
La cual es una enzima producida por la mayora de los Staphylococcus
presentes en infecciones producidas por este microorganismo, esta enzima
es termoestable y se presenta como cierto nmero de determinantes
antignicos, varios de los cuales pueden ser producidos por una misma
cepa staphylococica.
Staphylococcus aureus posee dos tipos de coagulasa:
a) Una endocoagulasa o coagulasa ligada o "clumping factor" que est
unida a la pared celular. Esta acta directamente sobre el fibringeno
y es
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Koneman
Diagnstico
Microbiolgico
6ta
Edicion
Paranmerica.
REFERENCIAS LINKOGRAFICAS
http://www.britanialab.com/productos/253_hoja_tecnica_es.pdf
http://www.minag.gob.pe/portal/download/pdf/prepublicaciones/2013/reg-leche-prod-lacteos.pdf
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U3c_PruebasBioquimi
cas_17461.PDF