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Inmunologa Online |1
TEMA 1. INTRODUCCIN A LA INMUNOLOGA.
INTRODUCCIN
Los seres superiores estn defendiendo constantemente su integridad biolgica frente
a agresiones, esencialmente externas. De no ser as, moriran como consecuencia de
tumores e infecciones de bacterias, virus, hongos, etc. Para que estos fenmenos de defensa
se lleven a cabo, los organismos disponen de un conjunto de elementos especiales, conocido
como sistema inmune. La capacidad de defensa se adquiere antes de nacer y se madura y
consolida en los primeros aos de la vida fuera del seno materno.
La inmunologa es la ciencia que estudia los procesos moleculares y celulares
implicados en la defensa de la integridad biolgica del organismo a travs de la identificacin
de las sustancias propias y deteccin de las sustancias extraas y su destruccin. En cada
organismo, los mecanismos de defensa son muy diversos y heterogneos, aunque siempre
existe una actuacin integrada de todos ellos. Los mecanismos de defensa pueden ser de tipo
inespecfico y especfico. Los mecanismos inespecficos estn constituidos por las barreras
naturales, tales como la piel, mucosas y otros que estn protegiendo constantemente al
individo de contagios externos (Figura 1.). Otros elementos naturales de actuacin son la
lisozima de la saliva, lgrimas y secreciones nasales que tienen capacidad de romper la unin
de azcares en las paredes bacterianas, lo que puede inducir su lisis. Tambin entre estos
mecanismos inespecificos se encuentra la respuesta inmune inespecfica que estn
constituidos fundamentalmente por los componentes de la respuesta inmune especifica.
Entendemos por respuesta inmune todos aquellos eventos desarrollados por el sistema
inmune al objeto de defender la integridad biolgica del individuo frente a cualquier agresin
(estimulo antignico). La respuesta inmune puede ser, pues, de tipo inespecfica o innata y
especfica
La respuesta inespecfica o innata es la primera barrera defensiva del organismo y no
requiere sensibilizacin previa. La respuesta especfica o adquirida se desarrolla solo frente a
la sustancia extraa que indujo su iniciacin y en ella participan prioritariamente los linfocitos y
las sustancias liberadas por los mismos, anticuerpos y citocinas (Figura 1.).
El sistema inmune se encuentra ubicado en los rganos linfoides y en su accin
participan una serie de clulas, clulas inmunocompetentes, y molculas, entre las que
destacan las inmunoglobulinas, linfocinas y otras (Figura1.). Las distintas clulas
inmunocompetentes se recogen en la Figura 1.4.
Todas las sustancias que tienen la capacidad de estimular al sistema inmune, se
conocen como antgenos y las partes del mismo que tienen capacidad inmungena, se
conocen como determinantes antgnicos o eptopos.
Generalmente el sistema inmune responde de forma unitaria, por lo que la divisin en
respuesta inespecfica y especfica es ms terica que real. Lo que s ocurre es que,
dependiendo de las circunstancias, en unos casos predomina una u otra de estas modalidades
de respuesta inmune.
La Inmunologa es una ciencia de gran amplitud que comprende diversas reas:
Inmunogentica, Inmunobiologa, Inmunopatologa o Inmunologa clnica, Inmunofarmacologa,
Inmunologa veterinaria, etc., todas ellas en continua expansin.
RESPUESTA INMUNE INESPECIFICA.
La finalidad de la respuesta inmune tanto inespecfica como especifica es la defensa de
la integridad biolgica del individuo, actuando como un sistema de mantenimiento de la
homeostasis del organismo, al igual que lo hace, por ejemplo, el sistema respiratorio o el
sistema nervioso.
La respuesta inespecfica forma parte de los mecanismos inespecficos de defensa y

representa el primer sistema defensivo del organismo y es de especial significacin frente a la
proteccin del mismo ante infecciones y cncer. Las clulas que mediatizan esta respuesta
inespecfica, son los PMN neutrfilos, macrfagos y clulas NK que son clulas que se
caracterizan por activarse de forma inmediata siempre que cualquier sustancia extraa penetra
en el organismo, como, por ejemplo ocurre, tras una herida. En este caso todas estas clulas
se movilizan a dicho foco, reconocen y toman contacto con la sustancia extraa, que destruyen
mediante el proceso de fagocitosis y citotoxiciadad natural (Tabla 1.1). En este tipo de
respuesta participa tambin el complemento (C), que est formado por una gran variedad de
protenas que se encuentran en el plasma. Los distintos componentes del complemento
interactan en un determinado orden para ejercer su accin en la defensa del organismo.
Probablemente la fagocitosis es el principal elemento que acta en este tipo de respuesta. La
fagocitosis se lleva a cabo en varias fases, aproximacin, fagocitosis y lisis (Figura 1. ).
Los mecanismos de defensa inespecficos aportan un buen sistema de proteccin. Sin
embargo, en muchas ocasiones no son suficientes para defender eficazmente al organismo,
pero por fortuna ste dispone de la respuesta inmune especfica.
RESPUESTA INMUNE ESPECIFICA
La respuesta inmune especfica se caracteriza porque es efectiva ante aquellos
antgenos frente a los cuales se ha iniciado y desarrollado. Este tipo de respuesta es mediada
por linfocitos y otras clulas como clulas dendrticas, macrfagos etc.
Los linfocitos son de dos tipos: linfocitos B y linfocitos T. Los linfocitos T, a su vez,
pueden ser linfocitos T colaboradores (Th), linfocitos T citotxicos (Tc) y por algunos autores
tambin se han propuesto los linfocitos T supresoresres/reguladores (Ts).
La respuesta inmune especfica, se considera que puede ser de dos tipos: humoral y
celular. Aunque la separacin de ambos tipos de respuesta es mas de tipo didctico que real,
en general se considera que cuando los elementos implicados son los linfocitos B, se trata de
una respuesta tipo humoral mientras que cuando participan prioritariamente los linfocitos T
tanto colaboradores (Th) como citotxicos (Tc), se trata de una respuesta tipo celular.
Reconocimiento del antgeno
Para que se inicie la respuesta inmune especfica, se requiere el reconocimiento del
antgeno por parte de los linfocitos y subsiguiente activacin de los mismos.
Los linfocitos B reconocen el antgeno mediante inmunoglobulinas de membrana (mIg)
mientras que los linfocitos T lo reconocen mediante el receptor de linfocitos T (TCR) (Figura 1.).
La activacin de los linfocitos B conduce a la sntesis de Inmunoglobulinas por los mismos
mientras que cuando lo que se activan son los linfocitos Th o Tc su funcin prioritaria es la
produccin de linfocinas o la de lisar clulas respectivamente.
Las inmunoglobulinas (Ig) son glicoprotenas formadas, al menos, por cuatro cadenas
mientras que el receptor de los linfocitos T (TCR) es tambin una glicoprotena pero de solo
dos cadenas (Figura 1.). Ambos tipos de molculas tienen la propiedad de reconocer y unirse
al antgeno. Cada inmunoglobulina tiene la propiedad de unirse especficamente al antgeno
que indujo su formacin.
Respuesta inmune celular
La respuesta inmune de tipo celular cubre una importante funcin como mecanismo
inmunolgico de defensa, actuando principalmente frente a virus, as como evitando la
aparicin y desarrollo de clulas tumorales. En ella participan esencialmente los linfocitos T
colaboradores (Th) y citotxicos (Tc).
Presentacin del antgeno
Para que los linfocitos T, tal como se ha dicho anteriormente puedan reconocer el
antgeno, ste debe ser debidamente presentado. Esta funcin se realiza por las clulas
presentadoras de antgeno (APC) y sus determinantes antignicos son expuestos en la
superficie de estas clulas en el seno de las molculas del complejo principal de

histocompatibilidad (MHC) (Figura 1.8).
Las molculas del Complejo Mayor de Histocompatibilidad son glicoprotenas
presentes en las membranas de la mayora las clulas nucleadas, entre las que se encuentran
las clulas inmunocompetentes. Estas molculas son esencialmente de dos tipos, tipo I y tipo II
y tienen entre otras funciones las de presentar el antgeno a los linfocitos as como participar en
el proceso de maduracin de los linfocitos T en el timo (Figura 1.9).
Las clulas presentadoras de antgeno (APC) tienen como misin captar, procesar
proteolticamente en el interior de estas clulas y despus presentar el antgeno a los linfocitos
T conjuntamente con las molculas de histocompatibilidad.
Interaccin celular
Para que la activacin del Ag se lleve a cabo se requiere que previamente se halla
producido la interaccin entre las clulas presentadoras y las respondedoras. Este fenmeno
se lleva a cabo prioritariamente por las molculas de adhesin que son un grupo muy
heterogneo de sustancias que se encuentran en la superficie de las clulas presentadoras y
respondedoras y que como se ha dicho hacen posible la adherencia entre ellas y en
consecuencia permiten la unin entre el receptor de las clulas T y el complejo MHC-Ag de la
APC (Figura 1.). De igual manera, estas molculas participan en todo tipo de interaccin celular
tanto en la respuesta celular como humoral.
Inmunomoduladores de la respuesta inmune
La respuesta inmune es regulada por molculas conocidas como linfocinas, que son
sustancias producidas por linfocitos en respuesta a una gran variedad de estmulos y que son
capaces de regular el funcionamiento de otras clulas del sistema inmune. Las linfocinas
actan como seal complementaria facilitando la activacin, proliferacin y diferenciacin de
los linfocitos y en general de todas las clulas implicadas en la respuesta inmune (Figura
1.11).
Activacin Th y Tc
Aunque existen excepciones, la separacin de las funciones de los linfocitos Th y Tc
viene dada por el origen de los antgenos que reconocen. Los linfocitos Tc reconocen a los
antgenos presentados en superficie por molculas MHC de clase I (Figura 1. ), mientras que
los linfocitos Th interaccionan con el antgeno en el contexto de molculas MHC de clase II.
Asociados a las dos cadenas polipeptdicas polimrficas que constituyen el TCR se
encuentra un grupo de molculas monomrficas de membrana llamado colectivamente CD3,
formando as el complejo TCR/CD3 y que sabemos que es imprescindible para la transmisin
de la seal del reconocimiento antignico al interior celular. En consecuencia se desencadena
una cascada de reacciones bioqumicas en el citoplasma de la clula T, dando as lugar al
proceso de activacin, proliferacin y diferenciacin celular. Estos mecanismos implican la
participacin de una serie de sustancias intracitoplasmticas, conocidas como segundos
mensajeros. Como consecuencia de estos eventos se producir finalamente la la transcripcin
de los genes implicados en la sntesis de la protena y factor implicado en una determinada
funcin. La activacin de las clulas Th es el ncleo central de la respuesta celular que a su
vez acta sobre, macrfagos, clulas NK y linfocitos Tc que adquieren entonces la capacidad
de lisar las clulas que portan el antgeno que indujo su activacin.
Respuesta inmune humoral
La ausencia de este tipo de respuesta deja al individuo tan indefenso frente a toda
clase de grmenes patgenos y otras agresiones, que es incompatible con la vida si no se
instaura a tiempo un tratamiento adecuado.
En la respuesta inmune humoral intervienen los linfocitos B, que como se ha dicho
anteriormente reconocen al antgeno a travs de las inmunoglobulinas de membrana. Sin
embargo este estmulo no es suficiente para que se inicie y desarrolle la respuesta inmune
humoral. Para ello es necesario que los linfocitos B, adems del estmulo antignico, reciban el
estmulo de ciertas citocinas (Figura 1.13)producidas por los linfocitos T colaboradores. Slo
cuando confluyen estos estmulos, el antignico y el mediado por las citocinas, se produce la
activacin, proliferacin y diferenciacin de los linfocitos B hasta la formacin de clulas
memoria y clulas plasmticas productoras de inmunoglobulinas, que sern el elemento efector
final de la respuesta humoral. En la Figura 1.14 se muestra un esquema con una visin
general de la respuesta inmune.
Caractersticas respuesta inmune especfica
La respuesta inmune especifica se caracteriza por ser de carcter clonal, reconocer
unos antgenos y no otros (especificidad), desarrollar memoria y ser autoregulable.
Especificidad. Se sabe que cada antgeno estimula solo a aquel linfocito o
grupo de linfocitos que han desarrollado y en consecuencia poseen en su membrana
los receptores capaces de reconocer y unirse especficamente a l. Estos receptores,
tal como se ha indicado anteriormente, son las inmunoglobulinas de superficie cuando
se trata de linfocitos B o el TCR cuando se trata de linfocitos T.
Clonalidad. Cuando un linfocito o grupo de linfocitos es activado, este prolifera
y se diferencia en mltiples clulas derivadas, todas ellas con idnticos receptores de
superficie. Se dice entonces que todas estas clulas constituyen lo que se denomina
clon celular. Tanto la especificidad como la clonalidad de la respuesta inmune fueron
originariamente definidos en los aos cincuenta por varios inmunlogos entre los que
se encontraba Burnet y se conoci despus por la teora de seleccin clonal de Burnet.
Esta teora deca que cada antgeno estimular a aquel linfocito o grupo de linfocitos
que poseen en su membrana receptores capaces de reconocer y unirse
especficamente a l y que como consecuencia se produca su proliferacin y
diferenciacin en clulas con las mismas caractersticas de reconocimiento que los
linfocitos originales (Figura 1.15). Este carcter clona, le confiere a este tipo de
respuesta el carcter de gran eficiencia en cuanto que cada individuo solo pone en
marcha aquellos elementos, celulares y moleculares, que le son necesarios para una
determinada accin.
Memoria Inmunolgica. Otra caracterstica importante de este tipo de
repuesta es que el organismo mantiene memoria de un estmulo a otro cuando son de
la misma ndole. Eso se debe a la permanencia de linfocitos sensibilizados de larga
vida despus de un estmulo antignico.
Autorregulacin. Este tipo de respuesta dispone de mecanismos internos de
control, de tal forma que la intensidad de la misma se regula por accin de diversos
tipos de molculas entre las que destacan las inmunoglobulinas y sobre todo las
citocinas. En la Figura 1.16 se recogen las distintas fases de la respuesta inmune.
Respuesta primaria y secundaria.
Cuando por primera vez un antgeno se pone en contacto con el organismo, se produce
una respuesta inmune que se denomina respuesta primaria. Por el contrario, cuando al cabo de
un tiempo el mismo antgeno vuelve a activar al sistema inmune, se produce una respuesta que
denominamos respuesta secundaria o adaptativa (Figura 1.). Ambas respuestas son, cualitativa
y cuantitativamente, diferentes. Las diferencias esenciales son:
1. En la respuesta primaria los niveles mximos de inmunoglobulinas se alcanzan

tras un largo perodo de latencia despus del estmulo antignico, mientras que
en la respuesta secundaria se alcanza ms rpidamente.
2. La respuesta primaria es de menor intensidad que la secundaria.

3. La respuesta primaria predomina la IgM, mientras que en la secundaria
predomina la IgG.
4. La respuesta secundaria, al predominar en ella la IgG de vida media ms larga

que la IgM, es ms permanente en su accin que la primera.
Ello se debe a que cuando un antgeno activa por primera vez a los linfocitos B, stos
necesitan tiempo para diferenciarse en las clulas plasmticas responsables de la sntesis de
inmunoglobulinas, mientras que cuando se trata de la respuesta secundaria, gracias a la
permanencia de las clulas memoria, se alcanza mucho antes el nivel de clulas plasmticas.
Resulta as, que la respuesta ser de menos intensidad que tras un segundo estmulo en que
ha aumentado el nmero de linfocitos sensibles gracias a la permanencia de clulas memoria
con receptores idneos para tal antgeno.
Estos sistemas funcionan de forma secuencial, envindose informacin entre ellos para
una eficaz eliminacin del patgeno. As, una vez que entra el patgeno superando las
barreras fsico-qumicas, se pone en funcionamiento el sistema inmune innato, con clulas y
factores solubles que van a tratar de eliminarlos. Tras la activacin de este sistema, es
nicamente en los vertebrados donde puede ponerse en marcha el sistema inmune especfico
adaptativo, aunque coordinado con los componentes del sistema inmune innato. Como
ejemplos de esta cooperacin se encuentran el papel desempeado por los macrfagos como
clulas presentadoras de antgeno a los linfocitos T; los anticuerpos IgM e IgG son capaces de
activar el sistema del complemento por la va clsica; o la citotoxicidad dependiente de
anticuerpo por parte de las clulas natural killer.
CONCEPTO DE ANTIGENO Y HAPTENO
Se entiende por antgeno toda sustancia con capacidad para generar una respuesta
inmune, esto es que posee capacidad de ser reconocida como extraa por el sistema inmune.
Sabemos que prcticamente cualquier tipo de molcula biolgica, incluyendo azcares, lpidos,
hormonas, metabolitos intermediarios, carbohidratos complejos, fosfolpidos, cidos nuclicos y
protenas pueden ser antgenos. Si se quiere producir anticuerpos contra pequeas molculas,
stas deben unirse antes de la inmunizacin a una macromolcula. En este sistema, la
molcula pequea recibe el nombre de determinantes antgenos (Figura 1. ).
Los anticuerpos frente a un antgeno se unen a sus grupos determinantes. Esta
capacidad de unin antgeno-anticuerpo (Ag-Ac), es la caracterstica ms importante y comn
de todas las inmunoglobulinas. Esta unin es no covalente y dbil, de tal forma que la reaccin
es reversible, encontrndose los antgenos y los anticuerpos libres en equilibrio dinmico con
los unidos. En general los antgenos son de mayor tamao que la zona que participa en la
unin con el anticuerpo, de modo que un anticuerpo solo se une a una zona muy restringida del
antgeno. A esta zona del antgeno que participa en la unin con el anticuerpo se le denomina
epitopo o determinante antignico. La mayora de los antgenos poseen mltiples eptopos, con
lo que pueden unir mltiples anticuerpos a la vez siempre que los eptopos estn
suficientemente alejados entre ellos para que no existan interferencias estricas que lo impidan
Clsicamente se llamaba antgeno a toda molcula capaz de generar un anticuerpo. En
la actualidad sin embargo, se considera antgeno a cualquier molcula capaz de unirse a un
anticuerpo independientemente de que pueda, por si sola, generarlo. Aquellas molculas que
adems sean capaces de generar un anticuerpo se les denomina inmunogenas. En este
sentido existen molculas demasiado pequeas que llamamos haptenos, que para generar
anticuerpos necesitan ir unidas a molculas mas grandes llamadas carrier. Una vez que se han
generado de este modo, anticuerpos contra el hapteno, ste puede unirse a los anticuerpos. El
hapteno es por tanto, una molcula antignica pero no inmungena.
Tras la unin antgeno-anticuerpo (Ag-Ac), las sustancias extraas (o antgenos) son
neutralizadas y posteriormente destruidas por las inmunoglobulinas a travs de mecanismos,
que pueden ser diferentes segn el tipo de inmunoglobulina que participa.
INMUNOPATOLOGA
Hay multitud de casos en los que los sistemas de defensa son en s causa de
enfermedad. Esto es, por ejemplo, lo que ocurre cuando el individuo reacciona incluso frente a
sustancias que en principio son inocuas, como es el polen de plantas, etc. Entonces se habla
de reacciones de hipersensibilidad(Figura 1. ) .
En otros casos, por razones todava no muy bien conocidas, el sistema inmune
reacciona frente a componentes propios, que destruye, ocasionando graves trastornos, o
incluso la muerte. Se trata de enfermedades por autoinmunidad, que pueden presentarse

frente al sistema nervioso central, frente a casi todas las glndulas endocrinas, frente a
componentes musculares, etc.
Tambin a veces, las clulas encargadas de la defensa inmune, comienzan a proliferar
en grandes cantidades, llegando a producir autnticos cnceres de clulas libres como son las
leucemias, que incluso en tan slo meses pueden terminar con la vida del individuo.
La Inmunologa, en consecuencia, debe estudiar no slo el papel que tiene el sistema
inmune en el mantenimiento de la salud sino tambin en la gnesis y evolucin de la
enfermedad.
APORTACIONES DE LA INMUNOLOGIA
La Inmunologa ha contribuido de forma notoria al progreso de la ciencia actual,
primero por aportaciones sobre bases empricas y despus sobre fundamentos slidos, fruto
del intenso esfuerzo desplegado en el estudio de los mecanismos de actuacin del sistema
inmune (Tabla 1.2)
Durante la fase emprica que podemos considerar anterior al comienzo del presente
siglo, la inmunologa ofreci la solucin a uno de los grandes problemas que ha azotado a la
humanidad, las pandemias. Ello fue posible gracias a Jenner quien a finales del siglo XVIII y a
Pasteur quien a su vez a finales del siglo XIX, prepararon las vacunas de la viruela y de la
rabia respectivamente. Posteriormente se desarrollaran, entre otras, las vacunas antitifoidea
(1898), anticlera (1892) y antidiftrica (1913).
Despus, en lo que podramos denominar fase cientfica, y debido a un mejor
conocimiento de las bases biolgicas y celulares del sistema inmune, la inmunologa se ha
desarrollado ampliamente, siendo una de las ciencias que ms ha evolucionado en los ltimos
aos. Hasta aproximadamente los aos sesenta los aspectos inmunolgicos conocidos
aparecan, en el contexto de la Microbiologa, como el sistema capaz de defender al organismo
frente a las infecciones. Desde entonces, los continuos avances en el conocimiento de los
mecanismos implicados en la respuesta inmune han dotado a esta disciplina de un slido
cuerpo de conocimientos.
A este desarrollo han contribuido de manera especial la puesta a punto de tcnicas
modernas, tales como los cultivos celulares, obtencin de lneas celulares puras e hbridos
celulares, posibilidad de obtener animales trangnicos, disponibilidad de las tcnicas de
biologa molecular tales como clonaje de genes, tcnica de PCR, el uso del lser y la
microscopa electrnica. En consecuencia, hoy da la Inmunologa posee su propia contextura
interna y puede ser firmemente considerada como ciencia independiente al tiempo que hace
posible el desarrollo de otras reas gracias a la aplicacin de reactivos y tcnicas puramente
inmunolgicas, adquiriendo as una amplia proyeccin en Medicina, Veterinaria, Biologa,
Bioqumica, Agronoma y Farmacia.
En resumen, la Inmunologa ha influido en las siguientes reas:
1. Enfermedades infecciosas. Haciendo posible la profilaxis de la mayora de

las enfermedades infecciosas mediante un progresivo y espectacular perfeccionamiento de las tcnicas de vacunoterapia durante el presente siglo. Es de
destacar a modo de ejemplo el descenso drstico que se observan en las tasas
de morbilidad declaradas por poliomielitis, por sarampin o que la viruela ha
sido completamente erradicada.
2. Transfusiones sanguneas. La Inmunologa hizo posible el descubrimiento de

los grupos sanguneos y los anticuerpos sricos frente a los mismos, gracias a
lo cual se pueden realizar las transfusiones sanguneas sin riesgo para el
enfermo.
3. Trasplantes de rganos. Haciendo posible la prevencin del rechazo de

muchos de los rganos
perfeccionamiento de las
trasplantados. Eso se ha debido a un

tcnicas quirrgicas pero, sobre todo, al
descubrimiento de los antgenos responsables del rechazo (antgenos de

histocompatibilidad) y a un mejor conocimiento de los mecanismos
inmunolgicos responsables del rechazo del trasplante, que estn permitiendo
la utilizacin de modernas terapias inmunosupresoras de gran efectividad en la
actualidad. Los avances ms recientes indican que pronto ser posible el
trasplante de animales al hombre (xenotrasplante) con lo cual se podr dar
solucin a la escasez de donaciones de rganos.
4. Oncologa. En donde la inmunologa ha permitido un mejor conocimiento de la

interrelacin clula cancerosa-husped. Estos conocimientos ya comienzan a
repercutir en una mayor sobrevivencia de ciertos pacientes cancerosos y
existen fundadas esperanzas de que en un futuro inmediato la inmunologa
pueda contribuir an ms, ofreciendo nuevas vas de solucin a esta
enfermedad. El descubrimiento reciente, por un lado, de oncogenes
responsables de la malignizacin celular y, por otro, de los mediadores
qumicos de la respuesta inmune, entre los que cabe destacar las linfocinas y
los interferones, ofrecen una amplia esperanza en la terapia de muchos
cnceres y de sus metstasis. En la actualidad se encuentran en va de ensayo
varias vacunas teraputicas con resultados verdaderamente alentadores.
5. Inmunopatologa. En donde el conocimiento del sistema funcionales, ha

hecho posible conocer la etiologa y patogenia de una gran variedad de
enfermedades surgidas por alteracin del propio sistema inmune, tales como
inmunodeficiencias, alergias, autoenfermedades, etc. Sin embargo, quedan
problemas pendientes sin resolver, como es el reto que actualmente tiene
planteada la Inmunologa con el Sndrome de Inmunodeficiencia Adquirida
(SIDA), de una extraordinaria capacidad expansiva y alta mortalidad, y frente al
cual no se dispone de un remedio eficaz que elimine de manera definitiva el
virus HIV.
6. Mtodos analticos. Una gran variedad de mtodos analticos de gran

precisin y sensibilidad se han desarrollado gracias a los conocimientos
inmunolgicos. Entre estas tcnicas las ms importantes que se pueden
destacar son la inmunoelectroforesis, radio-inmunoensayo, hemaglutinacin,
etc. Hoy se puede considerar que, por ejemplo, la endocrinologa moderna se
ha podido desarrollar gracias a la aparicin de un mtodo, el
radioinmunoensayo, capaz de medir los niveles de las distintas hormonas.
7. Biotecnologa, industria y farmacia. Esto est siendo realmente posible

gracias al extraordinario grado de cooperacin existente entre los inmunlogos
y cientficos dedicados a la bioqumica, biologa molecular, gentica y farmacia,
cuyos mtodos como, por ejemplo, la tecnologa del DNA recombinante,
hibridaciones celulares, etc., estn permitiendo la obtencin de manera
industrial, de sustancias y factores de gran inters farmacolgico, entre los que
podemos destacar, como mas sobresaliente, los anticuerpos monoclonales
(AcMo).
8. Otras aportaciones. Adems de lo indicado anteriormente, la inmunologa ha

contribuido a la solucin de otros muchos problemas. Citemos, por ejemplo, la
prevencin de la eritroblastosis fetal en casos de incompatibilidad Rh entre la
madre y el feto. Otra sensible y reciente aportacin de la inmunologa ha sido
el esclarecimiento de la etiologa de mltiples enfermedades, al descubrir una
estrecha relacin entre el padecimiento de las mismas y ciertos factores
genticos relacionados con el control del sistema inmune. Tambin la
inmunologa ha aportado conocimientos y tcnicas de gran utilidad en la
Medicina Legal, alguna de cuyas reas, como por ejemplo la identificacin, se
benefici ampliamente despus del descubrimiento de los grupos sanguneos y
tambin durante la ltima dcada, gracias al descubrimiento de los antgenos
de histocompatibilidad.
La inmunologa es una ciencia que actualmente se encuentra en pleno desarrollo, por

lo que es de suponer que en el futuro siga aportando nuevos conocimientos para la solucin
de muchos de los problemas que tiene planteados la medicina y biologa.
TEMA 2. CLULAS INMUNOCOMPETENTES

INTRODUCCION
La accin del sistema inmune es posible gracias a la participacin e interrelacin de
diferentes poblaciones celulares, conocidas como clulas inmunocompetentes. Estas clulas
son fundamentalmente los linfocitos T y B, las clulas NK, clulas dendrticas, macrfagos y
polimorfonucleares (tabla 2.1).
Las clulas inmunocompetentes se encuentran distribuidas por toda la economa, como
epitelios y mucosas, pero su concentracin es mxima en los ganglios linfticos y bazo. En
estos tejidos se dan las condiciones ptimas para su estimulacin antignica gracias a que a
ellos afluyen con facilidad las sustancias extraas (antgenos) a travs de los vasos linfticos y
es posible la interrelacin celular, ptima para que se pueda iniciar y desarrollar la respuesta
inmune.
En este captulo estudiaremos las caractersticas morfolgicas y fenotpicas ms
importantes de estas clulas inmunocompetentes, as como tambin el sistema linftico,
especialmente la estructura funcional de los ganglios linfticos, bazo y timo.
LINFOCITOS T Y B
Los linfocitos son clulas de tamao pequeo con un ncleo muy voluminoso y
provistas de una membrana citoplasmtica de especial importancia en la regulacin de su
funcionalidad. Estas clulas se dividen en linfocitos T y linfocitos B.
Ambos tipos de linfocitos al igual que todas las clulas sanguneas derivan de una
clula progenitora pluripotencial que en el feto se encuentra en el hgado y despus del
nacimiento en la mdula sea. A esta clula precursora comn se le denomina CFU-LH o
Unidad formadora de colonias linfoides y hematopoyticas (Figura 2.). Posteriormente esta
clula se diferenciar para dar lugar, por un lado, a la clula madre hematopoytica
pluripotencial (CFU-GMEM) para las series eritroctica, granuloctico-macrofgica y
megacarioctica. Por otro lado, dar lugar a una clula progenitora unipotencial (CFU-L),
especfica para la serie linfoide.
Cada una de estas clulas progenitoras continuar diferencindose hacia otras clulas
inmaduras, originndose as las CFU-E (precursor eritroctico), CFU-GM (precursor
mielomonoctico) y CFU-Meg (precursor megacarioctico) a partir de la clula precursora
hematopoytica.
De la clula madre linfoidea derivarn dos clulas precursoras, CFU-T y CFU-B, que
tras un proceso de maduracin, conocido como linfopoyesis, originarn los linfocitos T y B
respectivamente. En sangre perifrica la proporcin de linfocitos T es aproximadamente de un
70% mientras que la proporcin de linfocitos B es de un 15%. En la Figura 2. se muestra
una imagen de microscopa electrnica de barrido de un linfocito B (a) y un linfocito T (b)

donde pueden observarse las diferencias en su superficie.
Existen otras clulas de estirpe linfoide que no presentan caractersticas de linfocitos T
ni B, denominadas clulas NK que poseen actividad citotxica y secretora de ciertas citocinas.
Linfopoyesis
Las clulas pluripotentes, en las aves, se diferencian y transforman en clulas tambin
inmaduras, que emigran, unas hacia el timo y otras hacia la bolsa de Fabricio, donde se
transforman y maduran en linfocitos T o timo dependiente y linfocitos B o bolsa dependiente,
respectivamente (figura 2.3). En los mamferos, y entre ellos el hombre, estos procesos se
realizan en el timo (linfocitos T) y en la propia mdula sea (linfocitos B) (Figura 2. ).
Veamos a continuacin los aspectos ms importantes de la linfopoyesis en el timo y en
la bolsa de Fabricio o en los rganos equivalentes a la misma en los mamferos.
Linfopoyesis T
El timo es un rgano situado en la parte superior del mediastino anterior, donde
maduran los linfocitos T. El timo presenta su mximo desarrollo en el feto y en el nio,mientras
que a partir de los 10-12 aos comienza un proceso atrfico y degenerativo con gran invasin
grasa, de tal forma que en el adulto slo quedan residuos del mismo (Figura 2. ).
Los precursores de los linfocitos T, durante el proceso de maduracin intratmica,
reciben el nombre de timocitos. Durante esta fase mueren muchos timocitos, aproximadamente
el 95 por 100 de ellos, debido a que se eliminan aquellos que reconocen los antgenos propios
del organismo. El resto de las clulas abandonan el timo, va sangunea, como linfocitos T
maduros. Estos linfocitos colonizan los rganos linfoideos secundarios, situndose en la zona
paracortical de los ganglios linfticos y vainas paracorticales linfocticas del bazo.
Se han identificado algunos factores de transcripcin que son imprescindibles para la
diferenciacin de los linfocitos a lo largo de la linfopoyesis. Entre estos destacan PU.1 e
IKAROS que controlan el desarrollo de clulas T y B mientras que GATA-3 solo afecta el
compromiso de las clulas T y E2A, EBF y Pax controlan el compromiso B.
En el timo se han identificado clulas precursoras que poseen capacidad de generar
clulas T, NK, B y clulas dendrticas del timo, y a lo largo de su diferenciacin los precursores
mas evolucionados van perdiendo paulatinamente la capacidad de generar clulas B, NK y
clulas dendrticas en este orden.
Durante el proceso de maduracin intratmico, los timocitos adquieren una serie de
molculas nuevas en su superficie. Estas molculas van apareciendo secuencialmente en los
diferentes estados de maduracin intratmica as como, en general, en todos los procesos de
maduracin y diferenciacin hematopoyticos. Se les denomina marcadores de diferenciacin
hematopoytica ya que son propios de los diferentes estados madurativos y pueden ser
utilizados para definirlos. Se denominan con las siglas CD (cluster of differentiation o grupo de
diferenciacin) seguido de un nmero ordinal. La CFU-T, no expresa todava en su superficie
ninguno de los marcadores de los linfocitos T. Posteriormente estas clulas, ya en el timo,
maduran distinguindose varios estados diferenciativos con la presencia de diferentes
marcadores de superficie. As en los timocitos inmaduros aparecen los marcadores CD7 y CD2,
aadindose en un estadio posterior de maduracin (timocito comn), el marcador CD1.
I n m u n o l o g a O n l i n e | 10
Ya en el timo va a ocurrir una especializacin funcional, distinguindose dos

subpoblaciones de timocitos maduros: Una es aquella que expresa en su superficie el
marcador CD4 y que ser el precursor inmediato de los linfocitos T colaboradores que
aparecen en sangre perifrica. La otra expresa en la superficie el marcador CD8 y dar origen
a los linfocitos T citotxicos/supresorescirculantes. En ambas subpoblaciones se pierde la
expresin de la molcula CD1 (Figura 2.6). En la Tabla 2.2 se muestran algunos de los
marcadores de diferenciacin de las clulas linfoides de estirpe T.
Los timocitos ms inmaduros no expresan CD3, CD4 ni CD8, por lo que son conocidos
como clulas triples negativas. A medida que van madurando, en estas clulas se produce la
reorganizacin del TCR, la expresin del complejo CD3 y de las molculas CD4 y CD8
conjuntamente (clulas dobles positivas), para despus perder una u otra quedando bien como
CD4-CD+ o como CD+CD8-.
En el proceso de diferenciacin de los timocitos a linfocitos maduros se destruyen gran
nmero de clulas, tal como se ha indicado con anterioridad. Esto se debe a un proceso
de seleccin tmica que se realiza en dos fases y est condicionado por el grado de afinidad
del TCR con las molculas del MHC de las clulas epiteliales del timo. En una de las fases
tanto los timocitos CD4-CD8+ como CD8-CD4+ se seleccionan positivamente, es decir, solo
aquellos timocitos que poseen capacidad de reconocer las molculas del MHC presentes en
las clulas epiteliales del timo se van a diferenciar y crecer mientras que el resto mueren. Por el
contrario, en el proceso de seleccin negativa se destruyen los timocitos que ahora poseen la
capacidad de reconocer las molculas del MHC presentes en el timo, con lo que se eliminan
los clonos celulares autorreactivos. No se conoce bien cuando se efecta uno u otro proceso,
aunque todo parece indicar que se relaciona con la afinidad del TCR de los timocitos con las
molculas del MHC, de tal manera que cuando la afinidad es alta se efectuara una seleccin
negativa, mientras que cuando es baja la seleccin sera positiva.
Mediante el empleo de ratones transgnicos para el TCR se han estudiado los factores
responsables de la maduracin de timocitos que conduce especficamente a linfocitos Tc
maduros. As, cuando el TCR del timocito reconoce molculas del MHC clase I las clulas que
preferentemente se desarrollan son los linfocitos Tc (CD8+), mientras que cuando lo que
reconoce el TCR son molculas MHC clase II las clulas que esencialmente se desarrollan
son los linfocitos Th (CD4+).
Linfopoyesis B.
En las aves, la maduracin de los linfocitos B se realiza en la bolsa de Fabricio, rgano
linfoideo primario asociado a la cloaca y ausente en los mamferos. En los mamferos este
proceso se realiza en la mdula sea.
El proceso de diferenciacin conducente a la formacin de linfociots B es
independiente de todo estmulo antignico y se regula por factores presentes en el
microambiente de los rganos linfoideos primarios. Durante el proceso de maduracin de los
linfocitos B, a partir de la clula progenitora (CFU-B), se distinguen varios estadios de
diferenciaacin, que incluyen las clulas pre-pre-B, las clulas pre-B, clulas B inmaduras y
linfocitos B maduros (Figura 2.). En cada uno de estos estados de maduracin las clulas
expresan distintas molculas en la superficie, utilizadas como marcadores de diferenciacin.
En la Tabla 2.3 se detallan los pesos moleculares y funcin de algunos marcadores de
diferenciacin de las clulas B, que estn siendo utilizados para estudiar y clasificar las
enfermedades originadas por alteraciones en el proceso de diferenciacin linfoctica B
(leucemias y linfomas).
Ya en las clulas pre-B se detecta la presencia de cadena pesada m

intracitoplasmtica, adquirindose en la siguiente fase madurativa la capacidad de sintetizar las
cadenas ligeras y pesadas de las inmunoglobulinas IgM e IgD, detectables en la superficie
celular. En consecuencia, la mayora de los linfocitos B expresan estos dos tipos de
inmunoglobulinas en su superficie. Posteriormente estos linfocitos, mediante un proceso de
reordenamiento gnico, se especializarn en la produccin de una sola clase de las
inmunoglobulinas IgG, IgA, IgM, IgD e IgE Figura 2.8).
Linfocitos B
Morfolgicamente los linfocitos B son indistinguibles de los linfocitos T. Sin embargo, es
posible establecer diferencias de tipo molecular que justifican su distinta funcin (Tabla 2.4). La
caracterstica ms importante de los linfocitos B, por contribuir a su actividad funcional, es el
hecho de que poseen inmunoglobulinas unidas a su membrana citoplasmtica. Estas
inmunoglobulinas son los receptores especficos para los antgenos, de tal forma que cuando
se realiza la unin del antgeno a la inmunoglobulina de superficie, se va a producir la
activacin del linfocito B y su posterior transformacin en clula plasmtica. stas, son clulas
ms grandes que los linfocitos, muy ricas en retculo endoplsmico, y especializadas en la
sntesis y secrecin de grandes cantidades de inmunoglobulinas (Figura 2.). Tambin los
linfocitos B poseen receptores para mitgenos y para el virus Epstein-Barr (EBV). Precisamente
el tratamiento de linfocitos con EBV es el procedimiento de eleccin para la preparacin de
lneas celulares de tipo B (inmortalizacin de una poblacin celular) de gran utilidad en la
actualidad para el estudio de estas clulas. El receptor que utiliza el EBV en la superficie del
linfocito B es el mismo receptor que la fraccin C3d del sistema del complemento o CD21.
Linfocitos T
Los linfocitos T son una poblacin celular muy heterognea formada por, al menos, tres
tipos diferentes de clulas. Entre los marcadores de diferenciacin que definen los linfocitos
cabe destacar el marcador CD2 que acta de receptor para la molcula LFA-3, fundamentales
para la unin entre el linfocito y la clula diana. En la Figura 2.2b se muestra una imagen de un
linfocito T al microscopio electrnico de barrido.
Los linfocitos T poseen receptores especficos para los antgenos. Estas molculas
conocidas como receptores T o TCR, han sido identificadas, utilizando tecnologa de DNA
recombinante, resultando ser altamente polimrficas y de gran importancia funcional.
Estructuralmente constan de dos cadenas glicoprotecas ancladas en la membrana celular y
unidas por puentes disulfuro y que estudiaremos en el captulo 7. El receptor T se encuentra
asociado estrechamente en la superficie celular al complejo molecular CD3.
Tipos de linfocitos T
No todos los linfocitos T son idnticos entre s. Analizando las caractersticas funcionales
de los linfocitos T, se observan al menos tres comportamientos muy distintos entre s que
deben basarse en diferencias moleculares y estructurales de estas clulas. Los tres tipos de
linfocitos T funcionalmente distintos son:
Clulas T de colaboracin (T helper cells).

Clulas T citotxicas (T cytotoxic cells).
Clulas T supresoras/reguladoras (T suppressor cells)
Clulas T de colaboracin (Th)

Esta subclase de linfocitos T participa de forma importante en la iniciacin y desarrollo
de la respuesta inmune, tanto humoral como celular, debido a su capacidad de produccin de
linfocinas, entre las que destacan la interleucina-2 (IL-2), la interleucina-4 (IL-4) y interfern
gamma. Fenotpicamente, la caracterstica esencial de esta subpoblacin linfocitaria viene
definida por la presencia de la molcula CD4 en la superficie celular. Esta molcula es de gran
importancia funcional y tambin se utiliza para la cuantificacin de esta subpoblacin. Se
distinguen dos poblaciones diferentes de estas clulas, Th1 y Th2. La Th1 produce IL-2 e
interern gamma mientras que la Th2 produce IL-4, 5y 6.
Clulas T citotxicas (Tc).
Una vez activada esta subclase de linfocitos T, adquiere capacidad citotxica, siendo,
por tanto, los principales responsables de los fenmenos de citotoxicidad de la respuesta
inmune clular. Estas clulas se caracterizan por expresar el marcador CD8 y, al igual que lo
hacen los linfocitos Th, el complejo TCR-CD3 y otras molculas importantes funcionalmente
tales como CD2 y LFA-1.
Clulas T supresoras (Ts) y/o reguladoras.
Estos tipos de clulas poseen accin reguladora de la respuesta inmune. La
regulacin de la actividad del sistema inmune es de gran importancia en todo el
comportamiento del mismo y, sobre todo, en el desarrollo de tolerancia frente a los
componentes propios del organismo. Estas clulas expresan en su membrana molculas CD8
al igual que lo hacen los linfocitos T citotxicos y su mecanismo de accin no solo no es muy
bien conocido en la actualidad sino que tambin la propia presencia de estas clulas se est
cuestionando.
Clulas Asesinas Naturales (NK)
En la dcada de los aos 70 Herberman observ que los linfocitos obtenidos de
individuos sanos eran capaces de destruir clulas tumorales sin que existiera sensibilizacin
previa. La citotoxicidad mediada por estas clulas se denomin citotoxicidad natural, y a las
clulas encargadas de desarrollar esta actividad se las denomin Natural Killer (NK) o clulas
asesinas naturales. Estas clulas representan aproximadamente el 10% de las clulas
mononucleares de sangre perifrica y fenotpicamente no poseen marcadores ni de los
linfocitos T ni de los linfocitos B y corresponden con un tercer tipo de clulas linfoides conocido
anteriormente como linfocitos nulos o tercera poblacin. Desde el punto de vista morfolgico la
mayora de las clulas con actividad NK corresponden con los linfocitos granulares grandes
(LGL) por su gran tamao y la presencia de abundantes grnulos citoplasmticos (Figura 2.
10). Aunque hoy se sabe que los linfocitos pequeos tambin pueden desarrollar esta accin
citotxica.
Las clulas NK se definen como linfocitos que no reorganizan los genes de las
inmunoglobulinas ni tampoco los del TCR y que, por tanto, no expresan sus productos as
como tampoco el complejo CD3 completo. Por el contrario, expresan en su superficie las
molculas CD16 y CD56 y para su accin citoltica no requieren la expresin de molculas del
MHC en la clula diana. Estas clulas son responsables de la citotoxicidad celulomediada
dependiente de anticuerpos (ADCC), es decir, destruyen clulas con antgenos extraos en su
superficie frente a los que se han producido anticuerpos.
Las clulas NK contribuyen a la defensa frente a clulas infectadas por virus, bacterias,
hongos y parsitos. Pero la principal actividad de la clula NK es su capacidad de actuar frente
al crecimiento de clulas tumorales impidiendo su expansin y la formacin de metstasis. El
sndrome de Shediack-Higashi es una deficiencia selectiva de actividad NK y cursa con una
alta incidencia de tumores.
Las clulas NK derivan de clulas hematopoyticas stem cell presentes en el hgado

fetal o en mdula sea del adulto. Su proceso de maduracin se efecta fuera del timo en
rganos linfoides perifricos, desconocindose los procesos requeridos para que esta
diferenciacin se produzca, y el rgano donde se desarrolla. Esto explica que no se afecten
sustancialmente los niveles de clulas NK en animales atmicos y en inmunodeficiencia severa
combinada observada tanto en animales como el hombre. Tambin las clulas NK podran
derivar directamente, de las clulas doble negativas que sabemos son tambin CD16 positivas
que se encuentran en el timo y que son precursoras de las clulas T.
Clulas mielomonocticas
Las clulas inmunocompetentes de estirpe mielomonoctica son los macrfagos y los
granulocitos. Ambos tipos de clulas proceden de un precursor comn, la CFU-GM o Unidad
formadora de colonias granuloctico-macrofgicas, de la mdula sea. Esta clula progenitora,
mediante un proceso de diferenciacin, dar lugar a dos series de clulas sanguneas: a) la
serie mieloide, cuyo ltimo eslabn madurativo son los granulocitos, y b) la serie monoctica,
cuyo elemento diferenciativo final lo constituyen los macrfagos. El proceso de diferenciacin y
maduracin de las clulas monocticas en mdula sea se denomina monopoyesis y al proceso
de formacin y maduracin de las clulas mieloides se le conoce como mielopoyesis,
Monopoyesis
Durante el proceso de maduracin de los macrfagos, a partir de la clula progenitora
(CFU-GM) de mdula sea, se distinguen varios estados diferenciativos, que incluyen los
monoblastos, promonocitos, monocitos y macrfagos. En cada uno de estos estados de
maduracin las clulas expresan distintas molculas en su superficie, cuya funcin, en la
mayora de los casos, es an desconocida (Figura 2.11). Las mejor caracterizadas son las
molculas CD16 y CD11b que, como ya hemos indicado, actan como receptores para el
extremo Fc de la IgG y para la fraccin C3bi del complemento respectivamente.
En la Tabla 2.5 se detallan algunas caractersticas de estos marcadores, muchos de los
cuales estn siendo utilizados para clasificar las leucemias de estirpe monoctica.
Mielopoyesis
El proceso de diferenciacin de los granulocitos en mdula sea incluye varios estados
madurativos: mieloblasto, promielocito, mielocito, metamielocito y granulocito. En cada uno de
estos eslabones diferenciativos las clulas mieloides expresan distintas molculas de
superficie. Los marcadores de diferenciacin son compartidos, en su mayora, con clulas de
la serie monoctica ya que, como hemos indicado anteriormente, ambas estirpes celulares
tienen un origen comn.
En la Tabla 2.6 se resumen algunas de las caractersticas diferenciales de los
macrfagos y granulocitos. Se observa que los granulocitos carecen de la propiedad de
sintetizar interleucina 1 y adems no poseen la molcula CD14 ni los antgenos de
histocompatibilidad clase II.
Macrfagos
La denominacin de macrfagos engloba, en realidad, a una serie de clulas con
caractersticas ligeramente distintas y con funciones similares, distribuidas en varios lugares del
organismo. As, los macrfagos van a recibir diferentes denominaciones segn los diferentes
tejidos donde se encuentren (Tabla 2.7). A este conjunto de clulas hsticas, se le da la
denominacin genrica de sistema retculo endotelial o sistema mononuclear fagoctico.
Los macrfagos son clulas grandes con un solo ncleo, un aparato de Golgi muy
desarrollado, gran cantidad de lisosomas y muy ricos en enzimas de diferentes tipos, entre los
que destacan proteasas, peroxidasas y lipasas. Estas clulas poseen, adems de la capacidad
fagoctica ya indicada, capacidad de adherencia a los tejidos, al vidrio y al plstico, as como
una gran movilidad en estas superficies (quimiotaxis). Los macrfagos tienen una vida media
de varios meses. Poseen tambin gran actividad metablica, sobre todo en lo que se refiere a
sntesis de protenas, incluso cuando se encuentran en reposo. En la Figura 2.12 se muestra
una imagen al microscopio electronico de barrido correspondiente a un macrfago.
Los macrfagos poseen en su membrana una serie de receptores de gran importancia
funcional, como son los receptores para la fraccin Fc de la IgG, receptores para las fracciones
C3bi y C3b del complemento que se conocen como CD-11b y CD-35 y los receptores para
interleucinas e interferones, todos ellos, de gran inters en la iniciacin de la respuesta
inmune.
Granulocitos
El otro grupo de clulas, los granulocitos neutrfilos, se caracterizan por poseer una
vida muy corta (vida media de menos de 48 horas) por lo que se encuentran en continua
renovacin, para mantener los niveles sanguneos. Son clulas de gran tamao cuya
caracterstica ms llamativa es la segmentacin del ncleo en varios lbulos. Se les denomina
tambin polimorfonucleares neutrfilos. En la sangre estas clulas se encuentran en perodo de
trnsito hacia los tejidos, donde esencialmente ejercen sus funciones, al igual que ocurre con
los otros tipos de polimorfonucleares : eosinfilos y basfilos (Figura 2. ).
Otras clulas
Adems de las clulas tratadas hasta el momento, hay otras clulas que pueden
intervenir como clulas inmunocompetentes. Estas son los eosinfilos, basfilos, clulas
cebadas, clulas dendrticas y clulas de Langerham.
Las clulas dendrticas, son de gran importancia en la presentacin antignica a los
linfocitos y se encuentran en los ganglios linfticos y en el bazo. Fenotpicamente stas clulas
se caracterizan por poseer en su membrana una gran densidad de molculas de
histocompatibilidad de clase II. En la Figura 2.se muestra una imagen de microscopia
electrnica de barrido correspondiente a una clula dendrtica.
Las clulas de Langerham de la epidermis, cuya caracterstica morfolgica ms
llamativa es la presencia de grnulos en raqueta de tenis denominados grnulos de Birbeck,
tambin son ricas en antgenos MHC-clase II. Su misin es captar y transportar los antgenos
extraos hasta los ganglios linfticos de la proximidad, a travs de los vasos linfticos. Durante
su paso por los vasos linfticos estas clulas se adaptan y cambian de morfologa
denominndoselas clulas a vela. Una vez en el ganglio linftico las clulas a vela se
introducen en la paracorteza que es el rea de las clulas T, se interdigitan y presentan el
antgeno a los linfocitos T. Ahora estas clulas presentadoras reciben la denominacin
de clulas interdigitadas reticulares por su particular disposicin en los ganglios. En la
ANTIGENOS DE DIFERENCIACION
En la membrana plasmtica de los linfocitos se han podido identificar mltiples
molculas, gracias al empleo de la tecnologa de los anticuerpos monoclonales (AcMo). A
estos antgenos y se les denominan antgenos de diferenciacin. La celebracin peridica de

