DISEO Y REALIZACIN DE UN ESTUDIO DE INVESTIGACIN

Dr. Juan G. Abraldes y Dr. Ramn Bataller

Servicio de Hepatologa, Unidad de Cuidados Intensivos Enfermedades Digestivas y
Metablicas, Hospital Clnic de Barcelona.
Puntos clave:
La eleccin del diseo de un estudio viene determinada por la pregunta de
investigacin.
El ensayo clnico aleatorizado es el diseo que proporciona una nivel de
eviencia cientfica ms slido, seguido de los estudios de cohortes y de los
estudios de casos y controles.
La realizacin de estudios traslacionales con muestras biolgicas de
enfermos es necesaria para identificar los mecanismos de enfermedad y
desarrollar nuevas estrategias teraputicas.
La obtencin prospectiva de muestras biolgicas de los enfermos (DNA,
suero, etc) es clave para la realizacin de estudios traslacionales.
En la actualidad existen tcnicas sofisticadas que permiten realizar estudios
de variaciones genticas, expresin gnica y/o proteica a amplia escala.
TEXTO---El objetivo de cualquier actividad de investigacin es mejorar el cuidado de los
enfermos y la efectividad de los medios diagnsticos y teraputicos. El proceso de
investigacin se inicia con la formulacin de preguntas clnicamente relevantes,
seguido por una planificacin del estudio de investigacin, de su realizacin y su
anlisis y evaluacin, as como por la integracin del nuevo conocimiento con el preexistente. Finalmente, debe traducirse la evidencia obtenida en informacin utilizable
por los profesionales sanitarios en la cabecera del enfermo.
Para lograr el objetivo, existen diferentes tipos de estudios de investigacin.
Para los profesionales sanitarios que desean realizar investigacin en Cuidados
Intensivos, hay principalmente dos tipos de estudios: estudios clnicos y estudios
traslacionales con muestras biolgicas de los enfermos. Sin embargo hay
recomendaciones comunes para ambos tipos de estudios, como un estudio previo
exhaustivo de la literatura sobre el tema a investigar, el planteamiento de una
hiptesis verosimil, el establecimiento de objetivos bien definidos, la utilizacin de
una metodologa bien diseada y la interpretacin rigurosa de los resultados.
En este captulo se repasa los conceptos ms relevantes necesarios para la
realizacin de estudios clnicos y traslacionales en enfermos crticos. Adems de
aportar informacin terica, se incluir un ejemplo prctico de un posible estudio (por
ejemplo, investigar la historia natural y los factores pronsticos del shock sptico, as
como la identificacin de nuevas dianas teraputicas).
DISEO DE UN ESTUDIO DE INVESTIGACIN CLNICA
La pregunta de investigacin

