Agentes antimicrobianos

Agentes fsicos:
- calor
- radiaciones
- mecnicos
Agentes qumicos:
- esterilizantes
- desinfectantes
- antispticos
- antibiticos

Halgenos

Agentes
Qumicos

Antibiticos de uso clnico: agentes

quimioteraputicos
- Compuestos orgnicos de bajo peso molecular
- Inhiben el crecimiento o matan al germen
- Pueden ser administrados in vivo: va oral, sangre (EV), IM, otras
- No producen efectos nocivos sobre el husped o son leves
- Accin especfica sobre estructuras celulares del germen
- Especificidad sobre tipo de germen

Atributos deseables de un antibitico

- Toxicidad diferencial o selectiva (ndice teraputico alto)
- Efectos colaterales mnimos sobre el husped
- Administracin verstil
- Amplio espectro de accin
- Buena distribucin en lquidos corporales (farmacodinmica)
- Eficiente acceso a rganos y tejidos (farmacodinmica)
-Adecuada excrecin (farmacodinmica)
- Blancos de accin accesibles (clsicos) y buena actividad
inhibitoria (farmacocintica)
- Baja resistencia antimicrobiana
- Fcil produccin y bajo costo

Antibiticos producidos por diferentes

microorganismos

Actividad antimicrobiana sobre cultivos

Antibiticos de uso clnico

Antibitico

Accin

Espectro

Reacciones adversas

Antibiticos: blancos de accin

Antibiticos beta-lactmicos

Sntesis de PG

Sntesis de precursores solubles en el

citoplasma
Los precursores son recogidos por un
transportador de membrana y se forman las
uu. disacardicas con el pentapptido
Las uu. disacardicas-(pentapptido),
expuestas al exterior, son polimerizadas

cadenas lineales de PG
La cadena lineal de PG recin formado se une
al PG preexistente por transpeptidacin

Reacciones en citoplasma
Activacin de los monosacridos:
UDP-NAG

UDP-NAG + PEP
UDP-NAM

Unin secuencial aa. al NAM (con ATP y Mn):

NAM-L-ala
NAM-L-ala-D-glu
NAM-L-ala-D-glu di aa (m-DAP, L-Lys)

NAM-L-ala-D-glu di aa-D-ala-D-ala
Al final de esta fase tenemos en citoplasma:
UDP-NAG
UDP-NAM-(pentapptido)

Reacciones en membrana
plasmtica

Unidad disacardica-pentapptido y elongacin

El NAM-(pentaptido) se transfiere desde el UDP hasta el bactoprenol-P

bactoprenol-P-P-NAM-(pentapptido)
Ahora se transfiere la NAG desde el UDP para unirse por transglucosidacin con el
NAM.
Tenemos: bactoprenol-P-P-NAM(pentapptido)-NAG
Bactoprenol est en membrana citoplsmica. NAM(pentapptido)-NAG est en
principio hacia el citoplasma. Luego el bactoprenol cargado con la unidad
NAM(pentapptido)-NAG migra hacia el otro lado de la membrana (flip-flop), con lo
que la unidad queda expuesta hacia el exterior
Transglicosilacin: el disacrido bactoprenol-P-P-NAM(pentapptido)-NAG
reacciona con una cadena preexistente de PG
Queda libre bactoprenol-P-P (
bactoprenol-P, por fosfatasa especfica)
El PG queda elongado en una unidad disacardica NAM(pentapptido)-NAG
La reiteracin de la transglicosilacin va generando cadenas ms largas de PG
naciente

Reacciones Externas a MP
Transpeptidacin

CWT = transpeptidasa (PBP)

El PG naciente (con sus pentaptidos) reacciona por transpeptidacin
con otra cadena PG aceptor preexistente:
El COOH de la D-ala(4) reacciona con el NH2 libre del di-aa(3)
produciendo el entrecruzamiento entre dos cadenas de PG.
Se libera D-ala(5)

