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- RESPUESTA INMUNE ADAPTATIVA

1.2.1 Ontogenia de los linfocitos B

Los linfocitos B derivan de una clula germinal linfoide pluripotente y adquieren su
competencia inmunolgica en la mdula sea. Presentan en la membrana unas
molculas de carcter proteico, responsables del reconocimiento antignico
caracterstico de la inmunidad especfica y que se denominan receptores del
antgeno. Este tipo de molculas pueden ser de dos tipos, inmunoglobulinas (Igs)
y receptores de la clula T (RCT) que definen los subtipos celulares linfoides, B y
T, respectivamente. Estas molculas actan como receptores especficos de los
diferentes antgenos que circulan por el organismo y, aunque todas las clulas
humanas tienen la dotacin gentica necesaria para la sntesis de tales protenas,
sta solo se expresa en las clulas linfoides. Son siete los genes que codifican la
informacin necesaria para sintetizar estas molculas, localizados en diferentes
loci cromosmicos. En estos genes se pueden distinguir varias regiones genticas,
denominadas V (variable), D (diversidad), J (unin) y C (constante), constituidas a
su vez por segmentos genmicos que son responsables de la sntesis de cada
una de las partes proteicas de las molculas receptoras.
La gran diversidad proteica se genera con estos siete genes, gracias a que cada
linfocito B y T reordena sus segmentos genticos de una manera nica y diferente
a la de los dems. La probabilidad de que dos clulas lleven a cabo el mismo
reordenamiento es prcticamente nula, y por lo tanto supone una base terica muy
fiable para poder distinguir unos linfocitos de otros. En todas las neoplasias
linfoides, las clulas tienen el mismo patrn de reordenamiento de alguno o varios
de los genes de los receptores antignicos, constituyendo lo que se denomina una
poblacin clonal.
La ontogenia de las clulas B se puede dividir en dos grandes fases:
Fase independiente de antgeno: ocurre en la mdula sea (rgano linfoide
central o primario) y concluye con la salida de la mdula del linfocito B maduro
virgen e inmunocompetente.
Fase dependiente de antgeno: ocurre en los rganos linfoides secundarios o
perifricos, y que conduce a la diferenciacin del linfocito B en dos subclones
hermanos: uno de clulas plasmticas secretoras de Ac y otro de linfocitos B
cebados de memoria.

1.2.1.1 Fase independiente de antgeno

Las clulas B maduran mayoritariamente en la medula sea. El desarrollo de los

linfocitos B depende de la presencia de clulas estromales que actan, no slo
como una red de sostn necesaria para que los linfocitos B continen su
desarrollo, sino tambin como fuente de factores de crecimiento crticos que
estimulan la diferenciacin y proliferacin.
En el primer estadio de diferenciacin, conocido con el nombre de estadio pro-B,
los linfocitos poseen una capacidad limitada de auto-renovacin. Durante este
estadio es que se produce el rearreglo de la cadena H de las Ig, el cual se lleva a
cabo en dos etapas: primero se asocian los fragmentos DH-JH (pro-B temprano) y
luego se une el fragmento VH al DHJH previamente rearreglado (pro-B tardo). Tal
como se observa en la Figura 5, la asociacin DH-JH se produce en ambos
cromosomas. Por el contrario, la unin del fragmento VH al DHJH se intentar
primeramente en un cromosoma y en caso de no ser exitoso, se intentar
rearreglar el segundo cromosoma. Este fenmeno se conoce con el nombre de
exclusin allica y garantiza que slo se exprese la cadena H de uno de los dos
alelos del genoma.

La ausencia de rearreglos exitosos de la cadena H lleva a la apoptosis del linfocito