La necesidad de realizar un estudio de investigacin nace de la necesidad de

responder a una laguna de conocimiento. El elemento crtico en la elaboracin de un
proyecto de investigacin es una definicin clara de la pregunta que quiere
responder el estudio, lo que requiere un conocimiento exhaustivo del problema de
salud a investigar. El tipo de pregunta (tabla 1) es el elemento que ms debe
influencias el diseo del estudio.
La definicin de la pregunta de investigacin debe balancear la idea o ideas
del estudio con la factibilidad de su realizacin. La pregunta debe incluir los 4
componentes siguientes: enfermos, intervencin (slo para los estudios de
intervencin), el grupo de comparacin y el evento que se analiza. Un ejemplo de
pregunta de investigacin sera: en enfermos crticos ingresados en la UCI con
shock sptico, la administracin de protena C activada recombinante comparada
con la administracin de placebo reduce el riesgo de muerte hospitalaria?.
Diseos de investigacin
El diseo es el planteamiento terico que se hace de un estudio. Esta es una fase
pre-estadstica que no requiere por tanto conceptos estadsticos complejos, pero s
un conocimiento en profundidad de los diferentes tipos de diseos; lo cual es
necesario para una correcta eleccin del diseo, y para un correcto control de los
diferentes sesgos asociados a cada uno de ellos. Una clasificacin simple de los
tipos de diseos se expone en la tabla 2. Los estudios de intervencin son aquellos
en los que el investigador manipula la variable en el estudio, es decir, introduce el
factor objeto de estudio o de exposicin. El tpico ejemplo es el ensayo clnico. En
los estudios observacionales el investigador no manipula el factor o variable objeto
de exposicin, se limita a observar cmo o qu ocurre.
Estudios de intervencin.
Los estudios de intervencin son experimentales si la asignacin de la exposicin es
aleatoria, o cuasi-experimentales en el caso de que no.
- El ensayo clnico. El diseo que proporciona el nivel de evidencia ms slido es el
ensayo clnico aleatorizado. En este diseo los enfermos son asignados de forma
aleatoria a recibir la intervencin experimental o la control. De esta forma se asegura
que los enfermos de los dos grupos sean comparables. Si los factores pronsticos
de los enfermos en estudio se conociesen de forma completa, se podran emparejar
los enfermos en el grupo control y en el grupo de intervencin por otros medios. Sin
embargo la gran ventaja de la aleatorizacin es que los enfermos sern comparables
tanto en los factores pronsticos conocidos como en aquellos que sean
desconocidos, pero potencialmente importantes. De esta forma es el nico diseo en
el que se puede asumir con seguridad que al inicio del ensayo no existe un sesgo a
favor de un grupo comparado con el otro; en referencia, claro es, slo a los sesgos
de seleccin: falacia de Berkson, efecto del voluntario, sesgos de pertenencia,
procedimiento de seleccin. El desarrollo del ensayo abarca diferentes fases (tabla
3). Las fases I, II y III forman parte del desarrollo para conseguir la aprobacin por

las autoridades sanitarias. La fase IV se corresponde a ensayos con productos ya

aprobados.
En Espaa, la realizacin de ensayos clnicos se regula por el real decreto
223/2004
(http://www.agemed.es/actividad/legislacion/espana/docs/rcl_2004_3252008-1.pdf). Un aspecto importante en la realizacin de ensayos en el contexto de
una UCI es el consentimiento informado. Actualmente, la legislacin espaola
permite que un representante legal otorgue el consentimiento informado tras haber
recibido informacin completa sobre el estudio. El consentimiento informado debe
ser firmado por el enfermo en cuanto sea posible.
- Otros diseos. Otra forma de evaluar la eficacia y/o la efectividad (segn la fase
del diseo) de nuevos tratamientos son los diseos cuasi-experimentales, en los que
no hay aleatorizacin del tratamiento. Ejemplos de estos diseos son los estudios
pre-post, en los que los que se comparan los resultados antes y despus de aplicar
el tratamiento. El probema de estos estudios es que puede haber mltiples
caractersticas que hayan cambiado en los sujetos antes y despus del tratamiento.
Una extensin de este diseo son los estudios con controles histricos. En este caso
el investigador dispone de un grupo de enfermos en los que se ha aplicado un nuevo
tratamiento y lo compara con un grupo de enfermos del pasado tratados de forma
diferente. El principal problema es la comparabilidad de los enfermos y del manejo
general de los mismos en dos pocas diferentes. Los estudios realizados en la
comunidad son generalmente diseos cuasi-experimentales, en los que una o varias
comunidades reciben una intervencin mientras que otra u otras se usan como
control. Su utilidad fundamental es la evaluacin de vacunas y de otras medidas de
prevencin. En ocasiones se aleatorizan las comunidades que recibirn la
intervencin y las que no, y en este caso seran diseos verdaderamente
experimentales.
Estudios observacionales
- Estudios transversales. En este tipo de estudios los enfermos son estudiados en
un momento concreto. Carecen de seguimiento hacia delante o hacia atrs en el
tiempo, por lo que la exposicin y el efecto se valoran al mismo tiempo. Por ello, son
poco apropiados para la investigacin causal., excepto en aquellos casos de
exposiciones contstantes a lo largo del tiempo (como las variables genticas). Son
especialmente tiles para conocer la prevalencia de las enfermedades y para la
planificacin de los servicios sanitarios. Un ejemplo sera el estudio de la prevalencia
de infeccin por grmenes multiresistentes en el momento del ingreso del enfermo
crtico en la UCI.
- Estudio de cohortes. Tras el ensayo clnico el estudio de cohortes es el diseo
ms fiable en cuanto a nivel de evidencia. En este diseo se selecciona una muestra
de enfermos y se sigue para detectar el efecto en estudio. Pueden ser retrospectivos
o prospectivos. Un ejemplo de este diseo sera un estudio para determinar si en
enfermos que ingresan por sepsis grave en una UCI la presencia de un determinado
polimorfismo en el gen del TNF-alfa se asocia con un mayor riesgo de muerte
hospitalaria. La cohorte del estudio estara formada por todos los enfermos con
sepsis grave, a los que se le estudiara el polimorfismo del gen del TNF-alfa y seran