talleres (workshops) internacionales, donde los investigadores remiten sus AcMo para la
realizacin de estudios multicntricos, ha propiciado la progresiva sistematizacin de la
abundante informacin obtenida. Estos se adscriben, segn su especificidad, a grupos de
diferenciacin conocidos como CD clusters of differentiation, cada uno de los cuales incluye
a todos aquellos AcMo que reconocen una misma molcula o, en casos excepcionales, un
complejo molecular (ej. CD3). Los antgenos de diferenciacin leucocitaria son estructuras cuya
distribucin no est necesariamente restringida a estos tipos celulares; no obstante, algunos
pueden llegar a constituir, por su patrn selectivo de expresin, marcadores de diferentes
propiedades de la clula, tales como: la estirpe de diferenciacin a la que pertenece, su estadio
madurativo, el estado de activacin metablica o, incluso, su especializacin funcional.
La secuencia habitual seguida en la caracterizacin de un antgeno de diferenciacin
se inicia con el anlisis de su distribucin celular y tisular, habitualmente realizado por tcnicas
de inmunofluorescencia, combinadas con la citrometra de flujo, y mtodos
inmunohistoqumicos. El aislamiento para su anlisis electrofortico se realiza por medio de
tcnicas de inmunoprecipitacin, a partir de lisado de clulas radiomarcadas, que permiten
valorar algunas de las principales caractersticas bioqumicas tales como su masa relativa (Mr),
punto isoelctrico (pI), la presencia de uniones covalentes intercatenarias, y determinadas
modificaciones postraduccionales (ej. glicosilacin, fosforilacin), as como explorar el proceso
de biosntesis.
DISTRIBUCION DE LAS CLULAS INMUNOCOMPETENTES.
Las clulas que componen el sistema linfoide se agrupan formando rganos
discretamente encapsulados o bien acmulos difusos de tejido linfoide (Figura 2.15). Los
rganos linfoides contienen linfocitos en estado variable evolutivo y se clasifican en primarios
(rganos centrales) y en secundarios (rganos perifricos).
Los rganos linfoides primarios constituyen el principal origen de la linfopoyesis, es
decir, donde los linfocitos se diferencian a partir de clulas madre linfoides y proliferan y
maduran hacia clulas con capacidad efectora. En mamferos, incluyendo al hombre, los
linfocitos T son producidos en el timo, mientras que los linfocitos B se producen en el hgado
fetal y en la mdula sea fetal y adulta. En los rganos linfoides primarios, los linfocitos
adquieren sus receptores antignicos especficos, y tambin aprenden a discriminar entre
autoantgenos, que sern tolerados y antgenos extraos que sern atacados.
Los rganos linfoides secundarios que incluyen bazo, ganglios linfticos y MALT
(mucosal associated lymphoid tissue) (amgdalas, placas de Peyer del intestino y cmulos
linfoides del tracto urogenital), proporcionan el medio en el que las clulas implicadas
(macrfagos, clulas presentadoras de antgeno, linfocitos T y B) pueden interaccionar entre s
y con el antgeno.
rganos linfoides primarios
Timo
Es un rgano linfoepitelial de forma bilobulada situado en posicin retroesternal sobre
la cara anterior del pericardio. Deriva de un esbozo epitelial formado a partir de la tercera y
cuarta bolsas faringeas, de aparicin muy temprana en el embrin. En el hombre su estructura
aparece completamente desarrollada en el tercer mes de gestacin. El parnquima tmico est
constituido por una malla de clulas epiteliales rellena de clulas linfoides (denominadas
timocitos) y se organiza formando lobulillos tabicados por trabculas conjuntivas. Dentro de
cada lobulillo se puede distinguir una zona externa o corteza, que contiene la gran mayora de
los timocitos, y una zona interna o medular que es pobre en timocitos (Figura 2.).
El estroma del timo est constituido fundamentalmente por la malla de clulas
epiteliales que adoptan diferentes formas. En la mdula se hallan tambin clulas dendrticas
interdigitadas, derivadas de la mdula sea, que son clulas presentadoras de antgeno. En la
unin corticomedular se hallan tambin macrfagos. En la mdula existen, adems, unas
estructuras denominadas corpsculos de Hassal formados por clulas epiteliales y macrfagos
dispuestos de forma concntrica. Las clulas epiteliales del timo, tanto de la corteza como de
la mdula, expresan una gran riqueza en molculas del MHC clase II, imprescindibles para el
reconocimiento de autoantgenos por los linfocitos T.
Bursa de Fabricio y su equivalente en mamferos
En las aves, los linfocitos B se diferencian en la bolsa de Fabricio, rgano constituido
por un segmento intestinal con pliegues dirigidos hacia una luz central. Estos pliegues se
componen de tejido linfoide formando corteza y mdula. En los mamferos, islotes de tejido
linfoide en el hgado fetal y en la mdula sea fetal y adulta se ocupan de la produccin de
linfocitos B.
Organos linfoides secundarios
Bazo
Se trata de un rgano situado en el hipocondrio izquierdo, detrs del estmago y cerca del
diafragma. Su superficie externa se compone de una cpsula fibrosa con algunas fibras
musculares lisas y penetra profundamente en el parnquima del rgano. Bsicamente, en el
bazo se distingue la pulpa roja que es un reservorio vascular para hemates y la pulpa blanca
que contiene el tejido linfoide, el cual se dispone alrededor de una arteriola central,
presentando reas T y B. Las clulas T se disponen ms prximas y alrededor de la arteriola
central, mientras las clulas B se disponen exteriores a la misma. Tambin son frecuentes las
clulas reticulares dendrticas y macrfagos en el centro germinal, as como macrfagos
especializados en la zona marginal (rea que rodea a los folculos linfoides) que junto a las
clulas foliculares dendrticas de los folculos primarios (folculos no estimulados sin centro
claro germinal) se ocupan de la presentacin del antgeno al linfocito B (Figura 2.)
Ganglios linfticos
Conforman junto a los vasos linfticos una compleja red corporal cuya funcin es filtrar los
antgenos procedentes del espacio extracelular y la linfa durante su circulacin desde la
periferia hasta el ducto torcico.
Los ganglios linfticos, en el humano, son redondeados u ovoides y presentan un hilio
donde los vasos sanguneos entran y salen respectivamente. Bsicamente, se distingue un
rea B denominada crtex, un rea T denominada paracrtex y un rea medular central (Figura
2.).
El paracrtex, contiene linfocitos T y abundantes clulas presentadoras de antgeno
(clulas interdigitantes o histiocitos de la zona T) quienes presentan abundantes antgenos
MHC clase II en superficie. La zona medular presenta algunos cordones linfoides separados
por espacios vasculares (senos medulares) que contienen la mayor parte de las clulas
plasmticas y los macrfagos sinusales de los ganglios linfticos.
El crtex contiene agregados de linfocitos B dispuestos formando folculos primarios y

secundarios. Los folculos primarios son primordiales sin centro claro germinal (anteriores al
estmulo antignico) y los folculos secundarios poseen claros centros germinales (tras el
estmulo antignico). Estos ltimos contienen adems clulas presentadoras de antgeno y
algunos macrfagos, linfocitos T, y clulas NK, quienes junto a los macrfagos sinusales
parecen jugar un papel en el desarrollo de la respuesta de las clulas B, como su adquisicin
de memoria; esta parece ser la funcin primordial de los centros germinales (Figura 2.).
Tejido linfoide asociado a mucosas (MALT)
Acmulos dispersos de tejido linfoide no encapsulado se observan frecuentemente en
diversos rganos, particularmente en reas submucosas gastrointestinales, respiratorias y
urogenitales. Los elementos linfoides se encuentran formando agregados difusos u
organizados formando folculos con centro claro germinal (Figura 2.20). En el tracto intestinal,
se observan elementos linfoides difusos en la submucosa del rgano, y formando folculos
linfoides con centro germinal en las denominadas placas de Peyer. El epitelio que reviste las
placas de Peyer transporta el antgeno y en sentido inverso, la IgA secretora producida por las
clulas plasmticas muy abundantes en el epitelio (Figura 2.).
En el hombre, adems se encuentra abundante tejido linfoide con centros germinales en
las amgdalas farngeas y tambin en paredes bronquiales y a lo largo del tracto urogenital.
CIRCULACIN LINFOCITARIA
Una vez que los linfocitos B y T abandonan los rganos primarios, pasan al torrente
circulatorio, a travs del cual circulan por el organismo. A los tejidos llegan a travs del torrente
sanguneo, siendo recogidas por los vasos perifricos del sistema linftico que las conduce a
los distintos ganglios linfoideos, de donde pueden de nuevo volver a la sangre y a los diferentes
tejidos o almacenarse en el bazo (Figura 2.22). En la Tabla 2.8 se recoge la proporcin de
leucocitos en sangre.
De esta forma el contacto de los linfocitos con los antgenos se puede establecer en el
organismo a nivel de los diferentes tejidos, sistema linftico, bazo y sangre, aunque es
fundamentalmente a nivel de los ganglios y el bazo donde se puede desarrollar una respuesta
inmune, ejerciendo una accin, bien local en ganglios y bazo, o bien general, dado que los
elementos efectores (las inmunoglobulinas y linfocitos activados) pueden ser distribuidos por
toda la economa a travs del sistema circulatorio y linftico. En la Figura 2. se representa un
esquema de las circulaciones sangunea y linftica con la distribucin porcentual de los
linfocitos en sangre, bazo y rganos linfticos.
TEMA 3. INMUNOGLOBULINAS
INTRODUCCION
A finales del siglo XIX, Von Behring observ que los sueros de animales que haban
padecido difteria contenan sustancias que neutralizaban el efecto de la toxina diftrica. A estas
sustancias, que se caracterizaban por ser termolbiles y no dializables, se les denomin
anticuerpos, debido a su capacidad de reconcer a las toxinas bacterianas.
En 1937 Tiselius descubre la electroforesis y aplica este nuevo mtodo al
fraccionamiento de protenas plasmticas, identificando as los anticuerpos como las protenas
del suero que se desplazan ms lentamente. Esta fraccin recibi el nombre de g-globulina,
quedando as asociados temporalmente, los conceptos de anticuerpo y de g-globulina,

como equivalentes(Figura 3.).Posteriormente, se comprueba que no todos los anticuerpos
migran electroforticamente con las g-globulinas, sino que muchos de ellos lo hacen con las a
y b globulinas. Esto se observ analizando los niveles de las distintas fracciones de globulinas
antes y despus de la inmunizacin de animales con un antgeno (Figura 3. ). Se concluye
entonces, que no todos los anticuerpos son gammaglobulinas, por lo que Hebermans propone el
trmino de inmunoglobulinas para designar a todas las sustancias con capacidad de anticuerpo.
Hoy se conocen cinco tipos de inmunoglobulinas: IgM, IgA, IgG, IgD e IgE, cada una de
ellas con ciertas caractersticas distintas (Tabla 3.1).
ESTRUCTURA DE LAS INMUNOGLOBULINAS
Las inmunoglobulinas son glicoprotenas que, segn ya indic Porter en 1959, estn
formadas por cadenas polipeptdicas agrupadas, dependiendo del tipo de inmunoglobulina, en
una o varias unidades estructurales bsicas.
Unidad estructural bsica
Cada unidad est compuesta por cuatro cadenas polipeptdicas unidas entre s por
puentes disulfuro y otras uniones de tipo no covalente (Figura 3.). Para su estudio se han
empleado diferentes procedimientos. Por ejemplo, tras la rotura de los puentes disulfuro por
sustancias de carcter reductor, como el mercaptoetanol, se individualizan las cuatro cadenas
polipeptdicas y stos atendiendo a su tamao, son de dos tipos: de bajo peso molecular
(aproximadadamente 22 KD) y de alto peso molecular (50-70 KD, dependiendo del tipo de Ig).
Los polipptidos de bajo peso molecular reciben el nombre de cadenas ligeras o cadenas
L (Light) y las de alto peso molecular, cadenas pesadas o cadenas H (Heavy) (Tabla 3.2).
Dos cadenas ligeras y dos cadenas pesadas se agrupan de tal manera que existe una
proximidad espacial entre los cuatro extremos amnicos de las cadenas ligeras y pesadas por una
parte, y entre los dos extremos carboxlicos de las cadenas pesadas por otra.
Esta estructura bsica de las inmunoglobulinas puede ser fraccionada mediante la
utilizacin de enzimas (papana, pepsina, etc.), como fue efectuado por Porter en 1959,
obtenindose diferentes tipos de fragmentos (Figura 3 ). El tratamiento con papana produce la
ruptura especfica de las cadenas H, en el espacio comprendido entre el puente disulfuro que las
une entre s y los que las unen a las cadenas ligeras. Se obtienen tres fragmentos: uno
denominado Fc, que determina la actividad biolgica, contiene el alotipo y determina la clase y
subclase de cadena pesada y dos denominados cada uno de ellos Fab, que contienen el idiotipo
y es por donde la molcula se une al antgeno.
Cadenas Ligeras.
Hay dos tipos de cadenas ligeras, estructuralmente diferentes, que se conocen como
cadenas ligeras tipo kappa (k) y cadenas ligeras tipo lambda (l). La familia de genes que codifica
para la cadena ligera k se localiza en el cromosoma 2 y los loci de los genes homlogos que
codifican para la cadena l, en el cromosoma 22. En cada molcula de inmunoglobulina las dos
cadenas ligeras son del mismo tipo, k o bien l, pero nunca existe una de cada tipo en la misma
inmunoglobulina.
Las cadenas ligeras estn formadas por unos 200 aminocidos con la particularidad de
que existen dos puentes disulfuro que unen grupos de unos cincuenta aminocidos.
Concretamente la IgG1 posee 214 aminocidos y su estructura secundaria y terciaria estn
determinadas por dos puentes disulfuro intracatenarios que unen los aminocidos 23 con el 88 y
134 con el 193,(Figura 3.) . A su vez, estas cadenas ligeras tienen otro puente disulfuro
intercatenario, por el cual cada una de ellas se une a una cadena pesada para constituir la unidad
bsica de las inmunoglobulinas. Este puente se encuentra en el ltimo aminocido (214) de la
parte carboxlica para el tipo k y en el penltimo para el tipo l.
Cadenas pesadas.
Estas cadenas poseen unos cuatrocientos aminocidos establecindose entre algunos
de ellos puentes disulfuro (intracatenarios) que asocian unos 60 aminocidos y que condicionan
la estructura secundaria del polipptido. Por ejemplo, las cadenas pesadas de la IgG1 poseen 440
aminocidos y los puentes disulfuro unen el aminocido 22 con el 96, el 144 con el 200, el 261
con el 321 y el 367 con el 425.
Estas dos cadenas pesadas estn unidas la una a la otra por puentes disulfuro
intercatenarios, ya indicados anteriormente, y que pueden ser de uno a cinco dependiendo del
tipo de inmunoglobulina.
En estas cadenas pesadas, y a nivel de los puentes disulfuro intercatenarios, hay una
zona de unos 15 aminocidos, de gran flexibilidad debido a su estructura y constituye lo que se
denomina zona bisagra por donde se deforma la molcula de inmunoglobulina cuando se
produce la unin con el antgeno, facilitndose as su acoplamiento con ste. Los loci de los
genes que codifican para la cadena pesada se localizan en el brazo largo del cromosoma 14.
Parte variable y constante de las cadenas ligeras y pesadas.
Estructuralmente, las cadenas ligeras poseen dos partes: una corresponde al extremo
carboxlico que diferencia las cadenas ligeras en dos tipos k y l, y constituye la parte constante
de las cadenas ligeras (CL). La otra corresponde al extremo amnico, que es muy variable y
constituye la parte variable de las cadenas ligeras (VL) y corresponde a la zona de interaccin
con el antgeno. Las partes constante y variable son prcticamente de igual tamao en las
cadenas ligeras.
Tambin las cadenas pesadas poseen una parte variable y otra constante.
Aproximadamente el tercio del extremo amnico de estas cadenas se caracteriza por ser
estructuralmente muy variable, por lo que se conoce como parte variable de las cadenas pesadas
(VH). La estructura de este fragmento, al igual que en las cadenas ligeras, depende del tipo de
antgeno que reconoce, dado que este extremo tambin participa en la unin de la
inmunoglobulina con el antgeno. Por el contrario, aproximadamente los dos tercios del extremo
carboxlico de todas las cadenas pesadas de un mismo tipo de inmunoglobulinas poseen una
estructura idntica. De ah que esta parte de las cadenas pesadas se conozca como parte
constante de las cadenas pesadas (CH).
Esta parte constante es diferente segn la clase de inmunoglobulina que consideremos,
determinando la existencia de cinco tipos de cadenas pesadas: g, a, m, d y e que definen a su
vez las cinco clases de inmunoglobulinas: IgG, IgA, IgM, IgD e IgE respectivamente. (Figura 3. ).
Caractersticas de los distintos tipos de inmunoglobulinas

Debido a esta distinta estructura, las cadenas pesadas van a presentar distintas propiedades biolgicas, tales como la capacidad de unirse entre s, fijar complemento, fijar la pieza de
secrecin y unirse a macrfagos, neutrfilos y clulas NK. En la tabla 3.1 se recogen las
principales tipos de inmunoglobulinas y en la tabla 3.3 las principales propiedades de las
mismas. Hemos de considerar que incluso entre molculas de una misma clase existen, segn a
la subclase a la que pertenezcan, ciertas diferencias cmo se observa en la Tabla 3.4.
Isotipos
Si inmunizamos un animal de una especie con inmunoglobulinas procedentes de una
especie distinta, la mayora de los anticuerpos generados (antisuero heterlogo) irn dirigidos
contra la regin constante de la inmunoglobulina que hayamos inyectado, permitiendo definir lo
que llamamos el isotipo de una inmunoglobulina determinada. Los genes que codifican para las
distintas variantes isotipicas estn presentes en todos los individuos sanos, es decir, todos los
individuos sanos poseen los genes g1, g2, g3, g4, m, a1, a2, d, e, k y l; que codifican
respectivamente para las regiones constantes G1, G2, G3, G4, M, A1, A2, D y E de las cadenas
pesadas y para las regiones kappa y lambda de las cadenas ligeras. Existen cinco isotipos de
cadena pesada (M, G, A, D y E) y dos de cadena ligera (k y l). As diremos que el isotipo de una
determinada inmunoglobulina es G1 o que esa inmunoglobulina es de la clase G y subclase 1,
que a su vez puede tener unas cadenas ligeras del isotipo kappa o lambda.
Dominios moleculares en las cadenas ligeras y pesadas.

Tanto las cadenas pesadas como las ligeras poseen grupos de aminocidos unidos por
puentes disulfuro intracatenarios. Estos segmentos repetidos en las cadenas L y H se conocen
como dominios. Los dominios de la parte constante de las cadenas pesadas presentan una gran
homologa secuencial no slo entre ellos, sino tambin con la regin constante de la cadena L.
De forma similar, los nicos segmentos variables en las cadenas L y H presentan cierta
homologa entre ellos y en menor grado a los de la regin constante.
La cadena L tiene dos dominios, uno corresponde a la regin variable (VL) y otro a la
constante (CL). La cadena H tiene un dominio en la regin variable (VH) y tres o cuatro en la
constante dependiendo de la clase de inmunoglobulina que consideremos (tres en la IgG, IgA e
IgD y cuatro en las IgM e IgE). Estos dominios de la regin C se denominan CH1, CH2, CH3 y CH4
cuando aparece este ltimo (Figura 3. ).
Los dominios V son los responsables de la unin con el antgeno y los dominios C, con
excepcin del CH1, constituyen el fragmento Fc que, como ya se ha indicado, determina las
propiedades biolgicas de las inmunoglobulinas. Concretamente es por el dominio CH2 por donde
se produce la unin a las protenas del complemento y se establece el enlace con la cadena
glicosilada que completa la molcula glicoproteica de las inmunoglobulinas. Es entre los dominios
CH1 y CH2 donde se establece la zona bisagra..
Regiones hipervariables
Las zonas variables, tanto de la cadena L como H, poseen a su vez unas regiones en
donde se concentra fundamentalmente la variabilidad. Son tres pequeos segmentos que
constituyen las denominadas regiones o segmentos hipervariables o regin determinante de
complementariedad CDR (Complementarity Determining Region), pues determinan la forma del
centro activo que permite el reconocimiento y unin al antgeno. Cada una de estas regiones
hipervariables se componen de 17 a 20 aminocidos y cambios en muy pocos aminocidos de
estas zonas suponen una enorme diversidad de posibilidades de unin al antgeno sin variar el
resto de la molcula (Figura 3. ). El resto de la parte variable es relativamente constante, de
modo que sustituciones en los residuos que la constituyen, no afectan la especificidad de
combinacin; constituye un sostn de trabajo pues su misin es presentar adecuadamente en el
espacio las regiones hipervariables al antgeno, por lo que los residuos que componen esta zona
se denominan residuos FW (Framework).
Molculas adicionales a la unidad estructural bsica.
En las inmunoglobulinas aparecen, adems de las cuatro cadenas polipeptdicas bsicas,
un componente glucdico (que representa el 2-14 % del peso total de la molcula) y en algunas
clases de inmunoglobulinas, glicoprotenas adicionales conocidas como cadena J y pieza de
secrecin (Figura 3. ).
La cadena J es una glicoprotena con un 12 % de azcares y un peso molecular de 15 kD
que une, mediante puentes disulfuro, extremos Fc en la IgA e IgM. La pieza de secrecin es una
glicoprotena de 58 kD de peso molecular que sintetizan las clulas epiteliales de las mucosas y
glndulas exocrinas.
Estructura espacial de las inmunoglobulinas.

Una vez conocida la secuencia primaria de aminocidos en las cadenas peptdicas de las
inmunoglobulinas, la deduccin de su estructura espacial permiti entender la forma en que
millones de diferentes sitios de unin al antgeno son construidos sobre una estructura comn.
Las inmunoglobulinas pueden estar constituidas por unidades bsicas simples, como es el caso
de la IgG, IgD e IgE; en forma de dmeros (dos unidades bsicas unidas), como es el caso de la
IgA, o incluso por hasta cinco estructuras bsicas unidas por sus extremos Fc como es el caso de
la IgM. Esto se debe a la cualidad que tienen las cadenas m y a de unirse entre s. Esta unin se
realiza a travs de la cadena J y mediante puentes disulfuro (Figura 3.).
Las cadenas pesadas y ligeras estn plegadas sobre si mismo, tal como se ha visto
mediante anlisis cristalogrfico (Figura 3.).
Cada uno de los dominios de las cadenas est constituido a modo de cilindros en los
que se encuentran plegados en forma de sandwich dos grupos de cadenas proteicas, una con
tres cadenas polipeptdicas y la otra con cuatro, que presentan estructuras secundarias es de
hoja plegada b. Estas dos capas proteicas estn alineadas paralelamente rodeando un espacio
interior en el que predomina la presencia de aminocidos hidrfobos (Figura 3) . La unin de
esas dos capas se efecta por puentes disulfuro. En las zonas constantes, las capas de cuatro
segmentos estn en el exterior de la molcula y las de tres en el interior, mientras que en las
variables es al contrario; por lo dems, el modelo global de plegado guarda gran semejanza entre
los dominios variables y constantes. Sin embargo, las regiones hipervariables constituyen tres
bucles adicionales que no se someten al plegamiento del resto del dominio.
SUBCLASES DE INMUNOGLOBULINAS.
Se sabe que no todas las Inmunoglobulinas de una misma clase tienen idntica
estructura, sino que dentro de las clases se pueden establecer subclases considerando la
secuencia de aminocidos de la regin constante de las cadenas H y el diferente nmero y
situacin de los puentes disulfuro intercatenarios establecidos entre las cadenas pesadas. As, la
IgG humana se divide en cuatro subclases (IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4) y la IgA e IgM en dos (IgA1 e
IgA2; IgM1 e IgM2) respectivamente. En la tabla 3.4 se exponen las distintas propiedades
biolgicas de las subclases de inmunoglobulinas G.
Las regiones constantes de las cadenas pesadas de estas diferentes clases y subclases
de inmunoglobulinas se conocen, como veremos en el apartado siguiente, con el nombre de
variantes isotpicas y son las mismas en todos los individuos normales de la misma especie.
ALOTIPOS
Las inmunoglobulinas, como protenas que son, pueden actuar como antgenos. Esta
propiedad se ha aprovechado para generar anticuerpos contra ellas, que posteriormente han sido
utilizados como instrumentos para analizar su estructura y funcin. Mediante el uso de los
anticuerpos generados contra las inmunoglobulinas se ha podido detectar la existencia de
variaciones en las mismas.
Si inmunizamos un animal con inmunoglobulinas de otro animal de la misma
especie (Figura 3.) obtendremos antisueros homlogos. Estos antisueros homlogos pueden ir
dirigidos contra las regiones constantes de las inmunoglobulinas, solo contra aquellas zonas que
sean distintas entre ambos animales. Estas diferencias reflejan variaciones mnimas, a veces de
un solo aminocido debidas a diferencias en la secuencia de ADN de los genes que codifican
para las inmunoglobulinas. Los genes que codifican para las inmunoglobulinas se heredan en
forma de alelos mendelianos, por lo que a cada uno de este tipo de variante se le denomina
variante allica y al conjunto de variantes allicas, se le denomina alotipo. Los determinantes
alotpicos o simplemente alotipos, se sitan como hemos dicho en la regin constante de las
cadenas pesadas y ligeras. En el hombre se han descrito tres tipos de alotipos:
Gm en las cadenas g de las IgG.

Am en las cadenas a de las IgA.
Km en las cadenas ligeras k que dan lugar a tres alotipos: Km (12), Km (1) y Km (3),
cuyas diferencias estructurales se recogen en la tabla 3.5.
IDIOTIPOS
Los antisueros homlogos que referamos anteriormente que se producen al inmunizar
animales con inmunoglobulinas de otro animal de la misma especie, tambin pueden ir dirigidos
contra las regiones hipervariables de las cadenas H y/o L de las inmunoglobulinas. Todas las
inmunoglobulinas que poseen los mismos determinantes antignicos en sus regiones
hipervariables se dice que pertenecen al mismo idiotipo, o que poseen los mismos determinantes
idiotipicos. Los determinantes idiotpicos son exclusivos para las molculas producidas por un
clon determinado de clulas productoras de anticuerpos. Todos los animales tienen una
representacin de todas las regiones hipervariables posibles, generadas por recombinacin
gentica (como veremos en el capitulo 5). Estas en condiciones normales, no dan lugar a una
masiva produccin de anticuerpos al encontrarse cada una en cantidades muy pequeas, cuando
experimentalmente inyectamos una cantidad suficiente de inmunoglobulinas de una especificidad
determinada, se desarrollara una respuesta de anticuerpos contra el idiotipo de esa
inmunoglobulina en particular (Figura 3.). Los idiotipos parecen tener importancia fisiolgica en la
regulacin del sistema inmune. Segn la teora de la red de Jerne, frente a los idiotipos se
formaran anticuerpos que al unirse a los mismos formaran un entramado (red) de anticuerpos
unidos a otros anticuerpos que tendran como accin final la regulacin del proceso de sntesis de
nuevas inmunoglobulinas. Como decamos anteriormente, cada uno de los idiotipos se encuentra
representado en tan pequea cantidad que pasa desapercibido para el sistema inmune, sin
embargo, cuando un determinado clon de clulas B reconoce su antgeno especifico, prolifera, se
diferencia a clula plasmtica y produce una gran cantidad de inmunoglobulinas de una misma
especificidad, sus determinantes idiotipicos pasaran a encontrarse en mucha mayor cantidad y
ahora s darn lugar a una respuesta de anticuerpos contra ellos, anticuerpos anti-idiotipo, que
podrn unirse a las inmunoglobulinas que ocasionaron su generacin. La unin de los
anticuerpos anti-idiotipo al idiotipo que los origino podr dar lugar al bloqueo de las
inmunoglobulinas solubles que compartan ese idiotipo o unirse a las inmunoglobulinas de
membrana presentes en linfocitos B de la misma especificidad, o incluso a las regiones
hipervariables del receptor para el antgeno de la clula T que reconocen ese mismo antgeno,
con efectos en cada uno de los casos inhibidores o estimuladores. Los idiotipos se encontraron
mediante estudios serolgicos, al observarse que cuando en un conejo se inyectaban anticuerpos
antisalmonella de otro conejo del mismo alotipo, producan anticuerpos que reaccionaban con el
anticuerpo inyectado, incluso aunque los dos conejos fueran genticamente idnticos. Estos
anticuerpos anti-idiotipo, en la mayora de los casos, estn dirigidos contra la estructura exclusiva
de la porcin fijadora de antgeno y por tanto solo reconocen a inmunoglobulinas de la misma
especificidad, sin embargo en algunos casos, los anticuerpos anti-idiotipo pueden estar dirigidos
contra zonas de la regin hipervariable distintas de la porcin fijadora del antgeno y en este caso
podrn unirse a inmunoglobulinas de varias especificidades distintas regulando la respuesta
inmune frente a varios antgenos.
DISTRIBUCIN DE LAS INMUNOGLOBULINAS.
Las inmunoglobulinas se encuentran distribuidas en todos los fluidos orgnicos de la
economa de los vertebrados y en las membranas de los linfocitos B y clulas plasmticas. Las
cantidades relativas de cada una de las clases de inmunoglobulinas en los diferentes
compartimentos del organismo son muy diferentes.
En el torrente sanguneo predomina la IgG mientras que en las secreciones (saliva,
lgrimas, secrecin bronquial, as como en el lquido cefalorraqudeo y mucosas) la IgA es la
predominante. Los niveles de inmunoglobulinas sricas fluctan ampliamente en funcin de
diversos aspectos, tales como el estado nutricional, la edad, etc. Los valores normales en suero
de un hombre adulto (entre 20 y 40 aos) se recogen en la tabla 3.6.
Ontognicamente se producen mltiples cambios en los niveles de inmunoglobulinas
desde el nacimiento hasta los 8 10 aos, en que estos se estabilizan. En la figura 3.17 se
expresan las concentraciones de inmunoglobulinas desde antes del nacimiento hasta los 5 aos
de edad. Los niveles de Ig G son muy altos en la vida fetal y en las primeras semanas de vida
extrauterina, debido a que esta inmunoglobulina es la nica que pasa de la madre al feto a travs
de la placenta. Durante la lactancia, descienden los niveles de IgG por catabolismo de esas
molculas que no son repuestas por carecer el nio an de la capacidad de sntesis de las
mismas. Tambin en la edad fetal se sintetizan pequeas cantidades de IgM (Figura 3.).
Cuando las inmunoglobulinas se encuentran insertas en la membrana de los linfocitos
(inmunoglobulinas de membrana), actan como receptores de las seales de activacin
antignicas por su capacidad de reconocimiento del antgeno constituyendo el receptor para el
antgeno del linfocito B.
SUPERFAMILIA DE LAS INMUNOGLOBULINAS
La estructura de las cadenas pesadas y ligeras de las inmunoglobulinas posee ciertas
similitudes entre s (por ejemplo, la estructura en dominios equivalentes). Esto hizo pensar que
ambas cadenas procedan de una molcula ancestral comn. Idntica similitud se ha observado
con lab-2-microglobulina y con una gran cantidad de molculas, todas ellas agrupadas, por tanto,
bajo el mismo epgrafe de superfamilia de las inmunoglobulinas. Estas molculas son: el receptor
T para el antigeno, las molculas de histocompatibilidad clase I y II, LFA-3, ICAM-1 y otras
muchas que irn siendo estudiadas en diferentes captulos de este libro, especialmente en el
captulo 8, donde se estudian las molculas de adhesin (Figura 3.).
FUNCIN DE LAS INMUNOGLOBULINAS.
La funcin esencial de las inmunoglobulinas es la de unirse al antgeno. De esta manera
las inmunoglobulinas actan como receptoras de seales antignicas o bien pueden colaborar en
la destruccin antignica. La primera funcin se presenta cuando las inmunoglobulinas se
encuentran insertas en la membrana de los linfocitos B (inmunoglobulinas de membrana), y para
la segunda requieren la colaboracin del complemento, macrfagos, neutrfilos y clulas NK, que
tienen la propiedad de unir las inmunoglobulinas por su extremo Fc.
Unin antgeno anticuerpo.
Los eptopos de un antgeno pueden estar formados por aminocidos consecutivos en la
secuencia de la protena, como las protenas se encuentran normalmente dobladas sobre si
mismas segn lo que llamamos estructura terciaria, en la mayora de los casos los anticuerpos
generados contra este tipo de eptopos solo reconocern a la protena desnaturalizada o
linearizada y por ello se les llama epitopos lineales. En la mayora de los casos los eptopos
suelen estar formados por aminocidos del antigeno que solo se encuentran suficientemente
cerca unos de otros en la protena nativa, es decir en la protena que tiene estructura terciaria
conservada, es decir una conformacin adecuada, por lo que a estos eptopos se les llama
epitopos conformacionales (Figura 3. ). Cuando inmunizamos un animal con una protena,
generaremos una serie de anticuerpos dirigidos contra los distintos eptopos de la misma, todos
esos anticuerpos se encontraran circulando en el suero del animal al que, una vez extraido,
llamaremos antisuero. El tipo de anticuerpos que compondrn ese antisuero depender en gran
medida de la forma en que hayamos preparado la protena para la inmunizacin, si la hemos
preparado desnaturalizada, solo existirn eptopos lineales, mientras que si hemos inyectado la
protena en su estado nativo, coexistirn en el antisuero anticuerpos que reconozcan eptopos
conformacionales con otros que reconozcan eptopos lineales. En el caso de anticuerpos
monoclonales, todas los anticuerpos procedern de un clon de clulas plasmticas y por tanto
estarn dirigidos contra un solo eptopo que ser de un tipo u otro. La importancia radica, en que
dependiendo del tipo de epitopos que reconozcan los anticuerpos, las aplicaciones diagnosticas o
de investigacin sern distintas. En general, los anticuerpos que reconocen epitopos lineales
sern tiles para tcnicas de Western Blot (donde se analiza la protena generalmente
desnaturalizada) mientras los que reconocen eptopos conformacionales lo sern para tcnicas
de inmunofluoresencia, inmunoprecipitacin, etc.
Paratopo.
Las inmunoglobulinas se unen a los epitopos de los antgenos por sus sitios activos,
constituidos como se ha indicado anteriormente, por los segmentos variables de las cadenas
pesadas y ligeras (Figura 3. ) y donde intervienen principalmente las regiones hipervariables.
Esta zona de unin al eptopo se conoce con el nombre de paratopo.
Fuerzas de unin Ag-Ac
La unin del antgeno (Ag) con el anticuerpo (Ac) o inmunoglobulina es semejante a la
que se establece entre la enzima y su substrato o entre protenas que pertenecen a cualquier va
de sealizacin intracelular. Estas interacciones se deben a la formacin de mltiples enlaces no
covalentes (enlaces de hidrogeno, interacciones electrostticas, de Van der Waals e hidrfobas),
cada uno de los cuales por si solos son dbiles. Sin embargo, como se establecen mltiples
interacciones, la fuerza total de la unin puede ser muy elevada. Para que las interacciones
mencionadas lleguen a ser efectivas, los grupos entre los que se establece deben estar situados
a distancias muy cortas, y para que esto sea posible y se puedan producir un gran numero de
interacciones, el eptopo y el paratopo deben encajar perfectamente, dependiendo de ello la
fuerza de la interaccin que conocemos con el nombre de afinidad. La afinidad esta interaccin
es de vital importancia, por cuanto de ello depender tanto la utilidad diagnsitca y de
investigacin de un anticuerpo como su importancia fisiopatolgica. Para cuantificar la afinidad de
una interaccin, deberemos entender primero una serie de conceptos de los que nos ocuparemos
a continuacin. Al tratarse de uniones no covalentes, la unin Ag/Ac ser reversible de modo que
cuando el antgeno y el anticuerpo se mezclan en solucin, se estarn formando y disociaciando
complejos constantemente de acuerdo con la siguiente ecuacin:
KA
Ag + Ac = == Ag-Ac
KD
donde ka representa la constante de velocidad y kd la de disociacin.
Llegara un momento en que la velocidades de asociacin y disociacin se igualen, es
decir, que el numero de complejos Ag/Ac que se formen sea el mismo que el que se disocie,
entonces decimos que se ha llegado a una situacin de equilibrio dinmico. Una forma indirecta
de medir la afinidad de la interaccin de una pareja Ag/Ac, ser medir la velocidad de asociacin
y disociacin antes de que se llegue al equilibrio, lo cual puede realizarse actualmente mediante
biosensores. Cuanto mayor sea la velocidad de asociacin y menor la de disociacin mayor ser
la afinidad de la interaccin de esa pareja Ag/Ac. Otra forma complementaria y ms directa de
cuantificar la afinidad de la interaccin Ag/Ac, es hacerlo una vez que se ha alcanzado el
equilibrio y utilizando concentraciones bajas de anticuerpo. En estas condiciones la concentracin
de antgeno que permite que la mitad de los anticuerpos estn unidos a ellos y la otra mitad libre,
medida en molaridad, se denomina constante de disociacin (KD) y es una medida directa de la
afinidad de la interaccin. Cuanto menor sea la KD mayor ser la afinidad puesto que indica que
es necesaria una menor concentracin de antgeno para que la mitad de los anticuerpos estn
ocupados. La inversa de la KD es la constante de asociacin (KA) cuyo valor es directamente
proporcional a la afinidad de la interaccin. Para determinar experimentalmente estas constantes
tendremos que conocer las concentraciones de antgeno libre y unido, para lo cual existen varios
mtodos entre los que destacan anlisis mediante dialisis de equilibrio (Figura 3.). Esta tcnica
se basa en la utilizacin de una membrana semipermeable de un poro tal, que permita el paso de
un antgeno suficientemente pequeo (un hapteno) pero no del anticuerpo. A concentraciones
bajas de antgeno, la concentracin de anticuerpo libre ira bajando rpidamente hasta que se
alcance el equilibrio, puesto que todo el antgeno que entre a travs de la membrana
semipermeable quedara retenido por el anticuerpo. Realizando el experimento anterior con varias
concentraciones de antgeno, podremos encontrar aquella en la que la mitad del anticuerpo se
encuentra unido al antgeno que como hemos dicho corresponde a la KD. La afinidad que
hayamos calculado corresponder exclusivamente a la de la interaccin de esa pareja Ag/Ac. Un
determinado anticuerpo podr unirse a mas de un antgeno con afinidades distintas en cada
caso.
Avidez de la unin Ab-Ac
Como apuntbamos anteriormente, el fenmeno de la unin Ag/Ac es en realidad mucho
ms complejo, pues cada uno de los antgenos poseen varios eptopos distintos, por lo que
podrn unir mas de un anticuerpo. Cada molcula de anticuerpo, por su parte, podr unir al
menos dos molculas de antigeno, una por cada Fab y en el caso de la IgM hasta diez molculas
(como se comento anteriormente las inmunoglobulinas IgM se ensamblan en unidades
funcionales constituidas por cinco molculas de anticuerpo). Finalmente en un antgeno, un
determinado eptopo puede estar representado varias veces siendo capaz de unir varias
molculas del mismo anticuerpo. La fuerza total de la interaccin que considera todas las
interacciones eptopo/paratopo que tienen lugar entre antgenos y anticuerpos multivalentes (con
varios sitios de unin), se denomina avidez y es mucho mayor que la suma de las afinidades
puesto que las distintas interacciones se estabilizan entre ellas. Estas interacciones multivalentes
poseen una gran importancia fisiopatolgica por cuanto cuando se encuentren Ag y Ac en
solucin, como es el caso del plasma o los tejidos, se formaran agregados constituidos por
muchas molculas que denominamos Inmunocomplejos. A concentraciones equivalentes de Ag y
Ac estos inmunocomplejos sern de gran tamao y podrn quedar atrapados en los tejidos,
iniciando una respuesta inflamatoria y dando lugar a las llamadas enfermedades por deposito de
inmunocomplejos.
Especificidad de la unin Ag-Ac
La unin entre el Ag y la Ig tiene una gran especficidad, de tal manera que una Ig se
unir fundamentalmente y con mayor avidez, a un antgeno determinado. En algunos casos la
inmunoglobulina podr unirse a antgenos con eptopos muy similares, aunque en este caso la
afinidad de la unin es mucho menor (Tabla 3.7). Tambin es posible que un mismo eptopo se
encuentre con dos antgenos diferentes en cuyo caso el anticuerpo reaccionara con los dos
antgenos, dicindose entonces que existe una reactividad cruzada.
La consecuencia final de la accin de las inmunoglobulinas es la de destruir al antgeno
y/o neutralizar los efectos nocivos de los mismos. Para la consecucin de estos objetivos todas
las inmunoglobulinas poseen, como ya se ha indicado, una caracterstica esencial y comn, que
es la de unirse especficamente al antgeno, caracteristica que depende como hemos dicho, de
sus regiones hipervariables contenidas en el fragmento Fab. Sin embargo, tanto la neutralizacin
como la destruccin del antgeno, lo consiguen de muy diversas formas, dependiendo del tipo y
manera de encontrarse el antgeno y tambin del tipo de inmunoglobulina que interviene en cada
caso utilizando para ello, las regiones constantes y concretamente sus extremos Fc.
Tras la unin del antgeno y la inmunoglobulina, sta puede anular la accin del antgeno
por neutralizacin, precipitacin o aglutinacin del mismo. As si la Ig es especfica para una
toxina bacteriana, cuando se produce la unin Ag-Ac (toxina-antitoxina), quedan neutralizados los
efectos txicos de la toxina. De ah que clsicamente, cuando no se conoca la estructura de las
inmunoglobulinas, se las denominase antitoxinas, precipitinas o aglutininas, en funcin de la
reaccin que se detectaba en cada caso.
Propiedades biolgicas de las inmunoglobulinas.
Los fenmenos de neutralizacin, precipitacin y aglutinacin de los antgenos no son
suficientes por s solos para la destruccin y total eliminacin de stos. Para ello, adems de las
inmunoglobulinas se requiere de la colaboracin de otros muchos elementos, tales como el
sistema del complemento, macrfagos, polimorfonucleares o clulas NK.
Podemos decir que las inmunoglobulinas, al detectar los antgenos y producirse la
subsiguiente unin a ellos, actan como trans-ductores de la informacin de la presencia de los
mismos que seran destruidos por el complemento, macrfagos, los polimorfonucleares o clulas
NK a los que dan especificidad.
Opsonizacin.
Cuando se produce la unin de antgeno e inmunoglobulina G se producen una serie de
cambios alostricos en el extremo Fc de la IgG que hacen que se una a receptores que se
encuentran en la membrana de macrfagos y polimorfonucleares. A este fenmeno se le
denomina opsonizacin (Figura 3.). Al producirse esta unin, los macrfagos se activan,
inicindose el fenmeno de fagocitosis y subsiguiente destruccin de los complejos antgeno
anticuerpo por los procesos lticos intracelulares, propios de la accin de los enzimas contenidos
en los lisosomas de estas clulas. Estos receptores pueden ser de distinta naturaleza,
conociendose en la actualidad tres de estos receptores: FcgRI, FcgRII y FcgRIII, conocidos en la
actualidad como CD64, CD32 y CD16 respectivamente. Adems de en los macrfagos estos
receptores se encuentran en otras clulas como plaquetas, linfocitos B y NK (Tabla 3.8). Cuando
se produce la unin a clulas NK estas se activan y lisan a las clulas portadoras del antgeno
por un mecanismo conocido como citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC).
Cuando la inmunoglobulina que se une a un antgeno es de las clases IgM o IgG, en sus
extremos Fc se producen ciertos cambios alostricos gracias a los cuales stas adquieren la
propiedad de fijar y activar uno de los componentes del complemento. Las fracciones activas del
complemento poseen diferentes acciones muy importantes en la defensa del organismo, una de
las cuales es la lisis celular. Este fenmeno se conoce con el nombre de citotoxicidad mediada
por el complemento.
Adems de estas funciones, las inmunoglobulinas tienen la capacidad de ser esenciales
en el fenmeno de reconocimiento del antgenos por parte de linfocitos B cuando se encuentran
ligadas a la membrana celular de estas clulas como inmunoglobulinas de membrana
constituyendo el receptor para el antgeno del linfocito B. Esta propiedad ser estudiada
extensamente en captulos posteriores.
En la actualidad y utilizando tcnicas de Ingeniera Gentica, podemos construir
anticuerpos monoclonales que contengan una especificidad determinada y que sean del isotipo
que deseemos para que predominen unas u otras funciones biolgicas. Incluso podemos, con
fines teraputicos generar anticuerpos monoclonales de una determinada especificidad en
ratones y posteriormente aislar el ADN que codifica para las regiones hipervariables que
confieren la especificidad y fusionarlo con el ADN que codifica para las regiones constantes
humanas, estos anticuerpos monoclonales humanizados tendrn indudables ventajas desde el
punto de vista teraputico al no ser considerados como extraos por el sistema inmune humano
(ver captulo 4).
Propiedades y funcin de cada una de las inmunoglobulinas
Aunque en los apartados anteriores se ha hecho mencin a las propiedades y funcin de las
inmunoglobulinas, a continuacin estudiaremos brevemente y por separado las caractersticas
funcionales ms importantes de cada una de ellas (Figura 3.).
Inmunoglobulina G.
Son las inmunoglobulinas ms abundantes y representan ms del 70 % de las Igs sricas
totales; las diferentes subclases se presentan en proporciones muy diferentes. La IgG 1 es la
subclase ms frecuente (ms del 60 %), seguida de la IgG 2 (aproximadamente un 18 %),
mientras que IgG3 e IgG4 se encuentran en mucha menor proporcin.
Esta Ig posee capacidad neutralizante, precipitante, de fijar complemento, de unirse a clulas
NK y a macrfagos (opsonizacin) y son capaces de atravesar activamente las membranas
biolgicas. La propiedad de atravesar activamente las membranas biolgicas es de sumo inters
por lo que, adems de ejercer esta inmunoglobulina, su efecto en toda la economa del
organismo, lo hace tambin en el feto al atravesar la placenta desde la madre, merced a la

existencia de receptores para la porcin Fc en el sincitiotrofoblasto.
Como el feto slo sintetiza pequeas cantidades de inmunoglobulinas, adquiere de este
modo la posibilidad de defensa, no solamente mientras se encuentra en el seno materno, sino
incluso durante la lactancia, perodo en el cual todava no ha desarrollado la capacidad total de
sntesis de inmunoglobulinas.
Sin embargo, este paso de IgG desde la madre al feto no siempre es beneficioso para el feto.
De todos es sabido que cuando hay incompatibilidad del tipo Rh entre la madre y el feto, se
puede desarrollar el sndrome de eritroblastosis fetal como consecuencia de la destruccin de
glbulos rojos fetales, de nefastas consecuencias si no se acude a tiempo. Esto no se presentara
si la IgG no pasase de la madre al feto
La IgG se sintetiza tardamente tras un primer contacto con el antgeno, sin embargo, tras un
segundo contacto la mayora de las Igs formadas pertenecen a esta clase (Respuesta
Secundaria) ( Tabla 3.9).
Inmunoglobulina M.
Los anticuerpos del tipo IgM son los que mas rpidamente se forman en respuesta a un
estmulo antignico (Respuesta primaria). Esta Ig se caracteriza tambin por poseer capacidad
neutralizante, precipitante, aglutinante, fijar complemento, activar la respuesta inmune, sin
embargo no atraviesa activamente las membranas biolgicas. Esta ltima propiedad hace que
esta inmunoglobulina ejerza su accin normalmente en los espacios intravasculares.
Representa del 5 al 10 % de las Igs sricas totales y junto a la IgD es la ms frecuentemente
encontrada en la superficie de los linfocitos B como inmunoglobulina de membrana.
Inmunoglobulina A.
Esta inmunoglobulina posee capacidad neutralizante y precipitante, mientras que su
capacidad de fijar complemento y de opsonizacin son muy dbiles, limitndose su efecto a
neutrfilos y no a macrfagos.
La propiedad ms importante de esta inmunoglobulina viene determinada por su capacidad
de unirse por el extremo Fc a la pieza secretora, gracias a la cual puede ser secretada por las
mucosas y glndulas exocrinas, ejerciendo su accin ms importante en la superficie de mucosas
y lquidos biolgicos (sobre todo IgA2), tales como el liquido cefaloraquideo, secrecin bronquial,
lgrima, saliva, etc. Esto es importante porque as protegen precisamente los puntos ms
vulnerables del organismo, esto es, las puertas de entrada al mismo, como son ojos, boca,
aparato digestivo, sistema respiratorio, vagina, etc. No olvidemos que, por ejemplo, si
desplegamos la mucosa del aparato respiratorio, la superficie que cubriramos es de unos 300
2
m , superficie que se encuentra en contacto directo con el exterior a travs del aire que se
respira. Se deduce de ello que, sin duda, deben ser importantes los mecanismos de defensa local
entre los cuales la IgA tiene un papel esencial.
Esta inmunoglobulina se encuentra tambin en la leche materna. Los niveles de todas las
inmunoglobulinas, a excepcin de la IgG en recin nacidos son muy bajos, siendo por tanto de
gran significacin el hecho de que la IgA se transfiera desde la madre al lactante a travs de la
secrecin lctea. De ah que tengamos que insistir en que los lactantes se amamanten en el
mayor grado posible directamente por las madres y no con leche de otros orgenes, a lo que
actualmente existe excesiva tendencia.
La IgA recibida de la madre ejerce un importante papel de defensa a nivel de todo el aparato
digestivo. En ello parece que influyen las especiales caractersticas de pH gstrico del lactante
que es menos cido que en el adulto y una especial resistencia de esta inmunoglobulina frente al
mismo, por lo que no se destruye a su paso por el estmago.
Inmunoglobulina D. .
La concentracin de esta inmunoglobulina en suero es muy baja. Hasta fechas muy recientes
no se haba demostrado que esta inmunoglobulina posea capacidad de unirse a antgenos, por
lo que se dudaba de que actuase con funcin de anticuerpo. Sin embargo, aunque actualmente
se ha demostrado su accin de anticuerpo, no se conoce con precisin cules son sus funciones
especficas, aunque se piensa que colabora de forma importante en la activacin de linfocitos B al
actuar como receptor en la superficie de los mismos.
Inmunoglobulina E.
En muchos individuos alrgicos esta inmunoglobulina se presenta en grandes cantidades. El
estmulo para su sntesis puede proceder de una gran variedad de antgenos, a los que en este
caso se conocen como alergenos. Estos alergenos pueden penetrar en el organismo a travs de
la piel o de las mucosas respiratoria, ocular, del aparato digestivo, etc., as como por inyectables,
como es el caso de la penicilina u otros medicamentos.
La vida media de la IgE en sangre perifrica es de 24-48 horas. No tiene capacidad de
atravesar la placenta, por lo tanto, las reacciones de hipersensibilidad inmediata no pueden
transferirse de manera pasiva de la madre al feto. Sin embargo, puede existir una predisposicin
de tipo familiar a padecer enfermedades de naturaleza alrgica. Esta predisposicin parece estar
relacionada con una tendencia a producir anticuerpos de tipo IgE en la respuesta secundaria
frente a antgenos, en lugar de IgG que seria la respuesta normal en individuos no alrgicos.
La IgE se encuentra en forma libre en sangre (Tabla 3.10) en donde se observa que los
niveles cambian a lo largo de la edad. Tambin la IgE se encuentra en otros lquidos biolgicos
as como unida a basfilos y clulas cebadas, gracias a la propiedad que tiene esta
inmunoglobulina de unirse por su extremo Fc a receptores de superficie presentes en dichas
clulas. Estas clulas se caracterizan por encontrarse en la piel y mucosas y por contener
abundantes grnulos citoplasmticos, ricos en sustancias vasoactivas que liberan una vez se
activan.
TEMA 4. GENTICA DE LAS INMUNOGLOBULINAS.