 Inhibidores de la sntesis de pared

bacteriana (PG)

Penicilinas: estructuras y caractersticas

Cefalosporinas

-lactmicos: Mecanismo de accin

- Se unen en forma irreversibles a la transpeptidasa y otras PBPs
- Activan las autolisinas endgenas del remodelado del PG

Otros inhibidores de la sntesis de PG:

- fosfomicina: Inhibe las sntesis de UDP-NAM
- bacitracina: Inhibe el reciclado de bactoprenol
- glucoptidos: Se unen al dipptido D-Ala-D-Ala del
NAG-NAMyl-peptapptido en traslocacin, inhibiendo
transglicosilacin y transpeptidacin. Ej. Vancomicina

 Inhibidores de la sntesis de protenas

Aminoglucsidos
- Se unen a la subunidad ribosomal 30s, impidiendo su unin
a la subunidad 50s.
- Impiden la formacin del ribosoma activo
Unin a S12 en
subunidad 30S

Unin a S12 y L6
en subunidad
30S

Tetraciclinas:
- Se unen a la subunidad ribosomal 30s
- Distorsionan el sitio A del ribosoma
- Impiden el alineamiento del aminoacil-tRNA con el codon

MACRLIDOS
- Se unen a la subunidad ribosomal 50s al rRNA 23s impidiendo la traduccin

LINCOSAMIDAS - CLORANFENICOL
- Se unen a la subunidad ribosomal 50s al rRNA 23s impidiendo la traduccin

CICLO DEL RIBOSOMA

 Inhibidores de la sntesis de cidos nucleicos

Quinolonas: mecanismo de accin

Rifampicinas
- se

unen a la RNA polimerasa

- Inhibicin de la transcripcin

 Antimetabolitos

Anlogos estructurales: sulfonamidas

Anlogos estructurales: sulfonamidas

Anlogos estructurales: sulfonamidas

Metronidazol
- Productos de su catabolismo reaccionan con el DNA
conduciendo a su fragmentacin

 Pptidos Bioactivos

Pptidos catinicos: Mecanismos de accin

15-20 aa (precursores mayores, con secuencia seal
PM <10000 Da
Anfipticos
Piel de batracios, linfa de insectos, neutrfilos

Disrupcin membrana externa o MC

ANTIFNGICOS

Mecanismos de Resistencia
Antimicrobiana

Mecanismos de resistencia

Mecanismos de resistencia

RESISTENCIA A -LACTMICOS

ACCIN DE LAS -LACTAMASAS

ACCIN DE LAS -LACTAMASAS

RESISTENCIA A AMINOGLUCSIDOS

enzymes

RESISTENCIA A CLORAMFENICOL

RESISTENCIA A TETRACICLINAS

RESISTENCIA A VANCOMICINA

Rol de la membrana externa de bacterias Gram(-)

como barrera frente a antibiticos

Elementos genticos involucrados en la

transmisin de resistencia mltiple a
antibiticos
- Plsmidos conjugativos
- Plsmidos mobilizables
- Transposones
- ADN desnudo
- Bacterifagos

Mtodo de dilucin
en caldo

Determinacin de los
niveles de actividad
antimicrobiana

Determinacin de niveles de actividad antimicrobiana

- Mtodo de difusin en discos (Kirby-Bauer)

Determinacin de niveles de actividad antimicrobiana

- Mtodo de difusin en discos (Kirby-Bauer)

Microbiologa Industrial
y
Biotecnologa

Productos de Microbiologa Industrial y Biotecnologa

Microbiologa industrial y biotecnologa:

tipos de productos

Propiedades de una cepa para uso industrial

- Produccin del sustrato de inters

- Cultivo axnico
- Genticamente estable preservacin
- Capaz de crecer a gran escala
- Crecimiento en medios econmicos
- Fcil inoculacin (ej. Esporas)
- No patgeno
- Fcil eliminacin de cel. microbianas del medio de cultivo
(centrifugacin, decantacin, filtracin)
- Susceptible de manipulacin gnica