seguidos hasta ser dados de alta por buena evolucin o por fallecimiento. Los
enfermos con el polimorfismo especfico seran los expuestos, y los enfermos sin l
los no expuestos. Este diseo permitira calcular el riesgo relativo de muerte en los
expuestos en comparacin con los enfermos no expuestos. Los estudios de cohortes
son especialmente adecuados para establecer relaciones de causalidad, ya que la
exposicin ocurre y se registra antes de que ocurra el efecto.
- Estudio de casos y de controles. En los estudios de casos y controles los
enfermos son seleccionados en funcin del efecto en estudio (presente: casos;
ausente: controles). A partir de la identificacin de los casos y de los controles se
investiga las posibles diferencias en la exposicin (factor de riesgo, factor gentico)
entre ambos. La diferencia fundamental frente a los estudios de cohortes es el
sentido en que se investiga la exposicin: en los de cohortes se estudia inicialmente
la exposicin y se sigue al enfermo (hacia delante en el tiempo) para ver si
desarrolla el efecto. En el estudio de casos y controles se detecta el efecto, y se
investiga la exposicin hacia atrs en el tiempo. Al igual que los estudios de cohortes
los estudios de casos y controles pueden ser prospectivos o retrospectivos. Un
ejemplo de este diseo sera detectar a los enfermos ingresados en la UCI por
sepsis grave que desarrollan shock sptico (casos) durante un perodo de tiempo, y
seleccionar despus mediante un muestreo adecuado un grupo de controles
(enfermos ingresados con sepsis grave que no desarrollaron shock sptico). En este
diseo se investigara en ambos grupos la presencia del polimorfismo del gen del
TNF-alfa y se evaluara su asociacin con el evento. Los estudios de casos y de
controles tienen varias ventajas frente a los estudios de cohortes. Requieren menor
tiempo y coste y son especialmente adecuados para el estudio de enfermedades
raras o de enfermedades con perodos de latencia prolongada (tiempo prolongado
entre la exposicin y el inicio de la sintomatologa). Sin embargo, son ms sensibles
a los sesgos que los estudios de cohortes, y el nivel de evidencia que proporcionan
se considera menor que la de los estudios de cohortes. La informacin sobre
posibles factores de riesgo se recoge retrospectivamente y una vez ya conocida la
asignacin del enfermo (caso o control). Esto no constituye un problema si se trata
de factores objetivos e inmutables a lo largo del tiempo, como factores genticos,
pero puede haber inexactitudes si los factores que se analizan dependen de la
memoria del enfermo (sesgo de deteccin). Otro problema importante es la dificultad
de seleccionar un grupo control verdaderamente representativo (sesgo de
seleccin).
Seleccin del diseo de investigacin.
La eleccin del diseo del estudio depende fundamentalmente de la pregunta de
investigacin. La tabla 4 resume los diseos ms empleados para cada tipo de
estudio. Cuando existe ms de una opcin, se debe priorizar el diseo que ofrezca
un mayor nivel de evidencia (tabla 5), y el que sea ms eficiente segn la
disponibilidad de recursos para su realizacin. Por ejemplo, aunque un estudio de
cohortes proporciona un mayor nivel de evidencia que un estudio de casos y de
controles, no tiene sentido emplearlo para estudiar, por ejemplo, la ocurrencia de
eventos extremadamente raros, ya que sera enormemente caro, largo e ineficiente.
Un estudio de casos y controles sera una mejor opcin.