INTRODUCCION.
Los linfocitos B, al reconocer un determinado antgeno mediante las inmunoglobulinas
de superficie, se activan, proliferan y diferencian hasta clulas plasmticas que poseen la
propiedad de sintetizar y secretar inmunoglobulinas en grandes cantidades. La sntesis de
inmunoglobulinas, como glicoprotenas que son, se efecta en los ribosomas de las clulas
plasmticas, donde tiene lugar la traduccin de RNA mensajero correspondiente a las cuatro
cadenas peptdicas. Posteriormente se producir el proceso de la glicosilacin de dichas
cadenas y la secrecin de las mismas.
El conocimiento de la heterogeneidad de las inmunoglobulinas debida a su diversidad
de clases y a la gran variabilidad estructural derivada de la parte variable de las mismas, ha
producido, a su vez, una gran inquietud por conocer a nivel gentico el proceso de regulacin y
sntesis de estas molculas.
Hoy ya conocemos los mecanismos ms relevantes por los cuales el organismo es
capaz de sintetizar millones de molculas de inmunoglobulinas diferentes con una cantidad de
material gentico limitado.
GENES IMPLICADOS EN LA SNTESIS DE INMUNOGLOBULINAS.
A partir de los estudios de Tonegawa en 1976, aparece un acumulo de conocimientos
por los que se sabe que la sntesis de las cadenas ligeras y pesadas se regula por genes que
se encuentran en cromosomas distintos (Figura 4.1).
Esto fue puesto de manifiesto empleando tcnicas de digestin enzimtica del DNA de
clulas B y posterior hibridacin con sondas de DNA complementario (cDNA), mediante la
tcnica deSouthern Blot (ver capitulo Mtodos). Mediante esta tcnica, se pudo observar que
usando un cDNA marcado radioactivamente como sonda correspondiente a parte de
una cadena pesada, ste se una a segmentos de DNA de lneas celulares de ratn que
contenan el cromosoma 12. Por otra parte, empleando igualmente sondas de cDNA marcadas
radioactivamente frente al DNA de cadenas ligeras de tipo k, stas se unen a clulas que
contienen el cromosoma 6, mientras que las sondas para DNA de cadenas ligeras l lo hacen
al cromosoma 16. En la tabla 4.1 se especifica, tanto en humano como en ratn, el cromosoma
donde se encuentran estos segmentos de genes.
Segmentos de genes y sntesis de inmunoglobulinas.
Otra caracterstica importante de la formacin de inmunoglobulinas es que, en la
sntesis de cada una de las cadenas de inmunoglobulinas participan varios segmentos de
genes de cuyas combinaciones resultan los diversos genes funcionales, responsables directos
de la codificacin de cada una de las cadenas de inmunoglobulinas. Esto explica las mltiples
posibilidades de formacin del gran nmero de inmunoglobulinas partiendo de un limitado
material gentico. La codificacin multignica de las inmunoglobulinas fue demostrada tambin
por Tonegawa analizando DNA de clulas embrionarias de ratn y de un mieloma tambin de
ratn.
Tipos de segmentos gnicos
Estos segmentos codifican por separado la parte variable, la parte constante y las
partes por las que ambas regiones se unen, esto es, las regiones bisagra. Los segmentos que
codifican la parte variable son de dos tipos, segmentos V y segmentos D, responsables de la
variabilidad y diversidad de las inmunoglobulinas respectivamente. Le siguen los segmentos
J o de unin, responsables de unir los fragmentos anteriores con los segmentos C que
codifican para la parte constante. El nmero de segmentos responsables de la codificacin de
la parte constante es muy limitado en relacin con el nmero de segmentos que codifican la
parte variable de las inmunoglobulinas (Figura 4.2).
En las clulas embrionarias los segmentos de una misma clase se encuentran
separados del resto de tal forma que, por una parte, se encuentran los segmentos V, por otra
los D, los J y los C. Estos segmentos estn contenidos en los exones, que son aquellos
fragmentos de DNA que sern transcritos para dar lugar a la sntesis de protenas, y que se
encuentran separados entre s por fragmentos de DNA no codificadores de protenas
denominados intrones.
En consecuencia se puede concluir que: La sntesis de las cadenas ligeras y pesadas
de las inmunoglobulinas est regulada por cromosomas distintos. En esta sntesis participan
varios segmentos de genes que combinados dan lugar a los genes funcionales responsables
de la codificacin de las cadenas de las inmunoglobulinas.
REORDENAMIENTO DE LOS SEGMENTOS GENICOS DE LAS INMUNOGLOBULINAS.

Las observaciones anteriores se interpretaron como que a lo largo del proceso
madurativo de los linfocitos B, se produce un reagrupamiento de segmentos de genes para la
iniciacin de la sntesis de las cadenas ligeras y pesadas. A este fenmeno se
denomina recombinacin intracromosmica.
A medida que se produce el proceso madurativo de los linfocitos B, los segmentos V,
D y J cambian de sitio en el cromosoma de tal manera que se colocan juntos. Posteriormente
este conjunto V/D/J se reagrupa con el segmento C correspondiente quedando constituido en
consecuencia un gen con toda la informacin de la cadena. Cuando el linfocito B es maduro
posee ya reagrupados los genes correspondientes a sus cadenas ligeras y pesadas y slo
podr producir un determinado tipo de anticuerpo.
Reordenamiento de genes de cadenas ligeras

En la sntesis de cadenas ligeras participan los segmentos V, J y C (es decir, no hay
genes D para la cadena ligera). As pues, en el proceso de recombinacin de genes de
cadenas ligeras se acopla un segmento V con un segmento J y el conjunto V/J se recombina
con el segmento correspondiente a la parte constante C. El proceso de transcripcin se hace
de tal manera que el RNA mensajero contiene informacin secuenciada V, J y C. En la Figura
4.3 se esquematiza el proceso de recombinacin y trascripcin ocurridos en la lnea celular B
conducente a la sntesis de cadenas k.
Reordenamiento de genes de cadenas pesadas
A su vez, un proceso similar, si bien esta vez en dos etapas, ocurre para la formacin
de una cadena pesada. En este caso participan los segmentos V, D, J, y C. Primero se
produce la recombinacin entre un segmento D y un segmento J. En la segunda fase, este
conjunto D/J se recombina con un segmento V. El complejo V/D/J se puede por ltimo
recombinar con cada uno de los segmentos que codifican las regiones constantes, segn la
inmunoglobulina a formar. El proceso de recombinacin con los genes C tiene lugar a nivel de
RNA. Vamos a encontrar en este momento el siguiente orden: el segmento lder; un fragmento
V/D/J reordenado y unido y a continuacin cada uno de los genes que codifican para las
regiones constantes (Cm; Cd; Ct, etc) separados entre s por los correspondientes intrones y a
su vez precedidos por sus respectivos promotores. Se piensa que el gen C m es el situado en
primer lugar en la secuencia de genes C, seguido de Cd. En clulas B en reposo, el nico y
largo trnscrito primario de RNA va a contener la informacin del complejo V/D/J ms la
correspondiente a los genes Cm y Cd. Mediante mecanismos de procesamiento del RNA que
analizaremos posteriormente, se va a proceder a la escisin en el trnscrito primario de la
informacin correspondiente a Cm o bien a Cd. Se da lugar de esta manera a una
inmunoglobulina de tipo IgM o IgD, y este mecanismo es adems el responsable de que en las
clulas B en reposo se encuentre la expresin simultnea de ambas inmunoglobulinas.
En la Figura 4.4 se esquematiza el proceso de recombinacin y transcripcin ocurrido
en la lnea celular B concerniente a la sntesis de cadenas pesadas en este caso del tipo m3.
En este caso la recombinacin se ha producido entre VH3, D1, JH2, responsables de la parte
variable de la cadena pesada que se ha recombinado con la parte constante del segmento del
gen Cg3, que originar la cadena pesada correspondiente a la IgG3. En el caso de los genes V
de las cadenas pesadas, al igual que hemos visto para las cadenas ligeras, junto a su
segmento gnico se encuentran las estructuras lider y cerca de las mismas se sitan las
secuencias promotoras.
Segmentos lider y promotores.
Asociados a los segmentos V y situados en direccin 5' de los mismos, existen otros
segmentos gnicos conocidos como segmentos lder (L). Estos segmentos gnicos codifican
un pptido pequeo que servir de gua tanto para las cadenas ligeras como pesadas a su
paso por el retculo endoplsmico pero que se separa de estas cadenas antes de que las
mismas se unan entre s para formar la molcula completa de inmunoglobulina. Junto a estos
segmentos gnicos se sitan otros conocidos como segmentos promotores y que son
responsables de iniciar la seal del proceso de transcripcin del mRNA.
La secuencia promotora comienza normalmente a una distancia de alrededor de 25
pares de bases antes del lugar de inicio de la transcripcin y contina alejndose del mismo en
direccin 5', aunque su localizacin y longitud no son siempre las mismas. El lugar preciso de
la iniciacin de la transcripcin es reconocido por la combinacin conservada de cuatro bases
en las que se alternan timina y adenina, para formar lo que se conoce como caja "TATA",
siendo continuada por el triplete de bases que codifica el aminocido metionina, que suele ser
el primero codificado de manera casi constante en la mayora de los genes eucariticos.
Dentro de las secuencias promotoras, vamos a encontrar los denominados motivos de
secuencias, esto es, secuencias del DNA a las que se van a unir de manera especfica ciertas
protenas nucleares que son las que van a regular su funcin. En definitiva, las protenas que
van a unirse a estos motivos en el DNA van a regular, en ltima instancia, la transcripcin del
DNA, por lo que tambin estos factores o protenas de unin son conocidos como factores
transcripcionales. En el caso de los genes de las inmunoglobulinas, encontramos en la regin

promotora la presencia conservada de un octmero (secuencia de ocho bases) en la regin 5'
no traducida de los genes Vk, mientras que la secuencia complementaria pero invertida de este
octmero es encontrada en los genes VH. La presencia de este octmero se ha revelado de
gran importancia en el control gentico de la sntesis de inmunoglobulinas, en tanto que
confieren a las regiones promotoras de los genes de las inmunoglobulinas contenidos en las
clulas B no slo de especificidad tisular (esto es, slo las clulas B producen
inmunoglobulinas), sino que adems es necesaria para la adecuada funcin del promotor. Esto
parece alcanzarse mediante la unin especfica de varios factores transcripcionales, entre los
que sealamos los conocidos como Oct-1, Oct-2 y Oct-3. De manera general, los promotores
eucariticos pueden contener varias regiones de unin especficas para cada uno de los
factores de transcripcin que regulan su funcin.
Regulacin del proceso de reordenacin de las inmunoglobulinas.
Este complejo proceso de recombinacin que hemos estudiado hasta ahora ha de
tener, necesariamente, un mecanismo de regulacin muy estricto. Este mecanismo est
constituido por, al menos, los genes RAG-1 y RAG-2 (genes actividores de la recombinacin 1
y 2).
Genes RAG-1 y RAG-2
Estos genes fueron descubiertos en el laboratorio de David Baltimore en 1990. El
descubrimiento previo de que cada uno de los genes V, D y J era precedido de una corta
secuencia nica de DNA cuya funcin es la de servir de seal para los procesos de
recombinacin, y que es conocida como secuencia de seal de recombinacin (SSR) permiti
la identificacin de estos genes. Utilizando un sistema experimental de transfeccin en diversas
clulas de vectores retrovirales conteniendo genes de resistencia al cido micofenlico como
indicador de actividad, y que contenan los genes germinales de Vk y Jk junto con sus SSR,
estos investigadores comprobaron que slo las lneas pre-B y pre-T tenan capacidad de
recombinacin, lo que indicaba un mecanismo de regulacin comn a ambas estirpes. Este
sistema experimental permiti la posterior identificacin de RAG-1, seguido del descubrimiento
de un segundo gen (RAG-2) muy ligado al anterior tanto en su localizacin como en su
estructura, y que actuaba de una manera sinrgica con RAG-1 facilitando los procesos de
recombinacin. El papel in vivo que cada uno de estos genes juega en el desarrollo
ontognico del sistema inmune es crtico. Para demostrarlo, se generaron mediante un proceso
de ingeniera gentica, conocido como gene targeting, ratones que carecan especficamente
de RAG-1 o de RAG-2. El anlisis de estos ratones demuestra que no se producen fenmenos
de recombinacin en ninguno de los dos casos, y que como consecuencia, no se encuentran
presentes en la periferia ni linfocitos B ni T maduros. Esto indica que los procesos de
recombinacin gnica tanto de los genes del TCR y de las inmunoglobulinas van a estar
sometidos a mecanismos comunes de regulacin. An ms importante, se ha encontrado
recientemente un grupo de pacientes que tienen mutaciones en RAG-1 o RAG-2, dando como
resultado la aparicin de una inmunodeficiencia combinada severa por bloqueo en los procesos
de recombinacin tanto de linfocitos B como T.
Fenmenos de aproximacin de regiones
El proceso de reordenamiento gnico, adems de juntar los segmentos de genes que
formarn la estructura de las futuras cadenas ligeras y pesadas, aproxima las regiones
promotoras a lasregiones amplificadoras (regiones enhancer), lo cual facilitar posteriormente
la regulacin y control del inicio as como la adecuada transcripcion del RNA mensajero
correspondiente. Las regiones amplificadoras se localizan normalmente a miles de pares de
bases de distancia de las regiones promotoras, en tanto que las regiones amplificadoras
pueden encontrarse, segn el gen, despus de los segmentos J y antes de los segmentos C.
Por tanto, este acercamiento implica la formacin de un bucle en la estructura espacial
del DNA, de manera que la aproximacin entre ambas regiones no es lineal, sino espacial. Al
igual que en el caso de los segmentos promotores, las regiones enhancer van a contener
motivos de unin que van a interactuar con los factores transcripcionales. Uno de los primeros
factores en ser descubierto y ms relevante funcionalmente es el factor de transcripcin NF-kB,
que se une a la regin amplificadora del gen k. En la Figura 4.5 se muestra un esquema del
proceso por el cual se eliminan los segmentos de genes que no se van transcribir.
Unin de segmentos de genes
Otro mecanismo importante en la regulacin del reordenamiento de los genes de las
inmunoglobulinas es el que controla las uniones entre los genes V, D y J. Es decir, cuales son
las seales que hacen que un gen D identifique, dentro del cromosoma, la secuencia de un gen
J con el que puede unirse, y, a su vez, el gen V identifique la secuencia del complejo DJ ya
formado. Los reconocimientos y uniones de unos genes con otros estn controlados por
combinaciones de secuencias de DNA que se encuentran conservadas y son nicas de los
genes de las inmunoglobulinas. Estas secuencias estn formadas por un heptmero
palindrmico, un espaciador variable de 23 pares de bases y un nonmero palindrmico
(Figura 4.6). Este motivo va a reconocer otro formado por un nonmero de secuencia igual
pero invertida al anterior, continuado por un espaciador variable de 12 pares de bases y un
heptmero cuya secuencia es, otra vez, igual pero invertida al heptmero anterior. La longitud
conservada de los espaciadores no es casual, en tanto que se ha sugerido que 12 pares
corresponde a una vuelta de la hlice de DNA, y 23 a dos. As, los segmentos que contienen
un espaciador de 12 bases slo se pueden unir a otro de 23. Esto asegura, en el caso de las
cadenas pesadas, que los genes se reordenen en el orden correcto.
El mecanismo exacto por el que estas secuencias conservadas regulan la unin de los
genes de las inmunoglobulinas no se conoce todava con exactitud. Los modelos actualmente
considerados para explicar este fenmeno implican la formacin de un bucle en el DNA, lo que
conlleva la aproximacin de las secuencias reguladoras entre s. Al ser los heptmeros y
nonmeros de secuencia igual pero invertida, ello hace que al formarse el bucle cada uno de
ellos se encuentre con su complementario, permitiendo de esta manera la unin del DNA. Se
especula que las recombinasas (que pudieran ser codificadas por RAG-1 y/o RAG-2) tengan a
estas estructuras como diana de su mecanismo de accin. Aunque, como ya hemos sealado,
no podemos excluir que la actividad recombinasa a este nivel sea modulada por otros genes
todava no descubiertos.
CAMBIO DE ISOTIPO DE LAS INMUNOGLOBULINAS.
Cuando las clulas B reconocen al antgeno, una poblacin de las mismas secretarn
IgM llevando a cabo la respuesta primaria, mientras que, en menor medida, otras clulas van a
comenzar a producir IgG, IgA e IgE. Esto quiere decir que las clulas B tienen la propiedad
decambiar la subclase o isotipo de las inmunoglobulinas que producen Por tanto, en respuesta
a un mismo antgeno se van a generar anticuerpos que van a mantener su parte variable, pero
van a ser diferentes en los segmentos constantes que van a ensamblar.
Se cree que el cambio de isotipo se produce por dos mecanismos. El primer
mecanismo implica que las clulas B cambian su isotipo tiene lugar esta vez a nivel de DNA,
as una clula que ha sido comprometida a producir anticuerpos de un determinado isotipo, va
a sufrir una deleccin de todos los genes C a excepcin del correspondiente a la subclase que
va a ser producida (Figura 4.7). El segundo mecanismo es conocido como splicing
alternativo (Figura 4.8). Este proceso molecular genera polimorfismo proteico debido a la
transcripcin alternativa de los exones
Estos fenmenos pueden ser influenciados por ciertas citocinas. As por ejemplo, la IL4 induce el cambio de isotipo de IgM a IgG1 o bien a IgE.
CAUSAS DE LA DIVERSIDAD DE LAS INMUNOGLOBULINAS.
La diversidad de las inmunoglobulinas deriva de la variabilidad de las cadenas ligeras y
pesadas, por una parte, y por otra de las diversas posibilidades de unirse entre s estas
cadenas.
La variabilidad de cadenas, tanto L como H, que un mismo organismo es capaz de

producir, se debe al alto nmero de segmentos V existentes, a las diversas regiones J y D
tambin existentes y a la multiplicidad de formas de combinacin de V/J, en las cadenas
ligeras, y V/J y J/D, en las cadenas pesadas. Es decir, el primer mecanismo de generacin de
diversidad procede de las diferentes posibilidadaes combinatorias de cada uno de los genes
entre s. As, si consideramos que para la cadena pesada de las inmunoglobulinas del ratn
existen unos 300 genes VH (aunque stos pueden llegar hasta 1000), 12 genes D H y 4 genes
4
JH, las posibilidades de combinacin diferentes son como mnimo de 1.4x10 (300x12x4). A
esto hay que aadir las provenientes de las cadenas ligeras. La cadena k tiene 300 genes V k y
4 Jk, mientras que la l slo tiene 2 genes Vl (aunque en humanos contiene muchos ms) y 3 Jl.
3
Las posibilidades combinatorias son por tanto de 1.2x10 en el primer caso y de 6 en el

segundo. Al necesitarse la unin de cadenas pesada y ligera, las posibilidades combinatorias
son las resultantes de multiplicar cada una de ellas (Tabla 4.2).
Un segundo mecanismo generador de diversidad se debe a la imprecisin de las
uniones de los segmentos V, D y J debido posiblemente a desequilibrios en la unin entre los
intrones y exones correspondientes, y que se traduce en un pequeo cambio en la estructura
primaria de la cadena peptdica. Al parecer este mecanismo desempea un importante papel
en la maduracin de la afinidad de los anticuerpos, de tal manera que a medida que progresa
la respuesta frente a un antgeno, los anticuerpos formados presentan cada vez mayor grado
de afinidad por los epitopos del antgeno. Este mecanismo multiplica por, al menos, nueve las
posibilidades combinatorias de los genes de la cadena pesada y por tres las posibilidades de
los genes de las cadenas ligeras, en tanto que por trmino medio se producen tres
reordenamientos por cada unin.
Adems, toda la diversidad generada por los dos mecanismos ya mencionados, puede
verse amplificada por la aparicin de mutaciones puntuales en el gen responsable de una
determinada cadena de inmunoglobulinas. La ocurrencia de hipermutaciones somticas como
va de generacin de diversidad se han demostrado al encontrarse cadenas de
inmunoglobulinas que, obtenidas del mismo tipo de mieloma, posean secuencias de
aminocidos ligeramente diferentes a pesar de estar codificadas por un mismo gen. Estas
mutaciones somticas son de gran importancia en los procesos de incremento de la afinidad
del anticuerpo. Sabemos que conforme se produce en el tiempo la respuesta de
inmunoglobulinas, esta no slo incrementa el nmero de molculas producidas, sino que
igualmente lo hace la afinidad de las mismas.
Tambin, hay que indicar que a la diversidad de las cadenas ligeras y pesadas en s
mismo, hay que aadir la diversidad derivada de las diferentes formas de unin de las
cadenas ligeras con las pesadas.
EXCLUSION ALLICA EN LA SINTESIS DE INMUNOGLOBULINAS.
Normalmente cada clula productora de anticuerpos slo expresa un tipo de cadena
pesada y otro de cadena ligera. Este fenmeno se produce a pesar de que los genes que
codifican estas cadenas se encuentran presentes en los dos cromosomas, uno de origen
paterno y otro de origen materno, en tanto que las clulas productoras de inmunoglobulinas
son diploides. Es decir, a pesar de que existan dos copias para cada uno de los segmentos
gnicos V, D, J y parte constante de las cadenas pesadas y ligeras, slo una es expresada. De
no ser as se generara un serio problema en el individuo que generara anticuerpos por una
misma clula con especificidades diferentes.
Se piensa que este fenmeno, conocido como exclusin allica, se debe a que slo los
genes de un cromosoma sufren los procesos de reagrupamiento antes indicados de manera
que slo la informacin del cromomosoma no reorganizado es abortada y no se expresa. Esto
implica que una vez que se ha producido una unin productiva V/D/J, los procesos de
recombinacin son bruscamente detenidos en el otro cromosoma, de manera que no se puede
dar lugar a un segundo anticuerpo maduro. El mecanismo exacto por el que se produce la
exclusin allica no est completamente definido. No obstante, se piensa que una vez
producido un reordenamiento efectivo de los genes de las inmunoglobulinas, la protena
madura va a enviar una seal negativa de manera que la clula no produzca nuevos
reordenamientos. As, la presencia de un reordenamiento completo de la cadena pesada va
suponer el envo de una seal que inhiba nuevos reordenamientos de otras cadenas pesadas,
por un lado, y por el otro va a hacer que se inicien los reordenamientos correspondientes a las
cadenas ligeras, comenzando por las cadenas k. Si no se produjeran reordenamientos
productivos de k, entonces se permitira el reordenamiento de l. El ensamblaje final de las
cadenas pesadas y ligeras impedira nuevos reordenamientos, como ya hemos discutido,
mientras que si no se consiguieran reordenamientos productivos en ninguno de los dos alelos
de k y l, entonces la clula B entrara en un fenmeno de muerte celular programada, cesando
su maduracin y siendo posteriormente eliminada. El proceso de exclusin allica tiene como
fin asegurar que cada una de las clulas B produce un nico tipo de anticuerpo, a fin de evitar
el reconocimiento de ms de un eptopo mediante la produccin de anticuerpos multireactivos.
FASES FINALES DE LA SINTESIS DE INMUNOGLOBULINAS.
El RNA mensajero correspondiente al pptido a sintetizar se forma mediante la
transcripcin de los segmentos V, D, J y C ya reagrupados, de manera que la informacin de
estas regiones se transcribe en un solo mRNA al que se aade la cola de poliadenilacin (poliA). Tambin se transcribe el segmento L (Figura 4.9).
Las partes del RNAm correspondientes a los segmentos intrnicos es eliminada. Esta
eliminacin implica los procesos de corte del RNAm y posterior unin de los extremos exnicos
restantes. Despus, el RNAm abandonar el ncleo para alcanzar los ribosomas en donde se
producir la sntesis de los pptidos mediante el proceso de traduccin.
En el proceso de traduccin en el ribosoma se sintetizan los pptidos. Una vez
formados los pptidos de una Ig se produce la glicosilacin de los mismos en el propio retculo
endoplsmico, as como su ensamblaje para la formacin de la Ig completa, antes de ser
secretada por la clula. El proceso de ensamblaje parece desarrollarse en las siguientes fases:
H+H H2+LH2L+LH2L2. En el caso de la IgM, parece que por el contrario se unen primero
una cadena pesada con una ligera, uniendose esta media molcula a su otra media
independientemente formada.
Una vez que se ha producido el ensamblaje de la inmunoglobulina, esta molcula tiene
dos opciones funcionales. Una primera es la de permanecer en la membrana de las clulas B,
convirtiendose de esta forma en el receptor de las clulas B para el antgeno. La segunda
opcin es la de ser secretada al medio, con la funcin de interaccionar directamente con el
antgeno y conseguir su destruccin. La nica diferencia entre ambas es que las formas de Igs
de membrana tienen en la regin carboxi-terminal de la cadena pesada un fragmento aadido
de 19 aminocidos. La decisin de optar entre una forma u otra es tomada a nivel de
transcripcin del RNA, una vez ms mediante un proceso de splicing. En el caso que nos
ocupa, el proceso conlleva la transcripcin adicional de dos exones (M1 y M2) situados en la
regin 3' del gen CH, lo que a su vez da como resultado que se genere el fragmento de 19
aminocidos que origina una regin transmembrana hidroflica continuada por una muy corta
regin intracitoplasmtica. Si esto ocurre as, se origina el anclaje de la molcula a la superficie
celular, dando por tanto lugar a una inmunoglobulina de superficie, mientras que si estos dos
exones no son transcritos, la hidrofobicidad conferida a la inmunoglobulina hace que la
molcula no pueda anclarse a la superficie y sea secretada.
ANTICUERPOS MONOCLONALES PRODUCIDOS POR HIBRIDOMAS
Cuando se realiza una inmunizacin con el objeto de producir anticuerpos frente a un
antgeno, se produce una gran variabilidad de inmunoglobulinas que poseen funcin de
anticuerpo frente a los diferentes epitopos del antgeno. Esta producin de inmunoglobulinas es
de tipo policlonal debido a que son muchos y muy diversos clonos linfocitarios los que se
activan y diferencian para la produccin de anticuerpos (Figura 4.10).
Este fenmeno es de gran utilidad biolgica por cuanto ofrecen una amplia barrera de
proteccin del organismo al formarse una gran variabilidad de anticuerpos. Sin embargo, los
antisueros as obtenidos, aunque se han utilizado ampliamente y han sido de gran inters en el
conocimiento de la biologa y la bioqumica de las inmunoglobulinas (inmunoprecipitaciones e
inmunoblotting), ofrecen serias dificultades para su uso, por ejemplo, en la identificacin de
sustancias u otros fines anlogos, debido a la gran heterogeneidad estructural y funcional que
poseen.
Este problema se ha obviado desde que Georges Kholer y Cesar Milstein en
1975 (Figura 4.11)consiguieron la produccin de anticuerpos monoespecficos, conocidos
como anticuerpos monoclonales (AcMo). Con ello se abri un amplio campo en la Inmunologa
y la Biologa Molecular en general puesto que estos anticuerpos son de una gran utilidad por
cuanto tienen la capacidad de reaccionar frente a un solo eptopo del antgeno y son entre si
homogneos.
Fundamentos de la produccin de anticuerpos monoclonales.
El mtodo seguido para la produccin de estos anticuerpos consiste en la unin
(fusin) de una clula B productora de anticuerpos , con una clula de gran capacidad de
crecimiento (clulas de mieloma) con lo cual se forma un hbrido (hibridoma) que posee la
informacin gentica necesaria para la sntesis del anticuerpo deseado, que le es aportada por
la clula B, y una activa capacidad de sntesis proteica al tiempo que puede multiplicarse
tanto in vivo como in vitro indefinidamente, propiedades estas ltimas que son aportadas por la
clula mielomatosa(Figura 4.12). De esta manera, se pueden producir innumerables tipos de
hibridomas de acuerdo con el tipo de anticuerpo que interesa. Al ser cada uno de los
anticuerpos as producidos homogneos, ofrecen patrones de reaccin de gran especificidad
con los antgenos utilizados en la inmunizacin.Kholer y Milstein para la puesta a punto de
esta tcnica escogieron eritrocitos de oveja como inmungenos, ya que el anticuerpo contra
tales clulas se detectaba fcilmente mediante la tcnica de placas hemolticas de Jerne. Esta
tcnica se basa en la deteccin de la formacin de anticuerpos frente a glbulos rojos de
carnero, comprobando la capacidad ltica de los glbulos frente al complemento. As,
mezclando clulas de mieloma de ratn con clulas de bazo procedentes de ratones
inmunizados con glbulos rojos de carnero en presencia de un agente promotor de la fusin
celular, identificaron con xito las clulas hbridas en un medio selectivo y observaron que
segregaban inmunoglobulinas de ambos progenitores. Algunas segregaban anticuerpos contra
los eritrocitos. Haban logrado por tanto, aislar clones que segregaban una sola especie
molecular de anticuerpo y que, adems, podan mantenerse en cultivo. Por primera vez se
haban desarrollado cultivos continuos de clulas hbridas que segregaban un anticuerpo
monoclonal de especificidad predefinida.
Una vez seleccionado el hibridoma adecuado, ste puede conservarse largo tiempo
congelado. En cualquier momento el clon puede hacerse crecer para la produccin de
anticuerpos por inyeccin a ratones o siembra en cultivo. Generalmente el clon se inyecta
intraperitonealmente generndose ascitis extraordinariamente ricas en anticuerpos, de donde
son fcilmente purificables. Cuando el clon se ha cultivado in vitro el anticuerpo se recolecta a
partir del sobrenadante del cultivo.
Tecnologa de la obtencin de AcMo.
Generalmente se comienza por inmunizar a ratones de la cepa BALB/C con el antgeno
frente al cuale se desea obtener el anticuerpo. El protocolo de inmunizacin suele ajustarse a
tres dosis del material antignico que se administran intraperitonealmente, con intervalos de
unas dos semanas. Aproximadamente a los veinte das de la primera dosis, se comprueba la
presencia de anticuerpos dirigidos frente al antgeno en el suero del ratn.
Comprobada la presencia de anticuerpos se procede al aislamiento de las clulas B
productoras de los mismos del bazo de los animales, en condiciones de esterilidad. Las clulas
as obtenidas sern utilizadas para su fusin con clulas mielomatosas, generalmente del tipo
NSI.
La lnea mielomatosa NSI procede de un mieloma inducido en la cepa BALB/C que ha
perdido la capacidad de secretar inmunoglobulinas, por lo que no interferir en la produccin de
anticuerpos con los hibridomas que se obtengan. Mientras los linfocitos B, sensibilizados frente
al antgeno correspondiente aportan al hbrido los genes que codifican las cadenas ligeras y
pesadas de las inmunoglobulinas, la lnea mielomatosa dota al hbrido de la capacidad de
crecimiento ilimitado propia de las clulas tumorales y, por tanto, de la posibilidad de
desarrollarse tanto in vitro como in vivo.
Esta lnea mielomatosa se ha hecho resistente a la 8- azaguanina porque carece de la
enzima HGPRT (hipoxantin-guanidin- fosforibosil-transferasa). La sntesis de su DNA la tiene
que realizar a travs de la va de novo que obtiene nucletidos a partir de aminocidos y
azcares. La aminopterina bloquea la sntesis de novo de nucletidos, por lo que las clulas de
la lnea NSI no sobrevivirn en presencia de este frmaco. Esta caracterstica permitir eliminar
las clulas NSI que no se han podido fusionar en el medio rico en aminopterina. Las clulas
NSI no fusionadas morirn, mientras que los hbridos podrn seguir creciendo porque poseen
la enzima HGPRT, aportada por los esplenocitos.
La fusin celular entre los esplenocitos del ratn inmunizado y la lnea mielomatosa
NSI se realiza en el medio de cultivo adecuado que contiene, adems de los nutrientes
necesarios para un cultivo celular, polietilen glicol (PEG) que es un detergente capaz de
disolver parte de la membrana celular permitiendo as la formacin de clulas que contienen
dos ncleos (fusin celular).Posteriormente se procede a la seleccin de los hbridos que se
inicia a partir de las 24 horas despus de la fusin. Para ello se aade medio de cultivo con
HAT (mezcla de hipoxantina aminopterina y timidina), a cada uno de los pocillos de las placas
en donde se encontraban las clulas en cultivo.
Hacia la tercera semana, se retira la aminopterina de los cultivos aandindose medio
HT (hipoxantina-timidina) y, por ltimo, durante la cuarta semana las clulas se mantienen slo
en medio de cultivo. Terminado este proceso se estudian los sobrenadantes de los hbridos
para determinar si producen anticuerpos.
Los hibridomas productores de anticuerpos se expanden y si siguen siendo positivos se
clonan cuando se estabilizan en cultivo.
La clonacin tiene como objetivo aislar el hibridoma productor del anticuerpo deseado y que
todas las clulas que lo constituyen procedan de la misma clula progenitora, dado que los
hibridomas productores de anticuerpos se encuentran mezclados en cultivo con otros
hibridomas que, o bien no son productores o sintetizan anticuerpos que no interesan.
Utilidad de los anticuerpos monoclonales.
Un anticuerpo monoclonal es un reactivo biolgico homogneo en su actividad, en
contraste con los antisueros convencionales que son una mezcla variable de inmunoglobulinas.
El uso ms generalizado de los AcMo se centra:
En la caracterizacin y cuantificacin de sustancias de inters

biolgico que se encuentran en cantidades muy pequeas, tales como
hormonas, enzimas, interferones, etc. (Tabla 4.3).
En la identificacin de antgenos presentes en las membranas

celulares, tales como las molculas CD3, CD4, CD8 y otras muchas.
Esto ha permitido no slamente la cuantificacin de subpoblaciones
celulares, sino tambin su fraccionamiento y aislamiento. En este
sentido cabe destacar el empleo de equipos conocidos
comoclasificadores de clulas activados por fluorescencia"
(FACS,Fluorescence Activated Cell Sorter)
En trasplantes de rganos y enfermedades autoinmunes en donde los

AcMo dirigidos contra los linfocitos T se utilizan frecuentemente en
casos de amenaza de rechazo agudo.
En oncologa para la localizacin de clulas tumorales y/o su

destruccin. Para ello los anticuerpos especficos frente a antgenos
tumorales tales como el antgeno carcinoembrionario pueden ser
111
99
marcados con sustancias radioactivas, como por ejemplo In o Tc , y
as localizar su situacin en el organismo mediante una gammacamara
especial cuando son administrados a individuos afectos de tumores.
Tambin los AcMo pueden ser utilizados en la destruccin de clulas
tumorales en oncologa, para lo cual los anticuerpos son marcados con
drogas citostticas y citotxicas.
En esta panormica general de la utilizacin de los anticuerpos monoclonales,
asistimos hoy a una impresionante dispersin hacia otros muchos campos, lo cual permite
vislumbrar esperanzadores horizontes a partir de una tcnica que en principio surgi
simplemente de la pretensin de desvelar la organizacin y expresin gentica de las
inmunologlobulinas, lo que acabo constituyendo un verdadero hito en la historia de la medicina
y las ciencias biolgicas.
As pues, paulatinamente, los anticuerpos monoclonales van sustituyendo a los
antisueros convencionales en base a las ventajas que su uso conlleva y en tanto que pueden
producirse industrialmente. Se expone un esquema del procedimiento seguido para la
produccin de AcMo para su posterior utilizacin tanto en el laboratorio como en la clnica
como medio teraputico y diagnostico (Figura 4.13).
Sin embargo, sera deseable que, para su aplicacin terapetica, los anticuerpos
procedieran de linfocitos humanos y no de ratn o rata. Contrariamente a lo que se esperaba
en un comienzo, la utilizacin de linfocitos humanos ha resultado difcil, en tanto que los
intentos de inmortalizar hibridomas humanos mediante su fusin con clulas mielmicas de
ratn o rata, han sido, hasta la fecha, decepcionantes. El problema reside en que, cuando se
fusionan clulas humanas con clulas animales, hay una rpida prdida preferencial de los
cromososmas humanos en las clulas hbridas interespecies resultantes. En la actualidad se
comienza a producir AcMo humanos empleando linfocitos B a los que se transforma en
tumorales mediante su infeccin con el virus de Ebstein Barr, obtenindose as linfocitos B
productores de AcMo que pueden ser clonados y, por consiguiente, anticuerpos monoclonales
homogneos en su composicin y especificidad.
AcMo quimricos humanizados.
Como se ha comentado con anterioridad, uno de los problemas del uso de AcMo en
medicina es que al ser en su mayora de origen murino, cuando son administrados a individuos,
stos producen anticuerpos frente a los mismos que disminuyen su eficacia o bien pueden
presentar problemas de tipo alrgico cuando se usan reiteradamente.
Para evitar este problema se estan ya obteniendo mediante tcnicas de ingeniera
genticaanticuerpos humanizados de tipo quimrico. Estos anticuerpos se preparan mediante
la creacin de una molcula hbrida en la que se mantienen las partes del anticuerpo
monoclonal de ratn que le confieren la especificidad (regiones V, D y J), y sustituir la regin
constante del anticuerpo de ratn por una regin igualmente constante del mismo isotipo pero
de procedencia humana. Para ello, es necesario disponer previamente del cDNA que codifica
la inmunoglobulina de ratn de nuestro inters. Las regiones del DNA de ratn que contienen la
especificidad del anticuerpo han de ser unidos a otro cDNA de humano que codifica para la
regin constante de una inmunoglobulina del mismo isotipo. Una vez que se han ligado las
diferentes regiones de DNA de ratn y humano, esta construccin ha de ser subclonada en un
vector apropiado y transfectada a una clula B a fin de que sta produzca el
anticuerpohumanizado, y que este posea una adecuada glicosilacin. De acuerdo con esto, es
posible eliminar de un anticuerpo de ratn (al menos parcialmente) sus regiones ms
inmungenas, de manera que no sea reconocido como extrao por la persona que es
inyectada el organismo humano (Figura 4.14).
Un paso ms adelante en la humanizacin de los anticuerpos monoclonales producidos

en ratn ha sido ya dado mediante la realizacin de los llamados anticuerpos
hiperquimricos. En este caso se redisea la parte variable del anticuerpo, de manera que los
aminocidos correspondientes a la secuencia del anticuerpo de ratn que codifican las partes
hipervariables para el sitio de unin se introducen en el contructor que codificar la parte
variable dentro del marco de la regin variable de un anticuerpo humano. Es decir, el
anticuerpo humano va a servir nicamente como vehculo o vector de las regiones de
determinantes complementarios (CDR) murinas, que son en realidad las responsables de la
unin especfica del anticuerpo con el antgeno.
TEMA 5. SISTEMA DE HISTOCOMPATIBILIDAD.

INTRODUCCION
Las molculas de histocompatibilidad fueron inicialmente descubiertas por ser las

principales responsables de las reacciones de rechazo de tejidos trasplantados entre individuos
de la misma especie. Los loci genticos reguladores de la sntesis de estos antgenos se
agrupan en una regin denominada Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC) y se
heredan de acuerdo con las leyes de Mendel. Una de las principales caractersticas de estas
molculas es su extraordinario polimorfismo. Hoy da se considera que las molculas de
histocompatibilidad tienen como funcin principal recoger pptidos del interior de la clula,
transportarlos a la superficie celular y all presentarlos a las clulas T.
Las molculas de histocompatibilidad se localizan en la superficie de las clulas de las
distintas especies animales. En el ratn se denominan antgenos H-2 y los genes que las
codifican se localizan en el cromosoma 17. En el humano se denominan antgenos
HLA (Human Leucocyte Antigens) y estn codificadas por genes ubicados en el brazo corto del
cromosoma 6. Los primeros trabajos sobre los antgenos H-2 fueron realizados por Gorer
(1936) en cepas murinasendogmicas (inbred), obtenidas por el cruce entre animales
hermanos de forma continuada durante al menos 20 generaciones. El rechazo de trasplantes
entre animales de distintas cepas endogmicas y la obtencin de aloantisueros mediante
inmunizacin de animales de una cepa con clulas de otra, permitieron una primera definicin
de este sistema gentico.
En el caso humano, el primer antgeno de histocompatibilidad descrito fue Mac (en la
actualidad definido como HLA-A2), descubierto por Jean Dausset en 1958 (Figura 5.1). Pronto
se vio que exista una relacin entre estos antgenos y la supervivencia de riones
trasplantados.
En la actualidad, son ya centenares los antgenos de este tipo que se han definido
gracias a las intensas colaboraciones establecidas entre los laboratorios que trabajan en
histocompatibilidad, a travs de los Workshops Internacionales de Histocompatibilidad que
desde 1964 se celebran peridicamente.
En este captulo estudiaremos la estructura de estas molculas y la organizacin de los
genes que las codifican. Su funcin en el procesamiento y presentacin de pptidos se
estudiar en el captulo siguiente.
ESTRUCTURA DE LAS MOLCULAS DE HISTOCOMPATIBILIDAD
Segn su estructura las molculas de histocompatibilidad se dividen en dos grandes

grupos:molculas de clase I y molculas de clase II que se encuentran codificadas por regiones
genticas distintas dentro del MHC y desempean distintas funciones inmunolgicas (Figura
5.2). Las principales molculas de histocompatibilidad humanas quedan reflejadas en la tabla
5.1.
Estructura de las molculas HLA de clase I.
Las molculas de los antgenos de histocompatibilidad de clase I (Figura 5.3), tanto en
el sistema HLA como en el H-2, se hallan constituidas por 2 cadenas polipeptdicas: una
cadena pesada, glicosilada, de mayor tamao, con un peso molecular de 45 kD, que se
encuentra asociada, mediante interacciones no covalentes a una cadena ligera, la
beta-2-microglobulinaque tiene un peso molecular aproximado de 12.5 kD.
La beta-2-microglobulina, polipptido idntico al componente srico normal, es idntica
en todos los individuos de la misma especie y los genes que la codifican no se encuentran en
el MHC, situndose en el cromosoma 16, en el hombre y en el cromosoma 2 en el ratn. El
anlisis estructural de la beta-2-microglubulina revela que pertenece a la superfamilia de las
inmunoglobulinas, con una notoria homologa con el tercer dominio constante de la cadena
pesada de las inmunoglobulinas. La cadena pesada, por el contrario, es altamente variable
entre individuos de la misma especie, siendo la responsable del polimorfismo antignico de las
molculas de histocompatibilidad clase I (Figura 5.4). Se distinguen tres zonas bien definidas,
una zona extracelular de mayor tamao en la que se encuentran los determinantes antignicos
de la molcula, una pequea regin transmembrana, hidrfoba, y finalmente una regin
intracitoplasmtica de unos 35 aminocidos.
La zona extracelular se halla organizada en tres dominios de aproximadamente unos
90 residuos cada uno, denominados alfa-1, alfa-2 y alfa-3 mantenidos por la existencia de
puentes intracatenarios. Los residuos glucdicos se encuentran unidos a la asparagina en la
posicin 86 del dominio alfa-1. Los dominios alfa-1 y alfa-2 constituyen regiones de contenido
variable en aminocidos, es decir son las zonas donde radica la variabilidad de la molcula.
Por el contrario el dominio alfa-3 es bastante constante, pertenece a la superfamilia de las Igs y
por tanto muestra una notable homologa con la regin constante de las inmunoglobulinas y
con labeta-2-microglobulina
Estructura de las molculas HLA clase II.
Las molculas de clase II son glicoprotenas que se encuentran en la superficie celular.
Estn formadas por dos cadenas, ambas con un dominio transmembrana, denominadas
cadena a o pesada y cadena b o ligera, asociadas entre s mediante interacciones de
naturaleza no covalente. Tanto la cadena a como la cadena b se encuentran codificadas por
genes situados en el MHC.
La cadena a tiene un peso molecular aproximado de 33kD y la cadena b de 29 kD.
Ambas cadenas tienen una organizacin semejante. Estn constituidas por dos dominios
extracelulares y se conocen con las denominaciones de a-1 y a-2 en la cadena pesada y b-1 y
b-2 en la cadena ligera. Cada uno de estos dominios consta de 90-96 aminocidos. El dominio
a-1 es abierto mientras que los dominios alfa-2, beta-1 y beta-2 se pliegan mediante un puente
disulfuro cada uno de ellos. Cuando se analizan los aminocidos de las cadenas ligeras, se
observa que los dominios a-2 y b-2 pertenecen a la superfamilia de las Igs, mientras que los
a-1 y b-1, que son los que presentan mayor diversidad presentan homologa con los dominios
alfa-1 y alfa-2 de los antgenos clase I. Se aprecian tres zonas donde es ms frecuente la
variabilidad. Un tercer dominio corresponde a la regin de cada cadena que atraviesa la
membrana celular, contiene unos 30 aminocidos y es de naturaleza hidrofbica. Finalmente,
el cuarto dominio, corresponde a la parte citoplasmtica de la molcula, es de naturaleza
hidroflica y contiene de 10 a 16 aminocidos..
Estructura tridimensional.
El anlisis de la estructura tridimensional de los antgenos de histocompatibilidad de
clase I y clase II, determinada mediante cristalografa, demuestra que los dominios estn
estructurados de forma diferente. As, dentro de los antgenos clase I, el dominio alfa-3 y
labeta-2-microglobulina estn organizados en estructura de hoja plegada b. Por el contrario los
dominios a1 y a2 constan cada uno de ellos de una sola zona formada por cuatro fragmentos
en estructura de hoja plegada b seguido de otro segmento organizado en forma de a-hlice.
Esta organizacin delimita una hendidura denominada sitio de unin al pptido (peptide
binding groove) en el que los residuos ms polimrficos se encuentran en el suelo y las
paredes de la hendidura. En esa hendidura se localiza un pptido que no pertenece a la
molcula y de aproximadamente 8-10 aminocidos. Ese pptido procede de protenas
endgenas, como veremos en el captulo siguiente e interacciona con las molculas de
histocompatibilidad mediante fuerzas no covalentes entre sitios concretos de ambas
estructuras. Un determinado antgeno de histocompatibilidad puede unirse a pptidos
diferentes siempre que stos posean uno o varios motivos que interaccionen con zonas de la
molcula cuya estructura suele estar condicionada por residuos polimrficos.
La estructura tridimensional de los antgenos de clase II tambin ha sido determinada
por cristalografa y es semejante a la de los antgenos de clase I. Los dos dominios proximales
(a2 y b2) son los equivalentes al dominio alfa-3 y a la beta-2-microglobulina de los antgenos
clase I, mientras que los dos dominios distales (alfa-1 y beta-1) de los antgenos clase II se
corresponden con los dominios alfa-1 y alfa-2 de la molcula clase I. La hendidura donde se
ubica el pptido se forma entre los dominios alfa-1 y beta-1 de las molculas clase II.
Distribucin tisular de las molculas clase I y II.
Las molculas de clase I se encuentran presentes en la mayora de las clulas
nucleares del organismo pero no en todas, dado que, en algunas localizaciones, su expresin
es mnima o incluso nula, como sucede en el endotelio, glndulas de Brunner duodenales,
trofoblasto velloso o neuronas del sistema nervioso central.
La expresin de las molculas de clase II se encuentra fundamentalmente restringida a
macrfagos, monocitos, linfocitos B y cuando estn activados tambin en linfocitos T y NK.
Igualmente se encuentra expresado en alta densidad en otras clulas que actan como
presentadoras de antgenos, tales como clulas dendrticas del bazo, epidrmicas de
Langerhans o clulas endoteliales. Tambin se encuentran en progenitores hematopoyticos,
clulas leucmicas y clulas de diferentes tipos de tumores.
Esta distribucin diferencial de las molculas de histocompatibilidad de clase I y II se
encuentra directamente relacionada con la diferente funcin de cada tipo de molculas. Los
niveles relativos de las molculas HLA en diferentes rganos y tejidos es muy variado (Figura
5.5).
Otras molculas de histocompatibilidad