B. El rearreglo productivo de la porcin VH permite la expresin en la membrana
de una cadena pesada m (Hm) asociada con dos protenas producidas por el
linfocito que estn unidas en forma no covalente constituyendo una cadena liviana
sustituta (Ls). El ensamblado de la cadena H rearreglada a la cadena Ls y su
asociacin al heterodmero IgaIgb en la membrana del linfocito constituye el preBCR.
La presencia del pre-BCR en la membrana caracteriza el siguiente estadio de
maduracin denominado pre-B, en donde los linfocitos finalizan con los rearreglos
de la cadena H, realizan varios ciclos de proliferacin y comienzan posteriormente
a rearreglar la cadena L. De esta manera, cada una de las clulas hijas de la
progenie que poseen genes de cadena H ya rearreglados recombinan en forma
independiente los fragmentos de la porcin variable de la cadena L, aumentando
nuevamente la diversidad. Para que todo esto sea posible, se necesita la
transduccin de seales de sobrevida del pre-BCR.
Una vez que los genes de la cadena L son rearreglados exitosamente, la cadena L
comienza a sintetizarse y se combina con la cadena Hm a fin de formar la
molcula de IgM. Dicha molcula se expresar en la membrana junto con el
heterodmero Iga-Igb constituyendo el BCR de clase IgM caracterstico del estadio
B inmaduro.
En las etapas de maduracin de los linfocitos B que hemos visto hasta el momento
lo crucial es generar rearreglos productivos de los genes de cadena H y L que
permitan la expresin de una molcula de Ig en la membrana. Aquellas clulas
que logran generar su receptor antignico y expresarlo pueden avanzar a la
siguiente etapa de maduracin, en donde los mecanismos de control cambian el
foco de atencin hacia la especificidad del BCR. Es decir que, una vez que el
linfocito alcanza el estadio B inmaduro y expresa el BCR en la membrana , dicho
receptor ser evaluado en funcin de su capacidad de reconocer antgenos
presentes en el ambiente del rgano linftico primario. La finalidad de esta
"evaluacin" es controlar a aquellos linfocitos cuyos BCR pueden reconocer
molculas propias, los cuales seran potencialmente peligrosos ya que podran
generar respuestas de tipo autoinmunes. Este proceso de "evaluacin" se conoce
como induccin de tolerancia central. La especificidad y la avidez del receptor por
esos antgenos determinar el camino a seguir por el linfocito: sobrevivir y
continuar madurando, o morir por apoptosis sin alcanzar la madurez
Del total de linfocitos B inmaduros que se genera diariamente slo un pequeo
porcentaje logra salir de mdula sea y alcanzar el bazo, donde continan con su
proceso de maduracin.

Slo aquellos linfocitos B inmaduros, que sobrevivan a la induccin de tolerancia

central, saldrn de la mdula sea hacia el bazo, el rgano donde culminarn su
maduracin. En este estadio los linfocitos B, que se encuentran en la periferia en
un estado de transicin entre el estadio B inmaduro y maduro, reciben el nombre
de linfocitos B transicionales (BTr). Dentro de esta poblacin de linfocitos pueden
diferenciarse dos subpoblaciones bien definidas, BTr de tipo 1 (BTr1) o de tipo 2
(BTr2), que se encuentran en el bazo ubicadas en distintos lugares anatmicos.
Durante el estadio BTr1, los BCR de dichos linfocitos tambin son "controlados" y
sufren un proceso de seleccin negativa si reciben seales a travs de su BCR
para reconocer molculas propias. A travs de este mecanismo de induccin de
tolerancia perifrica, nos aseguramos que los linfocitos B autorreactivos que han
sobrevivido a la induccin de tolerancia central en la mdula sea no continen su
desarrollo y mueran por apoptosis en el bazo. Posteriormente, aquellos
sobrevivientes, darn lugar a los BTr2, los cuales aparentemente necesitan recibir
seales de sobrevida a travs de su BCR, an no bien definidas, para alcanzar el
estadio de B maduro.
Numerosas evidencias demostraron que es necesaria adems la presencia de
ciertos factores de sobrevida, tales como la citoquina BAFF, para la transicin de
los linfocitos BTr1 hacia el estadio BTr2 y B maduras. Una vez que los linfocitos
han alcanzado su madurez, co-expresan en su
membrana BCR de tipo IgM e IgD, sin embargo presentan una nica especificidad
dada por la porcin variable de las Igs, que es idntica. Esto se explica gracias a
que una misma porcin VH generada por recombinacin somtica puede
asociarse con los genes Cm (para dar la IgM) Cd (para dar la IgD).