DISEO DE UN ESTUDIO DE INVESTIGACIN TRASLACIONAL

La investigacin traslacional estudia la manera de aplicar los modernos
conocimientos sobre biologa molecular en la prctica clnica. Su objetivo es
trasladar el descubrimiento desde el laboratorio a la clnica contribuyendo a mejorar
el diagnstico, el tratamiento, el pronstico o la prevencin de las enfermedades
humanas. En la ltima dcada ha habido un aumento exponencial en la cantidad de
estudios trasnacionales que se realizan en centros hospitalarios. Existen varios
factores que han contribuido a este hecho: a) La secuenciacin de la totalidad del
genoma humano; b) el desarrollo de tcnicas modernas que permiten detectar
cambios en el DNA (por ej., placas para determinar 1-2 millones polimorfismos de
una sla muestra), en la expresin gnica (por ej., microarrays de Affymetrix) y en la
identificacin y cuantificacin de protenas (por ej., tcnicas de proteinmica como
placas de multi-ELISA) y c) desarrollo de centros de investigacin bsica y
traslacional asociados a hospitales acadmicos (por ej., IDIBAPS en el Hospital
Clnic de Barcelona).
En los apartados siguientes se detallar las fases necesarias en el diseo de
un estudio de investigacin traslacional, as como las dificultades ms importantes
en cada una de ellas.
Diseo de un estudio traslacional
La realizacin de un estudio traslacional comporta cuatro fases. En primer lugar,
debe realizarse un prediseo del estudio que permita definir el tipo de enfermos o
fenotipo que se quiera estudiar y desarrollar un protocolo de recogida de datos
clnicos y epidemiolgicos, as como de muestras biolgicas. Por ejemplo, el objetivo
del estudio puede ser la identificacin de nuevas dianas teraputicas para el
tratamiento del shock sptico. Para ello, se determinan los criterios de inclusin y de
exclusin para este estudio, as como la confeccin de una base de datos completa
que incluya informacin clnica y epidemiolgica. Finalmente, se definen las
muestras biolgicas que hay que obtener de manera prospectiva (por ej., 25 ml de
sangre para obtener clulas sanguneas y suero). Es importante estudiar con detalle
el mtodo de recogida de dichas muestras, as como su correcto almacenamiento.
Aunque las muestras ms comunes suelen ser sanguneas, existen diversos tipos de
muestras de tejidos susceptibles a ser utilizadas en este tipo de estudios. La
preservacin de dicho tejido es diferente segn las tcnicas de biologa molecular
que se quieran utilizar (Figura 1).
En segundo lugar, se procede a la obtencin prospectiva de las muestras y
de los datos de los enfermos. En caso de estudios poco prevalentes o que requieran
un gran nmero de enfermos, se recomienda realizar estudios multicntricos. En
estos casos es importante que la recogida y almacenamiento de las muestras
biolgicas se haga de una manera homognea, para evitar discrepancias en los
resultados segn los centros. Por ejemplo, se realiza un estudio en 5 centros en los
que se obtiene suero y clulas sanguneas de enfermos con shock sptico de origen
respiratorio. Las condiciones de recogida de las muestras y las caractersticas de los
tubos y de las neveras han de ser las mismas en todos los centros. El envo de

muestras al centro coordinador se debe realizar por una mensajera especializada y