Existen otras molculas de histocompatibilidad entre las que destacan de manera ms
significativa: HLA-G, HLA-E y HLA-F, que presentan una gran homologa con las molculas
clsicas de MHC de clase I (HLA-A, -B y -C).
HLA-E: La estructura tridimensional de la molcula de HLA-E, es muy
similar a la de las molculas clsicas HLA-A, B y C presentando sitios de unin

conservados para la b-2-microglobulina y al CD8. Esta molcula, cuando
presenta el pptido adecuado, se une a los receptores CD94/NKG2A que
inhiben la actividad citotxica de las NK y ciertos linfocitos T. En la actualidad
se ha descubierto que la protena UL40 presente en los citomegalovirus, es
capaz de unirse ella, y provocar una cascada de inhibicin en las clulas NK.
HLA- F: Se sabe que esta molcula se expresa principalmente en
amgdalas, bazo y timo. La localizacin de la protena es intracelular. Adems,

est descrito que los tetrmeros de HLA-F se unen a los receptores ILTR2
(LIR1) y ILTR4 (LIR2) que son receptores inhibidores de leucocitos.
HLA-G: La molcula HLA-G pertenece a la familia de molculas de
histocompatibilidad no clsicas y se caracterizan por un limitado polimorfismo y

una distribucin celular y tisular restringida al trofoblasto fetal y clulas del
epitelio tmico. Esta molcula puede presentarse en siete isoformas distintas,
codificadas por splicing alternativo, cuatro de ellas son protenas unidas a
membrana (HLA-G1, G2, G3 Y G4), y otras tres isoformas que son protenas
solubles (HLA-G5, G6 Y G7). Otras caractersticas de esta molcula son:
Es reconocida por ciertos receptores inhibidores, tales como KIR2DL4, ILT-2 y ILT-4 y,
en consecuencia posee, capacidad de inhibir la lisis mediada por clulas NK y ciertas
clulas T.
Est relacionada con la induccin de tolerancia materno-fetal. Se ha demostrado que

la molcula HLA-G es capaz de inhibir la actividad de las clulas NK de los leucocitos
de la decdua sobre los trofoblastos durante el primer trimestre de gestacin
Parece participar en la vigilancia del sistema inmune frente a tumores y se ha

descubierto un aumento en el nivel de la expresin de esta molcula en la superficie de
las clulas infectadas por el HIV, que podra ser una forma del virus de escapar de la
destruccin por el sistema inmune.
Familia de molculas CD1. Los antgenos CD1 son glicoprotenas no polimrficas

constitudos por una cadena pesada de 43-49 kDa que, en muchos casos, se asocia con la
beta-2-microglobulina (beta-2-m). Se ha definido como una molcula presentadora de antgeno
presente en la mayora de los mamferos encontrndose tanto en las clulas dendrticas como
en timocitos. Mientras que en ratones las molculas CD1 pueden presentar pptidos y
molculas no peptdicas como glicolpidos a clulas T, en humanos slo hay evidencia de
presentacin de antgenos no peptdicos de origen microbiano, generalmente a clulas T de
TCR restringido Las clulas T implicadas en el reconocimiento de antgeno presentado por
CD1 son denominadas NKT.
En humanos la familia de los genes de CD1 contiene 5 miembros: CD1A, CD1B, CD1C,
CD1D y CD1E, que se agrupan en dos grupos en base a la similitud de la secuencia de
aminocidos entre ellas y entre especies. En general, las molculas de CD1 se expresan
predominantemente en timocitos y en algunas APCs derivadas de mdula sea como las
clulas dendrticas. Se ha descrito que las clulas del epitelio intestinal expresan las molculas
de CD1d.
GENTICA DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD
Como ya se ha dicho, los genes que codifican las molculas cuya estructura y funcin
hemos estudiado, se encuentran agrupados en el genoma formando el Complejo Mayor de
Histocompatibilidad que se extiende aproximadamente 2-3 centimorgans (aproximadamente
6
4x10 pares de bases) y en el humano contiene al menos 50 genes distintos. Este grupo de
genes se encuentra organizado de forma diferente en las distintas especies, conocindose con
precisin la organizacin gentica del MHC en el hombre, sistema HLA, y el ratn, sistema H-2.
Recientemente se ha propuesto una nueva taxonoma para clasificar los distintos genes que
codifican las molculas de histocompatibidad, (Tabla 5.2)
Complejo Mayor de Histocompatibilidad en el hombre.
El Complejo Mayor de Histocompatibilidad en el hombre est constituido por un grupo
de genes situado en el brazo corto del cromosoma 6. El complejo mayor de histocompatibilidad
humano es donde se codifican los loci que de los distintos antgenos HLA clase I y II (Figura
5.6). Entre los de clase I se encuentran los genes que codifican las cadenas a de los
antgenos HLA-A, HLA-B y HLA-C y entre los de clase II se encuentran los pares de genes que
codifican las cadenas alfa y beta de los antgenos HLA-DR, HLA-DQ y HLA-DP.
Este grupo de genes se heredan de acuerdo con las leyes de Mendel, como caracteres
codominantes simples. La regin gentica de un cromosoma que contiene todos los genes HLA
(a excepcin de los que codifican la beta-2-microglobulina) se denomina haplotipo HLA (Figura
5.7). As pues un haplotipo HLA incluye los genes clase I: HLA-A, HLA-B y HLA-C y los genes
clase II: HLA-DR, HLA-DQ y HLA- DP. y otros loci que codifican molculas implicadas en el
procesamiento de pptidos como son los genes TAP cuyos productos estn implicados en la
transferencia de pptidos del citosol al retculo endoplsmico y los genes LMP que codifican
componentes del proteosoma responsable de transformar protenas en pptidos que
posteriormente sern presentados en la superficie celular. Asimismo en esta regin se
encuentran los genes que codifican algunos factores del complemento, la enzima
21-hidroxilasa, la citocina TNF-alfa y otros genes y pseudogenes con homologa estructural con
los genes clase I y clase II con limitado polimorfismo y cuya funcin aun se encuentra
insuficientemente aclarada (Figura 5.8). .
La existencia de estos diferentes loci fue demostrada inicialmente por la aparicin
espontnea de recombinaciones entre los mismos o la existencia de lneas celulares mutantes,
con prdidas de uno o varios loci y ha sido confirmada a lo largo de los ltimos aos por el
empleo de tcnicas de biologa molecular que han permitido aislar y secuenciar estos genes.
Gracias a estas tcnicas de biologa molecular se ha descubierto la existencia en esta regin
de numerosos genes y pseudogenes pero solamente una minora tienen estructura clase I o
clase II mientras que la mayora no estn relacionados estructuralmente.
Cada clula del organismo, (excepto las clulas germinales), poseen un haplotipo
procedente del padre y otro de la madre. La mayora de los genes del MHC son altamente
polimrficos, es decir pueden ser estructuralmente diferentes entre individuos de la misma
especie. No obstante, como se vio al hablar de la estructura, existen zonas muy conservadas,
prcticamente idnticas en todos los individuos y zonas altamente variables.
Cada especificidad definida en la superficie celular representara un alelo diferente a
nivel genmico. Como se muestra en la tabla 5.3, se han descrito numerosos alelos para los
diferentes loci HLA. Dado que cada individuo posee dos de cada uno de estos alelos, el
nmero de combinaciones tericas posibles en la poblacin considerada en su conjunto es muy
alto.
A menudo se describen nuevas especificidades asociadas a otras previamente
establecidas. Estas nuevas especificidades se suelen denominar especificidades subtpicas
que aparecen por divisin de otras anteriores y a las antiguas especificidades supertpicas. As
por ejemplo, las especificidades HLA-B51 y HLA-B52 se consideran como productos de la
divisin del antgeno HLA-B5. De hecho la secuenciacin de los genes HLA ha demostrado que
el polimorfismo que es detectado a nivel serolgico es slo una parte del que se encuentra a
nivel genmico. As por ejemplo existen numerosos subtipos de HLA-A2 y numerosos subtipos
de HLA-B27. Ello ha hecho que se establezca un nuevo sistema de nomenclatura para los
diferentes alelos HLA que utiliza la letra del loci seguida de 4 dgitos tal como se muestra en el
Apndice. Los dos primeros dgitos seran los de la especificidad serolgica y los otros dos
indicaran la especificidad detectada por secuenciacin.
Los haplotipos heredados de cada padre van a determinar el genotipo del hijo, es decir,
el genotipo de ste ser la suma de un haplotipo procedente de padre y otro procedente de la
madre. En la Figura 5.9 se ilustra grficamente todo lo anteriormente expuesto. En una familia
determinada en la que el padre tiene los haplotipos (a) = A2, B8, Cw1, DR1 y (b) = A3, B7,
Cw3, DR4 y la madre los haplotipos (c) = A2, B7, Cw2, DR2 y (d) = A11, B13, Cw3, DR5 los
hijos podrn heredar cuatro combinaciones distintas de estos haplotipos, siendo (a,b), (b,c) y
(b,d) los posibles genotipos resultantes.
Tras la secuenciacin completa del Complejo Mayor de Histocompatibilidad en el 1999
se conoce que esta regin la forman ms de 200 loci, muchos de los cuales an son
funcionalmente desconocidos, aunque posiblemente la mitad juegue un papel en la funcin del
sistema inmune. Probablemente el estudio del polimorfismo de esta regin ayudar a
comprender por qu unas personas desarrollan unas enfermedades y otras no, en todo caso
este avance ser una importante herramienta para el estudio filogentico, la biologa y la
evolucin de las familias de multigenes, las poblaciones y la enfermedad.
Loci HLA-A, B, C.
La regin que codifica las molculas de clase I est dividida en tres loci, conocidos
como A, B y C, que codifican tres tipos de cadenas pesadas para las distintas molculas de
clase I. Algunos de estos genes han sido estudiados mediante tcnicas de hibridacin de DNA
y se ha demostrado que se encuentran divididos en exones e intrones, encontrndose una
estructuracin homloga a los genes que codifican la b-2 microglobulina, las inmunoglobulinas
y otros tipos de protenas.
El prototipo de gen que codifica molculas de clase I, se encuentra dividido en 8

exones, cada uno de los cuales, se corresponde a cada dominio estructural de la molcula. Si
bien se conoce con precisin la funcin de estas tres familias de antgenos de
histocompatibilidad de clase I expresados en la superficie celular, se ha demostrado la
existencia de otros genes que tambin codifican otros antgenos HLA de clase I con menor
polimorfismo y cuya expresin es variable, tanto en su distribucin tisular como en la densidad
en la membrana celular. Entre estos genes se incluyen: HLA-E, HLA-F y HLA-G.
Gen HLA-E: Este gen presenta una secuencia parecida a la molcula Qa1
murina, que une pptidos hidroflicos de la secuencia leader de las molculas
MHC clsicas. Se expresa en pequeas cantidades en la superficie de la
clula, y su expresin est regulada por la presencia de las otras molculas de
histocompatibilidad presentadas en la superficie celular y es TAP dependiente.
Gen HLA- F: Este gen es muy similar en estructura y secuencia a los genes
de las molculas clsicas. Se trancribe en una gran variedad de clulas y
tejidos presentando un polimorfismo limitado.
Gen HLA-G: Este gen presenta la estructura tpica de la HLA clase I y su

expresin parece estar restringida a la placenta y se asocia con funciones de
caracter tolerognico..
Regin HLA-D
En la regin D se localizan los genes que codifican las molculas HLA-DR, HLA-DQ y
HLA-DP. Su anlisis bioqumico demuestra que se trata de molculas de clase II compuestas,
como ya hemos indicado, por una cadena a y otra b.
Las molculas HLA-DR y HLA-DQ se estudiaron por serologa y los antgenos HLA-DP
fueron inicialmente definidos por estudios funcionales, mediante estimulacin secundaria
de linfocitos previamente sensibilizados (PLT).
El empleo de tcnicas de biologa molecular han permitido el aislamiento y secuenciacin de
los genes de esta regin, de manera que hoy se conoce con precisin que la regin D posee
un elevado nmero de genes.
Los genes de la familia DR comprenden un gen DRA que codifica la cadena DRalfa y
posee escaso polimorfismo y al menos cuatro genes DRB (DRB1, 3, 4, 5) que codifican
cadenas DRbeta que contienen gran polimorfismo. Se han descrito otra serie de pseudogenes
DRB (DRB2, 6, 8) sin conocerse an su funcin y expresin. La cadena proteica DRalfa puede
combinarse (Figura 5.10). con las diferentes cadenas beta codificadas por los genes DRB
dando origen a las molculas de clase II portadoras de las especificidades HLA-DR (la unin de
los productos de los genes HLA-DRA y HLA-DRB1 y las especificidades HLA-DRw51, 52 y 53
(la unin de los productos de los genes HLA-DRA y HLA-DRB5, DRB3 o DRB4,
respectivamente).
Tanto las familias DQ como DP contienen dos pares de genes, es decir dos genes a y
dos genes b, prximos entre s y todos polimrficos. Slo uno de estos pares, DQA1 y DQB1 y
DPA1 y DPB1, codifican las cadenas a y b de las molculas de clase II HLA-DQ y HLA-DP
respectivamente. Los otros 2 pares de genes DQA2, DQB2 y DQB3 (pseudogen) y DPA2 y
DPB2 poseen un limitado polimorfismo y no se encuentran expresados en la superficie celular.
Adems existe otra subregin que contiene un gen a, denominado DNA, y un gen beta, DOB,
que podran codificar un nuevo tipo de molculas clase II.
Por otra parte tambin se han localizado una nueva pareja de genes, HLA-DM, no
polimrficos, que se encuentran implicados en el proceso de procesamiento y presentacin de
antgeno como se expone en el prximo captulo. Cada uno de estos genes esta estructurado
en secuencias de intrones y exones relacionados con los dominios estructurales de la protena
codificada por ellos.
Tipaje HLA.
Se denomina tipaje HLA, al anlisis llevado a cabo en el laboratorio para conocer los alelos
HLA de un determinado individuo mediante mtodos serolgicos, anlisis de genes por
biologa molecular (Figura 5.11). y mtodos celulares.
El tipaje HLA tiene especial inters en las siguientes situaciones:
Estudio de la asociacin con distintas formas clnicas de una enfermedad.

Por ejemplo la diabetes insulino-dependiente est asociada a DR3 y DR4 y
En trasplantes de rganos y medula sea y
Estudios de filiacin familiar.
La mayora de los genes del HLA son altamente polimrficos, como ya se explic en el
apartado anterior, y cada especificidad definida en la superficie celular representara un alelo
diferente a nivel genmico. As se han descrito numerosos alelos para los diferentes loci HLA.
Mtodo Serolgico.
El mtodo serolgico ms comnmente utilizado es el test de microlinfocitotoxicidad,
que se realiza enfrentando una poblacin de linfocitos a una batera de sueros o anticuerpos
monoclonales que son especficos para cada uno de los antgenos posibles. Posteriormente se
aade complemento de tal manera que en los pocillos en los que se encuentre el antisuero
especfico para los antgenos de un individuo determinado, se producir la lisis celular que
podr ser visualizada al microscopio. Para visualizar la lisis, actualmente se usan una tcnica
fluorescente con una mezcla de anaranjado de acridina y bromuro de etidio. El bromuro de
etidio se fija al ADN de las clulas muertas (que aparecen de color rojo) y desplaza al
anaranjado de acridina que tie a las clulas vivas de color verde brillante. Los cultivos se
incuban y se hacen las lecturas de viabilidad celular (Figura 5.12). .
Para llevar a cabo la tipificacin de los antgenos de clase II se utilizan poblaciones
purificadas de linfocitos B, ya que en estas clulas los antgenos de clase II se expresan ms
abundantemente que en los linfocitos T (de hecho, las clulas T expresan cantidades
significativas de molculas MHC de clase II slo cuando estn activadas). Los linfocitos B se
separan haciendo pasar suspensiones de linfocitos totales a travs de una columna
empaquetada con fibra de nylon. Por sus propiedades adherentes, las clulas B se retienen en
el nylon y posteriormente se despegan por manipulacin mecnica de la columna de la que
previamente se han eliminado, por lavado, las clulas no adherentes. Existe a su vez, otro
mtodo ms utilizado y menos perjudicial para la separacin de las clulas B que consiste en el
uso de microesferas magnticas acopladas a anticuerpos contra antgenos especficos de
estas clulas (el antgeno CD19, por ejemplo). La sangre se mezcla con las esferas y luego
stas se separan en un campo magntico (con un imn) y se lavan para proceder a su
tipificacin por serologa.
Mtodos de Biologa Molecular:
Las tcnicas de biologa molecular ms usadas (no las nicas) para detectar polimorfismos
en el ADN utilizan los mtodos de:
a. Secuenciacin directa del ADN.
b. Anlisis del tamao de los fragmentos de restriccin del ADN (RFLPrestriction
fragment lenght polymorphism).
c.
Reaccin en cadena de la ADN polimerasa (PCR, polymerase chain reaction).
La secuenciacin directa del ADN no es prctica para su uso rutinario. Actualmente son
utilizadas tcnicas de PCR-SBT en la que se secuencian los fragmentos amplificados mediante
PCR.
La tcnica de RFLP incluye la fragmentacin del ADN con enzimas de restriccin, la
separacin electrofortica de los fragmentos, la transferencia de los fragmentos separados a
membranas de nylon, la hibridacin con sondas, de secuencias conocidas, marcadas con
istopos radiactivos o con enzimas y la deteccin del producto por autorradiografa,
quimioluminescencia o colorimetra. La tcnica de PCR permite amplificar segmentos
particulares de ADN en pocas horas (ver capitulo sobre mtodos inmunolgicos).
Las tcnicas que actualmente ms se utilizan para realizar tipaje HLA son PCR-SSO y
PCR-SSP. La PCR-SSO (Figura 5.13). que se basa en: amplificacin de la zona polimrfica
del ADN por PCR, hibridacin con oligonucletidos especficos de secuencia (SSO) fijados a
membranas de nylon. Con la tcnica de PCR-SSP (Primers especficos de secuencia) slo se
consigue amplificacin en aquellas muestras en las que los primers reconozcan el alelo para
los que son especficos por lo tanto lo nico que se hace es probar la existencia o no de los
productos amplificados.
Mtodos Celulares
Tambin existe la posibilidad de detectar los antgenos de histocompatibilidad
por mtodos celulares mediante el cultivo de mezclas de linfocitos, del donante y del receptor.
Esta reaccin que se conoce como CML (cultivo mixto de linfocitos), se basa en la propiedad
que tienen los linfocitos de proliferar cuando se incuban en presencia de linfocitos portadores
de antgenos HLA diferentes. Los linfocitos con antgenos idnticos no estimulan las respuestas
proliferativas entre ellos. La proliferacin celular se puede cuantificar utilizando diferentes
3
tcnicas, aunque la ms comn mide la incorporacin de timidina tritiada ( HT) por las clulas
proliferantes. En una variante de la reaccin, denominada CML unidireccional, las clulas
estimuladoras se tratan previamente con mitomicina C para inhibir su capacidad de divisin
celular, sin modificar su viabilidad (la mitomicina se combina con los husos cromticos evitando
la segregacin cromosmica y la mitosis) y as las clulas slo funcionan como antgeno. Los
cultivos de clulas mezcladas se mantienen de 72 a 96 h antes de adicionar la timidina

radiactiva. De 4 a 18 horas despus las clulas se colectan, se lavan y se procesan para
3
determinar la cantidad de radiactividad incorporada. La incorporacin de HT se establece
midiendo la emisin de radiacin beta en un contador de centelleo y los resultados se expresan
como cuentas por minuto (cpm).
Regulacin de la expresin de los genes del MHC
En la parte 5' no traducida de los genes se encuentran las reas reguladoras
(llamadaselementos cis) constituidas por el promotor (rea estrictamente necesaria) y
los aumentadores einhibidores que modulan la expresin basal de los genes. El promotor suele
estar situado a una distancia de unas 300 bases desde el inicio de la transcripcin, mientras
que los aumentadores o inhibidores se encuentran a distancias variables. Sobre estas reas cis
se fijan unas protenas llamadas factores de transcripcin (elementos trans) que son
necesarios para que se active lapolimerasa II, enzima que inicia la transcripcin. En muchos
casos, la induccin de la expresin de los genes se debe a modificaciones posttranstraducionales de estas protenas como son la fosforilacin o la glicosilacin. Hasta ahora
no se conoce el mecanismo exacto de la expresin de los genes de clase I y II aunque se han
descrito algunos de sus elementos cis y trans.
Los genes de clase I y beta-2-microglobulina tienen regiones cis muy parecidas y su
expresin esta coordinada. Se han detectado tres regiones cis en el promotor a las que se
unen factores de transcripcin y que se llaman aumentadores A y B y entre ellos
el IRE (elemento de respuesta al interfern) (Figura 5.14). Adems, existen dos inhibidores en
dos regiones a unas -700 y -400 bases. Sobre las reas cis se unen factores de transcripcin
que no son especficos del promotor de clase I, sino que regulan muchos genes. En la regin I
del aumentador A se une RXRb que es un elemento de la familia de los receptores de la
hormona tiroidea y del cido retinoico y que se une a AP-1 (Protena Activadora 1) que es un
complejo de los oncogenes jun y fos originando un heterodmero que aumenta su afinidad por
el DNA. En la regin II del aumentador A se une el NF-kB (Nuclear Factor-kB). En la regin IRF
se unen protenas que se inducen por efecto del interfern y que se fosforilan por una tirosina
quinasa. Por ltimo, en el aumentador B parece que se unen protenas del grupo AP-1 que
responde a la induccin con AMP cclico.
En el promotor de todos los genes de clase II y de todas la especies descritas, existen
tres reas con secuencias que tienen una gran homologa entre los genes y que se denomina
X, Y y W separadas entre si por unas 20 bases. Estas reas son esenciales para la
transcripcin (elementos cis) y sobre ellas se unen una serie de factores de transcripcin. La
caja Y contiene una secuencia CCAAT sobre la que se une el NFY (Nuclear Factor Y)
compuesto por dos protenas A y B, ambas se requieren para una unin eficiente al DNA.
Sobre la caja W se une un factor no caracterizado hasta ahora y sobre la caja X, dependiendo
del extremo 5'(X1) se han descrito protenas RF-X y NF-X y sobre el extremo 3'(X2) se unen
hXBP y el complejo AP-1 (fos-jun) aunque estas interacciones con el DNA no estn muy claras.
La distancia crtica que separa estas cajas sugiere que los factores de transcripcin que se
unen a ellas interaccionan dando lugar a que se inicie la transcripcin. Sin embargo, no
sabemos que es lo que hace que se induzca clase II por efecto del gamma-interfern o porque
en algunos casos la induccin de clase II sea constitutiva.
Otros genes del sistema HLA.
Situados en el complejo HLA se encuentran un grupo de genes que codifican tanto el

componente Bf de la cascada alternativa del complemento, como los componentes de la va
clsica C2 y C4 que se estudian en el captulo dedicado al complemtno.
Otros genes de esta regin y de inters en la respuesta inmune son los genes que
codifican
1.
2.
3.
4.
las formas alfa y beta del factor de necrosis tumoral (TNF-alfa).

HSP (Heat Shock Protein).
lmp que codifican los componentes del proteosoma y
TAP1 y 2 que son protenas transportadoras.
Estas estructuras como veremos en el captulo 6, poseen una gran importancia en la

funcin de procesamiento antignico asociada a las molculas del MHC. Tambin dentro del
sistema HLA e ntimamente relacionado con los genes anteriores, se encuentran los genes que
codifican la enzima 21-hidroxilasa, que participa en el metabolismo de ciertas hormonas
sexuales.
Complejo Mayor de Histocompatibilidad en el ratn.
El complejo mayor de histocompatibilidad en el ratn (sistema H-2) se ha llegado a

conocer despus de diversos procesos de recombinacin gentica de ratones hasta la
obtencin de cepas recombiantes (Figura 5.15). Se localiza en el brazo corto del cromosoma
17 e incluye varios loci, entre ellos los K, IA, IE, S y D. Como en el humano, cada locus
contiene uno de varios genes alternativos. Los genes K y D codifican para los antgenos de
clase- I (K y D), equivalentes a los humanos HLA- A y HLA-B. Los loci IA e IE (anlogos a los
antgenos D en el humano) contienen a los genes Aa/Ab y Ea/Eb que codifican a los antgenos
MHC de clase III (Ia e Ie). Dentro del complejo H-2 tambin est insertada una regin S donde
se encuentran los genes correspondientes a los antgenos de clase III (C2 y C4). Como en el
humano, los genes H-2 se heredan en bloque (como haplotipos), son codominantes y se
segregan siguiendo las leyes de Mendel (Figura 5.16).
En la tabla 5.4 se muestran los distintos haplotipos H-2 de las cepas murinas mas
comunes y en la figura 5.17. se compara la organizacin del complejo de histocompatibilidad
murino con los de las diferentes especies.
MECANISMOS DE GENERACION DEL POLIMORFISMO
El polimorfismo del MHC es el resultado de un largo proceso de evolucin a lo largo de

miles de millones de aos como consecuencia de la presin evolutiva ejercida por los agentes
infecciosos. Para la generacin de este elevado polimorfismo el MHC ha utilizado diferentes
mecanismos que han contribuido de diferente forma a la creacin de nuevos alelos. As,
algunos son el resultado de mutaciones puntuales mientras que otros proceden de la
combinacin de secuencias completas entre diferentes alelos, bien mediante un proceso
derecombinacin gnica o bien mediante el proceso denominado conversin gnica, segn el
cual una secuencia es reemplazada por otra semejante de un gen homlogo. La recombinacin
entre alelos del mismo locus parece ser el mecanismo ms frecuentemente utilizado para la
creacin del polimorfismo y as muchos alelos diferentes pueden proceder de procesos de
recombinacin repetidos a partir de un pequeo nmero de genes ancestrales. La existencia de
este proceso evolutivo apoya que el polimorfismo es esencial para la funcin de los antgenos
de histocompatibilidad.
FUNCION MOLECULAS DE HISTOCOMPATIBILIDAD
Las molculas de histocompatibilidad presentes en las clulas del organismo son
marcadores para las clulas del sistema inmunitario de "lo propio" (el yo inmunolgico) e
intervienen de manera fundamental en la educacin tmica de los linfocitos T (Tabla 5.5).
La funcin biolgica de las molculas de histocompatibilidad es la de presentar
pptidos antignicos para la activacin de los linfocitos T. Los linfocitos T que reconocen
molculas HLA clase I y su pptido pertenecen a la subpoblacin citotxica. Las clulas T que
reconocen molculas HLA clase II en su la mayora tienen funcin reguladora produciendo
citocinas. Las molculas de histocompatibilidad de un individuo son antignicas para otro y por
lo tanto activan el sistema inmune (rechazo de trasplantes).
HLA Y ENFERMEDAD
Desde hace varias dcadas se sabe que el padecimiento de ciertas enfermedades se
asocia con el incremento en la frecuencia de un determinado alelo HLA. Esta asociacin
cuando tiene un valor estadsticamente significativo, se viene considerando como un factor de
susceptibilidad o un marcador de riesgo a padecer la enfermedad, que puede cifrarse
estadsticamente como riesgo relativo (RR) y da una idea de la mayor o menor probabilidad
que tiene un sujeto a padecer una determinada enfermedad si presenta dicho marcador o alelo
HLA con respecto a aquellos individuos que no lo tienen.
Efectivamente, a pesar del gran polimorfismo de las molculas HLA y de la ampliacin
del nmero de subtipos allicos de clase I y de clase II, hoy se conocen mltiples
enfermedades que estn asociadas a clase I y otras a clase II (Tabla 5.6). El nmero de
enfermedades asociadas a alelos de clase I es menor que el de las asociadas a clase II.
Las causas de esta asociacin HLA y enfermedad no es conocida completamente. Por
ejemplo en espondilitis anquilopoytica (EA), enfermedad invalidante y que afecta a las
articulaciones de la columna principalmente, y en la que se ha descrito una fuerte asociacin
con HLA-B27, se ha podido observar que ciertos pptidos antignicos de origen articular
serian capaces de formar un complejo con HLA-B27 especficamente que inducira fenmenos
de autoinmunidad, bien por generar en la molcula B-27 modificaciones conformacionales que
la haran no ser reconocida como propia, bien por generar complejos HLA-pptido con cierta
similitud con antgenos bacterianos que provocaran reacciones cruzadas autoagresivas en
individuos HLA-B27, previamente sensibilizados a tales antgenos bacterianos.
En el caso de la diabetes mellitus insulin dependiente (DMID), enfermedad que cursa
con una destruccin selectiva de los islotes de Langerhans del pncreas, con infiltracin
linfocitaria, se considera que es el resultado de una respuesta autoagresiva frente a antgenos
presentes en la membrana celular mediada por linfocitos T.
TEMA 6. PRESENTACIN DE ANTGENOS.

INTRODUCCIN
Los linfocitos, las nicas clulas con receptores especficos de antgeno, son
responsables de iniciar y llevar a cabo la respuesta inmune adaptativa. Los linfocitos B
interaccionan con el antgeno mediante su receptor (BCR), una inmunoglobulina de membrana
(mIg) que reconoce determinantes antignicos tridimensionales en protenas y otras molculas
antignicas, solubles o particuladas, en estado nativo. En cambio, el receptor clonotpico de los
linfocitos T (TCR) reconoce complejos moleculares en la membrana de las clulas
presentadoras de antgeno (APC), formados por molculas del Complejo Principal de
Histocompatibilidad (MHC) de clase I (MHC-I) o de clase II (MHC-II) (ver ms adelante) y
pptidos antignicos resultantes de la degradacin intracelular del antgeno. Las clulas T, por
tanto, a diferencia de los linfocitos B, necesitan de clulas presentadoras de antgeno (APC)
accesorias que captan el antgeno, lo procesan y lo presentan en la membrana.
El TCR interacciona molecularmente con el pptido contenido en la cavidad de las
molculas del MHC y con las propias molculas presentadoras, de forma que el reconocimiento
del antgeno por el linfocito T, tal como se ha visto en captulos anteriores, queda restringido
por el MHC (Figura 6.1). El fenmeno de la restriccin por el MHC del reconocimiento de
antgeno fue originalmente descrito por Zinkernagel y Doherty (1974) en la respuesta de los
linfocitos T al virus de la linfocoriomeningitis (LCV). Estos investigadores demostraron que las
clulas T citotxicas especficas de virus slo reconocen las clulas infectadas si stas
expresan determinadas molculas de histocompatibilidad en su superficie. Este trabajo mereci
el Premio Nobel de Medicina en 1996.
CELULAS PRESENTADORAS DE ANTIGENO
Los requerimientos para la presentacin de antgeno son: capacidad de captacin de

antgenos del medio externo,maquinaria proteoltica eficiente que permita la degradacin del
antgeno en pptidos capaces de ser presentados, expresin de molculas de MHC-II y
expresin de molculas coestimuladoras y de adhesin.
Los tres tipos celulares que cumplen en diferentes grados estos requisitos, llamadas
APC profesionales, son las clulas dendrticas, los macrfagos y los linfocitos B. Existen otras
estirpes celulares que, an no siendo APCs profesionales, son capaces de expresar molculas
de MHC-II bajo determinadas condiciones.
Clulas dendrticas.
Las clulas dendrticas derivan de la mdula sea, son de linaje mieloide y tienen una
morfologa irregular con prolongaciones membranosas. Las clulas dendrticas se generan en
la mdula sea desde donde migran en estado inmaduro a los tejidos perifricos, por ejemplo
las clulas de Langerhans de la piel.
Mientras estn en estado inmaduro, las clulas dendrticas tienen gran capacidad de
captacin de antgeno del medio y una maquinaria proteoltica eficiente, expresan bajos niveles
de MHC y de molculas coestimulatorias; expresan receptores Fc (CD32), de manosa y de
complemento, implicados en captacin de antgeno por endocitosis, fagocitosis y, sobre todo,
macropinocitosis. Al activarse su maduracin en presencia de citocinas inflamatorias, aumenta
considerablemente su capacidad de macropinocitosis y la expresin de receptores que
permiten la captacin de antgeno; tambin se activa la sntesis de molculas de MHC-I y II que
unirn con gran eficiencia tanto pptidos originados en la propia clula dendrtica como
pptidos externos que se hallan en el lugar de inflamacin. Desde el sitio de la herida, las
clulas dendrticas maduras expresan un alto nmero de complejos MHC/pptido de alta
estabilidad en su membrana, paran la sntesis de novo de MHC, pierden la capacidad de
captacin de antgeno y la expresin de algunos receptores iniciando su migracin los rganos

linfoides secundarios (ganglios linfticos, bazo o mucosas).
Durante el transporte de los tejidos perifricos a los rganos linfoides por los vasos
linfticos, las clulas cambian de morfologa y reciben el nombre de clulas veladas (veiled
cells). A su llegada a los rganos linfoides secundarios, las clulas dendrticas maduras se
emplazan en las zonas ricas en clulas T (recibiendo el nombre de clulas dendrticas
interdigitantes) donde realizan su funcin de presentar pptidos a clulas T especficas que all
se encuentren, inicindose as la respuesta inmune contra el agente agresor. Las clulas
dendrticas son especialmente eficientes en la activacin y estimulacin de clulas T preinmunes, tanto CD8 como CD4. Mediante la unin de pptidos exgenos o endgenos a sus
molculas de MHC-I, altamente expresadas, pueden iniciar una respuesta de clulas T CD8+,
incluso simultnea a la activacin de clulas T CD4+. Por otra parte, se las ha propuesto como
responsables en gran parte del mantenimiento de la memoria T ya que los complejos MHCII/pptido formados permanecen expuestos en su membrana durante un perodo de tiempo
largo proporcionando a las clulas T de memoria un contacto continuado con el antgeno que
las ha estimulado en la respuesta primaria.
Macrfagos.
Los macrfagos son clulas fagocticas mononucleares de linaje mieloide y con gran
capacidad de procesamiento de antgenos tanto solubles como particulados. Los macrfagos
inmaduros de sangre perifrica se denominan monocitos. Los macrfagos diferenciados
localizados en tejidos se encargan de eliminar restos celulares in situ. Estos macrfagos
diferenciados son residentes esenciales de los tejidos linfoides, pero tambin se encuentran en
otras localizaciones, en suspensin o integrados en tejidos slidos; all reciben distintos
nombres y, aunque mantienen sus propiedades principales, adquieren caractersticas
especficas al diferenciarse en los diferentes tejidos. Los macrfagos en suspensin son
clulas muy activas en la eliminacin de partculas extraas y restos celulares, entre ellos se
encuentran principalmente los peritoneales y los alveolares. Los macrfagos de tejido slido
son ms especializados, por ejemplo las clulas de Kupffer del hgado son responsables de la
eliminacin de productos particulados y bacterias de la circulacin sangunea. Entre este grupo
se agrupan las clulas de la microgla del sistema nervioso central, los osteoclastos del tejido
seo o las clulas mesangiales del glomrulo renal, entre otros.
Los macrfagos activados en el lugar de infeccin inician un proceso de fagocitosis
muy activo mediante receptores especficos, receptores tipo toll (TLR) y receptores scavenger,
capaces de reconocer patrones moleculares (PAMPS) expresados en los patgenos. Los
macrfagos tambin pueden endocitar antgenos opsonizados con molculas del complemento
o anticuerpos, va receptores del complemento o receptores Fc (CD64, CD32, CD23). Los
monocitos y macrfagos no activados expresan niveles bajos de MHC-II, en cambio en los
macrfagos activados se induce la expresin de molculas de clase II y las molculas
accesorias en su superfcie que aumentan su capacidad de presentacin de antgeno.
Consecuencia de la activacin, los macrfagos secretan quimiocinas que reclutan clulas
inflamatorias y citocinas implicadas en la activacin de las clulas T como IL-12 dirigiendo la
respuesta adaptativa en las fases iniciales.
Linfocitos B.
Los linfocitos B pueden actuar como clulas presentadoras de antgeno ya que
expresan MHC-II constitutivamente, expresin que aumenta cuando se activan, aunque su
capacidad de captacin de antgeno es muy baja. Sin embargo, los linfocitos B son clulas
presentadoras muy eficientes si expresan una inmunoglobulina de superficie (BCR) especfica
del antgeno. La eficiencia de la presentacin de un antgeno por clulas B aumenta 100-1000

veces cuando el antgeno se internaliza tras su unin con el BCR, permitiendo que un antgeno
se presente con gran eficiencia incluso en bajas concentraciones. La presentacin de antgeno
a linfocitos T especficos es parte esencial de la completa activacin y diferenciacin de la
clula B en clula plasmtica productora de anticuerpos, ya que para este proceso, los
linfocitos B requieren de la colaboracin de los linfocitos T. La presentacin de antgeno es su
forma de obtener esta colaboracin. La interaccin entre clulas T y B especficas del mismo
antgeno requiere segundas seales producidas a partir de la interaccin entre CD40 en la
clula B y CD40L en la clula T y por la interaccin entre la IL-4 producida por los linfocitos T y
su receptor en la clula B. El papel de las clulas B como APC se refuerza en la respuesta
secundaria contra el antgeno, ya que existen un mayor nmero de clulas B especficas
expandidas durante la respuesta primaria.
APCs no profesionales.
En hum anos, las clulas endoteliales expresan molculas del MHC-II y molculas
accesorias que aumentan en condiciones de inflamacin y se las ha implicado en la
presentacin de antgeno en reacciones de hipersensibilidad retardada en tejidos perifricos.
Adems existen otras clulas, como las epiteliales o los fibroblastos que en presencia
de citocinas, especialmente IFN-gamma, expresan MHC-II y como consecuencia podran
presentar antgeno en determinadas situaciones. Por otra parte, todas las clulas nucleadas
que expresan MHC-I pueden presentar antgeno a clulas T CD8+ aunque no son capaces de
iniciar una respuesta inmune.
CAPTACION Y PROCESAMIENTO DE ANTIGENO
El procesamiento de antgeno es el conjunto de mecanismos de degradacin de

antgenos tanto exgenos como endgenos para su presentacin a clulas T una vez unidos a
las molculas de MHC de clase II.
CAPTACION DE ANTIGENO EXOGENO
Las clulas captan antgeno exgeno por endocitosis, mediada o no por receptor,
proceso por el que la clula incorpora en su citoplasma materiales del medio externo. Se
distinguen dos tipos de endocitosis: pinocitosis y fagocitosis. Pinocitosis es la captacin de
lquido extracelular en el que se hallan los antgenos en forma soluble, llamada
macropinocitosis cuando la clula es capaz de captar grandes volmenes de fludo que
despus concentra, mecanismo clsico de las clulas dendrticas. La fagocitosis es un proceso
utilizado por fagocitos mononucleares, neutrfilos y otras clulas para ingerir y eliminar
partculas de gran tamao, includos agentes infecciosos, clulas seniles y restos celulares. La
internalizacin de la partcula se inicia por la interaccin de receptores en la superficie de la
clula con ligandos de la superficie de la partcula o por simple invaginacin mecnica de la
membrana.
Despus de la internalizacin, la vescula formada (endosoma o fagosoma) madura por
fusin con compartimentos de la va endoctica en varios pasos, que culminan en la formacin
de lisosomas. La va endoctica est constituda por distintos tipos de vesculas cuyo contenido
se va modificando a medida que van madurando en el interior de la clula. El pH del interior de
estas vesculas es bajo y va acidificndose a medida que stas van evolucionando haca
lisosomas. Las primeras vesculas de la va endoctica son los endosomas tempranos que
evolucionan a endosomas tardos, pasan a prelisosomas y finalmente se transforman en

lisosomas. Los diferentes compartimentos contienen distintas proteasas que los caracterizan.
El procesamiento de antgeno consiste en la desnaturalizacin y proteolisis de las protenas
captadas en las vesculas acdicas. Las proteasas son activas a pH bajo de forma que si
tratamos las APCs con agentes lisosomotrpicos que alcalinizan las vesculas endocticas,
como la cloroquina o el cloruro amnico, se bloquea el procesamiento, la generacin de
pptidos y, por tanto, la presentacin del antgeno.
BIOSINTESIS DE LAS MOLECULAS DEL MHC
Las molculas del MHC son glicoprotenas de membrana cuya funcin es presentar el
antgeno en forma de pptidos a los linfocitos T en la respuesta immune. Las molculas del
MHC se dividen en dos clases: de clase I y de clase II y, aunque ambas son protenas de
membrana, la va biosinttica y de exocitosis que utilizan es distinta e influye en el tipo y origen
de los pptidos que presentan.
VIA BIOSINTETICA DE MHC-I
Las molculas de clase I estn formadas por una cadena pesada (cadena alfa) y la
beta2-microglobulina (beta2-m) cuya asociacin se lleva a cabo en el retculo endoplasmtico
(RE) con la ayuda de diversas chaperonas, desde donde siguen la ruta constitutiva de
exocitosis hacia la membrana celular. Esto es, las molculas del MHC-I generadas en el RE
pasan al aparato de Golgi, despus pasan a travs del tras-Golgi y por va vesicular, llegan a la
membrana celular (Figura 6.2).
Sin embargo, el heterodmero alfa-beta2m formado en el RE es inestable en
condiciones fisolgicas y requiere de la unin de un pptido para alcanzar una conformacin
estable que le permita la salida del retculo endoplsmico. La cadena pesada a se une a una
molcula de 88 kDa llamada calnexina, chaperona de MHC-I por excelencia, que funciona
unindose a protenas de nueva sntesis que an no se han plegado o ensamblado
correctamente, retenindolas en el RE. Cuando la beta 2m se une a la cadena a, la calnexina se
desplaza para que MHC-I se una a otras chaperonas, entre ellas la calreticulina, cuya funcin
es parecida a la calnexina. El complejo calreticulina-alfa-beta2m se une a una tercera
chaperona llamada tapasina que a su vez se une a la subunidad TAP1 del transportador de
pptidos asociado a la membrana TAP (ver ms adelante). Esta asociacin estabiliza a los
heterodmeros alfa-beta2m parcialmente plegados hasta que se asocian a un pptido (ver fig.
va de clase I). Los dmeros TAP, formados por las subunidades TAP-1 y TAP-2 se encargan
de transportar pptidos de degradacin citoslica al interior del RE. Cuando TAP proporciona
un pptido con afinidad adecuada para poderse unir a la molcula de clase I, se forma el
complejo estable MHC-I/pptido, que se separa de las chaperonas e inicia la va de exocitosis
hacia la superficie celular, donde queda expuesto el pptido para su posterior reconocimiento
por un linfocito T CD8+ especfico.
TAP
La mayora de pptidos presentados por MHC-I derivan de protenas citoslicas. Para
transportar pptidos al interior del RE, las clulas han adaptado una molcula transportadora
de una familia de molculas conocida con el nombre de transportadores-ABC (ATP-binding
cassette (ABC)-transporters) encargados del transporte de iones, azcares, aminocidos e
incluso protenas. El transportador de pptidos, conocido con el nombre de TAP (Transporter
Associated with antigen Processing) est compuesto por dos protenas homlogas, TAP1 y
TAP2. El heterodmero TAP1/TAP2 conserva las caractersticas esenciales de los
transportadores-ABC: cada cadena contiene 6 dominios transmembrana, es decir, atraviesa 6
veces la membrana del RE, y dos dominios hidroflicos de unin a ATP. Estas dos cadenas se
disponen en la membrana con la posibilidad de generar un poro por el que accede el sustrato al
interior del RE. El mecanismo de transporte propuesto de los pptidos generados en el
citoplasma, es el siguiente: el pptido interacciona con la parte citoplasmtica de TAP
provocando la hidrlisis del ATP que induce un cambio conformacional del transportador
permitiendo el paso del sustrato al lumen del RE. Las molculas TAP se han descrito en
humanos, ratones y ratas. Se ha demostradouna preferencia en el tamao, de 8-12 aa, y de
secuencia del pptido transportado, por lo que se ha involucrado a TAP en la seleccin de
pptidos que se van a unir al MHC-I. La mayora de los pptidos no se unen a MHC-I y son
rpidamente transportados de nuevo al citosol donde son degradados por mecanismos an
desconocidos. Los genes que codifican las subunidades TAP-1 y TAP-2 estn dentro del MHC.
PROTEASOMA
Los pptidos transportados por TAP se generan por degradacin de protenas en el
citosol celular. Existen varios sistemas de degradacin de protenas en el citosol de los cuales
el complejo multicataltico llamado proteasoma es el ms directamente involucrado en la
generacin de pptidos para clase I. El proteasoma es un complejo proteico multienzimtico de
alto peso molecular resultado de la asociacin de distintas subunidades con capacidad
cataltica, muy abundante y ubicuo, que se encuentra en arqueobacterias, eubacterias y
eucariotas, y en estos ltimos se localiza en el citosol y en el ncleo. Estructuras de este tipo
se hallan muy conservadas entre especies: en eucariotas superiores se han descrito
proteasomas formados por ms de 25 subunidades distintas, en levaduras presentan hasta 14
subunidades y en bacterias se ha descrito el proteasoma de Thermophlasma acidophilum,
formado por slo 2 subunidades distintas (Figura 6.3). La gran estabilidad de los enzimas en
estos microorganismos termoflicos ha permitido la cristalizacin del proteasoma, revelando
una estructura en forma de cilindro formado por las subunidades que encaran su centro
cataltico hacia el interior. Los dos extremos estn compuestos por subunidades estructurales
denominadas alfa. Los dos anillos internos estn constitudos por subunidades denominadas
beta y forman una cmara donde se produce la proteolisis. Las protenas citoslicas
semidesnaturalizadas se introducen dentro del cilindro quedando a merced de las actividades
catalticas de las subunidades del proteasoma.
En vertebrados, las subunidades beta1, beta2 y beta5 son substituidas por otras tres:
beta1i, (LMP2) beta2i (MECL-1) y beta5i (LMP-7), cuya expresin se modula en presencia de
IFN-gamma (inmunoproteasoma). Las subunidades inducibles se sustituyen de forma
cooperativa en la estructura del proteasoma dando lugar al inmunoproteasoma. Los genes que
codifican para LMP-2 y LMP-7 se localizan en la regin del MHC-II por lo que, igual que en el
caso de TAP, se ha sugerido un papel selectivo del inmunoproteasoma en la generacin de
pptidos capaces de unirse a MHC-I.
VIA BIOSINTETICA DE MHC-II
Las molculas del MHC de clase II estn formadas por dos cadenas alfa y beta que se
sintetizan en el RE, a las que posteriormente se une una cadena llamada invariable (Ii), no
polimrfica. Los heterodmeros aparecen como agregados transitorios de elevado peso
molecular, puesto que una vez se han ensamblado las dos cadenas se forman trmeros de
dmeros alfa/beta. Por su parte la Ii una vez sintetizada tambin se dispone en forma de trmero
generndose finalmente un nonmero formado por tres molculas alfa/beta/Ii, (alfa/beta/Ii) 3. La
calnexina tambin se une a la Ii en el RE despus de generarse, en cambio los dmeros
alfa/beta se unen a otra chaperona llamada BiP (binding protein), miembro de la famlia de las
protenas de estrs trmico o heat shock proteins (hsp).
La cadena invariante se une al dmero disponindose de tal manera que bloquea el

sitio de unin de pptido de la molcula MHC-II, impidindose as la asociacin entre pptidos
y molculas de clase II en el retculo citoplasmtico. Una vez se ha generado el nonmero
(alfa/beta/Ii)3, se inicia una va de exocitosis no constitutiva pasando del complejo de Golgi al
transGolgi desde donde, (alfa/beta/Ii)3se desva a un compartimento de la va endoctica
denominado MIIC. La desviacin de los heterodmeros alfa/beta a la va endoctica responde
principalmente a una secuencia seal de la cadena invariante, aunque existen evidencias de
que tambin las propias cadenas beta de MHC-II tienen secuencias adicionales de desvo
hacia los endosomas. En este compartimento (MIIC), correspondiente a la zona intermedia de
la va endoctica, entre los endosomas tardos y los lisosomas (Figura 6.4)., se inicia la
proteolisis parcial de la cadena Ii quedndose slo unido a alfa/beta la porcin de Ii que ocupa
la hendidura de unin a pptidos , llamada CLIP (class II-associated invariant chain peptide).
CLIP se separa de (alfa/beta/Ii)3 naturalmente, pero el dmero se mantiene estable gracias a la
intervencin de una nueva chaperona residente del MIIC, el dmero codificado en el MHC, HLADM (o DM, en otras especies). El dmero se separa de DM si se asocia a un pptido capaz de
conferirle suficiente estabilidad. El complejo estable MHC-II/pptido viaja a la superficie celular
de la APC por va vesicular, aunque los mecanismos precisos no son conocidos (Figura 6.5)
CADENA INVARIANTE
La cadena invariable es una protena de membrana que se une a los dmeros alfa/beta,
ocupando el lugar de unin a pptido, impidiendo as la formacin de complejos MHC-II/pptido
en el RE. Adems, la cadena invariante es la responsable de la desviacin a la va endoctica
del complejo nonamrico (alfa/beta/Ii)3 y de la retencin en la va endoctica de los agregados
inestables que se forman. La Ii se ha descrito en humanos, ratones y rata. En humanos se han
descrito 4 isoformas de Ii, resultantes del procesamiento alternativo del RNA, aunque la forma
predominante es la denominada p33. La cadena invariante tiene estructura lineal, lo que
permite que el fragmento de Ii que se une a la cavidad bloquee perfectamente el acceso del
pptido. El fragmento de la cadena invariante que queda unido a la molcula de MHC-II se
denomina con el nombre genrico de CLIP (class II-associated invariant chain peptide, ver
pargrafo anterior) y ocupa la regin correspondiente a los aminocidos 80 al 104, con
variaciones de tamao (Figura 6.6).
HLA-DM y HLA-DO
El estudio de la regin gnica de clase II en busca de nuevas molculas homlogas a
las molculas clsicas MHC-II, condujo al aislamiento de HLA-DMA y HLA-DMB, en humanos,
y de H-2Malfa, H-2Mbeta1 y H-2Mbeta2, en ratones. La molcula de DM s un heterodmero
integrado en la membrana, formado por una molcula DMalfa y una DMbeta. DM se sintetiza
en el RE, viaja por el aparato de Golgi y transGolgi desde donde se desva a la va endoctica,
donde permanece por un tiempo. A diferencia de las molculas de clase II, HLA-DM no se
expresa en la superficie celular, lo que sugiere que dicha molcula acta preferentemente en la
va endoctica. En 1994, dos estudios independientes demostraron que, en ausencia de HLADM, las molculas de clase II no podan generar el complejo MHC-II/pptido, sugiriendo un
papel esencial en el intercambio entre CLIP y los pptidos ubicados en la va endoctica. HLADM se ha definido como catalizador del intercambio de pptidos en la cavidad del MHC-II,
aunque parece ser que su principal funcin es de chaperona, mediando la retencin en el MIIC
de complejos alfa/beta vacos o asociados a CLIP, hasta que se asocien con un pptido capaz
de conferirles alta estabilidad. HLA-DO es otra molcula codificada en la regin de clase II que
interviene en la formacin del complejo MHC-II/pptido. HLA-DO es un heterodmero formado
por la unin de las cadenas DOalfa y DObeta al que se le ha atribudo un papel regulador de la
funcin de DM en algunas clulas, incluyendo el epitelio tmico y las clulas B.
INTEGRACION DE LAS DOS VIAS
La presentacin de antgeno exgeno se lleva a cabo mayoritariamente por las