1.2.1.2 Fase dependiente de antgeno:

En la periferia, el linfocito B virgen puede encontrarse o no con el antgeno para el

que son especficas sus inmunoglobulinas de membrana.
1. Si no encuentra su antgeno especfico, muere por apoptosis al cabo de unos
pocos das o semanas (menos de un mes).
2. Si entra en contacto con su antgeno especfico, se convierte en linfocito B
activado que se expande clonalmente y se diferencia en dos subclones:
Clulas plasmticas secretoras de anticuerpos: El linfocito B pierde su mIgD y
experimenta un cambio de clase por un mecanismo de splicing diferencial.
Adems, aumenta mucho la tasa de transcripcin de los genes reordenados, por
lo que se producen y secretan grandes cantidades de Ac con la misma
especificidad que las mIg del linfocito B progenitor. Las clulas plasmticas son
clulas a trmino que ya no se diferencian ms, y mueren por apoptosis al cabo de
unos das.

 Clulas B cebadas de memoria: Las clulas B de memoria que quedan en los

centros germinales de los rganos linfoides secundarios sufren hipermutacin
somtica, por lo que va madurando la afinidad de sus mIg. Tienen vida larga (de
meses a muchos aos) que esta en funcin de su mIgD: las cadenas pesadas
delta parecen regular la persistencia de clulas B maduras de memoria en la
periferia.

1.2.2 Activacin de los linfocitos B y produccin de inmunoglobulinas

Una vez que el complemento BCR se une a un Ag una molcula anexa , la CD45
que es una fosfatasa, remueve el grupo fosfato de las molculas que estn en el
citoplasma , Fyn,Lyn y BLk,que en conjunto se conocen como kinasas Src,lo cual
les permite fosforilar porciones intracitoplasmticas de las cadenas Ig Ig
conocidas como ITAMs. En esta forma se inician varias vas de sealizacin, una
de las cuales a travs de las molculas RAS culmina con la generacin de
molculas MAPK (mitogen activated protein kinasas) que genera factores de
transduccin que al ingresar al ncleo regulan la expresin de varios genes. Por ot
En la membrana del linfocito B se expresa igualmente molculas CD19 Y CD21,
que sirven de receptores a factores del complemento, y que al activarse ejercen
una accin de refuerzo a la activacin iniciada por el complemento BCR-Ag

Por estas diferentes vas se logra la generacin de citoquinas y de Acs

Hay otra molecula en la membrana del LB, la CD22, que se activa cuando los
niveles de Acs llegan a los niveles deseados , y al hacerlo enva seales de freno
a la produccin de Acs para evitar que la respuesta inmune humoral se prolonge
indefinidamente

Los linfocitos B utilizan para su activacin sus inmunoglobulinas de membrana

(mIgs), de tal manera que cuando a ellas se unen los Ags, se inicia el proceso de

activacin de estos linfocitos. Posteriormente proliferan y

diferencian a clulas plasmticas, productoras de
anticuerpos y clulas memoria

La activacin de los linfocitos B se da por dos

mecanismos :

1.2.2.1 R I. Humoral frente a antgenos t-dependientes

Requiere linfocitos T colaboradores o helper (Th) activados. Los linfocitos B
pueden reconocer al Ag en su forma nativa y pueden actuar como CPA: al
contactar con Ag complejos T-dependientes (normalmente proteicos), los
incorporan por endocitosis y los degradan a pptidos
(procesamiento de Ag), que se unen a molculas CMH-II y los presenta al linfocito
Th activado (presentacin de Ag). A diferencia del LB, el linfocito TH slo reconoce
Ag procesados por una CPA y unido a molculas CMH-II. La interrelacin CPA-AgCMH-II con el TCR del linfocito T produce la activacin del linfocito Th a travs de
citoquinas (IL-1). El linfocito Th activado secreta otras citoquinas

1.2.2.2 R.
humoral
a antgenos t-independientes:

I.
frente

No requiere la cooperacin de linfocitos Th. Algunos Ag (habitualmente no

proteicos) son capaces de estimular la produccin de IgM por parte de los LB sin
necesidad de la cooperacin de los linfocitos Th. Los linfocitos B pueden
reconocer Ag polimricos con epitopos repetitivos (ej. LPS y polisacridos). A altas
concentraciones, interaccionan con molculas del linfocito B diferentes a la Ig del
BCR
Si bien a la mayora de los Ag a los que nos vemos sometidos son Ag proteicos,
existe otro tipo que pueden ser: polisacridos, glucopeptidos y cidos nucleicos.
Estos Ag no son internalizados, si no que ejercen su accin por sealizaciones
intracelulares producidas por el receptor del Linfocito B. Generalmente la
respuesta producida por este tipo de Ag, se compone de Ac de escasa afinidad y
un repertorio de clulas de memoria bajo. La importancia practica de este tipo de
reaccin, es que muchos Ag de las paredes bacterianas son polisacridos y este
es el mecanismo principal de la activacin de los Linfocitos B en la inmunidad
frente a las infecciones bacterianas