en un recipiente adecuado con abundante hielo seco.
Una vez obtenido la cantidad necesaria de enfermos, se realiza la tercera fase
que es la determinacin de los factores patognicos que pudieran constituir
dianas teraputicas. Los mtodos que pueden utilizarse para estos estudios estn
recogidos en la Tabla 6. La identificacin de factores patognicos puede realizarse a
diferentes escalas:
- Escala universal. Por ejemplo, determinacin de la expresin de todos los
genes conocidos en el mRNA extrado de la sangre de los enfermo por medio
de microarrays de 20,000 genes. Esta escala permite identificar nuevos
factores, es apriorstica y genera gran cantidad de datos, que deben ser
confirmados por tcnicas adicionales. Es la escala ideal, pero supone un gran
coste monetario y la necesidad de personal especializado para su anlisis e
interpretacin.
- Escala media. Por ejemplo, la utilizacin de placas microfludicas para
determinar la expresin de 40 citoquinas inflamatorias. Es cada da ms
utilizada, pues genera una cantidad de datos asumible, es monetariamente
menos costosa y la interpretacin de datos es menos laboriosa.
- Escala pequea. Cada vez menos utilizada. Consistira en medir la
expresin de 1-2 citoquinas en el mRNA de la sangre de estos enfermos. Es
relativamente barata, pero genera escasa cantidad de informacin, y no suele
permitir la identificacin de factores patognicos novedosos.
Asimismo, la identificacin de factores patognicos puede realizarse a diversos
niveles (Figura 6):
- Nivel del DNA: permite saber si variaciones genticas (polimorfismos) de un
gen influyen en el fenotipo del enfermo (por ej., como se ha comentado
anteriormente, si un poliformismo del TNF es ms comn en enfermos con
shock sptico de origen respiratorio que mueren a pesar del tratamiento
convencional).
- Nivel de expresin gnica: permite determinar si la cantidad que existe de un
mRNA especfico que codifica una protena est ms o menos aumentado en
enfermos de dos fenotipos diferentes (por ejemplo, existe una expresin de
TNF sangunea 5 veces superior en enfermos con shock sptico que mueren
que aquellos que sobreviven).
- Nivel proteico: permite determinar si la cantidad de una protena esta
aumentada o no en el suero o plasma de enfermos con diversos fenotipos. En
ocasiones, puede determinarse si una protrea es biolgicamente activa (por
ejemplo, una protena que ha madurado a partir de un precusor inactivo). En
este nivel es mucho ms complejo realizar estudios a gran escala, que estn
mucho ms estandarizados a nivel de RNA.
- Nivel de sealizacin intracelular: puede estudiarse en al material gnico y/o
proteico proveniente de la sangre si existen vas intracelulares activadas o no.
Por ejemplo, puede determinarse la cantidad de AMPc o GMPc, la
fosforilacin de kinasas, la activacin de factores de transcripcion (como el
NFkB), etc. Este nivel genera informacin dinmica sobre el tipo de vas
activadas en estos enfermos, dando indicios para la actuacin de frmacos
futuros.

La ltima fase consiste en la identificacin de los factores patognicos que

podran jugar un papel en la enfermedad. El primer paso es una definicin rigurosa
del fenotipo de enfermo: por ejemplo, identificar enfermos con shock sptico que
mueren a pesar del tratamiento y otros que fallecen. Es importante descartar
enfermos de difcil clasificacin. Por ejemplo, aquellos que mueren por causas
difcilmente atribuibles al shock sptico refractario (por ej., hemorragia digestiva por
varices esofgicas en un enfermo cirrtico). De esta manera, quedarn dos grupos
de enfermos claramente definidos. A continuacin, hay que estudiar si el factor
patognico en cuestin se expresa de manera diferente en los dos tipos de
enfermos. En el caso de estudios universales (por ejemplo, microarrays de expresin
gnica), es importante contar con la ayuda de un bioinformtico. Asimismo, es
necesario haber calculado correctamente el nmero de enfermos necesarios para el
estudio, para lograr una potencia estadstica adecuada.
Ejemplo de un estudio traslacional
Como se ha comentado anteriormente, podemos realizar un estudio multicntrico en
5 UCI para identificar nuevas dianas teraputicas para el shock sptico. Como el
estudio es complejo y monetariamente costoso, previamente se realiza un diseo
cuidadoso para obtener de manera prospectiva para la obtencin de suero y clulas
sanguneas de enfermos con shock sptico de causa respiratoria. Se establecen
previamente unos criterios de inclusin y exclusin, se definen los dos fenotipos a
estudiar (con mala evolucin y muerte versus con resolucin del cuadro clnico). Se
homogenizan los criterios en las 5 UCI sobre la forma de recogida y de
almacenamiento de las muestras, que se envan mediante una empresa de
mensajera especializada, con abundante hielo seco, al centro coordinador. Dado
que el estudio ser monetariamente costoso, es recomendable solicitar becas
oficiales o financiacin externa para poder realizarlo en todas sus fases.
Una vez acabado el perodo de inclusin de enfermos, los distintos Centros
envan las muestras y las bases de datos con los parmetros epidemiolgicos y
clnicos de los enfermos. En total se ha incluido 300 enfermos de cada fenotipo
(muertos vs vivos). Se seleccionan 50 enfermos por cada uno de los dos fenotipos y
se obtiene mRNA total de la sangre de los mismos. Se realiza un estudio amplio de
expresin gnica por microarrays de 20.000 genes y se analiza los resultados con la
ayuda de un bioinformtico. Se obtiene una firma gnica de 100 genes que estn
sobreexpresados en enfermos con mala evolucin. De dichos genes, existe uno que
est expresado 12 veces ms en enfermos con mala evoilucin y que se ha descrito
recientemente que tiene propiedades vasodilatadores y pro-inflamatorias (por ej.,
una sustancia ficticia: vasodilatina).
A continuacin estudio la vasodilatina en la serie completa en dos niveles
diferentes. Se determina si la presencia de polimorfismos del gen que codifica la
vasodilatina es diferente entre los enfermos con buen y con mal pronstico.
Finalmente, se determina mediante la tcnica ELISA en las muestras de todos los
enfermos si los niveles sricos de vasodilatina tienen valor pronstico y me permiten
identificar los enfermos con mala evolucin. Idealmente, se introducen los niveles de
vasodilatina en una base de datos y se hace un estudio de factores pronsticos. Se
realiza un anlisis multivariante para elucidar si el valor srico de vasodilatina es un
predictor independiente de mortalidad en estos enfermos.