molculas del MHC de clase II. Los antgenos exgenos entran en la APC por procesos de
fagocitosis o de endocitosis, formndose vesculas que se fusionan con endosomas tempranos
donde se inicia su degradacin. La generacin de pptidos es ms intensa en los
compartimentos ms maduros debido a su contenido en enzimas y por tanto en ellos es ms
importante la formacin de complejos MHC-II/pptido. Si despus de este trnsito por todos los
compartimentos de la va endoctica, ni el pptido ni la molcula de clase II se han asociado,
terminarn degradndose en los lisosomas.
Las molculas de membrana una vez expresadas estn sometidas a procesos de
internalizacin, formndose unas vesculas denominadas "coated-pits" que se fusionan con
endosomas tempranos de reciente formacin. As pues, estas molculas acceden a la va
endoctica donde, al igual que cualquier protena extraa exgena incorporada a la clula por
endocitosis, se degradan y, por tanto, pueden ser presentadas por molculas MHC-II.
Los antgenos endgenos citoplasmticos tanto propios como sintetizados tras
infeccin de la APC por un microorganismo, estn sometidos a la maquinaria degradativa del
citoplasma y se presentan preferentemente en el contexto de MHC-I. Los pptidos antignicos
generados en el citosol son transportados al RE por TAP y aquellos pptidos con afinidad por
el alelo de clase I expresado en la clula formarn el complejo MHC-I/pptido que finalmente
se expresar en la membrana celular.
VAS ALTERNATIVAS
Existen excepciones a esta asociacin. Por una parte, protenas citoslicas

parcialmente degradadas en el citoplasma pueden acceder a la va endoctica por
microfagocitosis o mediante chaperonas citoplsmicas (molculas encargadas de conducir a
otras molculas a determinados compartimentos o localizaciones celulares) donde se degradan
a pptidos capaces de formar complejos MHC-II/pptido, segn su afinidad por el alelo de
clase II expresado. A su vez, los pptidos generados en el citoplasma por degradacin de
protenas endgenas, tambin pueden ser presentados por MHC-II aunque el mecanismo de
acceso a la va endoctica utilizado por estos pptidos es todava desconocido.
Por otra parte, los antgenos exgenos pueden acceder a la va de clase I mediante
dos mecanismos distintos: por rotura de la integridad de la membrana de un fagosoma,
consecuencia de ello protenas parcialmente fraccionadas escapan al citosol donde se
degradan (presentacin cruzada) o por proteolisis extracelular de protenas de superfcie por lo
que los pptidos generados pueden unirse a un grupo minoritario de molculas de clase I
vacas, expresadas en la membrana de APCs profesionales como las clulas dendrticas.
Las vas de procesamiento y presentacin de antgeno endgeno y exgeno no son
excluyentes. En la clula presentadora de antgeno profesional que expresa tanto molculas de
clase I como de clase II, en un estado de infeccin donde existe alta expresin de molculas de
MHC y una gran produccin de antgeno extrao, todas las vas de presentacin de antgeno
coexistirn en la misma clula para cubrir todas las posibilidades de presentacin de antgeno y
combatir ms efectivamente al patgeno.
LAS MOLECULAS DEL MHC COMO RECEPTORES DE PEPTIDOS
Las molculas del MHC son receptores de pptido que unen pptido por defecto, es
decir, necesitan formar complejo con un pptido para convertirse en molculas estables y
maduras. En estado de reposo celular, las molculas del MHC estn ocupadas por pptidos
propios, endgenos o exgenos. Cuando el organismo es atacado por un agente extrao,
como por ejemplo un virus, estos pptidos naturales son desplazados por los pptidos vricos
que durante la infeccin sern mayoritarios en el interior de la clula presentadora. Debido al
polimorfismo de las molculas del MHC, cada molcula de histocompatibilidad presenta una
secuencia distinta en el lugar de unin al pptido lo cual implica que existan preferencias en
cuanto al patrn de pptidos que se unirn a cada molcula de MHC. Por otra parte, los
pptidos que se unen a las molculas de MHC-I y MHC-II presentan caractersticas peculiares
que describen a continuacin (Figura 6.7).
Pptidos unidos por MHC-I
Las molculas de clase I unen pptidos cortos, de 8-10 aa. En general, cada molcula
de clase I puede unir de 2.000 a 10.000 pptidos distintos, pero dichos pptidos presentan
restricciones en su secuencia, motivos estructurales especficos de cada alelo. Estas
restricciones se limitan principalmente a los aminocidos en posicin 2 y 9 del pptido que son
los "puntos de anclaje" a determinados residuos de la hendidura en la molcula de clase
I (Tabla 6.1). Los aminocidos de anclaje se unen en sus cadenas laterales
a bolsillos especficos de los sitios de unin de cada alelo. El resto del pptido, los aminocidos
del 3 al 8, queda en medio de la cavidad de unin sobre una base de molculas de agua, lo
cual da gran plasticidad al complejo. Estos residuos estn involucrados en la interaccin con el
TCR.
Pptidos unidos por MHC-II
Las molculas de clase II, a diferencia que las de clase I, unen pptidos de mayor
tamao que oscilan entre 12 y 34 aa, aunque el tamao preferido para todos los alelos
estudiados es de 12 a 17 aa. La forma de unin del pptido a la cavidad de unin es tambin
distinta. En la hendidura de MHC-II el pptido queda unido por su secuencia central (core),
quedando libres los extremos del pptido a cada lado de la hendidura. La variabilidad
observada en la secuencia de dichos pptidos tambin se halla sujeta a una cierta restriccin
que depende del alelo del MHC-II. Aunque las posiciones de anclaje del pptido a la hendidura
no son tan constantes como para MHC-I, los aminocidos en dos o tres posiciones extremas
(generalmente, 2 o 4 y 9) de la secuencia central del pptido son las posiciones principales de
anclaje al MHC y por lo tanto las que definen el motivo estructural especfico de alelo (Tabla
6.2). Los pptidos que se unen a las molculas MHC-II son mayores que los de MHC-I y varan
en longitud. Debido diferencia de tamao de los pptidos aislados, los residuos de anclaje se
hallan en distintas posiciones. No obstante, la secuencia interna del pptido se une a la cavidad
presenta rasgos comunes: por ejemplo, en el alelo HLA-DR3, los residuos que ocupan la
posicin 4 (P4) estn cargados negativamente como el cido asprtico (D) o el cido glutmico
(E) y en la posicin 9 (P9) son residuos hidrofbicos como tirosina (Y), leucina (L), prolina (P) o
fenilalanina (F).
OTRAS MOLECULAS PRESENTADORAS DE ANTIGENO
Se han caracterizado tres genes que codifican molculas que se denominan molculas
de HLA de clase I no clsicas: HLA-G, HLA-E y HLA-F, que presentan gran homologa con las
molculas clsicas de MHC-I (HLA-A, -B y -C) y que tambin se asocian con la beta2m. HLA-E
y HLA-F se expresan en la mayora de tejidos fetales y adultos.
HLA-G se expresa en los trofoblastos de la interfase materno-fetal donde las molculas

clsicas MHC-I y MHC-II estn ausentes. Esta restriccin en la expresin de HLA-G parece ser
importante en la tolerancia inmunolgica de la madre frente a los fetos semi-alognicos. Se ha
demostrado que HLA-G es capaz de inhibir la actividad NK de los leucocitos de la decdua
contra los trofoblastos durante el primer trimestre de gestacin. La funcin de HLA-G en la
presentacin de antgeno y reconocimiento por clulas T es desconocida, pero en estudios
experimentales se ha descrito que el correceptor CD8 reconoce y se une a la molculas HLAG.
La especidad de HLA-E est restringida por un grupo caracterstico de pptidos que
derivan de la secuencia lider de otras molculas de MHC-I. HLA-E es reconocido por NKG2A,
un receptor inhibidor expresado en la membrana de las clulas NK, asociado a CD94 que tras
dicha interaccin enva una seal de inhibicin que bloquea la activacin de las cluals NK.
MICA y MICB son molculas no clsicas de clase I, codificadas en el MHC, que se
expresan sobre todo en fibroblastos y clulas epiteliales, en particular, en las clulas del
epitelio intestinal. Su papel se ha implicado en los procesos de la inmunidad innata. MICA y
MICB son reconocidos por NKG2D, un ligando expresado en clulas NK, clulas T
gamma/delta y en algunas clulas T CD8+. La interacin entre NKG2D y MIC activa la la lisis
de la clula diana. Las molculas de MICA y MICB pueden expresarse en membrana en
ausencia de pptido.
CD1
La familia de los antgenos correspondientes a CD1 son glicoprotenas no polimrficas
constitudas por una cadena pesada de 43-49 kDa que, en muchos casos, se asocia con la
beta2-microglobulina (beta2m). Se ha definico como una molcula presentadora de antgeno
presente en la mayora de los mamferos. Mientras que en ratones las molculas CD1 pueden
presentar pptidos y molculas no peptdicas como glicolpidos a clulas T, en humanos slo
hay evidencia de presentacin de presentan antgenos no peptdicos de origen microbian,
generalmente a clulas T alfa/beta de TCR restringido Las clulas T implicadas en el
reconocimiento de antgeno presentado por CD1 son denominadas NKT.
En humanos la familia de los genes de CD1 contiene 5 miembros: CD1A, CD1B,
CD1C, CD1D y CD1E, que se agrupan en dos grupos en base a la similitud de la secuencia de
aa entre ellas y entre especies. En general, las molculas de CD1 se expresan
predominantemente en timocitos y en algunas APCs derivadas de mdula sea como las
clulas dendrticas. Se ha descrito que las clulas del epitelio intestinal expresan las molculas
de CD1d.
TEMA 7. ESTRUCTURA Y GENTICA DEL TCR.

INTRODUCCIN
Como se ha indicado en captulos anteriores, los linfocitos T, presentan un mecanismo

de reconocimiento antignico distinto de los linfocitos B. En el caso de los linfocitos T, el
antgeno endgeno o exgeno es primero degradado y procesado en el interior de las clulas
presentadoras de antgeno (APC). Posteriormente, sus determinantes antignicos procesados

son expuestos en la superficie de la APC, en el seno de una molcula del Complejo Principal
de Histocompatibilidad (MHC de clase I o de clase II). El linfocito T, a travs de su receptor
clonotpico, nicamente reconoce al antgeno cuando ste se encuentra presente en la
membrana de la clula presentadora de antgeno.
Asociados a las dos cadenas polipeptdicas polimrficas (alfa y beta o gamma y delta)
que constituyen las dos variantes del TCR, se encuentra un grupo de molculas monomrficas
de membrana llamado colectivamente CD3, formando as el complejo TCR/CD3 (Figura 7.1).
Cuando tiene lugar el reconocimiento antignico entre el TCR y la molcula MHC que porta el
antgeno, se desencadena una cascada de reacciones bioqumicas en el citoplasma de la
clula T, dando as lugar al proceso de activacin.
ESTRUCTURA DEL COMPLEJO TCR/CD3
Mediante la utilizacin de hbridos se determin que el reconocimiento del antgeno y
de la molcula MHC se lleva a cabo simultneamente por un mismo TCR/CD3 auque cada una
de las molculas que lo componen tienen diferentes funciones.
Componentes del complejo TCR/CD3
El complejo TCR/CD3 consta de dos partes bien diferenciadas, tanto estructural como
funcionalmente (Figura 7.2):
TCR. Heterodmero con dos subunidades proticas, denominadas alfa y beta, unidas
covalentemente por puentes disulfuro. Es la porcin especfica del receptor, por lo tanto
polimrfica, y en ella se d la variacin clonotpica que va a permitir el reconocimiento
8
de los ms de 10 antgenos diferentes. Existe una variante del TCR que se encuentra
en unas pocas clulas T, y est formada por cadenas gamma y delta en lugar de las
cadenas alfa y beta. Este heterodmero no se asocia covalentemente, y su funcin an
no est claramente determinada
CD3. Es la porcin invariante del complejo y est formado por al menos 3 monmeros
unidos no covalentemente, denominados gamma, delta y epsilon. El complejo CD3 fue
descubierto por anticuerpos monoclonales, OKT3 y Leu4, y sus secuencias
nucleotdicas se averiguaron alfa partir del anlisis de cDNA. Es el encargado de
transmitir la seal del reconocimiento antignico al interior celular. Al complejo CD3 se
le asocia un gran homodmero intracitoplasmatico .
Todos los componentes del receptor de la clula T son protenas de membrana, y estn
formadas por una secuencia, dominio N-terminal extracelular, dominio transmembrana y
dominio citoplsmico C-terminal.
Estructura bioqumica del receptor clonotpico (TCR)
Cadena TCR-alfa.
Es una cadena glicosilada cida que esta divida en los siguientes dominios (Figuras
7.3; Figura 7.4 y Tabla 7.1):
Un pptido lder.
Un dominio extracelular, constituido por una regin variableparecida a la de las

inmunoglobulinas y con 2 cistenas implicadas en los puentes disulfuro; una regin de
unin y una regin constante que tambin contiene 2 cistenas implicadas en puentes
disulfuro intracatenarios
Un dominio transmembranal, donde es particularmente significativo la presencia de

dos cargas de aminocidos bsicos implicados, probablemente, en el puente de unin
de tipo salino con las cadenas del complejo CD3
Un dominio intracelular de tan slo 5 aminocidos.
Cadena TCR-beta.
Es una cadena glicosilada con estructura similar a la ya mencionada TCR-alfa. Consta de
un pptido leader y tres dominios diferentes (Figura 7.3; Figura 7.4 y Tabla 7.1).
Extracelular, con una regin variable, una de unin y otra constante que posee 4
cistenas
Transmembranal, regin hidrofbica con un residuo bsico de Lisina para crear un

puente salino con las unidades de CD3.
Intracelular, formada tambin por slo 5 aminocidos.
Es conocido como la estructura de las cadenas alfa y beta guardan una cierta homologa
secuencial con los dominios de las inmunoglobulinas.
Estructura bioqumica del complejo CD3
Cadena CD3-delta.
CD3-delta es una glicoprotena constituida por tres dominios bien diferenciados: a) dominio
extracelular, que lleva dos oligosacridos unidos; b) un dominio transmembranal, y c)
un dominio intracitoplasmtico (Tabla 7.1 y figura 7. 5).
Cadena CD3-epsilon.
Es una protena no glicosilada. Est constituda por tres dominios: a) extracelular,
comprendiendo los residuos 1 al 107; b) transmembranal, de marcado caracter hidrofbico, que
comprende los resduos 105 a 130. Al igual que ocurre en el caso del CD3-delta, aparece un
asprtico en posicin 115, intuyndose que est implicado en una funcin parecida y
c)intracelular, constituido por dos porciones clramente diferenciadas.
Cadena CD3-gamma
Es tambin una glicoprotena de estructura similar a las anteriores y su funcin se cree que
es fundamentalmente estructural y/o de interaccin con otros correceptores (CD2, CD4, CD8,
etc.).
Cadena CD3-zeta.
Tiene una estructura distinta de los otros pptidos del complejo CD3, ya que su dominio
extracelular es de mucho menor tamao que el extracelular. Es de gran inters sealar las 6
tirosinas en el dominio intracelular, que se fosforilan cuando el receptor de la clula T se activa.
El segmento transmembrana de la cadena z tiene una gran homologa con la subunidad g del
receptor Fc de la IgE, y es requerido tanto para su expresin como para la transduccin de
seal (figura 7.6). La subunidad zeta se encuentra asociada al TCR en forma de homodmero
zz, o, con menor frecuencia, como heterodmero unido a otra protena, llamada h que proviene
del mismo gen que zeta por splicing alternativo.
Dentro del dominio citoplasmtico de todas las cadenas que forman el CD3 (g,d,e y en la
cadena z) existen unas regiones denominadas ITAM (Immunoreceptor Tyrosine-based
Activating Motif) que son ricas en tirosinas y susceptibles de ser fosforiladas en el proceso de
transduccin de seales de activacin hacia el interior celular.
Estructura del receptor TCR-gamma-delta/CD3

Este tipo de receptor se expresa en una poblacin minoritaria de linfocitos T perifricos
que carecen de las molculas de superficie CD4 y CD8 (tambin se encuentran en una
pequea proporcin de timocitos, en linfocitos de epitelio intestinal y en algunas clulas
dendrticas epidrmicas). La funcin de este tipo celular no est bien caracterizada, aunque se
cree que juegan un importante papel en las enfermedades autoinmunes (se aprecia un
aumento del nmero de este subtipo celular en sangre perifrica).
Sntesis y proceso de acoplamiento del complejo TCR/CD3.
Las cadenas peptdicas son sintetizadas en poliribosomas asociados a membrana, y la
formacin del complejo TCR/CD3 se produce mientras estas molculas an residen en el
retculo endoplsmico. Las primeras estructuras que se detectan durante este proceso de
biosntesis son CD3. Posteriormente se unen las cadenas alfa y beta. (se ha comprobado que
mutantes que carecen de las subunidades alfa y beta no son capaces de expresar el complejo
TCR/CD3 en la superficie celular). Por ltimo se produce la unin de la subunidad zeta y la
glicosilacin en el extremo N terminal de las cadenas alfa y beta del TCR y gamma y d del
complejo CD3 (Figura 7.7).
Con estos dos ltimos procesos, el receptor est listo para abandonar el retculo
endoplsmico y comenzar el mecanismo de exportacin, a travs del Golgi, a la superficie
celular. La maquinaria enzimtica que se encuentra en el interior del complejo de Golgi realiza
un procesamiento, tanto de las subunidades proticas como de las cadenas glucdicas unidas a
stas. Este proceso es necesario para que el receptor sea completamente funcional cuando
llegue a la membrana celular.
Estequiometra del complejo TCR/CD3
Aunque se conocen los componentes del complejo TCR/CD3, no se ha determinado
an con precisin en qu proporcin se asocian para constituir un complejo funcional. Segn la
hiptesis mas extendida, habra receptores formados por las molculas TcRCD3, ,
pero tambin podran existir los receptores con otras isoformas (Figura 7.8). En todos los
casos, habra dos sitios de unin al antgeno por complejo, como ocurre con las
inmunoglobulinas.
GENTICA DEL RECEPTOR
Al igual que ocurre en las inmunoglobulinas, los genes que codifican las cadenas alfa y
beta del TCR estn formadas a partir de la unin de elementos gnicos separados. El
reordenamiento gnico, tanto de las inmunoglobulinas como del TCR, es dependiente de la
presencia de secuencias de DNA especficas adyacentes a los segmentos gnicos de
reordenamiento. Mediante este proceso se genera una enorme diversidad de receptores.
El gen TCR-alfa
La organizacin gnica de la cadena a se puede dividir en cuatro regiones (en sentido 3'5')(Figura 7.9):
Una regin constante, que se reparte en cuatro exones, y que codifica para la regin
constante de la cadena (C-alfa)
Una serie de segmentos de unin (J)
Segmentos que codifican para las secuencias variables de la cadena V-alfa
Entre los segmentos gnicos V-alfa y J-alfa se encuentran los genes V(D)J del TCRdelta
El gen TCR-beta
Hay dos genes constantes, usados de forma intercambiable en todos los tipos de
clulas T, denominados C-beta1 y C-beta2, repartidos en cuatro exones que codifican el
dominio constante y una porcin del pptido de unin, regin bisagra y la cistena de unin
entre las cadenas alfa y beta, el dominio transmembrana y la fraccin citoplasmtica,
respectivamente(figura 7.9).
Genes del receptor gamma/delta-TCR
La organizacin gentica de los loci del gamma-TCR, localizado en el cromosoma 7,
est constituda por una serie de 14 genes variables, seguido de dos segmentos diferentes de
genes J-C. La diversidad de combinaciones generadas es muy limitada. Adems, una de las
regiones constantes es defectiva y podra eliminar uno de los genes V-gamma, no pudiendo
participar como molcula funcional (una caracterstica de la regin constante es que en el 2
exn se ha perdido el residuo de cistena, implicado en la formacin del puente disulfuro
intercatenario).
Estructura gentica del complejo CD3
Los genes que codifican para CD3gamma y CD3delta se encuentran muy prximos en
las especies analizadas. En humanos, ambos genes estn localizados en el brazo largo del
cromosoma 11 y estn separados por 1,5 Kb, aproximadamente. El gen CD3delta est
constitudo por cinco exones . El gen CD3-gamma tiene 7 exones. Las uniones exn-intrn
estn localizadas en posiciones homlogas en los dos genes, con la excepcin de que el gen
CD3-gamma contiene los dos exones adicionales. Una caracterstica del gen CD3d es el alto
nivel de conservacin de la secuencia de nucletidos situada 1000 bases por delante del codn
de iniciacin.
El gen CD3-epsilon est constitudo por 9 exones, dos de los cuales son inusualmente
pequeos. Las caractersticas ms importantes de estos genes son: a) mediante el estudio
comparado de secuencias se ha podido confirmar la relacin de estos genes con la
superfamilia de las inmunoglobulinas; b) la expresin de los genes CD3 parece estar
coordinada y regulada por factores reguladores superpuestos (se ha demostrado mediante la
utilizacin de mutantes, los cuales expresaban las cadenas alfa y beta, pero carecan de todo
el complejo CD3) y c) estos genes son transcritos sin promotores TATA, secuencia
caracterstica de eucariotas.
Reordenamiento de los genes del receptor clonotpico
Las secuencias adyacentes a la zona 5' de los segmentos J tienen, en homologa a las
inmunoglobulinas, determinadas secuencias, formadas por un heptmero y un nonmero, y
espaciadores muy conservativas implicados, como seal de reconocimiento, en el
reordenamiento somtico. Las regiones D tambin estn rodeadas de estas seales de
reconocimiento. Gracias a la existencia de regiones espaciadoras en D y J, es posible la
asociacin D-V J-V.
El mecanismo de reordenamiento sigue tres etapas (Figura 7.10):
Formacin de loops por secuencias complementarias, lo que origina la recombinacin

de los genes D y J.
El gen V sigue un mecanismo anlogo, constituyndose segmentos funcionales V-D-J.

La regin V podra asociarse tanto con genes de la regin D como con la regin J (esto
no ocurre en la cadena pesada de las inmunoglobulinas, donde la regin V slo puede
hacerlo con la regin D).
Por ltimo, se produce el agrupamiento de un gen L (secuencialder) y la regin

constante, dando lugar al DNA reordenado y completo que habra as creado una
especificidad al azar.
Generacin de la diversidad en los genes del receptor

Hay una serie de factores que intervienen en la generacin de la diversidad: a) la unin
aleatoria de los mltiples segmentos de los genes de la lnea germinal; b) la diversidad de
unin que resulta de una fusin imprecisa entre los distintos segmentos genticos, provocando
delecciones y adiciones de nucletidos, dando as origen a una diferencia en el nmero de
aminocidos; c) la asociacin al azar de las subunidades peptdicas que constituyen el receptor
(habra 5.000 tipos distintos de cadenas a y ms de 500 de cadenas b, que pueden
potencialmente formar 2.5 millones de combinaciones TCR V(D) J) y d) la multiplicidad de los
genes variables V.
En contraste con las inmunoglobulinas, los genes de TCR no parecen diversificarse
mediante mutaciones somticas de los genes reordenados, posiblemente debido a la
necesidad de reconocimiento de la molcula MHC.
FUNCION DEL RECEPTOR CLONOTIPICO
Las funciones del receptor clonotpico de la clula T son, durante el desarrollo en el
timo del linaje T, participar en la seleccin positiva y negativa, y en la periferia el
reconocimiento de antgenos exgenos. Estos fenmenos desembocan en la activacin celular,
durante la cual se inducen diversos programas funcionales en los linfocitos T: sntesis de
factores de crecimiento y de maduracin llamados linfocinas, sntesis de perforinas, seleccin
clonal, proliferacin celular, etc. En el reconocimiento antignico, adems del receptor
clonotpico juegan un papel fundamental otras molculas de superficie (entre ellas se
encuentran CD4, CD8, CD2, CD45) (ver capitulo sobre activacin de linfocitos T). La
participacin del TCR en la activacin de los linfocitos T, ser estudiada en el capitulo de
activacin de linfocitos T, mientras que seguidamente se tratar brevemente la participacin de
este receptor en el proceso de seleccin tmica.
Seleccin intratmica de los linfocitos T
El desarrollo de las clulas T en el timo, tal como se vio en el captulo 2, est
controlado por el TCR de los timocitos en dos estadios distintos (figura 7.11). Primero, un
homodmero TCR-beta asociado al complejo CD3 controla la expansin de los timocitos
inmaduros, media la exclusin allica del locus TCR-alfa, inicia la expresin gnica simultanea
de CD4 y CD8, e induce la transcripcin del locus TCR alfa.
En un segundo estadio, una vez que las clulas tienen el receptor formado por el
heterodmero alfa/beta, la especificidad del TCR intervine controlando el proceso de
maduracin de los timoncitos de dos formas:
seleccionando estas celulas para la maduracin cuando reconocen las molculas

MHC de clase I y II de las clulas del epitelio cortical del timo (seleccin positiva) o
entre las seleccionadas positivamente, entran en una muerte celular programada

(apoptosis) cuando sus receptores se unen con alta afinidad a un complejo MHCpptido endgeno(seleccin negativa).
En la figura 7.12 se esquematiza el proceso de seleccin positiva y seleccin negativa y en

lafigura 7.13 la composicin celular del timo y principales fases de la seleccin de timocitos.
Seleccin positiva de los linfocitos T.
En la seleccin positiva los timocitos se unen mediante su TCR con baja afinidad a las
molculas HLA clase I y II de las clulas epiteliales del timo en cuyo caso sobreviven mientras
que aquellos timocitos que no participan en este tipo de unin mueren por apoptosis. En
definitiva estos linfocitos que se seleccionan positivamente son rescatados de su muerte por
apoptosis. En este proceso participan tambin los pptidos propios presentados por las
molculas de histocompatibilidad tambin propias de cada individuo. En este proceso tambin
participan los receptores CD4 y CD8 de estos timocitos que como sabemos son doblemente
+
+
positivos (CD4 y CD8 ). Incluso experimentos bloqueando con anticuerpos monoclonales tanto
los receptores CD4 como CD8 han demostrado que la participacin de uno u otro de estos
receptores hace que los timocitos deriven hacia linfocitos T citotxicos o linfocitos T
colaboradores, segn que participe el receptor CD8 o CD4 respectivamente. Este tipo de
seleccin se efecta principalmente en el cortex del timo.
Seleccin negativa de los linfocitos T.
Este tipo de seleccin conduce a la muerte por apoptosis de aquellos timocitos que
reconocen con gran avidez mediante su TCR a las molculas de histocompatibilidad I o II
presentes en clulas dendrticas del timo. En este caso esta demostrado que los pptidos
propios presentados por las molculas HLA son de gran importancia. Este tipo de seleccin es
especialmente importante eliminando aquellos clonos celulares que al reconocer lo propio (HLA
ms pptidos propios) pueden tener capacidad autoreactiva una vez han madurado.
Precisamente al eliminar estas clulas se evita esto y la posibilidad de desarrollo de
enfermedades autoinmunes en el futuro. Es de destacar, como veremos en el capitulo de
activacin de linfocitos T, que cuando este tipo de unin de alta afinidad se produce en clulas
maduras, en lugar de muerte por apoptois, se produce una activacin linfocitaria. Este tipo de
seleccin se efecta principalmente en la mdula del timo.
En conclusin con estos dos procesos se garantiza:
la supervivencia selectiva de los linfocitos T capaces de reconocer pptidos sobre las

molculas MHC del individuo en el que tendrn que trabajar (seleccin positiva)
la eliminacin de los linfocitos T autorreactivos (seleccin negativa)
Una vez producida la seleccin positiva y negativa, las clulas supervivientes (menos del
2% del total) dejan de expresar uno de los dos correceptores (CD4 o CD8), dando lugar a
clulas CD4 CD8 TCRalfa-beta o CD4 CD8 TCRalfa-beta maduras (la regulacin de la mutua
exclusin de los genes CD4 y CD8 no est an esclarecida).
Reconocimiento del antgeno por el receptor de la clula T
Una vez en la periferia, el linfocito T tiene la capacidad de migrar a travs del cuerpo,
adherindose tanto funcional como no funcionalmente a distintos tipos celulares, sobre los que
reconoce antgenos exgenos. Por otro lado, una clula presentadora de antgeno que ha
procesado una protena antignica determinada expresar en su superficie celular un largo
nmero de diferentes complejos MHC/antgeno. Los pptidos que son reconocidos por las
clulas T deben tener una estructura secundaria en a-hlice. Se ha visto que todos los
pptidos antignicos son anfipticos, con una cara hidroflica y otra hidrofbica, pudiendo
interaccionar una de las caras con el complejo TCR/CD3 y la otra con la molcula de MHC,
respectivamente(Figura 7.14). Por esta razn, el reconocimiento de la asociacin MHC/pptido
antignico es un proceso dinmico que incluye un primer paso de complejas interacciones
clula-clula, antes de que se produzca un contacto productivo que d lugar a la activacin
celular.
Reconocimiento de superantgenos
Se denominan superantgenos a aquellos antgenos capaces de reaccionar con
distintas molculas MHC de clase II y TCR de un mismo individuo. Pueden ser exgenos (como
las toxinas de ciertos estafilococos), si provienen del exterior, o endgenos (como el retrovirus
MMTV), si se reproducen en la lnea germinal (Figura 7.15).
El reconocimiento del superantgeno se distingue del reconocimiento del pptido
antignico convencional por tres caractersticas fundamentales: la especificidad de la clula T a
los superantgenos est determinada por la regin variable de la cadena beta, siendo
independiente de otros componentes del receptor de la clula T; el superantgeno tiene dos
sitios de unin, uno para la molcula MHC de clase II, fuera de la hendidura de reconocimiento
peptdico, y otro para el TCR, situado en la regin Vb fuera del sitio clsico de unin al complejo
MHC-antgeno (esta caracterstica hace posible que un mismo superantgeno pueda
interaccionar con distintas clulas del repertorio T). Como consecuencia del reconocimiento
de superantgenos exgenos en periferia, se produce la activacin celular y fuerte expansin
de las clulas T implicadas en el reconocimiento.
ENFERMEDADES ASOCIADAS Al COMPLEJO TCR/CD3.
Alteraciones de diferente ndole del TCR/CD3 pueden dar lugar a enfermedades a
veces de difcil diagnstico.
Receptor clonotpico: oligoclonalidad y enfermedad
Los linfocitos T constituyen, en condiciones normales, una poblacin policlonal en la que
estn representados, en proporciones equivalentes, todas las regiones V de las cadenas TCRalfa y TCR-beta. Sin embargo, diferencias en la configuracin de los genes del receptor
clonotpico o en la seleccin intratmica pueden afectar al repertorio de linfocitos T, existiendo
una reduccin de determinados clones y un aumento de los niveles de otros. Estas alteraciones
pueden detectarse analizando la expresin de las regiones V de las cadenas alfa y beta de
estas clulas, y se ha demostrado que se asocian a ciertas enfermedades autoinmunes como
la artritis experimental inducida por colgeno.
Complejo CD3 y transduccin de la seal
Se ha descrito diversas enfermedades causadas por deficiencias que afectan de forma

selectiva a una o varias molculas del complejo TCR/CD3 (defectos estructurales), o bien por
un defecto en la transmisin de la seal de activacin al interior celular (deficiencias
funcionales, ya sean primarios o secundarios).
Estas deficiencias producen alteraciones en el sistema inmune: disminucin del nmero
de linfocitos, inhibicin de la proliferacin celular, reduccin de la sntesis de citocinas, etc. Las
consecuencias clnicas que se derivan de estos defectos son variadas y ms o menos graves;
sobre todo existen infecciones recurrentes y, a veces, enfermedades autoinmunes.
Defectos estructurales
Hasta el momento se han descrito, en humanos, tres deficiencias que afectan al
complejo CD3 o protenas asociadas a l: CD3-gamma, CD3-epsilon y la PTK Zap-70. En los
enfermos con dficit de las cadenas CD3-gamma, CD3epsilon hay una disminucin del nmero
de molculas de membrana del complejo TCR/CD3, el 50% para la deficiencia de CD3-gamma
y un 90% para el CD3-epsilon; este dato sugiere que la cadena e es ms importante para la
conformacin del complejo, y que, como comentamos anteriormente, existiran isoformas del
complejo donde las cadenas CD3-gamma y epsilon, que pueden ser alternativas, y suficientes
para que CD3 se transporte a la membrana.
Defecto secundarios del reconocimiento a travs del TCR/CD3.
Algunos virus pueden producir efectos patognicos directos en el sistema inmune por
interferir en la transduccin de seales por el TCR/CD3. Se ha demostrado que algunos virus
infectan
clulas
T
humanas:
virus
de
inmunodeficiencia
humana
(HIV), citomegalovirus (CMV),herpesvirus humano tipo 6 (HHV-6), measles virus y otros.
Tambin se sabe que algunos tumores inducen inmunodeficiencias secundarias de los
linfocitos T, probablemente, entre otros factores alteraciones estructurales en el complejo CD3.
TEMA 8. CITOCINAS Y QUIMIOCINAS.

INTRODUCCIN
En este captulo se tratar sobre las citocinas y quimiocinas, incluyendo tambin
conceptos bsicos sobre sus receptores. Las citocinas comprenden un amplio grupo de
protenas o glicoprotenas que poseen la capacidad de modular la actividad funcional de
clulas individuales y de tejidos, tanto en condiciones fisiolgicas como patolgicas. Las
quimiocinas son un grupo de pequeas molculas proteicas (8-14 kDa) con caractersticas
bioqumicas comunes y que estn producidas por muchos tipos celulares en respuesta a
estmulos exgenos o endgenos
CITOCINAS
Son molculas de bajo peso molecular, normalmente entre 15-30 KDa, constituidas por
120-180 aminocidos. Aunque en general estn producidas por leucocitos, determinadas
citocinas pueden tambin ser secretadas por otros muchos tipos celulares. Originariamente se
estableci el trmino linfocina para denominar productos biolgicos producidos por linfocitos en
respuesta al antgeno. Posteriormente su uso se ampli a molculas de caractersticas

similares secretadas por otros tipos celulares, por lo que se utiliz el trmino ms amplio de
citocina. El trmino interleucina (IL) se aplic a aquellas molculas que servan como seales
de comunicacin entre distintos tipos de leucocitos, numerndose correlativamente a medida
que se descubran (IL-1, IL-2, etc.). No obstante, algunas de ellas se detectaron inicialmente en
ensayos funcionales in vitro y an conservan su denominacin original de acuerdo con la
funcin biolgica que permiti su identificacin, como es el caso del TNF (factor de necrosis
tumoral) y el TGF (factor transformador de tejidos).
La expresin de la mayora de las citocinas est estrictamente regulada. En general, no
se detecta una produccin constitutiva significativa de estas molculas, siendo necesaria la
activacin celular para que se produzcan citocinas en cantidades suficientes para ejercer sus
efectos biolgicos. La mayora de las citocinas son secretadas al espacio extracelular, muchas
de ellas en forma glicosilada que incrementa su estabilidad y solubilidad. No obstante, algunas
citocinas se pueden acumular en el interior de la clula, o, bien, permanecer ancladas a la
membrana o en la matriz extracelular. En general, son molculas que poseen una vida media
muy corta y actan a muy bajas concentraciones, del orden de picogramos, mediante la unin
a receptores de alta afinidad presentes en la superficie de la propia clula productora o en otros
muy variados tipos celulares. Las citocinas ejercen un efecto autocrino cuando se unen a
receptores presentes en la propia clula productora. Tambin pueden tener un efecto
paracrino, actuando sobre diferentes tipos celulares que se encuentran en su vecindad. En
algunos casos pueden liberarse a la circulacin sangunea o linftica, ejerciendo su efecto en
otros rganos y tejidos, actuando as como las hormonas, de forma endocrina (Figura 9.1).
Dos importantes caractersticas funcionales de las citocinas son su pleiotropismo, de

tal manera que una misma citocina es capaz de ejercer efectos biolgicos diferentes al actuar
sobre distintos tipos celulares, y su redundancia, es decir, que varias citocinas pueden
contribuir al desarrollo de la misma funcin en un determinado tipo celular. Una consecuencia
de estas propiedades es que, en ausencia de una determinada citocina, sus funciones pueden
ser reemplazadas total o parcialmente por otras. Muchas de estas caractersticas biolgicas de
las citocinas se pueden explicar por la estructura y amplia distribucin celular de sus
receptores, como se ver ms adelante. Las acciones de las citocinas se engloban dentro de
un sistema o red funcional, donde el efecto de una molcula est estrechamente regulado,
positiva o negativamente, por otras molculas del sistema. As, la secrecin de una citocina
puede estar inducida, potenciada o inhibida por otra citocina que, a su vez, puede incrementar
o inhibir la expresin de sus receptores.
Los efectos biolgicos de las citocinas pueden ser muy variados, ya que, no solamente
desempean un papel esencial en las respuestas inmunes, sino que algunas de ellas estn
tambin implicadas en la embriognesis y en el desarrollo de rganos (por ejemplo, en la
angiognesis), otras juegan un papel clave en procesos neuroinmunes y neuroendocrinos, y
muchas son importantes reguladores, tanto positivos como negativos, de acontecimientos
celulares como la mitosis, la diferenciacin, la migracin, la supervivencia, la muerte celular, e,
incluso, de su transformacin maligna.
La actividad biolgica de las citocinas se puede medir con distintas modalidades de

bioensayos, utilizando, por ejemplo, lneas celulares cuya funcin depende de la presencia del
factor que se quiere estudiar. En la actualidad, se utilizan como tcnica ms habitual
inmunoensayos en fase slida, como el ELISA para cuantificar la concentracin de citocinas en

fluidos biolgicos, y el ELISPOT para conocer el nmero de clulas productoras. Tambin es
posible cuantificar y caracterizar las clulas productoras identificando las citocinas
intracelulares mediante citometra de flujo. Otra posibilidad es la utilizacin de tcnicas de RTPCR cuantitativa que permiten detectar y medir los niveles de RNAm que codifican una
determinada citocina.
Aunque la mayora de las citocinas no poseen ninguna homologa secuencial entre s,

algunas de ellas se han agrupado en familias en base a su estructura tridimensional. De
acuerdo con la estructura secundaria de la molcula se han agrupado las citocinas segn
posean una conformacin en alfa-hlice (IFN-alfa, IFN-gamma, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7,
IL-9, G-CSF, M-CSF y GM-CSF), una estructura de lminas beta (IL-1-alfa, IL-1-beta, TNF-alfa
y TNF-beta) o una estructura compuesta alfa/beta IL-8 e IFN-gamma). Por otra parte, el
anlisis de su disposicin gnica ha dado lugar a la definicin de grupos de citocinas que se
encuentran asociadas genticamente. Uno de estos grupos se ha descrito en el brazo largo del
cromosoma 5 (5q31), donde se encuentran los genes que codifican para IL-3, IL-4, IL-5, IL-9,
subunidad p40 de la IL-12, IL-13 y GM-CSF, mientras que en el cromosoma 2 (2q12-14) se
localizan los genes que codifican para las citocinas IL-1 e IL-1RA, sta el antagonista natural
del receptor de la IL-1.
Es difcil establecer una clasificacin funcional de las citocinas debido a su alto grado
de pleiotropismo. No obstante, para facilitar su estudio las describimos englobadas, de acuerdo
con su funcin ms relevante, dentro de las siguientes secciones: 1) citocinas implicadas en el
desarrollo hematopoytico, 2) citocinas implicadas en las respuestas inmunes innatas y,
finalmente 3) citocinas generadas durante las respuestas inmunes adaptativas. Algunas de las
citocinas sern mencionadas en ms de una seccin, si bien su descripcin se har slamente
en el apartado en que se cite originalmente.
Citocinas implicadas en el crecimiento y la diferenciacin hematopoytico

Comprenden un grupo amplio de citocinas que promueven el crecimiento y
diferenciacin de las clulas sanguneas maduras a partir de clulas madre hematopoyticas.
Son producidas por clulas del estroma de la mdula sea o por linfocitos maduros activados.
Algunas de estas citocinas reciben el nombre genrico de factores estimuladores de la
formacin de colonias (CSF) por su capacidad para estimular la formacin de colonias
celulares en los cultivos de mdula sea . (Tabla 9.1). A continuacin describimos las ms
relevantes:
IL-3. Es producida mayoritariamente por los linfocitos T activados y tambin por
mastocitos. Induce la proliferacin y diferenciacin de progenitores hematopoyticos
tempranos de todas las series sanguneas, por lo que tambin es conocida como
multi-CSF. Induce fundamentalmente la hematopoyesis en situaciones de stress que
requieren una respuesta rpida, siendo menos claro su papel en la hematopoyesis
constitutiva.
IL-5. Es secretada en forma glicosilada por LT CD4+ activados del tipo Th2. Es
esencial en la proliferacin y diferenciacin de las clulas precursoras de los
eosinfilos, as como en el mantenimiento de la actividad de los eosinfilos maduros
siendo la responsable de la eosinofilia en infecciones parasitarias. Sobre los linfocitos B

acta incrementando su proliferacin y estimulando la produccin de IgA.
IL-7. Es producida por clulas estromales de la mdula sea. Promueve la maduracin
de progenitores pro- y pre-B hacia linfocitos B maduros en la mdula sea y de
linfocitos T inmaduros en el timo fetal y adulto. Tambin acta como factor de
crecimiento para linfocitos T y B.
IL-9. Es producida por linfocitos T activados. Tiene un amplio espectro de actividades
no muy bien definidas entre las que se incluye la proliferacin de precursores eritroides.
Al igual que la IL-7, tambin induce la proliferacin de LT y estimula la produccin de
inmunoglobulinas en clulas B.
IL-11. Es producida por fibroblastos del estroma de la mdula sea y otros tipos
celulares. Estimula la megacariocitopoyesis y sinergiza con otras citocinas para
estimular el crecimiento de otros precursores hemticos. Comparte algunas funciones
con la IL-6, como la induccin de protenas de fase aguda en el hgado. Tambin se ha
descrito su capacidad como estimuladora de la secrecin de inmunoglobulinas por
clulas B en respuestas T-independientes.
GM-CSF. Es producido por linfocitos T activados y por otras clulas como fibroblastos,
clulas endoteliales y monocitos. Es un polipptido con varios posibles lugares de
glicosilacin. Induce la proliferacin de los progenitores de granulocitos y macrfagos,
producindose en respuesta a estmulos especficos en situaciones que requieren una
elevada produccin de stas clulas. Tambin puede actuar sobre granulocitos y
macrfagos maduros.
G-CSF. Es producido por fibroblastos, clulas endoteliales y monocitos en respuesta a
estmulos especficos. Acta sobre los precursores hematopoyticos de los
granulocitos y sobre los granulocitos maduros. La granulocitosis asociada a ciertas
infecciones se debe a que el LPS de las paredes bacterianas es un potente inductor de
la produccin de esta citocina. Se han descrito otras funciones de este factor, como la
estimulacin de la fagocitosis y de la citotoxicidad mediada por Ac.
M-CSF. Es producido por monocitos y macrfagos maduros activados y est implicado
en el desarrollo de las clulas progenitoras de los macrfagos. Tambin se ha visto
que facilita el desarrollo de la placenta, siendo producido por clulas del epitelio uterino
en respuesta a los estrgenos.
Citocinas producidas en las respuestas inmunes innatas