1.2.3 Mecanismos efectores de los anticuerpos

1.2.3.1 Neutralizacin de microorganismos y toxinas.

Los anticuerpos inhiben la infectividad de los microorganismos y asi su capacidad

de producir daos. Muchos microorganismos poseen molculas que interactan
con protenas de superficie de la clula husped, y de esta manera pueden
ingresar al citosol. Los anticuerpos pueden unirse a estas estructuras bacterianas
e impedir as su ingreso. Algo similar ocurre con las toxinas que daan a los
tejidos. Estas deben actuar con un receptor para ejercer su efecto, pero las
inmunoglobulinas impiden esta interaccin, dejndolas sin efecto
1.2.3.2 Opsonizacin y fagocitosis mediada por anticuerpos.
Los anticuerpos del tipo IgG, sobre todo las subclases IgG1 e IgG3, son capaces
de recubrir a los microorganismos y actuar como opsoninas, ya que promueven la
fagocitosis de estos. Muchos de los fogocitos poseen receptores para los
fragmentos Fc de los anticuerpos, de estos, el ms importante es el receptor Fc
(Subtipo FcRI), capas de reconocer a la porcin Fc de las IgG. Este receptor
tiene mayor afinidad por las Ig que se encuentran recubriendo a un
microorganismo, que a las Ig libres. Una vez que el receptor Fc reconoce a
Ligando, se inicia el proceso de fagocitosis.
Las clulas NK, tambin poseen receptores Fc (Subtipo FcRIII), que, si bien
tienen menor afinidad que los receptores Fc de los fagocitos, pueden activarse
frente a los microorganismos recubiertos de anticuerpos. Este es un ejemplo del
proceso denominado Citotoxicidad dependiente de anticuerpos (ADCC). Otro tipo
celular que desarrollan un tipo especial de ADCC son los eosinofilos, estos
reaccionan frente a los helmintos recubiertos de IgE. Los eosinofilos poseen
receptores Fc para la IgE denominados FcRI, que al interactuar con su ligando,
lleva a la liberacin de los grnulos intracelulares. Este sistema es de gran
importancia, ya que los helmintos no pueden ser fagocitados, y los eosinofilos
contienen en sus grnulos protenas que destruyen a estos parsitos

1.2.3.3 Activacin del complemento.

Los anticuerpos son capaces de e activar al complemento por la va clsica

1.2.3.4 Mecanismos efectores del sistema del complemento

Citolisis mediada por el complemento.
El producto final de las reacciones entre las protenas del complemento es la
formacin del MAC (complejo de ataque a membrana). Esta estructura forma
pequeos poros en la membrana, que origina el libre movimiento de agua y
solutos entre el espacio extracelular y el intracelular, conduciendo al
microorganismo a una muerte osmtica.
Opsonizacin y fagocitosis.
Durante la cascada de proteolisis de los componentes del complemento, se
generan pequeos pptido con funcin de opsoninas, capaces de recubrir la
superficie de los microorganismos e inducir su fagocitosis. Las opsoninas mas
potentes del complemento son el fragmento C3b (producido por ambas vas de
activacin) y C4b (producido solo por la via alterna). Dichos fragmentos son
reconocidos por los Receptores tipo 1 del complemento (CR1), ubicados en la
superficie de los fagocitos.
Estimulacin de la respuesta inflamatoria.
Otros fragmentos originados por las reacciones proteolticas, son inductores de la
respuesta inflamatoria aguda, debido a su capacidad de estimular la activacin de
los mastocitos y neutrofilos. El fragmento mas potente de todos es el C5a, este
interacta con su receptor (el cual pertenece a la familia de receptores de siete
hlices ) ubicado en la membrana de estas clulas. El fragmento C3a posee una
actividad 20 veces menor, y el fragmento C4a unas 2500 veces menor aun.