Hipotetizemos que hemos demostrado que la vasodilatina se sobreexpresa a

nivel gnico y proteico en los enfermos con shock sptico de origen respiratorio, y
que las variaciones de dicho gen (polimorfismos) influyen en el curso clnico de estos
enfermos. Se ha demostrado en el estudio traslacional que esta sustancia es una
posible diana teraputica. A continuacin, debe manipularse la expresin de dicha
sustancia o su unin a los receptores en animales de experimentacin en modelos
de sepsis. Si se confirma que la inhibicin de dicha sustancia tiene efectos
beneficiosos (disminuye la mortalidad en ratas con sepsis y evita la hipotensin), la
seguridad y eficacia de frmacos que bloqueen la vasodilatina deber ser evaluada
en estudios clnicos, comenzando lgicamente por estudios en fase I.

BIBLIOGRAFA RECOMENDADA
Delgado M, Llorca J, Domnech JM. Investigacin cientfica: Fundamentos
metodolgicos y estadsticos. Barcelona: Signo; 2005.
Haynes B, Sackett DL, Guyatt GH, Tugwell P. Clinical Epidemiology. Third ed.
Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins; 2006.
Keramaris NC, Kanakaris NK, Tzioupis C, Kontakis G, Giannoudis PV. Translational
research: from benchside to bedside. Injury 2008;39:643-50.
Machin D and Campbell MJ. Design of studies for medical research. Chichester, UK:
John Wiley & Sons Ltd; 2005

Pies de Figura.
Figura 1. Obtencin de tejidos de rganos de enfermos para su utilizacin en
estudios traslacionales.
Distintos mtodos de conservacin segn la tcnica de biologa molecular que se
pretenda emplear.

Tabla 1. Tipos de preguntas de investigacin que se pueden plantear en un estudio

sobre shock sptico.
1) Definir la enfermedad: Cules son las caractersticas que mejor
discriminan los enfermos con shock sptico de los que no lo tienen?
2) Definir la mejor prueba diagnstica de la enfermedad: Qu prueba
o grupos de pruebas diagnsticas o criterios diagnsticos son los
mejores para discriminar los enfermos con shock sptico de los
enfermos sin l?
3) Definir el patrn de ocurrencia de la enfermedad: Cul es la
frecuencia del shock sptico? A qu poblacin afecta?
4) Definir la etiologa de la enfermedad: Cules son los factores
determinantes del desarrollo de shock sptico?
5) Definir la estrategia de prevencin de la enfermedad: Se puede
evitar?Cul es la mejor intervencin para evitar su ocurrencia?
6) Definir los factores que influyen en el curso natural de la
enfermedad: Cules son los factores que determinan su pronstico?
7) Definir el mejor tratamiento de la enfermedad: Cul es la mejor
opcin teraputica?