Estas citocinas se producen de forma inmediata tras el contacto de las clulas
implicadas en las respuestas inmunes innatas con un agente extrao. Los monocitos y
macrfagos activados son la principal fuente de estas molculas aunque tambin pueden ser
producidas por linfocitos activados y otras clulas no pertenecientes al sistema inmune, como
clulas endoteliales y fibroblastos (Tabla 9.2).
IL-1. Es producida fundamentalmente por monocitos y macrfagos, pero tambin por

clulas dendrticas, endoteliales, NK y otros tipos celulares. Existen dos formas, IL1alfa e IL-1beta que, aunque solamente tienen un 25 % de homologa en su secuencia
aminoacdica, comparten el mismo receptor y ejercen efectos biolgicos similares.
Parte de sus efectos proinflamatorios se debe a que induce la liberacin de histamina
en los mastocitos, generando vasodilatacin y aumento de la permeabilidad vascular
en el lugar de la inflamacin. Es el principal pirgeno endgeno, induciendo fiebre a
travs de la produccin de prostaglandinas. Tambin promueve la sntesis de protenas
de fase aguda por los hepatocitos y acta sobre el SNC induciendo sueo y anorexia,
tpicamente asociados con los procesos infecciosos (Figura 9.2).
IL-6. Es producida fundamentalmente por monocitos/macrfagos, fibroblastos, clulas

endoteliales, linfocitos T y clulas del estroma de la mdula sea. Junto con la IL-1 es
la principal inductora de la sntesis de protenas de fase aguda, sobre todo de
fibringeno. Adems de su efecto en la inflamacin, se ha observado que promueve la
diferenciacin de linfocitos B hacia clulas plasmticas, induciendo la produccin de
inmunoglobulinas. Tambin puede aumentar la produccin de IL-2 y el desarrollo de los
precursores hematopoyticos dependientes de la IL-3 (Figura 9.3).
TNF. Los factores de necrosis tumoral fueron descritos inicialmente por su capacidad
de causar necrosis en algunos tumores. Con posterioridad , sin embargo, ganaron
protagonismo por las numerosas funciones que ejercen sobre las respuestas inmunes.
Se han descrito dos molculas estrechamente relacionadas, el TNF-alfa y el TNF-beta,
con elevada homologa en su secuencia aminoacdica. El TNF-alfa es producido
fundamentalmente por monocitos y macrfagos en respuesta a antgenos bacterianos,
tales como el LPS, siendo esta citocina el principal responsable del shock sptico
asociado a bacteriemias. Tambin puede ser producido por linfocitos T y B, NK,
fibroblastos y mastocitos. Junto con la IL-1 est implicado en los procesos inflamatorios
derivados de los procesos infecciosos, elevando la temperatura corporal y produciendo
caquexia y sueo al actuar sobre el SNC. Por otra parte, induce la expresin de
molculas de adhesin y estimula la produccin de IL-8 por clulas del endotelio
vascular, lo que contribuye a la extravasacin de linfocitos, neutrfilos y monocitos. El
TNF-beta o linfotoxina, es producido exclusivamente por linfocitos T activados,
aunque se une a los mismos receptores que el TNF-alfa e induce funciones similares.
IL-10. Es producida por linfocitos del tipo Th2, as como tambin por
monocitos/macrfagos, linfocitos B, queratinocitos y otros varios tipos celulares. Es la
citocina inmunosupresora por excelencia, inhibiendo la sntesis de muchas otras
citocinas, entre las que podemos citar IFN-gamma, TNF-alfa, IL-2, IL-12, y la expresin
de MHC-II y molculas de adhesin en monocitos. Tambin tiene efectos
antiproliferativos sobre muchos tipos celulares. La IL-10 ejerce adems mltiples
actividades inmunomoduladoras. Se ha visto que es un cofactor para el crecimiento de
lneas y colonias de clulas mastocticas in vitro. Regula las funciones mediadas por
linfocitos B induciendo la sntesis de IgG, y por linfocitos T, influyendo en el desarrollo
de timocitos y clulas T. Tambin ejerce efectos reguladores sobre la angiognesis. El
virus de Epstein Barr secreta una protena que posee una gran homologa estructural
con la IL-10 humana (vIL-10), y que tras unirse con baja afinidad al propio receptor de
la IL-10, ejecuta actividades biolgicas similares. Relacionadas estructural y
funcionalmente con la IL-10 se han descrito recientemente nuevas molculas tales
como la IL-19, IL-20 e IL-22, cuyas funciones son todava poco conocidas (Figura 9.4).
IL-12. Es producida mayoritariamente por monocitos/macrfagos, aunque su

produccin puede ser tambin inducida en clulas dendrticas y linfocitos B.
Inicialmente se describi como el factor estimulador de las clulas asesinas naturales
(NK), pero la actual importancia de esta citocina deriva de su capacidad de dirigir la
diferenciacin de los linfocitos Th hacia clulas efectoras tipo Th1 de la
hipersensibilidad retardada. La forma madura de esta molcula (p75) est compuesta
de dos subunidades, p35 y p40. La sntesis de ambas subunidades est regulada
diferencialmente, siendo ambas necesarias para la actividad funcional del
heterodmero. Esta citocina incrementa la actividad citotxica de las clulas NK e
induce clulas LAK (linfocitos asesinos activados por linfocinas). Incrementa la
produccin de IFN- por linfocitos T y clulas NK y activa linfocitos T citotxicos.
Recientemente se ha descrito un factor proteico denominado p19, sin actividad
biolgica por s mismo, que se combina con la subunidad p40 de la IL-12 para dar lugar
a una nueva citocina biolgicamente activa denominada IL-23. Esta citocina es
producida por clulas dendrticas activadas, se une al receptor de la IL-12 y comparte
algunas de las funciones biolgicas con ella.
IL-18. Esta citocina est estrechamente relacionada en sus funciones biolgicas con la
IL-12, ya que posee la misma capacidad de induccin de IFN-gamma en linfocitos T y
clulas NK. Sin embargo, es producida por diferentes tipos celulares que la IL-12,
siendo las clulas adrenales y de Kupffer las principales fuentes de produccin de la IL18.
Interferones tipo I. Los interferones fueron inicialmente descritos como agentes producidos
por clulas infectadas por virus. Posteriormente se descubri que adems de su capacidad
antiviral ejercan efectos reguladores sobre la proliferacin y la diferenciacin de varios tipos
celulares y tenan capacidad de modular el sistema inmune. Se clasificaron en dos grupos. Los
interferones tipo I, que incluyen el IFN-alfa y el IFN-beta, con capacidad principalmente
antiviral y antiproliferativa, y el IFN-gamma (tipo II), al que nos referiremos posteriormente, con
un mayor efecto inmunomodulador. El IFN-gamma es producido fundamentalmente por
monocitos y macrfagos, mientras que el IFN-alfa es secretado por fibroblastos y algunas
clulas epiteliales. Ambos incrementan la expresin de molculas de MHC de clase I. En
algunos casos se ha observado que poseen actividad antitumoral, posiblemente debido a su
efecto antiproliferativo sobre las clulas tumorales, y modulador sobre el sistema inmune.
Citocinas producidas en las respuestas inmunes adaptativas
En respuesta a una estimulacin antignica, los linfocitos T se activan, proliferan y se

diferencian hacia clulas efectoras especficas. Estas clulas ejercen sus funciones
produciendo una serie de molculas solubles, verdaderas artfices de los mecanismos
efectores de la respuesta inmune adaptativa (Tabla 9.3).
Los linfocitos T CD4+, como consecuencia de una estimulacin antignica, pueden
diferenciarse hacia linfocitos T cooperadores de tipo Th1 o Th2, estando esta diferenciacin en
parte condicionada por las citocinas que se encuentran en el medio. As, la presencia de IL-12
promueve la diferenciacin hacia Th1, mientras que la IL-4 condiciona el desarrollo Th2. Los
linfocitos Th1, en colaboracin con los macrfagos, estn implicados en la respuesta inmune
celular, mientras que los Th2 promueven la respuesta inmune humoral. Para llevar a cabo su
funcin los linfocitos Th1 secretan IL-2, IFN-gamma y TNF, mientras que los Th2 producen IL4,
IL-5, IL-10 e IL-13. Se han descrito otras subpoblaciones de linfocitos T CD4+ efectores que
secretan un perfil de citocinas diferente y llevan a cabo funciones especficas. Este es el caso
de los linfocitos T reguladores de los que se han descrito varios tipos.
Los linfocitos T CD8+ se diferencian hacia linfocitos T citotxicos como respuesta a la
estimulacin antignica y a la presencia de citocinas secretadas por otras clulas. Ejercen su
funcin efectora mediante la secrecin fundamentalmente de IL-2, IL-16, IFN-gamma y TNF.
Finalmente hay una serie de citocinas que pueden ser producidas por ambos tipos de
linfocitos T, CD4+ y CD8+, tales como IL-2, GM-CSF y TGF-beta.
IL-2. Es secretada por linfocitos T CD4+ y CD8+ activados en respuesta a un estmulo

antignico. Inicialmente se describi como factor de crecimiento de clulas T, ya que es
el principal agente que controla su proliferacin. Ejerce otros muchos efectos sobre el
sistema inmune, teniendo un papel esencial en el desarrollo de las respuestas
inflamatorias crnicas, tanto humorales como celulares. Es un factor estimulador del
crecimiento de linfocitos T , B y NK. Promueve la actividad citotxica mediada por
linfocitos T y clulas NK, as como el desarrollo de clulas LAK (clulas asesinas
activadas por citocinas). Tras unirse a su receptor en linfocitos T, activa la secrecin
de IFN-alfa, linfotoxina, IL-4, IL-3, IL-5 y GM-CSF. Sobre los linfocitos B estimula su
crecimiento y diferenciacin e incrementa la expresin de molculas de MHC de clase
II.
IL-15. Es secretada por una amplia variedad de clulas, entre las que se incluyen
clulas epiteliales, monocitos, msculo esqueltico, hgado, pulmn y placenta. Aunque
no es una citocina producida por linfocitos Th1 se incluye en este apartado por su
similitud funcional con la IL-2, con la que comparte la mayora de sus actividades
biolgicas, como la estimulacin de clulas NK, y la proliferacin y diferenciacin
linfocitaria.
IFN. Es producido por linfocitos Th1, LTC y por clulas NK. Adems de su efecto
antiviral posee una importante actividad inmunomoduladora. Incrementa la expresin
de antgenos de HLA de clase I y II en varios tipos celulares, lo que facilita su funcin
presentadora de Ag y activa a los macrfagos, incrementando su capacidad tumoricida
y de defensa contra las infecciones. Acta de forma autocrina sobre las propias clulas
NK que lo producen, aumentando su actividad citoltica y, como consecuencia,
incrementando su efecto antitumoral. Sobre los linfocitos Th2 inhibe la proliferacin, de
manera que su presencia durante la estimulacin antignica induce la diferenciacin de
linfocitos T hacia clulas efectoras tipo Th1 favoreciendo, por lo tanto, el desarrollo de
las respuestas inflamatorias (Figura 9.5).
IL-4. Es producida por linfocitos Th2, mastocitos, basfilos, clulas del estroma de la
mdula sea y, posiblemente, por determinadas subpoblaciones de clulas NK. Es
una citocina muy pleiotrpica, ya que ejerce numerosos efectos en diferentes tipos
celulares. Promueve la diferenciacin de linfocitos T vrgenes hacia clulas de tipo Th2,
inhibiendo la generacin de clulas Th1. Posee efectos inmunosupresores, ya que
inhibe la produccin de deteminados mediadores inflamatorios de los macrfagos e
induce la produccin de IL-1Ra, que bloquea la accin de la IL-1. Por otra parte,
promueve el desarrollo de las respuestas inmunes humorales a travs de la induccin
del crecimiento y diferenciacin de linfocitos B, produciendo el cambio isotpico hacia
IgG4 e IgE e incrementando la expresin de molculas CD23 en linfocitos B, basfilos
y eosinfilos. Por todo ello, los efectos de esta citocina se han relacionado con el
desarrollo de los procesos alrgicos y con el incremento de IgE en las infecciones
parasitarias
IL-13. Es producida por linfocitos T activados del tipo Th2, compartiendo muchas de
sus funciones con la IL-4 con la que se encuentra genticamente relacionada. Es una
citocina con actividad inmunosupresora ya que inhibe, junto con la IL-4 y la IL-10, la
produccin de citocinas inflamatorias por los monocitos (IL-1beta, TNF-alfa, IL-8, IL-6).
Por otra parte, esta citocina incrementa la proliferacin y diferenciacin de monocitos y
clulas B, incrementa la expresin de CD23 y promueve el cambio de clase de
inmunoglobulinas hacia la produccin de IgE
IL-16. Est producida por los linfocitos T CD8+ donde se acumula y se secreta en
respuesta a la estimulacin con serotonina o histamina. Originariamente se identific
como factor quimiotctico de linfocitos, recibiendo el nombre de linfotactina, debido a
su efecto atrayente sobre los linfocitos T CD4+. En la actualidad es el nico miembro
de la familia C de quimiocinas (vase ms adelante).
TGF . Hay dos tipos de factores transformadores del crecimiento, el TGF-alfa y el

TGF-beta, que no poseen ninguna similitud estructural ni comparten los mismos
efectos. Solamente el TGF-beta tiene efectos inmunomoduladores. Es producido por
linfocitos T, plaquetas y otros muchos tipos celulares. Su nombre responde a la
observacin inicial de que induca cambios fenotpicos en los fibroblastos de rata.
Incrementa la proliferacin de fibroblastos, osteoblastos y clulas musculares lisas e
incrementa la sntesis de protenas de la matriz extracelular, lo que favorece la curacin
de las heridas. Esta citocina tiene tambin efectos inmunosupresores ya que se
observ que inhiba el crecimiento y la funcin de muchos tipos celulares. En el sistema
inmune inhibe la sntesis y/o el efecto del IFN-gamma, TNF-alfa, TNFbeta, IL-1, IL-2 e
IL-3, as como la citotoxicidad natural y especfica.
Citocinas proinflamatorias e inmunosupresoras

En relacin con la respuesta inflamatoria algunas citocinas favorecen el desarrollo de la
misma (citocinas proinflamatorias) mientras que otras ejercen un efecto supresor de la
inflamacin (citocinas inmunosupresoras).
Las citocinas con actividad antiinflamatoria e inmunosupresora inhiben el crecimiento
celular o suprimen la secrecin de otras citocinas. Entre ellas se encuentran la IL-4, IL-13 e IL10, que activan las acciones de los linfocitos B a la vez que inhiben las respuestas
inflamatorias. Como ya comentamos, la IL-10 es la citocina inmunosupresora por excelencia.
Tambin se incluye en este apartado el TGF-beta que, como se ha dicho anteriormente, inhibe
el crecimiento y la funcin de muchos tipos celulares, la sntesis de determinadas citocinas y la
actividad citotxica natural y especfica. Finalmente, los interferones tipo I (alfa y beta), tambin
se pueden considerar citocinas supresoras debido a su capacidad antiproliferativa y a su efecto
regulador de la produccin de citocinas proinflamatorias.
En el grupo de las citocinas con actividad proinflamatoria se incluyen las producidas
por los monocitos y macrfagos activados durante las respuestas inmunes innatas, aunque
tambin pueden ser producidas por linfocitos activados (Th1 o citotxicos), y otras clulas no
pertenecientes al sistema inmune. Las principales citocinas que participan en los
acontecimientos celulares y moleculares asociados con los fenmenos inflamatorios son la IL1, IL-6, TNF-alfa y algunos miembros de la familia de las quimiocinas, que describimos ea
continuacin. Otra importante citocina proinflamatoria es el IFN-gamma, producido por linfocitos
Th1 en las respuestas inmunes especficas y por clulas NK activadas.
En la figura 9.6,se presenta un esquema general de la respuesta inmune en donde se
incluye la mayora de la citocinas conocidas. Tambin se incluye un esquema (Figura
9.7)donde se especifican las principales citocinas que intervienen sobre los linfocitos T, B y
macrfagos su orden de aparicin (Figura 9.8) en infecciones de tipo agudo.
*** QUIMIOCINAS
Su nombre proviene de citocinas quimiotcticas a que muchas de ellas poseen
propiedades quimioatrayentes, regulando el trasvase de leucocitos hacia rganos y tejidos. Las
quimiocinas secretadas se unen a proteoglicanos y a protenas de la matriz extracelular donde
se cree permanecen inmovilizadas sin pasar a la circulacin. Esta capacidad de unin a la
matriz extracelular favorece la permanencia de las quimiocinas en su lugar de produccin y
apoya el concepto de que la migracin de los leucocitos se realiza a travs de un gradiente
slido.
La caracterstica bioqumica comn de estas molculas es la conservacin de 4
residuos de cistena que se unen formando dos puentes disulfuro, esenciales para la actividad
de la molcula. Dependiendo de si las dos primeras cistenas estn o no separadas por otro
aminocido se han clasificado en quimiocinas CXC (cis-X-cis), y quimiocinas CC (cis-cis).
Hay otras 2 quimiocinas, la linfotactina y la fractalkina, que pertenecen a otras subfamilias por
tener caractersticas bioqumicas diferentes.
La molcula ms representativa de la familia CXC es la IL-8 (CXCL8). Es sintetizada
por todos los tipos de leucocitos, as como por otros muchos tipos celulares (fibroblastos,
clulas endoteliales, hepatocitos, astrocitos. etc.) y clulas tumorales (melanoma, carcinoma de
ovario,pulmonar, etc.) en respuesta a una amplia variedad de estmulos. La primera actividad
biolgica descrita fue la activacin de neutrfilos, en los que induca degranulacin, cambios
morfolgicos y quimiotaxis. Luego se observ que tambin era quimiotctico para eosinfilos y
basfilos. Es tambin un potente factor angiognico. Dentro de la familia CC se encuentran
laeotaxina, importante en los procesos alrgicos por ser quimiotctica para eosinfilos,
elRANTES que es quimiotctico para linfocitos T de memoria, y la protena quimioatrayente de
monocitos (MCP-1).
En general, las quimiocinas CXC son potentes quimioatrayentes para neutrfilos

mientras que las CC atraen ms eficientemente a los monocitos. Dado que las respuestas
inflamatorias se inician con la migracin de estas clulas hacia el foco inflamatorio, dirigidas por
la accin de las quimiocinas, estas molculas son altamente inducibles en una amplia variedad
de clulas por estmulos proinflamatorios, como el LPS bacteriano, IL-1, TNF e IFN-gamma.
Algunas quimiocinas CC son tambin potentes atrayentes de eosinofilos y basfilos e, incluso,
de clulas T de memoria, de tal forma que puede iniciar una respuesta inflamatoria como
consecuencia de una respuesta inmune especfica.
Hasta el momento actual se han descrito ms de 40 molculas de quimiocinas, que
agrupadas en las dos grandes familias, CXC y CC, se detallan en la tabla 9. 4, en las que se
muestra la ltima nomenclatura sistemtica propuesta y la original. Hasta hace poco se
pensaba que las quimiocinas actuaban sobre neutrfilos, monocitos y eosinfilos, y que, por lo
tanto, estaban implicadas principalmente en las respuestas inflamatorias agudas y crnicas.
Recientemente se han identificado nuevas quimiocinas con caractersticas funcionales
diferentes. Algunas de ellas son altamente especficas para linfocitos y clulas dendrticas y se
expresan constitutivamente en rganos linfoides primarios y secundarios. El hallazgo de estas

nuevas quimiocinas que tienen como diana clulas pertenecientes al sistema inmune ha
atrado el inters sobre estas molculas y ha propiciado una nueva clasificacin, principalmente
en base a criterios funcionales. De acuerdo con esta nueva clasificacin se
denominan quimiocinas inflamatoriasa las clsicas con capacidad atrayente sobre
monocitos y neutrfilos, mientras que las que actuan sobre linfocitos reciben el nombre
de inmunoquimiocinas. Ambos tipos pueden tener una estructura molecular CXC, si bien las
inflamatorias clsicas poseen el motivo ELR (cido glutmico-leucina-arginina) inmediatamente
antes del primer residuo de cistena, mientras que las inmunoquimiocinas no lo poseen (CXCno ELR). De forma similar tambin se han descrito dentro de las quimiocinas CC molculas
inflamatorias clsicas e inmunoquimiocinas. Estas molculas ejercen su funcin unindose a
receptores celulares que, a diferencia de la citocinas, no son especficos para cada molcula,
pudiendo el mismo receptor unir diferentes quimiocinas. Todas estas molculas se encuentran
distribuidas en el genoma en clusters, mayoritariamente en el cromosoma 4 y 17 , lo que indica
un origen gnico comn y su diversidad por duplicaciones gnicas..
RECEPTORES DE LAS CITOCINAS

La comunicacin entre los diferentes tipos celulares del sistema inmune y de otros
sistemas del organismo est mediada por factores solubles denominados citocinas. Estas
molculas ejercen su efecto biolgico a travs de su unin con receptores especficos
expresados en la superficie celular. Los receptores de citocinas son protenas de membrana
glicosiladas que constan de una regin extracitoplasmtica de unin con la citocina, una regin
transmembranal y una regin citoplasmtica que interviene en la transmisin de seales al
interior de la clula. La clonacin de muchos de estos receptores y el anlisis de su estructura
ha permitido clasificarlos en 4 familias segn regiones comunes de homologa dentro de los
miembros de una misma familia(Tabla 9.5).
-9
-11
Los receptores funcionales son de alta afinidad (10 -10 M), es decir, nicamente son
necesarias bajas concentraciones de citocinas para una unin efectiva con su receptor y para
desencadenar su correspondiente efecto biolgico. Adems, estos receptores se expresan en
un nmero bajo en la superficie celular generalmente de unos pocos cientos a unos pocos
miles de receptores por clula. La distribucin de algunos de ellos, como por ejemplo los de la
IL-2 y de la IL-5, est restringida a unos pocos tipos celulares mientras que otros, entre los que
se pueden citar los de la IL-1, IL-4 e IL-6, se encuentran distribuidos en una amplia variedad
de tipos celulares. La expresin de los receptores de citocinas en la superficie celular puede
ser constitutiva, es decir, tiene lugar sin necesidad de ningn estmulo fisiolgico o, por el
contrario, puede requerir que la clula sea activada previamente. En general, la activacin
celular incrementa el nmero de receptores por clula.
Muchos de los receptores de citocinas son complejos multicatenarios compuestos de
una cadena que se une especficamente a la citocina (cadena especfica) y de una cadena que
transduce las seales al interior de la clula y que es compartida por otros receptores de
citocinas (cadena comn). Para la transduccin de seales se requiere, en general, de la unin
de varias cadenas especficas (homodmeros) o de la cadena especfica con la comn
(heterodmeros). En algunos casos, es necesaria la interaccin de tres cadenas para la
formacin de receptores de alta afinidad. La transduccin de seales puede tener lugar por
mecanismos comunes a todas las familias de receptores o por mecanismos especficos de
cada una de ellas. Como comentaremos en este captulo, muchas de las caractersticas
funcionales de las citocinas, como la redundancia y el pleiotropismo, pueden ser explicadas

ahora por los conocimientos actuales sobre la composicin y mecanismos de sealizacin de
sus receptores.
Segn su estructura, los receptores de citocinas se pueden agrupar en 4 familias
diferentes(Figura 9.9).: la superfamilia de las inmunoglobulinas, la familia del receptor del
factor de necrosis tumoral (TNFR), la familia del receptor del factor de crecimiento
hematopoytico (HGFR) que incluye la mayora de los receptores de citocinas por lo que
tambin se denomina superfamilia de los receptores de citocinas y, por ltimo, la familia de los
receptores de quimiocinas. Dentro de cada familia la homologa entre sus diferentes miembros
es aproximadamente del 15 al 25%. Existen receptores que no pueden ser agrupados en
ninguna de estas familias como, por ejemplo, el receptor del factor de crecimiento epidrmico
(EGF), la cadena a del receptor de la IL-2 y el receptor del factor b de crecimiento
transformante (TGFbeta).
Superfamilia de las inmunoglobulinas

Se incluyen dentro de esta familia un grupo de receptores que presentan en la regin
extracitoplasmtica un nmero variable de dominios que son similares a los de las
inmunoglobulinas y que intervienen en la unin con el ligando. La regin citoplasmtica
contiene secuencias tirosina cinasa mediante las cuales tiene lugar la transduccin de seales
al interior de la clula como consecuencia de la unin del ligando con su receptor. A esta
familia pertenecen los receptores de la IL-1 y de otras citocinas implicadas en el crecimiento
celular como son el factor estimulante de colonias de mcrofagos (M-CSFR), el factor de
crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR) y el factor de clulas pluripotentes (SCFR).
Existen dos tipos de receptores para la IL-1 (IL-1RI e IL-1RII) a los que se unen tanto la IL-1a
como la IL-1b aunque lo hacen con diferente afinidad. Recientemente se ha clonado un
componente adicional del complejo del IL-1RI, denominado protena accesoria del receptor de
interleucina 1 (IL-1RAcP), que tambin pertenece a esta familia y que presenta una homologa
limitada con los IL-1RI y II.
Familia del TNFR

La caracterstica principal de los receptores que se incluyen dentro de esta familia es la
presencia en el dominio extracelular de 3 a 4 secuencias conservadas, de aproximadamente 40
aminodos, ricas en cistena e implicadas en la unin con el ligando. La regin intracelular no
presenta secuencias homlogas de aminocidos y tampoco se han identificado secuencias con
motivos de sealizacin al interior de la clula. Dentro de esta familia se incluyen el receptor del
factor de crecimiento nervioso (NGFR) y los 3 tipos de receptores para el TNFa y las linfotoxinas
(LT) (TNFRI, TNFRII y TNFRIII) (Tabla 9.1). El TNFa y la LTa (TNFb) se unen, con afinidades
similares, tanto al TNFRI como al TNFRII mientras que la LTb se une al TNFRIII. Adems, a esta
familia de receptores pertenecen otras protenas de membrana como el CD27, CD30, CD40, 41BB, OX-40, Fas-APO1 y APO-2L.
Superfamilia de los receptores de citocinas
Los receptores que pertenecen a esta familia se pueden subdividir a su vez en dos
clases relacionadas evolutivamente. La clase 1 est compuesta por la mayora de los receptores
de citocinas mientras que en la clase 2 se incluyen los receptores para los IFNs (Tabla 9.6).
Receptores de clase 1. Las cadenas polipeptdicas que forman parte de esta clase de
receptores se caracterizan por poseer en su regin extracitoplasmtica dos pares de
residuos de cistena conservados en el extremo distal y un motivo Tryp-Ser-X-Tryp-Ser
(WSXWS, donde X es un aminocido no conservado) en su extremo carboxiterminal. La
presencia de este dominio permite la unin eficiente del ligando al receptor. En la regin
citoplasmtica no se han encontrado secuencias con actividad cataltica pero existen
cidos hidrofbicos denominados respectivamente box1 y box2 que son necesarios para
la transduccin de seales al interior de la clula.
Los receptores que forman parte de esta clase son complejos multicatenarios y la mayora de
ellos adems de poseer una o ms cadenas especficas de unin al ligando comparten una
misma cadena que interviene en la transduccin de seales al interior de la clula. Dentro de esta
clase se incluyen las cadenas de transduccin comunes bc y gc, la cadena b del IL-2R, as como
la cadena especfica de los receptores de la IL-3, IL-4, IL-5, IL-7, IL-9, GM-CSF, EPO
(eritropoyetina) y TPO (trombopoyetina) (Tabla 9. 1). La cadena de transduccin comn gp130 y
los receptores especficos de la IL-6, IL-11, IL-12, G-CSF, factor inhibidor de la leucemia (LIF) y
oncostatina M (OSM) pertenecen a esta familia aunque su regin extracitoplasmtica distal
presenta tambin dominios similares a los de las inmunoglobulinas, por lo que tienen una
estructura de tipo mixto entre la de la superfamilia de las inmunoglobulinas y la de la superfamilia
de receptores de citocinas (Figura 9.1 y Tabla 9.5). Adems, dentro de esta familia se incluyen
receptores para otras molculas que no tienen funciones especficas inmunitarias, como el
receptor de la hormona del crecimiento (GHR), de la prolactina (PRLR) y el del factor neurotrfico
ciliar (CNTFR).
Los receptores de esta familia pueden ser agrupados segn la cadena comn (gp130, bc
o gc) que comparten y a travs de la cual se transmiten las seales al interior de la clula. Esta
cadena no interviene en la unin con el ligando mientras que la cadena especfica, generalmente
denominada a, se une a la citocina aunque con baja afinidad. La oligomerizacin de una cadena
especfica, o de la cadena especfica con alguna de las cadenas comunes es necesaria para la
formacin del receptor funcional de alta afinidad. As se pueden establecer diferentes modelos de
receptores (Figura 9.10), de los cuales el ms sencillo es el formado nicamente por
homodimerizacin de su cadena especfica como es el caso del G-CSFR, EPOR y TPOR. Otro
modelo consiste en la heterodimerizacin de la cadena especfica y alguna de las cadenas
comunes de transduccin de seales. De este modo, los receptores para la IL-6, IL-11, LIF, OSM y
CNTF se forman por heterodimerizacin de su cadena especfica de unin con el ligando y de una
o dos cadenas gp130. Los receptores para la IL-3, IL-5 y GM-CSF son, en cambio, heterodmeros
que constan de su cadena especfica y de una nica cadena comn bc. Varios receptores de
interleucinas, el IL-2R, IL-4R, IL-7R e IL-9R, estn formados por su cadena especfica y la cadena
gc. El receptor de la IL-2 ha sido ampliamente estudiado y se ha comprobado que la transduccin
de seales tiene lugar por receptores con distinta afinidad que resultan de la unin de dos o de tres
-9
cadenas. El receptor de afinidad intermedia (10 M) est compuesto por la cadena especfica b
(IL-2Rb) y por la cadena comn, gc, implicada en la transduccin de seales mientras que el
-11
receptor de alta afinidad (10 M) es un complejo trimolecular que consta de las dos cadenas
anteriores ms la cadena especfica a (IL-2Ra).
Receptores de clase 2. Estos receptores tienen conservado en su regin extracelular un

par de residuos de cistena aunque, a diferencia de los receptores de clase 1, no
contienen el motivo WSXWS. Dentro de esta clase se incluyen los receptores de los IFNs
y el receptor de la IL-10 . Los IFNs se unen a dos tipos de receptores: el IFN-alfa y el b al
receptor de tipo I (IFNRI) y el IFN-gamma al receptor de tipo II (IFNRII). Recientemente se
ha comprobado que los receptores funcionales de los IFNs, tanto de tipo I como de tipo II,
constan de dos cadenas. Las nuevas cadenas clonadas (IFNRI2 e IFNRII2) pertenecen
tambin a esta familia de receptores y son necesarias para la transduccin de seales.
RECEPTORES DE QUIMIOCINAS
Las quimiocinas son un tipo de citocinas estructuralmente semejantes que se caracterizan
por ejercer una actividad quimiotctica y estimuladora sobre clulas de tipo inflamatorio. Esta
familia de molculas puede ser dividida en dos clases, CC y CXC, segn variaciones en un motivo
de cistenas que se encuentra conservado en todos los receptores de esta familia. En las de tipo
CXC, los dos residuos de cistena estn separados por un aminocido no conservado mientras
que en las de tipo CC las dos cistenas estn adyacentes.
Los receptores a los que se unen las quimiocinas presentan caratersticas muy diferentes
a los receptores de las otras familias de receptores de citocinas. Actualmente se han clonado
muchos de ellos y se ha comprobado que presentan una estructura similar a los receptores de la
familia de la rodopsina ya que consisten en una regin extracelular corta, contienen 7 dominios
transmembranales muy conservados y estn asociados a protenas de unin con nucletidos de
guanina (protena G) que intervienen en la transduccin de seales. Dentro de esta familia de
receptores, se pueden distinguir los receptores especficos y los compartidos segn su
especificidad de unin con el ligando. Los especficos unen un ligando en concreto siendo el
ejemplo ms representativo el IL-8RA o CXCR1 que nicamente une a IL-8. Por el contrario, los
receptores compartidos pueden unir a ms de una quimiocina del tipo CXC o a ms de una
quimiocina del tipo CC. Receptores de este tipo son, por ejemplo, el IL-8RB o CXCR2 que une a
IL-8 y a otras quimiocinas CXC y el CCR1 cuyos ligandos son quimiocinas del tipo CC.
MECANISMOS DE TRANSDUCCIN DE SEALES.
La unin de una citocina a su receptor en la superficie de la clula diana produce su

efecto biolgico mediante la fosforilacin de protenas celulares, incluido el propio receptor. Estas
protenas fosforiladas activan factores de transcripcin producindose, en ltimo trmino, la
transcripcin de determinados genes cuyos productos protecos son los que, en ltimo trmino,
van a ejercer el efecto biolgico correspondiente. En la mayora de los receptores, el primer paso
en la sealizacin consiste en la oligomerizacin de varias cadenas de receptores inducida por la
unin con el ligando. Esta asociacin permite el contacto de las regiones citoplasmticas de los
receptores a partir del cual se van a activar mecanismos de sealizacin especficos de cada
familia de receptores de citocinas. Adems, las citocinas tambin transducen seales mediante
mecanismos comunes a otros ligandos (Figura 9.12).
Superfamilia de inmunoglobulinas: sealizacin por receptores con actividad tirosina

cinasa.
En los receptores de la familia de las inmunoglobulinas, la sealizacin est mediada por
secuencias con actividad tirosina cinasa presentes en su regin citoplasmtica que fosforilan residuos de tirosinas en protenas citoplasmticas. Este dominio est altamente conservado y funciona
como un sitio de unin para el ATP implicado en la reaccin de fosforilacin. La oligomerizacin de
varias cadenas del receptor parece ser necesaria para la induccin de la actividad tirosina cinasa .
En el caso del PDGFR y M-CSFR, sus ligandos son complejos dimricos que, al unirse a dos
cadenas prximas en la superficie celular, producen la dimerizacin del receptor y la transduccin
de seales al interior de la clula. El IL-1RI es un sistema ms complejo ya que recientemente se
ha comprobado que para una sealizacin efectiva por IL-1, adems de la cadena especfica, es
esencial la presencia de la protena accesoria (IL-1RAcP) tambin perteneciente a esta familia.
Sealizacin en la familia del TNFR

La regin citoplasmtica de los receptores de la familia del TNFR no presenta
secuencias con actividad cataltica pero se ha comprobado que para la transduccin de
seales por varios de ellos son necesarias unas protenas citoplasmticas, pertenecientes a
una nueva familia, denominadas factores asociados al receptor del TNF (TRAF). Estas
protenas forman complejos multimoleculares e interaccionan con las regiones citoplasmticas
de los receptores producindose, en ltimo trmino, la activacin del factor de transcripcin
NFkB. En esta familia tambin parece ser necesaria la oligomerizacin de varias cadenas del
receptor para que tenga lugar la sealizacin al interior de la clula. Por ejemplo, en el caso del
TNFR se produce la transduccin de seales porque su ligando es una protena trimrica que
provoca la oligomerizacin de 3 cadenas del receptor y su posterior contacto citoplasmtico.
Superfamilia de los receptores de citocinas: sealizacin por Jaks y Stats

En la superfamilia de receptores de citocinas tampoco existen dominios con actividad
cataltica en su regin citoplasmtica. A pesar de ello, la unin de una citocina con su receptor
produce una rpida fosforilacin de tirosinas en protenas celulares incluido el propio receptor.
Esta sealizacin est mediada principalmente por una nueva familia de tirosina cinasas
denominadas Janus cinasas (Jaks) y por factores de transcripcin de una nueva familia
denominada Stat (transductores de seal y activadores de la transcripcin). No se conoce todava
el mecanismo exacto mediante el cual se produce la sealizacin por las cinasas Jak y los factores
de transcripcin Stat. Diversos estudios sugieren que las Jaks se encuentran asociadas con una
de las subunidades del receptor y que la oligomerizacin del receptor inducida por la unin con su
citocina produce la activacin por autofosforilacin de estas cinasas. Esta activacin requiere los
motivos citoplasmticos box1 y box2 ya que mutaciones o deleciones en estas regiones suprimen
la sealizacin. A continuacin, las Jaks activadas fosforilan residuos de tirosina en el propio
receptor y en los factores de transcripcin Stat. El siguiente paso en la sealizacin consiste en la
dimerizacin de los Stat fosforilados y en su translocacin al ncleo donde se unen a secuencias
palindrmicas en el ADN en las que se puede reconocer una estructura general TT(N)5A.
La familia de cinasas Jak consta actualmente de 4 miembros (Jak1, Jak2, Jak3 y Tyk2).
Parece existir un patrn de asociacin entre un determinado receptor y una determinada Jak
segn la cadena comn que interviene en la transduccin de seales. Uno de los ejemplos ms
claros es el de los receptores que utilizan la cadena gc en los que la cadena especfica se asocia
con Jak1 mientras que la cadena comn se asocia con Jak3.
La identificacin de los Stats y su relacin con las cinasas Jak ha sido posible gracias a los
estudios realizados sobre la induccin de transcripcin en respuesta a los IFNs. Hasta el momento
se han identificado 6 componentes de esta familia. No parece existir un patrn especfico de
activacin receptor-Stat ya que un Stat puede ser activado por mltiples receptores y la unin de
una citocina con su receptor puede activar varios Stats. Por otra parte, existe una cierta relacin
entre grupos de receptores que comparten una misma cadena de transduccin de seales y
determinados Stats. As, los receptores que comparten la cadena bc activan el Stat5 mientras que
los que utilizan la cadena gp130 activan preferentemente el Stat3.
Familia de los receptores de quimiocinas: sealizacin por protena G

La sealizacin por los receptores de quimiocinas est mediada por protenas G
asociadas a su extremo carboxiterminal. Estas proteinas se encuentran localizadas en la cara
interna de la membrana citoplasmtica y catalizan el intercambio de GDP por GTP producindose
la activacin de muchas enzimas citoplasmticas y, en ltimo trmino, la activacin de factores de
transcripcin. En esta familia, no es necesaria la oligomerizacin del receptor para la transduccin
de seales al interior de la clula ya que los receptores funcionales constan nicamente de una
cadena.
Vas comunes de transduccin de seales

Adems de los mecanismos de sealizacin especficos de cada familia de receptores, las
citocinas pueden activar mecanimos comunes a las distintas familias e incluso a otros sistemas de
receptores. Los primeros candidatos para la fosforilacin en tirosinas producida inmediatamente
despus de la unin de una citocina con su receptor fueron cinasas de la familia src. Estas tirosina
ciinasas han sido implicadas en la respuesta a muchos ligandos y adems se requieren en la
activacin celular a travs del TCR. Actualmente, se ha comprobado que varias src ciinasas son
activadas por receptores de citocinas de la superfamilia de las inmunoglobulinas, como el PDGFR,
y por varios componentes de la superfamilia de receptores de citocinas.
Otra va de sealizacin utilizada tambin por los receptores de citocinas es la Ras-GTP
que, adems, forma parte del crecimiento normal en respuesta a muchos factores de crecimiento
y de la proliferacin maligna inducida por oncogenes. La estimulacin de esta va, en ltimo
trmino, produce la activacin de la cascada de cinasas de protena activadas por mitgenos
(MAPK). Las MAPK activadas se translocan al ncleo donde fosforilan varios factores de
transcripcin como c-Myc y c-Jun. La transduccin de seales por la va Ras-GTP parece ser
comn a muchas citocinas ya que su activacin ha sido observada en la sealizacin por
componentes de todas las familias de receptores de citocinas.
Implicaciones funcionales de los receptores de citocinas.
Determinadas caractersticas funcionales de las citocinas pueden ser explicadas ahora por
los recientes conocimientos adquiridos sobre la composicin y los mecanismos de activacin de
sus receptores. Las citocinas son redundantes, es decir, varias citocinas ejercen efectos biolgicos
similares sobre un mismo tipo celular. El que algunos receptores de citocinas sean complejos
oligomricos que comparten una misma cadena de transduccin de seales puede explicar este
hecho. En estos receptores, la sealizacin tendra lugar por vas comunes producindose la
transcripcin de los mismos genes. Este fenmeno ha sido mejor observado en las citocinas que
utilizan receptores que son miembros de la superfamilia de los receptores de citocinas. Por
ejemplo, la IL-3 y el GM-CSF que utilizan receptores que comparten la cadena beta como
transductora de seales tienen funciones muy parecidas en el sistema hematopoytico. En el caso
de las citocinas que utilizan la cadena gp130 (IL-6, LIF, CNTF, OSM, e IL-11), todas ellas son
capaces de inducir la produccin de protenas de fase aguda en el hgado. Respecto a las
citocinas cuyos receptores comparten la cadena gamma como transductora de seales (IL-2, IL-4,
IL-7, IL-9 e IL-15), todas son factores de crecimiento de clulas T. Este hecho es de gran
importancia en la inmunodeficiencia combinada severa ligada al cromosoma X (XSCID) en la que
no se produce un desarrollo normal de clulas T debido a la falta de una cadena transductora
funcional por mutaciones en la cadena gamma.
Otro mecanismo que explicara la redundancia de las citocinas es el hecho de que no
exista una elevada especificidad de unin entre una citocina y su receptor como es el caso de las
quimiocinas y sus receptores. Muchas de ellas tienen efecto quimiotctico sobre un mismo tipo
celular lo que puede ser explicado porque comparten un mismo receptor.
La pleiotropa es otra caracterstica funcional de las citocinas ya que algunas realizan
mltiples funciones diferentes en distintos tipos celulares. El empleo de varias rutas de
sealizacin as como la activacin de mltiples cinasas y factores de transcripcin que tiene lugar
como consecuencia de la unin de las citocinas a sus receptores puede explicar la diversidad
funcional de las mismas.
RECEPTORES SOLUBLES
Adems de existir como protenas de membrana, muchos receptores de citocinas son
sintetizados como protenas solubles. La existencia de estos receptores ha modificado en gran
manera el conocimiento sobre la interaccin citocina-receptor y la regulacin de las distintas
funciones de las citocinas. A nivel molecular, los mecanismos ms comunes de generacin de las
formas solubles de los receptores son la rotura proteoltica del receptor expresado en la membrana
y el procesamiento alternativo del ARNm (Tabla 9.7). El receptor soluble del CNTF (sCNTFR) se
forma por un mecanismo de rotura lpidica y en el caso de la forma soluble del receptor de la IL-6
(sIL-6R), no se conoce su mecanismo de generacin.
Los receptores solubles pueden ejercer varios efectos biolgicos (Figura 9. 4) si bien el
ms comn es el de antagonistas de su receptor equivalente en la membrana mediante competicin por la unin con el ligando para prevenir la sealizacin al interior de la clula. Receptores
solubles de este tipo son, por ejemplo, los de la IL-1, IL-4 y TNF-alfa ya que producen una
inhibicin dosis dependiente de la funcin del receptor de membrana. Cuando los receptores
solubles se generan por proteolisis de los receptores de membrana, disminuye el nmero de
receptores funcionales a los que se puede unir la citocina en la superficie celular y por tanto,
tambin se produce una inhibicin en la sealizacin al interior de la clula.
Adems de las funciones inhibidoras de los receptores solubles, se ha comprobado que,
en algunos casos, estos receptores pueden facilitar la sealizacin inducida por la unin con su
citocina en clulas que no expresen el receptor funcional completo de membrana. Este mecanismo
se ha observado en las formas solubles de receptores (Figura 9.13).
TEMA 9. RESPUESTA CELULAR
ACTIVACIN DE LINFOCITOS T
INTRODUCCIN
La activacin de los linfocitos T se produce tras el reconocimiento por parte del
TCR/CD3 de la molcula HLA y el pptido presentado por la misma junto con otros procesos,
como son la activacin de ciertas molculas accesorias presentes en su membrana. Tambin
en este proceso de activacin se hace mas eficiente si los linfocitos reciben el estimulo de
ciertas citocinas mediante su unin a los receptores especficos presentes tambin en la
membrana de estos linfocitos.
Una vez activados los linfocitos T, estos prioritariamente producirn citocinas o factores
+
+
citotxicos, segn se trate de linfocitos T CD4 o CD8 . De esta manera se desarrollar la
+
respuesta inmune. Los linfocitos T CD4 colaborarn en la posterior activacin de otras clulas,
+
+
tales como NK, T CD8 , linfocitos B o macrfagos. A su vez los linfocitos T CD8 tras su
activacin ejercern su funcin citotxica destruyendo clulas blanco (Figura 10.1).
Fenmenos de interaccin celular.
El proceso de reconocimiento vara si el receptor de la clula T est formado por el
+
+
heterodmero alfa/beta (clulas T alfa/beta CD4 o CD8 ) o si es del tipo gamma/delta (clulas
Tgamma/delta CD4 /CD8 ), ya que en estas ltimas no existe funcin coestimuladora por parte
de las molculas accesorias CD4 y CD8 (no se puede producir la unin MHC-CD4 o MHCCD8). Como se dijo anteriormente, las molculas de histocompatibilidad "no clsicas" pueden
presentar pptidos antignicos a los receptores gamma/delta.
En muchos casos la unin del antgeno con el TCR no es suficiente para dar lugar a
una respuesta inmune eficaz. Para que esta respuesta se lleve a cabo se requiere la
participacin de una serie de molculas conocidas globalmente como accesorias, y cuya
funcin es precisamente la de contribuir al desarrollo de una respuesta inmune efectiva
facilitando la interaccin entre las distintas clulas. Se forma as lo que se viene en denominar
sinapsis entre linfocitos T y clula presentadora de antgeno (Figura 10.2). Las principales
molculas que estn implicadas en este fenmeno de reconocimiento son el CD4, CD8, CD2,
CD45 y CD28 y sus ligandos respectivos. Todas estas molculas de adhesin tambin juegan
un importante papel en la transduccin de seales y activacin de la clula T. En la Figura
10.3 se recoge un esquema de las distintas posibilidades de activacin de los linfocitos T segn
las molculas que intervienen en los procesos de reconocimiento y adhesin intercelular.
Molculas CD4 y CD8.
Las molculas CD4 y CD8 son glicoprotenas cuyos ligandos naturales son las
molculas del MHC de clase II y de clase I respectivamente. La molcula CD4 pertenece a la
superfamilia de las inmunoglobulinas y esta formada por una sola cadena. La molcula CD8
pertenece tambin a la superfamilia de las Igs, pero su estructura difiere considerablemente de la
anterior, al estar formada por dos cadenas homlogas, alfa y beta, que pueden formar
heterodmeros o, en menor proporcin, homodmeros (alfa/alfa).
Las interacciones de estas molculas con el HLA, juegan un papel esencial en la

maduracin tmica de los linfocitos. De hecho, el fenotipo CD4/CD8 de un determinado linfocito
T determina su funcin efectora. As, mientras el CD4 se expresa en la mayora de los linfocitos
T cooperadores, la molcula CD8 se presenta, principalmente, en aquellos linfocitos T con
+
funcin citotxica. Es lgico que las clulas T con fenotipo CD8 reconozcan antgenos en el
contexto de molculas MHC de clase I, ya que stas tienen una distribucin tisular universal,
pudindose realizar as la funcin citotxica, reconocimiento y lisis, de cualquier clula del
organismo que se encuentre infectada por virus.
Molculas CD2
Las molculas CD2 junto con el CD11a/CD18 (LFA-1) son las molculas de adhesin
primaria que contribuyen a potenciar la afinidad de unin del linfocito T a la clula
presentadora. Sus ligandos naturales que son el CD58 (LFA-3) y CD54 (ICAM-1)
respectivamente, se expresan en la superficie de todas las clulas que realizan la funcin de
APC. El CD2 es una glicoprotena presente en la superficie de timocitos y linfocitos T, organizada
en dos dominios globulares extracitoplasmticos, una regin transmembrana y una larga regin
intracitoplasmtica. Esta molcula es la primera molcula que se expresa en el linaje T durante
su diferenciacin y se encuentra en todos los timocitos y clulas T maduras. Adems de su
papel en la interaccin entre clulas, est implicado en una va alternativa de activacin T
antgeno-independiente. Otras molculas de membrana que intervienen en el proceso de
adhesin son CD5 y CD40, cuyos ligandos en la APC son, respectivamente, CD72 y CD40L.
Molculas CD28
Las molculas CD28 son tambin de especial importancia en los mecanismos de
adhesin celular. El CD28 se expresa en todos los linfocitos CD4 y aproximadamente en el
50% de los linfocitos CD8, sus ligandos naturales pertenecen a la familia B7 (B7-1, CD80; B72, CD86). CD28, adems de su papel en el proceso de adhesin, tambin participa en el
mecanismo de transduccin de seal y activacin de la clula T ya que el CD28 induce la
denominada segunda seal de activacin celular (la primera est generada por el TCR/CD3).
En ausencia de esta segunda seal, los linfocitos T pueden anergizarse por la primera seal de
activacin dependiente TCR/CD3. Esta segunda seal parece ser regulada negativamente por
la molcula CTLA-4 (Cytotoxic T Lymphocyte Antigen 4).
Solo un nmero muy pequeo de molculas MHC con el pptido apropiado estn
presente en un rea dada del contacto clula-clula establecido con el proceso de adhesin.
Gracias a la habilidad del TCR/CD3 de formar estructuras ordenadas, los complejos MHC con
el pptido correcto migran dentro de la interfase. Esto provoca una alta densidad local
de complejos TCR/CD3 cooperando en la unin antignica.
Transmision de seales
Todas las clulas eucariotas incluidos los linfocitos T, B y NK poseen mecanismos a
travs de los cuales los estmulos externos son procesados y enviados al ncleo a travs de una
serie de cambios bioqumicos que conocemos genricamente como seales de activacin
intracelulareso de transduccin de seales. Estos mecanismos implican la formacin de los
denominadossegundos mensajeros que son capaces de regular la transcripcin especfica de un
amplio nmero de genes, los cuales participan en los procesos de crecimiento, divisin y
diferenciacin celular. En la activacin de esta cadena de segundos mensajeros intervienen
seales procedentes tanto del TCR/CD3 como de las molculas accesorias y receptores de
citocinas presentes en la membrana de los linfocitos (Figura 10.4).
Un mecanismo fundamental en la regulacin de la actividad y la funcin de numerosas

protenas en las clulas eucariticas son los ciclos de fosforilacin y defosforilacin mediados
por cinasas y fosfatasas. Bsicamente existen dos tipos de cinasas, dependiendo de su actividad
fosfotransferasa
la
cual
se
manifiesta
fosforilando
protenas
en
aminocidos serina ytreonina (serina/treonina cinasas) o bien en aminocidos tirosina (tirosina
cinasas). Igualmente hay fosfatasas que defosforilan especficamente protenas fosforiladas bien
en serina/treonina o en tirosina.
Una propiedad general de los linfocitos es la necesidad de generar dos seales
distintas para inducir la proliferacin hacia clulas efectoras. Como se ha comentado
anteriormente la primera seal la proporciona la unin del complejo pptido-MHC al TCR (y a
los co-receptores CD4 y CD8), esta seal est potenciada por molculas de adhesin (CD2, el
LFA-1, el CD26, etc.). La segunda seal es suministrada por molculas co-estimuladoras del
tipo CD28, que de alguna manera complementan las seales de activacin inducidas por el
TCR permitiendo una activacin celular completa (Figura 10.5). Estas seales coestimuladoras
son necesarias para la activacin del linfocito, ya que en su ausencia la seal mediada por el
TCR puede conducir al linfocito a la muerte celular o a un estado de anergia (en la que el
linfocito no responde a nuevas estimulaciones).
Despus de la ocupacin de los receptores T por el antgeno, se produce la activacin de
los linfocitos y la iniciacin de eventos tempranos de traduccin de seales que finalmente
conducen a la reprogramacin gnica y a la adquisicin de funciones efectoras. Para que el
linfocito T pueda llevar a cabo estas funciones se requiere un complejo sistema responsable de la
transmisin de seales de activacin desde la superficie al interior de la clula. En esta ltima
dcada se est realizando un gran esfuerzo para identificar los componentes celulares y
moleculares que estn involucrados en dicha activacin celular y determinar la secuencia de
eventos bioqumicos que ocurren despus del reconocimiento del antgeno.
ESTMULOS INICIADOS POR EL TCR.
Uno de los primeros eventos bioqumicos que ocurren en linfocitos T despus de la
interaccin Ag-TCR, es el incremento de fosforilacin en tirosina de las cadenas no polimrficas
del CD3. Estas cadenas poseen en sus dominios intracitoplasmticos unas regiones
denominadas ITAM (Immunoreceptor Tyrosine-based Activation Motifs) que se fosforilan por la
accin de las tirosina cinasas c-lck o c-fyn.
La tirosina cinasa c-lck se encuentra localizada en la parte intracelular de la membrana
plasmtica unida a la bicapa lipdica por un proceso de miristilacin de su regin
aminoterminal (Figura 10.6). La asociacin fsica y funcional del CD4 y del CD8 con el
TCR/CD3, hace que la c-lck asociada a estas molculas se aproxime a la porcin citoplsmica
de las protenas del complejo CD3, donde puede fosforilar en tirosina a sus regiones ITAM.
Adems del CD3 esta cinasa puede tambin fosforilar otros substratos como es el caso de
PLC-gamma-1 (fosfolipasa C-gamma-1) que participa en la regulacin del sistema inositol
fosfatoque se describir ms adelante. C-fyn, al igual que c-lck es otra tirosina cinasa que
pertenece a la familia de cinasas Src. Tambin est anclada a la cara interna de la membrana
celular por miristilacin de su porcin aminoterminal. Esta cinasa est fsicamente asociada al
TCR y su actividad est regulada por la ocupacin y activacin del mismo.
Una vez que los ITAM son fosforilados en residuos tirosinas, se convierten en sitios
especficos de acoplamiento que se unen a protenas citoplsmicas con dominios SH2. La
funcin de los dominios SH2 es interactuar con algunas protenas que se encuentran
fosforiladas en residuos tirosina, as su funcin esta regulada por procesos fosforilacindesfosforilacin de estos aminocidos. Por este motivo, un dominio SH2 puede interactuar con
una fosfotirosina adyacente en la misma o en otra molcula. Cuando es sobre la misma
molcula contribuye al control de su propia actividad enzimtica. En otras ocasiones, la enzima
con el dominio SH2 interacciona a travs de dicho motivo con otras protenas previamente
fosforiladas en tirosina por otra cinasa.
Esta interaccin es responsable de su activacin y de la de otros substratos. Este es el
caso de la enzima ZAP-70 que se activa cuando a travs de sus dominios SH2 se une a las
cadenas que han sido previamente fosforiladas por c-fyn o c-lck. ZAP-70 desempea un papel
crtico en el mantenimiento de la cascada de seales que se pone en marcha tras el
reconocimiento del antgeno por el TCR. En este sentido, esta enzima es un acoplador de
seales desde la superficie celular al ncleo por fosforilacin de los adaptadores Lat y SLP-76.
Lat es una protena transmembrana cuya funcin, una vez fosforilada, es organizar complejos
multimoleculares en determinados subdominios lipdicos de la membrana plasmtica. Estos
complejos contienen protenas claves en la sealizacin al interior de la clula como son la
PLC-gamma1 (fosfolipasa C), el Grb-2 (growth factor binding protein), SLP-76, la PI3K y Vav-1
FOSFATASA CD45
El CD45, LCA (Antgeno comn leucocitario) o T200 es una de las glicoprotenas ms
abundantemente expresadas en la superficie de clulas hematopoyticas, pudindose detectar
hasta un milln de molculas por clula El CD45 presenta una larga regin citoplasmtica que
contiene dos dominios catalticos con actividad fosfatasa, una regin intra-membrana y una regin
aminoterminal extracelular que se encuentra glicosilada y que vara en su estructura. Esta
variedad ha sido explicada despus del clonaje e identificacin del gen que, codificada dicha
protena, el cual gracias a que puede transcribir de forma alternativa los tres exones (A, B y C) que
codifican la porcin aminoterminal de la protena. Esta transcripcin alternativa puede generar
hasta ocho diferentes ARN mensajeros que traducen al menos seis diferentes isoformas del CD45
en la membrana celular (Figura 10.7).
El ligando del CD45 no se conoce y la existencia de estas diferentes isoformas pueden
indicar que los ligandos del CD45 sean mltiples y medien diferentes funciones en diferentes
subpoblaciones de linfocitos T.
Diferentes sistemas experimentales han demostrado que el CD45 juega un papel
predominante en los procesos de activacin celular mediados por la ocupacin del TCR. Aunque
terica, la funcin que ms frecuentemente se atribuye al CD45 es la de defosforilar la tirosina de
regulacin negativa de c-lck y c-fyn, con lo que estas cinasas se activaran autofosforilndose y
fosforilando con toda probabilidad otros substratos prximos (como la cadena del CD3). No
obstante, el CD45 podra defosforilar tambin a la tirosina de c-lck y c-fyn previamente
autofosforilada conduciendo a una inhibicin de estas cinasas.
Aunque estos modelos son hipotticos, se acumulan continuamente evidencias de que el
CD45 pude regular positiva o negativamente los procesos de activacin celular. En este ltimo
caso es importante destacar que la regin citoplasmtica del CD45 puede ser fosforilada
va Protena Cinasa C (PKC) en residuos serina y como se ver a continuacin en el tiempo es
posterior a los procesos de fosforilacin en tirosina descritos anteriormente por lo que es posible
que esta fosforilacin de CD45 sea necesaria para inducir su actividad fosfatasa de regulacin
negativa. En la Figura 10.8 se muestra la estructura de una tirosin cinasa p56.
PLC-gamma-1
Despus del reconocimiento antignico por parte del TCR esta PLC-gamma-1, se fosforila
en tirosina y se activa dentro de los complejos multimoleculares lipdicos de la membrana
plasmtica donde induce la hidrlisis de su substrato especfico, el fosfatidilinositol bifosfato
(PIP2), generndose los metabolitos inositol trifosfato (IP3) y diacilglicerol (DAG) (Figura 10.9). El
IP3 se une a un receptor especfico (IP3R) localizado en unas estructuras especficas del retculo
endoplsmico facilitando la liberacin del calcio intracelular de sus compartimentos y aumentando
la concentracin de estos iones en el espacio libre intracelular. El IP3, posiblemente en conjuncin
con su metabolito, el IP4, puede regular los canales de calcio de la membrana plasmtica
permitiendo la entrada de calcio del exterior al interior celular.
El calcio intracelular puede estimular la enzima calmodulina, que es una serina/treonina
cinasa que puede activar a su vez a la fosfatasa calcineurina. Adems de la activacin del sistema
calmodulina/calcineurina, los niveles altos de calcio intracelular tambin ayudan a la activacin de
otras cinasas como son algunas isoenzimas de las protena cinasas C (PKC) y posiblemente
algunas cinasas activadas por mitgenos (MAPKs). El otro metabolito de la hidrlisis del PIP2,
el diacilglicerol es el principal responsable de la activacin de las enzimas protena cinasas C.
PROTEINA CINASAS C
Las protena cinasas C (PKCs) son una familia de isoenzimas que estn ampliamente
distribuida en tejidos y rganos de mamferos. Esta familia de serina/treonina protena cinasas
est constituida por varias subfamilias que engloban distintas isoformas. Hasta el momento, se
conocen 11 isoenzimas de PKC diferentes, clasificadas segn su estructura y necesidad de
cofactores para su activacin. Aunque todas las isoformas de PKC se activan mediante
fosfolpidos, estas isoenzimas en particular se diferencian marcadamente en su sensibilidad
hacia el calcio. Teniendo en cuenta este factor, podemos clasificar estos 11 genes de PKC de
mamferos conocidos hasta ahora en las siguientes subfamilias:
1. PKC convencionales (cPKC): su activacin es dependiente de Ca ++ y diacilglicerol

(DAG). Esta subfamilia engloba las siguientes isoformas: alfa, beta (1 y 2) y gamma.
2. PKC novel (nPKC): su activacin es dependiente de diacilglicerol e independiente de

++
Ca . Esta subfamilia engloba distintas isoformas: delta,epsilon, etc.