1.3.1 Ontogenia de los linfocitos T

La diferenciacin se acompaa de cambios en los marcadores de superficie
Los progenitores de la celula T que llegan de la medula osea ingresan en el timo a
travs de vnulas que se encuentran en la unin corticomedular.
Estos timocitos tempranos carecen de correceptores CD4 y CD8 y pr
consiguiente , se denominan clulas doble negativas (DN) . Sin embargo expresan
el receptor de quimiocina CCR7 y , por la influencia de quimiocinas como CCL19 y
CCL21, migran a travs de la corteza del timo hacia la zona subcapsular externa.
Las mas tempranas de estas clulas progenitoras , las clulas DN1, mantienen la
pluripotencialidad, expresan todava al marcador de la celula madre CD34 , y
tambin expresan niveles elevados de la molecula de adhesin CD44 y el receptor
para el factor de la celula madre stem cell
Cuando maduran en celula DN2, pierden la expresin de CD34 y comienzan a
expresar la cadena para el receptor de IL-2(CD25) . Estas clulas estn
restringidas a la prduccion de clulas T y clulas dendrticas linfoides . El
desarrollo de la celula T se haya intensamente alterado en los ratones obtenidos

por desactivacin gnica ,Notch -1 la sealizacin Notch -1 es necesaria para la

asignacin de linaje de las clulas TDN1 y DN2. En efecto , los ligandos Notch -1
con los nombres bastante exticos de Jagged-1, Jagged-2 y -tipo 1 se expresan
en la celula del epitelio timico de una manera altamente regulada. La
diferenciacin ulterior en clulas DN3 y la regulacin negativa de la expresin de
CCR7 acompaan su arribo a la zona subcapsular . La expresin transitoria de los
genes activadores de la recombinasa RAG-1 y RAG-2 junto con un aumento en la
accesibilidad de la cromatina alrededor de un alelo de los genes de la cadena
del TCR, producen el reordenamiento de esta y la asignacin al linaje de las
clulas T. La expresin de los CD3, el complejo de la seal de transduccin
invariable del TCR, tiene lugar en este estadio, mientras se pierden CD44. La
perdida ulterior de CD25 significa el paso a la poblacin DN4 que con
posterioridad se diferencia en timocitos doble positivos (DP) CD4 .(el marcador
para las molculas de reconocimiento de clase II del CMH ) y CD8 (molecula de
reconocimiento de clase I ). El reordenamiento del gen de la cadena del TCR
ocurre cuando RAG-1 y RAG-2 se expresan transitoriamente de nuevo en
cualquiera de las clulas DN4 o inmediatamente despus de la expresin de CD4
y CD8 . Los timocitos DP comienzan a expresr otra vez cantidades elevadas de
CCR7 y determinan que migren a travs de la corteza, atraviesen la unin
corticomedular y lleguen a la medula. Los marcadores CD4 y CD8 se segregan en
forma paralela a la diferenciacin en poblaciones inmunocompetentes separadas
de precursores de clulas T simple positivas (SP) CD4 (en su mayora T helpers) y
precursores de clulas TCD8 (principalmente citotoxicas)

1.3.1.1 La activacin de las clulas T requieren dos seales

La estimulacin del TCR por el CMH-peptido (que puede ser imitada por
anticuerpos dirigidos contra el TCR o el complejo CD3 ) no es suficiente por si
misma para activar a las clulas T helper en reposo. Sin embargo, con el agregado
de interleucina 1 (IL-1) se induce el RNA y la sntesis de protenas , la celula
aumenta de tamao con un aspecto similar a los blastos , comienza la sntesis de
interleucinal 2 (IL-2) y aquella pasa de fase G0 a G1 del ciclo de divisin celular .
Por lo tanto, para la activacin de una celula T en reposo se requieren dos
seales.
El antgeno asociado con las molculas de clase II del CMH en la superficie de las
CPA claramente es capaz de cumplir estos requisitos. La formacin de un
complejo entre el TCR y el CMH- pptido proporciona seales 1, a travs del
complejo receptor-CD3, y esto se refuerza en gran medida por el acoplamiento de
CD4 con el CMH . La celula T ahora queda expuesta a una seal coestimuladora
(seal -2) de la CPA . Aunque esta podra ser la IL-1 parecera que el
coestimulador mas poderoso es B7 en la CPA qu interactua con CD28 en la
clula T . As , la activacin de las clulas T en reposo pueden ser bloqueadas por
anticuerpos anti-B7 de manera sorprendente , esto torna a la clula T anergica , es
decir no reactiva a cualquier estimulacin nueva por el antgeno. El principio de
que dos seales activan pero una puede inducir anergia en una celula especifica
para el antgeno brinda un mecanismo posible para el tratamiento inmunosupresor
dirigido .
Sin embargo, a diferencia de los linfocitos T en reposo las clulas T activadas
proliferan en respuesta a una nica seal .
Las molculas de adhesin como ICAM-1 , VCAM-1 y LFA-3 no son por si mismas
coestimuladoras , sino que aumentan el efecto de otras seales , una diferencia
importante. Los acontecimientos de sealizacin tempranos comprenden la
agregacin de balsas lipdicas , compuesto por subdominios de membrana con
alto contenido de colesterol y glucoesfingolpidos . Las molculas de las
membranas celular que intervienen en la activacin se concentran dentro de estas
estructuras