Tabla 2. Clasificacin simplificada de los diferentes diseos de investigacin

Estudios de Intervencin
Diseos Experimentales
Ensayos clnicos
Ensayos en la comunidad
Diseos Cuasi-experimentales
Clnicos
En la comunidad
Estudios Observacionales
Diseos bsicos
Estudios de cohortes
Estudios de casos y de controles
Estudios transversales
Diseos hbridos
Estudios de cohorte y casos
Estudios de casos y de controles anidados en una cohorte
Diseos incompletos
Estudios de mortalidad proporcional
Estudios ecolgicos
Series de casos

Tabla 3: Fases de un ensayo clnico:

Fase I: Estudios de farmacocintica y farmacodinmica en sujetos sanos. En
algunos casos se realizan con enfermos
Fase II: Estudios que evalan de forma preliminar la relacin eficacia
teraputica/toxicidad y la dosis ptima del producto en el proceso diana
Fase III: Estudios que evalan la eficacia y seguridad de la intervencin en las
condiciones de uso habituales.
Fase IV: Estudios que evalan la efectividad de nuevos usos de una intervencin
ya autorizada y estudios de vigilancia de efectos indeseables.

Tabla 4: Diseos empleados segn la pregunta de investigacin

Estudios del diagnstico de una enfermedad:
Estudio transversal
Estudio de casos y controles
Estudio del patrn de ocurrencia de una enfermedad
Sistemas de informacin sanitaria. Vigilancia epidemiolgica *
Estudios de las causas de la enfermedad
Estudio de casos y controles
Estudio de cohortes
Estudio de la mejor estrategia de intervencin
Estudios de intervencin
Estudio del pronstico de la enfermedad
Estudio de cohortes
Estudio del tratamiento de la enfermedad
Estudios de intervencin
* No son diseos de investigacin, pero aportan datos fundamentales para elaborar
las preguntas de investigacin

Tabla 5. Niveles de evidencia (Oxford Centre for Evidence-Based Medicine)

Nivel
evidencia

de Fuente

1a

Revisin sistemtica de ensayos clnicos aleatorizados, con

homogeneidad (incluye estudios con resultados comparables y en
la misma direccin).

1b

Ensayo clnico aleatorizado individual (con intervalos de

confianza estrechos)

1c

Eficacia demostrada por la prctica clnica y no por la

experimentacin

2a

Revisin sistemtica de estudios de cohortes, con

homogeneidad (incluye estudios con resultados comparables y en
la misma direccin).

2b

Estudio de cohortes individual y ensayos clnicos aleatorizados

de baja calidad (< 80% de seguimiento)

2c

Investigacin de resultados en salud

3a

Revisin sistemtica de estudios de casos y controles, con

homogeneidad (incluye estudios con resultados comparables y en
la misma direccin).

3b

Estudios de casos y controles individuales

Serie de casos y estudios de cohortes y casos y controles de baja

calidad.

Tabla 6. Tipos de estudios que utilizan tcnicas de biologa molecular para

investigacin traslacional con muestras humanas.

Nivel
estudio
DNA

de Escala del
estudio

Tcnicas de biologa molecular

Universal

Chips de DNA para determinar mltiples

polimorfismos (500.000 a 2 millones)

Media

Placas
para
polimorfismos

determinar

100-500

Pequea
PCR con enzimas de restriccin para
determinar 1 polimorfismo
mRNA

Universal

Chips de
genes)

microarrays

(10.000-30.000

Media
PCR cuantitativa en placas microfludicas
(12-96 genes), RNA protection assay
Pequea
PCR cuantitativa de genes
Northern blot, In situ hybridization
Protena

Universal

nicos,

Estudios de proteinmica a larga escala

con espectometra masas,
Maldi-TOF,
electroforesis dos dimensiones
Multi-ELISAS

Media
Pequea
Sealizacin Universal
intracelular
Media

ELISA protena nica,

inmunohistoqumica.

western

blot,

----Kits de multiples protenas fosforiladas y de

expresin factores transcripcin.

Pequea
Ensayos de AMPc, GMPc, determinacin
de calcio intracelular, western blot de
protena fosforilada, EMSA para activacin
factor transcripcin, actividad kinasas

FIGURA 1