3. PKC atpica (aPKC): pertenecen estructuralmente a esta familia de enzimas, pero no
se activan mediante steres de forbol o diacilglicerol. Esta subfamilia engloba varias
isoformas.
Las PKCs en condiciones de reposo celular se encuentra localizada en el citosol donde es

++
inactiva, una vez que recibe el estmulo del DAG conjuntamente con iones Ca (dependiendo del
isotipo enzimtico) se transloca a la membrana celular donde en presencia de fosfolpidos
(fundamentalmente fosfatidilserina) ejerce su funcin de cinasa de protenas en
aminocidosserina y treonina. La implicacin de las PKCs en el transcurso de activacin de
clulas T ha sido bien establecida desde finales de los aos 70. As, las clulas T expresan
mltiples isotipos de PKC, incluyendo PKC-alfa,-beta1 y otros; sin embargo, el papel de los
diferentes isotipos de PKC en la regulacin de la sealizacin celular y la transcripcin gnica
no est an establecido definitivamente. La activacin de linfocitos T implica una compleja
cascada de respuestas celulares, que incluye la entrada en el ciclo celular y la liberacin de
citocinas. La estimulacin de clulas T resulta en la transcripcin de varios genes y en la
expresin de una determinada variedad de molculas, incluyendo las citocinas y sus receptores
especficos (como es el caso de IL-2 y su receptor). Las PKCs regulan la activacin de genes
de clulas T mediante el control de varios factores de transcripcin.
GAP-RAS
La familia de los proto-oncogenes Ras comprende al menos tres genes que codifican
otras tantas protenas denominadas Ha , Ki y N-Ras, que juegan un papel crtico en el control de la
proliferacin celular.
Las tirosinas cinasas activadas por la ocupacin del TCR no solamente inducen la
hidrlisis de fosfolpidos, sino que tambin activan vas de sealizacin a travs de Ras y
mediadas por Lat. Este adaptador fosforilado por ZAP-70 se une a otro adaptador intermediario
(Grb-2) que contiene dominios SH2 y SH3. Este ltimo se une a protenas especficas
fosforiladas en tirosina a travs de su dominio SH2 y a una protena de intercambio de
nucletidos de guanina (Sos) mediante su dominio SH3. La protena de intercambio acta
entonces sobre la forma inactiva de Ras (ras-GDP) convirtindola en su forma activa (RasGTP), el cual se une y retiene a c-Raf cerca de la membrana plasmtica. Esta accin mediada
por Ras, hace que Raf se active y acte como una cinasa de MAPK (MAPKK) que a su vez
activa y fosforila una o ms MAPKs, incluyendo a ERK-1 y ERK-2, las cuales tras dicha
activacin migran al ncleo donde regulan por fosforilacin a determinados factores de
transcripcin involucrados en la proliferacin y diferenciacin celular. La inactivacin de Ras
GAP
(Ras-GTP) se debe a la accin de la protena p120
o protena activadora de GTPasa que es la
responsable de hidrolizar el GTP unido a Ras y convertirlo en GDP (Ras-GDP) por lo que se la
puede considerar como un regulador negativo de Ras. Esta cascada de sealizacin termina con
la fosforilacin de determinados factores de transcripcin que participan en la activacin y
funcionalidad de los linfocitos T (Fig. 10.9).
'
FOSFATIDILINOSITOL-3 CINASA (PI3K).

Adems de la PLCgamma1, otras enzimas presentes en las clulas T que participa en el
'
metabolismo de fosfolpidos son las denominadas fosfatidilinositol-3 cinasas (PI3Ks), que
fosforilan el PIP2 generando cuatro especies de inositoles especficos que son; i) el fosfatidilinositol
3-fosfato; ii) el fosfatidilinositol 3,4-bifosfato; iii) el fosfatidilinositol 3,5-bifosfato y iv) el
fosfatidilinositol 3,4,5-trifosfato.. Una de las dianas mejor caracterizadas de la accin de estos
lpidos fosforilados es la protena cinasa B. En respuesta a estmulos externos, la Akt citoslica
(inactiva) se transloca a la mebrana plasmtica por los estos inositoles fosfatos y se fosforila y
activa. Una vez que Akt est activa es capaz de fosforilar y activar a su vez una gran variedad de
substratos (BAD, CREB, factores de transcripcin de la familia forhead, la cinasa IkB, la
procaspasa-9, etc.), explicando el por qu de la importancia de esta cinasa como elemento clave
en los procesos de proliferacin y diferenciacin celular.
PROTEINA CINASA ACTIVADA POR MITOGENOS (MAP-CINASAS).
En los ltimos aos se ha identificado y caracterizado parcialmente un sistema de
transmisin de seales crucial no solo para la activacin de clulas T sino tambin para todas las
clulas eucariotas. Este sistema de traduccin de seales est regulado por las MAPKs (mitogen
activated protein kinases) que de alguna manera actan como puente entre tirosinas cinasas
prximas a la membrana con otras cinasas que fosforilan en aminocidos serina/treonina una serie
de factores de transcripcin regulando as su actividad transactivadora. Estas MAPKs engloban a
una familia de serina/treonina cinasas, que son activadas cuando a su vez se fosforilan en
serina/treonina o tirosina. Al menos tres subfamilias de MAPKs han sido bien identificadas, i) las
ERK1 y 2 (Extracellular Regulated Kinases), 2) la subfamilia de c-Jun cinasas, JNK1, JNK2 y JNK3
(tambin llamadas SAPK), y 3) la subfamilia p38 (p38, p38b, p38g, y p38d). Las ERKs activadas
migran al ncleo donde regulan la transcripcin de c-fos, que forma dmeros con c-jun para formar
el complejo AP-1, que es fosforilado por las JNK en la subunidad c-jun, regulando su actividad
transcripcional. La p38 tambin participa en la activacin de AP-1 y recientemente se ha descrito

que en linfocitos T acta como limitador de la regulacin transcripcional mediada por el factor de
transcripcin NF-AT.
Las MAPKs son reguladas a su vez por otras cinasas denominadas MAPKK, y estas a s
vez por otro grupo de cinasas que por inercia han sido llamadas MAPKKK (ej, Raf). Estas ltimas
actuaran como integradores de las seales inducidas por la ocupacin de receptores de
activacin (ej. el TCR), fosforilando a las MAPKK, y estas a su vez fosforilando a las MAPKs en
residuos treonina y tirosina.
FACTORES DE TRANSCRIPCION.
Tras la activacin de las clulas T se transcriben alrededor de 100 genes (conocidos). La
activacin de esta pltora de genes ocurre de una manera secuencial, de manera que alguno de
ellos se transcriben inmediatamente despus del reconocimiento antignico y otros incluso das
despus. Por este motivo se pueden clasificar de manera didctica en genes inmediatos (su
transcripcin ocurre entre diez y treinta minutos despus de la activacin), tempranos (transcritos
entre treinta minutos y dos das) y tardos (transcripcin entre dos das e incluso hasta dos
semanas). Entre los primeros tenemos los genes c-fos, c-jun, c-myc, NF-KB/rel, etc., entre los
segundos estn la mayora de las interleucinas producidas por clulas T as como alguno de sus
receptores y entre los terceros podemos destacar molculas como el CTLA-4 y los genes VLA
(very late antigen) (Figura 10.9)..
En general, la transcripcin de genes inmediatos ocurre en ausencia de sntesis de
novo de protenas, lo cual indica que estos genes son activados por factores de transcripcin
preexistentes en la clula. Estos factores despus de la cascada activacin de cinasas y
fosfatasas originada por el reconocimiento antignico son fosforilados o defosforilados y de esta
manera activados. En este estado se unen a regiones reguladoras de la transcripcin situadas
generalmente en los promotores de determinados genes permitiendo su transcripcin o a veces
incluso su represin.
As, la primera etapa de su respuesta celular culmina con la expresin en el ncleo de
protenas trans-activadoras que regulan la transcripcin de una serie de genes involucrados en los
procesos de proliferacin, diferenciacin y adquisicin de funciones en los linfocitos T.
Una de las funciones ms importantes de los linfocitos T es la produccin de linfocinas, las
cuales, en ltima instancia, junto a los procesos de interaccin e celulares, van a modular el tipo de
respuesta inmune producida. Los mejores ejemplos de regulacin gentica de linfocinas lo
encontramos en la regulacin de la IL-2, as como de su receptor (principalmente la cadena alfa).
En la parte 5' del gen de la IL-2 se encuentra una regin de aproximadamente trescientos pares de
bases (entre las bases -319 y -52) que contiene los sitios de unin para factores como, NF-B, NFAT, factores octamricos, AP-1 y adems un sitio de unin conocido como CD28RE (CD28
responsive element). Estudios moleculares han demostrado que la accin conjunta de estos
factores es necesaria para conseguir una activacin completa del gen de la IL-2. La expresin de
alguno de estos factores est restringida a determinados tipos celulares, como es el caso de NFAT, mientras que otros como AP-1 y NF-B estn expresados en una gran variedad de tipos
celulares.
Factor nuclear de la cadena K de clulas B (NF-B/rel).
NF-B (factor nuclear de la cadena Kappa en clulas B) fue caracterizado por primera vez,
en 1986, como un factor especfico de clulas B y que se una a una secuencia localizada en el
promotor de la cadena ligera de las inmunoglobulinas. NF-kB se encuentra fundamentalmente en
todos los tipos celulares y est implicado en la activacin de multitud de genes en respuesta a
inflamacin, infeccin y otras situaciones de stress que requieren una rpida reprogramacin
de la expresin gnica..
Este factor de transcripcin est formado por una familia de protenas que presentan una
alta homologa entre ellas y que est compuesta principalmente por las protenas p50, p52, p65,
RelB, y c-rel. Estas protenas pueden estar formando distintos complejos entre ellas siendo los
mas comunes p50/p50 y p50/p65. Los distintos complejos tienen distintas afinidades por los sitios
de unin al DNA y posiblemente tengan diferentes actividades transactivadoras. Esto se puede
entender por el hecho de que la regin de DNA que se una a NF-kB es GGGRNNYYCC, este
decmero palindrmico no es exactamente igual en todos los genes que contienen una regin NFkB y as, estas pequeas diferencias pueden ser las responsables de las diferentes afinidades de
los complejos NF-kB/rel por el DNA.
Los complejos de NF-B se encuentran retenidos en el citoplasma por molculas
llamadasinhibidores de NF-B o IB. Dos de las ms estudiadas en linfocitos T son IB-a e IB-b
que en condiciones de reposo estn unidas a los dmeros de NF-kB enmascarando as su
seal de localizacin nuclear (NLS), previniendo de esta forma el desplazamiento de NF-kB al
ncleo La activacin de linfocitos T va TCR/CD3, IL-1 o TNF entre otros estmulos extracelulares
inducen una cascada de cinasas y proteasas que median la degradacin de IB por un proceso
combinado de fosforilacin, ubiquitinacin y proteolisis, como consecuencia del cual se producen
la liberacin de NF-B/rel y su translocacin al ncleo (Figura 10.9).
Adems de participar en la transcripcin de la IL-2 y de su receptor se ha demostrado que
NF-B puede trans-activar tambin un amplio nmero de genes en linfocitos T como son la cadena
beta del TCR, genes HLA de clase I y clase II, beta-2-microglobulina, molculas de adhesin como
ICAM-1, otras linfocinas como IL-6, IL-8 y el G-CSF, proto-oncogenes como c-myc y tambin se
une a las regiones promotoras (LTR) de virus como el HIV y HTLV-1.
La activacin de NF-kB representa el paradigma del control de protenas mediante un
proceso de ubiquitinacin y degradacin en el proteasoma integrado a la cascada de
fosforilaciones. Recientemente, ha habido un gran progreso en lo que concierne a la ruta de
seales de NF-kB, especialmente las relacionadas con las citocinas proinflamatorias, IL-1 y
tumor necrosis factor alfa.
Activador de protena 1 ( AP-1)
A diferencia de NF-KB, AP-1 (Activador protein 1) es un factor de transcripcin
exclusivamente nuclear que se activa por fosforilacin mediada por determinadas cinasas que se
translocan al ncleo e inducen en este factor una modificacin postranslacional que le hace activo.
El factor de transcripcin AP-1 (Activator Protein 1) est formado por protenas ubicuas
pertenecientes a las familias Jun (c-Jun, v-Jun, JunB y JunD), Fos (c-Fos, FosB,Fra1 y Fra2) o
ATF (ATF2 y ATF3) capaces de unirse a una secuencia consenso de ADN denominada TRE
(TPA response element, TGACTCA) regulando la transcripcin de alto nmero de genes que
incluye genes de citokinas proinflamatorias entre otros. Los miembros de las familias Jun o ATF
forman homodmeros o heterodmeros con los miembros de las otras dos familias, pero en el
caso de las proteinas Fos, stas solo forman heterodmeros. La integracin de las seales
transmitidas por las distintas MAPKs (ERK, p38, JNK) activadas tras la activacin del receptor
TCR provoca la unin de determinados factores de transcripcin (TCF, SRF) a los genes que
codifican para Fos y Jun, aumentando su presencia en el ncleo. Posteriormente, Fos y Jun
son fosforilados por FRK y JNK respectivamente (cinasas reguladoras de Fos y Jun). De este
modo, ambos factores de transcripcin activados, dimerizan y se unen a regiones especficas
de los promotores de genes como la IL-2 y otros genes que participan en la respuesta inmune
e inflamatoria (Figura 10.9).
Factor nuclear de clulas T activadas ( NF-AT).
La familia de protenas NF-AT (Nuclear Factor of Activated T cells) est constituida al
menos por cuatro miembros NF-AT1/p, NF-AT2/c, NF-AT3, y NF-AT4/x, presentando cada uno
de ellos, excepto NF-AT3, varias isoformas probablemente derivadas de splicing (corte y
empalme) alternativo del mismo gen. Todas las isoformas presentan dos regiones de
secuencia homlogas entre ellas, el dominio de unin al ADN (DBD) y la regin homloga para
NF-AT (NHR). El DBD, comprendido aproximadamente entre los aminocidos 400 y 700, es la
zona ms conservada entre los miembros de la familia NFAT. La regin NHR constituye el
dominio principal de transactivacin de la protena y es el sitio de anclaje donde se une la
fosfatasa calcineurina, que cuando se activa defosforila mltiples residuos fosforilados de esta
zona, controlando as la translocacin nuclear de NF-AT. En un principio NF-AT se identific en
clulas T como un complejo rpidamente inducible que se una al elemento distal de respuesta
a antgeno en el promotor del gen de la IL-2. Su induccin requiere la sealizacin por calcio y
se inhibe con drogas inmunosupresoras como CsA y FK506, que inhiben la actividad fosfatasa
de la calcineurina. El complejo NF-AT activo unido al ADN est formado por un componente
citoslico presente en clulas T y por un componente nuclear ubicuo. El componente citoslico
est constituido por los miembros de la familia NF-AT mientras que el componente nuclear est
formado por miembros de la familia Fos y Jun que constituyen el factor de transcripcin AP-1.
En los ltimos aos se ha identificado la existencia de miembros de la familia NF-AT en otras
clulas del sistema inmune distintas a los linfocitos T y donde tambin regulan la expresin de
numerosos genes de citocinas (IL-4, TNFalfa y GM-CSF) y de receptores de superficie (FasL,
CD40L). La expresin de NF-AT3 y NF-AT4 tambin ha sido descrita en clulas fuera del
sistema inmune, lo que explicara en parte los efectos secundarios de la CsA fuera del sistema
inmune.
Como se ha comentado anteriormente, la activacin fisiolgica del TCR da lugar a la
++
movilizacin de Ca y con ello la activacin de la fosfatasa calcineurina que defosforila a
NFAT, altamente fosforilado en clulas T en reposo. La translocacin al ncleo, el aumento de
afinidad para unirse al ADN y la induccin de la actividad transcripcional de NF-AT estn
regulados por esta defosforilacin. La asociacin fsica entre la calcineurina y NFAT sigue
incluso en el ncleo donde la calcineurina sigue defosforilando al factor mientras los niveles de
calcio intracelulares sigan altos. En gran parte las secuencias de reconocimiento para NF-AT
necesita de la cooperacin de protenas AP-1 para transactivar dichos genes. Adems, esta
interaccin entre AP-1 y NFAT con el ADN, confiere al complejo NFAT/AP1:ADN una
estabilidad 20 veces superior a la que presentan los complejos NFAT:ADN. Por tanto las rutas
de sealizacin que convergen en la activacin de AP-1 van a afectar la actividad
transcripcional mediada por los complejos NFAT/AP-1.
ACTIVACIN DE LINFOCITOS B
INTRODUCCION
Los linfocitos B son clulas especializadas que poseen receptores con distribucin
clonal que tras interaccionar con su ligando especfico (antgeno) secretan inmunoglobulinas
(Ig) denominadas ahora anticuerpos (Ac). En su biografa hay que distinguir dos fases:
1.
Desarrollo (linfopoyesis ontognica) a partir de progenitores linfoides derivados

de la clula hematopoytica primordial (HSC), un proceso independiente de
estmulo antignico y durante el cual se reordenan los genes de las cadenas
pesadas y ligeras de inmunoglobulinas lo que permite la expresin en membrana
de la inmunoglobulina de membrana (mIg conocida tambin como del receptor de

antgeno del linfocito B (BCR),
2.
Procesos que experimentan los linfocitos B maduros tras la unin NO covalente

del antgeno (Ag) con la mIg, cambios que conducen a su expansin por
proliferacin celular y que culminan, por un lado, con la generacin de linfocitos B
memoria, y por otro, con su maduracin hastaclula secretora de anticuerpos
(ASC), cuyo estado terminal corresponde a la morfologa de clula plasmtica, una
clula de vida media corta.
Los linfocitos B memoria adems de haber perdido la mIgD (al menos la mayora de
ellos), en virtud del mecanismo de recombinacin de los genes de la parte constante (genes C)
de las Ig, han cambiado la regin constante de su mIg, de forma que en lugar de expresar
mIgM, expresan mIgG o mIgA o mIgE o combinaciones de mIgM/mIgG o mIgM/mIgA o incluso
mIgM/mIgG/mIgA. Esas mIg siguen expresando el mismo tipo de cadenas ligeras y las mismas
regiones VH y VL, aunque levemente modificadas por la aparicin de cambios puntuales (hasta
diez) en ciertos aminocidos de las regiones determinantes de la complementariedad, lo quein
vivo causan una mayor afinidad del anticuerpo por el Ag. Esos cambios se deben al fenmeno
de hipermutacin somtica de los genes que codifican las regiones VH y/o VL (vaseEstructura
y gentica de las Ig). Los linfocitos B memoria son los precursores inmediatos de las ASC
productoras de IgG o IgA o IgE de la respuesta secundaria, y se generan en el centro
germinal (vide infra, Respuesta de anticuerpos). Aparte de las diferencias de las mIg, no hay
ningn marcador conocido que permita distinguir de forma inequvoca, clulas B memoria de
los linfocitos B primarios (Figura 11.1).
REPERTORIO DE ESPECIFICIDADES DEL ANTICUERPO
El hecho de que los genes V de las Ig se distribuyen clonalmente, es decir, que cada
linfocito B exprese una nica regin VH y una nica regin VL y por tanto una nica
especificidad antignica distinta de la expresada por los otros linfocitos B, constituye el punto
esencial de la teora de la seleccin clonal, segn la cual el Ag exgeno se une (selecciona) a
los linfocitos B cuyas Ig de membrana sean especficas (complementarias) para l. El repertorio
o catlogo de especificidades anticuerpo distribuidas entre los linfocitos B recientemente
formados y que no han tenido contacto todava con el Ag exgeno, se denomina repertorio
primario o preinmune. Los segmentos de genes VH y VL expresados por las clulas B
primarias, tal como se vea en el captulo 5, se hallan en configuracin germinal (no han
experimentado hipermutaciones somticas, como ocurre tras la respuesta al Ag) y su repertorio
surge de los mecanismos recombinatorios de los distintos segmentos gnicos VH DH y JH
(cadena pesada) y VL y JL (cadena ligera) usados, as como del ensamblamiento de una
region VH con una regin VL para formar una zona comn de unin al Ag. Esas posibilidades
combinatorias pueden determinar un repertorio potencial que parece tender al infinito,
8
9
calculndose que, en el ratn, pueda ser de 10 10 . Ello garantiza que cualquier Ag exgeno
de los mltiples (potencialmente millones) presentes de forma natural o artificialmente creados
por el hombre, que entre en el organismo pueda tener oportunidad de encontrar (seleccionar),
aunque sea en muy bajas proporciones, linfocitos B que lo reconozcan. Sin embargo, por
estudios de frecuencia de clulas B especficas contra antgenos definidos (hapteno-portador)
6
7
se infiere que el repertorio realmente utilizado parece ser mucho menor (10 -10 ).
RECEPTOR DE CELULAS B (BCR).
Las Ig de membrana de los linfocitos B maduros constituye parte del receptor de Ag

(BCR). Las cadenas pesadas de las mIg difieren de las cadenas pesadas de las Ig secretadas
en una pequea parte del extremo carboxi-terminal. El hecho de que las Ig se expresen en la
membrana (linfocitos B primarios o vrgenes) o pasen a secretarse tras el contacto con el
antgeno, se debe a un mecanismo de empalme diferencial de los exones M1 y M2 de los
genes CH presentes en el RNA.
La regin citoplsmica de la mIgM y mIgD (humanas) slo tiene 3 aa, (lisina-valinalisina) mientras que la de las otras mIg es algo mayor (25 aa adicionales para la mIgG e mIgE).
Hace unos aos qued claro que el ligamiento cruzado de las mIg (puenteo o agregacin)
mediante anticuerpos anti-Ig (que vienen a representar la accin del Ag) transduca seales
activadoras. Sin embargo, dada la escasa parte citoplsmica de las mIg se sospechaba que no
eran las Ig por si mismas las que transducan esas seales a la maquinaria intracitoplsmica
generadora desegundos mensajeros, sino que ello poda ser responsabilidad de molculas
asociadas a las mIg, de forma anloga a como ocurre con las molculas CD3 asociadas al
receptor antignico de las clulas T (TCR). Actualmente est plenamente establecido que las
mIg se hallan asociadas de forma no covalente a un complejo de dos cadenas polipeptdicas
unidas entre s por enlaces disulfuro, llamadas Ig-alfa e Ig-beta, que estn codificadas por los
genes llamados mb-1 y B29 respectivamente
La arquitectura del receptor, esto es, nmero de heterodmeros y orden de las cadenas
dentro del heterodmero que estan en contacto con las cadenas pesadas de la mIg no se
conoce, pero el modelo aceptado actualmente asume la configuracin que se esquematiza en
la Figura 11.3, en que dos heterodmeros estaran en contacto con cada una de las dos
cadenas pesadas de la mIg.
La parte citoplasmtica de las cadenas Ig-a e Ig-b carecen de dominios catalticos, pero
poseen residuos tirosina que son fosforilados por proten-tirosn-cinasas. El segmento
intracitoplasmtico del receptor antignico de clula B (BCR) est asociado de forma no
covalente a proten-tirosn-cinasas (PTK) que catalizan la forsorilacin de residuos de tirosina
en varios substratos intracelulares, incluidas ellas mismas, inmediatamente despus de que se
produzca el ligamiento cruzado de las mIg. Dichos procesos de fosforilacin se cree que son de
importancia capital en la transduccin de seales activadoras al interior de la clula, trs la
unin del Ag a las mIg. Entre esas PTK se hallan lyn, fyn, blk (y posiblemente otras),
pertenecientes a la familia de src-PTC que contactan con la membrana (ver captulo dedicado a
tansmisin de seales en linfocitos). Tambin se halla asociado una PTK no perteneciente a
esta familia, denominada syk, que al revs de las del tipo src-PTK es completamente
citoplasmtica, sin conexin con la membrana y de enorme semjanza a la cinasa ZAP-70
presente en clulas T. Como se indica ms adelante, el BCR se halla funcionalmente asociado
al complejo no covalente que forman las molculas CD21 y CD19.
RECEPTOR SUBRROGADO DE LAS CELULAS PRE-B.
Las cadenas m libres, es decir no unidas a cadenas ligeras, aunque estn codificadas
con los exones apropiados para expresarse en la membrana, no pueden hacerlo. Para ello,
adems de su ensamblamiento a las cadenas ligeras, se requiere la expresin del
heterodmero Ig-alfa e Ig-beta. Las cadenas m producidas por las clulas pre-B tardas (cuando
todava no se han reordenado los genes V de las cadenas ligeras) quedan retenidas en el
retculo endoplsmico unidas a la protena copuladora de las Ig (BiP) una
molcula carabina (que es idntica a la protena grp78), donde se degradan. Recientemente se
ha visto que una pequea parte de las cadenas m de las clulas pre-B no quedan retenidas en
el citoplasma sino que son exportadas a la membrana. Ello se consigue gracias a su

ensamblaje con una pseudo cadena ligera (y-LC) que subroga la funcin de las cadenas ligeras
autnticas, mientras stas no se reordenan y expresan.
Hay evidencias de que la mIgM subrogada (pre-BCR) de las clulas pre-B transduce
seales queordenan el cese de ms reordenamientos de los genes de las cadenas pesadas,
fenmeno subyacente a la exclusin allica que caracteriza la expresion de los genes de las Ig
(vasegenes de las Ig) adems de favorecer la supervivencia celular mientras se reordenan los
genes de las cadenas ligeras.
ACTIVACION Y DIFERENCIACION DE LINFOCITOS B.
Teora de la seleccin clonal.
Un hito fundamental en el conocimiento de la funcin de los linfocitos B fue la
demostracin de que las clulas B que unen un antgeno determinado son las responsables de
la secrecin de anticuerpos contra ese antgeno. La produccin de anticuerpos solubles
requiere la inyeccin del antgeno (inmunizacin) al animal en una solucin que induce
inflamacin (adyudante). Se supuso que la interaccin fsica del antgeno con alguna clula del
organismo inducira su activacin y posterior diferenciacin a clula secretora de
inmunoglobulinas. Para la demostracin de esta teora se realizaron una serie de experimentos
en los que se adicion un antgeno marcado radioctivamente a un cultivo de clula de bazo
(rgano que contiene un abundante nmero de clulas B). Aquellos linfocitos B que unan el
antgeno moran por irradiacin (Figura 11.4). Las clulas supervivientes (la inmensa mayora
porque slo 1 de cada 50.000 clulas unan el antgeno) se transferan a un ratn irradiado
letalmente. Sin embargo, la inmunizacin de ese ratn con el mismo antgeno no despertaba
respuesta de anticuerpos especficos, cosa que s ocurra cuando el antgeno utilizado en la
inmunizacin no estaba marcado radioactivamente. Estos experimentos slo podan ser
interpretados segn la teora denominada de seleccin clonal. De acuerdo con esta teora, los
linfocitos B tienen receptores distribuidos clonalmente (inmunoglobulinas de membrana
responsables de la unin al antgeno) y por tanto, presentan un potencial de estimulacin
antignica restringido. Tras el contacto con el antgeno, los linfocitos B se activan y diferencian
a clulas secretoras de inmunoglobulinas, las cuales tienen una especificidad casi idntica, a la
expresada en la membrana de las clulas B que han unido el antgeno (con mutaciones
puntuales en los segmentos VH y VL.Las clulas B inmaduras que unen antgenos propios son
eliminadas (deleccin clonal) o son incapaces de diferenciarse a clulas secretoras de
inmunoglobulina (anergia). Efectivamente, el desarrollo del sistema inmune necesita compaginar
dos fenmenos casi contradictorios; a) generar una enorme diversidad de receptores que
reconozcan antgeno y b) seleccionar de todas estas especificidades generadas al azar las no
dainas para el organismo. De no ser as, los autoanticuerpos generados produciran fenmenos
inflamatorios destructivos para rganos y tejidos.
Las clulas B inmaduras (aquellas clulas B que acaban de reordenar los genes de las
cadenas ligeras) que interaccionen con antgenos propios multivalentes expresados en alta
cantidad en la membrana celular (p.e. molculas MHC), mueren por un proceso denominado
apoptosis, en el que se produce la fragmentacin de DNA y la eliminacin de fragmentos
celulares por clulas fagocticas sin liberacin de enzimas citoplasmticas pro-inflamatorias al
entorno. De hecho, algunas clulas B autorreactivas vuelven a intentar reordenar la cadena
ligera (edicin del receptor) con el fin de no reaccionar contra elementos propios y poder
sobrevivir. Cuando el antgeno propio reconocido por las clulas B inmaduras es soluble, el
linfocito B autorreactivo no muere, pero tampoco se diferencia a clula secretora de
inmunoglobulinas. Esta peculiar forma de respuesta se denomina anergia funcional, y trae
como consecuencia la modificacin de la recirculacin tisular de estas clulas y el acortamiento

de su vida media.
Cooperacin T:B. Teora de las dos seales.
Primera seal.
En los fenmenos inducidos por el Ag en las clulas B tras su unin a las Igm, es
clsico distinguir tres acontecimientos secuenciales: activacin (entrada en la fase G1 del ciclo
celular), proliferacin (sntesis de DNA y divisin celular) y maduracin y diferenciacin hacia
ASC. Estos acontecimientos se inician con la unin del Ag a las mIg del BCR. Aunque esa
divisin pueda parecer artificiosa por cuanto fisiologicamente esos fenmenos son
un continuum, es til e importante por cuanto se trata de acontecimientos con un control y
requerimentos distintos. Se demostr que la unin no covalente entre el antgeno y la
inmunoglobulina de membrana slo se traduca seales al interior de la clula cuando al menos
dos molculas de mIg se pongan en ntimo contacto (puenteo del BCR). Ello se puede lograr
de dos formas, bien porque el antgeno tenga estructuras (eptopos) repetidas y que cada una
de ellas interaccione con una molcula de mIg, o bien porque el antgeno sea captado por una
clula que lo fije a su membrana facilitando el puenteo de mIg. Dado que el nmero de
linfocitos B con mIg especficas para un determinado Ag es muy bajo, el estudio in vitro de la
activacin inducida por el Ag se ha modelizado usando anticuerpos anti-Ig, que sirven a modo
de panantgenocapaz de unirse a las mIg de todos los linfocitos B, con independencia de la
especificidad anticuerpo (activacin policlonal). Durante la mitad de los 80 qued claro que el
ligamiento cruzado o puenteo de las mIg por anticuerpos anti-Ig inducan a las clulas B a
entrar en la fase G1 del ciclo clular (activacin) que se caracteriza por aumento del tamao
celular y aspectoblstico, hiperexpresin de molculas HLA de clase II, expresin de antgenos
de activacin (receptores de IL-2R y de otras citocinas y otros antgenos de activacin),
formacin de agregados celulares mediados por molculas de adhesin (principalmente a
travs de la integrina leucocitaria LFA-1 (CD11a/CD18) y su unin a ICAM-1 (CD54), ICAM-2 e
ICAM-3 (CDw50) y sntesis de RNA. Esto se puede observar durante las primeras 24-48 hr. del
cultivo. Los mecanismos de transduccin de seales desde la membrana al citoplasma y luego
al ncleo, donde se activar la transcripcin de genes implicados en la entrada de la clula en
el ciclo celular, son comunes a otros tipos celulares tras interacciones receptor-ligando, y son
muy similares a los procesos que se desencadenan tras la interaccin del receptor para el
antgeno (TCR) de los linfocitos T con el complejo pptido- molcula MHC. Sin embargo, estos
cambios incluyen como mnimo : activacin de tirosin-cinasas asociadas al BCR, que catalizan
la fosforilacin de varios substratos intracelulares, incluidas ellas mismas, as como la
fosfolipasa C-gamma (PLC-gamma), CD19, y las cadenas Ig-alfa e Ig-beta. La fosforilizacin de
la PLC se cree que causa su activacin con lo que luego cataliza la hidrlisis de
fosfoinositoles, generndose inositoltrifosfato (IP3) y diacilglicerol (DAG) que causan ,
respectivamente, aumento del calcio libre intracelular (primero por descaraga de los almacenes
internos, despues por entrada de calcio extracelular) y activacin de la protein-cinasa C (PKC).
La importancia de la activacin de la PKC para la activacin de las clulas B, fu
corroborado por el hecho de que los esteres de forbol, que causan la activacin de la PKC y su
translocacin a la membrana celular, en conjuncin con ionforos de calcio, que causan
entrada de calcio extracelular, actan de modo sinrgico causando los mismo fenmenos
activatorios que los anticuerpos anti-Ig. De hecho la combinacin de esos agentes
farmacolgicos, constituye el activador policlonal ms potente de clulas B.
Hoy en da se acepta que por muy favorable que sea la estimulacin de linfocitos B va
mIg, siempre que se estudien clulas mIgM+/mIgD+ verdaderamente quiescentes y altamente
purificadas, la activacin B no suele progresar hacia sntesis de DNA, ni muchsimo menos
madura hacia ASC. Ello llevo a hipotetizar que las clulas B necesitaban dos seales para su
diferenciacin terminal, una proveniente del puenteo de la Ig de membrana y otra segunda
seal proveniente de alguna clula accesoria.
Segunda seal. Papel de los linfocitos T
Los experimentos que involucraban a las clulas T en la diferenciacin de clulas B tienen
su base en experimentos muy antiguos de cooperacin entre clulas provenientes de mdula
sea (linfocitos B) y timo (linfocitos T). Estos experimentos se interpretaron bajo la hiptesis de
que las clulas B eran capaces de producir anticuerpos pero para ello requeran el auxilio de
clulas T. Veamos la naturaleza de esta segunda seal:
1. Factores solubles. Los estudios de este fenmeno se basaron en experimetos que

demostraron que los linfocitos T eran capaces de producir factores solubles tras su
estimulacin con antgenos o mitgenos, y que algunos de estos factores solubles
estaban involucradas en procesos de proliferacin. As, se prob el efecto de
sobrenadantes de clulas T activadas en la proliferacin y diferenciacin de clulas B.
Se demostr que la adicin de estos factores solubles (citocinas) a clulas B
estimuladas con anti-IgM eran capaces de inducir proliferacin de clulas B pero no su
diferenciacin (Figura 11.5). Sin embargo, se obtuvieron datos aparentemente
contradictorios con este postulado al lograrse in vitro la diferenciacin de clulas B de
tamao superior al normal y de una densidad baja en presencia nicamente de
factores solubles. Datos posteriores evidenciaron que estas clulas B probablemente
haban sido activadas in vivo, probablemente gracias a la colaboracin T, y por ello su
diferenciacin final aparentemente slo requera factores solubles (vide infra).
2. Molculas de membrana. Se ha demostrado que tanto los linfocitos B como las clulas
T que han reconocido antgeno expresan en su membrana transitoriamente molculas
de activacin, con ligandos recprocos. As, las clulas B expresan las molculas de
activacin CD80 y CD86 que interaccionan con CD28 presente en linfocitos T mientras
que la molcula de activacin de linfocitos T CD40-L se une a CD40 presente en
linfocitos B.C) Cooperacin entre factores solubles y molculas de activacin. Diversos
abordajes experimentales han demostrado que las molculas de activacin presentes
en linfocitos T y B activados con ligandos recprocosunidas a la secrecin de
interleucinas por linfocitos T son las seales que hacen diferenciarse a linfocitos B que
han contactado con el antgeno y por tanto constituyen conjuntamente la segunda
seal.(Figura 11.5).
Cooperacin linfocitos T y B.
Veremos separadamente los procesos relacionados con la activacin de linfocitos T y despus de
linfocitos B.
Activacin de linfocitos T.
Al igual que los linfocitos B, las clulas T necesitan el puenteo de su receptor
antignico para la modificacin de su fisiologa y con ello la ganancia de ciertas funciones que
antes no tena, tales como secrecin de factores solubles, expresin en membrana de
molculas de activacin, etc. El receptor de linfocitos T no reconoce, tal y como lo hacen los
linfocitos B, una enorme variedad de estructuras moleculares (incluyendo hidratos de carbono)
sino que est sesgado para el reconocimiento de molculas del complejo principal de
histocompatibilidad (MHC) debido a un proceso de seleccin que tiene lugar en el timo. Las
molculas codificadas en el MHC son capaces de alojar pptidos en un hendidura que aparece
en su estructura cuaternaria. El receptor de linfocito T slo es capaz de unirse a complejos

pptido-MHC, interaccionando los aminocidos de las cadenas que forman el receptor de
linfocito T tanto con aminocidos del pptido como de la molcula MHC en la que ste se
encuentra alojado. Estos pptidos se generan por la proteolisis de protenas generadas en el
interior de la clula (por ejemplo protenas virales) o de aquellas captadas del medio externo
tras su endocitosis o pinocitosis (protenas bacterianas). Este proceso se denomina
presentacin antignica.
Tambin la activacin de las clulas T requiere otra segunda seal no del todo aclarada
pero que probablemente sea debida a la interaccin de protenas de membrana de la clula
presentadora con otras protenas de membrana del linfocito T. Es importante resaltar que slo
algunas clulas del organismo son capaces de facilitar a las clulas T esta segunda seal, a las
que se denominan clulas accesorias. Si el linfocito T reconoce un pptido en una clula sin
capacidad accesoria, el linfocito T no slo no se activa, sino que se hace refractario a
activacin, entrando en un proceso denominado anerga. Las clulas que clsicamente se les
ha considerado clulas accesorias (monocitos, macrfagos y clulas dentrticas) captan el
antgeno bien por pinocitosis o por endocitosis a travs de receptores para el fragmento Fc de
Ig (RFc), receptores de factores de complemento (RC) o receptores de manosa.
Clula B como clula presentadora de antgenos T dependientes.
En 1985 A. Lanzavecchia demostr que la inmunoglobulina de superficie de clulas B
era capaz de captar y de concentrar antgenos solubles de naturaleza proteica (antgenos T
dependientes) permitiendo una presentacin antignica a clulas T extremadamente eficaz.
Esta nueva funcin de linfocitos B podra ser la base de respuestas de anticuerpos especficas
a bajas concentraciones de antgeno, y, al mismo tiempo, explicara la especificidad de la
respuesta inmune. Los linfocitos B que interaccionaran a travs de su Igm con un antgeno
denominado por ejemplo X, lo procesaran y presentaran unidos a MHC pptidos del
mismoantgeno X (pptidos-X). Los linfocitos T con especificidad anti-(peptidos-X) que han
interaccionado previamente con el antgeno en clulas accesorias clsicas, reconoceran el
complejo MHC-pptido en la membrana de la clula B, transmitiendo las segundas seales
necesarias para la diferenciacin de clulas B (factores solubles ms interaccin membranamembrana) (Figura 11.6).
Es importante destacar que las partes del antgeno X reconocidas por linfocitos T y B
pueden ser muy distintas. Las clulas B pueden interaccionar con los hidratos de carbono de la
glicoproteina X, mientras que los linfocitos T anti-X slo reconocen pptidos de esta protena X.
Un ejemplo clsico de este tipo de reconocimiento es la respuesta a haptenos que no
contengan aminocidos. Los haptenos son estructuras moleculares de pequeo tamao que
pueden ser reconocidas por ciertas inmunoglobulinas de membrana, pero que paradjicamente
son incapaces de inducir la diferenciacin de clulas B tras su inyeccin in vivo por no recibir
la cooperacin de linfocitos T. Por ejemplo, haptenos que no contengan aminocidos
(poliazcares) no pueden presentar ningn pptido presente en su estructura a linfocitos T, por
lo que no se generaran las segundas seales necesarias para la diferenciacin de linfocitos B
hapteno especficos (los que han unido hapteno a travs de su BCR). Lgicamente, la
inmunizacin de una nueva estructura molecular en la que el hapteno se uniera
convalentemente a protenas no presentes en el animal (no propias) s despiertan una
respuesta de anticuerpos in vivo. Ello se debe a que las clulas B que unen el hapteno,
endocitan el complejo hapteno-proteina (denominada transportadora o carrier)., degradan
enzimticamente la porcin proteica generando pptidos que se unen a MHC. Esta estructura
peptido-MHC sera reconocida por algunos linfocitos T CD4, que se activaran y generaran
segundas seales que permitiran la diferenciacin terminal de estas clulas B que secretaran
inmunoglobulinas anti-hapteno
Dado que los linfocitos T han sufrido un proceso de seleccin en timo por el que se han
seleccionado aquellos con una cierta afinidad por molculas MHC propias y considerando que
previamente han reconocido el antgeno (ms exactamente un pptido de l) en el contexto de
molculas MHC propias presentes en la clula accesoria presentadora de antgeno, es lgico
que las clulas T slo cooperan con clulas B que hayan unido el antgeno y lo hayan
presentado en molculas MHC idnticas a las presentes en clulas dentrticas, que en
coondiciones fisiolgicas son tambin las presentes en clulas T. Como las molculas MHC
son polimrficas en poblaciones, las clulas B, T y dentrticas deben expresar el mismo alelo
MHC al que se une el pptido para cooperar entre s, fenmeno por ello denominado
restriccin allica HLA.
Otras vias de activacin de clulas B.
Entre estas vas destacan las son antgenos T independientes de aquellas que son antgeno T
dependientes, segn el grado de necesidad de que participen estos linfocitos en la respuesta inmune.
Antgenos T independientes.
Algunos antgenos son capaces de despertar una respuesta de anticuerpos en
ausencia de clulas T. Este tipo de antgenos se ha dividido en dos grupos, los denominados
antgenos T independientes 1 (TI-1) o 2 (TI-2). Los antgenos TI-1 son antgenos de la pared
bacteriana que inducen una diferenciacin policlonal de clulas B murinas independiente de la
especificidad de su receptor clonotpico, ya que este no interviene en el reconocimiento. El
ejemplo clsico en el modelo experimental murino es la respuesta a LPS (Figura 11. 7).
Por el contrario, los antgenos TI-2 son estructuras repetids, normalmente hidratos de
carbono, que son reconocidos por el receptor B. Las caractersticas moleculares de los Ag TI-2
hacen que se produzca un puenteo de varias molculas de Igs (un nmero crtico parece ser
de 12-16). Este puenteo masivo local favorece la activacin de linfocitos B, an en la ausencia
de una interaccin T:B membrana-membrana. Cmo ya hemos desarrollado, los hidratos de
carbono no puede activar clulas T al no contener aminocidos en su estructura molecular. As,
el puenteo masivo de Igm por antgenos TI-2 provoca un estado de activacin en el linfocito B,
en el cual los contactos membrana-membrana con linfocitos T no son necesarios. Sin embargo
parece que factores solubles producidos por clulas T o no T (mastocitos) s juegan un cierto
papel en este tipo de respuesta.
Tanto los antgenos TI-1 como TI-2 se encuentran sobre todo en bacterias, sugiriendo
que la respuesta antibacteriana pueda tener un componente T independiente. Este parece ser
el caso, ya que las inmunodeficiencias T genticas o adquiridas no suelen asociarse a un
aumento exagerado de infecciones bacterianas. De hecho, recientemente se ha descrito la
activacin policlonal de linfocitos B tras su interaccin con DNA bacteriano en un proceso en el
que no interviene el BCR, por lo que este DNA podra considerarse un antgeno TI-1.
Es de destacar que en general, los epitopos reconocidos por las clulas B no
corresponden a los reconocidos por los linfocitos T (Figura 11. 8). Una vez que las clulas B
se activan adecuadamente, stas se transforman en clulas plasmticas (Figura 11. 9) o en
clulas memoria que por su situacin de preactivadas responden con gran eficacia en
estmulos posteriores.
ACTIVACION DE CLULAS NK
INTRODUCCION
Las clulas NK participan activamente en la defensa del organismo frente a infecciones,

principalmente de tipo viral y frente al crecimiento de clalas tumorales. Estas clulas participan
tanto en la defensa innata y como en los mecanismos de defensa adquirida o adaptativa. La
funcin esencial de estas clulas es identificar y destruir clulas blanco. Tambin es importante su
funcin reguladora del sistema inmune debido a su capacidad secretora tanto de citocinas como
de quimiocinas.
Las clulas NK constituyen la tercera estirpe de clulas de tipo linfoide. Carecen de
TCR y de Igm y, en su mayora, expresan en superficie las molculas FcgammaR-III (CD16) y
CD56 que junto con otros marcadores definen a este grupo celular (Tabla 12.1). La deteccin
de algunos de estos marcadores puede ser variable, definindose varias subpoblaciones NK,
tales como clulas muy positivas para CD56 (CD56 bright), muy poco positivas para este
dim
+
+
+
marcador (CD56 ), o clulas CD16 CD56 o CD16 CD56 , etc. Las clulas NK se encuentran
en sangre, bazo y mdula sea y en muy baja proporcin en ganglios linfticos.
FUNCIN CITOTXICA DE LAS CLULAS NK
La funcin citotxica de las clulas NK fue la primera accin asignada a estas clulas y
el motivo de su descubrimiento (Tabla 12.2). Para que las clulas NK ejerzan su funcin
citotxica se requiere la identificacin, a travs de los receptores implicados, de las clulas blanco.
Entre estos receptores destacan receptores de activacin y otro grupo recientemente descrito de
receptores que tienen como ligando molculas de histocompatibilidad clase I y que pueden ser de
tipo inhibidor o activador (Figura 12.1). En este fenmeno adems intervienen ciertas citocinas y
molculas de adherencia facilitadoras de la interaccin celular.
Mediante la accin citoltica, las clulas NK pueden destruir un amplio espectro de
clulas, tanto anormales (infectadas por virus o tumorales) como incluso normales (alognicas).
Esta lisis se realiza de manera directa, lisis natural, o bien mediante la participacin de
anticuerpo,citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos o ADCC (Figura 12.2).
La citotoxicidad natural consiste en lisis de una gran variedad de clulas de manera
espontnea y sin necesidad de un periodo de sensibilizacin previa. De ah la denominacin dada
de NK (de natural killer) debido a que la capacidad citoltica que presentan lo hacen, a
diferencia de las clulas T citotxicas, de una manera natural, esto es sin necesidad de un
aprendizaje preliminar. Esto implica que estas clulas no requieren un proceso de preparatorio
de activacin para destruir clulas en los trminos que lo hacen los linfocitos T citotxicos,
pero sin duda la activacin por clulas blanco o por citocinas hace que esta funcin sea mas
eficiente.
Krre y cols. observaron que variantes de una misma lnea celular tumoral
manifestaban distinto grado de sensibilidad a la lisis NK, que se correlacionaba inversamente
con la expresin de molculas de clase I del MHC (Figura 12.3). Por otra parte, la transfeccin
de clulas diana con molculas del MHC-I les confera resistencia. Los autores propusieron la
teora de missing self para explicar los fenmenos de citotoxicidad natural. As hoy se
considera que pese a que las clulas NK son responsables de mecanismos de citolisis
inespecfica no restringida por el MHC, se sabe que la funcin de las clulas NK est regulada en
parte por el reconocimiento de molculas MHC de clase I (MHC-I) en la clula diana.
La citotoxicidad dependiente de anticuerpos (ADCC), implica la presencia de
anticuerpos que son reconocidos por su extremo Fc por los receptores CD16 presentes en las
clulas NK y tambin en otras clulas, como son los macrfagos. Cuando el CD16 reconoce su
ligando activa la maquinaria ltica de la clula NK.
FUNCIN SECRETORA DE LAS CLULAS NK
Adems de la accin citotxica, las clulas NK tienen la propiedad de sintetizar y liberar

diversos tipos de citocinas de gran importancia en la regulacin del sistema inmunitario, en la
accin de las propias clulas NK y en otras funciones como es la hematopoyesis (Figura
12.4 yTabla 12.2).
Las principales citocinas producidas por las clulas NK son TNF-alfa, IFN-gamma, IL-3,
GM-CFS y M-GSF. Estos inmunomoduladores se producen como consecuencia de la
activacin de clulas NK como consecuencia de su interaccin con la clula blanco, por la
accin de diferentes citocinas como son IL-2 y Il-12 o por activacin directa, por ejemplo por
anticuerpos frente a las molculas CD16, CD69, CD80 y otras.
Tambin las clulas NK producen cuando son estimuladas ciertas quimiocinas, tales
como MIP-1alfa, MIP-1beta y RANTES de gran importancia en los fenmenos inflamatorios. En
la tabla 12.3 se recogen las principales diferencias funcionales entre las clulas NK y los
linfocitos T.
bright
Hoy se sabe que las clulas NK mas positivas para el CD56 (CD56
) poseen mayor
dim
capacidad para producir citocinas que las clulas mas dbiles para esta molcula (CD56 ). A
dim
bright
su vez las clulas NK CD56 poseen mayor capacidad citotxica que las CD56
.
RECEPTORES ACTIVADORES DE CLULAS NK

Para que las clulas NK desarrollen su funcin tienen que identificar a la clula blanco.
Para ello las clulas NK poseen diferentes tipos de receptores con funcin de reconocimiento
de molculas en las clulas blanco y en consecuencia de activar la maquinaria citoltica y/o
secretora de estas clulas. Despus veremos como junto a estos receptores de tipo activador
existen otros cuya funcin es inhibidora. En consecuencia hoy se conoce que la accin final
de las clulas NK depende del equilibrio entre las seales inhibidoras y activadoras
procedentes de sus receptores de superficie.
Entre los receptores de activacin de las clulas NK destacan el CD16, CD80, CD43 y
los recin descritos receptores de citotoxicidad natural (NCKs) y entre los inhibidores destacan
ciertos receptores presentes en las clulas NK con capacidad de reconocer molcula de
histocompatibilidad (Receptores NK de HLA) (Tabla 12.4).
Receptor CD16.
La va de activacin a travs de CD16 es, al menos parcialmente, comparable a la del
CD3/TCR. Ambos receptores se asocian a ciertas cadenas del complejo CD3, implicadas en la
transduccin de seales. Por otra parte, la estimulacin va CD16, determina tambin la
activacin de ciertas cinasas y PLC-gamma, y se ha demostrado su asociacin molecular con
p56lck.
Receptores de citotoxicidad natural.