1.3.3 Mecanismos efectores de la inmunidad celular

Linfocitos T Helper (TH1 y TH2). La principal funcin de las clulas T CD4+, es
como su nombre lo indica colaborar en la activacin y actividad de otros tipos

celulares mediante la secrecin de diversas citoquinas, que adems participan en

el desarrollo de cada subespecie. Los linfocitos TH1 secretan principalmente INF,
citoquina importante en la activacin de macrfagos. Esta citoquina tambin
estimula la diferenciacin de CD4+ naive, a Linfocitos TH1, mientras que inhibe la
diferenciacin a TH2. A su vez, los TH2, secretan en primer lugar IL-4, IL-5 e IL-13,
cuya principal funcin es la maduracin y activacin de mastocitos y eosinofilos,
mientras que inhibe la activacin de los macrfago. Adems estimula la
diferenciacin celular de los CD4+ naive, a Linfocitos TH2 e inhiben la
diferenciacin hacia TH1. Se puede apreciar que los efectos de las citoquinas
secretadas por cada subespecie, antagoniza las funciones de la otra, este sistema
busca que la respuesta iniciada por un antgeno especifico solo se desarrolle en el
sentido mas apropiado para su eliminacin. La principal funcin de los TH1 es
participar en la defensa mediada por fagocitos, es decir, frente a microorganismos
que hayan podido ser fagocitados, esto se logra a travs de los siguientes
eventos: Luego de haber llegado al sitio de la infeccin los TH1 actan en conjunto
con los CD8+ estimulando la migracin de los monocitos de la sangre hacia ellos,
una vez realizado esto, se lleva adelante la interaccin entre macrfagos y TH1 en
la cual ambos generan estmulos para su expansin, el macrfago estimula al TH1
secretando IL-12 y este, en respuesta, secreta INF para activarlo. El macrfago
activado, mejora su capacidad fagoctica, aumenta la secrecin de citoquinas y la
expresin de molculas del MHC II junto con sus coestimuladores. En tanto los
TH2 son los responsables de la defensa frente a helmintos artrpodos y
reacciones alrgicas, debido a que sus citoquinas activan a esosinofilos y
mastociots, a su vez, la IL-4, IL-5 e IL-13 tambin estimulan la produccin de IgE
por las clulas plasmticas. Estas dos funciones de aparente discordancia, son
complementarias, ya que los esosinofilos y mastocitos reconocen a los helmintos
que se encuentren recubiertos por IgE. Linfocitos T citolticos: Este tipo celular
recibe este nombre por su capacidad de lisar a las clulas infectadas con
microorganismos intracelulares, los cuales no pueden ser eliminados por los
fagocitos. El primer paso es reconocer a las clulas infectadas. Los CD8+
reconocen a los pptidos presentados por las molculas de clase I del MHC, las
cuales pueden ser expresadas por todos lo tipos celulares nucleados. Una vez que
el linfocito T citoltico interacta con el MHC I y sus coestimuladores, es activado y
esto lleva a la exocitosis de sus grnulos.
Los grnulos de lo CD8+ contienen las protenas Perforinas y Granzimas, cuyos
mecanismos de accin ya han sido expuestos. Los T citolticos tambin expresan
FasL, que interacta con Fas en la membrana de las clulas blanco e inducen la
apoptosis.