Caractersticas particularmente deseables

-Alta relacin superficie/ volumen
- Variedad de reacciones
- Adaptabilidad
- Enantimeros especficos

Preservacin de cepas de uso industrial

Medios de cultivo de uso industrial

Microbiologa industrial y biotecnologa: fermentacin

Lift-tube

Ferment en estado slido

Reactor de cama fija

Reactor de partculas
en fluido

Dilisis

Quimiostato

Escalado
- Cultivo en frascos (1-2L)
- Fermentador de laboratorio (5-20L)
- Planta Piloto (100- 1000L)
- Fermentador industrial (10-500 KL)

Productos: Metabolitos primarios y secundarios

Productos: Metabolitos primarios y secundarios

Caractersticas de los metabolitos

primarios
Molculas pequeas, productos finales o intermediarios del vas metablicas generales
Unidades estructurales de macromolculas, coenzimas
* Ejemplos en produccin industrial:
- aminocidos: glutamato, lisina, fenilalanina
- nucletidos realzadores del sabor: ac. 5guanlico, 5inoslico
- cidos orgnicos: ctrico, lctico, actico (acidulantes)
- solventes y combustibles: acetona, etanol, butanol
- polisacridos: xantanos, gelanos
- azcares: fructosa, ribosa
- vitaminas: riboflavina (B2), cianocobalamina (B12)

Caractersticas de los metabolitos

secundarios
- Restringidos a grupos taxonmicos especficos
- Produccin dependiente de la condicones de cultivo
- Superproduccin en mezclas de estructuras relacionadas (racmicas)
Ejemplos en produccin industrial:
- antibiticos, toxinas, pesticidas, factores de crecimiento
- antihelmnticos: avermectinas, (Streptomices)
- Hipocolesterolemiantes: lovastatin, pravastatin (fngicos)
- Hipoglucemiantes: arcabosa (Actinomyces)
- Inhibidores de beta-lactamasas: ac. Clavulnico
- Insecticidas: cristales parasporales de B. thuringensis
- Inmunosupresores para transplante de rganos: ciclosporina A, rapamicina
- Uterocontractantes: alcaloides, ergotamina
- Reguladores del crecimiento de plantas: giberelinas
- Anablicos en animales de granja: micotoxinas
- Agentes antitumorales: doxorrubicina, mitomicina

Metabolitos Primarios:
Produccin industrial
de lisina

Metabolitos Primarios: produccin de cido glutmico

Metabolistos Secundarios: Antibiticos

*Aislamiento y seleccin de cepas productoras de antibiticos
- rastreo
- confrontacin cultivos axnicos v.s. cepas referencia

*Estudios sobre el nuevo antibitico

- anlisis estructural
- ensayos de actividad antimicrobiana (in vitro)
- ensayos in vivo de actividad teraputica y de toxicidad (animales)
- ensayos clnicos (humanos)

*Produccin comercial
- escalado
- purificacin (cristalizacin)
- cepas de alto rendimiento (naturales)
- manipulacin gnica (activacin, copias de genes, mutagnesis)

Identificacin y aislamiento
de cepas productoras
de antibiticos

Purificacin
de un
antibitico

Produccin de
penicilina

Produccin de estreptomicina
Cultivo de Streptomyces griseus

Otros metabolitos secundarios en Streptomyces

Produccin de
tetraciclina

Enzimas microbianas

Extremoenzimas

Inmobilizacin
de enzimas

Bioconversin de esteroides

Hidroxilacin de progesterona en posicin 11

El sustrato (esteroide) se adiciona al cultivo del hongo

Produccin de cido actico (vinagre)

Produccin
de vinagre

Produccin de
cido ctrico

Levadura de cerveza

Tratamiento
de aguas
residuales

Digestor anxico de cieno

Eventos en un digestor anxico de cieno

Digestor de cieno activado (aerbico)