Los receptores de citotoxicidad natural (NCKs), han sido descritos recientemente y de
manera mayoritaria por el grupo de Moretta, mediante el empleo de anticuerpos monoclonales
en ensayos en donde lo que se ha analizado es la capacidad de inhibir la lisis de determinadas
lneas celulares tras el uso de los mencionados anticuerpos. Entre estos receptores destacan
tres conocidos como:
NKp46,
NKp44 y
NKp30.
Tambin recientemente se han descrito receptores de tipo activante que se caracterizan

por reconocer especficamente molculas de histocompatibilidad y que trataremos a
continuacin.
RECEPTORES NK ESPECIFICOS DE ANTGENOS HLA.
El reciente descubrimiento de receptores presentes en clulas NK que reconocen

molculas de histocompatibilidad y que tienen funciones reguladoras de la funcin de estas
clulas ha abierto una importante puerta para entender la biologa de estas clulas.
Los sistemas experimentales convencionales para estudiar estos fenmenos analizan la
actividad de clones/subpoblaciones NK frente a lneas tumorales deficientes en la expresin de
MHC-I, transfectadas selectivamente con diferentes molculas de clase I.
Los receptores NK especficos de antgenos HLA clase I son un grupo heterogneo de
glicoprotenas que pertenecen a distintas familias de molculas y se expresan en clulas NK
pero tambin en ciertos linfocitos T (Figura 12.5 y Tabla 12.5).
1. La primera familia incluye receptores de antgenos HLA-I pertenecientes a la

superfamilia de las inmunoglobulinas. Originariamente estos receptores se conocieron
por su accin inhibidora de la citotoxicidad y se denominaron como KIRs (killer cell Iglike receptors).
2. Otro grupo de estos receptores pertenece tambin a la superfamilia de las

inmunogbubulinas y son conocidos como ILTs (immunogloobulin like transcripts).
3. Adems existe otro grupo de receptores que son heterodmeros formados por la
asociacin de dos molculas diferentes con dominio lectina tipo C como es el CD94
que se puede unir a miembros de las superfamilia de molculas NKG2. Estos
receptores pueden tener accin inhibidora, que es como originariamente se
descubrieron, pero pueden poseer tambin accin activante de acuerdo con la
estructura de la parte citoplasmatica de sus molculas.
Receptores NK tipo KIR.

Se trata de receptores que pertenecen a la familia de las inmunoglobulinas.
Originariamente estos receptores fueron descubiertos porque estaban implicados en la inhibicin
de la lisis al interaccionar especficamente con determinadas molculas HLA de clase I de la clula
blanco(Figura 12.6). En primer lugar, se observ cierta correlacin entre la expresin de estos
receptores por distintos clones NK y el reconocimiento de diferentes grupos de alelos de HLA-C.
Por otra parte, se observ que anticuerpos monoclonales frente a estos receptores restablecan la
citotoxicidad de los clones NK frente a dianas protegidas especficamente por la expresin de
molculas HLA. En la tabla 12.6 se recoge una lista de estos receptores y las molculas que
reconocen (Figura 12.6).
Segn el nmero de dominios presentes en la molcula del receptor a la palabra KIR,
se aaden los sufijos 2D y 3D que indican el nmero de los dominios de inmunoglobulina que
poseen y la letra L (long) o S (short) segn que la cola citoplasmtica de estas molculas sea
larga o corta respectivamente (Tabla 12.6). Estos receptores pueden ser de tipo inhibidor o de
tipo activante. En este ltimo caso estos receptores se asocian de manera covalente con la
molcula DAP-12.
La distribucin de estos receptores en las clulas NK no es homognea y cada clon NK
puede expresar uno o varios tipos de estos receptores. Se aprecian claras diferencias en la
expresin de cada receptor cuando se estudian distintos individuos, y hay indicios en los que
el repertorio de receptores est regulado durante el desarrollo por factores genticos,
incluyendo presumiblemente la influencia del propio MHC. A estos receptores recientemente se
les ha dado la denominacin de CD158 seguido de una letra (ente a y k) segn el tipo de
receptor.En la Figura 12.7, se recogen los distintos tipos de receptores y las molculas que
reconocen y en la Figura 12.8 se recoge un modelo de la estructura tridimensional de esta
molcula unida a un antgeno de histocompatibilidad.
Los genes que codifican estos receptores se encuentran localizados en el cromosoma
19 en humanos en una en donde se codifican tambin los receptores ILTs, Fca y
NKp46 (Figura 12.9).
Receptores NK tipo ILT
Otro grupo de receptores, que tambin pertenece a la superfamilia de las
inmunoglobulinas, se conocen como ILTs (immunogloobulin like transcripts) o como
LIR (leukocyte Ig-like receptor).Alguno de estos receptores reconocen molculas HLA-G y la
protena UL18 (LIR1 y LIR2) del citomegalovirus humano y tiene una distribucin muy extensa
en diferentes tipos de clulas incluyendo no solo clulas NK sino tambin monocitos y ciertas
clulas de tipo polimorfonuclear (Tabla 12.7). A estos receptores recientemente se le ha dado
la denominacin de CD85 seguido de una letra (a-m) para definir el tipo de receptor .
Receptores NK tipo lectina.

La tercera familia de estos receptores de HLA esta formada por un grupo heterodimero
compuesto por molculas de tipo C-lectina que comprende la molcula CD94 unida
covalentemente de manera alternativa a diferentes molculas pertenecientes a la familia NKG2
(A, B, C, E y H).La molcula CD94, fue identificada originalmente por uno de nosotros (M. LpezBotet) en el laboratorio del Hospital de la Princesa. Este receptor reconoce molculas de HLA-E
en asociacin con pptidos derivados de la secuencia lder de otros antgenos HLA-I (Figura
12.10).
Las molculas de la familia NKG2 pueden ser de distinto tipo: A, B, C, E y H. Resultan
as que de la combinacin del receptor CD94 con los distintos miembros de NKG2, resultan los
dmeros CD94/NKG2A, CD94/NKG2C, etc. Esta posibilidad de unirse el CD94 a diferentes
miembros de la familia NKG2 justifica la accin unas veces, inhibidora (por ejemplo
CD94/NKG2A) y otras activante (por ejemplo CD94/NKG2C) descritas originariamente para
este receptor (Tabla 12.8).
Consideramos a este receptor de especial importancia en los procesos de regulacin

de la accin de clulas NK in vivo, debido a la extensa distribucin de las molculas de
histocompatibilidad HLA-E que reconoce y sobre todo por el hecho de encontrarse presente en
un amplio numero de clulas NK (60-80 %) y ciertos linfocitos T, mientras que por ejemplo los
recetores KIRs lo estn en una proporcin de clulas mucho ms baja. La expresin de CD94
es regulada por ciertas citocinas tales como IL-15 IL-10 y TGF-beta.
Recientemente se ha visto que los receptores de tipo activante poseen adems del CD94
y un miembro de NKG2 (C, E y H), la molcula DAP-12 que posee motivos ITAM, y por tanto se
caracteriza por la transmisin de seales de activacin.
En la Figura 12.11 se recoge un modelo tridimensional de CD94 unido a una molcula
de HLA-E que es su ligando natural. Los genes que codifican tanto los receptores CD94 como
los de la familia NKG2 se encuentran localizados en el cromosoma 12 en humanos en una
zona conocida como complejo gnico NK ( Figura 12.9).
Receptores NK de molculas HLA en otras clulas
Los receptores NK especficos de molculas HLA se encuentran tambin en otras
estirpes celulares no NK, aunque en una menor proporcin y densidad. Este es el caso de una
poblacin especial de clulas NK se encuentran en la decidua y que son conocidas como
clulas NK deciduales y cuya funcin no esta completamente esclarecida.
Otra poblacin conocida que expresa estos receptores corresponde a las clulas NKT
cuya funcin tampoco esta totalmente esclarecida. Estas clulas se caracterizan por poseer el
fenotipo T con ciertos marcadores de clulas NK y que se encuentran en gran proporcin en el
hgado. Estas clulas son TCR alfa/beta positivas y expresan Va14/Ja18 y tienen la capacidad
de reconocer molculas de histocompatibilidad no clsicas, CD1. Estas clulas poseen
capacidad citoltica, producen ciertas citocinas y su proliferacin es activada por IL-12.
Algunos de estos receptores se encuentran tambin en linfocitos T, principalmente del
tipo citotxico (Tc) pero tambin en linfocitos Th, lo que hace pensar que adems de su
intervencin en la regulacin de los procesos citotxicos de las clulas intervengan tambin en
su regulacin funcional, principalmente en la secrecin de citocinas.
TRANSDUCCION DE SEALES
Tal como se ha indicado con anterioridad, tanto los receptores KIR, ILT como el
homodmero de CD94 con distintos miembros de la familia de NKG2, pueden ejercer acciones
inhibidoras como activantes. El que ejerzan una u otra accin depende de la cola
citoplasmatica de dichas molculas y de las cinasas con las cuales se asocien.
Mecanismos de inhibicin.
Los receptores inhibidores se caracterizan por poseer en sus dominios
intracitoplasmticos los motivos YxxL-26-YxxL, denominados ITIM (immunoreceptor tyrosinebased inhibitory motifs) (Figura 12.12). Estos motivos tienen la propiedad de unirse al dominio
SH2 que contiene las tirosin fosfatasas, SHP-1 y SHP-2, y as producir inhibicin de la
citotoxicidad. En la figura 12.13 se representan un ejemplo de cada uno de los dos tipos de
receptores, inhibidores y activadores.
Es de destacar que esta accin inhibidora ejercida por los receptores inhibidores
despus de reconocer a su ligando (HLA clase I) en la clulas tiene una gran importancia
fisiolgica, pues esto previene la destruccin de las clula normales del husped. Esto se debe
a que, como se sabe, la mayora de las clulas del organismo expresan molculas de
histocompatibilidad clase, incluidas las molculas HLA-E. Precisamente cuando una clula deja
de expresar molculas de histocompatibilidad, entones pude ser destruida por las clulas NK al
no ser frenada su actividad por no actuar los receptores de tipo inhibidosr (Figura 12.14),
Estos mismos fenmenos has sido descritos para linfocitos T, en los que el efecto
activador mediado por el TCR-CD3, puede ser bloqueado por accin de un receptor de tipo
inhibidor(Figura 12.15). Los receptores de este grupo son KIR2DL, KIR3DL, ILT-2, NKG2A y
NKG2B.
Mecanismos de activacin.
Aunque los receptores de antgenos HLA se describieron primero como receptores de
tipo inhibidor por su capacidad de bloquear la citotoxicidad dependiente de clulas NK,
posteriormente se han encontrado receptores muy homlogos, que diferan solo en los
dominios intracelulares y que funcionaban induciendo seales de tipo activador. Estos
receptores poseen una parte citoplasmtica muy corta, carecen de la secuencias ITIMs y
tienen la propiedad de asociarse a las molcula DAP-12. Estos receptores son KIRD2S,
NKG2C, NKG2E y NKG2H.
El DAP-12 es un homodimero conocido tambin como KARAP (Killer activating
receptor associated protein), gracias al cual se lleva a cabo la transmisin de seales en el
citoplasma de la clula. La molcula DAP12 se caracteriza por contener en su parte
citoplasmtica un dominio conocido como ITAM (immunoreceptor tyrosine-based activating
motif) y tiene la capacidad de unir las cinasas ZAP-70 y Syk.
ACTIVACION NK Y RESPUESTA INMUNE INNATA.
Las clulas NK forman parte de la primera barrera defensiva del individuo junto
con macrfagosy polimorfonucleares (Figura 12.16). Constituyen as parte de la respuesta
inmune innata. Ciertas citocinas que potencian el efecto de estas clulas son producidas
precisamente por macrfagos en las primeras fases de la infeccin (Tabla 12.9). Las clulas
NK actan destruyendo clulas (por ejemplo infectadas por virus) y produciendo citocinas y
quimiocinas, que intervienen regulando el sistema inmune y el proceso inflamatorio (Figura
12.17).
INMUNOPATOLOGIA DE LAS CLULAS NK.
Las clulas NK son de especial importancia en las primeras fases de la infeccin,
especialmente frente a virus, de ah que cuando estas clulas no actan correctamente, el
individuo se hace mas vulnerable a la infecciones virales. Por ejemplo en individuos infectados
por HIV-1, se ha podido comprobar que las clulas NK han disminuido su capacidad citoltica,
lo que puede explicar que el virus HIV-1 se desarrolle con mas facilidad. De igual manera ha
podido ser comprobado que las clulas NK infiltrantes de tumores poseen menor capacidad
citoltica que las clulas NK normales, probablemente por un aumento de expresin de
receptores de tipo inhibidor.
Por otra parte una excesiva capacidad citotxica de las clulas NK pueden inducir
estados de prdida de la tolerancia normal y contribuir al desarrollo de enfermedades de tipo
autoinmune.
Recientemente se ha visto que las clulas NK, pueden ser utilizadas en terapia antitumoral. Para ello despus de su extraccin del individuo y cultivo con Il-2, IL-12 o IL-15, son
posteriormente reinyectadas en el enfermo en forma de clulas LAK (citokyne activated
lymphocytes). En enfermos con SIDA, tambin se esta tratando de potenciar la respuesta
inmune innata y en especial estas clulas NK, mediante la administracin de IL-2, con
resultados que son prometedores.
TEMA 10. SISTEMA DEL COMPLEMENTO

INTRODUCCIN
El sistema de complemento est constituido por molculas implicadas principalmente

en la defensa frente a infecciones y clulas tumorales. Parte de los factores del complemento
potencian la inflamacin y la fagocitosis y actan produciendo la lisis de clulas y
microorganismos. El complemento es especialmente importante frente a grmenes gram
negativos que pueden ser directamente lisados por anticuerpos y complemento.
La mayor parte de los factores del complemento son protenas plasmticas y una
pequea proporcin de ellos son protenas de membrana (Tabla 13.1). Muchos de los
componentes del complemento (C2, C3, C4, C6, C7, C8, Factor B y Factor I) son polimrficos,
es decir que existen diferentes formas allicas que se expresan con distintas frecuencias en
poblaciones o razas.
El hepatocito es el principal productor de factores del complemento. No obstante, por
ejemplo los componentes de C1 son sintetizados por las clulas epiteliales del intestino y del
sistema genito-urinario y los adipocitos sintetizan factor D. Se ha observado que los
macrfagos activados producen algunos factores del complemento; sin embargo, esto solo
tiene importancia, en el foco inflamatorio. Las citocinas inflamatorias (IL1, IL6 y TNF) e IFNgamma incrementan la sntesis de algunos factores del complemento en el hgado.
ACTIVACION DEL COMPLEMENTO
En la activacin del complemento se pone en marcha una serie de reacciones

consecutivas encascada, de tal forma que a partir de cada una de ellas se genera un producto
activo que adems de determinar que la reaccin consecutiva prosiga, puede tener diferentes
acciones biolgicas importantes en la defensa del organismo. Se puede ver este conjunto de
reacciones en cascada en la figura 13.1.
Algunos de los factores del complemento son enzimas con carcter proteoltico, de tal
forma que durante el proceso de activacin, algunas molculas son rotas en fragmentos a los
que para identificarlos se les aade letras minsculas (Ej. C3a, C3b). Estos fragmentos poseen
importanes funciones biolgicas y son mediadores de la inflamacin.
La activacin del complemento puede iniciarse por dos vas: la va clsica y la va
alternativa. La va clsica se activa por la unin antgeno-anticuerpo, mientras que la va
alternativa se activa por productos bacterianos. En ambas vas el factor C5 se transforma en
C5b lo que permite, en uno y otro caso, poder entrar en la va terminal o ltica que conduce a la
lisis celular o bacteriana (Figura 13.1)
Una vez producida la activacin del complemento, toda la serie de reacciones
subsiguientes se llevan a cabo por un proceso multiplicador, de tal forma que, aunque la
activacin comienza por un nmero limitado de molculas, son muchos los factores con
actividad biolgica que aparecen en el curso de las reacciones. La accin de las molculas
puede ser local, en el sitio de su produccin, pero tambin puede ejercerse a distancia por
dispersin a otras zonas. Un esquema general de las reacciones del complemento en su
conjunto es complejo (Figura 13.2).
VIA ALTERNATIVA
Esta va es ms antigua desde el punto de vista evolutivo- que la clsica,
diferencindose adems de sta en que la va alternativa no necesita anticuerpos para
activarse, por lo que es un mecanismo de defensa importante en los estadios iniciales de la
infeccin cuando todava no se han sintetizado cantidades importantes de anticuerpos.
Funciona de forma continua a un bajo nivel y solo en presencia de determinados factores se
amplifica. Por ello, podemos distinguir dos situaciones para la va alternativa: en estado de
reposo y en estado de activacin.
La va alternativa en estado de reposo
En condiciones normales, en el plasma, el factor C3 se escinde continuamente y de
forma lenta, en un proceso que se denomina marcapasos de C3, dando lugar a C3b y
quedando as su enlace tioester interno expuesto. Si no se une a la superficie de algn
microorganismo C3b permanece en fase fluida y se combina con una molcula de agua,
quedando as su enlace tioester hidrolizado y el C3b inactivo (Figura 13.3) El factor B es
equivalente al factor C2 de la va clsica.
El factor D circula en la sangre de forma activada aunque no es perjudicial para el
organismo, debido a su baja concentracin. Este factor tiene actividad esterasa de tipo serina y
unindose al complejo C3bB rompe a B en una pequea fraccin, Ba, que se libera y en una de
mayor peso molecular, Bb, que se mantiene unida al complejo (C3bBb). Este complejo, que
permanece en la fase fluida, tiene actividad convertasa de C3 de la va alternativa, es decir que
puede degradar a C3 en dos fracciones: C3a y C3b, radicando la actividad proteoltica del
complejo en la molcula Bb.
El factor C3b puede unirse covalentemente mediante enlace ster o amida a las
membranas celulares (Figura 13.4), incluso a las propias, captando ms factor B y amplificando
el proceso, lo que permitira la entrada en la va ltica. No obstante, en condiciones normales o
de reposo, esto no ocurre ya que C3b tiene una vida media muy corta. Por otra parte, los
sistemas de regulacin que se comentarn ms abajo mantienen en un bajo nivel el
funcionamiento de este circuito.
Amplificacin de la va alternativa
Cuando C3b se une a las membranas de bacterias, hongos y parsitos, los
mecanismos de regulacin que bloquean la amplificacin en el estado de reposo no funcionan.
El factor C3b sobre estas membranas capta factor B formando el complejo C3bB sobre el que
acta el factor D liberando Ba y quedando el complejo C3bBb que tiene actividad convertasa
de C3, siendo Bb la molcula responsable de la actividad proteoltica. Esa convertasa libera
ms factor C3b que al formar C3bBb3b retroalimenta el circuito y consigue

amplificacin (Figura 13.2).
su
El complejo C3bBb3b adems puede actuar sobre C5 (C3bBb3b es la convertasa de

C5 de la va alternativa) e iniciar la va ltica que lleva a la lisis de los grmenes. C3b puede
unirse a receptores en la membrana de los fagocitos lo que favorece la fagocitosis. Por otra
parte el fragmento C3a, por su actividad de anafilotoxina, activa mastocitos y basfilos,
induciendo la liberacin de mediadores qumicos por parte de estas clulas, lo que potencia la
inflamacin.
La properdina (P) es una protena constituida por 4 subunidades aparentemente
idnticas asociadas entre s de manera no covalente. Este factor se une al complejo C3bBb,
que es lbil, dando lugar a C3bBbP que es ms estable lo que contribuye a la amplificacin.
Tambin puede amplificar la va alternativa el factor C3b generado en la va clsica,
suponiendo este fenmeno un mecanismo de conexin entre ambas vas
El veneno de cobra contiene un factor (CVF, cobra venenom factor) que acta de forma
semejante a C3b formando un complejo muy estable CVFBb que puede liberar grandes
cantidades de C3b y producir, por agotamiento, una depleccin de C3 del plasma.
VIA CLASICA
Se inicia tras la unin Ag-Ac y siempre que el anticuerpo que participe en ello sea del tipo IgM
o IgG de las clases IgG1, IgG2 o IgG3. Los anticuerpos solubles o libres no activan el
complemento, solo se activa este sistema cuando se forman complejos antgenoanticuerpo (Ag-Ac). En el caso de la IgG, que es una Ig monomrica, se necesitan al menos
dos complejos Ag-Ac cercanos para que las fracciones Fc de la IgG unan y activen el factor C1.
En el caso de la IgM, al ser una molcula pentamrica, solo es necesario un complejo Ag-Ac.
La unin de la Ig al antgeno, induce un cambio conformacional en los dominios de la

regin Fc que permite la unin del factor C1.
Factor C1
El factor C1 est compuesto por tres subunidades proteicas (q, r y s), que en el
momento de la activacin del complemento se unen entre s por enlaces dependientes del
++
Ca formando un complejo constituido con una unidad de C1q, 2 de C1r y 2 de C1s (C1qr 2s2).
La molcula C1q es una protena con dos partes bien diferenciadas, globular y
fibrilar (Figura 13.5). Parece ser que en las porciones globulares se encuentran los sitios de
combinacin con el anticuerpo con los que se une solo cuando ste est unido al Ag. Las
porciones fibrilares poseen una estructura qumica que guarda similitud con el colgeno, con
gran cantidad de aminocidos hidroxilados que unen disacridos de glucosa y galactosa. El
complejo molecular C1q est integrado por 18 cadenas polipeptdicas organizadas en seis
subunidades idnticas.
Activacin de C1
La subunidad C1q se fija al anticuerpo en los sitios de unin que son el dominio CH2 de
la IgG y el CH3 y/o CH4 de la IgM). Este fenmeno es el primero que ocurre en la activacin
mediada por anticuerpos de la va clsica del complemento y es el que pone en marcha la
cascada de reacciones subsiguientes. El fragmento C1q va a activar a las dos subunidades

C1r, que actuar sobre las dos C1s que, entonces, adquieren actividad de esterasa de tipo
serina, responsable de iniciar las fases siguientes.
Para que se produzca la activacin de C1q, ste debe estar unido por su regin
globular al menos a dos dominios de distinta fraccin Fc (Figura 13.6). Esto implica que los
anticuerpos, para activar al complemento, han de encontrarse con la disposicin espacial
apropiada que permita a C1q acoplarse a varios de ellos al mismo tiempo (complejos Ag-Ac
dispersos sobre una superficie celular pueden no llegar a activar el complemento). C1q, por
otra parte, solo se une a inmunoglobulinas cuando stas, a su vez, se encuentran unidas a sus
antgenos y stos estn integrados en una misma superficie (membrana celular). Este concepto
es importante para comprender por qu complejos antgeno-anticuerpo solubles no conectados
con membranas, pueden convivir en el suero con los factores del complemento sin llegar a
activarlos y que, por el contrario, si se activan cuando tales complejos quedan atrapados sobre
algn tejido, originando, en este caso, un proceso inflamatorio localizado.
La activacin de C1q provoca que una molcula de C1r del complejo C1qr2s2 pierda
por autocatlisis un trozo de bajo peso molecular, quedando activada. Esta molcula, a su vez,
activa a la otra molcula de C1r. Las dos molculas de C1r atacan a las dos molculas de C1s
liberando sendos trozos de bajo peso molecular y dejando expuestos sus dominios catalticos.
La MBP (mannose-binding protein) es una molcula del grupo de las colectinas
(protenas con colas de colgeno y dominios globulares de tipo lectina). Esta protena reconoce
carbohidratos en distintos grmenes, lo que le permite unirse a ellos y tiene la capacidad de
sustituir a C1q en la activacin de C1r y C1s, pudiendo iniciar de esta forma la va clsica. A su
vez, la MASP (MBP associated binding protease) es una proteasa de tipo serina que puede
sustituir a C1r y C1s en la activacin de la va clsica. Estos resultados han determinado que
algunos autores hablen de una tercera va de activacin del complemento: La Va de la
Lectina.
Activacin de C4 y C2
C1s del complejo C1q2r2s va a actuar sobre la cadena a de C4 produciendo su
escisin en dos molculas, una pequea, C4a, que difunde a la fase fluida y otra mayor, C4b,
que se une por enlace covalente de tipo ster o amida (equivalente al del C3b) a la superficie
++
celular. Esta fraccin C4b unida a la membrana, en presencia de iones Mg , forma un
complejo con la fraccin C2. C1s tambin acta sobre C2, provocando la escisin de esta
molcula en dos fragmentos, uno menor C2b y otro mayor C2a. Este ltimo se une al C4b para
formar el complejo C4b2a (convertasa C3 de la va clsica), que tiene actividad
estersica (Figura 13.7).
Convertasa de C5 de la va clsica
El complejo C4b2a, cuyo centro activo se encuentra en el componente C2a, acta
sobre la cadena a del factor C3 que se transforma por proteolisis en dos fragmentos activos:
laanafilotoxina C3a, que pasa al medio lquido, y el fragmento C3b que se une a la membrana
celular mediante un enlace de tipo ster o amida. Al complejo formado por C4b2a3b se le
denomina convertasa de C5 de la va clsica ya que tiene capacidad de actuar sobre este
factor, siendo ste el primer paso de la denominada va ltica. (Figura 13.2).
El factor C3b unido a la membrana celular tambin puede ser captado por los fagocitos,
que al presentar receptores de membrana para C3b, se facilita de esta forma el proceso de la
fagocitosis (opsonizacin) (Tabla 13.2).
La anafilotoxina C3a, por otra parte, potencia la inflamacin al inducir la desgranulacin

de los basfilos y mastocitos y liberar, por tanto, mediadores de la inflamacin. El incremento
de la permeabilidad capilar facilita el acceso al foco de nuevos factores del complemento y de
inmunoglobulinas desde la sangre, as como la llegada de fagocitos que son movilizados por la
actividad quimiotxica del propio C3a y otros factores quimiotxicos del foco inflamatorio
(Tabla 13.2).
VIA LITICA. FORMACION DEL COMPLEJO DE ATAQUE A LA MEMBRANA
Las reacciones finales del complemento se encuentran esquematizadas en la Figura

13.8. Las enzimas convertasas de C5 (C4b2a3b y C3bBb3b), formadas ya sea en la va clsica
o en la alternativa, actan fijando el factor C5 a C3b, que es escindido por los factores con
actividad esterasa (C2a o Bb) en 2 fragmentos, la anafilotoxina C5a, que pasa al medio fluido y
el fragmento C5b de mayor peso molecular que se une no covalentemente a C3b. La fraccin
C5b capta C6 y C7 de la fase fluida, formando un complejo estable C5b67 con actividad
quimiotxica y capacidad de fijacin a las membranas.
Si al complejo C5b67 se une la fraccin C8, C5b678 es ya citoltico, pues el factor C8
modifica su configuracin espacial ofreciendo zonas hidrofbicas que determinan su insercin
en la membrana. Este grupo de molculas, adquiere la capacidad de interaccionar
con molculas de C9 formando el complejo C5b6789 (Figura 13.9). Las molculas de C9 (en
nmero de 1 a 18) sufren cambios en su configuracin, desplegndose y presentando ms
zonas hidrofbicas que potencian y aceleran la penetracin de este complejo de ataque a la
membrana (MAC,Membrane Attack Complex), dando origen a la formacin de canales
hidroflicos (Figura 13.10), que permiten el libre intercambio de sodio y agua con el exterior de
la clula, provocando la consiguiente lisis osmtica de la clula atacada.
C9 es estructuralmente homologo a la perforina, protena liberada por los linfocitos T
citotxicos y las clulas NK, y que es tambin responsable de la formacin de poros en la
membrana de las clulas diana.
CODIFICACIN GENTICAS DE LAS FRACCIONES DEL COMPLEMENTO.
Las molculas C2, C4 y el factor B (Bf) estn codificadas por genes ubicados en el
cromosoma 6, entre los loci HLA-B y HLA-DR del Complejo Principal de Histocompatibilidad
humano (MHC, Major Histocom-patibility Complex). El resto de los componentes del sistema
del complemento no estn vinculados a HLA. Mientras que el factor B y C2 estn codificados
por un solo locus, existen dos loci que codifican C4, C4a y C4b.
Otros genes que codifican componentes del sistema complemento tambin se
encuentran agrupados. As en el brazo corto del cromosoma 1 del hombre se localizan los
genes que codifican las cadenas alfa y beta de C8 y las cadenas alfa y beta de C1q. Los
genes C6 y C7, que se han originado por duplicacin, se detectan en el cromosoma 5.
En el brazo largo del cromosoma 1 se encuentra la regin RCA (regulators of
complement activation) que contiene genes ligados que codifican distintas protenas
reguladoras: CR1, CR2, DAF, H, C4BP y MCP.
RECEPTORES PARA FACTORES DEL COMPLEMENTO
Muchas de las funciones del complemento se llevan a cabo tras la unin de fragmentos
de algunos factores del complemento a receptores especficos presentes en la superficie de
varios tipos de clulas (Tabla 13.2). Los mejor conocidos son los que tienen como ligando a
fragmentos de C3.
CR1 (Receptor de complemento tipo 1, CD35).
Sus ligandos son los fragmentos C3beta, iC3beta y C4beta. Se encuentra sobre todo
en las clulas del sistema fagoctico mononuclear, en los neutrfilos, en los linfocitos T y B y en
los eritrocitos. En las clulas fagocitarias facilita la fagocitosis de partculas opsonizadas por
sus ligandos. En los eritrocitos facilita su unin a inmunocomplejos opsonizados por C3beta y
C4beta. Estos inmunocomplejos son retirados de la superficie de los hemates en el hgado y
bazo por los fagocitos. De esta forma los hemates quedan con sus receptores libre para
continuar el aclaramiento de inmunocomplejos de la circulacin (ver mas adelante).
CR2 (Receptor de complemento tipo 2, CD21).
Sus ligandos son C3b, la forma inactiva de ste, iC3b y sus fragmentos de
degradacin C3delta y C3deltagamma. Este receptor se encuentra en los linfocitos B, en las
clulas dendrticas foliculares y en algunas clulas epiteliales.
El CR2 se encuentra en las clulas B formando un complejo trimolecular junto con otras
dos protenas, CD19 y CD81. Este complejo es el llamado correceptor del linfocito B y enva
seales al interior de la clula B que facilitan su respuesta una vez unida al antgeno por su
receptor (inmunoglobulina + molculas Ig-alfa e Ig-beta).
En las clulas dendrticas foliculares CR2 sirve para atrapar en los centros germinales
complejos Ag-Ac opsonizados por iC3beta o C3deltagamma.
El CR2 es el receptor usado por el virus de Epstein-Barr para invadir a las clulas B.
Este virus es el causante de la enfermedad mononucleosis infecciosa y est relacionado con
tumores como el linfoma de Burkitt y el carcinoma nasofarngeo.
CR3 (Receptor de complemento tipo 3, Mac-1, CD11bCD18).
Se encuentra en fagocitos mononucleares, neutrfilos, clulas cebadas y NK. La
cadena beta de CR3 (CD18) se encuentra en otras dos molculas (LFA-1 y p150,95). CR3,
LFA-1 y p150,95 pertenecen a la familia de las integrinas.
El ligando de CR3 es iC3b por lo que participa en la fagocitosis de partculas
opsonizadas por este factor. Pero en los fagocitos y neutrfilos se une tambin a ICAM-1. Esta
molcula se encuentra en los endotelios por lo que facilita el anclaje de fagocitos a las clulas
endoteliales para posteriormente abandonar los vasos por diapdesis.
CR4 (CD11cCD18, p150,95).
Su ligando es tambin iC3b y probablemente la funcin de CR4 es similar a la de CR3.
CR4 es abundantemente expresado por las clulas dendrticas por lo que se usa como
marcador para identificarlas.
FUNCIONES DEL COMPLEMENTO
Las funciones del complemento son muy diversas, de ah la gran potencialidad

defensiva del mismo.
Estas funciones se llevan a cabo por diferentes fracciones del complemento activas.
La tabla 13.2 muestra la accin fisiolgica de stas. Los factores activos frecuentemente
desarrollan su funcin conectando con distintos receptores de membrana. La Tabla
13.2 expone los receptores de membrana para las distintas fracciones del complemento.
Comentamos,
a
continuacin,
las
funciones
biolgicas
fundamentales.
Las
acciones anafilotxicas,quimiotxicas y opsonizantes del complemento lo convierten en un
factor fundamental en la potenciacin de la inflamacin, fenmeno bsico en la defensa frente
a la infeccin
Accin citoltica
Una vez puesta en marcha la cascada del complemento, si se forma el complejo final
C5b67, y sobre l se acopla la fraccin C8 y molculas de C9, se produce la lisis de las clulas
sobre cuyas membranas se ha adosado dicho complejo. La lisis se produce por la formacin de
mltiples poros formados por el complejo C5b6789 (Figura 13.10). Como se ha explicado
anteriormente, a este efecto se puede alcanzar por la unin del Ag-Ac (va clsica) o por la
activacin grmenes (va alternativa). Por uno u otro mecanismo se produce la lisis de gran
nmero de bacterias, tales como bacteridium, salmonella, shigella, escherichia, vibrio,
treponema y otras clulas. Todas estas acciones se agrupan bajo la denominacin conocida de
citotoxicidad dependiente del complemento.
Accin anafilotxica
Las fracciones C3a y C5a, conectando con receptores de membrana (C3aR,
C5aR, Tabla 13.2), ejercen una accin anafilotxica, esto es, poseen una potente accin
activadora sobre los mastocitos y basfilos que en consecuencia, liberan mediadores de la
inflamacin. Las sustancias vasoactivas liberadas incrementan la permeabilidad capilar, lo que
facilita la afluencia de leucocitos y molculas al foco inflamatorio.
Accin quimiotxica
Las fraccin C5a posee una potente actividad quimiotxica, que determina la atraccin
de leucocitos al foco inflamatorio.
Accin facilitadora de la fagocitosis (opsonizacin)
Los macrfagos y polimorfonucleares neutrfilos presentan
en
sus
membranas
receptores (CR1, CR3 y probablemente CR4, Tabla 13.2) capaces de unir la molcula C3b y
sus derivados resultantes de la activacin del complemento. De esta forma, si el C3b est
fijado sobre la superficie de un germen, los fagocitos pueden conectar con ste mediante los
receptores para C3b, facilitndose as, el fenmeno de la fagocitosis. Esta actividad facilitadora
de la fagocitosis se denomina opsonizacin. La fagocitosis de microorganismos dependiente de
C3b e iC3b es probablemente el mayor mecanismo de defensa frente a las infecciones
bacterianas (Figura 13.11).
Otra funcin de especial importancia ligada a la capacidad inductora de la fagocitosis
de cierto factores del complemento es la de aclaramiento de inmunocomplejos.
Aclaramiento de inmunocomplejos
En condiciones normales, se pueden detectar inmunocomplejos solubles circulando en
sangre. Estos inmunocomplejos son potencialmente peligrosos, pues de precipitar en algn
tejido activaran el complemento e iniciaran un foco inflamatorio. No obstante, existe un
mecanismo fisiolgico de aclaramiento de inmunocomplejos. Los eritrocitos, las clulas ms
abundantes de la sangre, presentan CR1 en su membrana y mediante este receptor captan
inmunocomplejos circulantes a travs del factor C3b. Cuando los hemates atraviesan el hgado
o el bazo, los macrfagos de estos rganos, mediante sus receptores CR1, CR3 o CR4, unen
los inmunocomplejos a travs de C3b (o mediante receptores para Fc a travs de IgG) y los
fagocitan. Los eritrocitos quedan libres para captar nuevos inmunocomplejos (Figura 13.12)..
Accin reguladora de la respuesta inmune
El factor C3b tiene importantes funciones reguladoras de la respuesta inmune. As, el
C3b o sus derivados (C3d), unido a membranas facilita la cooperacin entre las clulas
inmunes y acta en la estimulacin de las clulas T y B probablemente debido a su capacidad
de promover la adhesin clula-clula.
Las clulas presentadoras del antgeno tienen receptores para el complemento, lo que
permite su conexin con el antgeno para su posterior presentacin.
MECANISMOS DE REGULACION DEL COMPLEMENTO
Dado el potencial lesivo del sistema del complemento, ste se encuentra

estrechamente regulado por diversos mecanismos y molculas (Tabla 13.3), cuyo objeto es
evitar la lisis de las clulas autlogas. El mecanismo ms simple de regulacin es la baja
concentracin y labilidad de muchos de sus factores. No obstante los factores que actan en la
regulacin del complemento ejercen su accin en distintos puntos tanto en la va clsica como
en la alternativa o ltica, centrndose fundamentalmente en la activacin de C3.
Inhibicin de C1
El inhibidor de la C1 esterasa (C1inh) inhibe la formacin de C3b convertasa de la va
clsica por su capacidad de unin a los fragmentos C1r y C1s. En los casos de deficiencia en
C1inh (edema angioneurtico hereditario), el C1 activado degrada elevadas cantidades de C2
produciendo un acumulo de C2b. Este factor es degradado anormalmente por plasmina lo que
da lugar a C2-Kinina que es un potente vasodilatador y aumenta la permeabilidad vascular
produciendo los edemas caractersticos del cuadro.
Inhibicin de C4
El factor C4BP (C4-binding protein) tiene la capacidad de captar C4b facilitando su

disociacin del complejo C4b2a e inhibiendo, por tanto, la actividad de convertasa de
C3.
El factor I (FI) es una esterasa de tipo serina que circula en forma activada. El C4b
disociado es susceptible de ser atacado por el factor I y ser degradado en C4c y C4d.
Los receptores de membrana DAF (factor acelerador de la degradacin) y la MPC
(cofactor protenico de membrana) se encuentran ampliamente distribuidos en clulas
inmunes y no inmunes. Tienen la capacidad de inhibir la unin, facilitar la disociacin
de C4b y C2a (DAF) o favorecer que el factor C4b pueda ser degradado por el FI
(MCP). Estos receptores son de gran importancia en los mecanismos de prevencin de
lisis de las clulas autlogas.
Inhibicin de C3
La regulacin de C3, al ser ste el factor central en la activacin del complemento, es
probablemente el mecanismo de regulacin ms importante.
El factor H (FH) es una protena plasmtica homloga a la C4BP que tiene la capacidad
de unir C3b en la fase fluida. El Factor I ataca entonces C3b liberando una pequea fraccin
C3f y convirtindolo en iC3b. Por otra parte FH tambin promueve la disociacin del complejo
C3bBb. Un defecto en este tipo de regulacin acontece en un tipo de glomerulonefritis
(membranosa tipo II), en la que aparecen autoanticuerpos (factores nefrticos) que se une al
complejo C3bBb, estabilizndolo y hacindolo resistente a la accin de FH.
Los receptores de membrana CR1, DAF y MCP actan sobre el C3b de forma
semejante a su actuacin sobre C4b: inhiben la unin o facilitan la disociacin C3bBb (CR1,
DAF) o actan como cofactores del factor I en la degradacin de C3b unido a la membrana
(CR1, MCP). En este caso C3b tambin se degrada a iC3b, sobre el que el factor I puede
seguir ejerciendo su actividad cataltica originando las fracciones C3c y C3dg.
Todos estos mecanismos inhiben la capacidad de C3b de formar convertasa de C5, as
como de que C3b medie la adherencia celular. Sin embargo iC3b s mantiene la capacidad de
adherencia a clulas fagocticas por los receptores de estas clulas para iC3b (CR1, CR3 y
CR4)(Tabla 13.2).
Inhibicin del MAC
La protena S (vitronectina) es una glucoprotena plasmtica con capacidad para unirse

al complejo C5b67 impidiendo que ste se una a la membrana celular.
CD59 es una protena ampliamente distribuida en las membranas celulares que inhibe
la insercin de C9 en el complejo C5b-8.
El factor de restriccin homloga (Homologous Restriction Factor, HRF) tambin est
ampliamente distribuido en la membrana de las distintas clulas y presenta una funcin
equivalente al CD59.
La capacidad de MAC de lisar las clulas puede ser modulada tambin por una
protena circulante llamada SP-40,40, esta es un heterodmero que ha sido aislado de
complejos solubles C5-9. Podra ser un componente normal de MAC cuyo efecto
principal sera controlar la capacidad de MAC de lisar las clulas. El mecanismo de
accin de SP-40,40 es desconocido.
Proteccin de lo propio, lisis de lo extrao

De los factores reguladores estudiados DAF, HRF y CD59, se piensa que actan
exclusivamente en la inhibicin de la lisis de las clulas del propio organismo donde asienta.
Estas protenas de membrana se detectan fundamentalmente en eritrocitos y
clulas endoteliales que son las clulas que se encuentran en mayor peligro de autolisis por el
complemento.
En la enfermedad hemoglobinuria paroxistica nocturna hay un defecto congnito de
DAF, HRF y CD59 producindose una anemia debido a la lisis de los hemates, lo cual ocurre
frecuentemente durante la noche.
Lgicamente los grmenes no presentan en sus membranas molculas reguladoras de
la autolisis por lo que no pueden protegerse de los efectos lticos del complemento. Esto
determina, por tanto, un mecanismo rudimentario de discriminacin entre lo propio y lo no
propio.
No obstante, algunos grmenes han desarrollado mecanismos que le permiten
evadirse de la actuacin del complemento. En algunos grmenes la simple presencia de una
cpsula puede ser un mecanismo de resistencia. Otros grmenes presentan protenas de
membrana que impiden el desarrollo del MAC o enzimas que degradan los factores del
complemento o liberan factores proteicos que inactivan las convertasas de C3, etc.

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Inmunologa Online |1

TEMA 1. INTRODUCCIN A LA INMUNOLOGA.

La respuesta inespecfica forma parte de los mecanismos inespecficos de defensa y

superficie de estas clulas en el seno de las molculas del complejo principal de

1. En la respuesta primaria los niveles mximos de inmunoglobulinas se alcanzan

2. La respuesta primaria es de menor intensidad que la secundaria.

4. La respuesta secundaria, al predominar en ella la IgG de vida media ms larga

incluso la muerte. Se trata de enfermedades por autoinmunidad, que pueden presentarse

1. Enfermedades infecciosas. Haciendo posible la profilaxis de la mayora de

2. Transfusiones sanguneas. La Inmunologa hizo posible el descubrimiento de

3. Trasplantes de rganos. Haciendo posible la prevencin del rechazo de

trasplantados. Eso se ha debido a un

descubrimiento de los antgenos responsables del rechazo (antgenos de

4. Oncologa. En donde la inmunologa ha permitido un mejor conocimiento de la

5. Inmunopatologa. En donde el conocimiento del sistema funcionales, ha

6. Mtodos analticos. Una gran variedad de mtodos analticos de gran

7. Biotecnologa, industria y farmacia. Esto est siendo realmente posible

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TEMA 2. CLULAS INMUNOCOMPETENTES

una imagen de microscopa electrnica de barrido de un linfocito B (a) y un linfocito T (b)

Ya en el timo va a ocurrir una especializacin funcional, distinguindose dos

Ya en las clulas pre-B se detecta la presencia de cadena pesada m

Clulas T de colaboracin (T helper cells).

Clulas T de colaboracin (Th)

Las clulas NK derivan de clulas hematopoyticas stem cell presentes en el hgado

estos antgenos y se les denominan antgenos de diferenciacin. La celebracin peridica de

El crtex contiene agregados de linfocitos B dispuestos formando folculos primarios y

quedando as asociados temporalmente, los conceptos de anticuerpo y de g-globulina,

Caractersticas de los distintos tipos de inmunoglobulinas

Dominios moleculares en las cadenas ligeras y pesadas.

Estructura espacial de las inmunoglobulinas.

Gm en las cadenas g de las IgG.

organismo, lo hace tambin en el feto al atravesar la placenta desde la madre, merced a la

TEMA 4. GENTICA DE LAS INMUNOGLOBULINAS.

REORDENAMIENTO DE LOS SEGMENTOS GENICOS DE LAS INMUNOGLOBULINAS.

Reordenamiento de genes de cadenas ligeras

transcripcionales. En el caso de los genes de las inmunoglobulinas, encontramos en la regin

La variabilidad de cadenas, tanto L como H, que un mismo organismo es capaz de

Las posibilidades combinatorias son por tanto de 1.2x10 en el primer caso y de 6 en el

En la caracterizacin y cuantificacin de sustancias de inters

En la identificacin de antgenos presentes en las membranas

En trasplantes de rganos y enfermedades autoinmunes en donde los

En oncologa para la localizacin de clulas tumorales y/o su

Un paso ms adelante en la humanizacin de los anticuerpos monoclonales producidos

TEMA 5. SISTEMA DE HISTOCOMPATIBILIDAD.

Las molculas de histocompatibilidad fueron inicialmente descubiertas por ser las

ESTRUCTURA DE LAS MOLCULAS DE HISTOCOMPATIBILIDAD

Segn su estructura las molculas de histocompatibilidad se dividen en dos grandes

Otras molculas de histocompatibilidad

HLA-E: La estructura tridimensional de la molcula de HLA-E, es muy

similar a la de las molculas clsicas HLA-A, B y C presentando sitios de unin

HLA- F: Se sabe que esta molcula se expresa principalmente en

amgdalas, bazo y timo. La localizacin de la protena es intracelular. Adems,

HLA-G: La molcula HLA-G pertenece a la familia de molculas de

histocompatibilidad no clsicas y se caracterizan por un limitado polimorfismo y

Est relacionada con la induccin de tolerancia materno-fetal. Se ha demostrado que

Parece participar en la vigilancia del sistema inmune frente a tumores y se ha

Familia de molculas CD1. Los antgenos CD1 son glicoprotenas no polimrficas

El prototipo de gen que codifica molculas de clase I, se encuentra dividido en 8

Gen HLA-G: Este gen presenta la estructura tpica de la HLA clase I y su

Estudio de la asociacin con distintas formas clnicas de una enfermedad.

En trasplantes de rganos y medula sea y